Valikoiva aryylihiilivetyreseptori modulaattori 3,3-Diindolylmethane estää mahalaukun syövän solujen kasvua

Valikoiva aryylihiilivetyreseptori modulaattori 3,3'-di-indolyylimetaani estää mahalaukun syöpäsolujen kasvua
tiivistelmä
tausta
aryylihiilivetyreseptori (AhR) on ligandiaktivoituja transkriptiotekijä liittyy mahasyövän. 3,3'-di-indolyylimetaani (DIM) on suhteellisen myrkytön selektiivinen AhR modulaattori. Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli havaita vaikutuksia DIM mahalaukun syöpäsolujen kasvua.
Menetelmät
Mahalaukun syöpäsolun SGC7901 käsiteltiin DIM eri pitoisuuksina (0,10,20,30,40,50 umol /l) kanssa tai ilman AhR antagonisti, resveratrol. Ilmaus AhR ja sytokromi P4501A1 (CYP1A1), klassinen kohdegeeni AhR, havaittiin RT-PCR: llä ja Western blot; Solujen elinkelpoisuus mitattiin MTT: llä, ja muutokset solusyklin ja apoptoosin analysoitiin virtaussytometrialla.
tulokset
RT-PCR ja western-blot osoitti, että kasvu pitoisuuden DIM, AhR proteiini vähitellen vähentynyt ja CYP1A1 ilmaisun lisääntynyt, mikä viittaa siihen, että DIM aktivoitu AhR ja aiheutti translokaatiota AhR välillä sytoplasmasta tumaan. MTT-analyysi osoitti, että elinkelpoisuus SGC7901 solujen väheni huomattavasti on pitoisuudesta ja ajasta riippuvaisella tavalla jälkeen DIM hoidon ja tämä voi osittain kumota resveratrol. Virtaussytometria analyysi osoitti, että DIM pidätetty solukierron G1- vaiheessa ja indusoi apoptoosia.
Päätelmä
Selective aryylihiilivetyreseptori modulaattori 3,3'-di-indolyylimetaani estää SGC7901 soluproliferaation apoptoosin aiheuttamiseksi ja viivästyttää solusyklin etenemisen. AhR voi olla potentiaalinen terapeuttinen kohde mahalaukun syövän hoitoon.
Avainsanat
aryylihiilivetyreseptori 3,3'-di-indolyylimetaani Mahasyöpää Sytokromi P4501A1 tausta
Mahalaukun syöpä on yksi yleisimmistä maligniteetti. Taloudellisesti developping maissa, mahalaukun syöpä on toiseksi eniten frequntly diagnosoitu syöpien ja kolmas johtava syy syövän kuoleman miehillä [1], yleinen 5 vuoden pysyvyys on alhainen (15%: sta 35%), koska korkea toistumisen hinnat, solmukohtien etäpesäkkeitä ja lyhytaikainen vastaus kemoterapiaa [2]. Esillä olevassa, enemmän ja enemmän tutkimukset keskittyvät molekyyli- diagnostiikassa ja mahasyövän [3].
Aryylihiilivetyreseptori (AhR) on ligandi-aktivoidun transkriptiotekijän. Sen jälkeen kun ligandit kuten polysyklisiä aromaattisia hiilivetyjä (PAH) ja halogenoidut hiilivedyt (HAH) sitoutuvat kanssa AHR solulimassa, ligandi-AhR kompleksin kulkeutua tumaan ja heterodimerizes kanssa AhR ydin- translocator (ARNT). Monimutkainen sitoutuu sukulais tehostajasekvenssiin ja myöhemmin aktivoi alavirran geenien ilmentymistä [4].
Perinteiset tutkimukset AhR toiminta keskittyi sen roolin ekspressiota sääteleviä xenobiotic metaboloivien entsyymien (XMEs) välittyvät ksenobioottien aineenvaihduntaa. Viimeaikaiset tutkimukset osoittivat, että AhR voi liittyä monia tärkeitä fysiologisia ja patologisia prosesseja kuten yksilön kehityksen, solujen erilaistumiseen ja syövän syntymistä [5]. AhR ilmentyminen ylössäädellään keuhkoissa [6], rintarauhasen [7], haiman [8] ja syöpien [9]. Lisätutkimukset havaittiin, että AhR pelataan improtant roolit säätelyssä soluproliferaatiokokeessa, apoptoosin, solusykliä, muuttoliike ja invaasio [10]. Koska proteiini syöpään liittyvät, AhR ehkä lupaava kohde syövän hoidossa. Meidän edellinen työ havaittu, että AhR agonisti, 2,3,7,8 -tetrachlorodibenzo para-dioksiinia (TCDD), estivät mahalaukun syövän solujen kasvua [9]. Mutta TCDD itsessään on syöpää aiheuttava [11], niin löytää myrkytön tai vähän myrkyllinen AhR modulaattorit voivat olla uusi suunta molekyyli-täsmähoitoihin mahasyövän.
Valikoiva AhR reseptorin modulaattori 3,3'-di-indolyylimetaani (DIM ) on luokan suhteellisen myrkytön indolijohdannaisia. DIM on happo-catalyed consendation tuote indoli-3-karbinoli, joka on consititudent ristikukkaisten vihanneksia, ja on muodostettu mahassa [12]. DIM on syöpälääke, se tukahduttaa syöpäsolujen lisääntymistä rintakasvainkudoksessa [13], paksusuolen [14] ja haiman [15] syöpiä.
Oli ollut vain vähän raportteja vaikutuksista DIM mahalaukun syöpäsolujen kasvua, Tämä tutkimustyö suunniteltiin tarkkailla vaikutuksia DIM mahalaukun syöpäsolujen kasvua ja tutkia mahdollisia mekanismeja. Tool menetelmät
Cell line
Ihmisen mahalaukun syövän solulinja SGC7901 saatiin Cancer Institute of Chinese Academy of Medical Science. SGC7901 Soluja ylläpidettiin RPMI-1640-väliaineessa (GIBCO, Carlsbad, Kalifornia, USA), johon oli lisätty 10% naudan sikiön seerumia (Hyclone, USA), 1 x 10 5 U /l penisilliiniä, ja 0,1 g /l gentamysiiniä. Solu ympäristö pidettiin 50 ml /l CO2 ja 37 ° C.
Solujen käsittely
DIM ostettiin Enzo Life Science yritys (Bulter Pike Plymouth Meeting, PA, USA), resveratrol ja dimetyylisulfoksidi (DMSO ) ostettiin Sigma Chemical Company (Bellefonte, PA, USA). DIM ja resveratrolin liuotettiin DMSO. Kun oli inkuboitu 24 tuntia, yksi ryhmä soluja käsiteltiin DIM eri pitoisuuksina (0, 10, 20, 30, 40, 50 umol /l) 24 tunnin ajan. Toinen ryhmä käsiteltiin DIM (30 umol /l) plus resveratrolin (0, 1, 5, 10, 20 umol /l) 6 tuntia. Toinen ryhmä käsiteltiin DIM (30 umol /l) ja eri aikavälein (0, 1, 6, 24, 48, 72 h), vastaavasti. Kontrollisolut saivat 1 ml /l pelkästään DMSO.
Käänteinen transkriptio-polymeraasi ketjureaktio (RT-PCR) B-keräyksen jälkeen solun kokonais-RNA uutettiin käyttäen Qiagen RNeasy Mini Kit (Qiagen, Saksa) mukaan valmistajan ohjeita. cDNA syntetisoitiin 1 ug: lla kokonais-RNA: sta käyttäen käänteistranskriptaasia, ReverTraAceTM (Toyobo Co., Osaka, Japani) seuraavissa olosuhteissa: 30 ° C: ssa 10 minuuttia, 42 ° C: ssa 20 minuutin ajan, 99 ° C: ssa 5 min, ja 4 ° C: ssa 5 min. Polymeraasiketjureaktio (PCR) suoritettiin käyttäen 2 pl komplementaarisen DNA: n ja 0,6 U Ex Taq DNA-polymeraasia (Takara, Dalian, Kiina) 20 ui reaktiossa järjestelmän ja 30 sykli 94 ° C: denaturaatio 30 s, 55 ° C annealing 30 s ja 72 ° C venymä 45 s.
alukesekvenssit olivat seuraavat: käänteistranskriptaasi-polymeraasiketjureaktio (RT-PCR): AhR, 5'-ACT CCA CTT CAG CCA CCA TC-3 '( eteenpäin) ja 5'- ATG GGA CTC GGC ACA ATA AA -3 '(taaksepäin), ehdotettu koko PCR tuote oli 204 bp. CYP1A1, 5'- CCA TGT CGG CCA CGG AGT T -3 '(eteenpäin) ja 5'ACA GTG CCA GGT GCG GGT T -3' (taaksepäin), The proposedsize PCR tuote oli 174 bp. Glyseraldehydi-3-fosfaattidehydrogenaasi (GAPDH), 5'- GGG AAA CTG TGG CGT GAT -3 '(eteenpäin) ja 5'- AAA GGT GGA GGA GTG GGT -3' (taaksepäin), ennakoitu koko PCR-tuotteen oli 309 kp. PCR-tuotteet sen jälkeen elektroforeesi 1,5% agaroosigeelillä, ja visualisoitiin UV-transilluminaattoria.
Western blot-analyysi
Solut hajotettiin puskurissa, joka sisälsi 20 mmol /L HEPES, 1 mmol /l EGTA: a, 50 mmol /L β-glyserofosfaatti, 2 mmol /L natriumortovanadaattia, 100 ml /l glyserolia, 10 ml /l Triton X-100, 1 mmol /l DTT: tä ja 1 x proteaasi-inhibiittorin Cocktail (Roche, Mannheim, Saksa). Lysaattia sentrifugoitiin 13 000 g ja 4 ° C: ssa 10 min. Supernatantti oli kokosolulysaattia. Proteiinipitoisuus mitattiin käyttäen BCA-proteiinimäärityksellä (Pierce Chemical Co., Rockford, IL, USA). Kolmekymmentä mikrogrammaa proteiinia kaistaa kohti, erotettiin 100 g /l SDS-PAGE, ja siirretään tasapainotettiin polyvinylidiinidifluoridiin kalvon elektroforeesin. Membraanit blokattiin 5% rasvatonta maitoa 1% TBS-T-puskurissa 2 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. AhR, CYP1A1, ja GAPDH havaittiin 2 tuntia käyttäen vasta-aineita AhR (SC-5579, Santa Cruz Biotechnology, USA, työskentely laimennus 1: 150), CYP1A1 (AB1258, Chemicon International, USA, työskentely laimennus 1: 500), ja GAPDH (2118, Cell Signaling Technology, USA, työskentely laimennus 1: 1000). Sen jälkeen, kun sekundaarisen vasta-aineen inkuboinnin (7074, Cell Signaling Technology, USA, työskentely laimennus 1: 2000), 2 tuntia, proteiinin vyöhykkeet havaittiin käyttäen ECL-järjestelmää (Pierce Biotechnology, Inc., USA).
Solunelinkykyisyysmääritys
vaikutus DIM proliferaatioon mahasyövän solujen määritettiin MTT-määrityksellä. Lyhyesti, yhteensä 1 x 10 4 trypsiini-dispergoidaan solua 0,1 ml: ssa viljelyalustaa ympättiin kuhunkin kuoppaan 96-kuoppaiselle levylle ja viljeltiin 24 tuntia. Seuraavaksi soluja käsiteltiin DIM kuten edellä on kuvattu. Sitten 20 ui MTT: tä (5 g /l) lisättiin kuhunkin kuoppaan ja inkubointia jatkettiin 4 tuntia 37 ° C: ssa. Lopuksi, elatusaine poistettiin ja 150 ui DMSO: ta lisättiin kuhunkin kuoppaan. Absorbanssi määritettiin ELISA-lukijalla 490 nm: ssä. Solujen elävyys prosenttiosuus laskettiin: Elinkelpoisuus prosentteina (%) = (imeytyminen arvo koeryhmä) /(imeytyminen arvo kontrolliryhmä) x 100%.
Virtaussytometrinen analyysi
SGC7901 solut maljattiin 60 mm: n halkaisija soluviljelylevyille ja käsiteltiin DIM eri pitoisuus (10, 20, 30, 40, 50 umol /l) 48 tuntia. Ohjaus sisälsi 1 ml /l pelkästään DMSO. Ennen sadonkorjuuta, solut pestiin kahdesti
0,01 mol /l PBS, trypsinoitiin, ja rehupelletit. Sitten solut kiinnitettiin 70%: isella jääkylmällä etanolilla 4 ° C: ssa yön yli. Lopuksi solut pestiin kaksi kertaa PBS: llä ja värjättiin PI. DNA-pitoisuus analysoitiin virtaussytometrillä (Beckman-Coulter, Brea, USA). Solusyklin SGC7901 solut analysoitiin käyttäen MULTYCYCLE ja winMDI2.9 ohjelmisto (Phoenix, AZ, USA). Solun apoptoosia analyysi sen jälkeen, kun oli inkuboitu 48 tuntia, solut värjättiin anneksiini V-FITC: llä ja PI. Solut anneksiini V: (-) ja PI (-) katsottiin eläviä soluja. Solut anneksiini V: (+) ja PI (-) katsottiin alussa apoptoottisia soluja. Solut sekä anneksiini V: (+) ja PI (+) katsottiin myöhään apoptoottisia soluja.
Tilastollinen analyysi
Kaikki kvantitatiiviset tiedot ilmaistiin keskiarvona ± SD ja analysoitiin käyttäen yksisuuntaista varianssianalyysiä (ANOVA). Kaikki tilastolliset analyysit tehtiin SPSS tilastollista ohjelmistopaketti (versio 11.0, SPSS Inc. Chicago, USA). P < 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.
Tulokset
aktivointi AhR mukaan DIM
Sen testaamiseksi, AhR signaalireitin voitaisiin aktivoida DIM, käsittelimme mahasyövän solulinja SGC7901 kanssa DIM. RT-PCR: llä ja Western blot-analyysi osoitti, että kun DIM hoidon, AhR proteiinia kokosoluliuotteista alennetaan asteittain (kuvio 1). CYP1A1, klassinen kohde geenin AhR, käytettiin indikaattorina AhR signaalireitin aktivointi. Perustaso CYP1A1 ilmentymistä ei havaittu SGC7901 soluissa, mutta molemmat CYP1A1 mRNA ja proteiinin ilmentyminen oli lisääntynyt annoksesta ja ajasta riippuvaisella tavalla seuraavat DIM hoidon (kuvio 1). Edelleen vahvistaa DIM aiheuttama CYP1A1 ilmentyminen oli AhR-riippuvainen, käsittelimme SGC7901 solut tietyn AhR antagonisti, resveratroli [16, 17]. soluja käsiteltiin DIM (30 umol /l) vain tai DIM (30 umol /l), sekä erilaisia ​​pitoisuuksia resveratrolin (0, 1, 5, 10, 20 umol /l), vastaavasti 6 h (kuvio 2). Yhdenmukaiset aiempien tulosten kanssa, hoito SGC7901 soluja 30 mikromol /l DIM aiheutti huomattava nousu CYP1A1 ilme. Kuitenkin tämä DIM aiheuttama CYP1A1-ekspressio osittain kumota resveratrolin annos-riippuvaisella tavalla (kuvio 2A ja B). Kuvio 1 AhR ja CYP1A1 ilmaisun SGC7901 soluissa jälkeen DIM hoidon. A ja B: RT-PCR; C ja D: Western blotting. Hoito SGC7901 solujen AhR modulaattori DIM johti ajan - (A ja C) ja pitoisuus -riippuvaisella (B ja D) induktion CYP1A1 ilmaisua. Esitetyt tulokset edustavat kolmea riippumatonta koetta.
Kuvioon 2 inhibitio DIM aiheuttama CYP1A1 mRNA: n ja proteiinin ilmentyminen resveratrol. V: CYP1A1 mRNA: ta havaittiin RT-PCR: llä; B: CYP1A1-proteiini havaittiin Western-blottauksella. RSV: resveratrol. Esitetyt tulokset edustavat kolmea riippumatonta koetta. Hoito SGC7901 solujen 30 mikromol /l DIM aiheutti huomattava nousu CYP1A1 ilme. Tämä DIM aiheuttama CYP1A1 ilmentyminen oli osittain kumota resveratrolin pitoisuudesta riippuvalla tavalla.
Vaikutus DIM cellur leviämisen
proliferaatio SGC7901 solujen määritettiin MTT-analyysi kuluttua 6-72 h hoidon kasvavia konsentraatioita DIM (0-50 umol /l). Tulokset osoittivat, että DIM esti SGC7901 soluproliferaatioon on pitoisuudesta ja ajasta riippuvaisella tavalla, Resveratrol (10 mikromol /l) voi osittain kääntää esto vaikutukset DIM (30 mikromol /l) on cellur proliferaatioprosessi ajankohtina: 6 h ja 12 h (kuvio 3), mutta emme löytäneet käänteinen vaikutuksia muissa aikapisteissä (24 h, 48 h ja 72 h, tietoja ei ole esitetty). Kuvio 3 elinkelpoisuus SGC7901 solujen jälkeen DIM hoidon arvioitiin MTT: llä. Elinkelpoisuus SGC7901 solujen väheni huomattavasti on pitoisuudesta ja ajasta riippuvaisella tavalla jälkeen DIM hoidon. Resveratrolin (10 mikromol /l) voi osittain kääntää esto vaikutukset DIM (30 mikromol /l) on cellur leviämistä.
Vaikutus DIM solusyklin
Virtaussytometrinen analyysi paljasti, että DIM hoito aiheuttamiin muutoksiin solusyklin jakelu , lisääntynyt kertyminen SGC7901 soluja G1 vaiheessa ja korvauksia tämän muutoksen väheneminen soluja S-vaiheeseen (kuvio 4 ja taulukko 1). Kuva 4 vaikutus DIM solusyklin of SGC7901 soluja. SGC7901-soluja käsiteltiin eri pitoisuuksilla DIM ja alistettiin virtaussytometria-analyysi. Prosenttiosuus kunkin vaiheen on ilmoitettu kussakin paneelissa. Esitetyt tulokset edustavat kolmea riippumatonta koetta.
Taulukko 1 vaikutus DIM solusyklin SGC7901 solujen
DIM pitoisuus (umol /l)
Suhteellinen solusyklin (%)

G1
G2
S
0
55,90 ± 1,48
10,5 ± 0,95
33,63 ± 0,55
10
57.20 ± 0,36 *
9,10 ± 0,3
33,70 ± 0,53
20
61.03 ± 1,53 *
8,17 ± 0,68
30,77 ± 0,97 *
30
61,97 ± 0,32 *
9,83 ± 0,32
28,23 ± 0,60 *
40
62,77 ± 1,46 *
9,13 ± 0,91
28,10 ± 0,56 *
50
73.03 ± 4,05 *
9,17 ± 1,51
18,07 ± 0,57 *
* p < 0,05, vs kontrolli.
Vaikutus DIM apoptoosin
48 h kuluttua DIM hoidon, muutoksia solun apoptoosin havaittiin virtaussytometrisellä analyysi. Verrattuna kontrolliryhmään, apoptoosia indusoitiin pitoisuuksina 20-50 umol /l, ja apoptoosin nousi annoksesta riippuvalla tavalla. Nämä tulokset osoittivat, että DIM voivat aiheuttaa solujen apoptoosia SGC7901 soluissa (kuvio 5 ja taulukko 2). Kuva 5 vaikutus DIM apoptoosiin SGC7901 soluja. SGC7901-soluja käsiteltiin eri pitoisuuksilla DIM ja alistettiin virtaussytometria-analyysi. Esitetyt tulokset edustavat kolmea riippumatonta koetta.
Taulukko 2 vaikutus DIM apoptoosiin SGC7901 solujen
DIM pitoisuus (umol /l)
Apoptosis määrä (%) B
0
4,18 ± 0,23
10
4,81 ± 0,42
20
6,07 ± 0,33 *
30
7,23 ± 0,78 #
40
7,39 ± 1,08 #
50
9,14 ± 0,32 #
* p < 0,05, #p < 0.01vs valvontaa.
Keskustelu
Aiemmat työtä havaittu, että ilmaus AhR oli merkitsevästi säädellään ylöspäin mahasyövän, ja voi olla mukana alkuvaiheessa mahasyövän, sääntely AhR voi olla mahdollinen rooli hoidossa mahasyövän. Oletimme, että AhR ligandeja voidaan käyttää mahalaukun syövän hoidossa. Sitten meidän enää joutuisi tutkimukset osoittivat, että TCDD, joka on voimakas AhR agonistia, voisivat supresse kasvua mahasyövän solun AGS annoksesta ja aika-depengent tavalla indusoimalla kasvun pysähtymisen G1-S-vaiheessa [9]. Mutta TCDD itsessään on syöpää aiheuttavia, se aiheuttaa laajan kirjon biologisia vasteita, kuten induktio CYP1A1, häiriintyminen normaalia hormonin signalointireittien, lisääntymis- ja kehityshäiriöitä vikoja, immunotoksisuus, maksavaurioita, tuhlaa oireyhtymä ja syöpä [18], joten myrkytön tai vähän myrkyllinen selektiiviset AhR modulaattorit ehkä toimi mahdollisille mahasyövän.
Vuodesta tutkimukset rintasyövän, Safe löydetty kaksi luokkaa selektiiviset AhR modulaattorit: Alternate-substituoidut (1,3,6,8- ja 2, 4,6,8-) alkyyli polykloorattujen dibentsofuraanien (PCDF) ja substituoidut diindolylmethanes (himmenee), verrattuna TCDD, nämä yhdisteet ovat suhteellisen myrkyttömiä ja estävät ER-positiiviset ja ER-negatiivisen nisäkasvaimen kasvua, mutta eivät indusoi AhR- välitteisen myrkyllisiä indusoimia TCDD [19].
DIM edustaa uuden luokan suhteellisen myrkytön antitumorigenic AhR modulaattoreita, jotka ovat phytochemical alkuperää. Verrattuna TCDD, DIM on heikko agonistina AhR induktioon CYP1A1-geenin ilmentymisen [20] ja toiminta [21], ja se osoittaa kykyä kilpailla sitoutumisesta TCDD on AhR [22].
Testaamiseksi sää AhR signaalireitin voitaisiin activited mukaan DIM mahasyövän soluissa, käsittelimme mahasyövän solulinja SGC7901 kanssa DIM. Tulokset osoittivat, että AhR proteiinia kokosoluliuotteista vähitellen pienentynyt (kuvio 4C ja D), Samanlaisia ​​ilmiöitä on havaittu meidän labs ja useita muita ryhmiä [9, 23], alas-säätely AhR ligandin sitoutumisen jälkeen pidetään imprtant vaihe AhR signaalireitin [23]. CYP1A1, klassinen kohde geenin AhR valittiin indikaattorina AhR signaalireitin aktivointi. Lähtötasot CYP1A1 ilmaisua ei havaittu SGC7901 soluissa esillä olevassa tutkimuksessa. Kuitenkin ilmaus CYP1A1 lisääntyi merkitsevästi on pitoisuudesta ja ajasta riippuvaisella tavalla jälkeen DIM käsittelylle, mikä ilmaisee aktivointi AhR. Vahvista aktivoinnin AhR signaalireitin mukaan DIM, käsittelimme SGC7901 soluja tietyllä AhR antagonisti, resveratrol. Tuloksemme osoittivat, että DIM aiheuttama CYP1A1 ilmentyminen oli osittain kumota resveratrolin pitoisuudesta riippuvalla tavalla. Epätäydellinen käänteinen CYP1A1 ilmentymisen resveratroli voi johtua siitä, että AhR ei ole ainoa säädin CYP1A1 transkription [24]. Yhdessä nämä tulokset viittaavat siihen, että DIM voi aktivoida AhR signaalireitin mahalaukun syöpäsoluja.
MTT-määritys osoitti, että elinkelpoisuuden SGC7901 solujen väheni huomattavasti on pitoisuudesta ja ajasta riippuvalla tavalla, kun DIM hoidon. Selventää sää tämä vaikutuksia oli AhR- riippuvainen, käsittelimme SGC7901 soluja DIM ja resveratrolin, huomasimme, että esto vaikutukset DIM SGC7901 solujen kasvu oli osittain mutta ei täysin varattu reservatrol, mikä viittaa siihen, että DIM estää mahalaukun syövän solujen kasvua osittain kautta AhR. Tämä tulos on sopusoinnussa aikaisempien tutkimusten: Hong, C totesi, että DIM esti kasvu sekä Ah-reagoiva ja Ah-ei-reagoivaa rintasyövän soluja. jotkut antikarsinogeenisiä toimintaan DIM ovat AhR riippumattaman [25]. Mielenkiintoista on, että kääntyminen vaikutus solujen proliferaatioon havaittiin sen jälkeen, kun soluja käsiteltiin DIM plus reservatrol 6 h tai 12 h, mutta ei enää ajankohtina (24 h, 48 h ja 72 h), tämä ehkä liittyy aika-tehokkuus of reservatrol.
on ollut joitakin tutkimuksia syövän machanisms of DIM. Choi HJ osoitti, että DIM aiheuttama G1 ja G2 /M vaiheessa solusyklin pysähtymisen HT-29 ihmisen paksusuolen syöpäsoluissa [26]. Vivar OI ja Hong C löysi DIM indusoi G (1) pidätyksen ihmisen eturauhasen syöpäsolujen [27] ja ihmisen rintasyövän solujen [28]. Toisaalta, jotkut artikkeleita kertoi, että DIM voi edistää apoptoosin syöpäsoluissa surviviini, uPA ja uPAR tai NF-kappaB sinaling [29-33].
Tutkimaan edelleen erityisiä menetelmiä mahalaukun syöpäsolun kasvua estävän vaikutuksen DIM käsittelimme SGC7901 solut DIM, testataan muutosten solusyklin ja solu- apoptoosin virtaussytometrianalyysillä. Tulokset osoittivat, että kasvu DIM pitoisuuden, solut G1 vaiheessa vähitellen kasvanut, solut S-vaiheessa vähentynyt, mutta solut G2-vaiheessa pysyi muuttumattomana, mikä osoittaa, että DIM voisi pidättää solusyklin G1 vaiheessa. Eroaa TCDD, DIM myös indusoi apoptoosia, mikä viittaa siihen, että DIM voi tukahduttaa mahasyövän solujen lisääntymisen kautta aiheuttamaan apoptoosin ja pidättivät solusyklin, Kuitenkin mekanismit vastaavat vaikutukset DIM mahasyövän solusyklin ja apoptoosin tarvitaan edelleen olla edelleen tutkittu.
Johtopäätökset
surmary, tämä raportti osoitti, että myrkytön selektiivinen AhR modulaattori DIM inhiboivat ihmisen mahasyövän solulinja SGC7901 in vitro indusoimalla apoptoosia ja pidättivät solusyklin G1-vaiheessa. Meidän havainnot ehdotti, että AhR voisi olla lupaava kohde mahalaukun syövän hoitoon.
Notes
Xiao-Fei Yin, Jie Chen vaikuttanut yhtä tähän työhön.
Lyhenteet
AhR:
aryylihiilivetyreseptori
GAPDH:
Glyseraldehydi 3-fosfaattidehydrogenaasin
RT-PCR:
käänteistranskriptiolle polymeraasin toi- Chain Reaction
MTT:
metyyli tiatsolyyli tetratsoliumilla
DMSO:
Dimetyylisulfoksidi
FBS:
sikiön seerumia
TCDD:
2,3,7,8-tetraklooridibentso-para-dioksiinia
TBST:
Tris-puskuroitu suolaliuos, joka sisältää 0,05% Tween 20
julistukset
Kiitokset
tutkimus tukee avustuksia National Natural Science Foundation of China (No. 30871145 ja nro 81072048), Junior opettaja viljely Project Sun Yat-sen University (nro 09ykpy22), avustukset suurhankkeiden monitieteisen tutkimukset Sun Yat-sen University (No.10ykjc23) tukema perustutkimus rahastojen Keski yliopistot.
kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 13046_2012_571_MOESM1_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 13046_2012_571_MOESM2_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 13046_2012_571_MOESM3_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 3 13046_2012_571_MOESM4_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 4 13046_2012_571_MOESM5_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäisen tiedoston luku 5 kilpailevat edut
kirjoittajat ilmoittavat, että heillä ei ole kilpailevia intressejä.
Tekijät osuudet
Yin XF ja Chen J vaikuttanut yhtä tähän työhön; Yin XF ja Chen J suoritettu tutkimus ja kirjoitti paperille; Mao W järjestetty luvut ja analysoitua tietoa; Wang YH avustivat soluviljelmässä. Chen MH suunniteltu tutkimus ja valvoi kirjoittamista ja organisaation prosessi. Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.

• Romaani onkolyyttinen viruslääkkeitä ja kuvantamismenetelmä mahasyövän käyttäen geneettisesti vacciniavirus kuljettaa ihmisen natriumjodidin symporter
• FOLFIRI kuin toisen linjan hoito potilailla, joilla on dosetakselia esikäsitellyt mahasyövän: historiallinen cohort