Рецептор модулятор селективный арилуглеводородному 3,3-Diindolylmethane ингибирует рост раковых клеток желудка

Рецептор модулятор селективный арилуглеводородному 3,3'-Diindolylmethane ингибирует желудочную рост раковых клеток
Аннотация
Справочная информация
арилуглеводородному рецептора (AHR) представляет собой лиганд-активированный фактор транскрипции, связанный с желудочным канцерогенеза. 3,3'-Diindolylmethane (DIM) является относительно нетоксичным селективный модулятор AhR. Это исследование было обнаружить эффекты DIM на желудочную роста раковых клеток.
Методы
Желудочный раковых клеток SGC7901 обрабатывали DIM при различных концентрациях (0,10,20,30,40,50 мкмоль /л) с или без антагониста AhR, ресвератрол. Экспрессия и цитохрома арил-P4501A1 (CYP1A1), классический целевой ген AhR пути, были обнаружены с помощью ОТ-ПЦР и Вестерн-блоттинга; жизнеспособность клеток измеряли с помощью МТТ, а также изменения в клеточного цикла и апоптоза анализировали с помощью проточной цитометрии.

Результаты RT-PCR и вестерн-блот показал, что с увеличением концентрации DIM, AhR белка постепенно уменьшилась и экспрессия CYP1A1 увеличилась, предполагая, что DIM активировал путь AhR и вызвал транслокации из цитоплазмы арил-к ядру. МТТ показали, что жизнеспособность SGC7901 клеток значительно уменьшилось в от концентрации и зависимости от времени после обработки DIM, и это может быть частично отменено ресвератрола. Проточная цитометрия анализ показал, что DIM арестовал клеточного цикла в фазе G1 и индуцированный апоптоз клеток.
Заключение
модулятор рецептора Селективный арилуглеводородному 3,3'-Diindolylmethane ингибирует пролиферацию SGC7901 клеток путем индукции апоптоза и задерживая прогрессию клеточного цикла. AhR может быть потенциальной терапевтической мишенью для лечения рака желудка.
Ключевые слова
арилуглеводородному рецептор 3,3'-Diindolylmethane рак желудка цитохрома P4501A1 фон
рак желудка является одним из наиболее распространенных злокачественных новообразований. В экономически developping странах, рак желудка является вторым наиболее frequntly диагностировали рак и третьей ведущей причиной смерти от рака у мужчин [1], общий показатель 5-летней выживаемости невелика (от 15% до 35%) из-за высокой повторяемостью ставки, узловой метастаз и недолговечной ответ на химиотерапии [2]. В настоящее время все больше и больше исследований сосредоточены на молекулярной диагностике и терапии рака желудка [3].
Арила рецептор углеводородов (AHR) представляет собой лиганд-активированный фактор транскрипции. После того, как лигандов, таких как полициклические ароматические углеводороды (ПАУ) и галогенированные углеводороды (ХА) связываются с ПВДП цитоплазмы, комплекс лиганд-AhR транслоцируется к ядру и heterodimerizes с ядерным транслокатору AhR (ARNT). Комплекс связывается с родственной последовательностью энхансера, а затем активирует экспрессию генов вниз по течению [4].
Традиционные исследования функции AhR сосредоточены на ее роль в регуляции экспрессии ксенобиотиков метаболизирующих ферментов (XMEs) и опосредовании метаболизма ксенобиотиков. Недавние исследования показали, что AhR может включать в себя во многих важных физиологических и патологических процессов, в том числе индивидуального развития, дифференциации клеток и канцерогенеза [5]. Выражение AhR активируется в легких [6], молочной железы [7], поджелудочной железы [8] и рака желудка [9]. Дальнейшие исследования показали, что AhR играл Improtant роль в регуляции клеточной пролиферации, апоптоз, клеточный цикл, миграцию и инвазию [10]. В качестве белка, связанного с раком, AhR возможно перспективной мишенью для терапии рака. Наша предыдущая работа обнаружили, что агонистично, 2,3,7,8 -tetrachlorodibenzo -para-диоксин (ТХДД), ингибирует желудочную рост раковых клеток [9]. Но сама ТХДД является канцерогенным [11], Таким образом, чтобы найти нетоксичными или Малотоксичные AhR модуляторов может быть новым направлением для молекулярно-направленной терапии при раке желудка.
Модулятор рецептора Селективный AhR 3,3'-Diindolylmethane (DIM ) является классом относительно нетоксичные производные индола. DIM представляет собой кислотно-catalyed consendation продукт индол-3-карбинол, в consititudent крестоцветных овощей, и формируется в желудке [12]. DIM представляет собой противораковое средство, он подавляет пролиферацию раковых клеток в молочной [13], толстой кишки [14] и поджелудочной железы [15] рака.
Там было мало сообщений о влиянии DIM на желудочную роста раковых клеток, тем настоящее исследование было разработано, чтобы наблюдать эффекты DIM на желудочную роста раковых клеток и исследовать возможные механизмы.
Методы
линия клеток
желудка человека линии клеток рака SGC7901 была получена из онкологического института китайской академии медицинских Наука. SGC7901 Клетки поддерживали в среде RPMI-1640 (Gibco, Carlsbad, CA, США) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (Hyclone, США), 1 × 10 5 ед /л пенициллина, и 0,1 г /л гентамицин. Клеточная среда поддерживалась на уровне 50 мл /л CO2 и 37 ° С.
Обработка клеток
DIM был приобретен у компании Энцо Life Science (Bulter Pike встречи, Плимутской PA, USA), ресвератрол и диметилсульфоксид (ДМСО ) были приобретены у Sigma Chemical Company (Bellefonte, Пенсильвания, США). DIM и ресвератрол растворяли в ДМСО. После инкубирования в течение 24 ч, одна группа клеток обрабатывали DIM при различных концентрациях (0, 10, 20, 30, 40, 50 мкмоль /л) в течение 24 часов. Вторую группу обрабатывали DIM (30 мкмоль /л) плюс ресвератрола (0, 1, 5, 10, 20 мкмоль /л) в течение 6 ч. Другая группа обрабатывали DIM (30 мкмоль /л) в течение различных интервалов времени (0, 1, 6, 24, 48, 72 ч), соответственно. Контрольные клетки получили 1 мл /л ДМСО только.
с обратной транскрипцией и полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР)
После сбора клетки, Суммарную РНК экстрагировали с использованием набора Qiagen RNeasy Mini Kit (Qiagen, Германия) в соответствии с инструкции изготовителя. кДНК синтезировали с 1 мкг суммарной РНК с использованием обратной транскриптазы, ReverTraAceTM (Toyobo Co., Осака, Япония) при следующих условиях: 30 ° C в течение 10 мин, 42 ° С в течение 20 мин, 99 ° С в течение 5 мин и 4 ° С в течение 5 мин. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) проводили с использованием 2 мкл комплементарной ДНК и 0,6 U Ex Taq ДНК-полимеразы (Takara, Dalian, China) в реакционной системе 20 мкл и 30 цикла при 94 ° С денатурация в течение 30 с, 55 ° С для отжига . в течение 30 секунд и 72 ° C удлинение в течение 45 секунд
последовательности праймеров были следующими: обратной транскрипции-полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР): AhR, 5'- ACT CCA CTT CAG CCA CCA TC-3 '( вперед) и 5'- ATG GGA CTC GGC ACA ATA AA-3 '(обратный), предлагаемый размер продукта ПЦР 204 пар оснований. CYP1A1, 5'- CCA TGT CGG CCA CGG AGT T-3 '(вперед) и 5'- ACA GTG CCA GGT GGT GCG T-3' (обратный), то proposedsize продукта ПЦР 174 пар оснований. Глицеральдегид-3-фосфат-дегидрогеназы (GAPDH), 5'- GGG AAA CTG TGG ВКТ GAT-3 '(вперед) и 5'- ААА ГГТ GGA GGA GTG ГГТ -3' (обратный), разведанные размер ПЦР-продукта 309 пар оснований. Полученные ПЦР-продукты затем подвергали электрофорезу на агарозном геле 1,5%, и визуализировали под УФ просвечивания.
вестерн-блот анализ
Клетки лизируют в буфере, содержащем 20 ммоль /л HEPES, 1 ммоль /л EGTA, 50 ммоль /л β-глицерофосфат, 2 ммоль /л ортованадата натрия, 100 мл /л глицерина, 10 мл /л тритона Х-100, 1 ммоль /л ДТТ и 1 × Ингибитор Коктейль Протеаза (Roche, Mannheim, Германия). Лизат центрифугировали при 13 000 г и 4 ° С в течение 10 мин. Супернатант был общий клеточный лизат. Концентрацию белка измеряли с помощью анализа белка ВСА набора (Pierce Chemical Co., Rockford, IL, США). Тридцать микрограммов белка, были загружены на полосу, разделенных 100 г /л SDS-PAGE и переносили на уравновешенной поливинилидендифторидную мембрану электроблотинга. Мембраны блокировали 5% -ным молоком обезжиренным в 1% TBS-T буфере в течение 2 ч при комнатной температуре. AhR, CYP1A1 и GAPDH были обнаружены в течение 2 ч с использованием антител против арил-(SC-5579, Santa Cruz Biotechnology, США, работая разведение 1: 150), CYP1A1 (AB1258, Chemicon International, США, работая разведение 1: 500), и GAPDH (2118, Cell Signaling Technology, США, рабочее разведение 1: 1000). После инкубации вторичное антитело (7074, Cell Signaling Technology, США, рабочее разведение 1: 2000) в течение 2 ч, белковые полосы были обнаружены с использованием системы ECL (Pierce Biotechnology, Inc., США)
жизнеспособность клеток анализ
СКОРОСТЕЙ. влияние DIM на пролиферацию клеток рака желудка определяли с помощью МТТ-теста. Если коротко, то в общей сложности 1 × 10 4 трипсин-дисперсионные клеток в 0,1 мл культуральной среды высевали в каждую лунку 96-луночного планшета и культивировали в течение 24 часов. Затем клетки обрабатывали DIM, как описано выше. Затем, 20 мкл МТТ (5 г /л) добавляли в каждую лунку, и инкубацию продолжали в течение 4 ч при 37 ° С. И, наконец, культуральную среду удаляли и 150 мкл ДМСО добавляли в каждую лунку. Оптическую плотность определяли с помощью ELISA-считывателем при 490 нм. Процент жизнеспособности клеток рассчитывают как:. Жизнеспособность в процентах (%) = (поглощение стоимости эксперимента группы) /(поглощение значением контрольной группы) × 100%
Цитометрический анализ
SGC7901 клетки высевали на 60-мм диаметр культуральные планшеты и обрабатывали DIM при различной концентрации (10, 20, 30, 40, 50 мкмоль /л) в течение 48 ч. Контроль содержал только 1 мл /л ДМСО. До сбора урожая, клетки дважды промывали
0,01 моль /л PBS, обрабатывали трипсином и осаждали. Затем клетки фиксировали 70% охлажденным льдом этанолом при температуре 4 ° С в течение ночи. Наконец, клетки дважды промывали ПБС и окрашивали PI. Содержание ДНК анализировали с помощью проточной цитометрии (Beckman-Coulter, Brea, США). Клеточного цикла SGC7901 клеток анализировали с использованием MULTYCYCLE и программного обеспечения winMDI2.9 (Феникс, Аризона, США). Для анализа апоптоза клеток, после инкубации в течение 48 ч, клетки окрашивали аннексина V-FITC и PI. Клетки с аннексина V (-) и PI (-) были признаны жизнеспособные клетки. Клетки с аннексина V (+) и PI (-), были признаны в начале апоптотических клеток. Клетки с обоих аннексина V (+) и PI (+) были признаны поздние апоптотических клеток.
Статистический анализ
Все количественные данные были выражены как среднее ± стандартное отклонение и анализировали с помощью одностороннего анализа в дисперсии (ANOVA). Все статистические анализы проводились с использованием статистического пакета программного обеспечения SPSS (версия 11.0, SPSS Inc. Чикаго, США). P &л; 0,05 считали статистически значимыми.
Результаты
Активация пути с помощью арил-DIM
Чтобы проверить, может ли сигнальный путь AhR быть активирован DIM, мы обрабатывали желудочный линии раковых клеток SGC7901 с DIM. ОТ-ПЦР и Вестерн-блот-анализ показал, что после того, как DIM лечения, AhR белка в лизате клеток постепенно уменьшается (рисунок 1). CYP1A1, классический ген-мишень из арил-углеводорода, был использован в качестве индикатора активации пути сигнала AhR. Базовый уровень экспрессии CYP1A1 не наблюдалось в SGC7901 клетках, но и мРНК CYP1A1 и экспрессии белка были увеличены в дозы и времени зависимым образом следуя DIM лечения (рисунок 1). Для дальнейшего подтверждения экспрессии CYP1A1 DIM-индуцированное был AhR-зависимыми, мы рассматривали SGC7901 клетки со специфическим антагонистом AhR, ресвератрол [16, 17]. Клетки обрабатывали DIM (30 мкмоль /л) или только DIM (30 мкмоль /л), а также различные концентрации ресвератрола (0, 1, 5, 10, 20 мкмоль /л), соответственно в течение 6 часов (рисунок 2). В соответствии с предыдущими результатами, лечение SGC7901 клеток с 30 мкмоль /л DIM вызвало значительное увеличение экспрессии CYP1A1. Тем не менее, это выражение CYP1A1 DIM-индуцированной частично отменено ресвератрола в зависимости от дозы образом (фиг.2А и В). Рисунок 1 AhR и экспрессия CYP1A1 в SGC7901 клетках после лечения DIM. А и В: ОТ-ПЦР; C и D: Вестерн-блоттинга. Лечение SGC7901 клеток с AhR модулятора DIM приводит к времени - (А и С) и концентрация -зависимая (В и D) индукция экспрессии CYP1A1. Результаты, показанные являются репрезентативными из трех независимых экспериментов. Рисунок 2
Ингибирование DIM индуцированный мРНК CYP1A1 и экспрессию белка с помощью ресвератрола. А: CYP1A1 мРНК была обнаружена с помощью ОТ-ПЦР; В: CYP1A1 белка определяли с помощью Вестерн-блоттинга. RSV: ресвератрол. Результаты, показанные представляют три независимых эксперимента. Лечение SGC7901 клеток с 30 мкмоль /л DIM вызвало значительное увеличение экспрессии CYP1A1. Это выражение CYP1A1 DIM-индуцированной частично отменено ресвератрола в зависимости от концентрации.
Влияние DIM на пролиферацию cellur
Распространение SGC7901 клеток определяли с помощью МТТ после 6-72 ч лечения с увеличением концентрации DIM (0-50 мкмоль /л). Результаты показали, что DIM ингибирует клеточную пролиферацию SGC7901 в и концентрация-время-зависимым образом, ресвератрол (10 мкмоль /л) может частично отменять Ингибирующее действие DIM (30 мкмоль /л) на пролиферацию cellur в моменты времени: в течение 6 ч и 12 ч (рис 3), но мы не нашли разворотные эффекты в других временных точках (24 ч, 48 ч и 72 ч, данные не показаны). Рисунок 3 Жизнеспособность SGC7901 клеток после обработки DIM оценивали с помощью МТТ-теста. Жизнеспособность клеток SGC7901 после лечения DIM было значительно снижено в от концентрации и зависимым от времени образом. Ресвератрол (10 мкмоль /л) может частично поменять местами ингибирования эффекты DIM (30 мкмоль /л) на cellur пролиферации.
Влияние DIM на клеточном цикле
проточной цитометрии анализ показал, что лечение DIM индуцированных изменений в распределении клеточного цикла , с повышенным накоплением SGC7901 клеток в фазе G1 и компенсации за это изменение уменьшением клеток в фазе S (рисунок 4 и таблица 1). Рисунок 4 Влияние DIM на клеточного цикла SGC7901 клеток. SGC7901 клетки обрабатывали различными концентрациями DIM и подвергали анализа проточной цитометрии. Процентное содержание каждого этапа указывается в каждой панели. Результаты, показанные являются репрезентативными из трех независимых экспериментов.
Таблица 1 Влияние DIM на клеточного цикла SGC7901 клеток
DIM концентрации (мкмоль /л)

Процент клеточного цикла (%) <бр>
G1

G2

S

0
55,90 ± 1,48
10,5 ± 0,95
33,63 ± 0,55
10
57,20 ± 0,36 * 9,10 ±
0,3
33,70 ± 0,53
20
61,03 ± 1,53 * 8,17 ±
0,68
30,77 ± 0,97 *
30
61,97 ± 0,32 * 9,83
± 0,32
28,23 ± 0,60 *
40
62,77 ± 1,46 * 9,13 ±
0,91
28,10 ± 0,56 *
50
73,03 ± 4,05 *
9,17 ± 1,51
18,07 ± 0,57 *
* р &л; 0,05, по сравнению с контролем.
Влияние DIM на апоптоз клеток
48 ч после обработки DIM, наблюдались изменения клеточного апоптоза с помощью анализа проточной цитометрии. По сравнению с контрольной группой, апоптоз клеток индуцировали при концентрациях от 20 до 50 мкмоль /л, а скорость апоптозом увеличена в зависимости от дозы образом. Эти результаты показали, что DIM может индуцировать апоптоз клеток в SGC7901 клеток (рисунок 5 и таблица 2). Рисунок 5 Влияние DIM на апоптоз клеток SGC7901. SGC7901 клетки обрабатывали различными концентрациями DIM и подвергали анализа проточной цитометрии. Результаты, показанные являются репрезентативными из трех независимых экспериментов.
Таблица 2 Влияние DIM на апоптоз клеток SGC7901
DIM концентрации (мкмоль /л)

Апоптоз ставка (%)
<бр> 0
4,18 ± 0,23
10
4,81 ± 0,42
20
6,07 ± 0,33 * 30

7,23 ± 0,78 #
40
7,39 ± 1,082

9,14 ± 0,32 #
* р &л; 0,05, #p &л; 0.01vs элемента управления.
Обсуждение
нашей предыдущей работы обнаружили, что экспрессия была значительно арил-повышающей регуляции при раке желудка, и могут быть вовлечены в ранней стадии рака желудка, регуляция пути AhR может иметь потенциальную роль в лечении рака желудка. Мы предположили, что AhR лиганды могут быть использованы для терапии рака желудка. Тогда наши futher исследования показали, что ТХДД, мощный AhR агонистом, может supresse рост раковых клеток желудка AGS в дозы и времени depengent образом с помощью индукции остановки роста в G1-S фазы [9]. Но сама ТХДД является канцерогенным, он вызывает широкий спектр биологических реакций, в том числе индукции CYP1A1, нарушение нормальных сигнальных путей гормональной, репродуктивной и пороки развития, иммунотоксичность, повреждение печени, синдром истощения и рак [18], поэтому нетоксичен или низкотоксичные селективных модуляторов AhR может быть, служил в качестве возможных агентов для рака желудка продажу из исследований в области рака молочной железы, Безопасный найдены два класса селективных модуляторов Ahr:. альтернативные_следствия замещенна (1,3,6,8- и 2, 4,6,8-) алкильными полихлорированные дибензофураны (ПХДФ) и замещенные diindolylmethanes (DIMS), по сравнению с ТХДД, эти соединения являются относительно нетоксичен и ингибируют ER-положительный и ER-отрицательный рост опухоли молочных желез, но не вызывать AhR- опосредованные токсические реакции, вызванные ТХДД [19].
DIM представляет собой новый класс относительно нетоксичных противоопухолевых AHR модуляторов, которые имеют фитохимическому происхождения. По сравнению с TCDD, DIM является слабым агонистом для индукции арил-экспрессии гена CYP1A1 [20] и деятельности [21], и это показывает способности конкурировать за связывание с TCDD арил-[22].
Чтобы проверить погоду сигнальный путь AhR может быть activited тусклым в желудочном раковых клеток, мы лечили клетку рака желудка линии SGC7901 с DIM. Результаты показали, что AhR белка в лизате клеток постепенно снижалась (рис 4C и D), подобные явления были зарегистрированы нашими лабораториями и несколькими другими группами [9, 23], понижающее регулирование арил-следующем связывание лиганда рассматривается как imprtant шаг сигнального пути AhR [23]. CYP1A1, классический ген-мишень из арил-углеводорода, был выбран в качестве индикатора активации пути сигнала AhR. Базовые уровни экспрессии CYP1A1 не наблюдались в клетках SGC7901 в настоящем исследовании. Однако экспрессия CYP1A1 была значительно увеличена в от концентрации и зависимости от времени после обработки DIM, что указывает на активацию арил-. Для подтверждения активации сигнального пути AhR тусклым, мы рассматривали SGC7901 клетки с конкретным антагонист AhR, ресвератрол. Наши результаты показали, что DIM индуцированный выражение CYP1A1 частично отменено ресвератрола в зависимости от концентрации. Неполное реверсирование экспрессии CYP1A1 путем ресвератрол может быть связано с тем, что AhR не является единственным регулятором транскрипции CYP1A1 [24]. Взятые вместе, эти результаты свидетельствуют о том, что DIM может активировать сигнальный путь ПВДП клеток рака желудка.
МТТ показали, что после лечения DIM жизнеспособность SGC7901 клеток было значительно снижено в и концентрация-зависимым от времени образом. В целях дальнейшего уточнения этот эффект кастрированный баран был AhR- зависит, мы рассматривали SGC7901 клетки с тусклым и ресвератрола, мы обнаружили, что ингибирование эффекты DIM на рост SGC7901 клеток частично, но не полностью зарезервирован Reservatrol, предполагая, что DIM ингибирует желудочную рост раковых клеток, частично с помощью AhR пути. Этот результат согласуется с предыдущими исследованиями: Hong, C показало, что DIM ингибирует рост как Ah-отзывчивых и Ай-не-реагирующих клеток рака молочной железы. некоторые из анти-канцерогенные деятельности DIM являются AhR -независимый [25]. Интересно отметить, что наблюдался эффект разворота на пролиферацию клеток после того, как клетки обрабатывали DIM плюс Reservatrol в течение 6 ч или 12 ч, но не более длительные периоды времени (24 ч, 48 ч и 72 ч), это может быть, связана с временем эффективности из Reservatrol.
Там были некоторые исследования о противораковых machanisms тусклой. Чой HJ показали, что DIM индуцированных G1 и G2 /M арест цикла фазы клеток в НТ-29 клеток рака толстой кишки человека [26]. Вивар О.И. и Hong C найдено DIM индуцировал G (1) арест в клетках рака простаты человека [27] и клеток рака молочной железы человека [28]. С другой стороны, некоторые статьи сообщили, что DIM может способствовать апоптоз в раковых клетках сурвивина, УАП и уАПР или NF-kappaB sinaling [29-33].
Для дальнейшего изучения конкретных механизмов ингибирования роста клеток рака желудка с помощью DIM , мы рассматривали SGC7901 клетки с DIM, а затем проверили изменения клеточного цикла и апоптоза клеток при помощи анализа проточной цитометрии. Результаты показали, что с увеличением концентрации DIM, клетки в фазе G1 постепенно увеличивается, клетки в фазе S уменьшились, но клетки в фазе G2 остается неизменным, что свидетельствует о том, что DIM может остановку клеточного цикла в фазе G1. В отличие от TCDD, DIM также индуцированный апоптоз клеток, предполагая, что DIM может подавлять пролиферацию раковых клеток желудка путем индукции апоптоза и арест клеточного цикла, Тем не менее, механизмы, ответственные за эффекты DIM на желудочную раковых клеток цикла и апоптоза по-прежнему необходимы, чтобы быть дальше изучены.
Выводы
в surmary этот отчет показал, что нетоксичный селективный модулятор AhR DIM ингибирует пролиферацию раковых клеток желудка линии человеческого SGC7901 в пробирке путем индукции апоптоза клеток и арестовывать клеточного цикла в фазе G1. Наши результаты свидетельствуют о том, что AhR может быть перспективной мишенью для лечения рака желудка
Notes
Сяо-Fei Инь, Чэнь Цзе также внесли вклад в эту работу
Сокращения
AhR:..
арилуглеводородному рецептор


GAPDH:
глицеральдегид 3-фосфатдегидрогеназы


RT-PCR:
обратной транскрипции -полимеразы цепной реакции


MTT:
Метил тиазолил тетразолиевую


ДМСО:
Диметилсульфоксид


FBS:
эмбриональная бычья сыворотка


ТГЖД:
2,3,7,8-тетрахлородибензо-пара-диоксин


TBST:
Трис-солевой буфер, содержащий 0,05% Tween 20.


Объявления
Подтверждения
Данное исследование было поддержано грантами от Национального фонда естественных наук Китая (No. 30871145 и № 81072048), культивирование проекта Младший Учитель Сунь Ят-сена университета (№ 09ykpy22), гранты для крупных проектов и новых междисциплинарных исследований Сунь Ят-сена университета (No.10ykjc23) при поддержке фундаментальных исследований фондов для Центральные университеты.
авторов оригинальные представленные файлы для изображений изображения Ниже приведены ссылки на авторов оригинальных представленных файлов для изображений. 'Исходный файл для Рисунок 1 13046_2012_571_MOESM2_ESM.tiff Авторского 13046_2012_571_MOESM1_ESM.tiff авторов исходного файла для "исходного файла для фигурного 3 13046_2012_571_MOESM4_ESM.tiff Авторского Рисунок 2 13046_2012_571_MOESM3_ESM.tiff Авторского исходного файла для фигурного 4 исходного файла 13046_2012_571_MOESM5_ESM.tiff Авторского на рисунке 5 конкурирующие интересы
авторы заявляют, что у них нет никаких конкурирующих интересов взносы
Авторского
Инь и Чэнь XF J способствовали в равной степени к этой работе. Инь и Чэнь XF J проводил исследования и написал статью; Мао W организовал цифры и анализ данных; Ван YH помогал с клеточной культуре. Чен MH разработаны исследования и контролировал процесс написания и организации. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Роман онколитический вирусная терапия и визуализация техника для рака желудка с использованием генной инжен…
• FOLFIRI в качестве второй линии терапии у пациентов с доцетакселом предварительно обработанных рака желудка: ис…