Korelácia hK6 prejavu sa recidívy a prognózou u pokročilého karcinómu žalúdka

Korelácia hK6 prejavu sa recidívy a prognózou u pokročilého karcinómu žalúdka
abstraktné
pozadia
Human kallikreinového génom 6 (KLK6) je členom génovej rodiny ľudského kallikreinového (Kallikreins, KLKs). Ľudský peptidázy kalikreín súvisiace 6 (hK6) je podobná trypsínu serínová proteáza kódované KLK6, bolo popísané, že vysoko exprimovaný v niekoľkých typov rakoviny, vrátane rakoviny žalúdka. V tejto štúdii sme skúmali korelácia hK6 výrazu s klinicko-charakteristikami, recidívy a prognózou u pokročilého karcinómu žalúdka po kuratívnu resekcii.
Metódy
Retrospektívne sme analyzovali klinické údaje o 129 prípadov pokročilého karcinómu žalúdka po kuratívny gastrektómii , Expresie hK6 v pokročilých žalúdočné rakovinové tkanive v porovnaní so susednými nerakovinové tkanivá boli skúmané, a bol vyhodnotený vzťah medzi expresiou hK6 a klinicko vlastnosti. V ďalšej, títo pacienti boli sledovaní skúmať vzťah medzi hK6 prejavu a doby prežitia.
Výsledky
pozitívnym záchytu hK6 expresie bola signifikantne vyššia u pokročilého karcinómu žalúdka tkanivo, než v priľahlej nenádorové a žalúdočného vredu tkaniva (36,5%, 33,3%, v uvedenom poradí, P 0,001). Tam bol úzky vzťah medzi hK6 prejavu a TNM štádiu (p = 0,005), vaskulárne invázie (p = 0,037) a perineurální invázie (p = 0,035). Okrem toho, pacienti s pozitívnym hK6 ukázali výrazne vyšší opakovanie a horšiu prognózu ako tí s hK6 negatívne. Multivariačný analýza ukázala, že hK6 výraz bol významným nezávislým faktorom recidívy a celkové prežitie.
Záver
hK6 je nadmerne vystavený v pokročilom karcinómu žalúdka tkanív. Jeho klinické využitie môžu byť použité ako nepriaznivé ukazovatele v predikcii recidíve nádoru a prognózu pokročilým karcinómom žalúdka po operácii. Táto štúdia tiež naznačuje, že hK6 by mohli byť potenciálnym terapeutickým cieľom pre rakovinu žalúdka
Virtuálne diapozitívy
Virtuálne snímka (y) pre tento článok možno nájsť tu :. Http: //www. Diagnosticpathol nika. diagnomx. eu /vs /8558403578787206
kľúčové slová
Žalúdočné novotvary Human kalikreín súvisiace peptidázy 6 nádorových markerov (hK6) recidíva Úvod
rakovina žalúdka je jedným najčastejší malígny a druhou najčastejšou príčinou úmrtí u všetkých typov rakoviny v klinickej [1], a chirurgické resekcii zostáva v súčasnosti jedinou liečbu kuratívnu. Aj keď operáciu, pooperačné chemo-rádioterapie imunoterapia, cielená liečba tie multidisciplinárnej spolupráce režim zlepšili mieru prežitia u pacientov s karcinómom žalúdka. Stále pooperačné recidívy rakoviny žalúdka je vysoká, najmä pokročilá rakovina žalúdka (Advanced rakovina žalúdka označuje to nádor napáda do muscularis propria alebo cez muscularis až blany a extra serózna blany). A včasná diagnostika je obtiažna, špecifické nádorové markery v detekcii recidívy nádoru doteraz nebol objavený.
KLKs sa skladajú z 15 homológnych génov, ktoré kódovanie vylučovaných serínovej proteázy, lokalizované v tandeme na chromozóme 19q13.4. Tieto KLKs majú podobné genómovej organizácie, a vykazujú významnú homológie ako na nukleotidu, ako aj na úrovni proteínov. Rovnaký gén rodiny je vyjadrená v rôznych tkanivách, a niekoľko génov sú obvykle vyjadrené v tej istej tkaniva, [2].
KLK6 je členom KLKs, ktorá kóduje ľudský kalikreín súvisiace peptidázy 6 (hK6). To je serínová proteáza skladá z 223 aminokyselín s trypsínu podobné aktivity. hK6 bol klonovaný nezávisle tromi skupinami, pomocou techniky diferenciálnej zobrazenie z primárnych a metastatických bunkových líniách karcinómu prsníka. Anisowicz et al. [3] prvýkrát izolovaný v plnej dĺžky cDNA KLK6, pomenovaný proteázy M, ktorý je silne exprimovaný na úrovni mRNA v niektorých primárnych bunkových línií karcinómu prsníka a karcinómu vaječníkov v tkanivách a bunkových líniách. Yamashiro et al. [4] klonovaný rovnaký gén s názvom neurosin, z knižnice cDNA pripravenej z ľudskej bunkovej línie karcinómu hrubého čreva (Colo 201). Napokon, malý a kol. [5] naklonovali cDNA totožný s názvom Zyme, z mozgového tkaniva pacienta s Alzheimerovou chorobou, ktoré hrajú dôležitú úlohu v rozvoji a progresii Alzheimerovej choroby. Štúdia zistila, že hK6 bol vysoko exprimovaný u karcinómu žalúdka a uviedla zlú prognózu [6].
Podľa našich najlepších vedomostí, niekoľko štúdií boli skúmané o klinický význam hK6 expresie v pokročilým karcinómom žalúdka s recidívou a prognózou. V tejto štúdii sme hodnotili expresiu hK6 v chirurgických vzoriek pokročilých žalúdočné rakovinové tkanive, spárované priľahlé nerakovinové tkanivá a žalúdočného vredu tkaniva pomocou imunohistochémia HRP, a analyzoval ich korelácia s klinicko-patologické charakteristiky a pacienti prežitie objasniť význam hK6 v pokročilej rakovina žalúdka po kuratívnu operácii.
materiály a metódy
Pacienti a odber vzoriek tkaniva
celkom 129 vzoriek boli získané od pacientov od januára 2007 do novembra 2011, ktorí podstúpili kuratívne operáciu pre pokročilú rakovinou žalúdka v Huizhou Municipal Ústredná nemocnica Kuang-tung. Vzorky boli resekcia potvrdené, že primárna rakovina žalúdka klinickej patológie, u žiadneho z pacientov dostalo akúkoľvek chemoterapia, rádioterapia a ďalšie adjuvantnej terapie pred operáciou. 52 blokov od priľahlých noncancerous žalúdočných tkanivách (aspoň 5 cm od okraja rakoviny) boli získané od pacientov. Okrem toho sa 36 vzorky získanej od pacientov, ktorí podstúpili chirurgický zákrok a bolo potvrdené, že žalúdočný vred použité ako kontroly v rovnakom období.
Pacienti , klinicko-patologické charakteristiky, ako je pohlavie a vek, umiestnenie nádoru, veľkosti, diferenciácie T etapa, lymfatických uzlín, TNM štádium a či recidívy bola spätne preskúmaná. Priemerný vek bol 60 rokov (rozsah: 28 ~ 80 rokov) s 56 žien a 73 mužov. Všetci pacienti boli inscenované založené na TNM klasifikácii spoločného výboru amerického rakoviny (AJCC, 7. kritérií vydanie, 2010) [7] .Tumor umiestnenie v žalúdku fundusu /kardio bolo 21 prípadov, žalúdočné telo 32 prípadov, žalúdočné dutine 76 puzdra , Veľkosť nádoru bola väčšia ako 5 cm v 70 prípadoch, a menej ako 5 cm v 59 prípadoch, 16 prípadov klasifikovaný ako dobre alebo stredne diferencovaný (vrátane rúrkových a papilárnej adenokarcinóm), 113 prípady, ako zle diferencovaný (zle diferencované adenokarcinóm a iné bunkové typy takýchto ako mucinózního adenokarcinóm a karcinóm pečatný prsteň buniek a tak ďalej), 19 prípadov bolo u T2, 55 prípadov bolo u T3 a T4 resp. N0 /N1 bola nájdená v 49 prípadoch, N2 /N3 v 80 prípadoch, 43 prípadov with /II fázy, 86 prípadov s III /IV fáze, písomný informovaný súhlas bol získaný od všetkých pacientov alebo ich rodín. Štúdia bola schválená Ústavom , s etickú komisiu Huizhou Mestskej Centrálne nemocnice. Všetky vzorky boli fixované v 10% neutralizované maldehyde, vložené do parafínu, rezané do 3 um silné oddiely, a namontované na sklíčka pre analýzu imunohistochemického.
Imunohistochémia
Imunohistochémia bola vykonaná s použitím chrenovej peroxidáze dvojstupňový spôsob , ktorý zabraňuje interferencii endogénneho biotínu, čím sa znižuje nešpecifickú falošne pozitívne farbenie pozadia. Imunohistochémia bola vykonaná v ôsmich krokoch podľa návodu: 1, parafín rezy boli zbavené parafínu v xyléne, rehydratované pomocou gradientu etanol. 2. Antigen vyhľadávania bola vykonaná v Tris-EDTA pufra (pH 9,0) s tlakovom hrnci. 3, blok endogénne peroxidáza 3% peroxidu vodíka. 4, potom inkubované s očisteným králičie polyklonálne protilátky (AP6325a, Abgent, San Diego, USA), sprístupnenie antigénu a riedení boli stanovené predbežnými pokusmi. 5, Detekcia hK6 imunokomplexu bola inkubovaná s PV9000 kity (Zlatý most Biotechnology Co, Ltd, Peking, Čína). 6, bolo dosiahnuté farbené Diaminobenzidine roztokom substrátu chromogénu (Goldenbridge Biotechnology Co, Ltd), až do optimálnej farbenie. 7, Rezy boli kontrastne zafarbené hematoxylínom, diferencované, sa vrátil modrej. 8. A konečne, dehydratovaná pomocou gradientu alkoholom, zrušené v xyléne, neutrálne guma namontovať. Potom pozorovali pod optickým mikroskopom.
Imunohistochemické farbenie skóre
Všetky preparáty boli hodnotené oddelene od dvoch vedúcich patológov bez predchádzajúcich znalostí klinicko-parametrov, do konečného výsledku pre ich priemer. Pre vyhodnotenie hK6 imunohistochemického farbenia, percento pozitívnych buniek bola kvantitatívne 10 pole vnútri nádoru boli vybrané náhodne, expresie v 1000 nádorových buniek (100 buniek na poli) bola hodnotená s použitím vysoko výkonnou magnifcation (400 ×) a priemer bola vyhodnotená kvantitatívne a zaznamenal ako: 0 pre percento pozitívnych buniek £ 10%, 1 pre farbenie 11 ~ 25%, 2 pre farbenie 26 ~ 50%, a 3 na farbenie 51 ~ 75%, 4 na farbenie > 75% buniek skúmaných [6], jej intenzita bola resp odstupňovaná semikvantitatívne takto: 0 žiadny signál, jeden slabý, 2 stredne a 3 silnú súlade s predchádzajúcimi literatúry [8] celkové farbenie skóre 4 alebo viac bola hodnotená ako imunohistochemické POZITÍVNE.
Follow-up
Všetci títo pacienti dostávali fluóruracil adjuvantnej chemoterapie po operácii. Ako pravidelný nadväznosti všetci pacienti boli kontrolované každé 3 mesiace počas prvých 2 rokov a každých 6 mesiacov, počas tretieho až piateho ročníka, neskôr raz ročne. Lekárske work-up sa skladala z histórie a fyzikálneho vyšetrenia, hematologických a biochemických testov, vrátane sérového CEA, CA19-9 a CA72-4 a zobrazovania vrátane röntgenu hrudníka, bárnatý jedlo, brušné ultrasonografia (USA), počítačová tomografia (CT), a endoskopie v závislosti na klinickej situácii. Doba sledovania mal v deň operácie ako východiskový bod, doba recidívy a úmrtia boli zaznamenané, sú tieto dva body boli hodnotené na prognostický analýzu. V prípade, že následné činnosti boli neúplné, pacienti alebo ich rodiny boli kontaktovaní telefonicky, uzávierka pre sledovanie bola 05 2012, priemerné sledovanie po operácii bola 25 mesiacov (rozmedzie 4-64 mesiacov).
štatistická analýza
štatistická analýza bola vykonaná s použitím SPSS 13.0, vzťahy medzi hK6 prejavu a pacientov klinicko vlastnosti boli analyzované s Chi-kvadrát (χ 2) a Fisherov presný test. Pre analýzu prežitie boli skúmané dva koncové body: recidívy-free survival (RFS) a celkové prežívanie (OS), resp. RFS je definovaný ako časový interval medzi dátumom chirurgie a odo dňa prvého detekovaného recidívy alebo metastáz, a OS je definovaná ako časový interval medzi dátumom chirurgie a dátumom úmrtia alebo k dátumu posledného sledovanie pre tých, ktorý bol živý na konci štúdie. Model Kaplan-Meier bolo vyšetrených prežitie medzi pacientmi pozitívnym a negatívnym hK6 výrazu. Význam prípadný rozdiel v krivkách prežitia bola stanovená pomocou log-rank testu. Premenné dosiahnuť úroveň, význam v jednorozmerné analýze boli následne zavedené v doprednom proporcionálny analýzy rizika LR (Cox model) na identifikáciu týchto premenných nezávisle spojené s prežitie, p hodnota 0,05 (alebo menej) bola považovaná za štatisticky významnú.
výsledky
hK6 expresie v pokročilej rakoviny žalúdka tkanív
rôzne proteíny boli exprimované v inom mieste v bunke, ako je napríklad cytoplazmy, membrány, nukleárna [9, 10] .hK6 pozitívne farbenie bolo exprimované hlavne v cytoplazme karcinómu žalúdka bunky ako hnedé alebo tmavo hnedé granule (obrázok 1) bol tiež pozorovaný v priľahlých nenádorové a žalúdočný vred epitelových buniek pomocou imunohistochémia. Pozitívne Miera KLK6 expresie v karcinómu žalúdka tkanivách bola 77,5% (100/129), výrazne vyššia ako v susedných nenádorové tkaniva (36,5%) a vredy (33,3%) tkaniva (p-0,001, tabuľka 1). Obrázok 1 Imunohistochemické farbenie hK6 v pokročilom karcinómu žalúdka (A, B) a priľahlých nenádorové (C, D) tkanív. HK6 pozitívne vyjadrenia; B hK6 negatívne vyjadrenia; C hK6 pozitívne vyjadrenia; D hK6 negatívne vyjadrenia.
Tabuľka 1 Expresia hK6 v priľahlej nenádorové, žalúdočný vred a pokročilé rakoviny žalúdka tkanív
Group
prípadoch
pozitívny
Pozitívne rate

χ2-value

P-value

GCT
129
100
77.5%
39.201
<0.001a
ANT
52
19
36.5%
0.096
0.757b
GUT
36
12
33.3%
Skratka: ANT
, Priľahlé noncancerous tkaniva; GUT
, žalúdočný vred tkaniva; GCT rakovina žalúdka, keď GCT v porovnaní s ANT a GUT, P < 0,001, ANT v porovnaní s GUT, P = 0,757.
HK6 expresie a klinicko-patologické charakteristiky
koreláciu medzi úrovňou expresie hK6 a klinicko-charakteristík, ako je zhrnuté v tabuľke 2, hK6 expresia významne koreluje s TNM fázu (p = 0,005) , vaskulárne invázie (P = 0,037) a perineurální invázie (P = 0,035). hK6 pozitívne nádory častejšie musel neskôr zvýšený výskyt cievnych a perineurální invázie, na druhej strane, žiadny štatisticky významný rozdiel bol pozorovaný medzi jeho expresie a pohlavia, veku, tumor miesta, veľkosť, diferenciácie, T štádiu, lymfatické žily metastáz alebo marže (P > 0,05) .Table 2 vzťah medzi KLK6 prejavu, recidívy a klinicko-charakteristiky
Charakteristika
Puzdrá
Pozitívne
Pozitívne sadzba

χ2-hodnota
P-hodnoty
Pohlavie
1.214
0,271
Žena
56
46
82,1%
Male
73
54
74,0%
Age
0,067 0,796
Hotel < 60 rokov
65
51
78,5%
≥ 60 rokov
64
49
76,6%
nádoru mieste
3,806 0,149
fundusu /kardio
21
19
90,5%
telo
32
26
81,3%
dutine pyloru
76
55
72,4%
veľkosť nádoru
0,540 0,462
Hotel < 5 cm
59
44
74,6%
≥5 cm
70
56
80,0%
diferenciácie
0,004 0,951
no /stredne diferencovaný 16
16
13
81,3%
zle diferencované
113
87
77,0%
T fáze
1.486
0,476
T2
19
13
68,4%
T3
55 45
81,8%
T4
55
42
76,4%
lymfatických uzlín
1,682 0,195
N0 /N1
49
35
71,4%
N2 /N3
80
65
81,3 %
vaskulárne invázie
4.370
0,037
neprítomný
81
58
71,6%
Prezentujte
48
42
87,5%
perineurální invázie
4.439
0,035
neprítomný
76
54
71,1%
Prezentujte
53
46
86,8%
hraničnou hodnotou
0,211 0,646
Absent
110
84
76,4%
Prezentujte
19
16
84,2%
TNM štádium
8,029
0,005
I + II
43
27
62,8%
III + IV
86
73
84,9%
hK6 výraz asociácie s nádorom recidívy a zlé celkové prežitie
Vzhľadom k tomu, follow-up skončil, 68 (52,7%) pacientov zomrelo celkom 61 pacientov zomrelo v dôsledku progresie nádoru a 7 z iných príčin. Vo všetkých, tam bolo 69 (53,5%) pacientov došlo k recidíve nádoru, 31 z nich vyvinutý ako loco-regionálnej recidívy, 19 as vzdialených metastáz (11 v pečeni, 3 v pľúcach, a 5 v kosti), 14 ako peritoneálnej recidívy a 5 ako pozostatok; Všetci ale osem pacientov s recidívy zomrelo od neho.
Kaplan-Meierove krivky prežitia pre indikované pacientov s pozitívnym výrazom hK6 boli viac pravdepodobné, že obaja kratšie RFS (p = 0,002, obrázok 2A) v porovnaní s pacientmi s negatívnym hK6 výrazu. Jednorozmerné analýzy expresie vzhľadom na RFS, pomocou Cox proporcionálne nebezpečenstvo regresného modelu ukázala, že hK6 výraz, TNM štádium, veľkosť tumoru, T pódium, lymfatické žily, maržu a ovplyvňujúce faktory RFS, kedy boli skúmané hK6 výraz spolu s ďalšími faktormi v viacrozmerné modelu, TNM štádiu, hK6 prejavu, veľkosti nádoru, marže boli nezávislé prediktory recidívy (tabuľka 3), čo ukazuje hK6 pozitívnych pacientov sú dvakrát väčšia pravdepodobnosť, že opakovanie než tie hK6 negatívne. Obrázok 2 prežitie Kaplan-Meier krivky ukazuje pravdepodobnosť, že bez opakovania (A) a celkové prežívanie (B) u pacientov s hK6-negatívne a hK6-pozitívne expresie. Skratky :. 95% interval spoľahlivosti 95% interval spoľahlivosti, pomer rizika HR, OS celkové prežívanie, RFS recidíva prežitie bez
Tabuľka 3 Jednorozmerná a viacrozmerné analýza hK6 a ďalších klinicko-charakteristiky s ohľadom na RFS liečbu pokročilého karcinómu žalúdka

Jednorozmerná
Multivariate
Variable
HR
95% CI
P
HR

95% CI
P
Pohlavie F /M
1.05
0,65 -1 0,69
0,86 -
-
-
Age < 60 /yr ≥60
1,30
0.81- 2.08
0,29 -
- -
Tumor site - -
0,58
- - -
telo /fundus
0,68
0,31-1,49
0,33 -
- -
dutine /fundu, telo
0,88
0,45 -1,71
0,70 -
- -
veľkosť nádoru < 5 /≥5 cm
2.05
1.25 - 3.37
0,005
1,80
7.1.a-4.3.
0,027
stupeň No /Zle
0,88
0.40 -1.93
0,75 -
- -
T etapa - -
0,10 -
- -
T3 /T2
2,21
0,92-5,30
0,077 - -
0,58
T4 /T2, T3
2,60
1,08 -6,26
0,032
- -
0,75
N etapa N0,N1/N2,N3
2.28
1.34-3.87
0.002
–
–
0.83
Vascular−/+
0.91
0.49-1.70
0.77
–
–
–
Perineural−/+
1.27
0.71-2.25
0.42
–
–
–
Margin−/+
2.42
1.41-4.15
0.001
2.49
1.44– 4,31
0,001
TNM štádium I, II /III, IV
3.10
1,69-5,68
0,000
2,25
1,18 -4,30
0,014
hK6- /+
2,77
1,41-5,47
0,003
2,09
1,04 -4.
230.039
Podľa analýzy prežívania, analýza prežitie Kaplan-Meier ukázala, že pacienti s pozitívnym hK6 výraz majú nižšiu OS (P = 0,002, 2B), jednorozmerné analýza ukázala, že pozitívny hK6 prejavu, TNM štádiu, veľkosti nádoru, lymfatické uzliny, T fázu a marže sú dôležité faktorov ovplyvňujúcich ceny operačného systému, kedy boli zapojené tieto faktory v Multivariate analýzy (pozri tabuľku 4), TNM štádium a hK6 boli nezávislé prognostické faktory OS.Table 4 jednorozmerné a viacrozmerné analýzy prognostických faktorov OS pokročilou rakovinou žalúdka
jednorozmerných
multivariačných

Variabilný
HR
95% CI
P
HR
95% CI
P
Pohlavie F /M
1,35
0,80-2,25
0,26 -
- -
Age < 60 /yr ≥60
1,59
0,95-2,67
0,08 -
- -
Tumor site - -
0,17
- - -
telo /fundus
0,47
0,20-1,09
0,078 -
- -
dutine /fundu, telo
0,57
0,29 -1,13
0,11 -
- -
veľkosť nádoru < 5 /≥5 cm
1.72
1,02-2,90
0,043 - -
0,57
stupeň No /Zle
0,57
0,26-1,27
0,17 -
- -
T etapa - -
0,004 - -
0,019
T3 /T2
1,60
0,66-3,89
0,30
0,83
0,33-2,12
0,70
T4 /T2, T3
3,36
1,38-8,15
0,007
1,86
0,73-4,70
0,19
N etapa N0,N1/N2,N3
2.87
1.57–5.21
0.001
–
–
0.12
Vascular−/+
1.23
0.65-2.34
0.52
–
–
–
Perineural−/+
1.32
0.71-2.43
0.38
–
–
–
Margin−/+
1.29
0.72-2.31
0.40
–
–
–
TNM etapa I, II /III, IV
4.05
2.04- 8.03
<0.001
2.99
1.45–6.16
0.003
hK6−/+
2.88
1.40-5.92
0.004
2.66
1.25–5.63
0.011
Multivariačný analýza ukázala, že expresia hK6 bol jeden z nezávislých prognostických faktorov celkového prežitia pre pacientov s rakovinou žalúdka vedľa TNM fáze (p = 0,011).
Diskusia
štúdie zistili, že hK6 bol secernovaný do extracelulárnej matrix a podieľajú na degradácii matrix proteínov, vrátane fibronektínu, laminínu, vitronektinu, kolagénu a vyvolané E-cadherin ektodomény ubúdanie, znižuje adhéziu bunka-bunka [11, 12] a viedol k keratinocytov na podporu nádorového bujnenia, migrácie, invázie a metastáz [13 ]. Je známe, že ľudský hK6 sa sú zapojené do niekoľkých malignít Niekoľko vedci hlásili, že hK6 je nadmerne exprimovaný u rakoviny vaječníkov [14], maternicové serózna papilárna rakoviny [15], kolorektálneho karcinómu [16], rakovina žalúdka [6] a rakoviny pažeráka [17], ale underexpressed v slinných žliaz nádorov [18] a karcinómu obličky [19], ktorá závisí od typu nádoru a tkanivá mikroprostredia [20]. hK6 podporuje rast väčšiny nádorov. Avšak, keď bol hK6 nadmerne exprimovaný u buniek rakoviny prsníka MDA-MB-231 bunky boli za následok označené obrátenie ich malígneho fenotypu, prejavujúce sa nižšej rýchlosti proliferácie a hustotu nasýtenia, výraznú inhibíciu adhéziu nezávislého rastu, zníženú pohyblivosť buniek a schopnosť tvoriť nádory. Mechanizmus môže byť to, že hK6 hrajú ochrannú úlohu proti progresii nádoru sprostredkovaného inhibíciou epiteliálne-to-mesenchymálního prechodu [21].
K dnešnému dňu bolo preukázané, že KLK6 je up-regulovaná v takých gastrointestinálnych malignít pankreasu a rakoviny hrubého čreva [22]. Ogawa et al. [16] opisuje, že expresia mRNA KLK6 bola významne vyššia v rakovinové než v zodpovedajúcej nenádorové tkaniva hrubého čreva. Kim et al. [23] skúmali KLK6 mRNA a jeho zodpovedajúcich hladín proteínov pomocou RT-PCR a ELISA, zistili, že KLK6 mRNA bola up-regulovaná asi 8-krát v porovnaní s nontumor oblasťou, a sérové ​​hladiny hK6 od pacientov s karcinómom žalúdka bola 1,7-krát pre zdravú jednotlivcov. Pri zneškodňovaní KLK6 s malým RNA interferencia (siRNA), bunkovej invázie sa znížil o 45%. Tiež zistili, že KLK6 degradujú proteíny extracelulárnej matrix na nádorové invazívnosti a metastázovaniu. Zvýšená expresia exogénne KLK6 viedlo k zníženej aktivite promótorom E-cadherinu. Okrem toho, naša štúdia ukázala, že pozitívne miera hK6 expresie u pokročilého karcinómu žalúdka tkanivo bola významne vyššia ako v priľahlej nenádorové a žalúdočný vred tkaniva. Avšak bolo zistené, že žiadny rozdiel medzi susednými nerakovinové tkanivá a žalúdočný vred tkaniva. Tieto zistenia naznačujú, že expresia hK6 môže hrať dôležitú úlohu v rozvoji rakoviny žalúdka.
Ogawa et al. [16] uviedli, že vysoké KLK6 mRNA hladiny expresie u kolorektálneho karcinómu tkanivách boli korelované s serózna inváziou, pečeňových metastáz, Advanced vojvodovho fáze však obmedzené správy navrhli vzťah medzi KLK6 prejavu a klinicko-charakteristikami. Nagahara a kol. [6] uvádzajú, že nadmerná expresia KLK6 významne spojená s TNM štádiu, lymfatické invázie u pacientov s karcinómom žalúdka. V tejto štúdii, pre fázu TNM, pozitívna miera hK6 expresie bola významne vyššia v neskoršej fáze (stupeň III a IV fázy: 84,9%) než v počiatočnej fáze (fáza I a II, jeleňa: 62,8%). Rozdiel bol štatisticky významný, čo ukazuje, že hK6 pozitívny expresie bola silne koreluje s TNM štádiu pokročilého karcinómu žalúdka. Naša štúdia tiež ukázala, že existuje vzťah medzi hK6 pozitívny expresiou s vaskulárne invázie, čo bolo v súlade s [6] správu Nagahara je. Navyše Bolo oznámené, že hK6 pozitívny expresie bola spojená s perineurální inváziou, ktoré neboli študované v [6] správy Nagahara, ale to vyžaduje ďalšiu štúdiu, ktorej cieľom overiť. Zistili sme žiadny vzťah medzi hk6 prejavu v pokročilou rakovinou žalúdka a pohlavie pacienta, veku, nádoru mieste, veľkosti, diferenciácie T fáze, lymfatické metastázy Lode, ktorý bol v súlade s predchádzajúcimi výsledkami [6].
Dostatok dôkazov preukázal, že niekoľko členov KLKs sú potenciálne rakovinou markery [24]. Najviac široko známe a používané KLKs je KLK3. KLK3 gén kóduje prostatický špecifický antigén (HK3), bol schválený FDA ako špecifický marker karcinómu prostaty, ktorý je široko používaný pre screening, diagnostiku, stanovenie účinnosti a hodnotenie prognózy rakoviny prostaty [25]. KLK2 proteín (VO2), je tiež považovaný za sekundárne marker rakoviny prostaty. Nedávne správy naznačujú, že hK6 vysoká expresia u rakoviny vaječníkov [26], rakoviny hrubého čreva [16, 27], rakoviny pankreasu [28], non-malobunkovým karcinómom pľúc [29] a intrakraniálne nádory [30] môže byť nezávislý prognostický faktor to naznačuje, že hK6 môže byť prognostický marker pre tieto nádory.
štúdie naznačujú, že vysoká KLK6 expresie bola úzko spojená s kratším celkovým a opakovanie prežitie bez rakoviny vaječníkov [31] a pacientov s rakovinou hrubého čreva [32]. Rovnaký výsledok bol potvrdený v pokročilom karcinómu žalúdka v našej štúdii. Všetky z nich vyplýva, že KLK6 môže byť potenciálny biomarker pre predvídanie recidíve nádoru a terapeutický cieľ pre nich. Mnoho štúdií ukázalo, že súhlasne TNM fáza bola najspoľahlivejšie prognostickým indikátorom gastrointestinálnych nádorov, ako je rakovina žalúdka, gastrointestinálne lymfómov pacientov [9, 10, 33, 34], zatiaľ čo ostatné vlastnosti, neexistovala dohoda. Jin et al. [33] zistili, Ezrin nadmerná expresia výrazne vyššia v lymfatických uzlín, Demirag et al. [10] preukázali PKP3 expresiu a zlá prognóza zdalo, že koreluje s počtom lymfatických uzlín. Kým v tejto štúdii sme nezistili žiadnu súvislosť medzi lymfatických uzlín a prognózou viacrozmerné analýzy.
S rozvojom molekulárnej a proteomiky v karcinómu žalúdka, rad proteínov boli potenciálne markery pre včasnú diagnózu, prognózu a terapeutické ciele karcinómu žalúdka, medzi nimi c-Met [9], PKP2 a PKP3 [10], Ezrin [33], sú známe ones.Moreover iné molekulárnej biomarkery sú v súčasnej dobe v štúdiu.
niekoľkých predchádzajúcich štúdií skúmala patologickým význam hK6 prejavu v pokročilých žalúdočné rakovinové tkanive. Tak, v tejto štúdii sme skúmali koreláciu expresie hK6 s recidívy a prognózou u pokročilého karcinómu žalúdka. Tieto výsledky ukazujú, že expresia hK6 významne spojená s TNM fáze, vaskulárne invázie, perineurální invázie a zlou prognózou u pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka. Navyše sme zistili, že pacienti s pozitívnym hK6 prejavu boli väčšia pravdepodobnosť, že opakovanie a nižšie RFS a ceny OS v porovnaní s tými, s negatívnym hK6 výrazom. Multivariačný analýza ukázala, že expresia hK6 bol významný nezávislý prognostický faktor RFS a OS u pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka. Naše výsledky potvrdzujú, že hK6 by mohli byť použité ako potenciálny biomarker a terapeutický cieľ pre rakovinu žalúdka. Okrem toho, pozitívna expresia hK6 vo vyspelých rakovinou žalúdka tkanív môže poskytnúť cenné informácie pre pochopenie biologickej správanie rakoviny žalúdka.
Na záver, naše štúdia ukázala, že hK6 výraz v pokročilým karcinómom žalúdka významne koreluje s TNM štádiu, vaskulárnej invázie a perineurální invázie rovnako ako RFS a OS sadzby. Jedná sa o vzácne správa k vyhodnoteniu hK6 expresie a jej koreláciu s recidívy a zlou prognózou u pokročilého karcinómu žalúdka. Ďalšie štúdie bude potrebné preskúmať možnosti, či hK6 by mohli byť použité ako cenný biomarkeru v predikcii recidíve nádoru a terapeutický cieľ pre rakovinu žalúdka pomocou vzorky séra od pacientov. A my tiež posúdi KLK6 na úrovni mRNA z tkanív vzoriek ďalšiemu kroku.
Vyhlásenie
Poďakovanie
Autori by radi, Huizhou najprv poďakoval Wenli Zhao Ming Zhong, Yingxia Liu (Department of Pathology nemocnice, provincia Guangdong) a Qingxi Yang, Tongtong Wu (Department of Pathology, Huizhou Mestské centrálne nemocnice, provincia Guangdong) o pomoc s optickým mikroskopické pozorovania a tkanivové časti.
Financovanie
štúdia bola financovaná Natural Science Foundation provincia Guangdong, Čína, (GDNSF, no.1051600101000001).
Autori ďalej len "pôvodné predložený súbory obrazov
Nižšie sú uvedené odkazy na autorov pôvodnej predložených súborov pre obrázky. "Pôvodný súbor pre Obrázok 1 13000_2012_773_MOESM2_ESM.tiff autorského 13000_2012_773_MOESM1_ESM.pdf autorov pôvodného súboru na obrázku 2 protichodnými záujmami
Autori vyhlásili, že nemajú konkurenčný záujem. Príspevky
autorov
XL a XY vykonávané patologický vyšetrenia, HX a JL analyzied dáta, YH navrhol rukopis. Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Promotér metylácie a expresie génu TIMP3 v žalúdku cancer
• Žalúdočným účinok rohovník (rohovník obyčajný L.) proti etanolom vyvolaného oxidačného stresu v rat