Correlazione di espressione HK6 con recidiva del tumore e la prognosi in avanzato cancer

gastrica Correlazione di espressione HK6 con recidiva del tumore e la prognosi nel cancro gastrico avanzato
Abstract
sfondo
gene callicreina umana 6 (KLK6) è un membro della umana callicreina gene famiglia (Kallikreins, KLKs). Umano peptidasi kallikrein legati 6 (HK6) è una serina-proteasi tripsina-come codificata dal KLK6, è stato segnalato per essere altamente espresso in diversi tipi di cancro tra cui il cancro gastrico. In questo studio, abbiamo studiato la correlazione di espressione HK6 con caratteristiche clinico-patologici, recidiva del tumore e la prognosi nel carcinoma gastrico avanzato dopo resezione curativa.
Metodi
Abbiamo analizzato retrospettivamente i dati clinici di 129 casi avanzati cancro gastrico dopo gastrectomia curativa . L'espressione di HK6 in avanzati tessuti di cancro gastrico rispetto ai tessuti non tumorali adiacenti sono stati esaminati, e la relazione tra espressione HK6 e le caratteristiche clinico-patologici è stata valutata. In aggiunta, questi pazienti sono stati seguiti fino a indagare il rapporto tra l'espressione HK6 e il tempo di sopravvivenza.
Risultati
Il tasso positivo di espressione HK6 era significativamente maggiore nei avanzato tessuto del cancro gastrico, quello in ulcera gastrica e non cancerosa adiacente tessuti (36,5%, 33,3%, rispettivamente; p < 0,001). C'è stata una stretta relazione tra espressione HK6 e lo stadio TNM (P = 0,005), invasione vascolare (p = 0,037) e l'invasione perineurale (P = 0,035). Inoltre, i pazienti con HK6 positivi hanno mostrato significativamente più alto di recidiva e prognosi peggiore rispetto a quelli con HK6 negativo. L'analisi multivariata ha mostrato che l'espressione HK6 era un fattore indipendente significativo di recidiva del tumore e la sopravvivenza globale.
Conclusione
HK6 è sovraespresso nei tessuti cancro gastrico avanzato. La sua utilità clinica può essere utilizzato come indicatore sfavorevole nel prevedere recidiva e la prognosi per il cancro gastrico avanzato dopo l'operazione. Questo studio suggerisce anche che HK6 potrebbe essere un potenziale target terapeutico per il cancro gastrico
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Parole chiave
neoplasie dello stomaco peptidasi kallikrein relative 6 marcatori tumorali (HK6) ricorrenza Introduzione
cancro gastrico umano è uno dei tumori più comuni e la seconda causa di morte tra tutti i tumori della clinica [1], e la resezione chirurgica rimane attualmente l'unico trattamento con curativa. Anche se la chirurgia, postoperatoria chemio-radioterapia immunoterapia, terapia mirata quelle modalità di collaborazione multidisciplinare hanno migliorato il tasso di sopravvivenza dei pazienti affetti da cancro gastrico. Ancora il tasso di recidiva postoperatoria del cancro gastrico è alto, cancro gastrico in particolare avanzato (carcinoma gastrico avanzato si riferisce a quella del tumore invade la muscolare propria o attraverso i muscolare alla sierosa e sierosa extra). E la diagnosi precoce è difficile, i marcatori tumorali specifici nel rilevamento di recidiva del tumore non è stato ancora scoperto.
I KLKs consistono in 15 geni omologhi che codifica secreto serina proteasi, localizzati in tandem sul cromosoma 19q13.4. I KLKs hanno organizzazioni genomici simili, e mostrano omologia significativa sia a nucleotide e il livello di proteine. Lo stesso gene della famiglia si esprime in diversi tessuti, e più geni sono comunemente espresse nello stesso tessuto [2].
KLK6 è un membro del KLKs, che codifica per l'uomo peptidasi kallikrein relative 6 (HK6). È una proteasi serina costituita da 223 aminoacidi con l'attività tripsina-like. HK6 è stato clonato indipendentemente da tre gruppi, utilizzando una tecnica di visualizzazione differenziale da linee cellulari di tumore mammario primari e metastatici. Anisowicz et al. [3] prima isolato il cDNA full-length di KLK6, chiamato proteasi M, che è fortemente espresso a livello di mRNA in alcune linee primarie di cellule di cancro al seno e nei tessuti di cancro ovarico e linee cellulari. Yamashiro et al. [4] clonato questo stesso gene, denominato neurosin, da una libreria di cDNA preparata da una linea cellulare di cancro colorettale umano (COLO 201). Infine, Little et al. [5] clonato il cDNA identica, denominato zyme, dal tessuto cerebrale di un paziente con malattia di Alzheimer, che svolge un ruolo importante nello sviluppo e nella progressione della malattia di Alzheimer. Studio ha trovato che HK6 è stato altamente espresso nel cancro gastrico ed indicato prognosi infausta [6].
Sulle nostre migliori conoscenze, pochi studi sono stati studiati per quanto riguarda il significato clinico di espressione HK6 nel cancro gastrico avanzato con recidiva e la prognosi. In questo studio, abbiamo valutato l'espressione di HK6 nei campioni chirurgici di tessuti carcinoma gastrico avanzato, abbinato tessuti non tumorali adiacenti e tessuti ulcera gastrica con immunoistochimica HRP, e analizzato le loro correlazioni con caratteristiche clinico-patologiche e pazienti la sopravvivenza di chiarire il significato di HK6 in avanzato cancro gastrico dopo chirurgia curativa.
Materiali e metodi
pazienti e raccolta di campioni di tessuto
Un totale di 129 campioni sono stati ottenuti da pazienti da gennaio 2007 a novembre 2011, sottoposti a chirurgia curativa per il cancro gastrico avanzato a Huizhou comunale Ospedale centrale di GuangDong. campioni di resezione sono stati confermati per essere il cancro gastrico avanzato primaria patologia clinica, nessuno dei pazienti ha ricevuto alcuna chemioterapia, radioterapia e altre terapie adiuvante prima dell'uso. 52 isolati da adiacenti tessuti non tumorali gastriche (almeno 5 cm di distanza dal margine cancro) sono stati ottenuti da pazienti. Inoltre, 36 campioni ottenuti da pazienti che hanno subito un intervento chirurgico e sono stati confermati per essere ulcera gastrica utilizzati come controlli nello stesso periodo.
Pazienti , caratteristiche clinico-patologici come il sesso e l'età, localizzazione del tumore, le dimensioni, la differenziazione, T fase, metastasi linfonodali, stadio TNM e se ricorrenza sono stati retrospettivamente recensione. L'età media era di 60 anni (range: 28 ~ 80 anni) con 56 donne e 73 uomini. Tutti i pazienti sono stati in scena basate sulla classificazione TNM del Joint Committee on Cancer (AJCC, criteri Edizione 7th, 2010) [7] .Tumor posizione nel fondo gastrico /cardias è stato di 21 casi, il corpo gastrico 32 casi, 76 casi gastrico . Le dimensioni del tumore è stata maggiore di 5 cm in 70 casi, e meno di 5 cm in 59 casi, 16 casi classificati come bene o moderatamente differenziato (compresi tubolare e adenocarcinoma papillare), 113 casi come poco differenziate (scarsamente adenocarcinoma differenziata e altre cellule tipi, come adenocarcinoma mucinoso e carcinoma a cellule anello con sigillo e così via), 19 casi erano al T2, 55 casi erano in T3 e T4 rispettivamente. N0 /N1 è stato trovato in 49 casi, N2 /N3 in 80 casi, 43 casi withi /II fase, 86 casi con III /IV stadio, il consenso informato scritto è stato ottenuto da tutti i pazienti o le loro famiglie. Lo studio è stato approvato dall'Istituto , s Comitato Etico di Huizhou Central Hospital comunale. Tutti i campioni sono stati fissati in 10% formaldeide neutralizzata, inclusi in paraffina, tagliati in sezioni di spessore di 3 micron, e montate su vetrini per l'analisi immunoistochimica.
Immunoistochimica
immunoistochimica è stata effettuata utilizzando il metodo in due fasi perossidasi di rafano , che evita l'interferenza di biotina endogena, riducendo così il aspecifica colorazione di fondo falsi-positivi. Immunoistochimica è stata eseguita in otto fasi secondo le istruzioni: 1, Le sezioni in paraffina sono stati deparaffinate in xilene, reidratate attraverso etanolo gradiente. 2, Antigen recupero è stata eseguita in tampone Tris-EDTA (pH 9,0) con una pentola a pressione. 3, Block la perossidasi endogena con perossido di idrogeno al 3%. 4, poi incubate con l'anticorpo policlonale di coniglio purificato (AP6325a, Abgent, San Diego, Stati Uniti d'America), il recupero antigene e la diluizione sono stati determinati da esperimenti preliminari. 5, Rilevamento di HK6 immunocomplesso è stata incubata con i kit PV9000 (Golden Bridge Biotechnology Co, Ltd, Pechino, Cina). 6, macchiato con la soluzione di substrato cromogeno diaminobenzidina (Goldenbridge Biotechnology Co, Ltd) fino a quando la colorazione ottimale è stato raggiunto. 7, le sezioni sono state di contrasto con ematossilina, differenziato, restituito blu. 8, infine, disidratati attraverso l'alcool pendenza, eliminato in xilene, gomma neutra montato. Poi osservato al microscopio ottico.
Immunoistochimica punteggio colorazione
Tutti i vetrini sono stati valutati separatamente da due patologi alti senza alcuna conoscenza preliminare dei parametri clinico-patologici, il punteggio finale per la loro media. Per la valutazione della HK6 colorazione immunoistochimica, la percentuale di cellule positive è stata valutata quantitativamente 10 campi all'interno del tumore sono stati selezionati in modo casuale, espressione in 1000 cellule tumorali (100 cellule per campo) è stata valutata utilizzando un magnifcation alta potenza (400 ×) e una media è stata valutata quantitativamente e segnato come: 0 per la percentuale di cellule positive ≤ 10%, 1 per la colorazione di 11 ~ 25%, 2 per la colorazione del 26 ~ 50%, e 3 per la colorazione del 51 ~ 75%, 4 per la colorazione di > 75% delle cellule esaminate [6], l'intensità di colorazione è stata rispettivamente classificato semiquantitativo come segue: 0 nessun segnale, 1 debole, 2 moderato e 3 forte secondo i precedenti letterature [8], un punteggio totale colorazione di 4 o più è stata classificata come positiva immunoistochimica.
Follow-up
Tutti questi pazienti hanno ricevuto fluorouracile basato chemioterapia adiuvante dopo la chirurgia. Come un regolare follow-up, tutti i pazienti sono stati controllati ogni 3 mesi durante i primi 2 anni e ogni 6 mesi durante il terzo al quinto anno, una volta l'anno successivo. Medical work-up consisteva di storia e l'esame fisico, ematologia e test biochimici, tra cui CEA nel siero, CA19-9 e CA72-4, e di imaging tra cui radiografia del torace, pasto di bario, ecografia addominale (US), la tomografia computerizzata (CT), e l'endoscopia a seconda della situazione clinica. Il follow-up ha avuto il giorno dell'intervento come punto di partenza, il tempo di recidiva del tumore e della morte sono stati registrati, questi due punti sono stati valutati per l'analisi prognostica. Se il follow-up erano incompleti, i pazienti e le loro famiglie sono state contattate telefonicamente, la data di chiusura per il follow-up è stato Maggio 2012, il periodo di follow-up mediano dopo l'intervento è stata di 25 mesi (range 4-64 mesi).
analisi statistica l'analisi statistica
è stata effettuata utilizzando l'SPSS 13.0, le relazioni tra l'espressione HK6 e le caratteristiche clinico-patologici dei pazienti sono stati analizzati con il Chi-quadrato (χ 2) e il test esatto di Fisher. Per l'analisi di sopravvivenza, sono stati esaminati due punti finali: la sopravvivenza libera da recidiva (RFS) e la sopravvivenza globale (OS), rispettivamente. RFS è definito come l'intervallo di tempo tra la data di intervento chirurgico e la data della prima recidiva o di metastasi rilevato, e il sistema operativo è definito come l'intervallo di tempo tra la data di intervento chirurgico e la data del decesso o la data dell'ultimo follow-up per chi che erano vivi alla fine dello studio. Il modello di Kaplan-Meier è stato utilizzato per esaminare la sopravvivenza tra i pazienti espressione HK6 positivo e negativo. Il significato di eventuali differenze nelle curve di sopravvivenza è stato determinato con il log-rank test. Le variabili che hanno raggiunto un livello di significatività per l'analisi univariata sono stati successivamente introdotti in un avanti LR analisi dei rischi proporzionali (modello di Cox) per identificare le variabili associate in modo indipendente con la sopravvivenza, il valore p di 0.05 (o meno) è stato considerato come statisticamente significativo.
risultati
espressione HK6 nei tessuti carcinoma gastrico avanzato
diverse proteine ​​sono state espresse in diverse posizione della cella, come ad esempio il citoplasma, la membrana, nucleare [9, 10] colorazione .hK6 positivo è stato espresso principalmente nel citoplasma del cancro gastrico cellule come granuli marrone o marrone scuro (Figura 1) è stata osservata anche nelle cellule epiteliali delle ulcere gastriche e non tumorali adiacenti mediante immunoistochimica. Il tasso positivo di espressione KLK6 nei tessuti di cancro gastrico è stata del 77,5% (100/129), significativamente superiore a quella nei tessuti adiacenti non tumorali (36,5%) e l'ulcera (33,3%) i tessuti, rispettivamente (P < 0,001; Tabella 1). Figura 1 colorazione immunoistochimica di HK6 nel carcinoma gastrico avanzato (A, B) e tessuti adiacenti noncancerous (C, D). Un HK6 espressione positiva; B HK6 espressione negativa; C HK6 espressione positiva; D HK6 espressione negativa.
Tabella 1 L'espressione di HK6 in adiacente noncancerous, ulcera gastrica e tessuti carcinoma gastrico avanzato
Gruppo
Casi
positivo
Positivo rate

χ2-value

P-value

GCT
129
100
77.5%
39.201
<0.001a
ANT
52
19
36.5%
0.096
0.757b
GUT
36
12
33.3%
Abbreviazione:
ANT, tessuti non tumorali adiacenti; GUT
, tessuti ulcera gastrica; GCT cancro gastrico quando GCT rispetto al ANT e GUT, P < 0.001, ANT rispetto al GUT, P = 0,757. Espressione
HK6 e le caratteristiche clinico-patologici
La correlazione tra i livelli di espressione HK6 e le caratteristiche clinico-patologici è riassunta nella tabella 2, espressione HK6 significativamente correlata con stadio TNM (P = 0,005) , invasione vascolare (p = 0,037) e l'invasione perineurale (P = 0,035). HK6 tumori positivi avevano più frequentemente fase successiva, una maggiore incidenza di vascolare e invasione perineurale, d'altra parte, è stata osservata nessuna differenza statisticamente significativa tra la sua espressione e sesso, età, sito del tumore, le dimensioni, la differenziazione, T fase, la linfa filoni metastasi o margine (P > 0,05) .table 2 Il rapporto tra l'espressione KLK6, recidiva del tumore e caratteristiche clinico-patologici
Caratteristiche
casi
positivo
tasso positivo

χ2 valore
P-valore
genere
1.214
0,271
femminile
56
46
82,1%
Male
73
54
74,0%
Età
0,067 0,796

< 60 anni
65
51
78,5%
≥ 60 anni
64
49
76,6% Il portale di tumore
3.806
0,149
fundus /cardias
21
19
90,5%
corpo
32
26
81,3%
antro piloro
76
55
72,4%
Le dimensioni del tumore
0.540
0.462
< 5 cm
59
44
74,6%
≥5 cm
70
56
80,0%
differenziazione
0.004
0.951
bene /moderata differenziata 16
16
13
81,3%
scarsamente differenziato
fase
T 113
87
77,0%
1.486
0.476
T2
19
13
68,4%
T3
55
45
81,8%
T4
55
42
76,4% nodo
linfa
1.682
0.195
N0 /N1
49
35
71,4%
N2 /N3
80
65
81,3 %
vascolare invasione
4.370
0,037
Assente
81
58
71,6%
Presentare
48
42
87,5%
invasione perineurale
4.439
0.035
Assente
76
54
71,1%
Presentare
53
46
86,8%
Margine
0,211 0,646

Assente
110
84
76,4%
Presentare
19
16
84,2% fase
TNM
8,029
0.005
I + II
43
27
62,8%
III + IV
86
73
84,9% associazione espressione
HK6 con tumore recidiva e la scarsa sopravvivenza globale
Come il follow-up si è conclusa, 68 (52,7%) pazienti erano morti, per un totale di 61 pazienti è morto a causa della progressione del tumore e 7 dovuto ad altre cause. In tutto, ci sono stati 69 (53,5%) pazienti hanno sviluppato recidiva del tumore, 31 dei quali sviluppato come loco-regionale ricaduta, 19 metastasi come a distanza (11 nel fegato, 3 nel polmone, e 5 in osso), 14 come recidiva peritoneale e 5 come residuo; Tutti tranne otto pazienti con recidiva del tumore sono morti da esso.
Curve di sopravvivenza di Kaplan-Meier pazienti indicate con l'espressione HK6 positivi sono stati più probabilità di avere sia un RFS più breve (p = 0,002, Figura 2a) rispetto ai pazienti con espressione HK6 negativo. espressione L'analisi univariata per quanto riguarda la RFS, con il proporzionale modello di rischio di regressione di Cox, ha mostrato che l'espressione HK6, stadio TNM, dimensioni del tumore, stadio T, filoni linfatici, margine e sono state influenzando fattori per RFS, quando l'espressione HK6 insieme ad altri fattori sono stati esaminati in un modello multivariato, stadio TNM, espressione HK6, dimensioni del tumore, il margine erano predittori indipendenti di tumore recidiva (Tabella 3), indicando i pazienti positivi HK6 sono due volte più probabilità di avere una recidiva rispetto a quelli negativi HK6. Figura 2 curve di sopravvivenza di Kaplan-Meier mostra la probabilità di essere libero di recidiva (A) e la sopravvivenza globale (B) in pazienti con espressione HK6-negativi e HK6-positivo. Abbreviazioni:. 95% CI 95% intervallo di confidenza, HR hazard ratio, OS sopravvivenza globale, RFS libera da recidiva sopravvivenza
Tabella 3 univariata e analisi multivariata di HK6 e altre caratteristiche clinico-patologici per quanto riguarda RFS in avanzato cancro gastrico

univariata
multivariata
variabile
HR
95% CI
P
HR

95% CI
P
Sesso F /M
1.05
0.65 -1 .69
0.86 -
-
-
Age < 60 /yr ≥60
1.30
0.81- 2.08
0,29 -
- Francia - Il portale di tumore -
-
0.58
- Francia - -
corpo /fondo
0.68
0,31-1,49
0,33 -
- -
antro /fondo, corpo
0.88
0,45 -1,71
0,70 -
- -
Le dimensioni del tumore < 5 /≥5 cm
2.05
1,25-3,37
0.005
1,80
1,07-3,04
0.027
grado Bene /Mal
0.88
0.40 -1.93
0.75 -
- -
T fase
- -
0.10 -
- -
T3 /T2
2.21
0,92-5,30
0,077 -
-
0.58
T4 /T2, T3
2.60
1,08 -6,26
0.032
- -
0.75
fase N N0,N1/N2,N3
2.28
1.34-3.87
0.002
–
–
0.83
Vascular−/+
0.91
0.49-1.70
0.77
–
–
–
Perineural−/+
1.27
0.71-2.25
0.42
–
–
–
Margin−/+
2.42
1.41-4.15
0.001
2.49
1.44– 4.31
0.001
TNM stadio I, II /III, IV
3.10
1,69-5,68
0.000
2,25
1,18 -4,30
0,014
hK6- /+
2.77
1,41-5,47
0.003
2.09
1.04 -4.
230,039
Secondo l'analisi di sopravvivenza, analisi di sopravvivenza di Kaplan-Meier ha mostrato che i pazienti con positivi espressione HK6 hanno una minore OS (P = 0,002, figura 2B), analisi univariata ha rivelato che l'espressione positiva HK6, stadio TNM, dimensioni del tumore, linfonodi, stadio T, e il margine sono fattori importanti che influenzano i tassi di OS, quando questi fattori sono stati coinvolti nella un'analisi multivariata (Tabella 4), stadio TNM e HK6 erano fattori prognostici indipendenti di OS.Table 4 univariata e analisi multivariata dei fattori prognostici di OS nel cancro gastrico avanzato
univariata
multivariata

variabile
HR
95% CI
P
HR
95% CI
P
Sesso F /M
1.35
0,80-2,25
0,26 -
- -
Age < 60 /yr ≥60
1.59
0,95-2,67
0,08 -
- Francia - Il portale di tumore -
-
0,17
- Francia - -
corpo /fondo
0,47
0,20-1,09
0,078 -
- -
antro /fondo, corpo
0.57
0.29 -1.13
0,11 -
- -
Le dimensioni del tumore < 5 /≥5 cm
1.72
1,02-2,90
0,043 -
-
0.57
grado Bene /Mal
0.57
0,26-1,27
0,17 -
- -
T fase
- -
0,004 -
-
0.019
T3 /T2
1.60
0,66-3,89
0.30
0.83
0,33-2,12
0,70
T4 /T2, T3
3.36
1,38-8,15
0.007
1.86
0,73-4,70
0,19
fase N N0,N1/N2,N3
2.87
1.57–5.21
0.001
–
–
0.12
Vascular−/+
1.23
0.65-2.34
0.52
–
–
–
Perineural−/+
1.32
0.71-2.43
0.38
–
–
–
Margin−/+
1.29
0.72-2.31
0.40
–
–
–
TNM stadio I, II /III, IV
4.05
2.04- 8.03
<0.001
2.99
1.45–6.16
0.003
hK6−/+
2.88
1.40-5.92
0.004
2.66
1.25–5.63
0.011
L'analisi multivariata ha indicato che l'espressione HK6 è stato uno dei fattori prognostici indipendenti di sopravvivenza globale per i pazienti con cancro gastrico vicino alla stadio TNM (P = 0,011)
. Discussione
studi hanno trovato che HK6 è stato secreto alla matrice extracellulare e coinvolti nella degradazione delle proteine ​​della matrice compresa la fibronectina, la laminina, vitronectina, collagene e indotta e-caderina ectodomain spargimento, ridotta l'adesione cellula-cellula [11, 12] e portato cheratinociti di promuovere la proliferazione del tumore, la migrazione, invasione e metastasi [13 ]. E 'noto che HK6 umano è sono coinvolti in diversi tumori maligni, Diversi studiosi hanno riferito che HK6 è sovraespresso nel cancro ovarico [14], uterino sierosa tumore papillare [15], il cancro del colon-retto [16], il cancro gastrico [6] e il cancro esofageo [17], ma underexpressed in tumori delle ghiandole salivari [18] e carcinoma renale [19], che dipende dal tipo di tessuto tumorale e microambiente [20]. HK6 promuove la crescita della maggior parte dei tumori. Tuttavia, quando HK6 stato sovraespresso nel cancro della mammella MDA-MB-231 cellule, le cellule sono state comportato marcata inversione del loro fenotipo maligno, si manifesta con tassi di proliferazione inferiori e la densità di saturazione, marcata inibizione della crescita ancoraggio indipendenti, ridotta motilità cellulare e capacità di formare tumori. Il meccanismo può essere che HK6 svolgono un ruolo protettivo contro la progressione del tumore mediata dalla inibizione della epiteliali-to-mesenchimale transizione [21].
Fino ad oggi, è stato dimostrato che KLK6 è upregulated in tali neoplasie gastrointestinali come pancreas e del colon [22]. Ogawa et al. [16] hanno riportato che l'espressione KLK6 mRNA era significativamente più alta nel cancerose rispetto al corrispondente tessuto del colon-retto non cancerosa. Kim et al. [23] ha esaminato la KLK6 mRNA e dei suoi corrispondenti livelli di proteina mediante RT-PCR ed ELISA, ha scoperto che KLK6 mRNA era upregulated di circa 8 volte, rispetto alle regioni non tumorali, e livelli sierici di HK6 da pazienti affetti da cancro gastrico è stato di 1,7 volte ad una sana individui. Quando l'inattivazione KLK6 con piccoli RNA interferenza (siRNA), invasività cellulare è diminuito del 45%. Ha anche scoperto che KLK6 degradano le proteine ​​della matrice extracellulare per l'invasività del tumore e delle metastasi. sovraespressione esogena di KLK6 comporta una diminuita attività del promotore E-caderina. Inoltre, il nostro studio ha mostrato il tasso positivo di espressione HK6 in avanzato tessuto cancro gastrico è risultato significativamente più alto di quello in adiacente tessuto ulcera gastrica e non cancerosa. Tuttavia, nessuna differenza è stata trovata tra il tessuto noncancerous adiacenti e il tessuto ulcera gastrica. Questi risultati suggeriscono che l'espressione HK6 può svolgere un ruolo importante nello sviluppo del cancro gastrico.
Ogawa et al. [16] hanno riportato che alti livelli di espressione di mRNA KLK6 nei tessuti cancro del colon sono stati correlati con l'invasione sierose, metastasi epatiche, in fase avanzata di Duke, tuttavia, i rapporti limitati suggeriscono il rapporto tra l'espressione KLK6 e le caratteristiche clinico-patologici. Nagahara et al. [6] ha riferito che la sovraespressione di KLK6 era significativamente associato con stadio TNM, invasione linfatica per i pazienti con cancro gastrico. Nel corso di studio, per la fase TNM, il tasso positivo di espressione HK6 era significativamente maggiore nel secondo tempo (stadio III e IV stadio: 84,9%) rispetto a quella fase precedente (stadio I e II cervo: 62,8%). La differenza era statisticamente significativa, a dimostrazione che HK6 espressione positiva è stata fortemente correlata con stadio TNM nel carcinoma gastrico avanzato. Il nostro studio ha anche mostrato che vi era un rapporto tra HK6 espressione positiva con invasione vascolare, che era coerente con [6] Relazione del Nagahara. Inoltre, è stato segnalato che HK6 espressione positiva è stata associata con invasione perineurale, che non ha studiato a di Nagahara [6] Relazione, ma ha bisogno di ulteriori studi per verificare. Abbiamo trovato alcuna relazione tra l'espressione HK6 nel cancro gastrico avanzato e il sesso del paziente, l'età, sito del tumore, le dimensioni, la differenziazione, stadio T, la linfa Lode metastasi, che era in accordo con i risultati precedenti [6].
Un sacco di prove ha dimostrato che diversi membri delle KLKs sono potenziali biomarcatori tumorali [24]. Il più conosciuto e utilizzato KLKs è KLK3. KLK3 gene codifica per l'antigene prostatico specifico (HK3), è stato approvato dalla FDA degli Stati Uniti come il marcatore specifico del cancro alla prostata, che è ampiamente usato per lo screening, la diagnosi, determinare l'efficacia e la valutazione della prognosi del cancro alla prostata [25]. KLK2 proteine ​​(hK2), è anche considerato come un indicatore secondario di cancro alla prostata. Recenti studi hanno indicato che HK6 elevata espressione nel carcinoma ovarico [26], il cancro del colon [16, 27], il cancro del pancreas [28], non a piccole cellule cancro ai polmoni [29] e tumori intracranici [30] potrebbe essere un fattore prognostico indipendente , suggerendo che HK6 può essere un marcatore prognostico per questi tumori.
studi hanno suggerito che l'espressione alta KLK6 era strettamente associato a più breve sopravvivenza globale e libera da recidiva di tumore ovarico [31] e pazienti affetti da cancro del colon [32]. Lo stesso risultato è stato confermato nel cancro gastrico avanzato nel nostro studio. Tutti questi suggeriscono che KLK6 può essere un potenziale biomarcatore nel predire recidiva del tumore e target terapeutico per loro. Molti studi hanno dimostrato che costantemente stadio TNM era l'indicatore prognostico più attendibile delle neoplasie gastrointestinali come il carcinoma gastrico, i pazienti linfomi gastrointestinali [9, 10, 33, 34], mentre le altre caratteristiche, non c'era nessun accordo. Jin et al. [33] hanno trovato Ezrin sovraespressione aumentato in modo significativo in metastasi linfonodali, Demirag et al. [10] hanno mostrato espressione PKP3 e prognosi infausta sembrava correlare con numero di linfonodi. Mentre nel presente studio, non abbiamo trovato alcuna associazione tra metastasi linfonodali e la prognosi in analisi multivariata.
Con lo sviluppo di molecolare e proteomica in cancro gastrico, molte proteine ​​sono stati i potenziali marker per la diagnosi precoce, la prognosi e terapeutico obiettivi di carcinoma gastrico, tra i quali c-Met [9], PKP2 e PKP3 [10], Ezrin [33], sono il ones.Moreover noti, altri biomarcatori molecolari sono attualmente in studio.
Pochi studi precedenti hanno studiato il clinicopathologic significato di espressione HK6 nei tessuti carcinoma gastrico avanzato. Così, in questo studio, abbiamo esaminato la correlazione di espressione HK6 con recidiva del tumore e la prognosi nel cancro gastrico avanzato. I risultati indicano che l'espressione di HK6 era significativamente associato con stadio TNM, invasione vascolare, invasione perineurale e cattiva prognosi per i pazienti con carcinoma gastrico avanzato. Inoltre, abbiamo riscontrato che i pazienti con espressione HK6 positivi sono stati più probabilità di avere recidive, e minore RFS e tassi di OS rispetto a quelli con l'espressione HK6 negativo. L'analisi multivariata ha dimostrato che l'espressione HK6 è stato un significativo fattore prognostico indipendente di RFS e OS in pazienti con carcinoma gastrico avanzato. I nostri risultati supportano che HK6 potrebbe essere utilizzato come un potenziale biomarcatore e target terapeutico per il cancro gastrico. Inoltre, l'espressione positiva di HK6 nei tessuti carcinoma gastrico avanzato può fornire informazioni preziose per capire il comportamento biologico del cancro gastrico.
In conclusione, il nostro studio ha dimostrato che l'espressione HK6 nel cancro gastrico avanzato significativamente correlata con stadio TNM, invasione vascolare e perineurale invasione così come i tassi di RFS e OS. Si tratta di un rapporto rara per valutare l'espressione HK6 e la sua correlazione con la recidiva del tumore e prognosi sfavorevole nel carcinoma gastrico avanzato. saranno necessari ulteriori studi per esplorare le possibilità se HK6 potrebbe essere utilizzato come un valido biomarcatore nel predire recidive del tumore e un obiettivo terapeutico per il cancro gastrico utilizzando campioni di siero di pazienti. E abbiamo anche esamineremo il KLK6 a livello di mRNA dal prossimo passo tessuti campioni.
Dichiarazioni
Ringraziamenti
Gli autori desiderano ringraziare Wenli Zhao, Ming Zhong, Yingxia Liu (Dipartimento di Patologia, Huizhou prima Ospedale, provincia del Guangdong) e Qingxu Yang, Wu Tongtong (Dipartimento di Patologia, Huizhou Central Hospital comunale, nella provincia del Guangdong), per un aiuto con la sezione di osservazione e di tessuto al microscopio ottico.
finanziamento
lo studio è stato finanziato dalla Fondazione di Scienze naturali della provincia di Guangdong, in Cina, (GDNSF, no.1051600101000001).
Autori 'originali presentate file per le immagini
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Gli autori dichiarato che non hanno alcun interesse in competizione.
contributi degli autori
XL e XY effettuati patologico l'esame, HX e JL analyzied i dati, YH redatto il manoscritto. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.

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