Korrelaatio hK6 ilmaisutapoja kasvaimen uusiutumisen ja ennusteeseen edenneen mahasyövän cancer

korrelaatio hK6 ilmaisutapoja kasvaimen uusiutumisen ja ennusteen edennyt mahasyöpä
tiivistelmä
tausta
Human kallikreiinia geeni 6 (KLK6) kuuluu ihmisen kallikreiini geeniperheen (kallikreiinien, KLKs). Ihmisen kallikreiini liittyvät peptidaasi 6 (hK6) on trypsiinin kaltainen seriiniproteaasi, jota koodaa KLK6, on raportoitu olevan erittäin ilmaistu useissa syövissä, mukaan lukien syöpään. Tässä tutkimuksessa tutkimme korrelaatio hK6 ilmaisutapoja kliinis ominaisuuksia, kasvaimen uusiutumisen ja ennusteeseen kehittynyt mahasyöpä jälkeen parantavaa resektion. Tool Menetelmät
Me takautuvasti analysoitiin kliiniset tiedot 129 tapauksia edennyt mahasyöpä jälkeen parantava gastrectomy . Ilmentymistä hK6 edenneessä mahasyövässä kudoksiin verrattuna viereiseen noncancerous kudokset tutkittiin, ja suhde hK6 ilmaisun ja kliinis ominaisuudet arvioitiin. Ylimääräisiä, näitä potilaita seurattiin tutkimaan suhdetta hK6 ilmaisun ja eloonjäämisaika.
Tulokset
positiivinen nopeus hK6 ilmentyminen oli merkitsevästi korkeampi edennyt mahasyöpä kudos, kuin viereisissä noncancerous ja mahahaava kudokset (36,5%, 33,3%, vastaavasti, P < 0,001). Oli läheinen suhde hK6 ilmaisun ja TNM-luokitus (P = 0,005), verisuonten invaasio (P = 0,037) ja hermoa invaasio (P = 0,035). Lisäksi potilailla, joilla on hK6 positiivinen osoittivat huomattavasti korkeampi uusiutumisen ja huonompi ennuste kuin ne, joilla hK6 negatiivinen. Monimuuttuja-analyysi osoitti, että hK6 ilme oli merkittävä itsenäinen tekijä kasvaimen uusiutumisen ja kokonaiselossaolo.
Päätelmät
hK6 yliekspressoituu edennyt mahasyöpä kudoksiin. Sen kliininen hyödyllisyys voidaan käyttää epäsuotuisa indikaattorina ennustamisessa kasvaimen uusiutumisen ja ennusteeseen edennyt mahasyöpä leikkauksen jälkeen. Tämä tutkimus viittaa myös siihen, että hK6 voisi olla potentiaalinen terapeuttinen kohde mahasyövän.
Virtual dioja
Virtuaalinen dia (t) tämän artikkelin löytyvät täältä: http: //www. Diagnosticpathol gian. diagnomx. eu /vs /8558403578787206
avainsanat
Vatsa kasvaimet Ihmisen kallikreiini liittyvät peptidaasi 6 (hK6) uusiutuminen kasvainmerkkiaineet Johdanto
Mahalaukun syöpä on yksi yleisimmistä pahanlaatuisia kasvaimia ja toiseksi suurin syy kuoleman kaikkien syöpien kliinisessä [1], ja kirurginen resektio jää tällä hetkellä ainoa hoito parantava. Vaikka leikkaus, leikkauksen jälkeinen kemosädehoidon immunoterapian täsmähoitoihin ne monitieteinen yhteistyönä tila ovat parantaneet eloonjäämisaste mahasyöpäpotilaista. Silti leikkauksen jälkeisen uusiutui mahasyöpä on korkea, erityisesti edennyt mahasyöpä (Advanced mahasyövän tarkoittaa, että kasvaimen tunkeutuu sen muscularis propriaan tai muscularis on herakalvoon ja ylimääräisiä herakalvon). Ja varhainen diagnosointi on vaikeaa, erityinen tuumorimarkkereina havaitsemiseksi kasvaimen uusiutumisen ei ole vielä löydetty.
KLKs koostuvat 15 homologisten geenien koodaava erittää seriiniproteaasien, paikallinen yhdessä kromosomissa 19q13.4. KLKs on samanlaiset genomista organisaatioita, ja näyttää merkittävää homologiaa sekä nukleotidi- ja proteiinin taso. Saman geenin perhe on ilmaistu eri kudoksissa, ja useita geenejä yleisesti ilmaistu samassa kudoksessa [2].
KLK6 on jäsen KLKs, joka koodaa ihmisen kallikreiinin liittyvät peptidaasi 6 (hK6). Se on seriiniproteaasi, joka muodostuu 223 aminohaposta, joissa trypsiinin kaltaista aktiivisuutta. hK6 on kloonattu itsenäisesti kolme ryhmää, käyttämällä differentiaalista display tekniikalla primaarinen ja metastaattinen rintasyöpä solulinjoissa. Anisowicz et ai. [3] ensimmäinen eristetty täyspitkä cDNA KLK6, nimeltään proteaasi M, joka ilmentyy voimakkaasti mRNA-tasolla tiettyjen ensisijainen rintasyövän solulinjoissa ja munasarjasyövän kudoksissa ja solulinjoissa. Yamashiro et ai. [4] on kloonattu tämän saman geenin, nimeltään neurosiini, cDNA-kirjastosta, joka on valmistettu ihmisen paksusuolen ja peräsuolen syövän solulinja (COLO 201). Lopuksi, Little et ai. [5] kloonattiin sama cDNA, nimeltään Zyme, aivojen potilaan kudokseen on Alzheimerin tauti, joka oli tärkeä rooli kehittymisessä ja etenemisessä Alzheimerin taudin. Tutkimuksessa havaittiin, että hK6 oli hyvin ilmaistu mahasyövän ja osoitti huonon ennusteen [6].
Parhaan tietomme, harvat tutkimukset ovat tutkineet koskevat kliinistä merkitystä hK6 ilmentymisen edennyt mahasyöpä uusiutui ja ennusteeseen. Tässä tutkimuksessa arvioimme ilmaus hK6 kirurgisessa yksilöiden edennyt mahasyöpä kudoksiin, pariksi viereisen noncancerous kudoksiin ja mahahaava kudoksia käyttäen immunohistokemia HRP, ja analysoidaan niiden korrelaatiot kliinis ominaisuuksia ja potilaiden eloonjäämisen selventää merkitystä hK6 kehittyneissä mahasyöpä jälkeen parantava leikkauksen.
Materiaalit ja menetelmät
potilaat ja kokoelma kudosnäytteiden
yhteensä 129 näytettä otettiin potilaista tammikuusta 2007 marraskuu 2011 jolle tehtiin parantava leikkaus edennyt mahasyöpä Huizhou Municipal keskussairaala Guangdongin. Resektio näytteet varmistettiin olevan ensisijainen edennyt mahasyöpä kliinisen patologian, yksikään potilaista sai mitään kemoterapiaa, sädehoitoa ja muut adjuvanttihoitona ennen käyttöä. 52 estää vierekkäisten noncancerous mahan kudoksissa (vähintään 5 cm: n päässä syövän marginaali) saatiin potilailta. Lisäksi 36 näytteet saatiin potilailta, joille tehtiin leikkaus ja varmistettiin olevan mahahaava käytettiin verrokkeina samana aikana.
Potilaat , kliinis ominaisuuksia kuten sukupuoli ja ikä, kasvaimen sijainti, koko, erilaistumiseen, T vaiheessa imusolmuke etäpesäke, TNM ja onko toistumisen oli takautuvasti uudelleen. Keski-ikä oli 60 vuotta (vaihteluväli: 28 ~ 80 vuotta) ja 56 naista ja 73 miestä. Kaikki potilaat olivat lavastettuja perustuu TNM luokittelu amerikkalaisen sekakomitean Cancer (AJCC, seitsemäs painos perusteet, 2010) [7] .Tumor paikalla mahalaukun silmänpohjan /cardia oli 21 tapausta, mahalaukun runko 32 tapauksissa mahan antrum 76 tapauksessa . Kasvaimen koko on suurempi kuin 5 cm 70 tapauksessa, ja vähemmän kuin 5 cm 59 tapauksessa, 16 tapauksessa luokitellaan hyvin tai kohtalaisesti eriytetty (myös putkimainen ja papillaarinen adenokarsinooma), 113 tapausta huonosti eriytetty (huonosti eriytetty adenokarsinooma ja muiden solutyyppien kuten kuten mucinous adenokarsinooma ja sinettisormus karsinooma ja niin edelleen), 19 tapauksessa olivat T2, 55 tapausta olivat T3 ja T4 vastaavasti. N0 /N1 löydettiin 49 tapauksessa, N2 /N3 80 tapauksissa 43 tapausta withi /II vaiheen 86 tapauksia III /IV vaiheessa kirjallinen suostumus saatiin kaikilta potilailta tai heidän perheilleen. Tutkimuksen hyväksyi instituutin , s eettinen komitea Huizhou Municipal keskussairaalassa. Kaikki näytteet kiinnitettiin 10%: neutraloitu formaldehydipäästöjen, upotettiin parafiiniin, leikattiin 3 um: n paksuisia leikkeitä, ja asetettiin lasilevyille immunohistokemiaa varten.
Immunohistokemia
Immunohistokemia suoritettiin käyttämällä piparjuuriperoksidaasiin kaksivaiheista menetelmää siten, että vältetään häiriöt endogeenisen biotiinin, mikä vähentää epäspesifistä väärän positiivisen taustan värjäytymistä. Immunohistokemia suoritettiin kahdeksassa vaiheessa ohjeiden mukaisesti: 1, The parafiinileikkeillä poistettiin parafiini ksyleenillä, vedettömät kautta kaltevuus etanolia. 2, Antigeeni haku suoritettiin Tris-EDTA-puskuriin (pH 9,0), jossa on painekattila. 3, Block endogeeninen peroksidaasi 3% vetyperoksidilla. 4, sitten inkuboitiin puhdistetun kanin polyklonaalinen vasta-aine (AP6325a, Abgent, San Diego, USA), antigeenin haku ja laimennus määritettiin alustavissa kokeissa. 5, havaitseminen hK6 Immunokompleksin inkuboitiin PV9000 sarjat (Golden bridge Biotechnology Co, Ltd, Peking, Kiina). 6, Stained diaminobentsidiinillä alustan kromogeeniliuoksen (Goldenbridge Biotechnology Co, Ltd), kunnes optimaalinen värjäys saavutettiin. 7, Osat vasta- värjättiin hematoksyliinillä, eriytetty, palasi sininen. 8, lopuksi kuivattu kautta kaltevuus alkoholia, kirkastettiin ksyleenissä, neutraali ikenet asennettu. Sitten tarkasteltiin optisella mikroskoopilla.
Immunohistokemiallinen värjäys pisteet
Kaikki objektilasit arvioitiin erikseen kahden kokeneen patologit ilman aiempaa tietoa kliinis parametrien, lopputulos niiden keskiarvo. Arviointiin hK6 immunohistokemiallisella värjäyksellä, prosenttiosuus positiivisten solujen arvioitiin kvantitatiivisesti 10 aloilla kasvain on valittu satunnaisesti, ilmentymistä 1000 syöpäsoluissa (100 solua per kenttä) arvioitiin käyttäen korkean tehon magnifcation (400 x) ja keskimääräinen arvioitiin määrällisesti ja pisteytettiin: 0 varten positiivisten solujen prosenttiosuuden ≤ 10%, 1 värjäykseen 11 ~ 25%, 2 värjäykseen 26 ~ 50%, ja 3 värjäykseen 51 ~ 75%, 4 värjäykseen > 75% soluista tutkitaan [6], värjäytymisintensiteettiä oli vastaavasti luokiteltiin semikvantitatiivisesti seuraavasti: 0 ei signaalia, 1 heikko, 2 kohtalainen, ja 3 vahva mukaan edelliseen kirjallisuuden [8], yhteensä värjäys pisteet 4 tai enemmän luokiteltiin immunohistokemiallisella positiivinen.
seuranta
Kaikki nämä potilaat saivat fluorourasiilipohjaisen adjuvanttihoitoa leikkauksen jälkeen. Koska säännöllistä seurantaa, kaikki potilaat tarkastettiin 3 kuukauden välein ensimmäisten 2 vuotta ja 6 kuukauden välein kolmannella viidenteen vuoteen, kerran vuodessa sen jälkeen. Lääketieteellinen työstämisen koostui historia ja fyysinen tarkastus, hematologian ja biokemialliset testit mukaan lukien seerumin CEA, CA19-9 ja CA72-4, ja kuvantamisen kuten Rintakehän röntgenkuvaus, barium aterian, vatsan ultraääni (US), tietokonetomografia (CT), ja tähystys mukaan kliinisen tilanteen. Seuranta-aika oli leikkauspäivänä lähtökohtana, kun kasvaimen uusiutumisen ja kuoleman kirjattiin, nämä kaksi seikkaa arvioitiin ennustetekijöiden analyysiä. Jos seurannat olivat puutteellisia, potilaat tai heidän perheensä otettiin yhteyttä puhelimitse, päättymispäivänä seuranta-aika oli toukokuuta 2012, mediaani seuranta-aika leikkauksen jälkeen oli 25 kuukautta (vaihteluväli 4-64 kuukautta).
tilastollinen analyysi
tilastollinen analyysi suoritettiin SPSS 13.0, välisiä suhteita hK6 ilmaisun ja potilaan kliinispatologiset ominaisuudet analysoitiin Chi-square (χ 2) ja Fisherin testiä. Hengissä analyysi, kahden päätepisteen tutkittiin: uusiutumista elinaika (RFS) ja kokonaiseloonjääminen (OS) vastaavasti. RFS määritellään aikaväli välinen aika leikkauksen ja päivämäärä ensimmäinen havaittu uusiutuminen tai etäpesäke, ja OS määritellään aikaväli välinen aika leikkauksen ja kuolinpäivästä tai viimeisimmän seurannan niille jotka olivat elossa lopussa tutkimuksen. Kaplan-Meier-mallia käytettiin tutkimaan selviytymisen välillä potilaiden positiivisen ja negatiivisen hK6 ilme. Merkitys mitään eroa eloonjäämiskäyrien määritettiin log-rank-testi. Muuttujat saavuttaa merkitys tasolla yhden muuttujan analyysissä sittemmin esiteltiin eteenpäin LR suhteellinen vaara-analyysi (Coxin malli) tunnistaa nämä muuttujat itsenäisesti liittyvät säilyminen, p-arvo on 0,05 (tai vähemmän) pidettiin tilastollisesti merkitsevä.
tulokset
hK6 ilmentyminen edenneessä mahasyövässä kudosten
eri proteiinit ilmennettiin eri sijainnin solun, kuten sytoplasmassa, kalvo, ydin- [9, 10] .hK6 positiivista värjäytymistä oli ilmentyy pääasiassa sytoplasmassa mahasyövän solujen ruskea tai tummanruskea rakeet (kuvio 1) myös havaittiin viereisen noncancerous ja mahahaavan epiteelisolujen immunohistokemiallisesti. Positiivinen nopeus KLK6 ilmentymisen mahasyövässä kudoksissa oli 77,5% (100/129), huomattavasti korkeampi kuin viereisillä noncancerous kudoksissa (36,5%) ja haava (33,3%) kudoksiin vastaavasti (P ​​< 0,001; taulukko 1). Kuva 1 immunohistokemiallinen värjäys hK6 advanced mahasyöpä (A, B) ja viereisen noncancerous (C, D) kudoksiin. HK6 positiivinen ilmaisu; B hK6 negatiivinen ilmaus; C hK6 positiivinen ilmaisu; D hK6 negatiivinen ilmaus.
Taulukko 1: n ilmentyminen hK6 viereisissä noncancerous, mahahaava ja edennyt mahasyöpä kudoksiin
Ryhmä
Kotelot
Positiivinen
Positiivinen rate

χ2-value

P-value

GCT
129
100
77.5%
39.201
<0.001a
ANT
52
19
36.5%
0.096
0.757b
GUT
36
12
33.3%
Lyhenne: ANT
, Vieressä noncancerous kudoksia; GUT
, mahahaava kudoksia; GCT mahasyövän kun GCT verrattuna ANT ja GUT, P < 0,001, ANT verrattuna GUT, P = 0,757.
HK6 ilmaisun ja kliinis ominaisuudet
korrelaatio hK6 ekspressiotasot ja kliinis ominaisuudet on esitetty yhteenveto taulukossa 2, hK6 ilmaisu merkittävästi korreloi TNM (P = 0,005) , verisuonten invaasio (P = 0,037) ja hermoa invaasio (P = 0,035). hK6 kasvaimia liittyi useammin myöhemmin, ilmaantuvuuden lisääntymistä verisuonten ja hermoa invaasio, toisaalta, ei tilastollista merkitsevää eroa ei havaittu sen ilmaisun ja sukupuoli, ikä, kasvainpaikkaa, koko, erilaistuminen, T vaiheessa imusolmuke lodes etäpesäke tai marginaali (P > 0,05) .table 2 välinen suhde KLK6 ilme, kasvaimen uusiutumisen ja kliinis ominaisuudet
ominaisuudet
asiat
Positiivinen
Positiivinen nopeudella

χ2-arvo
P-arvo
Sukupuoli
1,214
0,271
Female
56
46
82,1%
Mies
73
54
74,0%
Ikä
0,067
0,796
< 60 vuotta
65
51
78,5%
≥60 vuotta
64
49
76,6%
kasvainpaikkaa
3,806
0,149
silmänpohjan /cardia
21
19
90,5%
runko
32
26
81,3%
antrum mahanportin
76
55
72,4%
Tuumorikoko
0,540
0,462
< 5 cm
59
44
74,6%
≥5 cm
70
56
80,0%
erilaistuminen
0,004
0,951
No /kohtalainen eriytetty 16
16
13
81,3%
Huonosti eriytetty
113
87
77,0%
T vaiheessa
1,486
0,476
T2
19
13
68,4%
T3
55
45
81,8%
T4
55
42
76,4%
Imusolmuke
1,682
0,195
N0 /N1
49
35
71,4%
N2 /N3
80
65
81,3 %
Vascular invaasio
4,370
0,037
Absent
81
58
71,6%
Esitä
48
42
87,5%
hermoa invaasio
4,439
0,035
Absent
76
54
71,1%
Esitä
53
46
86,8%
marginaali
0,211
0,646
Absent
110
84
76,4%
Esitä
19
16
84,2%
TNM
8,029
0,005
I + II
43
27
62,8%
III + IV
86
73
84,9%
hK6 ilmaisun yhteydessä kasvain toistuminen ja huono kokonaiselossaolo
koska seurannan päättynyt, 68 (52,7%) potilaista oli kuollut, yhteensä 61 potilasta kuoli syövän etenemisen ja 7 muista syistä. Kaikkiaan oli 69 (53,5%) potilaista kehittyi kasvaimen uusiutumisen, 31 joista kehittyi paikallista alueellista uusiutumisen, 19 niin etäinen etäpesäkkeitä (11 maksassa, 3 keuhkoissa ja 5 luun), 14 vatsakalvon toistuminen ja 5 kuten jäännös; Kaikki mutta kahdeksan potilasta, joilla kasvaimen uusiutumisen kuoli siitä.
Kaplan-Meierin eloonjäämiskäyrien tarkoitettu potilaille, joilla on positiivinen hK6 ilme olivat todennäköisemmin olla sekä lyhyempi RFS (P = 0,002, kuvio 2A) verrattuna potilaisiin, joiden negatiivinen hK6 ilme. Univariate analyysi ilmaisun osalta RFS, Coxin suhteellista vaaraa regressiomallin, osoitti hK6 ilmaisua, TNM, kasvaimen koko, T vaiheessa imusolmukkeiden lodes, marginaali ja olivat vaikuttavia tekijöitä RFS, kun hK6 ilme yhdessä muiden tekijöiden tutkittiin monimuuttuja malli, TNM vaiheessa hK6 ilme, kasvaimen koko, marginaali olivat riippumattomia ennustajia kasvaimen uusiutumisen (taulukko 3), mikä osoittaa hK6 positiiviset potilaat ovat kaksi kertaa todennäköisemmin uusiutumisen kuin hK6 kielteisiä. Kuvio 2 Kaplan-Meierin eloonjäämiskäyristä osoittaa todennäköisyys olla vapaa toistumisen (A) ja kokonaiseloonjääminen (B) potilailla, joilla hK6-negatiivisia ja hK6-positiivinen ilme. Lyhenteet: 95% CI 95%: n luottamusväli, HR riskisuhde, OS kokonaiselinaika, RFS uusiutumista elinaikaa.
Taulukko 3 yhden ja usean analysointi hK6 ja muiden kliinispatologiset ominaisuuksien osalta RFS pitkälle mahasyövässä

univariate
Monimuuttujatestaus
Variable
HR
95% CI
P
HR

95% CI
P
Gender F /M
1,05
0,65 -1 0,69
0,86
- -
-
Age < 60 /≥60 v
1,30
0.81- 2.08
0,29 -
-
- Kasvain site
-
- 0,58
- -
-
body /silmänpohjan
0,68
0,31-1,49
0,33 -
-
- antrum /silmänpohjan, body
0,88
0,45 -1,71
0,70 -
-
- Tuumorikoko < 5 /≥5 cm
2,05
1,25-3,37
0,005
1,80
1,07-3,04
0,027
laatu No /Huonosti
0,88
0,40 -1,93
0,75 -
- -
T vaihe -
-
0,10 -
-
- T3 /T2
2.21
0,92-5,30
0,077 -
-
0,58
T4 /T2, T3
2,60
1,08 -6,26
0,032
- -
0,75
N vaiheessa N0,N1/N2,N3
2.28
1.34-3.87
0.002
–
–
0.83
Vascular−/+
0.91
0.49-1.70
0.77
–
–
–
Perineural−/+
1.27
0.71-2.25
0.42
–
–
–
Margin−/+
2.42
1.41-4.15
0.001
2.49
1.44– 4.31
0,001
TNM I, II /III, IV
3,10
1,69-5,68
0,000
2,25
1,18 -4,30
0,014
hK6- /+
2,77
1,41-5,47
0,003
2,09
1.04 -4.
230,039
mukaan selviytymisen analyysin Kaplan-Meier selviytymisen analyysi osoitti, että potilailla, joilla on positiivinen hK6 ilmaisu on pienempi OS (P = 0,002, kuvio 2B), yhden muuttujan analyysi paljasti, että positiivinen hK6 ilmaisua, TNM, kasvaimen koon, imusolmuke, T vaiheessa ja marginaali ovat tärkeitä tekijöitä, jotka vaikuttavat OS hinnat, kun nämä tekijät olivat mukana monimuuttuja-analyysissä (taulukko 4), TNM ja hK6 olivat riippumattomia ennustavia tekijöitä OS.Table 4 yhden ja usean analysointi ennustetekijöiden OS pitkälle mahasyövässä
univariate
monimuuttuja

Muuttuva
HR
95% CI
P
HR
95% CI
P
Gender F /M
1,35
0,80-2,25
0,26 -
-
- Age < 60 /≥60 v
1,59
,95-+2,67
0,08 -
-
- Kasvain site
-
- 0,17
- -
-
body /silmänpohjan
0,47
0,20-1,09
0,078 -
-
- antrum /silmänpohjan, body
0,57
0,29 -1,13
0,11 -
-
- Tuumorikoko < 5 /≥5 cm
1,72
1,02-2,90
0,043 -
-
0,57
laatu No /Huonosti
0.57
0,26-1,27
0,17 -
- -
T vaihe -
-
0,004 -
-
0,019
T3 /T2
1,60
0,66-3,89
0,30
0,83
0,33-2,12
0,70
T4 /T2, T3
3,36
1,38-8,15
0,007
1,86
0,73-4,70
0,19
N vaiheessa N0,N1/N2,N3
2.87
1.57–5.21
0.001
–
–
0.12
Vascular−/+
1.23
0.65-2.34
0.52
–
–
–
Perineural−/+
1.32
0.71-2.43
0.38
–
–
–
Margin−/+
1.29
0.72-2.31
0.40
–
–
–
TNM vaiheen I, II /III, IV
4,05
2.04- 8.03
<0.001
2.99
1.45–6.16
0.003
hK6−/+
2.88
1.40-5.92
0.004
2.66
1.25–5.63
0.011
Monimuuttuja-analyysi osoitti, että hK6 ilmaus oli yksi riippumaton ennustetekijöiksi kokonaiselinaika potilaille mahalaukun syövän vieressä TNM (P = 0,011).
Keskustelu
tutkimuksissa havaittiin, että hK6 erittyi solunulkoiseen matriisiin ja mukana hajoaminen matriisiproteiineista kuten fibronektiini, laminiini, vitronektiini, kollageenin ja indusoi E-kadheriinin ektodomeeni irtoaminen, vähensi solujen soluadheesiota [11, 12] perusteella keratinosyyttien edistää kasvaimen proliferaatiota, migraatiota, invaasio ja etäpesäkkeiden [13 ]. Tiedetään, että ihmisen hK6 on mukana useissa pahanlaatuisia Useat tutkijat ovat raportoineet, että hK6 yliekspressoituu munasarjasyöpä [14], kohdun serous papillaarinen syöpä [15], peräsuolen syöpä [16], mahasyöpä [6] ja ruokatorven syöpä [17], mutta on ali-ilmentynyt on sylkirauhasten kasvaimia [18] ja munuaissolukarsinooma [19], joka riippuu kasvaimen kudostyyppien ja mikroympäristön [20]. hK6 edistää kasvua eniten kasvaimia. Kuitenkin, kun hK6 yliekspressoitiin rintasyöpä MDA-MB-231-soluja, soluja johti merkitty käänteinen niiden pahanlaatuisen fenotyypin, joka ilmenee alempi leviämisen hinnat ja kyllästystiheyden, on merkitty esto kiinnityspisteen riippumattomaan kasvuun, vähentää solujen liikkuvuutta ja kyky muodostaa kasvaimia. Mekanismi voi olla, että hK6 olla suojaava tehtävä vastaan ​​kasvaimen etenemistä välittämän eston epiteelin-to-mesenkymaalitransitioon [21].
Tähän mennessä on osoitettu, että KLK6 on yliaktiivista kuten maha-suolikanavan pahanlaatuisten kasvainten, kuten haiman ja paksusuolen syöpiä [22]. Ogawa et ai. [16] on raportoitu, että KLK6 mRNA: n ekspressio oli merkittävästi suurempi syöpä kuin vastaava noncancerous peräsuolen kudokseen. Kim et ai. [23] tutki KLK6 mRNA ja sen vastaavan proteiinin tasot käyttäen RT-PCR ja ELISA, todettiin että KLK6 mRNA voimistuvan noin 8-kertainen verrattuna nontumor alueille, ja seerumin hK6 tasoilla mahasyöpäpotilaista oli 1,7-kertainen terveisiin yksilöitä. Kun inaktivoimalla KLK6 pieniä häiriöitä RNA (siRNA), solu invasiivisuus laski 45%. Hän havaitsi myös, että KLK6 hajottavat soluväliaineen proteiinien kasvaimen invasiivisuus ja etäpesäkkeiden. Eksogeeninen yliekspressio KLK6 vähensivät aktiivisuutta E-kadheriinin promoottori. Lisäksi meidän tutkimus osoitti positiivisen määrä hK6 ilmentymisen edennyt mahasyöpä kudos oli merkittävästi korkeampi kuin viereisillä noncancerous ja mahahaava kudosta. Ei kuitenkaan eroa löytynyt vierekkäisten noncancerous kudosten ja mahahaava kudosta. Nämä havainnot viittaavat siihen, että hK6 ekspressio voi olla tärkeä rooli mahalaukun syövän kehittymisessä.
Ogawa et ai. [16] ilmoitetaan, että korkeat KLK6 mRNA ekspressiotasot kolorektaalisyövässä kudoksissa korreloivat seröösisiä invaasio, maksa etäpesäke, kehittyneet Duken vaiheessa kuitenkin rajallinen raportit ehdotti suhdetta KLK6 ilmaisun ja kliinis ominaisuudet. Nagahara et ai. [6] raportoi, että yli-ilmentyminen KLK6 oli merkitsevästi yhteydessä TNM, imusuonten invaasio potilaille, joilla on mahalaukun syöpä. Nykyisessä tutkimuksessa, että TNM vaiheessa positiivinen nopeus hK6 ilmentyminen oli merkitsevästi korkeampi myöhemmin (vaihe III ja vaihe IV: 84,9%) kuin aiemmissa vaiheessa (vaihe I ja polttarit II: 62,8%). Ero oli tilastollisesti merkitsevä, mikä osoittaa, että hK6 positiivinen ilmentyminen korreloi voimakkaasti TNM pitkälle mahasyövän. Tutkimuksemme osoitti myös, että oli suhde hK6 positiivisen ilmaisun verisuoni- invaasiota, joka oli yhdenmukainen Nagahara n [6] raportti. Lisäksi Kerrottiin, että hK6 positiivinen ilmaisu liittyi hermoa invaasio, jota ei tutkittu Nagahara n [6] raportti, mutta se on vielä tutkittava tarkistaa. Emme löytäneet suhdetta hk6 ilmentymistä edennyt mahasyöpä ja potilaan sukupuoli, ikä, kasvainpaikkaa, koko, erilaistuminen, T vaiheessa imusolmukkeiden lode etäpesäke, joka oli sopimus aikaisempien tulosten kanssa [6].
Runsaasti todisteita on osoittanut, että useat jäsenet KLKs ovat mahdollisia syöpää biomarkkerit [24]. Yleisimmin tunnettu ja käytetty KLKs on KLK3. KLK3 geeni koodaa prostataspesifinen antigeeni (HK3), on hyväksynyt FDA kuin spesifinen merkki eturauhassyövän, jota käytetään laajalti seulontaan, diagnosointiin, määritetään tehon ja arvioida ennustetta eturauhassyövän [25]. KLK2 proteiini (hK2), pidetään myös toissijaisena markkeri eturauhassyövän. Viimeaikaiset raportit ovat osoittaneet, että hK6 voimakasta ilmentymistä munasarjasyöpä [26], paksusuolen syöpä [16, 27], haimasyöpä [28], ei-pienisoluinen keuhkosyöpä [29] ja kallonsisäinen kasvaimissa [30] voisi olla itsenäinen ennustetekijä , mikä viittaa siihen, että hK6 voi olla ennustetyövälineenä merkkiaine näistä kasvaimista.
Tutkimukset ovat osoittaneet, että korkeat KLK6 ilmentyminen tiiviisti lyhyempi yleistä ja uusiutumista elinaika munasarjasyöpä [31] ja paksusuolen syöpäpotilaiden [32]. Sama tulos vahvistettiin edennyt mahasyöpä tutkimuksessamme. Kaikki nämä viittaavat siihen, että KLK6 voi olla mahdollinen biomarkkereiden ennustaa kasvaimen uusiutumisen ja terapeuttinen kohde heille. Monet tutkimukset osoittivat johdonmukaisesti, että TNM oli kaikkein luotettavin ennustetekijöiden indikaattori ruoansulatuskanavan kasvaimet, kuten mahasyöpä, ruoansulatuskanavan lymfoomat potilaat [9, 10, 33, 34], kun taas muut ominaisuudet, ei ollut sopimusta. Jin, et ai. [33] löydetty Erzin yliekspressio kasvoi merkittävästi imusolmuke etäpesäke, Demirag et al. [10] osoitti PKP3 ilmaisun ja huono ennuste näytti korreloivan imusolmuke numero. Vaikka tässä tutkimuksessa, emme löytäneet yhdistyksen välillä imusolmuke etäpesäke ja ennusteeseen monimuuttujamenetelmin.
Kehittämisen kanssa molekyyli- ja proteomiikan mahasyövän, monet proteiinit ovat olleet mahdollisia merkkiaineita varhaisen diagnoosin, ennustetta ja terapeuttinen tavoitteet mahasyöpä joukossa c-Met [9], PKP2 ja PKP3 [10], Erzin [33], ovat tunnetut ones.Moreover, muut molekyyli- biomarkkerit ovat tällä hetkellä tutkimuksessa.
Harva aikaisemmissa tutkimuksissa selvitettiin ennusteeseen viittaavia merkityksen hK6 ilmentymisen edennyt mahasyöpä kudoksiin. Näin ollen tässä tutkimuksessa selvitimme korrelaatio hK6 ilmaisutapoja kasvaimen uusiutumisen ja ennusteen edennyt mahasyöpä. Tulokset osoittavat, että ilmentyminen hK6 oli merkitsevästi yhteydessä TNM, verisuonten invaasio, hermoa invaasio ja huonon ennusteen potilailla, joilla on edennyt mahasyöpä. Lisäksi olemme havainneet, että potilailla, joilla on positiivinen hK6 ilme olivat todennäköisemmin toistumisen, ja alempi RFS ja OS hinnat verrattuna negatiivisen hK6 ilme. Monimuuttujamenetelmin osoitti, että hK6 ilme oli merkittävä itsenäinen ennustetekijä RFS ja käyttöjärjestelmän potilailla, joilla on edennyt mahasyöpä. Meidän havainnot tukevat että hK6 voidaan käyttää mahdollisena biomarkkereiden ja terapeuttinen kohde mahasyövän. Lisäksi positiivinen ilmaus hK6 pitkälle mahasyövässä kudokset voivat antaa arvokasta tietoa ymmärtää biologista käyttäytymistä mahasyövän.
Lopuksi todettakoon, että tutkimus osoitti, että hK6 ilmentymistä edennyt mahasyöpä korreloi merkitsevästi TNM, verisuonten invaasio ja hermoa invaasio sekä RFS ja OS hinnat. Tämä on harvinainen arviointiraportissa hK6 ilmaisun ja sen korrelaatio kasvaimen uusiutumisen ja huonon ennusteen edennyt mahasyöpä. Lisätutkimuksia tarvitaan tutkimaan mahdollisuuksia onko hK6 voitaisiin käyttää arvokkaana biomarkkereiden ennustaa kasvaimen uusiutumisen ja terapeuttisena kohteena mahasyövän käyttämällä seeruminäytteistä potilaista. Ja me myös tarkastelee KLK6 mRNA-tasolla kudoksista näytteistä seuraava askel.
Julistukset
Kiitokset
Kirjoittajat kiittää Wenli Zhao, Ming Zhong, Yingxia Liu (Department of Pathology, Huizhou ensimmäinen Hospital, Guangdong) ja Qingxu Yang, Tongtong Wu (Department of Pathology, Huizhou Kunnan keskussairaala, Guangdong) apua optisen mikroskooppinen tarkkailu ja kudoksen osassa.
Rahoitus
tutkimuksen rahoittivat Natural Science Foundation Guangdong, Kiina, (GDNSF, no.1051600101000001).
kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 13000_2012_773_MOESM1_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 13000_2012_773_MOESM2_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 Kilpailevat edut
Kirjoittajat ilmoittaneet, etteivät ne ole kilpailevia kiinnostusta.
Tekijät osuudet
XL ja XY suorittaa patologinen tutkimus, HX ja JL analyzied data, YH laadittu käsikirjoitus. Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.

• Promoottori metylaatio ja ilmentyminen TIMP-3 geenin mahasyövän
• Gastroprotektiivinen vaikutus johanneksenleipäpuu (JOHANNEKSENLEIPÄPUU L.) vastaan ​​etanolin aiheuttamia oksidatiivisen stressin rotan