Korrelation von HK6 Expression mit Tumorrezidiv und Prognose bei fortgeschrittenem Magen cancer

Korrelation von HK6 Expression mit Tumorrezidiv und Prognose bei fortgeschrittenem Magenkrebs
Zusammenfassung
Hintergrund
Menschliche Kallikrein-Gen 6 (KLK6) ist ein Mitglied der menschlichen Kallikrein-Genfamilie (Kallikreine, KLKs). Humankallikrein bezogenen peptidase 6 (HK6) eine trypsinartige durch die KLK6 kodierten Serinprotease, berichtet wurde, in verschiedenen Krebsarten, einschließlich Magenkrebs stark exprimiert werden. In dieser Studie untersuchten wir die die Korrelation von HK6 Ausdruck mit klinisch-pathologischen Merkmale, Rezidiven und Prognose bei fortgeschrittenem Magenkarzinom nach kurativer Resektion.
Methoden kaufen Wir die klinischen Daten von 129 Fällen retrospektiv analysiert fortgeschrittenem Magenkrebs nach kurativer Gastrektomie . Die Expression von HK6 in fortgeschrittenem Magenkrebsgewebe im Vergleich zu benachbarten noncancerous Gewebe wurden untersucht, und die Beziehung zwischen HK6 Expression und klinisch-pathologischen Eigenschaften bewertet. In weiteren wurden diese Patienten verfolgt, die die Beziehung zwischen HK6 Ausdruck und die Überlebenszeit zu untersuchen.
Ergebnisse | Die positive Rate von HK6 Ausdruck war signifikant höher bei fortgeschrittenem Magenkrebs Gewebe, als in benachbarten noncancerous und Magengeschwür Gewebe (36,5%, 33,3% bzw. P < 0,001). Es gab eine enge Beziehung zwischen HK6 Ausdruck und TNM-Stadium (p = 0,005), Gefäßinvasion (P = 0,037) und perineuralen Invasion (P = 0,035). Darüber hinaus Patienten mit HK6 positiv, zeigten eine signifikant höhere Rezidiv und schlechtere Prognose als solche mit HK6 negativ. Multivariate Analyse zeigte, dass HK6 Ausdruck ein bedeutender unabhängiger Faktor für Tumorrezidiv und Gesamtüberleben war.
Fazit
HK6 ist in fortgeschrittenem Magenkrebs Gewebe überexprimiert. Seine klinischen Nutzen kann bei der Vorhersage von Rezidiven und die Prognose für fortgeschrittenem Magenkrebs nach der Operation als eine ungünstige Indikator verwendet werden. Diese Studie zeigt auch, dass HK6 könnte ein mögliches therapeutisches Ziel für Magenkrebs sein
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Schlüsselwörter Magentumoren Menschenkallikrein-verwandten Peptidase 6 (HK6) Recurrence Tumormarker Einführung
Magenkrebs ist eine der häufigsten bösartigen Tumoren und die zweithäufigste Ursache des Todes unter allen Krebserkrankungen in der klinischen [1], und chirurgische Resektion bleibt derzeit die einzige Behandlung mit kurativer. Auch wenn die Operation, haben postoperativen Chemo-Strahlentherapie Immuntherapie, zielgerichtete Therapie jene multidisziplinären Kooperationsmodus, um die Überlebensrate von Patienten mit Magenkrebs verbessert. Immer noch die postoperativen Rezidivrate von Magenkrebs ist hoch, vor allem mit fortgeschrittenem Magenkrebs (Advanced Magenkrebs bezieht sich auf das Tumor auf die Muscularis propria oder durch die Muskularis serosa und extra serosa infiltriert). Und frühe Diagnose ist schwierig, hat die spezifischen Tumormarker bei der Erkennung von Tumorrezidiv noch nicht entdeckt worden.
Die KLKs bestehen aus 15 homologe Gene, die Codierung Serin-Proteasen, lokalisiert im Tandem auf Chromosom 19q13.4. Die KLKs haben ähnliche genomische Organisationen und zeigen eine signifikante Homologie sowohl auf dem Nukleotid und Proteinebene. Das gleiche Gen der Familie wird in verschiedenen Geweben exprimiert und mehrere Gene in demselben Gewebe allgemein ausgedrückt. [2]
KLK6 ist ein Mitglied der KLKs, die für den menschlichen Kallikrein-verwandten peptidase 6 (HK6) kodiert. Es ist eine Serin-Protease von 223 Aminosäuren mit Trypsin-ähnliche Aktivität besteht. HK6 ist durch drei Gruppen, unter Verwendung eines Differential Display-Technik aus primären und metastatischen Brustkrebszelllinien unabhängig geklont. Anisowicz et al. [3] isoliert zuerst die Volllängen-cDNA von KLK6, genannt Protease M, die stark auf mRNA-Ebene in bestimmten primären Brustkrebszelllinien und in Eierstockkrebsgeweben und Zelllinien exprimiert wird. Yamashiro et al. [4] das gleiche Gen kloniert, namens Neurosinprotein, aus einer cDNA-Bibliothek aus einer menschlichen Linie kolorektalen Krebszelle vorbereitet (COLO 201). Schließlich Kleiner et al. [5] kloniert, um das identische cDNA, genannt zyme, aus dem Hirngewebe von einem Patienten mit Alzheimer-Krankheit, die eine wichtige Rolle in der Entwicklung und dem Fortschreiten der Alzheimer-Krankheit gewonnen. Studie ergab, dass HK6 wurde bei Magenkrebs stark exprimiert und zeigte schlechte Prognose [6].
Nach unserem Kenntnisstand haben nur wenige Studien untersucht worden in Bezug auf die klinische Bedeutung der HK6 Ausdruck in fortgeschrittenem Magenkrebs mit Rezidiv und Prognose. In dieser Studie haben wir die Expression von HK6 in den chirurgischen Proben von fortgeschrittenem Magenkrebs Gewebe, neben noncancerous Gewebe und Magengeschwür Gewebe mittels Immunhistochemie HRP gekoppelt, und analysiert deren Korrelationen mit klinisch-pathologischen Eigenschaften und Patienten das Überleben, die Bedeutung von HK6 in fortgeschrittenen zu klären Magenkrebs nach kurativer Operation.
Materialien und Methoden
Patienten und Sammlung von Gewebeproben
insgesamt 129 Proben von Patienten, von Januar 2007 bis November 2011 erhalten wurden, die kurative Operation für fortgeschrittenem Magenkrebs in Huizhou Municipal unterzog Central Hospital von GuangDong. Die Resektion Proben wurden bestätigt primäre fortgeschrittenem Magenkrebs durch klinische Pathologie zu sein, keiner der Patienten erhielten jede Chemotherapie, Strahlentherapie und andere adjuvante Therapie vor der Operation. 52 Blöcke von benachbarten noncancerous Magengewebe (mindestens 5 cm entfernt von der Krebs-Marge) von den Patienten erhalten. Darüber hinaus, 36 Proben von Patienten, die Operation unterzogen und bestätigt wurden Magengeschwür als Kontrollen im gleichen Zeitraum verwendet werden.
Patienten , klinisch-pathologischen Merkmale wie Geschlecht und Alter, Tumorlokalisation, Größe, Differenzierung, T Stadium, Lymphknotenmetastasen, TNM-Stadium und ob Wiederholung wurden nachträglich überprüft. Das mittlere Alter betrug 60 Jahre (Bereich: 28 ~ 80 Jahre) mit 56 Frauen und 73 Männer. Alle Patienten wurden auf der TNM-Klassifikation des American Joint Committee on Cancer (AJCC, 7. Auflage Kriterien, 2010) inszenierten basiert [7] .Tumor Lage im Magenfundus /Cardia war 21 Fälle, Magenkörper 32 Fällen Magenantrum 76 Fälle . Die Tumorgröße wurde von mehr als 5 cm in 70 Fällen und weniger als 5 cm in 59 Fällen, 16 Fälle als auch klassifiziert oder mßig differenziert (einschließlich Rohr und papilläres Adenokarzinom), 113 Fälle als schlecht differenzierten (schlecht differenziertes Adenokarzinom und andere Zelltypen, wie beispiels als mucinous Adenokarzinom und cell carcinoma Siegelring usw.) waren 19 Fälle bei T2, 55 Fälle, bei T3 und T4 wurden jeweils. N0 /N1 wurde in 49 Fällen gefunden, N2 /N3 in 80 Fällen, 43 Fälle withi /II Stadium, 86 Fälle mit III /IV Stufe, eine schriftliche Einverständniserklärung wurde von allen Patienten oder deren Familien erhalten. Die Studie des Instituts genehmigt wurde , s Ethikkommission der HuiZhou Municipal Central Hospital. Alle Proben wurden in 10% neutralisierten maldehyde fixiert, in Paraffin eingebettet, geschnitten in 3 um dicke Abschnitte und montiert auf Glasobjektträger für die Immunhistochemie Analyse.
Immunhistochemie
Immunhistochemie wurde die Meerrettichperoxidase zweistufigen Verfahren unter Verwendung von , das vermeidet die Interferenz von endogenen Biotin, so dass die nicht-spezifische falsch-positiven Hintergrundfärbung zu reduzieren. Die Immunhistochemie wurde nach in acht Schritten durchgeführt, um den Anweisungen: 1, Die Paraffinschnitte wurden in Xylol, rehydratisiert durch Gradienten Ethanol entparaffiniert. 2, Antigen Retrieval wurde in Tris-EDTA-Puffer (pH 9,0) mit einem Druckkocher durchgeführt. 3, Block die endogene Peroxidase mit 3% Wasserstoffperoxid. 4 und dann mit dem gereinigten polyklonalen Kaninchen-Antikörper inkubiert (AP6325a, Abgent, San Diego, USA), Antigen-Retrieval und Verdünnung wurden durch Vorversuche ermittelt. 5, Nachweis von HK6 Immun wurde mit den PV9000-Kits (Goldene Brücke Biotechnology Co., Ltd, Beijing, China) inkubiert. 6, Bunt mit Diaminobenzidin Substratchromogen Lösung (Goldenbridge Biotechnology Co., Ltd), bis die optimale Färbung wurde erreicht. 7. Die Schnitte wurden mit Hämatoxylin gegengefärbt, unterschieden, zurück blau. 8, schließlich durch Gradienten Alkohol entwässert, in Xylol geklärt, neutral Gummi montiert. Dann unter dem optischen Mikroskop beobachtet.
Immunhistochemische Färbung Partitur
Alle Folien getrennt durch zwei leitende Pathologen ohne vorherige Kenntnis der klinisch-pathologischen Parameter bewertet wurden, die Endnote für ihre Durchschnitt. Zur Beurteilung der HK6 immunhistochemischen Färbung der Prozentsatz der positiven Zellen wurde quantitativ 10 Felder innerhalb des Tumors ausgewertet wurden zufällig ausgewählt, die Expression in 1000 Krebszellen (100 Zellen pro Feld) wurde ein Hochleistungs magnifcation ausgewertet (400 ×) und eine durchschnittliche quantitativ und erzielte wie wurde bewertet: 0 für den Prozentsatz der positiven Zellen ≤ 10%, 1 für die Färbung von 11 ~ 25%, 2 für die Färbung von 26 ~ 50%, und 3 für die Färbung von 51 ~ 75%, 4 für die Färbung von > 75% der untersuchten Zellen [6], die Färbeintensität wurde jeweils semi-quantitativ wie folgt bewertet: 0 kein Signal, 1 schwach, 2 moderat und 3 stark nach den vorhergehenden Literaturen [8], insgesamt Färbung Score von 4 oder mehr wurde als immunhistochemischen positiv bewertet.
Follow-up
Alle diese Patienten Fluorouracil basierte adjuvante Chemotherapie nach der Operation erhalten. Als regelmäßiger Follow-up wurden alle Patienten alle 3 Monate während der ersten 2 Jahre und alle 6 Monate während des dritten bis zum fünften Jahr überprüft, einmal danach jährlich. Medizinische Aufarbeitung bestand aus Anamnese und körperliche Untersuchung, Hämatologie und biochemische Tests, einschließlich Serum-CEA, CA19-9 und CA72-4 und Bildgebung einschließlich Röntgen-Thorax, Bariumbrei, Abdomensonographie (US), Computertomographie (CT) und Endoskopie entsprechend der klinischen Situation. Die Follow-up-Zeit, den Tag der Operation als Ausgangspunkt hatten, waren die Zeit von Rezidiven und Tod aufgezeichnet, wobei diese beiden Punkte wurden für prognostische Analyse ausgewertet. Wenn die Follow-ups unvollständig waren, Patienten oder deren Familien telefonisch kontaktiert wurden, war der Stichtag für die Follow-up Mai 2012 betrug die mediane Nachbeobachtungszeit nach der Operation betrug 25 Monate (Bereich 4-64 Monate).
die statistische Analyse wurde
die statistische Auswertung erfolgt mit der SPSS 13.0, die Beziehungen zwischen HK6 Expression und Patienten klinisch-pathologischen Eigenschaften wurden mit dem Chi-Quadrat analysiert (χ 2) und der exakte Test nach Fisher. Für das Überleben der Analyse wurden zwei Endpunkte untersucht: das rezidivfreie Überleben (RFS) und Gesamtüberleben (OS) sind. RFS ist als das Zeitintervall zwischen dem Zeitpunkt der Operation und dem Datum der ersten erkannten Rezidiv oder Metastasierung definiert und OS ist als das Zeitintervall zwischen dem Zeitpunkt der Operation und dem Zeitpunkt des Todes oder dem Datum der letzten Follow-up für diejenigen, die die am Ende der Studie am leben waren. Die Kaplan-Meier-Modell wurde verwendet, um die Patienten zu untersuchen Überleben zwischen positiven und negativen HK6 Ausdruck. Die Bedeutung jeder Unterschied in der Überlebenskurven wurden mit dem Log-Rank-Test bestimmt. Variablen ein Signifikanzniveau in der univariaten Analyse zu erreichen wurden anschließend in einer Vorwärts LR Proportional Hazard-Analyse (Cox-Modell) eingeführt diese Variablen unabhängig mit dem Überleben, der p-Wert von 0,05 (oder weniger) wurde als statistisch signifikant angesehen assoziiert zu identifizieren.
Ergebnisse | HK6 Expression in fortgeschrittenem Magenkrebs Gewebe
verschiedene Proteine ​​wurden in anderen Ort der Zelle, wie Zytoplasma, Membran, Kern [9, 10] ausgedrückt .hK6 positive Färbung wurde hauptsächlich im Zytoplasma von Magenkrebs ausgedrückt Zellen als braun oder dunkelbraun Granulat (Abbildung 1) wurde auch in den benachbarten noncancerous und Magengeschwür Epithelzellen durch Immunhistochemie beobachtet. Die positive Rate von KLK6 Expression in Magenkrebsgewebe war 77,5% (100/129), deutlich höher als die in benachbarten noncancerous Gewebe (36,5%) und Geschwür (33,3%) Gewebe (p < 0,001; Tabelle 1). Figur 1 Immunhistochemische Färbung von HK6 im erweiterten Magenkarzinoms (A, B) und benachbart noncancerous (C, D) Gewebe. Ein HK6 positiven Ausdruck; B HK6 negativen Ausdruck; C HK6 positiven Ausdruck; D HK6 negativen Ausdruck.
Tabelle 1 Die Expression von HK6 in benachbarten noncancerous, Magengeschwür und fortgeschrittenem Magenkrebs Gewebe
Gruppe
Hüllen
Positive
Positive rate

χ2-value

P-value

GCT
129
100
77.5%
39.201
<0.001a
ANT
52
19
36.5%
0.096
0.757b
GUT
36
12
33.3%
Abkürzung: ANT
, Angrenzend noncancerous Gewebe; DARM
, Magengeschwür Gewebe; GCT Magenkrebs bei GCT im Vergleich zu ANT und DARM, P < 0,001, ANT im Vergleich zu DARM, P = 0,757.
HK6 Expression und klinisch-pathologischen Merkmale, die die Korrelation zwischen HK6 Expressionsniveaus und klinisch-pathologischen Eigenschaften
ist, wie in Tabelle 2 HK6 Expression signifikant korreliert mit TNM-Stadium (p = 0,005) zusammengefasst , Gefäßinvasion (P = 0,037) und perineuralen Invasion (P = 0,035). HK6 positiven Tumoren häufiger später hatte, eine erhöhte Inzidenz von Gefäß- und perineuralen Invasion, auf der anderen Seite kein statistisch signifikanter Unterschied zwischen Ausdruck und Geschlecht beobachtet, Alter, Tumorstelle, Größe, Differenzierung, T-Stadium, lodes Lymphe Metastasierung oder Rand (P > 0,05) .Tabelle 2 Die Beziehung zwischen KLK6 Ausdruck, Rezidiven und klinisch-pathologischen Merkmale
Eigenschaften Bei
Hüllen
Positive
Positive Rate

χ2-Wert
P-Wert
Geschlecht
1,214
0.271
Weiblich
56
46
82,1%
Nachrichten> Männlich 73
54
74,0%
Alter
0,067
0.796
< 60 Jahre
65
51
78,5%
≥60 Jahre
64
49
76,6%
Tumor
3,806
0.149
Fundus /Cardia
21
19
90,5%
Körper 32
26
81,3%
Antrum pylorus
76
55
72,4%
Tumorgröße
0.540
0.462
<
5 cm 59
44
74,6%
≥5 cm
70
56
80,0%
Differenzierung 0,004
0.951
; Gut /mäßig differenzierten 16
16
13
81,3%
schlecht differenziert
113
87
77,0%
T-Stadium
1,486
0,476
T2
19
13
68,4%
T3
55
45
81,8%
T4
55
42
76,4%
Lymph Node
1,682
0.195
N0 /N1
49
35
71,4%
N2 /N3
80
65
81,3 Vascular%
Invasion
4,370
0,037
Absent
81
58
71,6%
Präsentieren
48
42
87,5%
perineurale Invasion
4,439
0,035
Absent
76
54
71.1%
53
46
86,8%
Margin Präsentieren
0.211
0.646
Absent
110
84
76,4%
Präsentieren
19
16
84,2%
TNM-Stadium
8,029
0,005
I + II 43
27
62,8%
III + IV
86
73
84,9%
HK6 Ausdruck Assoziation mit Tumor Wiederholung und insgesamt schlechte Überleben
Wie das Follow-up beendet, 68 (52,7%) der Patienten gestorben war, insgesamt 61 Patienten wegen der Tumorprogression gestorben und 7 aufgrund anderer Ursachen. Insgesamt waren 69 (53,5%) Rezidiv entwickelt Tumorpatienten, 31, von denen als lokoregionale Rezidiv entwickelt, 19 als Fernmetastasen (11 in Leber, 3 in der Lunge und 5 in Knochen), 14 als peritoneal Rezidiv und 5 als Rest; Alle aber acht Patienten mit Rezidiven daran gestorben. Kaplan-Meier-Überlebenskurven zeigten Patienten
mit positiven HK6 Ausdruck wahrscheinlicher waren beide eine kürzere RFS zu haben (P = 0,002, 2A) im Vergleich zu Patienten mit negativem HK6 Ausdruck. Univariate Analyse Ausdruck in Bezug auf RFS, mit dem Cox Proportional Hazard Regressionsmodell zeigte, dass HK6 Ausdruck, TNM-Stadium, Tumorgröße, T-Stadium, Lymphe Erzgängen, Marge und wurden Faktoren für RFS Beeinflussung Wenn HK6 Ausdruck zusammen mit anderen Faktoren untersucht wurden, in einem multivariaten Modell, TNM-Stadium, HK6 Ausdruck, Tumorgröße, Rand waren unabhängige Prädiktoren für ein Tumorrezidiv (Tabelle 3), was darauf hinweist HK6 positiven Patienten zweimal wahrscheinlicher sind, um eine Wiederholung als HK6 negativen zu haben. Abbildung 2 Kaplan-Meier-Überlebenskurven zeigt die Wahrscheinlichkeit des rezidivfrei sein (A) und das Gesamtüberleben (B) bei Patienten mit HK6-negativ und HK6-positiven Ausdruck. Abkürzungen:. 95% CI 95% Konfidenzintervall, HR Hazard Ratio OS Gesamtüberleben, RFS rezidivfreie Überleben
Tabelle 3 Univariate und multivariate Analyse von HK6 und anderen klinisch-pathologischen Merkmale in Bezug auf RFS in fortgeschrittenem Magenkrebs

Univariate
Multivariate
Variable
HR
95%
CI
P
HR

95% CI
P
Geschlecht F /M
1,05
0,65 -1 0,69
0,86
- -
-
Alter < 60 /≥60 yr
1.30
0.81- 2.08
0,29
- -
- Tumor-Website -
- 0,58
-
-
- Körper /Fundus
0,68
0,31-1,49
0.33
- -
- Antrum /Fundus, Körper
0,88
0,45 -1,71
0,70
- -
- Die Tumorgröße < 5 /≥5 cm
2,05
1,25-3,37
0,005
1,80
1,07-3,04
0,027
Note Gut /Schlecht
0,88
0,40 -1,93
0,75
- -
- T-Stadium
-
- 0,10
- -
- T3 /T2
2,21
0,92-5,30
0.077
-
- 0,58
T4 /T2, T3
2,60
1,08 -6,26
0,032
-
- 0.75
N-Stadium N0,N1/N2,N3
2.28
1.34-3.87
0.002
–
–
0.83
Vascular−/+
0.91
0.49-1.70
0.77
–
–
–
Perineural−/+
1.27
0.71-2.25
0.42
–
–
–
Margin−/+
2.42
1.41-4.15
0.001
2.49
1.44– 4.31
0,001
TNM-Stadium I, II /III, IV
3.10
1,69-5,68
0.000
2,25
1.18 -4.30
0,014
hK6- + /
2,77
1,41-5,47
0,003
2,09
1,04 -4.
230,039
nach der Überlebensanalyse nach Kaplan-Meier-Überlebensanalyse zeigte, dass Patienten mit positiven HK6 Ausdruck haben niedrigere OS (P = 0,002, 2B), univariate Analyse ergab, dass positive HK6 Ausdruck, TNM-Stadium, Tumorgröße, Lymphknoten, T-Stadium und Marge sind wichtige Faktoren, die OS-Raten zu beeinflussen, wenn diese Faktoren beteiligt waren, in eine multivariate Analyse (Tabelle 4), TNM-Stadium und HK6 waren unabhängige prognostische Faktoren von OS.Table 4 Univariate und multivariate Analyse der prognostischen Faktoren von OS in fortgeschrittenem Magenkrebs

Univariate
multivariate

Variable
HR
95% CI
P
HR
95% CI
P

Geschlecht F /M
1.35
0,80-2,25
0,26
- -
- Alter < 60 /≥60 yr
1,59
0,95-2,67
0,08
- -
- Tumor-Website -
- 0,17
-
-
- Körper /Fundus
0,47
0,20-1,09
0.078
- -
- Antrum /Fundus, Körper
0,57
0,29 -1,13
0,11
- -
- Die Tumorgröße < 5 /≥5 cm
1,72
1,02-2,90
0,043
-
- 0,57
Grad Well /Poorly
0,57
0,26-1,27
0,17
- -
- T-Stadium
-
- 0.004
-
- 0.019
T3 /T2
1,60
0,66-3,89
0,30
0,83
0,33-2,12
0,70
T4 /T2, T3
3,36
1,38-8,15
0,007
1,86
0,73-4,70
0,19
N-Stadium N0,N1/N2,N3
2.87
1.57–5.21
0.001
–
–
0.12
Vascular−/+
1.23
0.65-2.34
0.52
–
–
–
Perineural−/+
1.32
0.71-2.43
0.38
–
–
–
Margin−/+
1.29
0.72-2.31
0.40
–
–
–
TNM Stufe I, II /III, IV
4,05
2.04- 8.03
<0.001
2.99
1.45–6.16
0.003
hK6−/+
2.88
1.40-5.92
0.004
2.66
1.25–5.63
0.011
Multivariate Analyse zeigte, dass HK6 Ausdruck einer der unabhängigen prognostischen Faktoren des Gesamtüberlebens für die Patienten mit Magenkrebs war neben TNM-Stadium (p = 0,011).
Diskussion
Studien festgestellt, dass HK6 an die extrazelluläre Matrix ausgeschieden wurde und involviert in den Abbau von Matrixproteinen einschließlich Fibronectin, Laminin, Vitronectin, Kollagen und induzierte E-Cadherin-Ektodomäne Verschütten, reduziert [11, 12], um die Zell-Zell-Adhäsion und führte zu Keratinozyten Tumorproliferation, Migration, Invasion und Metastasierung zu fördern [13 ]. Es ist bekannt, dass das menschliche HK6 in mehreren malignen Erkrankungen beteiligt sind, haben mehrere Forscher berichtet, dass HK6 bei Eierstockkrebs überexprimiert wird [14], Gebärmutter- serösen papillären Krebs [15], Darmkrebs [16], Magenkrebs [6] und Speiseröhrenkrebs [17], aber in Speicheldrüsentumoren [18] und Nierenzellkarzinom [19] unterexprimiert, die auf den Tumorgewebetypen und Mikroumgebung abhängt [20]. HK6 fördert das Wachstum der meisten Tumoren. Wenn jedoch HK6 bei Brustkrebs MDA-MB-231-Zellen überexprimiert wurde, Zellen in markiert Umkehrung ihrer bösartigen Phänotyp wurden, durch niedrigere Proliferationsraten und Sättigungsdichte manifestiert, deutliche Hemmung der Verankerung unabhängiges Wachstum, reduzierte Zellbeweglichkeit und die Fähigkeit zur Bildung Tumoren. Der Mechanismus kann sein, dass HK6 eine schützende Rolle gegen Tumorprogression durch Hemmung der epithelial-mesenchymalen Übergang zu [21].
Bisher vermittelten spielen, hat es sich gezeigt, dass in solchen KLK6 gastrointestinalen Tumoren wie Bauchspeicheldrüsen- und Dickdarm-Krebs hochreguliert [22]. Ogawa et al. [16] berichteten, dass KLK6 mRNA-Expression signifikant höher bei kanzerösen als in noncancerous colorectal Gewebe entspricht. Kim et al. [23] untersuchten die KLK6 mRNA und ihre entsprechende Proteinspiegel unter Verwendung von RT-PCR und ELISA festgestellt, dass KLK6 mRNA von etwa 8-fach hochreguliert wurde, im Vergleich zu Nicht-Tumorregionen und Serum HK6 Ebenen von Magenkrebs-Patienten war 1,7-fach bis gesunden Individuen. Wenn KLK6 mit kleinen Interferenz-RNA (siRNA) zu inaktivieren, verminderte zelluläre Invasivität um 45%. Er entdeckte auch, dass KLK6 abbauen extrazelluläre Matrixproteine ​​auf Tumor Invasivität und Metastasierung. Überexpression von exogenen KLK6 führte zu einer verminderten Aktivität des E-Cadherin-Promotor. Darüber hinaus zeigte unsere Studie die positive Rate von HK6 Expression in fortgeschrittenen Gewebe Magenkrebs signifikant höher als in benachbarten noncancerous und Magengeschwür Gewebe war. Es wurde jedoch kein Unterschied zwischen benachbarten noncancerous Gewebe und Ulcus ventriculi Gewebe. Diese Ergebnisse legen nahe, dass HK6 Ausdruck kann eine wichtige Rolle bei Magenkrebs Entwicklung spielen.
Ogawa et al. [16] berichtet, dass hohe KLK6 mRNA Expression in kolorektalen Krebsgewebe mit serösen Invasion korreliert wurden, Lebermetastasen, Bühne erweiterte Dukes jedoch begrenzt Berichte vorgeschlagen, um die Beziehung zwischen KLK6 Expression und klinisch-pathologischen Eigenschaften. Nagahara et al. [6] berichtet, dass die Überexpression von KLK6 signifikant mit TNM-Stadium, bei Patienten mit Magenkrebs Lymphgefäßinvasion verbunden war. In der aktuellen Studie, für die TNM-Stadium war die positive Rate von HK6 Expression signifikant höher in späteren Stadium (Stadium III und IV: 84,9%) als in früheren Stadium (Stadium I und Hirsch II: 62,8%). Der Unterschied war statistisch signifikant, was zeigt, dass HK6 positiven Ausdruck stark mit TNM-Stadium in fortgeschrittenem Magenkrebs korreliert. Unsere Studie zeigte auch, dass es eine Beziehung zwischen HK6 positiven Ausdruck mit Gefäßinvasion, die mit Nagahara des [6] Bericht im Einklang war. Außerdem wurde berichtet, dass HK6 positiven Ausdruck mit perineuralen Invasion assoziiert war, die nicht in Nagahara der studierte [6] Bericht, aber es muss eine weitere Studie zu überprüfen. Wir fanden keinen Zusammenhang zwischen HK6 Ausdruck in fortgeschrittenem Magenkrebs und den Patienten Geschlecht, Alter, Tumorstelle, Größe, Differenzierung, T-Stadium, Lymphe Lode Metastasierung, die mit früheren Ergebnissen überein war [6].
Eine genügend Beweise hat gezeigt, dass einige Mitglieder der KLKs potentielle Krebs Biomarkern [24] sind. Die am weitesten bekannten und verwendeten KLKs ist KLK3. KLK3 Gen kodiert für Prostata-spezifisches Antigen (hK3), wurde von der US FDA als spezifische Marker für Prostatakrebs zugelassen, die allgemein für das Screening verwendet wird, die Diagnose, die Wirksamkeit zu bestimmen und die Prognose von Prostatakrebs Beurteilung [25]. KLK2 Protein (hK2) wird auch als Sekundär Marker für Prostatakrebs betrachtet. Jüngste Berichte haben darauf hingewiesen, dass HK6 hohe Expression in Ovarialkarzinom [26], Darmkrebs [16, 27], Bauchspeicheldrüsenkrebs [28], nicht-kleinzelligem Lungenkarzinom [29] und intrakraniellen Tumoren [30] könnte ein unabhängiger prognostischer Faktor sein , was darauf hindeutet, dass HK6 ein prognostischer Marker für diese Tumoren sein kann.
Studien haben ergeben, dass hohe KLK6 Ausdruck eng mit kürzeren Gesamt und rezidivfreie Überleben für Eierstockkrebs [31] und Darmkrebspatienten [32] verbunden war. Das gleiche Ergebnis wurde in fortgeschrittenem Magenkrebs in unserer Studie bestätigt. Alle diese Faktoren deuten darauf hin, dass KLK6 ein potentieller Biomarker für sie bei der Vorhersage von Rezidiven und therapeutisches Ziel sein kann. Viele Studien zeigten übereinstimmend, dass TNM-Stadium war die zuverlässigste prognostischer Indikator für gastrointestinale Neoplasmen wie Magenkarzinom, gastrointestinalen Lymphome Patienten [9, 10, 33, 34], während andere Eigenschaften, da keine Übereinstimmung war. Jin et al. [33] gefunden Ezrin Überexpression signifikant in Lymphknotenmetastasen erhöht, Demirag et al. [10] zeigte PKP3 Ausdruck und einer schlechten Prognose erschien mit Lymphknotennummer zu korrelieren. Während in der vorliegenden Studie haben wir keinen Zusammenhang zwischen Lymphknotenmetastasen und die Prognose in der multivariaten Analyse finden.
Mit der Entwicklung von molekularen und Proteomik bei Magenkrebs, haben viele Proteine ​​für eine frühzeitige Diagnose die potentielle Marker gewesen, Prognose und Therapie Ziele des Magenkarzinoms, darunter c-Met [9], PKP2 und PKP3 [10], Ezrin [33], sind die bekannten ones.Moreover sind auch andere molekulare Biomarker zur Zeit in der Studie.
Nur wenige frühere Studien, die klinisch-pathologische sucht Bedeutung der HK6 Expression in fortgeschrittenen Magenkrebsgewebe. Somit wird in dieser Studie untersuchten wir die Korrelation von HK6 Expression mit Tumorrezidiv und Prognose bei fortgeschrittenem Magenkrebs. Die Ergebnisse zeigen, dass die Expression von HK6 signifikant mit TNM-Stadium, Gefäßinvasion, perineuralen Invasion und einer schlechten Prognose für Patienten mit fortgeschrittenem Magenkrebs in Verbindung gebracht wurde. Darüber hinaus fanden wir, dass Patienten mit positiven HK6 Ausdruck waren eher eine Wiederholung zu haben, und niedrigere RFS und OS Raten im Vergleich zu denen mit negativen HK6 Ausdruck. Multivariate Analysen bewiesen, dass HK6 Ausdruck ein bedeutender unabhängiger prognostischer Faktor von RFS und OS bei Patienten mit fortgeschrittenem Magenkrebs war. Unsere Ergebnisse unterstützen die HK6 könnten als potenzielle Biomarker und therapeutische Ziel für Magenkrebs verwendet werden. Weiterhin positive Expression von HK6 in fortgeschrittenem Magenkrebs Gewebe wertvolle Informationen liefern kann das biologische Verhalten von Magenkrebs zu verstehen.
Abschließend unsere Studie zeigte, dass HK6 Ausdruck in fortgeschrittenem Magenkrebs signifikant mit TNM-Stadium korreliert, Gefäßinvasion und perineuralen Invasion sowie RFS und OS Raten. Dies ist eine seltene Bericht HK6 Ausdruck und ihre Korrelation mit Tumorrezidiv und schlechter Prognose bei fortgeschrittenem Magenkrebs zu bewerten. Weitere Studien sind erforderlich, um die Möglichkeiten zu untersuchen, ob HK6 könnte bei der Vorhersage von Rezidiven und ein therapeutisches Ziel für Magenkrebs unter Verwendung von Serumproben von Patienten als wertvolle Biomarker verwendet werden. Und wir werden auch die KLK6 auf mRNA-Ebene aus dem Proben Gewebe nächsten Schritt untersuchen.
Erklärungen
Danksagung
Die Autoren Wenli Zhao Ming Zhong, Yingxia Liu (Abteilung für Pathologie, HuiZhou zuerst möchte danken Hospital, Guangdong Province) und Qingxu Yang, Tongtong Wu (Abteilung für Pathologie, HuiZhou Municipal Central Hospital, Provinz Guangdong) für die Hilfe bei der optischen mikroskopischen Beobachtung und Gewebeschnitt.
Finanzierung
die Studie wurde von Natural Science Foundation finanziert der Provinz Guangdong, China, (GDNSF, no.1051600101000001).
Autoren Original vorgelegt Dateien für Bilder
Nachfolgend finden Sie die Links zu den Autoren ursprünglich eingereichten Dateien für Bilder. 13000_2012_773_MOESM1_ESM.pdf Autoren Originaldatei für Abbildung 1 13000_2012_773_MOESM2_ESM.tiff Autoren Originaldatei für Abbildung 2 Konkurrierende Interessen
Die Autoren erklärten, dass sie keine Interesse haben.
Beiträge der Autoren
XL und XY pathologischen durchgeführt Prüfung, HX und JL analyzied die Daten, YH das Manuskript verfasst. Alle Autoren gelesen und genehmigt haben das endgültige Manuskript.

• Promoter-Methylierung und die Expression von TIMP3 Gen bei Magenkrebs
• Gastroprotektiver Wirkung von Johannisbrotbaum (siliqua L. Ceratonia) gegen Ethanol-induzierten oxidativen Stress in rat