Korrelasjon av Ht6 uttrykk med tumorresidiv og prognose ved avansert ventrikkelcancer

Korrelasjon av Ht6 uttrykk med tumorresidiv og prognose ved avansert ventrikkelcancer
Abstract
Bakgrunn
Menneskelig kallikrein gen 6 (KLK6) er et medlem av den menneskelige kallikrein genet familien (Kallikreins, KLKs). Humant kallikrein-relaterte peptidase 6 (Ht6) er et trypsin-lignende serinprotease som kodes av den KLK6, har blitt rapportert å være sterkt uttrykt i en rekke kreftformer, inkludert magekreft. I denne studien undersøkte vi sammenhengen av Ht6 uttrykk med clinicopathological egenskaper, tumorresidiv og prognose ved avansert magekreft etter kurativ reseksjon.
Metoder
Vi retrospektivt analysert kliniske data for 129 tilfeller avansert magekreft etter kurativ gastrektomi . Ekspresjonen av Ht6 i avanserte magekreft vev i forhold til tilstøtende noncancerous vev ble undersøkt, og forholdet mellom Ht6 ekspresjon og clinicopathological egenskaper ble evaluert. I tillegg ble disse pasientene følges opp for å undersøke forholdet mellom Ht6 uttrykk og overlevelse.
Resultater
positive frekvensen av Ht6 uttrykk var betydelig høyere i avansert magekreft vev, enn i tilstøtende noncancerous og magesår vev (36,5%, 33,3%, henholdsvis, P < 0,001). Det var en nær sammenheng mellom Ht6 uttrykk og TNM stadium (P = 0,005), vaskulær invasjon (P = 0,037) og perinevral invasjon (P = 0,035). Videre pasienter med Ht6 positiv viste signifikant høyere tilbakefall og dårligere prognose enn de med Ht6 negativ. Multivariat analyse viste at Ht6 uttrykk var en betydelig selvstendig faktor for svulst tilbakefall og total overlevelse.
Konklusjon
Ht6 er overuttrykt i avansert ventrikkelcancer vev. Sin kliniske nytte kan brukes som en ugunstig indikator for å forutsi tumorresidiv og prognose for avansert magekreft etter operasjonen. Denne studien tyder også på at Ht6 kan være et potensielt terapeutisk mål for magekreft
virtuelle lysbilder
virtuelle lysbilde (er) for denne artikkelen finner du her:. Http: //www. Diagnosticpathol logi. diagnomx. eu /vs /8558403578787206
nøkkelord
Mage neoplasmer Menneskelig kallikrein relaterte peptidase 6 (Ht6) gjentakelse svulst markørene Innledning
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP er en av de vanligste kreftformen og den nest største årsaken til dødsfall blant alle krefttilfeller i den kliniske [1], og kirurgisk reseksjon er fortsatt i dag den eneste behandlingen med kurativ. Selv om operasjonen, har postoperativ kjemoterapi-strålebehandling immunterapi, målrettet terapi de tverrfaglige samarbeidsmodus bedret overlevelsen av mage kreftpasienter. Fortsatt postoperativ tilbakefall av magekreft er høy, spesielt avansert magekreft (avansert magekreft viser til at tumor invaderer til muskularis propria eller gjennom muskularis til serøse hinnen og ekstra serosa). Og tidlig diagnose er vanskelig, spesifikke tumormarkører i påvisning av tumorresidiv ennå ikke er oppdaget.
Den KLKs består av 15 homologe gener som koder for utskilte som serinproteaser, lokalisert i tandem på kromosom 19q13.4. De KLKs har tilsvarende genomiske organisasjoner, og viser signifikant homologi på både nukleotid og proteinnivå. Det samme gen av familien blir uttrykt i forskjellige vev, og multiple gener er vanligvis uttrykt i de samme vev [2].
KLK6 er et medlem av KLKs, som koder for humant kallikrein-beslektet peptidase 6 (Ht6). Det er en serin protease som består av 223 aminosyrer med trypsin-lignende aktivitet. Ht6 har blitt klonet uavhengig av tre grupper, med en differensial skjerm teknikk fra primær- og metastatisk brystkreft cellelinjer. Anisowicz et al. [3] først isolerte full-lengde cDNA av KLK6, kalt protease M, som er sterkt uttrykt på mRNA-nivå i visse primær brystkreft-cellelinjer og ovarialkreft vev og cellelinjer. Yamashiro et al. [4] klonet dette samme genet, kalt neurosin, fra et cDNA-bibliotek fremstilt fra en human kolorektal kreft cellelinje (COLO 201). Til slutt, Little et al. [5] klonet identisk cDNA, kalt Zyme, fra hjernevevet hos en pasient med Alzheimers sykdom, som spilte en viktig rolle i utviklingen og progresjonen av Alzheimers sykdom. Studien fant at Ht6 ble sterkt uttrykt i magekreft og indikerte dårlig prognose [6].
Til vår beste kunnskap, få studier har undersøkt om den kliniske betydningen av Ht6 uttrykk i avansert magekreft med tilbakefall og prognose. I denne studien, vurderte vi uttrykk for Ht6 i kirurgiske prøver ved fremskreden ventrikkelcancer vev, sammen tilstøtende noncancerous vev og magesår vev ved hjelp av immunhistokjemi HRP, og analysert deres korrelasjoner med clinicopathological egenskaper og pasienter overlevelse for å avklare betydningen av Ht6 i avansert magekreft etter kurativ kirurgi.
Materialer og metoder
pasienter og innsamling av vevsprøver
totalt 129 prøver ble innhentet fra pasienter fra januar 2007 til november 2011 som gjennomgikk kurativ kirurgi for avansert magekreft i Huizhou Municipal sentral~~POS=TRUNC i Guangdong. Reseksjon prøvene ble bekreftet å være primær avansert magekreft med klinisk patologi, ingen av pasientene mottatt noen cellegift, strålebehandling og annen adjuvant behandling før operasjonen. 52 blokker fra tilstøtende noncancerous gastrisk vev (minst 5 cm fra kreft margin) ble oppnådd fra pasientene. I tillegg 36 prøver hentet fra pasienter som gjennomgikk kirurgi og ble bekreftet å være magesår brukt som kontroller i samme periode.
Pasienter , clinicopathological egenskaper som kjønn og alder, tumor plassering, størrelse, differensiering, T stadium, lymfeknutemetastase, TNM stadium og om tilbakefall ble retrospektivt gjennomgått. Gjennomsnittsalderen var 60 år (range: 28 ~ 80 år) med 56 kvinner og 73 menn. Alle pasientene ble iscenesatt basert på TNM klassifisering av det amerikanske Joint Committee on Cancer (AJCC, 7. utgave kriterier, 2010) [7] .Tumor beliggenhet i mage fundus /Cardia var 21 saker, mage kropps 32 tilfeller, mage antrum 76 tilfeller . Tumorstørrelse ble større enn 5 cm i 70 tilfeller, og mindre enn 5 cm i 59 tilfeller 16 tilfeller klassifisert i tillegg eller moderat differensierte (inkludert rørformet og papillære adenokarsinom), 113 tilfeller som dårlig differensiert (dårlig differensiert adenokarsinom og andre celletyper slike som mucinous adenokarsinom og signetring cell carcinoma og så videre), 19 tilfeller var på T2, 55 saker var på T3 og T4 hhv. N0 /N1 ble funnet i 49 tilfeller, N2 /N3 i 80 tilfeller, 43 tilfeller Withi /II scene, 86 tilfeller med III /IV scenen, ble skriftlig informert samtykke innhentes fra alle pasienter eller deres familier. Studien ble godkjent av Institute , s Ethics Committee of Huizhou Municipal Central Hospital. Alle prøvene ble fiksert i 10% nøytralisert maldehyde, innstøpt i parafin, kuttet i tre-mikrometer tykke seksjoner, og montert på objektglass for immunhistokjemisk analyse.
Immunhistokjemi
Immunhistokjemi ble utført ved anvendelse av pepperrot peroksidase to-trinns metode som unngår forstyrrelser av endogent biotin, og dermed redusere den ikke-spesifikke falsk-positive bakgrunnsfarging. Immunhistokjemi ble gjennomført i åtte trinn i henhold til instruksjonene: 1, ble parafinsnitt deparaffinized i xylen, rehydrert gjennom gradient etanol. 2, Antigen gjenfinning ble utført i Tris-EDTA-buffer (pH 9,0) med en trykkoker. 3, Block den endogen peroksidase med 3% hydrogenperoksyd. 4, deretter inkuberes med renset kanin polyklonale antistoff (AP6325a, Abgent, San Diego, USA), ble antigen gjenfinning og fortynning bestemmes av foreløpige eksperimenter. 5, Påvisning av Ht6 immun ble inkubert med PV9000 kits (Golden Bridge Bioteknologi Co, Ltd, Beijing, Kina). 6, Farget med diaminobenzidine underlaget kromogenløsning (Goldenbridge Bioteknologi Co, Ltd) inntil optimal farging ble oppnådd. 7, Seksjonene ble kontra med hematoksylin, differensiert, returneres blå. 8, slutt dehydrert gjennom gradient alkohol, ryddet i xylen, nøytral tyggegummi montert. Deretter observert under optisk mikroskop.
Immunhistokjemisk farging poengsum
Alle snittene ble separat av to senior patologer med noen tidligere kjennskap til clinicopathological parametere, den endelige poengsummen for deres gjennomsnitt. For vurdering av Ht6 immunhistokjemisk farging, ble prosentandelen av positive celler vurderes kvantitativt 10 felt innen tumoren ble valgt tilfeldig, ekspresjon i 1000 kreftceller (100 celler pr felt) ble evaluert ved anvendelse av en høyeffekts magnifcation (400 x) og en gjennomsnittlig ble undersøkt kvantitativt og scoret som: 0 til prosentandelen av positive celler ≤ 10%, en for farging av 11 ~ 25%, 2 til farging av 26 ~ 50%, og 3 for farging av 51 ~ 75%, 4 for farging av > 75% av cellene undersøkt [6], fargeintensitet var henholdsvis gradert semikvantitativt som følger: 0 ingen signal, en svak, 2 moderat, og 3 sterk i henhold til de tidligere litteratur [8], en total farging score på 4 eller mer ble gradert som immunhistokjemisk positiv.
Oppfølging
Alle disse pasientene fikk fluorouracil basert adjuvant kjemoterapi etter operasjonen. Som en vanlig oppfølging, ble alle pasientene kontrolleres hver 3. måned i løpet av de første 2 årene og hver 6. måned i løpet av tredje til femte år, en gang i året. Medisinsk utredning besto av historie og fysisk undersøkelse, hematologi og biokjemiske tester, inkludert serum CEA, CA19-9 og CA72-4, og bildebehandling inkludert brystet radiografi, barium måltid, abdominal ultralyd (US), computertomografi (CT), og endoskopi i henhold til den kliniske situasjonen. Oppfølgings tid hadde dagen for kirurgi som et utgangspunkt, tiden for tumorresidiv og død ble registrert, disse to punktene ble evaluert for prognostisk analyse. Hvis oppfølging var ufullstendige, ble pasienter eller pårørende kontaktet via telefon, fristen for oppfølging var mai 2012, median oppfølgingsperiode etter operasjonen var 25 måneder (variasjon 4-64 måneder).
statistisk analyse
statistisk analyse ble utført ved hjelp av SPSS 13.0, ble forholdet mellom Ht6 uttrykk og pasient clinicopathological egenskaper analysert med Chi-square (χ 2) og Fishers eksakte test. For overlevelsesanalyse, ble to endepunkter undersøkes: tilbakefall overlevelse (RFS) og total overlevelse (OS) hhv. RFS er definert som tidsintervallet mellom datoen for kirurgi og dato for første gang påvist tilbakefall eller metastaser, og OS er definert som tidsintervallet mellom datoen for kirurgi og dødsdato eller dato for siste oppfølging for de som var i live ved slutten av studien. Kaplan-Meier-modellen ble brukt til å undersøke overlevelse mellom pasienter som er positive og negative Ht6 uttrykk. Betydningen av noen forskjell i overlevelseskurver ble bestemt ved log-rank test. Variabler oppnå et signifikansnivå på univariate analysen ble deretter innført i en fremre LR proporsjonal fareanalyse (Cox-modellen) for å identifisere de variable uavhengig av hverandre forbundet med overlevelse, ble p-verdi på 0,05 (eller mindre) anses som statistisk signifikant.
resultatene
Ht6 ekspresjon i avanserte magekreft vev
forskjellige proteiner ble uttrykt i forskjellig plassering av cellen, slik som cytoplasma, membran, atom [9, 10] ble .hK6 positiv farging hovedsakelig uttrykt i cytoplasma av magekreft celler som brun eller mørk brun granulater (figur 1) også ble observert i de tilstøtende noncancerous og magesår epitelceller ved immunhistokjemi. Den positive frekvensen av KLK6 ekspresjon i magekreft vev var henholdsvis 77,5% (100/129), vesentlig høyere enn i tilstøtende noncancerous vev (36,5%) og sår (33,3%) vev (P < 0,001; Tabell 1). Figur 1 Immunohistokjemisk farging av Ht6 i den avanserte gastrisk karsinom (A, B) og tilstøtende noncancerous (C, D) vev. En Ht6 positivt uttrykk; B Ht6 negative uttrykk; C Ht6 positivt uttrykk; D Ht6 negative uttrykk.
Tabell 1 Uttrykket av Ht6 i tilstøtende noncancerous, magesår og avansert ventrikkelcancer vev
Gruppe
Skaper Book Positive
Positiv rate

χ2-value

P-value

GCT
129
100
77.5%
39.201
<0.001a
ANT
52
19
36.5%
0.096
0.757b
GUT
36
12
33.3%
Forkortelse: ANT
, Tilliggende noncancerous vev; GUT
, magesår vev; GCT magekreft når GCT sammenlignet med ANT og GUT, P < 0.001, ANT forhold til GUT, P = 0,757.
Ht6 uttrykk og clinicopathological egenskaper
sammenheng mellom Ht6 uttrykk nivåer og clinicopathological egenskaper er som oppsummert i tabell 2, Ht6 uttrykk signifikant korrelert med TNM stadium (P = 0,005) , vaskulær invasjon (P = 0,037) og perinevral invasjon (P = 0,035). Ht6 positive tumorer oftere hadde senere stadium, økt forekomst av vaskulær og perinevral invasjon, på den annen side ble det ikke observert noen statistisk signifikant forskjell mellom sin ekspresjon og kjønn, alder, tumorlokalisering, størrelse, differensiering, T stadium, lodes lymfeknutemetastase eller margin (P > 0,05) .table 2 forholdet mellom KLK6 uttrykk, tumor tilbakefall og clinicopathological egenskaper
Kjennetegn Book Cases Book Positive
Positiv hastighet

χ2-verdien
P-verdi
Kjønn
1,214
0.271
Kvinne
56
46
82,1%
Mann fra 73
54
74,0%
Age
0,067
0,796
< 60 år
65
51
78,5%
≥60 år
64
49
76,6%
Tumor nettstedet
3,806
0,149
fundus /Cardia
21
19
90,5%
kroppen
32
26
81,3%
antrum pylorus
76
55
72,4%
Tumor størrelse
0.540
0,462
< 5 cm
59
44
74,6%
≥5 cm
70
56
80,0%
Differensiering
0,004
0,951
vel /moderat differensiert 16
16
13
81,3%
Dårlig differensiert
113
87
77,0%
T scenen
1,486
0,476
T2
19
13
68,4%
T3
55
45
81,8%
T4
55
42
76,4%
Lymfeknute
1,682
0,195
N0 /N1
49
35
71,4%
N2 /N3
80
65
81,3 %
Vaskulær invasjon
4.370
0,037
Fraværende
81
58
71,6%
Presenter
48
42
87,5%
perinevral invasjon
4,439
0,035
Fraværende
76
54
71,1%
Presenter
53
46
86,8%
Margin
0,211
0,646
Fraværende
110
84
76,4%
Presenter
19
16
84,2%
TNM stadium
8,029
0,005
I + II
43
27
62,8%
III + IV
86
73
84,9%
Ht6 uttrykk forbindelse med svulst tilbakefall og dårlig total overlevelse
Som oppfølging avsluttet, hadde 68 (52,7%) av pasientene døde, totalt 61 pasienter døde på grunn av tumorprogresjon og 7 på grunn av andre årsaker. I alt var det 69 (53,5%) av pasientene utviklet tumor tilbakefall, 31 av dem utviklet som lokoregionalt tilbakefall, 19 som fjernmetastaser (11 i leveren, tre i lungene, og fem i bein), 14 som peritoneal tilbakefall og 5 som rest; Alle men åtte pasienter med svulst tilbakefall døde av det.
Kaplan-Meier overlevelseskurver indikert pasienter med positiv Ht6 uttrykket var mer sannsynlig å ha både en kortere RFS (P = 0,002, figur 2A) sammenlignet med pasienter med negativ Ht6 uttrykk. Univariat analyse uttrykk med hensyn til RFS, ved hjelp av Cox proporsjonal fare regresjonsmodell, viste at Ht6 uttrykk, TNM stadium, tumorstørrelsen, T stadium, lymfe lodes, marg og ble påvirkende faktorer for RFS, Når Ht6 uttrykk sammen med andre faktorer ble undersøkt i en multivariat modell, TNM stadium, Ht6 uttrykk, tumorstørrelse, margin var uavhengige prediktorer for tumorresidiv (tabell 3), noe som indikerer Ht6 positive pasienter er to ganger mer sannsynlig å ha en gjentakelse enn Ht6 negative. Figur 2 Kaplan-Meier-overlevelseskurver viser sannsynligheten for å være fri for tilbakefall (A) og total overlevelse (B) i pasienter med Ht6-negativ og positiv Ht6-ekspresjon. Forkortelser:. 95% KI 95% konfidensintervall, HR hazard ratio, OS total overlevelse, RFS gjentakelse overlevelse
Tabell 3 Univariat og multivariat analyse av Ht6 og andre clinicopathological egenskaper med hensyn til RFS i avansert magekreft

Univariat
Multivariate
Variabel
HR
95% KI
P
HR

95% KI
P
Kjønn F /M
1,05
0,65 -1 0,69
0.86 -
-
-
Age < 60 /≥60 år
1,30
0.81- 2.08
0,29 -
- -
Tumor stedet -
-
0,58
- -
-
kroppen /fundus
0,68
0,31 til 1,49
0,33 -
- -
antrum /fundus, kropp
0.88
0,45 -1,71
0,70 -
- -
Tumor størrelse < 5 /≥5 cm
2.05
1,25 til 3,37
0,005
1,80
01.07 til 03.04
0,027
klasse Vel /Dårlig
0,88
0,40 -1,93
0,75 -
- -
T scenen -
-
0,10 -
- -
T3 /T2
2.21
0,92 til 5,30
0,077 -
-
0,58
T4 /T2, T3
2,60
1,08 -6,26
0,032
- -
0,75
N scenen N0,N1/N2,N3
2.28
1.34-3.87
0.002
–
–
0.83
Vascular−/+
0.91
0.49-1.70
0.77
–
–
–
Perineural−/+
1.27
0.71-2.25
0.42
–
–
–
Margin−/+
2.42
1.41-4.15
0.001
2.49
1.44– 4.31
0,001
TNM stadium I, II /III, IV
3,10
1,69 til 5,68
0.000
2,25
1,18 -4,30
0,014
hK6- /+
2,77
1,41 til 5,47
0,003
2.09
1,04 -4.
230,039
Ifølge overlevelsesanalyse viste Kaplan-Meier overlevelsesanalyse at pasienter med positiv Ht6 uttrykk har lavere OS (P = 0,002, figur 2B), univariat analyse viste at positive Ht6 uttrykk, TNM stadium, tumor størrelse, lymfeknute, T scenen, og marginen er viktige faktorer som påvirker OS priser, da disse faktorene var involvert i en multivariat analyse (tabell 4), TNM stadium og Ht6 var uavhengige prognostiske faktorer av OS.Table 4 Univariat og multivariat analyse av prognostiske faktorer av OS i avansert magekreft Book Univariat
multivariate

Variabel
HR
95% KI
P
HR
95% KI
P
Kjønn F /M
1.35
0,80 til 2,25
0,26 -
- -
Age < 60 /≥60 år
1.59
0,95 til 2,67
0,08 -
- -
Tumor stedet -
-
0,17
- -
-
kroppen /fundus
0,47
0,20 til 1,09
0,078 -
- -
antrum /fundus, kropp
0,57
0,29 -1,13
0,11 -
- -
Tumor størrelse < 5 /≥5 cm
1,72
1,02 til 2,90
0,043 -
-
0,57
klasse Vel /Dårlig
0,57
0,26 til 1,27
0,17 -
- -
T scenen -
-
0,004 -
-
0,019
T3 /T2
1,60
0,66 til 3,89
0,30
0,83
0,33 til 2,12
0,70
T4 /T2, T3
3,36
1,38 til 8,15
0,007
1,86
0,73 til 4,70
0,19
N scenen N0,N1/N2,N3
2.87
1.57–5.21
0.001
–
–
0.12
Vascular−/+
1.23
0.65-2.34
0.52
–
–
–
Perineural−/+
1.32
0.71-2.43
0.38
–
–
–
Margin−/+
1.29
0.72-2.31
0.40
–
–
–
TNM stadium I, II /III, IV
4.05
2.04- 8.03
<0.001
2.99
1.45–6.16
0.003
hK6−/+
2.88
1.40-5.92
0.004
2.66
1.25–5.63
0.011
Multivariat analyse viste at Ht6 uttrykk var en av de uavhengige prognostiske faktorer av total overlevelse for pasienter med magekreft ved siden av TNM stadium (P = 0,011).
Diskusjon
studier har funnet at Ht6 ble utskilt til det ekstracellulære matrise og som er involvert i nedbrytningen av matriksproteiner, inkludert fibronektin, laminin, vitronektin, kollagen og indusert E-cadherin ectodomain utstøtingen, redusert celle-celle adhesjon [11, 12] og førte til keratinocytt for å fremme tumor proliferasjon, migrering, invasjon og metastase [13 ]. Det er kjent at menneske Ht6 er involvert i flere kreftformer, har flere forskere rapportert at Ht6 er overuttrykt i eggstokkreft [14], livmor serøs papillær kreft [15], tykktarmskreft [16], magekreft [6] og spiserørskreft [17], men underexpressed i spyttkjertelsvulster [18] og nyrecellekarsinom [19], som avhenger av tumor vevstyper og mikromiljøet [20]. Ht6 fremmer veksten av de fleste svulster. Men når Ht6 ble overuttrykt i brystkreft MDA-MB-231 celler ble cellene resulterte i markert reversering av sitt ondartede fenotype, manifestert ved lavere spredning priser og metningstetthet, merket hemming av forankringsuavhengig vekst, redusert cellemotilitet og evne til å danne svulster. Mekanismen kan være at Ht6 spille en beskyttende rolle mot tumorprogresjon mediert ved inhibering av epitel-til-mesenchymale overgang [21].
Til dags dato, har det vist seg at KLK6 blir oppregulert i slike gastrointestinale maligniteter som bukspyttkjertel og tykktarmskreft [22]. Ogawa et al. [16] rapporterte at KLK6 mRNA uttrykk var betydelig høyere i kreft enn i tilsvarende noncancerous kolorektal vev. Kim et al. [23] undersøkte KLK6 mRNA, og tilsvarende proteinnivåer ved hjelp av RT-PCR og ELISA, fant at KLK6 mRNA ble oppregulert med om lag åtte ganger, sammenlignet med nontumor regioner, og serum Ht6 nivåer fra mage kreftpasienter var 1,7 ganger til sunn enkeltpersoner. Når inaktivere KLK6 med liten forstyrrelse RNA (siRNA), redusert cellulær invasivitet med 45%. Han oppdaget også at KLK6 degradere ekstracellulære matrix proteiner til tumor invasivitet og metastasering. Eksogene overekspresjon av KLK6 ført til redusert aktivitet av E-cadherin promoter. Videre vår studie viste positive frekvensen av Ht6 uttrykk i avansert ventrikkelcancer vev var betydelig høyere enn i tilstøtende noncancerous og magesår vev. Imidlertid, ingen forskjell ble funnet mellom tilstøtende noncancerous vev og magesår vev. Disse funnene tyder på at Ht6 uttrykk kan spille en viktig rolle i magekreftutvikling.
Ogawa et al. [16] rapporterte at høye KLK6 mRNA uttrykk nivåer i kolorektal kreft vev ble korrelert med serøse invasjon, levermetastaser, avansert Duke etappe, men begrensede rapporter antydet forholdet mellom KLK6 uttrykk og clinicopathological egenskaper. Nagahara et al. [6] rapporterte at overekspresjon av KLK6 var signifikant assosiert med TNM stadium, lymfatisk invasjon for pasienter med magekreft. I denne studien, for TNM stadium, den positive frekvensen av Ht6 uttrykk var betydelig høyere i senere stadium (stadium III og stadium IV: 84,9%) enn i tidligere stadium (stadium I og hjort II: 62,8%). Forskjellen var statistisk signifikant, noe som viser at Ht6 positivt uttrykk var sterkt korrelert med TNM stadium i avansert magekreft. Vår studie viste også at det var en sammenheng mellom Ht6 positivt uttrykk med vaskulær invasjon, som var i samsvar med Nagahara s [6] rapport. I tillegg ble det rapportert at Ht6 positivt uttrykk var assosiert med perinevral invasjon, som ikke studert i Nagahara s [6] rapporten, men det er behov for videre studier for å bekrefte. Vi fant ingen sammenheng mellom Ht6 uttrykk i avansert magekreft og pasienten kjønn, alder, tumorlokalisering, størrelse, differensiering, T scenen, lymfe lode metastaser, som var i overensstemmelse med tidligere resultater [6]., En nok av bevis har vist at flere medlemmer av KLKs er potensielle kreft biomarkører [24]. Den mest kjente og brukte KLKs er KLK3. KLK3 genet koder for prostataspesifikt antigen (HK3), har blitt godkjent av US FDA som spesifikk markør for prostatakreft, som er mye brukt for screening, diagnostisering, bestemme effekt og vurdere prognose av prostatakreft [25]. KLK2 protein (hK2), er også ansett som en sekundær markør for prostatakreft. Nye rapporter har indikert at Ht6 høyt uttrykk i eggstokkreft [26], tykktarmskreft [16, 27], bukspyttkjertelkreft [28], ikke-småcellet lungekreft [29] og intrakranielle svulster [30] kan være en uavhengig prognostisk faktor , noe som tyder på at Ht6 kan være en prognostisk markør for disse svulstene.
studier har antydet at høy KLK6 uttrykk var nært forbundet med kortere samlet og tilbakefall overlevelse for eggstokkreft [31] og tykktarmskreftpasienter [32]. Det samme resultatet ble bekreftet i avansert magekreft i vår studie. Alle disse tyder på at KLK6 kan være en potensiell biomarkør i å forutsi tumorresidiv og terapeutisk mål for dem. Mange studier viste at konsekvent TNM stadiet var den mest pålitelige prognostisk indikator for gastrointestinale neoplasmer slik som gastrisk karsinom, gastrointestinale lymfomer pasienter [9, 10, 33, 34], mens andre egenskaper, var det ingen enighet. Jin et al. [33] fant ezrin overekspresjon økt betydelig i lymfeknutemetastaser, Demirag et al. [10] viste PKP3 uttrykk og dårlig prognose viste seg å korrelere med lymfeknute nummer. Mens i denne studien, fant vi ikke noen sammenheng mellom lymfeknutemetastase og prognose i multivariat analyse.
Med utvikling av molekylære og proteomikk i magekreft, har mange proteiner vært de potensielle markører for tidlig diagnose, prognose og terapeutisk mål for magekreft, blant dem c-Met [9], PKP2 og PKP3 [10], ezrin [33], er den kjente ones.Moreover, andre molekylære biomarkører er for tiden i undersøkelsen.
Få tidligere studier undersøkte clinicopathologic betydningen av Ht6 uttrykk i avansert ventrikkelcancer vev. Derfor, i denne studien, undersøkte vi sammenhengen av Ht6 uttrykk med tumorresidiv og prognose i avansert magekreft. Funnene tyder på at uttrykket av Ht6 var signifikant assosiert med TNM stadium, vaskulær invasjon, perinevral invasjon og dårlig prognose for pasienter med avansert magekreft. Videre fant vi at pasienter med positiv Ht6 uttrykk var mer sannsynlig å ha tilbakefall, og lavere RFS og OS priser sammenlignet med de med negative Ht6 uttrykk. Multivariat analyse viste at Ht6 uttrykk var en betydelig uavhengig prognostisk faktor på RFS og OS hos pasienter med avansert magekreft. Våre funn støtter at Ht6 kan brukes som en potensiell biomarkør og terapeutisk mål for magekreft. Videre kan positivt uttrykk for Ht6 i avansert ventrikkelcancer vev gi verdifull informasjon for å forstå biologiske oppførsel av magekreft.
Konklusjonen vår studie viste at Ht6 uttrykk i avansert magekreft signifikant korrelert med TNM stadium, vaskulær invasjon og perinevral invasjon samt RFS og OS priser. Dette er en sjelden rapport for å vurdere Ht6 uttrykk og dens korrelasjon med tumorresidiv og dårlig prognose i avansert magekreft. Videre studier vil være nødvendig for å utforske mulighetene om Ht6 kan brukes som et verdifullt biomarkør i å forutsi tumorresidiv og et terapeutisk mål for magekreft ved hjelp av serumprøver fra pasienter. Og vi vil også
undersøke KLK6 på mRNA-nivå fra vevsprøver neste trinn. Erklæringer
Takk
Forfatterne ønsker å takke Wenli Zhao, Ming Zhong, Yingxia Liu (avdeling for patologi, Huizhou først Hospital, Guangdong-provinsen) og XU Yang, Tongtong Wu (avdeling for patologi, Huizhou Municipal Central Hospital, Guangdong-provinsen) for å få hjelp med den optiske mikroskopisk observasjon og vev delen.
Funding
studien ble finansiert av Natural Science Foundation i Guangdong-provinsen, Kina, (GDNSF, no.1051600101000001).
Forfattere 'originale legges filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes opprinnelige innsendte filer for bilder. 13000_2012_773_MOESM1_ESM.pdf Forfatteroriginalfilen for figur 1 13000_2012_773_MOESM2_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 2 konkurrerende interesser
Forfatterne erklært at de ikke har noen konkurrerende interesse.
Forfatternes bidrag
XL og XY utført patologisk undersøkelse, HX og JL analyzied dataene, YH utarbeidet manuskriptet. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Promoter metylering og ekspresjon av genet i TIMP3 gastrisk cancer
• Magesekk effekten av carob (johannesbrødtre L.) mot etanol-indusert oksidativt stress i rat