Correlação de expressão HK6 com recidiva tumoral e prognóstico no câncer gástrico avançado

Correlação de expressão HK6 com recidiva tumoral e prognóstico no câncer gástrico avançado da arte abstracta
Fundo
gene calicreína Humano 6 (KLK6) é um membro da família de genes calicreína humana (Calicreínas, KLKs). Humana peptidase relacionados com calicreína 6 (HK6) é uma protease da serina semelhante a tripsina codificado pelo KLK6, tem sido relatada a ser altamente expresso em vários cancros, incluindo o cancro gástrico. Neste estudo, foi investigada a correlação de expressão HK6 com características clinicopatológicas, recidiva tumoral e prognóstico em carcinoma gástrico avançado após a ressecção curativa.
Métodos
Foram analisados ​​retrospectivamente os dados clínicos de 129 casos avançados de câncer gástrico após gastrectomia curativa . A expressão de HK6 em tecidos de cancro gástrico avançado, em comparação com tecidos não cancerosos adjacentes foram examinados, e a relação entre a expressão HK6 e características clinicopatológicas foi avaliada. Em adicional, esses pacientes foram acompanhados para investigar a relação entre a expressão HK6 e o ​​tempo de sobrevivência.
Resultados
A taxa positiva de expressão HK6 foi significativamente maior no tecido do cancro gástrico avançado, do que na úlcera gástrica não canceroso e adjacente tecidos (36,5%, 33,3%, respectivamente, P < 0,001). Não havia uma relação estreita entre a expressão HK6 e estágio TNM (P = 0,005), invasão vascular (P = 0,037) e invasão perineural (P = 0,035). Além disso, os pacientes com HK6 positiva mostrou significativamente maior de recorrência e de pior prognóstico do que aqueles com HK6 negativo. A análise multivariada mostrou que a expressão HK6 era um fator independente significativo para a recidiva do tumor e sobrevida global.
Conclusão
HK6 é sobre-expresso em tecidos de câncer gástrico avançado. A sua utilidade clínica pode ser usado como um indicador desfavorável em prever a recorrência do tumor e o prognóstico para o cancro gástrico avançado após a operação. Este estudo também sugere que HK6 pode ser um potencial alvo terapêutico para câncer gástrico
lâminas virtuais
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Palavras-chave
neoplasias de estômago peptidase calicreína-relacionada 6 marcadores tumorais (HK6) recorrência Introdução
câncer gástrico humano é um dos tumores malignos mais comuns e a segunda principal causa de morte entre todos os cânceres na ressecção clínica [1], e cirúrgico permanece atualmente o único tratamento com curativo. Mesmo se a cirurgia, pós-operatório quimio-radioterapia imunoterapia, terapia direcionada àqueles modo colaborativo multidisciplinar melhorou a taxa de sobrevivência de pacientes com câncer gástrico. Ainda assim, a taxa de recorrência pós-operatório de câncer gástrico é alta câncer gástrico especialmente avançado, (câncer gástrico avançado refere-se que o tumor invade a muscular própria ou através dos muscularis a serosa e serosa adicional). Eo diagnóstico precoce é difícil, os marcadores tumorais específicas na detecção de recorrência do tumor ainda não foi descoberto. Tours A KLKs composto por 15 genes homólogos qual a codificação secretadas proteases de serina, localizadas no tandem em cromossomo 19q13.4. Os KLKs têm organizações genômicas semelhantes e mostram homologia significativa, tanto a nível de proteína de nucleotídeos e. O mesmo gene da família é expresso em diferentes tecidos, e múltiplos genes são normalmente expressos no mesmo tecido [2].
KLK6 é um membro da KLKs, que codifica para a peptidase-calicreína humana relacionada 6 (HK6). É uma protease de serina constituído por 223 aminoácidos com actividade do tipo tripsina. HK6 foi clonado de forma independente por três grupos, usando uma técnica de exibição diferencial a partir de linhas celulares de cancro da mama primários e metastáticos. Anisowicz et ai. [3] pela primeira vez isolado o ADNc de comprimento completo de KLK6, chamado de protease M, que é fortemente expressa no nível de ARNm em certas linhas celulares de cancro da mama primário e em tecidos de cancro do ovário e linhas celulares. Yamashiro et al. [4] clonado este mesmo gene, denominado neurosina, a partir de uma biblioteca de ADNc preparada a partir de uma linha celular de cancro colo-rectal humano (Colo 201). Finalmente, Little et ai. [5] clonado o ADNc idênticas, chamado Zyme, a partir do tecido cerebral de um doente com doença de Alzheimer, que desempenhou um papel importante no desenvolvimento e progressão da doença de Alzheimer. Estudo constatou que HK6 foi altamente expressa em câncer gástrico e indicou mau prognóstico [6].
Para nosso melhor conhecimento, poucos estudos têm sido investigados sobre o significado clínico de expressão HK6 no cancro gástrico avançado com recidiva e prognóstico. Neste estudo, avaliamos a expressão de HK6 nos espécimes cirúrgicos de tecidos de câncer gástrico avançado, emparelhado tecidos não cancerosos adjacentes e tecidos úlcera gástrica utilizando imuno-histoquímica HRP, e analisou suas correlações com características clínicas e pacientes de sobrevivência para esclarecer o significado da HK6 em avançado câncer gástrico após a cirurgia curativa.
Materiais e métodos
pacientes e coleta de amostras de tecido
um total de 129 amostras foram obtidas de pacientes de janeiro de 2007 a novembro de 2011 que foram submetidos à cirurgia curativa para o cancro gástrico avançado em Huizhou Municipal Hospital Central de Guangdong. amostras de ressecção foram confirmados para ser câncer gástrico avançado primário, patologia clínica, nenhum dos pacientes recebeu qualquer quimioterapia, radioterapia e outra terapia adjuvante antes da operação. 52 blocos de tecidos gástricos não cancerosos adjacentes (pelo menos 5 cm de distância da margem do cancro) foram obtidos a partir dos pacientes. Além disso, 36 amostras obtidas de pacientes submetidos à cirurgia e foram confirmados para ser úlcera gástrica usados ​​como controles no mesmo período.
Pacientes , as características clinicopatológicas, tais como sexo e idade, localização do tumor, o tamanho, a diferenciação, T palco, metástase linfonodal, estádio TNM e se recidiva foram analisados ​​retrospectivamente. A idade média foi de 60 anos (intervalo: 28 ~ 80 anos) com 56 mulheres e 73 homens. Todos os pacientes foram encenadas com base na classificação TNM da American Joint Committee on Cancer (AJCC, critérios 7ª edição, 2010) [7] .Tumor localização no fundo gástrico /cárdia foi de 21 casos, corpo gástrico 32 casos, antro gástrico 76 casos . O tamanho do tumor foi maior que 5 cm em 70 casos, e menos de 5 cm em 59 casos, 16 casos classificados como bem ou moderadamente diferenciados (incluindo tubular e adenocarcinoma papilar), 113 casos de pouco diferenciado (mal adenocarcinoma diferenciado e outros tipos de células tais como adenocarcinoma mucinoso e carcinoma de células anel de sinete e assim por diante), 19 casos estavam em T2, 55 casos foram em T3 e T4, respectivamente. N0 /N1 foi encontrada em 49 casos, N2 /N3 em 80 casos, 43 casos withi /estágio II, 86 casos com III /IV fase, consentimento informado foi obtido de todos os pacientes ou seus familiares. O estudo foi aprovado pelo Instituto , s Comitê de Ética de Huizhou Hospital Central Municipal. Todos os espécimes foram fixados em 10% maldehyde neutralizado, embebidos em parafina, cortadas em 3 mm de espessura, e montada em lâminas de vidro para análise imuno-histoquímica.
Imunohistoquímica
A imuno-histoquímica foi realizada utilizando o método de duas etapas Peroxidase de Rábano , o qual evita a interferência de biotina endógena, reduzindo, assim, o fundo não específico de coloração falso-positivo. A imuno-histoquímica foi levada a cabo em oito passos de acordo com as instruções: 1, As secções de parafina foram desparafinizadas em xileno, re-hidratadas por meio de gradiente de etanol. 2, recuperação antigênica foi realizada em tampão Tris-EDTA (pH 9,0) com uma panela de pressão. 3, Bloco da peroxidase endógena com peróxido de hidrogênio a 3%. 4, depois incubadas com o anticorpo policlonal de coelho purificado (AP6325a, Abgent, San Diego, EUA), recuperação de antigénios e a diluição foi determinada por experiências preliminares. 5, Detecção de HK6 imunocomplexo foi incubado com os kits PV9000 (Golden Bridge Biotechnology Co, Ltd, Beijing, China). 6, manchado com solução de substrato cromógeno diaminobenzidina (Goldenbridge Biotechnology Co, Ltd), até que a coloração ideal foi alcançado. 7, as secções foram contrastadas com hematoxilina, diferenciado, voltou azul. 8, Finalmente, desidratado através do álcool gradiente, apuradas em xileno, goma neutra montado. Então observadas ao microscópio óptico.
Pontuação coloração imuno-histoquímica
Todas as lâminas foram avaliadas separadamente por dois patologistas seniores sem conhecimento prévio de parâmetros clínico, a pontuação final para a sua média. Para a avaliação da coloração imuno-histoquímica HK6, a percentagem de células positivas foi avaliada quantitativamente 10 campos dentro do tumor foram seleccionados aleatoriamente, de expressão em 1000 células cancerosas (100 células por campo) foi avaliada usando um magnifcation de alta potência (400 ×) e uma média foi avaliada quantitativamente e teve como: 0 para a percentagem de células positivas ≤ 10%, 1 para a coloração de 11 ~ 25%, 2 para a coloração de 26 ~ 50%, e 3 para a coloração de 51 ~ 75%, 4 para a coloração de > 75% das células examinadas [6], a intensidade da coloração foi respectivamente classificados semi-quantitativamente como se segue: 0 nenhum sinal, um fraco, 2 moderado e 3 forte de acordo com a literatura precedente [8], uma pontuação total de coloração de 4 ou mais foi classificada como positiva imuno-histoquímica.
Acompanhamento
Todos esses pacientes receberam fluorouracil baseado quimioterapia adjuvante após a cirurgia. Como um acompanhamento regular, todos os pacientes foram verificadas a cada 3 meses durante os primeiros 2 anos e cada 6 meses durante o terceiro ao quinto ano, uma vez por ano depois disso. A obra médico-up consistia de anamnese e exame físico, em testes hematológicos e bioquímicos incluindo CEA sérico, CA19-9 e CA72-4 e imagem, incluindo radiografia de tórax, bário refeição, ultrassonografia abdominal (US), tomografia computadorizada (TC) e endoscopia de acordo com a situação clínica. O tempo de seguimento tinha no dia da cirurgia como um ponto de partida, o tempo de recorrência do tumor e morte foram registados, estes dois pontos foram avaliados para a análise de prognóstico. Se os acompanhamentos eram incompletos, os pacientes ou seus familiares foram contatados por telefone, a data limite para follow-up foi em Maio de 2012, o período de seguimento médio de pós-operatório foi de 25 meses (intervalo de 4-64 meses).
a análise estatística
a análise estatística foi realizada através do SPSS 13.0, as relações entre a expressão HK6 e as características clinicopatológicas dos pacientes foram analisados ​​com o qui-quadrado (χ 2) e exato de Fisher. Para análise de sobrevivência, dois pontos finais foram examinados: sobrevida livre de recidiva (RFS) e sobrevida global (OS), respectivamente. RFS é definido como o intervalo de tempo entre a data da cirurgia e da data da primeira recidiva ou metástase detectada, e OS é definido como o intervalo de tempo entre a data da cirurgia ea data da morte ou a data do último follow-up para aqueles que estavam vivos no final do estudo. O modelo de Kaplan-Meier foi usado para examinar a sobrevivência entre os pacientes expressão HK6 positivo e negativo. A importância de qualquer diferença nas curvas de sobrevida foi determinada com o teste de log-rank. Variáveis ​​que atingiram um nível de significância na análise univariada foram introduzidas posteriormente em uma análise prospectiva LR proporcional de risco (modelo de Cox) para identificar as variáveis ​​independentemente associadas com a sobrevivência, o valor p de 0,05 (ou menos) foi considerado estatisticamente significativo.
resultados
HK6 expressão em tecidos de cancro gástrico avançado
proteínas diferentes foram expressos em local diferente da célula, tal como do citoplasma, membrana, nuclear [9, 10] .hK6 coloração positiva foi expresso principalmente no citoplasma de cancro gástrico células como grânulos de cor castanha escura (Figura 1) foi observada também nas células epiteliais da úlcera não cancerosos e gástricas adjacentes por imuno-histoquímica. A taxa positiva de expressão KLK6 em tecidos de cancro gástrico foi de 77,5% (100/129), significativamente mais elevada do que nos tecidos adjacentes não cancerosos (36,5%) e tecidos úlcera (33,3%), respectivamente (P < 0,001; Tabela 1). A Figura 1 coloração imuno-histoquímica de HK6 no carcinoma gástrico avançado (A, B) e tecidos adjacentes não cancerosos (C, D). A HK6 expressão positiva; B HK6 expressão negativa; C HK6 expressão positiva; expressão negativa D HK6.
Tabela 1 A expressão de HK6 em úlcera adjacente não canceroso, gástrico e tecidos de câncer gástrico avançado
Grupo
Casos
positiva
positiva rate

χ2-value

P-value

GCT
129
100
77.5%
39.201
<0.001a
ANT
52
19
36.5%
0.096
0.757b
GUT
36
12
33.3%
Abreviatura: ANT
, tecidos não cancerosos adjacentes; GUT
, tecidos úlcera gástrica; GCT câncer gástrico quando GCT comparação com ANT e GUT, P < 0,001, comparado com ANT GUT, P = 0,757.
Expressão HK6 e características clinicopatológicas
A correlação entre os níveis de expressão e as características clinicopatológicas HK6 é como resumido na Tabela 2, a expressão HK6 significativamente correlacionada com a fase TNM (P = 0,005) , invasão vascular (P = 0,037) e perineural (P = 0,035). tumores HK6 positivos com mais freqüência teve fase posterior, uma maior incidência de invasão vascular e perineural, por outro lado, não foi observada nenhuma diferença estatisticamente significativa entre a sua expressão e sexo, idade, local do tumor, o tamanho, diferenciação, estádio T, linfa filões metástase ou margem (P > 0,05) .table 2 A relação entre a expressão KLK6, recorrência do tumor e características
clinicopatológicas Características

Cases
positiva
taxa positiva

χ2 valor
P-valor
Sexo
1.214
0,271
Feminino
56
46
82,1%
Homem
73
54
74,0%
idade
0,067
0,796 Art < 60 anos
65
51
78,5%
≥60 anos
64
49
76,6%
local Tumor
3,806
0,149
fundo de olho /cárdia
21
19
90,5%
corpo
32
26
81,3%
antro piloro
76
55
72,4%
tamanho do tumor
0,540
0,462
< 5 cm
59
44
74,6%
≥5 cm
70
56
80,0%
Diferenciação
0,004
0,951
bem /moderada diferenciada 16
16
13
81,3%
pouco diferenciado
113
87
77,0% fase
T
1.486
0,476
T2
19
13
68,4%
T3
55
45
81,8%
T4
55
42
76,4% nó de linfa

1.682
0,195
N0 /N1
49
35
71,4%
N2 /N3
80
65
81,3 %
Vascular invasão
4.370
0,037
Ausente
81
58
71,6%
Apresente
48
42
87,5%
invasão perineural
4.439
0,035
Ausente
76
54
71,1%
Apresente
53
46
86,8%
Margem
0,211
0,646
Ausente
110
84
76,4%
Apresente
19
16
84,2% fase
TNM
8,029
0,005
I + II
43
27
62,8%
III + IV
86
73
84,9% associação expressão
HK6 com tumor recorrência e pobres sobrevida global
Como o follow-up terminou, 68 (52,7%) pacientes tinham morrido, um total de 61 pacientes morreram por causa da progressão do tumor e 7 devido a outras causas. Ao todo, foram 69 (53,5%) pacientes desenvolveram recidiva do tumor, 31 dos quais desenvolvidos como loco-regional recaída, 19 metástases tão distantes (11 no fígado, 3 no pulmão, e 5 no osso), 14 como recidiva peritoneal e 5 como remanescente; Todos, mas oito pacientes com recorrência do tumor morreram com ele.
Curvas de sobrevida de Kaplan-Meier pacientes indicados com expressão HK6 positivo eram mais propensos a ter tanto um RFS mais curtos (p = 0,002, Figura 2A) em comparação com pacientes com expressão HK6 negativo. expressão análise univariada em relação a RFS, utilizando o modelo de regressão de riscos proporcionais de Cox, mostrou que a expressão HK6, estágio TNM, tamanho do tumor, estágio T, lodes linfáticos, a margem e foram fatores de influência para a RFS, Quando a expressão HK6 juntamente com outros fatores foram examinados em um modelo multivariado, estágio TNM, expressão HK6, tamanho do tumor, a margem foram preditores independentes de recorrência do tumor (Tabela 3), indicando pacientes positivos HK6 são duas vezes mais propensos a ter uma recorrência do que os HK6 negativos. Figura 2 curvas de sobrevida de Kaplan-Meier mostra a probabilidade de estar livre de recorrência (A) e sobrevida global (B) em pacientes com expressão HK6-negativo e HK6-positivo. Abreviaturas:. 95% IC 95% de intervalo de confiança, taxa de risco de RH, a sobrevida global OS, RFS sobrevida livre de recidiva
Tabela 3 univariada e análise multivariada de HK6 e outras características clínico-patológicas em relação a RFS em cancro avançado
gástrica
univariada
multivariada
variável
HR
95% CI
P
HR

95% CI
P
Sexo F /M
1,05
0,65 -1 0,69
0,86
- -
-
Age < 60 /≥60 anos
1,30
0.81- 2,08
0,29
- -
- O sítio do tumor viajantes -
- 0,58
- Restaurant -
- corpo /fundo de olho
0,68
0,31-1,49
0,33
- -
- antro /fundo, corpo
0,88
0,45 -1,71
0,70
- -
- tamanho <Tumor; 5 /≥5 cm
2,05
1,25-3,37
0,005
1,80
1,07-3,04
0,027
grau Bem /Mal
0,88
0,40 -1,93
0,75
- -
- estágio T viajantes -
- 0,10
- -
- T3 /T2
2,21
0,92-5,30
0,077 Restaurant -
- 0,58
T4 /T2, T3
2,60
1,08 -6,26
0,032
-
- 0,75
estágio N N0,N1/N2,N3
2.28
1.34-3.87
0.002
–
–
0.83
Vascular−/+
0.91
0.49-1.70
0.77
–
–
–
Perineural−/+
1.27
0.71-2.25
0.42
–
–
–
Margin−/+
2.42
1.41-4.15
0.001
2.49
1.44– 4,31
0,001
TNM fase I, II /III, IV
3.10
1,69-5,68
0.000
2,25
1,18 -4,30
0,014
hK6- /+
2,77
1,41-5,47
0,003
2,09
1,04 -4.
230,039
de acordo com a análise de sobrevivência, análise de sobrevivência de Kaplan-Meier mostrou que pacientes com positiva expressão HK6 têm oS inferior (P = 0,002, Figura 2B), a análise univariada revelou que a expressão positiva HK6, estágio TNM, tamanho do tumor, linfonodo, estágio T, ea margem são fatores importantes que influenciam as taxas de oS, quando esses fatores estavam envolvidos em uma análise multivariada (Tabela 4), estágio TNM e HK6 foram fatores prognósticos independentes de OS.Table 4 univariada e análise multivariada de fatores prognósticos de OS no cancro gástrico avançado
univariada
multivariada

variável
HR
95% CI
P
HR
IC 95%
P
Sexo F /M
1,35
0,80-2,25
0,26
- -
- Age < 60 /≥60 anos
1,59
0,95-2,67
0,08
- -
- O sítio do tumor viajantes -
- 0,17
- Restaurant -
- corpo /fundo de olho
0,47
0,20-1,09
0,078
- -
- antro /fundo, corpo
0,57
0,29 -1,13
0,11
- -
- tamanho <Tumor; 5 /≥5 cm
1,72
1,02-2,90
0.043 viajantes -
- 0,57
grau Bem /Mal
0,57
0,26-1,27
0,17
- -
- T estágio viajantes -
- 0.004 viajantes -
- 0,019
T3 /T2
1,60
0,66-3,89
0,30
0,83
0,33-2,12
0,70
T4 /T2, T3
3,36
1,38-8,15
0,007
1,86
0,73-4,70
0,19
estágio N N0,N1/N2,N3
2.87
1.57–5.21
0.001
–
–
0.12
Vascular−/+
1.23
0.65-2.34
0.52
–
–
–
Perineural−/+
1.32
0.71-2.43
0.38
–
–
–
Margin−/+
1.29
0.72-2.31
0.40
–
–
–
TNM fase I, II /III, IV
4.05
2.04- 8.03
<0.001
2.99
1.45–6.16
0.003
hK6−/+
2.88
1.40-5.92
0.004
2.66
1.25–5.63
0.011
A análise multivariada mostrou que a expressão HK6 foi um dos fatores prognósticos independentes de sobrevida global para os pacientes com câncer gástrico junto ao estágio TNM (P = 0,011).
Discussão
estudos descobriram que HK6 foi segregada para a matriz extracelular e envolvida na degradação de proteínas de matriz, incluindo f ibronectina, laminina, vitronectina, colagénio e induzida ectodomínio derramamento de e-caderina, reduziu a adesão célula-célula [11, 12] e levou a queratinócitos para promover a proliferação do tumor, migração, invasão e metástase [13 ]. Sabe-se que HK6 humano é estão envolvidos em várias doenças malignas, Vários estudiosos têm relatado que HK6 é overexpressed no cancro do ovário [14], uterina serosa carcinoma papilífero [15], o cancro colorectal [16], câncer gástrico [6] e câncer de esôfago [17], mas underexpressed em tumores de glândulas salivares [18] e carcinoma de células renais [19], o que depende dos tipos de tecido tumoral e microambiente [20]. HK6 promove o crescimento da maioria dos tumores. No entanto, quando HK6 foi sobre-expresso em cancro da mama células MDA-MB-231, as células foram resultou em reversão marcado do seu fenótipo maligno, manifestado pela taxa de proliferação mais baixos e densidade de saturação, marcada inibição do crescimento independente de ancoragem, redução da mobilidade celular e capacidade para formar tumores. O mecanismo pode ser que HK6 desempenhar um papel protector contra a progressão do tumor mediado pela inibição da epitelial-mesenquimal-a transição [21].
Até à data, tem sido demonstrado que KLK6 é regulada positivamente em tais doenças malignas gastrointestinais, cancros pancreáticos e do cólon [22]. Ogawa et ai. [16] relataram que a expressão de ARNm KLK6 foi significativamente maior no canceroso do que no tecido correspondente colorrectal benigno. Kim et al. [23] examinou o ARNm KLK6 e os seus níveis de proteína correspondentes usando RT-PCR e ELISA, descobriram que KLK6 ARNm foi regulada positivamente em cerca de 8 vezes, em comparação com regiões não tumorais, e os níveis de HK6 soro de doentes com cancro gástrico foi de 1,7 vezes para saudável indivíduos. Quando inativação KLK6 com pequeno RNA de interferência (siRNA), capacidade de invasão celular diminuiu em 45%. Ele também descobriu que KLK6 degradar proteínas da matriz extracelular a invasão tumoral e metástase. a sobre-expressão exógena de KLK6 levou à diminuição da actividade do promotor da E-caderina. Além disso, o nosso estudo mostrou que a taxa positiva de expressão HK6 em tecido de cancro gástrico avançado foi significativamente mais elevada do que em tecido não canceroso e úlcera gástrica adjacente. No entanto, não foi encontrada diferença entre o tecido não canceroso e do tecido adjacente úlcera gástrica. Estes resultados sugerem que a expressão HK6 pode desempenhar um papel importante no desenvolvimento do cancro gástrico.
Ogawa et ai. [16] relatou que os altos níveis de expressão de mRNA KLK6 em tecidos de câncer colorretal foram correlacionados com a invasão da serosa, metástase hepática, estágio avançado de Duke, no entanto, os relatórios limitados sugeriu a relação entre a expressão KLK6 e características clínico-patológicas. Nagahara et ai. [6] relatou que a superexpressão de KLK6 foi significativamente associada com o estádio TNM, invasão linfática para pacientes com câncer gástrico. No estudo actual, para a fase de TNM, a taxa positiva de expressão HK6 foi significativamente maior no estágio mais tarde (fase III e IV fase: 84,9%) do que na fase anterior (fase I e II de veado: 62,8%). A diferença foi estatisticamente significativa, o que demonstra que a expressão HK6 positiva foi fortemente correlacionada com o estádio TNM no cancro gástrico avançado. Nosso estudo também mostrou que havia uma relação entre a expressão HK6 positiva com invasão vascular, que era consistente com [6] O relatório do Nagahara. Além disso, foi relatado que a expressão positiva HK6 foi associado com a invasão perineural, que não estudado em [6] O relatório do Nagahara, mas precisa de um estudo mais aprofundado para verificar. Nós não encontraram nenhuma relação entre a expressão HK6 no cancro gástrico avançado eo sexo do paciente, idade, local do tumor, o tamanho, diferenciação, estádio T, metástase linfática filão, que estava de acordo com os resultados anteriores [6].
Uma abundância de evidências demonstrou que vários membros das KLKs são biomarcadores de câncer potenciais [24]. O KLKs mais conhecido e utilizado é KLK3. KLK3 gene codifica antigénio específico da próstata (hK3), foi aprovado pelo FDA dos Estados Unidos como o marcador especifico do cancro da próstata, que é amplamente utilizado para o rastreio, o diagnóstico, a determinação da eficácia e avaliar o prognóstico do cancro da próstata [25]. proteína KLK2 (hK2), também é considerado como um marcador secundário de cancro da próstata. Relatórios recentes têm indicado que a elevada expressão HK6 no cancro do ovário [26], o cancro do cólon [16, 27], câncer pancreático [28], o cancro do pulmão de não pequenas células [29] e tumores intracranianos [30] poderia ser um fator prognóstico independente , sugerindo que HK6 pode ser um marcador de prognóstico para estes tumores.
Estudos têm sugerido que a alta expressão KLK6 estava intimamente associado à sobrevida global e livre de recidiva menor de câncer de ovário [31] e pacientes com câncer de cólon [32]. O mesmo resultado foi confirmado no cancro gástrico avançado em nosso estudo. Todos estes sugerem que KLK6 pode ser um biomarcador potencial para predizer recorrência de tumores e alvo terapêutico para eles. Muitos estudos consistentemente demonstraram que o estádio TNM foi o indicador prognóstico mais confiável de neoplasias gastrointestinais, tais como carcinoma gástrico, pacientes linfomas gastrintestinais [9, 10, 33, 34], enquanto que outras características, não houve acordo. Jin et al. [33] encontraram Ezrin superexpressão aumentou significativamente em metástase linfonodal, Demirag et al. [10] mostraram expressão PKP3 e mau prognóstico apareceu para correlacionar com o número de linfonodos. Embora no presente estudo, não encontramos nenhuma associação entre metástases em linfonodos e prognóstico na análise multivariada.
Com o desenvolvimento do molecular e proteômica em câncer gástrico, muitas proteínas têm sido os potenciais marcadores para o diagnóstico precoce, prognóstico e terapêutica alvos de carcinoma gástrico, entre eles c-Met [9], pKP2 e PKP3 [10], Ezrin [33], são o ones.Moreover conhecido, outros biomarcadores moleculares estão atualmente em estudo.
Poucos estudos anteriores investigaram a clinicopatológico significância de expressão HK6 em tecidos de cancro gástrico avançado. Assim, neste estudo, examinamos a correlação de expressão HK6 com recidiva tumoral e prognóstico no câncer gástrico avançado. Os resultados indicam que a expressão de HK6 foi significativamente associada com o estádio TNM, invasão vascular, invasão perineural e mau prognóstico para pacientes com câncer gástrico avançado. Além disso, verificou-se que os pacientes com expressão HK6 positivo foram mais propensos a ter recorrência, e menor RFS e taxas de OS em comparação com aqueles com expressão HK6 negativo. A análise multivariada mostrou que a expressão HK6 foi um fator prognóstico independente significativo de RFS e OS em pacientes com câncer gástrico avançado. Nossos resultados suportam que HK6 pode ser usado como um potencial biomarcador e alvo terapêutico para câncer gástrico. Além disso, a expressão positiva de HK6 em tecidos de câncer gástrico avançado pode fornecer informações valiosas para entender o comportamento biológico do câncer gástrico.
Em conclusão, nosso estudo mostrou que a expressão HK6 no cancro gástrico avançado significativamente correlacionada com o estádio TNM, invasão vascular e perineural invasão, bem como as taxas de RFS e OS. Este é um relatório rara para avaliar a expressão HK6 e sua correlação com a recorrência do tumor e mau prognóstico no câncer gástrico avançado. serão necessários mais estudos para explorar as possibilidades se HK6 pode ser usado como um biomarcador importante na previsão de recorrência do tumor e um alvo terapêutico para câncer gástrico, utilizando amostras de soro de pacientes. E também vamos examinar o KLK6 no nível de mRNA do amostras de tecidos próximo passo.
Declarações
Agradecimentos
Os autores gostariam de agradecer Wenli Zhao, Ming Zhong, Yingxia Liu (Departamento de Patologia, Huizhou primeiro Hospital, província de Guangdong) e Qingxu Yang, Tongtong Wu (Departamento de Patologia, Huizhou Hospital Central Municipal, província de Guangdong) para obter ajuda com a seção de observação e tecido óptico microscópica.
Financiamento
o estudo foi financiado pelo Natural Science Foundation da província de Guangdong, China, (GDNSF, no.1051600101000001).
Autores 'original apresentada arquivos para imagens
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Os autores declararam que não têm interesse competindo. contribuições
dos autores
XL e XY realizadas patológica exame, HX e JL analyzied os dados, YH redigido o manuscrito. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final.

• metilação do promotor e expressão do gene TIMP3 no câncer gástrico
• efeito gastroprotetora de alfarroba (alfarrobeira L.) contra o estresse oxidativo induzido por etanol em vigor rat