Súvislosť medzi stavom HER2 u karcinómu žalúdka a klinicko-rysy: retrospektívnej štúdie s použitím celej tkaniva sections

pridružení medzi stavom HER2 v žalúdočnej rakoviny a klinicko-rysy: retrospektívnej štúdie využívajúce celej tkanivové rezy
abstraktné
pozadia
žalúdočné rakovina je zvyčajne diagnostikovaná v pokročilom štádiu choroby a liečebných možností sú riedke. Trastuzumab bol nedávno schválený pre metastatických alebo lokálne pokročilých karcinómov vznikajúcich v žalúdku alebo v gastroezofageálneho spojenia u pacientov s HER2-pozitívne nádory. Avšak údaje o frekvencii HER2-pozitívnych prípadov u brazílskych pacientov sú obmedzené. Naším cieľom bolo charakterizovať proteínu HER2 a stav génu v sérii brazílskych pacientov s karcinómom žalúdka a zhodnotiť jeho vzťah s klinicko-dátami.
Metódy
histologických preparátov od 124 primárnych gastrectomies boli preskúmané a ich patologické správy boli vyvolané z súbory v brazílskej fakultnej nemocnici. Automatizované imunohistochemické HER2 bola vykonaná na celé tkanivových rezoch z každého nádoru. HER2-nejednoznačné prípady imunohistochemicky boli odoslané k automatickému dual in situ hybridizácia
pre vyhodnotenie amplifikácia génu. Stav HER2 bol konfrontovaný s klinicko-parametrami s cieľom posúdiť štatisticky významné asociácie.
Výsledky
imunohistochemicky analýzy vyplynulo, že 13/124 prípadov (10,5%) boli HER2 pozitívne (3+), 10/124 prípady (8,1%) boli nejednoznačné (2+) a 101/124 prípadov (81,4%) boli negatívne, pričom 7 prípadov 1+. Žiadny z nejasných prípadov ukázal amplifikáciu génu. Celková miera pozitivity HER2 bol 10,5%. Tam bol vzťah medzi HER2 expresie a Lauren črevnej histologického podtypu (P
= 0,048), dobre až stredne diferencované nádory (P
= 0,004) a prítomnosť lymphovascular invázie (P
= 0,031). Nebola nájdená súvislosť medzi stavom HER2 a nádorové topografiu.
Závery
konfrontácii s údajmi publikovanými inými autormi, tým nižšie percento HER2-pozitívnych prípadov nájdete v našom seriáli by mohli byť čiastočne vysvetliť nižšie frekvencie nádorov, ktoré vznikajú na gastroezofageálneho spojenia v porovnaní s distálnej žalúdočnej karcinómy v brazílskych pacientov. To by tiež mohlo vysvetliť nedostatok štatisticky významnú súvislosť medzi stavom HER2 a nádorové topografie v našej štúdii.
Kľúčové
HER2 Karcinóm žalúdka Imunohistochémia amplifikácia génu klinicko-funkcie Background
O milión nových prípadov rakoviny žalúdka (GC ) odhaduje sa vyskytujú každý rok vo svete, čo zodpovedá 8% všetkých diagnóz rakovinových celosvetovo [1, 2]. GC je tiež považovaný za druhou najčastejšou príčinou úmrtí súvisiacich s rakovinou po celom svete a viac ako 700.000 úmrtí sa očakáva, že dôjde v dôsledku tohto ochorenia každoročne [1, 3]. Avšak, že výber pacientov s GC v rôznych častiach sveta nie je homogénny: viac ako 70% nových prípadov a úmrtí dochádza v rozvojových krajinách. Najvyšší výskyt sa nachádzajú vo východnej Ázii, východnej Európe a Južnej Amerike [1]. Národný inštitút raka Brazílie odhaduje, že GC obsahuje viac ako 5% všetkých nádorových ochorení v tejto krajine [4]. Možnosti liečby
pre GC sú všeobecne obmedzené, pretože to je zvyčajne diagnostikovaná v pokročilom štádiu ochorenia, a teda prežitia päť rokov je trvalo nízka, asi 20% vo väčšine častí sveta [2, 5]. Podľa štúdie Toga, najnovšie fázy III medzinárodnej randomizovanej štúdii liečby v kombinácii chemoterapie a trastuzumabu (TZB) sa výrazne zlepšila prežitie u pacientov s HER2-pozitívnym pokročilým GC [6]. TZB je rekombinantná monoklonálna protilátka namierená proti HER2, transmembránový proteín, ktorý patrí do rodiny ľudských epidermálny rastový faktor receptorov [7]. HER2 intracelulárnu doména vykazuje tyrozín kinázy, ktorý je schopný generovať intracytoplazmatická druhých poslov, ktoré koordinujú nukleárna expresiu génov spojených s angiogenézu, proliferáciu buniek, prežívanie a [8]. Nadmerná expresia proteínu HER2, produkt preto-onkogénu sa nachádza na chromozóme 17, bola spojená s karcinogenézy a progresiu nádorov prsníka, vaječníkov, slinné žľazy, prostaty a rakoviny gastrointestinálneho traktu [9].
Na základe štúdie Toga výsledky medzinárodnej regulačné úrady nedávno schválila použitie TZB v HER2-pozitívnym metastatickým alebo lokálne pokročilou rakovinou vzniknutých v žalúdku alebo gastroezofageálneho spojenia (ġej) [10]. Karcinómy z vhodných pacientov na ošetrenie TZB musia predložiť HER2-pozitívny stav doložený proteín nadexpresiou (skóre 3+) imunohistochemicky (IHC) alebo amplifikácia génu in situ hybridizácia (ISH
) pre nádory s nejednoznačnými výsledkami IHC (skóre 2+) [11, 12]. Od tej doby, mnoho štúdií sa zameralo na prezentáciu frekvencii HER2 pozitívne GC v rôznych populáciách, s veľkými rozdielmi v metódach používaných na proteín a detekciu génu. Preto výsledky výrazne v rozmedzí od 2 do 45% zvýšenej expresie HER2 v GC série [13-17]. Veľký systematický prehľad, vrátane údajov z 49 štúdií našiel strednej sadzbu vo výške 18% z HER2 pozitivity v 11,337 pacientov s GC [18]. Avšak prevalencia HER2-pozitívnych prípadov medzi brazílskych pacientov zostáva neznámy, s málo údajov zverejnené [19 až 26]. Vzhľadom k tomu, brazílsky systém verejného zdravia doteraz schválili používanie TZB pre liečbu GC v tejto krajine, veríme, že detekcia HER2-pozitívne GC v brazílskych pacientov môže poskytnúť vedecký základ pre vznik nových politík v oblasti verejného zdravia a lepšie definovať klinický protokoly pre zlepšenie liečby týchto pacientov v Brazílii.
Preto sa v tejto štúdii sme sa zamerali charakterizovať HER2 expresiu v GC v sérii brazílskych pacientov, s použitím nádorových úseky celej tkaniva z chirurgických vzoriek, a vyhodnotiť združenia medzi proteínu HER2 a stavom génu s klinicko-údajmi.
Metódy
Táto štúdia bola schválená etickou komisiou našej inštitúcie (Comité de etike e Pesquisa COEP-UFMG) pod číslom CAAE protokolu 32898114.9.0000.5149. Písomný informovaný súhlas bol získaný v súlade s inštitucionálnymi smernicami.
Študovali sme 142 po sebe idúcich pacientov, ktorí podstúpili primárnu gastrektómii v rokoch 2007 až 2011 v nemocnici klinikách Federálna univerzita Minas Gerais, Brazília, ktorého histopatologické diagnóza bola GC. Žiadny z pacientov dostávala neoadjuvantnej chemoterapii alebo iný typ liečby pre ich nádoru pred operáciou. Všetky 142 prípadov bolo ich patologickej správy neprevzali a, na potvrdenie diagnózy GC, pôvodná Hematoxylin eozín nafarbená boli súčasne preskúmaná dvomi patológmi (RSL a MMDAC), z ktorých jeden je odborník v gastrointestinálne patológiu (MMDAC) , boli zaznamenané klinické údaje (Vek pacientov) a patologické parametre (tumor topografia, maximálny priemer tumoru, štádium, histologického stupňa a podtyp, prítomnosť lymphovascular a cievne invázie). Nádory boli rozdelené do dvoch skupín podľa žalúdočné topografie: distálnej a proximálnej nádory, sú tieto posledne menované zahrnuté karcinómy z ġej. Kritériá TNM systému a recomendations od 7. vydanie spoločného výboru American Cancer Staging o príručke boli použité k nádoru predstavovať [27, 28]. Index žľazovej formácie a cytologické pleomorphism boli považované za histologické triedenie do dobre, stredne alebo zle diferencovaných tumorov. Laurenův histologické klasifikačný systém bol použitý pre nádorové subtypizace [29].
Nový 4 um hrúbky úseky celej tkaniva boli získané od formalínom pevnej parafínu vložené nádorových vzoriek a odoslané k automatickému IHC, s použitím platformy BenchMark XT ™ (Ventana Medical Systems , Arizona, USA) a predzriedenie primárne králičie monoklonálne protilátky anti-HER2 /neu (4B5 klon). Všetky rezy boli kontrastne subsequentially hematoxylínom. Pre-testovaný HER2-pozitívna vzorka rakovina bola použitá ako externý pozitívna kontrola. Osemnásť prípady neobsahoval dostatok nádorového tkaniva pre ďalšie protokoly IHC a boli vylúčení z tejto štúdie, čo má za následok 124 vhodných prípadoch na analýzu.
Troch patológov (RSL, HG a CBN) naraz analyzované imunologicky kĺzačky pomocou multi-head mikroskop a získal konsenzuálne skóre pre HER2 expresiu v súlade s odporúčaniami Hofmanna a Rüschoff pre GC chirurgických vzoriek [11, 12]. Prípady boli rozdelené do štyroch skupín (0, 1+, 2+ a 3+), v závislosti na rozšírenie a intenzite výrazu: 0, žiadna reaktivita, alebo reakcie na membráne < 10% buniek; 1+ Slabé /ťažko rozoznateľné reakcie na membráne u > 10% buniek a bunky reagujú len na časti svojej membrány; 2+, slabý až stredne úplné alebo basolateral reakcie na membráne > 10% buniek; 3+, silný úplné alebo bazolaterálnou reakcie na membráne > 10% buniek [11]. Len membránové schéma expresie bol vhodný pre vyhodnotenie. Prípady zaradený do kategórie 3+ boli považované za pozitívne na nadmerné expresie HER2, zatiaľ čo 0 a 1+ prípady boli považované za negatívne.
Prípady hodnotené ako 2+ boli považované za nejednoznačné pre expresiu proteínu HER2 a nový 4 um hrúbka whole- tkanivové rezy boli predložené strieborné svetlom poli in situ hybridizácia (
Sish) s použitím rovnakého automatického platformy (referenčná XT ™) a INFORM HER2 Dual ISH DNA Probe Cocktail testu (Ventana Medical Systems, Arizona, USA). HER2 stroje a chromozómu 17 (CEP17) kopírovať čísla boli počítané v 20 neprekrývajúcich jadrách súbežne dvoma pozorovateľmi (RSL a CBN). HER2
genomické profil bol definovaný ako non-zosilnený, ak stredná pomer HER2
/CEP17 bolo < 2.0 a zosilnený v prípade, že pomer HER2
/CEP17 bolo ≥2.0. V prípade, že pomer klesol medzi 1,8 a 2,2, ďalších 20 jadra boli hodnotené a celkový pomer vypočítať. IHC 2+ prípady vykazujú amplifikáciu génu pomocou Sish a IHC 3+ prípadoch boli obaja považujú za pozitívne pre HER2 konečnom statuse [11, 12].
Štatistická analýza bola vykonaná pomocou verzie 19,0 softwaru SPSS (SPSS Inc., Chicago, IL ). Pearson Chi-kvadrát test bol použitý na koreláciu výsledkov IHC a HER2 konečný stav s klinicko-parametrami. Všetky
Hodnoty P boli obojstranné a P Hotel < . 0,05 bola považovaná za štatisticky významnú
Výsledky
klinicko-ukazovateľov a ich asociácie s HER2 konečnom statuse a IHC skóre sú uvedené v tabuľke 1. pacientov podľa veku pri stanovení diagnózy v rozmedzí od 28 do 92 rokov (medián: 62,33 rokov), a tam bolo 64 mužov (51,6%) a 60 žien (48,4%) zo 124 pacientov zaradených do tejto štúdie. Nádory boli s výhodou identifikované u distálneho žalúdka (80,6%) v porovnaní s nádormi, ktoré vyplývajú z kardio alebo z ġej. Veľkosť nádoru pohybovala medzi 0,5 a 14,0 cm (priemerne 5,31 cm) a pokročilých nádorov (kategória pt2, PT3 a PT4) predstavovali 107 prípadoch (86,3%). Podľa histologického triedenie, 13 prípadov (10,5%) bolo dobre diferencovaný, 45 prípadov (36,3%) mierne diferencované a 66 prípadov (53,2%) zle diferencovaných tumorov. Lauren črevnej histologický podtyp bola najčastejšie diagnostikovaná, čo predstavuje 61 prípadoch (49,2%). Difúzna a zmiešané podtypy boli pozorované u 21 (16,9%) a 33 (26,6%) prípadov, v danom poradí. Deväť zostávajúcich prípadov (7,3%) bolo klasifikované ako neurčitý. Lymphovascular invázia bola nájdená v 94 prípadoch (75,8%), a 85 pacientov (68,5%) malo lymfatických uzlín pri diagnóze, s priemerom 9,27 pozitívnych uzlín na jednotlivý prípad (rozsah 1 až 63 pozitívnych uzlín) .Table 1 pridružení medzi HER2 stav a klinicko-patologické parametre
Celkové
HER2-pozitívnym
HER2 negatívny
P
hodnoty
HER2 (3 +)
HER2 (2+)
HER2 (0, 1+) ​​
P
hodnoty
n =
124 ( %)
13 (10,5)
111 (89,5)
13 (10,5)
10 (8,1)

101 (81,4)
vek v čase stanovenia diagnózy
0,803 0,590
≥60 rokov
82 (66,1)
9
73
9
8
65 Hotel < 60 rokov
42 (33,9)
4
38
4
2
36
Pohlavie
0,865
0,459
Male
64 (51,6)
7
57
7
7
50
Žena
60 (48,4)
6
54
6 Sims 3
51
Tumor topografia
0,720 0,709
distálnej žalúdočnej
100 (80,6)
10
90
10
9
81
Proximálna žalúdočné /ġej
24 (19,4) Sims 3
21 Sims 3 foto 1
20
Histologické podtyp
0,048 0,009
črevnej
61 (49,2)
11
50
11
9
41
Difúzna
21 (16,9) NETHRY.cz 0
21
0
0
21
Mixed
33 (26,6)
2.
31
2
1
30
Unditermined
9 (7,3)
0
9
0
0
9
histologického stupňa
0,004 Hotel < 0,001
no
13 (10,5)
4.
9
4
1
8
Mierne
45 (36,3)
7
38
7
8
30
Zle
66 (53,2)
2.
64
2 foto 1
63
Lymphovascular invázie
0,031
0,060
Pozitívne
94 (75,8)
13
81
13
6
75
Negatívne
30 (24,2)
0
30
0
4
26
invázie ciev
0,395 0,170
Pozitívne
44 (35,5)
6
38
6
1
37
Negatívne
80 (64,5)
7
73
7
9
64
pT stav
0,271 0,165
PT1
17 (13,7) NETHRY.cz 0
17
0
1
16
pt2
32 (25,8)
3
29 Sims 3
2
27
PT3
69 (55,6)
10
59
10
5
54
PT4
6 (4,9)
0
6
0
2
4
PN stav
0,453 0,762
pN0
39 (31.5)
2
37
2
4
33
PN1
46 (37,1)
7
39
7
4
35
PN2
24 (19,3) Sims 3
21 Sims 3 foto 1
20
PN3
15 (12,1)
1
14
1
1
13
pM stav
0,548 0,705
pm0
121 (97,6)
13
108
13
10
98
PM1 Sims 3 (2.4) NETHRY.cz 0 Sims 3
0
0 Sims 3
Tučná čísla predstavujú p
hodnoty s štatistickej významnosti
imunohistochemické analýzou odhalili 13 pozitívnych prípadov (3+; 10,5%), pre nadmerné expresia HER2 (Obr 1a), 10 nejednoznačné prípady (2 +, .. 8,1%) (obr 1b) a 101 negatívnych prípadoch (81,4%), z toho 7 boli hodnotené 1+ (5,6%) (obr . 1c). Stredný vek v čase diagnózy tendenciu zvyšovať v závislosti od stavu HER2 (negatívny, 61,76 rokov nejednoznačné, 66,3 roka, a pozitívne, 68,58 rokov), aj keď to nedosiahlo štatistickú významnosť. Žiadny z pacientov v kategórii IHC 3+ boli mladší ako 46 rokov a najstarší pacienta v rade (A 92 ročná žena) bol medzi nimi. Nebol zistený žiadny vzťah medzi HER2 expresie a pohlavie pacienta. Obr. 1 Imunohistochemické analýza expresie HER2 v žalúdočných karcinómov použitie protilátky 4B5 v celých tkanivových rezoch. (A) HER2-pozitívny prípad (3+); (B) HER2-nejednoznačné puzdro (2+); (C) HER2-negatívne puzdro (1+); (D) intratumorová heterogenita proteín v HER2-pozitívnym prípade (3+). (AC: zväčšenie x400 poľa; D: x200 poľa zväčšenie)
došlo k pozitívny vzťah medzi expresiou HER2 proteínu a dobre diferencovaných tumorov moderatly (P Hotel &0,001), rovnako ako s Laurenův črevnej subtypu (P
= 0,009).
nádory vznikajúce v distálnom žalúdku predstavovali 76,9% z IHC 3+ prípadov, zatiaľ čo 23,1%, kedy nájsť v kardio, alebo v ġej, ale tento variant nebol štatisticky významný. Nie IHC 3+ nádor vykázal difúziu či neurčitý morfológiu a len boli považované za dva (15,4%) zle diferencované karcinómy. Každý IHC 3+ tumor ukázal lymphovascular inváziu a všetci boli diagnostikovaná v pokročilom štádiu ochorenia, najmä v kategórii PT3 (76,9%). Jedenásť prípadov (84,6%) bolo pozitívnych na lymfatických uzlín, s priemerom 7,5 pozitívnych uzlín na jednotlivý prípad. Avšak, žiadna štatistická významnosť bola pozorovaná medzi nadmernej expresie HER2 a PT, PN alebo postavenie hodín.
V porovnaní s IHC 3+ prípadoch HER2-nejednoznačné nádory (2+) bol zaznamenaný mierne podobný profil, kedy bola morfologické údaje zohľadnené. Žiadny prípad ukázal, difúzne alebo neurčitý histológiu, s prevahou črevné podtypu (9 prípadoch 90,0%) a mierne diferencované nádory (8 prípadov, 80,0%). Väčšina nádorov v tomto nastavení tiež ohrozená distálnej žalúdok a bola diagnostikovaná v pokročilom štádiu choroby (9 prípadov, 90,0%). Došlo však k poklesu počtu prípadov ukazujú lymphovascular inváziu a lymfatických uzlín (6 prípadov, 60,0%) v porovnaní s počtom nájdených medzi IHC 3+ prípadoch (13 prípadov 100,0% a 11 prípadov, 84,6%, v uvedenom poradí) .
HER2-negatívne karcinómy (výsledky 0 a 1+) sčítané všetky nádory s difúznou alebo neurčitú morfológie, rovnako ako väčšina tých, ktorí sa zle diferencovaným histologického stupňa a ranom štádiu ochorenia v čase diagnózy.
IHC 2+ prípady boli predložené Sish ale nebola zistená žiadna amplifikácia génu. Preto prípady s konečnou HER2-pozitívnym stave bol zložený výhradne pomocou IHC 3+ nádorov, čo predstavuje 10,5% všetkých GC v tejto sérii. HER2 pozitivita bola spojená s črevnou podtypu (P
= 0,048), dobre až stredne diferencovaných tumorov (P
= 0,004) a prítomnosť lymphovascular invázie (P
= 0,031).
Čo sa týka intratumorální proteínu HER2 rôznorodosť, rozšírenie IHC 3+ oblastí, v rozmedzí od 10 do 99% pozitívnych neoplastických buniek (obr. 1D). Tam bol tiež variácie v predĺžení HER2 imunoreaktívnych oblastí v nejasné kategórii, v rozmedzí od 10 do 40% nádorových buniek. V oboch kategóriách, intratumorová heterogenita proteín bol väčšinou videný v zmiešaných karcinómov typu, v ktorom HER2 expresie korelovala s črevnej typu oblastiach.
Na rozdiel od ich HER2 skóre, mnoho prípadov, zobrazí sa cytoplazmatická imunoreaktivita v normálnych bunkách sliznice žalúdka (87 prípadov , 70,2%), metaplastická epitel (30 prípadov, 24,2%) a ložiská
dysplázia (24 prípadov, 19,4%) (obr. 2). Tento vzor expresie bola pozorovaná v oboch metaplastického a dysplastických epitelu, bez ohľadu na povahu alebo metaplázia stupni dysplázia. Jadrová expresie bol často videný medzi rozptýlených karcinómov typu, ale všetky tieto imunologicky oblasti neboli zohľadnené pre bodovaní HER2 imunohistochemickým profilu. Obr. 2 Možné úskalia v imunohistochemické analýze expresie HER2 proteínu využívajúce protilátku 4B5. Cytoplazmatický nešpecifické farbenie v normálnom foveolární žalúdočnej sliznice (vľavo) a v ohniskovej
žalúdku vysoký stupeň dysplázia (vpravo) (x200 pole zväčšenie)
Diskusia
V našej štúdii sme zistili, že konečné HER2 pozitívny stav 10,5%. Celková miera HER2 pozitivita nájdená v štúdii Toga bolo 810 z 3,665 pacientov (22,1%) [6]. Tieto čísla predstavujú jednu z najväčších dátových sád testovanie HER2 vo vzorkách GC, získaných od pacientov zo 24 rôznych krajín v Ázii, Európe a Latinskej Amerike z. Hoci 22,1% predstavuje viac než dvojnásobok množstva pozitívnych nádorov, ktoré sme našli v našej sérii, Toga skúšobné HER2 pozitivita skríningu kritériá zahŕňali všetky prípady s proteínovou expresiu IHC (3+ a 2+ prípadov) alebo amplifikácia génu zo strany samotného veľtrhu ISH. Podrobnejšie údaje týkajúce sa testovania HER2 v štúdii Toga bol nedávno publikovaný odhalil, že práve 610 prípadov z 3,665 nádorových vzoriek (16,6%) boli v skutočnosti považovaný HER2 pozitívne, buď bodovanie IHC 3+ alebo IHC 2+ s génovou amplifikáciu fluorescencie in situ hybridizácia (FISH
) [30]. Post hoc
prieskumná analýza viedla k záveru, že pacienti v týchto kategóriách boli tí, ktorí absolútne najvyšší prospech z liečby TZB [6]. To znamená, že presné percento pacientov vhodných pre liečbu TZB podľa HER2 skríningu vykonať na proces Toga bola 16,6%, a keď sú výsledky IHC považované samotné, tak 398 prípadov (10,9%) bolo v skutočnosti HER2 pozitívne (3+) [30 ]. V našej štúdii, pretože žiadny IHC 2+ prípady ukázali, amplifikáciu génu podľa Sish sme našli IHC 3+ rýchlosť a záverečný HER2 pozitívny stav 10,5%.
GC v brazílskych pacientov má tendenciu vznikať v dutine, spojená s Helicobacter pylori
chronickej infekcie, tak, naša rada sa skladá hlavne z karcinómov distálneho žalúdka (80,6%). Vzhľadom k tomu, HER2 expresie bola veľmi spojená s GC kardia a ġej [17, 30-33], sme očakávali nájsť ešte nižšiu mieru pozitivity medzi našimi prípadov. Toga skúšobné výsledky ukázali rozdiel v pozitivity HER2 medzi Európou /Ázii a Strednej /Južnej Amerike (23,8 a 16,1% v uvedenom poradí, vrátane všetkých FISH-pozitívne a IHC 3+ prípadov). Autori spojené kontrastné výsledky, v dôsledku nižšieho počtu pacientov detekčné v Latinskej Amerike (484 z 3,665 pacientov) namiesto možné variácie v nádorovej biológie [30]. Bohužiaľ sa nám nepodarilo nájsť špecifické informácie týkajúce sa HER2 expresie v GC brazílskej zapísaných pacientov Toga. Ak by mohli byť vyvolané krížové dát medzi nádoru topografiu a krajinách pôvodu pacienta, mohlo by to tiež pomôcť vysvetliť rozdielne ceny GC HER2-pozitívne v Latinskej Amerike.
Podobne ako u našich výsledkov, v nedávnom veľké európske série [34], rovnako ako v japonskej kohorte 1,461 pacientov [35], nebol žiadny rozdiel v HER2 pozitivity medzi proximálnym a distálnym nádorov žalúdka. Avšak, dve veľké čínske série [17, 33] nedávno ukázala významne vyššia HER2 expresiu v bližšom GC, po dohode s Toga skúšobnej nálezmi [30] a výsledky z radu 2,798 juhokórejských pacientov [32]. Autori vyplynulo, že rakovina čriev typu sú spravidla častejšie v ġej a, pretože rôzne etiológie, môže hrať úlohu v karcinogenéze nádorov z týchto dvoch miestach, mohlo by to čiastočne ospravedlniť rozdielne ceny HER2 expresie podľa tumoru topografia [30]. Popri genetickej pôvodu podľa etnického pôvodu, viac žalúdočnej karcinogenézy cesty môže byť do značnej miery ovplyvnený stravovacích návykov a chronickej infekcie Helicobacter pylori
[3]. Aj keď toto má pravdepodobne tiež nejaký vplyv na pozitivity HER2 sa nachádzajú v rôznych populáciách s GC, vzťah medzi týmito faktormi a expresia HER2 zostáva neznámy, s zverejnené niekoľko prác [36, 37]. EU Počet IHC 3+ prípadov nájdených v našej štúdii by bolo možné čiastočne vysvetliť tým, že celé tkanivové rezy boli použité výhradne pre hodnotenie HER2, namiesto endoskopických biopsiou. Nedávna štúdia párované primárnej gastrectomies a ich endoskopické biopsia porovnať HER2 expresie skóre a našiel miery zhoda iba 57%, väčšinou kvôli intratumorální HER2 heterogenity [38]. HER2 genetická heterogenita by ISH vopred preukázaná na rakovinu prsníka, ale to sa zdá byť zložitejšie záležitosť na GC vzoriek [39]. Expresia proteínu heterogenita podľa IHC, je obvykle označovaná ako variability imunohistochemické intenzity a predĺženie HER2-pozitívnych oblastí, je tiež problém, ktorý by mohol významne ovplyvniť výber vzoriek pre testovanie HER2 v GC. V skutočnosti, HER2 expresie heterogenita bola preukázaná nielen našej štúdii, ale aj inými autormi [39, 40], vrátane štúdie zahŕňajúce 2,727 gastrectomies [32]. V dôsledku toho sa celý-tkanivové rezy získané z resekovaných primárnych nádorov žalúdka môže ponúknuť väčšie zastúpenie rôznych sub klonálnej populácie nádorových buniek, ktoré by mohli pomôcť vyhnúť sa falošne negatívnych výsledkov v dôsledku heterogenity HER2. Vzhľadom k tomu, pacienti s lokálne pokročilým alebo metastatickým GC nemusí podstúpiť primárnej gastrektómii, celok-tkanivové rezy nie sú vždy k dispozícii, a ďalšie vzorky GC by mala byť použitá namiesto toho, zvýšenie otázku, ktoré sú najvhodnejšie pre testovanie HER2: endoskopické biopsie oproti
metastatické lézie. Pre endoskopické biopsia, odporúčanie je životaschopný rad reprezentatívnych nádorových fragmentov (ideálne 6-8), a ak je to možné, patológ by tiež mala Testovanie HER2 u druhej vzorky, ak je negatívny výsledok na nádor endoskopické biopsia [40].
Okrem toho boli testované GC vzoriek zo štúdie Toga pre expresiu HER2 s HercepTest kit, ktorý používa králičie polyklonálne anti-HER2 protilátka [6], vzhľadom k tomu, králičie monoklonálna protilátka (4B5) bol použitý v našej štúdii. Iné štúdie uvádzajú nižšie sadzby citlivosť pre HercepTest v porovnaní s 4B5 klonu pre detekciu expresie proteínu HER2 [15, 41, 42]. To by tiež mohlo zodpovedať za podobné IHC 3+ percento prípadov zistených v našom seriáli a na súd Toga, a to napriek prevahe nádorov od distálneho žalúdka medzi našimi pacientmi.
Údaje o HER2 expresiu v brazílskych pacientov s GC sú veľmi obmedzené a tam je široká variácia na publikovaných výsledkov. Prvé dve štúdie vykonané v Brazílii vôbec našiel zvýšenej expresie HER2 sadzbu vo výške 12 a 5,4%, vrátane IHC 3+ a 2+ prípady sčítajú [23, 24]. Avšak, triedenie skóre pre rakovinu prsníka bola použitá pre hodnotenie stavu HER2, v ktorom by mala byť celá bunková membrána zafarbia, a to nielen bočné steny alebo basolateral, čo naznačuje, podcenenie HER2 pozitivity. Vo viac nedávnych výskumov použitím špecifických kritérií HER2 mení na GC, IHC 3+ prípadov v rozmedzí od 0,8% do 11,6% [19 - 22, 25, 26]. Takisto štúdie poukazujú na najnižšej sadzby (0,8%, 3% a 6%) používa nádorové tkanivo mikročipov (TMA) získané z chirurgických vzoriek a ďalších protilátok anti-HER2 skôr ako 4B5 [19, 20, 22]. Tieto výsledky sú ťažko porovnávať s našimi dôsledku metodických rozdielov, najmä pri TMA a nádorové heterogenita expresie proteínu sú konfrontovaní. Tak TMA by mohlo predstavovať vzorky ďalšie podobné k endoskopické biopsia skôr než na väčších sekcií celý tkanív z primárnych gastrectomies, ktoré boli použité v našej štúdii.
Naše výsledky potvrdzujú doterajšie poznatky literatúry o brazílskych pacientov s GC testovaných na HER2 expresie s použitím vysoko citlivý anti-HER2 protilátka v nádorových sekciách celý tkanív. Ako v skutočnosti, nedávna analýza z brazílskeho Cancer Center v porovnaní výkonnosti HercepTest, SP3 a 4B5 protilátok medzi celok-tkanivových rezoch a TMA v sérii 199 gastrectomies [21]. Autori zistili najvyššiu HER2 pozitivity sadzbu s použitím rovnakých parametrov našej štúdie: 4B5 protilátky v nádorových sekciách celý tkanív (11,6%), čo je hodnota najviac podobné nášmu nálezu (10,5%). Najnižšia miera pozitivita HER2 bola zistená medzi TMA a HercepTest kit (3%) [21].
Cez vyššou citlivosťou zistené protilátky 4B5, niektorí autori tiež hlásené rozsiahle cytoplazmatický pozadí farbenie žalúdočné foveolární vrstvy a ložísk
črevnej metaplázia /dysplázia, ako je vidieť v našej štúdii, ktorá naznačuje skôr než vnútorné klonálnej charakteristiku metodický problém [15, 21, 41, 42]. V skutočnosti, HER2 farbenie dysplastických epitelu bola v korelácii s génovou amplifikáciu ISH [43]. Hoci tam boli v rozlišovaní HER2-pozitívne nádorové bunky z týchto oblastí žiadne ťažkosti, zdôrazňujeme, že farbenie je namieste nemožno brať do úvahy pri vyhodnocovaní HER2 výraz.
Až do písania tohto rukopisu autori boli schopní získať len tri ďalšie štúdie týkajúce ISH pre detekciu amplifikácie génu vo vzorkách GC od brazílskych pacientov [19, 21, 25]. Begnami et al. nájdených celkovej miery zosilnenie 8% využívajúcich ryby, ale percento IHC 2+ zosilnených prípadov nebolo spomenuté [19]. Podobne ako u našich zistení ďalšia skupina nenašiel žiadne zosilnené prípady medzi IHC 2+ nádorov, hoci FISH bola použitá metóda [25]. Okrem našej štúdii, len ešte jeden aplikovať striebro vo svetlom dvojitej ISH vo IHC 2+ prípadov [21]. Výsledky ukázali, široký rozsah zosilnenia ceny (od nuly do 100%), v závislosti na primárnej protilátku používané pre IHC a vzorky tkanív (whole-rezy oproti
TMA). 4B5 protilátky na 198 celej tkanivových rezov odhalila 20 prípadov s nejasné HER2 skóre (10,1%), z ktorých iba šesť prípadov (30%) vykazovalo amplifikáciu génu pomocou Sish [21]. Percento prípadov s konečnou HER2 pozitívneho stavu bola 14,6%, čo je o niečo vyššia rýchlosť, než je tá, ktorú odhalil, ktoré by mohli byť čiastočne vzhľadom k nižšej frekvencii distálnej GC (43,2%) v ich sérii. Došli k záveru, že najpresnejší metódou IHC pre hodnotenie HER2 expresie v GC bolo použiť 4B5 protilátky na celej tkanivových rezoch [21], ktorá bola práve táto metóda použitá v našej štúdii.
Navyše sme zistili súvislosť medzi HER2 pozitívne nádory a niektoré patologické parametre, ako je napríklad Laurenův črevnej podtypu (P
= 0,048), dobre sa mierne diferencované nádory (P
= 0,004) a prítomnosť lymphovascular invázie (P
= 0,031). Črevné podtyp bolo preukázané, že je patologickým znakom väčšiny vždy spojená s HER2 pozitivity v niekoľkých štúdiách [17, 32, 34, 35, 44, 45], vrátane procesu Toga [30] a niektoré brazílskej pacientov [19, 22, , 23, 26]. Vzhľadom k tomu, HER2 pozitivita sa očakáva, že sa nachádza na nádory črevnú typu, odporúčame, aby pri rokovaní s nádorom zmiešané typu, v oblastiach, kde črevná morfológiu by mala byť vybraná pre HER2 bodovania.
Asociácie HER2 pozitivity s histologického stupňa a prítomnosť lymphovascular invázie bol hlásený aj niektorí autori [19, 25, 31, 46], ale nie iní [20, 47].

• Žalúdočné sonda v rámci priameho výhľadu pomocou video laryngoscope Kráľ Vision ™: randomizovanej, prospektívna, klinický trial
• Korelácia medzi zdanlivým difúznych koeficientov a stavom HER2 u karcinómov žalúdka: Pilotné štúdie