Sammenheng mellom HER2-status i magekreft og clinicopathological funksjoner: en retrospektiv studie med hel-vev sections

sammenheng mellom HER2-status i magekreft og clinicopathological funksjoner: en retrospektiv studie med hel-vevssnitt
Abstract
Bakgrunn
Gastric kreft er vanligvis diagnostisert i et avansert stadium av sykdom og behandling er sparsom. Trastuzumab ble nylig godkjent for metastatisk eller lokalavansert karsinomer som oppstår i magen eller i gastroøsofageal krysset hos pasienter med HER2-positiv svulster. Imidlertid data om hyppigheten av HER2-positiv tilfeller blant brasilianske pasienter er begrenset. Vårt mål var å karakter HER2 protein og gen status på en rekke brasilianske pasienter med magekreft og for å evaluere sin tilknytning clinicopathological data.
Metoder
Histologiske lysbilder fra 124 primær gastrectomies ble anmeldt og deres patologiske rapporter ble hentet fra filene på en brasiliansk universitetssykehus. Automatisert immunhistokjemi for HER2 ble utført på hel-vevssnitt fra hver svulst. HER2-tvetydig tilfeller ved immunhistokjemi ble sendt til automatisert dual in situ
hybridisering for genamplifikasjon evaluering. HER2 status ble konfrontert med clinicopathological parametre for å vurdere statistisk signifikante assosiasjoner.
Resultater
Immunohistochemistry analyse viste at 13/124 tilfeller (10,5%) var HER2 positive (3+), 10/124 tilfeller (8,1%) ble tvetydig (2+) og 101/124 tilfeller (81,4%) var negative, blir 7 saker 1+. Ingen av de tvetydige tilfellene viste genamplifikasjon. Den samlede HER2 positivitet sats var 10,5%. Det var en sammenheng mellom HER2 uttrykk og Lauren intestinal histologisk subtype (P
= 0,048), godt til moderat differensierte tumorer (P
= 0,004) og tilstedeværelse av lymphovascular invasjon (P
= 0,031). Ingen sammenheng ble funnet mellom HER2 status og tumor topografi.
Konklusjoner
Konfrontert med data publisert av andre forfattere, kan lavere andel av HER2-positiv tilfeller funnet i vår serie delvis forklares med lavere frekvens av svulster som oppstår ved gastroøsofageal krysset i sammenligning med distale mage karsinom i brasilianske pasienter. Dette kan også forklare mangelen på statistisk signifikant sammenheng mellom HER2 status og tumor topografien i vår studie.
Nøkkelord
HER2 Magekreft Immunohistochemistry Geneamplifikasjon Clinicopathological funksjoner Bakgrunn Alt om millioner nye tilfeller av magekreft (GC ) er beregnet å forekomme hvert år i verden, tilsvarende 8% av alle cancerdiagnoser globalt [1, 2]. GC er også ansett som den nest største årsaken til kreftrelaterte dødsfall på verdensbasis og over 700 000 dødsfall er forventet å oppstå på grunn av denne sykdommen hvert år [1, 3]. Imidlertid er fordelingen av pasienter med GC i ulike deler av verden ikke homogen: over 70% av nye tilfeller og dødsfall forekommer i utviklingsland. De høyeste forekomst er funnet i Øst-Asia, Øst-Europa og Sør-Amerika [1]. The National Institute of Cancer av Brasil anslår at GC består av over 5% av alle kreftformer i dette landet [4].
Behandlingstilbud for GC er generelt begrenset, siden det er vanligvis diagnostisert på et avansert stadium av sykdommen, og derfor fem års overlevelse er gjennomgående lav, rundt 20% i de fleste deler av verden [2, 5]. Ifølge toga studien, en siste fase III internasjonal randomisert studie, behandling i kombinasjon med kjemoterapi og trastuzumab (TZB) har betydelig forbedret overlevelse hos pasienter med HER2-positiv avansert GC [6]. TZB er et rekombinant monoklonalt antistoff rettet mot HER2, et transmembranprotein som tilhører familien av human epidermal vekstfaktor-reseptorer [7]. HER2 intracellulære domenet viser tyrosin kinase-aktivitet, i stand til å generere intracytoplasmatisk andre budbringere som koordinere atom ekspresjon av gener assosiert med angiogenese, celleformering, og overlevelse [8]. Overekspresjon av HER2 protein, et produkt fra et proto-onkogen ligger i kromosom 17, er blitt assosiert med karsinogenese og tumorprogresjon av bryst, eggstokk, spyttkjertlene, prostata og mage-tarm-kreft [9].
Basert på togaprøve resultatene har internasjonale reguleringsorganer nylig godkjent bruk av TZB i HER2-positiv metastatisk eller lokalavansert karsinomer som oppstår i magen eller i gastroøsofageal krysset (GEJ) [10]. Kreftsvulster fra kvalifiserte pasienter for behandling med TZB må vise HER2-positiv status, attestert av protein overekspresjon (poengsum 3+) ved immunhistokjemi (IHC) eller genamplifisering ved in situ
hybridisering (ISH) for svulster med tvetydige IHC resultater (poengsum 2+) [11, 12]. Siden da har mange studier fokusert på å presentere hyppigheten av HER2-positiv GC i forskjellige populasjoner, med en stor variasjon av fremgangsmåter som benyttes for protein og gen-deteksjon. Derfor resultater bemerkelsesverdig varierer fra 2 til 45% av økt forekomst av HER2 i GC serie [13-17]. En stor systematisk inkludert data fra 49 studier fant en median rate på 18% av HER2 positivitet i 11,337 pasienter med GC [18]. Likevel er forekomsten av HER2-positiv tilfeller blant brasilianske pasienter er ukjent, med få data publisert [19-26]. Siden det brasilianske helsevesenet ennå ikke har sluttet seg til bruk av TZB for GC behandling her i landet, mener vi at påvisning av HER2-positiv GC i brasilianske pasienter kan gi vitenskapelig grunnlag for etablering av nye folkehelsepolitikk og definere bedre klinisk protokoller for å forbedre behandlingen av disse pasientene i Brasil.
Derfor, i denne studien ønsket vi å karakter HER2 uttrykk i GC i en rekke brasilianske pasienten ved å bruke hel-vev tumorsnitt fra kirurgiske prøver, og å vurdere foreningen mellom HER2 protein og gen status med clinicopathological data.
Metoder
studien ble godkjent av etikkomiteen av vår institusjon (Comité de Etica e Pesquisa COEP-UFMG) under CAAE protokollnummer 32898114.9.0000.5149. Skriftlig informert samtykke ble innhentet i henhold til institusjonelle retningslinjer.
Vi studerte 142 påfølgende pasienter som gjennomgikk primær gastrektomi mellom 2007 og 2011 på klinikker Hospital, Federal University of Minas Gerais, Brasil, som histopatologisk diagnose var GC. Ingen av pasientene hadde mottatt neoadjuvant kjemoterapi eller annen type av behandling for deres svulst før operasjonen. Alle 142 tilfeller hadde sine patologiske rapporter hentes, og for å bekrefte diagnosen av GC, ble de opprinnelige Hematoxylin-eosin farget lysbilder samtidig anmeldt av to patologer (RSL og MMDAC), hvorav den ene er en ekspert på gastrointestinal patologi (MMDAC) . Kliniske data (pasientenes alder og kjønn) og patologiske parametre (tumor topografi, maksimal svulst diameter, scene, histologisk grad og subtype, tilstedeværelse av lymphovascular og blod-fartøy invasjon) ble registrert. Svulster ble delt inn i to grupper etter gastric topografi: fjerne og nære svulster, sistnevnte kategorien skal inkluderes karsinomer fra GEJ. Den TNM-systemet kriterier og recomendations fra syvende utgaven av det amerikanske Joint Committee on Cancer Staging Manual ble brukt for svulst staging [27, 28]. Indeksen av kjertel formasjon og cytologic pleomorphism ble ansett for histologisk gradering i tillegg, moderat eller dårlig differensierte svulster. Lauren histologisk klassifisering systemet ble brukt for svulst subtyping [29].
New 4 mikrometer tykkelse hel-vevssnitt ble hentet fra formalinfiksert parafin innebygd tumorprøver og sendt til automatisert IHC, ved hjelp av en Benchmark XT ™ plattform (Ventana Medical Systems , Arizona, USA) og prediluted primært kanin monoklonalt antistoff anti-HER2 /neu (4B5 klone). Alle lysbildene ble subsequentially kontra med hematoksylin. En forhåndstestet HER2-positiv brystkreft prøve ble brukt som ekstern positiv kontroll. Atten tilfeller inneholdt ikke nok svulstvev for påfølgende IHC protokoller og ble ekskludert fra denne studien, noe som resulterer i 124 er aktuelt for analyse.
Tre patologer (RSL, HG og CBN) på en gang analysert immunfargete lysbilder ved hjelp av en multi-head mikroskop og fått en konsensus score for HER2 uttrykk ifølge Hofmann og Rüschoff anbefalinger for GC kirurgiske prøver [11, 12]. Sakene ble kategorisert i fire grupper (0, 1+, 2+ og 3+), avhengig av forlengelse og intensiteten i uttrykket: 0, ingen reaktivitet, eller membran reaktivitet i < 10% av cellene; 1+, svak /knapt merkbar membran reaktivitet i > 10% av celler, og celler som er reaktive bare i en del av sin membran; 2+, svak til moderat fullstendig eller basolateral membran reaktivitet i > 10% av cellene; 3+, sterk komplett eller basolateral membran reaktivitet i > 10% av celler [11]. Bare en membran mønster av ekspresjon var egnet for evaluering. Sakene inkludert i 3+ kategorien ble vurdert positivt for HER2 protein overekspresjon, mens 0 og 1 + saker ble ansett som negativt.
Cases scoret som 2+ ble vurdert tvetydig for HER2 protein uttrykk og ny 4 mikrometer tykkelse grossist vevssnitt ble sendt inn til sølv lysfelt in situ
hybridisering (SISH) ved hjelp av den samme automatiserte plattform (BenchMark XT ™) og informere HER2 Dual ISH DNA Probe Cocktail analysen (Ventana Medical Systems, Arizona, USA). HER2 Hotell og kromosom 17 (CEP17) kopiere numre ble talt i 20-overlappende kjerner samtidig av to observatører (RSL og CBN). HER2
genomisk profilen ble definert som ikke-forsterket hvis den gjennomsnittlige HER2 Twitter /CEP17 ratio var mindre enn 2,0 og forsterkes dersom HER2 Twitter /CEP17 forholdet var ≥2.0. Hvis forholdet falt mellom 1,8 og 2,2, ble ytterligere 20 kjerner mottok og hvorved mengdeforholdet beregnes. IHC 2+ tilfeller viser genamplifikasjon av SISH og IHC 3+ saker ble begge ansett positiv for HER2 sluttstatus [11, 12].
Statistiske analysen ble utført ved hjelp av SPSS versjon 19,0 programvare (SPSS Inc., Chicago, IL ). Pearson kji-kvadrat test ble brukt til å korrelere IHC resultater og HER2 endelige status med clinicopathological parametere. Alle P
verdiene var tosidig, og P
< . 0,05 ble ansett statistisk signifikant
Resultater
Clinicopathological egenskaper og deres tilknytning til HER2 endelige status og IHC score er vist i tabell 1. Pasientenes alder ved diagnose varierte fra 28 til 92 år (median: 62,33 år), og det var 64 menn (51,6%) og 60 kvinner (48,4%) blant 124 pasienter inkludert i denne studien. Tumorer ble fortrinnsvis identifisert ved den distale magesekken (80,6%) sammenlignet med tumorer som oppstår i den gastriske cardia eller fra GEJ. Tumorstørrelse varierte mellom 0,5 og 14,0 cm (gjennomsnittlig 5,31 cm) og avanserte tumorer (PT2, PT3 og pt4 kategorier) utgjorde 107 tilfeller (86,3%). Ifølge histologisk gradering, 13 tilfeller (10,5%) ble godt differensiert, 45 tilfeller (36,3%) moderat differensierte, og 66 tilfeller (53,2%) dårlig differensierte svulster. Lauren intestinal histologisk subtype ble hyppigst diagnostisert, sto for 61 tilfeller (49,2%). Diffuse og blandede undergrupper ble observert hos 21 (16,9%) og 33 (26,6%) tilfeller, henholdsvis. De ni gjenværende tilfeller (7,3%) ble klassifisert som ubestemt. Lymphovascular invasjonen ble funnet i 94 tilfeller (75,8%), og 85 pasienter (68,5%) hadde lymfeknutemetastase ved diagnose, med et gjennomsnitt på 9,27 positive noder per sak (område 1 til 63 lymfeknuter) .table en forening mellom HER2 status og clinicopathological parametere
Totalt
HER2 positiv
HER2 negative
P
verdi
HER2 (3 +) <.no> HER2 (2+)
HER2 (0, 1+) ​​
P
verdi
n =
124 ( %)
13 (10,5)
111 (89,5)
13 (10,5)
10 (8,1)

101 (81,4)
Alder ved diagnose
0,803
0,590
≥60 år
82 (66,1)
9
73
9
8
65
< 60 år
42 (33,9)
4
38
4
2
36
Kjønn
0,865
0,459
Mann fra 64 (51,6)
7
57
7
7
50
Kvinne
60 (48,4)
6
54
6
3
51
Tumor topografi
0,720
0,709
Distal magen
100 (80,6)
10
90
10
9
81
Proximal mage /GEJ
24 (19,4)
3
21
3
1 20
Histologisk subtype
0,048
0,009
Tarm
61 (49,2)
11
50
11
9
41
Diffuse
21 (16,9)
0
21
0
0
21
Blandet
33 (26,6)
2
31
2
1 30
Unditermined
9 (7,3)
0
9
0
0
9
Histologisk klasse
0,004
< 0,001
vel
13 (10,5)
4
9
4
1 8
Moderat
45 (36,3)
7
38
7
8
30
Dårlig
66 (53,2)
2
64
2
1 63
Lymphovascular invasjon
0,031
0,060
Positiv
94 (75,8)
13
81
13
6
75
Negativ
30 (24,2)
0
30
0
4
26
Blood-fartøy invasjonen
0,395
0,170
Positive
44 (35,5)
6
38
6
1 37
Negativ
80 (64,5)
7
73
7
9
64
pT status
0.271
0,165
PT1
17 (13,7)
0
17
0
1 16
pT2
32 (25,8)
3
29
3
2
27
pT3
69 (55,6)
10
59
10
5
54
pT4
6 (4,9)
0
6
0
2
4
pN status
0,453
0,762
pN0
39 (31.5)
2
37
2
4
33
PN1
46 (37,1)
7
39
7
4
35
pN2
24 (19,3)
3
21
3
1 20
pN3
15 (12,1)
1
14
1 1
13
pM status
0,548
0,705
pM0
121 (97,6)
13
108
13
10
98
PM1
3 (2,4)
0
3
0
0
3
Fet tallene representerer P
verdier med statistisk signifikans
Immunhistokjemisk analyse viste 13 positive tilfeller (3+; 10,5%) for HER2 protein overekspresjon (fig 1a), 10 tvetydige tilfeller (2 +,.. 8,1%) (fig 1b) og 101 negative tilfeller (81,4%), 7 av dem ble scoret 1+ (5,6%) (fig . 1c). Median alder ved diagnose tendens til å øke i henhold til HER2 status (negative, 61.76 år, tvetydig, 66,3 år, og positiv, 68.58 år), selv om dette ikke statistisk signifikant. Ingen av pasientene i kategorien IHC 3+ var yngre enn 46 år og den eldste pasienten i serien (en 92 år gammel kvinne) var blant dem. Det var ingen sammenheng mellom HER2 uttrykk og pasientenes kjønn. Fig. 1 Immunhistokjemisk analyse av HER2 uttrykk i mage karsinom bruker 4B5 antistoff i hel-vevssnitt. (A) en HER2-positiv sak (3+); (B) en HER2-tvetydig sak (2+); (C) en HER2-negative huset (1+); (D) intratumoral protein heterogenitet i et HER2-positiv huset (3+). (AC: x400 feltet forstørrelse; D: x200 feltet forstørrelse)
Det var en positiv sammenheng mellom HER2 protein uttrykk og godt å moderatly differensierte svulster (P
< 0,001), så vel som med Lauren intestinal subtype (P
= 0,009).
tumorer som oppstår i den distale magen utgjorde 76,9% av IHC 3 + tilfeller, mens 23,1% der finnes i den gastriske cardia eller i GEJ, men denne varianten var ikke statistisk signifikant. Ingen IHC 3+ tumor viste en diffus eller ubestemt morfologi og bare to (15,4%) ble vurdert dårlig differensierte karsinomer. Hver IHC 3+ tumor viste lymphovascular invasjon og de var alle diagnostisert på et avansert stadium av sykdommen, hovedsakelig i kategorien pT3 (76,9%). Elleve tilfeller (84,6%) var positive for lymfeknutemetastase, med et gjennomsnitt på 7,5 lymfeknuter per tilfelle. Imidlertid ble det ikke observert noen statistisk signifikant sammenheng mellom HER2 protein overekspresjon og pt, pn eller PM status.
Sammenlignet med IHC 3+ tilfeller HER2-tvetydige svulster (2+) presenterte en noe lignende profil når morfologiske data ble tatt hensyn til. Ingen tilfeller viste diffus eller ubestemt histologi, med en overvekt av tarm subtype (9 tilfeller, 90,0%) og moderat differensierte svulster (8 tilfeller, 80,0%). Flertallet av svulster i denne innstillingen også kompromittert distal magen og ble diagnostisert på et avansert stadium av sykdommen (9 tilfeller, 90,0%). Men det var en nedgang i andelen av saker som viser lymphovascular invasjon og lymfeknutemetastase (6 tilfeller, 60,0%) sammenlignet med tall funnet blant IHC 3+ tilfeller (13 tilfeller, 100,0% og 11 tilfeller, 84,6%, henholdsvis) .
HER2-negative karsinom (score 0 og 1+) samles alle svulster med en diffus eller ubestemt morfologi samt flertallet av de med dårlig differensiert histologisk grad og tidlig stadium av sykdommen ved diagnose.
IHC 2 + saker ble oversendt Sish men ingen genamplifikasjon ble oppdaget. Derfor tilfeller med en endelig HER2-positiv status ble utelukkende består av IHC 3+ svulster, som representerer 10,5% av alle GC i denne serien. HER2 positivitet var assosiert med tarm subtype (P
= 0,048), godt til moderat differensierte svulster (P
= 0,004) og tilstedeværelse av lymphovascular invasjon (P
= 0,031).
Angå intratumoral HER2 protein heterogenitet, utvidelse av IHC 3 + områder varierte 10-99% av positive neoplastiske celler (fig. 1d). Det var også en variasjon i forlengelsen av HER2 immunoreaktive områder i den tvetydige kategori, som strekker seg fra 10 til 40% av tumorcellene. I begge kategorier, ble intratumoral protein heterogenitet mest sett i blandede typen karsinomer, der HER2 uttrykk høyt korrelert med intestinal-type områder.
Bortsett fra deres HER2 score, mange tilfeller vises en cytoplasma immunoreaktivitets i normale mageslimhinnen celler (87 tilfeller , 70,2%), metaplastiske epitel (30 tilfeller, 24,2%) og foci
av dysplasi (24 tilfeller, 19,4%) (fig. 2). Dette mønsteret av ekspresjon ble observert i både metaplastiske og dysplastisk epitel, til tross for arten av metaplasi eller graden av dysplasi. Nuclear uttrykk ble ofte sett blant diffuse typen karsinomer, men alle disse immunostained områdene ble ikke tatt hensyn til ved scoring av HER2 immunhistokjemisk profil. Fig. 2 Mulige fallgruver i immunhistokjemisk analyse av HER2 protein uttrykk ved hjelp av 4B5 antistoff. Cytoplasmatiske ikke spesifikk farging i normal foveolar mageslimhinnen (til venstre) og i fokus
av mage høygradig dysplasi (høyre) (x200 feltet forstørrelse)
Diskusjon
I vår studie fant vi en endelig HER2- positiv status på 10,5%. Den samlede HER2 positivitet prisen funnet i toga studien var 810 av 3,665 pasienter (22,1%) [6]. Disse tallene representerer en av de største sett av HER2 testing data i GC prøver, hentet fra pasienter fra 24 forskjellige land i Asia, Europa og Latin-Amerika. Selv om 22,1% står for mer enn dobbelt så mye positive svulster vi fant i vår serie, toga rettssaken HER2 positivitet screening kriterier inkludert alle tilfeller med protein uttrykk ved IHC (3+ og 2+ tilfeller) eller genamplifisering ved ISH alene. Mer detaljerte opplysninger om HER2 testing i toga studien er nylig publisert avslører at nettopp 610 tilfeller av 3,665 tumorprøver (16,6%) var faktisk anses HER2-positiv, enten ved å utføre IHC 3+ eller IHC 2+ med genamplifisering ved fluorescens in situ
hybridisering (FISH) [30]. En post hoc
undersøkende analyse konkluderer med at pasienter i disse kategoriene var de som helt dratt mest nytte av behandling med TZB [6]. Dermed eksakte prosentandelen av pasienter med behov for behandling med TZB ifølge HER2 screening utført på toga rettssaken var 16,6%, og når IHC resultatene regnes alene, kun 398 tilfeller (10,9%) var faktisk HER2 positive (3+) [30 ]. I vår studie, siden ingen IHC 2+ tilfeller viste genamplifikasjon av SISH, fant vi en IHC 3+ hastighet og en endelig HER2-positiv status på 10,5%.
GC i brasilianske pasienter har en tendens til å oppstå i antrum, assosiert med Helicobacter pylori
kronisk infeksjon, og derfor er vår serie består hovedsakelig av karsinomer i distale magesekken (80,6%). Siden HER2 uttrykket har blitt sterkt assosiert med GC av Cardia og GEJ [17, 30-33], vi forventet å finne en enda lavere positivitet raten blant våre saker. Toga prøve Resultatene viste en forskjell i HER2 positivitet priser mellom Europa /Asia og Sentral /Sør-Amerika (henholdsvis 23,8 og 16,1%, inkludert alle FISH-positiv og IHC 3+ tilfeller). Forfatterne forbundet kontrasterende resultater som følge av det lavere antall pasienter som vist i Latin-Amerika (484 ute av 3,665 pasienter) i stedet for en mulig variasjon i tumorbiologi [30]. Dessverre kunne vi ikke finne informasjon spesielt om HER2 uttrykk i GC av brasilianske pasienter inkludert i toga studien. Hvis cross-data mellom tumor topografi og pasientenes opprinnelsesland kunne hentes, kan det også bidra til å forklare avvik HER2-positiv GC priser i Latin-Amerika.
Likhet med våre resultater, i en fersk stor europeisk serie [34], så vel som i en japansk kohort av 1,461 pasienter [35], var det ingen forskjell i HER2 positivitet mellom proksimale og distale gastriske tumorer. Men to store kinesiske serien [17, 33] nylig viste signifikant høyere HER2 uttrykk i proksimale GC, i samråd med toga trial funn [30] og med resultater fra en rekke 2,798 sørkoreanske pasienter [32]. Forfatterne har antydet at intestinal-type kreft er vanligvis mer hyppige i GEJ og, som forskjellige etiologier kan spille en rolle i karsinogenese av tumorer fra disse to steder, kan dette delvis rettferdiggjøre distinkte HER2 ekspresjonshastigheter ifølge tumor topografi [30]. I tillegg til den genetiske opphav i henhold til etnisitet, kan flere mage karsinogenisitetsstudier trasé bli sterkt påvirket av kostholdsvaner og kronisk Helicobacter pylori
infeksjon [3]. Selv om dette har nok også en viss innflytelse på HER2 positivitet priser finnes i ulike populasjoner med GC, forholdet mellom disse faktorene og HER2 uttrykk er fortsatt ukjent, med få artikler publisert [36, 37].
Antallet IHC 3+ tilfeller funnet i vår studie kan delvis forklares ved at hel-vevssnitt ble utelukkende brukt for HER2 evaluering, i stedet for endoskopiske biopsier. En fersk studie sammenkoblet primære gastrectomies og deres endoskopiske biopsier sammenligne HER2 uttrykk score og fant en konkordans rente på bare 57%, hovedsakelig på grunn av intratumoral HER2 heterogenitet [38]. HER2 genetisk heterogenitet ved ISH er tidligere vist på brystkreft, men det synes å være en mer komplisert sak på GC prøver [39]. Proteinekspresjon heterogenitet av IHC, vanligvis omtalt som variasjon i immunhistokjemisk intensitet og utvidelse av HER2-positiv områder, er også et problem som kan i stor grad påvirke prøveutvalg for HER2-testing i GC. Faktisk har HER2 uttrykk heterogenitet blitt demonstrert ikke bare av studien, men også av andre forfattere [39, 40], blant annet en undersøkelse som omfatter 2.727 gastrectomies [32]. Som et resultat, kan hel-vevssnitt hentet fra resected primære mage svulster har en større representasjon av forskjellige sub klonal kreftcellepopulasjon som kan bidra til å unngå falske negative resultater på grunn av HER2 heterogenitet. Siden pasienter med lokalavansert eller metastatisk GC ikke kan gjennomgå primær gastrektomi, hel-vevssnitt er ikke alltid tilgjengelig og andre GC prøvene bør brukes i stedet, å reise spørsmålet om hvilke er best egnet for HER2 testing: endoskopiske biopsier versus
metastatiske lesjoner. For endoskopiske biopsier, er anbefalingen en levedyktig antall representative tumorfragmenter (helst 6-8) og, hvis mulig, bør patologen også utføre HER2 testing på en annen prøve når et negativt resultat er funnet på en svulst endoskopisk biopsi [40].
i tillegg GC prøver fra togaprøveperioden ble testet for ekspresjon HER2 med HercepTest kit, som bruker et kanin polyklonalt anti-HER2-antistoff [6], mens en kanin monoklonalt antistoff (4B5) ble anvendt i vårt studium. Andre studier har rapportert lavere sensitivitets prisene for HercepTest sammenlignet med 4B5 klon for påvisning av HER2 protein uttrykk [15, 41, 42]. Dette kan også forklare den ligner IHC 3+ Andelen saker som finnes i vår serie og på toga rettssaken, til tross for overvekt av svulster fra den fjerne magen blant våre pasienter.
Data om HER2 uttrykk i brasilianske pasienter med GC er veldig begrenset, og det er en stor variasjon på publiserte resultater. De to første studiene noensinne er gjennomført i Brasil har funnet en økt forekomst av HER2 hastighet på 12 og 5,4%, inkludert IHC 3+ og 2+ tilfeller lagt sammen [23, 24]. Imidlertid ble gradering stillingen for brystkreft anvendes for HER2-status vurdering, hvor hele cellemembranen bør være farget, og ikke bare sideveis eller basolaterale vegger, noe som tyder på undervurdering av HER2 positivitet. I nyere forskning ved hjelp av spesifikke HER2 scoring kriterier for GC, IHC 3+ tilfeller varierte fra 0,8% til 11,6% [19-22, 25, 26]. Studier viser de laveste prisene (0,8%, 3% og 6%) brukes svulst microarray (TMA) hentet fra kirurgiske prøver og andre anti-HER2-antistoffer i stedet 4B5 [19, 20, 22]. Disse resultatene er vanskelig å bli sammenlignet med våre på grunn av metodiske forskjeller, særlig når TMA og tumoral proteinekspresjon heterogenitet blir konfrontert. Dermed TMA kan representere prøver mer lik endoskopiske biopsier snarere enn til større hel-vevssnitt fra primær gastrectomies, som ble brukt i vår studie.
Våre resultater underbygge dagens litteratur funnene på brasiliansk pasienter med GC testet for HER2 uttrykk ved hjelp av en svært sensitive anti-HER2-antistoff i hel-vev tumorsnitt. Som et spørsmål om faktum, en fersk analyse fra en brasiliansk kreftsenter sammenlignet ytelsen HercepTest, SP3 og 4B5 antistoffer mellom hel-vevssnitt og TMA i en serie av 199 gastrectomies [21]. Forfatterne fant den høyeste HER2 positivitet sats med de samme parameterne for vår studie: 4B5 antistoff i hel-vev tumorsnitt (11,6%), en verdi som ligner mest på våre funn (10,5%). Det laveste HER2-positivitet Hastigheten ble identifisert blant TMA og HercepTest kit (3%) [21].
Til tross for den høyere følsomhet funnet med 4B5-antistoffet, har enkelte forfattere også rapportert omfattende cytoplasmisk bakgrunnsfarging av det foveolar gastrisk lag og foci
av intestinal metaplasi /dysplasi, som sett i vårt studium, noe som antyder en iboende egenskap klonal snarere enn et metodisk problem [15, 21, 41, 42]. Faktisk har HER2 farging av dysplastisk epitel vært korrelert til genamplifikasjon av ISH [43]. Selv om det var ingen problemer med å skille HER2-positiv neoplastiske celler fra disse områdene, understreker vi at farging av sistnevnte ikke må vurderes når ledelsen HER2 uttrykk.
Frem til skriving av foreliggende manus forfatterne var i stand til å hente tre andre studier om ISH for genamplifisering deteksjon i GC prøver fra brasilianske pasienter [19, 21, 25]. Begnami et al. funnet en generell forsterkning sats på 8% ved hjelp av FISH, men prosentandelen av IHC 2+ forsterkede tilfeller ble ikke nevnt [19]. I likhet med våre funn, gjorde en annen gruppe ikke finne noen forsterkede tilfeller blant IHC 2+ svulster, selv om fisken var sysselsatt metoden [25]. Foruten vår studie, bare en annen brukt sølv lysfelt dual ISH i IHC 2+ tilfeller [21]. Resultatene viste et bredt spekter av forsterknings satser (fra null til 100%), i henhold til det primære antistoff som brukes til IHC og vevsprøver (hel-vevssnitt versus
TMA). 4B5-antistoff på 198 hel-vevssnitt viste 20 tilfeller med en tvetydig HER2 poengsum (10,1%) av hvilke bare seks tilfeller (30%) viste genamplifikasjon av SISH [21]. Prosentandelen av tilfeller med en endelig HER2-positiv status var 14,6%, en litt høyere hastighet enn den som vi avdekket, som kan være delvis på grunn av den lavere frekvens av distal GC (43,2%) i sin serie. De har konkludert med at den mest nøyaktige IHC metode for å evaluere HER2 uttrykk i GC var å bruke 4B5 antistoff på hel-vevssnitt [21], som var akkurat den metode som anvendes i vår studie.
Videre fant vi en sammenheng mellom HER2 positive tumorer og noen patologiske parametre, som Lauren intestinal subtype (P
= 0,048), godt til moderat differensierte tumorer (P
= 0,004) og tilstedeværelse av lymphovascular invasjon (P
= 0,031). Intestinal-subtypen har vist seg å være den patologiske trekk mest alltid forbundet med HER2 positivitet i flere undersøkelser [17, 32, 34, 35, 44, 45], inkludert Toga prøve [30] og noen med brasilianske pasienter [19, 22 , 23, 26]. Siden HER2 positivitet ventes å bli funnet på intestinal-type svulster, anbefaler vi sterkt at det, når du arbeider med en blandet-type svulst, områder som viser en intestinal morfologi bør velges for HER2 scoring.
Association of HER2 positivitet med histologisk karakter og nærværet av lymphovascular invasjon har også blitt rapportert av noen forfattere [19, 25, 31, 46], men ikke ved andre [20, 47].

• Magesonde innsetting under direkte visjon hjelp Kongen Vision ™ video laryngoskop: en randomisert, prospektiv, klinisk studie
• Sammenheng mellom tilsynelatende Diffusjonskoeffisientene og HER2 status i mage kreft: pilot studie