Ассоциация между HER2 статусом при раке желудка и клинико-патологическими особенностями: ретроспективное исследование с использованием разделов целого ткани

Ассоциация между статусом HER2 при раке желудка и клинико-патологическими особенностями: ретроспективное исследование с использованием разделов цельной ткани
Аннотация
Фон
рак желудка обычно диагностируется на поздней стадии заболевания и варианты лечения скудны. Трастузумаб был недавно одобрен метастатическим или местно-распространенных карцином, возникающих в желудке или в желудочно-пищеводного соединения у пациентов с HER2-позитивными опухолями. Тем не менее, данные о частоте HER2-положительных случаев среди бразильских пациентов ограничены. Наша цель состояла в том, чтобы охарактеризовать белок HER2 и статус гена в ряде бразильских пациентов с раком желудка и оценить его связь с клинико-патологическими данными.
Методы изображения гистологических слайды были рассмотрены 124 первичные гастрэктомий и их патологические отчеты были получены из файлы в бразильской университетской больнице. Автоматизированная иммуногистохимии для выявления HER2 проводили на участках цельной ткани от каждой опухоли. HER2-сомнительны случаи иммуногистохимическим были представлены автоматизированные двойного Ситу
гибридизации для оценки амплификации гена в. статус HER2 столкнулось с клинико-патологическими параметрами для оценки статистически значимых ассоциаций.

Результаты анализа иммуногистохимии показали, что случаи 13/124 (10,5%) были положительными HER2 (3+), 10/124 случаев (8,1%) были неоднозначны (2+) и 101/124 случаев (81,4%) были отрицательными, будучи 7 случаев 1+. Ни один из неоднозначных случаев не показали амплификации гена. Общий уровень HER2 положительность составил 10,5%. Был ассоциация между экспрессией HER2 и кишечной гистологического подтипа Лорена (P
= 0,048), а умеренно дифференцированными опухолями (P = 0,004
) и наличие лимфоваскулярной вторжения (P
= 0,031). Ни одна ассоциация не была найдена между HER2 статусом и топографии опухоли.
Выводы
Столкнувшись с данными, опубликованными другими авторами, тем ниже процент HER2-положительных случаев нашли в нашей серии может быть частично объяснено более низкой частотой опухолей, возникающих при желудочно-пищеводного соединения по сравнению с дистальных желудочных карцином у бразильских пациентов. Это может также объяснить отсутствие статистически значимой связи между HER2 статусом и топографии опухоли в нашем исследовании.
Ключевые слова
HER2 рак желудка Immunohistochemistry амплификации гена особенности клинико-патологическими фона изображения около одного миллиона новых случаев рака желудка (GC ), по оценкам, каждый год происходит в мире, что соответствует 8% всех диагнозов рака на глобальном уровне [1, 2]. GC также считается второй ведущей причиной смертности от онкологических заболеваний во всем мире и более 700 000 случаев смерти, как ожидается, произойти из-за этого заболевания ежегодно [1, 3]. Тем не менее, распределение больных с GC в разных частях земного шара не является однородным: более 70% новых случаев заболевания и смерти происходят в развивающихся странах. Самые высокие показатели заболеваемости находятся в Восточной Азии, Восточной Европы и Южной Америки [1]. Национальный институт рака Бразилии считает, что GC содержит более 5% всех злокачественных новообразований в этой стране [4]. Варианты
Лечение для GC, как правило, ограничены, так как она, как правило, диагностируется на поздней стадии заболевания и, следовательно, скорость пятилетняя выживаемость составляет стабильно низким, около 20% в большинстве регионов мира [2, 5]. Согласно ToGA исследования, недавно фаза III международного рандомизированного исследования, лечение в комбинации химиотерапии и трастузумаба (TZB) значительно повышает выживаемость у пациентов с HER2-положительным расширенному GC [6]. TZB представляет собой рекомбинантный моноклональное антитело, воздействующее HER2, трансмембранный белок, который принадлежит к семейству рецепторов эпидермального фактора роста человека [7]. HER2, внутриклеточный домен показывает активность киназы тирозина, способный генерировать Интрацитоплазматическую вторичные мессенджеры, которые координируют ядерное экспрессию генов, ассоциированных с ангиогенезом, пролиферации клеток, и выживание [8]. Сверхэкспрессия белка HER2, продукт прото-онкогена, расположенного на хромосоме 17, был связан с канцерогенеза и опухолевой прогрессии рака молочной железы, яичников, слюнных желез, простаты и рака желудочно-кишечного тракта [9].
На основании ToGA суда результаты, международные регулирующие органы недавно одобрили использование TZB в HER2-положительным метастатическим или местно-распространенным карцином, возникающих в желудке или в желудочно-пищеводного соединения (GEJ) [10]. Карцинома из подходящих пациентов для лечения с TZB должны представить HER2-положительный статус, заверенная белка оверэкспрессии (оценка 3+) с помощью иммуногистохимии (IHC) или амплификации гена с помощью Ситу
гибридизации (ISH) для опухолей с сомнительными результатами IHC (оценка в 2+) [11, 12]. С тех пор многие исследования были сосредоточены на представлении частоту HER2-положительного GC в разных популяциях, с широкой вариации на методах, используемых для обнаружения белков и генов. Таким образом, результаты заметно в диапазоне от 2 до 45% от гиперэкспрессией HER2 в GC серии [13-17]. Большой систематический обзор включая данные из 49 исследований было установлено, средний темп 18% HER2 положительности в 11,337 пациентов с GC [18]. Тем не менее, распространенность HER2-положительных случаев среди бразильских пациентов остается неизвестным, с мало данных опубликованы [19-26]. Так как бразильское система общественного здравоохранения до сих пор не одобрил использование TZB для лечения ГК в этой стране, мы считаем, что обнаружение HER2-положительного GC в бразильских пациентов может обеспечить научную основу для создания новой политики в области общественного здравоохранения и определить более качественные клинические протоколы для улучшения лечения этих пациентов в Бразилии.
Таким образом, в настоящем исследовании мы стремились охарактеризовать экспрессию HER2 в GC в серии бразильских пациентов, используя опухолевые участки цельной ткани от хирургических образцов, а также, чтобы оценить связь между белком HER2 и статусом гена с клинико-патологическими данными.
Методы
настоящее исследование было одобрено Комитетом по этике нашего института (Comite де ETICA е Pesquisa COEP-UFMG) под номером протокола CAAE 32898114.9.0000.5149 путем. Письменное информированное согласие было получено в соответствии с ведомственным руководящим принципам.
Мы изучили 142 последовательных пациентов, перенесших первичную гастрэктомию в период между 2007 и 2011 годах в больнице клиники, Федеральный университет Минас-Жерайс, Бразилия, чей диагноз был гистопатологическая GC. Ни один из пациентов не получал неоадъювантной химиотерапии или другой тип лечения для их опухоли перед хирургическим вмешательством. Все 142 случая имели их патологические отчеты получены и для того, чтобы подтвердить диагноз GC, оригинальные гематоксилин-эозином окрашенные слайды были одновременно рассмотрены двумя патологи (RSL и MMDAC), один из которых является специалистом в области патологии желудочно-кишечного (MMDAC) , были зарегистрированы Клинические данные (возраст и пол пациентов) и патологические параметры (топография опухоли, максимальный диаметр опухоли, стадии, гистологического класса и подтип, наличие лимфоваскулярной и кровеносных сосудов вторжения). Опухоли были разделены на две группы в зависимости от топографии желудка: дальняя и ближняя опухолях последняя категория включала карцином из GEJ. Критерии системы TNM и рекомендациями от 7-е издание американского Объединенного комитета по вопросам рака Руководства по Staging были использованы для стадирования опухоли [27, 28]. Индекс железистой формации и цитологического плеоморфизмом были рассмотрены для гистологической классификации в хорошо, умеренно или слабо дифференцированных опухолей. гистологическое система классификации Lauren была использована для опухоли подтипов [29].
Новый мкм толщиной 4 секции в целом тканей были получены из фиксированных формалином и залитых парафином образцов опухоли и представлен автоматизированной IHC, используя платформу BenchMark XT ™ (Ventana Medical Systems , штат Аризона, США), и предварительно разбавленный первичного моноклонального антитела кролика против HER2 /Neu (4B5 клон). Все слайды были subsequentially контрастно гематоксилином. Предварительное тестирование HER2-положительного образца рак молочной железы был использован в качестве внешнего положительного контроля. Восемнадцать случаев не содержат достаточное количество опухолевой ткани для последующих протоколов IHC и были исключены из этого исследования, в результате чего в 124 соответствующих случаях для анализа.
Три патологи (РГБ, HG и CBN) все сразу анализировали иммуноокрашиванию слайдов с использованием многоступенчатой ​​головы микроскоп и получил консенсусную оценку для экспрессии HER2 в соответствии с рекомендациями Гофмана и Rüschoff для GC хирургических образцов [11, 12]. Дела были разделены на четыре группы (0, 1+, 2+ и 3+), в зависимости от расширения и интенсивности выражения: 0, отсутствие реактивности или мембранным реакционной способности в &л; 10% клеток; 1+, слабый /едва заметный перепончатая реакционная способность в > 10% клеток, а клетки являются реактивными только в части их мембраны; 2+, слабый до умеренного полной или базолатеральных мембранную реакционную способность в > 10% клеток; 3+, сильная полная или базолатеральная перепончатая реакционная способность в > 10% клеток [11]. Только перепончатая паттерн экспрессии был пригоден для оценки. Случаи, включенные в категорию 3+ считались положительными для HER2 белка избыточной экспрессии, тогда как 0 и 1+ случаи считались отрицательными.
Случаи оценивали как 2+ были признаны сомнительными для экспрессии белка HER2 и новый 4 мкм толщиной общеправительственного срезы ткани были представлены серебряной Ситу
светлого гибридизация (SISH) при использовании той же автоматизированной платформе (BenchMark XT ™) и ИНФОРМ Коктейль анализ HER2 Dual ISH ДНК-зонд (Ventana Medical Systems, штат Аризона, США). HER2
и хромосомы 17 (CEP17) число копий были подсчитаны в 20 ядрах неналегающих одновременно двумя наблюдателями (RSL и CBN). Her2
геномный профиль был определен как не усиливается, если отношение к HER2
/CEP17 среднее было &л; 2,0 и усиливается, если отношение к HER2
/CEP17 был ≥2.0. Если отношение упало от 1,8 до 2,2, еще 20 ядер были забиты, а общий коэффициент рассчитывается. IHC случаи 2+, показывающие усиление гена путем SISH и IHC 3+ случаях оба считаются положительными для HER2 окончательного статуса [11, 12].
Статистический анализ проводился с использованием SPSS версии 19.0 программного обеспечения (SPSS Inc., Chicago, IL ). Пирсона хи-квадрат тест был использован для корреляции результатов IHC и HER2 окончательного статуса с клинико-патологическими параметрами. Все значения P
были двусторонними, а Р
&л; . 0,05 считали статистически значимыми

Результаты клинико-патологическими характеристиками и их связь с HER2 окончательным статусом и IHC оценки приведены в таблице 1. Возраст больных на момент постановки диагноза колебалось от 28 до 92 лет (медиана: 62,33 лет), и было 64 мужчин (51,6%) и 60 женщин (48,4%) среди 124 пациентов, включенных в данное исследование. Опухоли предпочтительно идентифицированы на дистальном желудка (80,6%) по сравнению с опухолями, возникающих в кардии желудка или из GEJ. Размер опухоли колебался от 0,5 до 14,0 см (в среднем, 5,31 см) и поздних стадиях раковых заболеваний (pt2, pt3 и pT4 категорий) составила 107 случаев (86,3%). Согласно гистологической классификации, 13 случаев (10,5%) были хорошо дифференцированы, 45 случаев (36,3%) умеренно дифференцированные и 66 случаев (53,2%) слабо дифференцированные опухоли. кишечная гистологического подтипа Lauren был наиболее часто диагностируемых, что составляет 61 случаев (49,2%). Диффузные и смешанные подтипы наблюдались у 21 (16,9%) и 33 (26,6%) случаях соответственно. Девять оставшихся случаев (7,3%) были классифицированы как неопределенные. Лимфоваскулярная вторжение было обнаружено в 94 случаях (75,8%), и 85 пациентов (68,5%) имели метастазы узла лимфы при постановке диагноза, в среднем 9,27 положительных узлов в случае (в диапазоне от 1 до 63 положительных узлов) .table 1 Ассоциация между HER2 статус и параметры
клинико-патологические изображения Общий

HER2 позитиве

HER2 отрицательного

значение P на
HER2 (3 +)

HER2 (2+)

HER2 (0, 1+) ​​

P
значение


п =
124 ( %)

13 (10.5)

111 (89,5)


13 (10.5)

10 (8.1)
<бр> 101 (81,4)


Возраст на момент постановки диагноза
0.803
0,590
≥60 лет
82 (66,1)
9
73
9
8
65
&л; 60 лет
42 (33,9) 4
38 4
2
36
Пол
0,865
0,459
Male
64 (51,6)
7
57
7
7
50
Женский
60 (48,4)
6
54
6 страница 3 из 51
Опухоль топография
0,720
0,709
Дистальная желудка
100 (80,6)
10
90
10
9
81
проксимального отдела желудка /GEJ
24 (19,4) страница 3 из 21 страница 3 из 1
20
гистологического подтипа
0,048
0,009
Кишечные
61 (49,2)
11
50
11
9
41
Диффузный
21 (16.9)
0
21
0 0

21
Смешанная
33 (26,6) страница 2 из 31 страница 2 1
30
Unditermined
9 (7.3)
0
9
0 0

9
Гистологическое оценка
0,004
< 0,001
Ну
13 (10.5) 4
9 4
1
8
Умеренно
45 (36,3)
7
38
7
8
30
Плохо
66 (53,2) страница 2 из 64 страница 2 1
63
лимфоваскулярная нашествие
0.031
0,060
Положительный
94 (75,8) 13

81
13
6
75
Отрицательный
30 (24,2)
0
30
0 4
26
кровеносного сосуда вторжения
0,395
0,170
Положительный
44 (35,5)
6
38
6
1
37
Отрицательный
80 (64,5)
7
73
7
9
64
пТл статус
0,271
0,165
pT1
17 (13,7) 0

17
0
1
16
pT2
32 (25,8)
3
29
3 страница 2 из 27
pT3
69 (55,6) 10

59
10 страница 5 из 54 <бр> pT4
6 (4.9) 0

6
0
2 4
пН статус
0,453
0,762
pN0
39 (31.5) страница 2 из 37
2 4
33
pN1
46 (37,1)
7
39
7
4
35
PN2
24 (19,3) страница 3 из 21 страница 3 из 1
20
pN3
15 (12.1)
1
14
1
1
13
статус пМ
0,548
0,705
Pm0
121 (97,6)
13
108 <бр> 13
10
98
PM1
3 (2.4) 0
страница 3 0 0
страница 3 Жирные цифры представляют P <бр> значения с статистической значимости
анализа иммуногистохимического было выявлено 13 положительных случаев (3+; 10,5%) для HER2 белка оверэкспрессии (рис 1а), 10 сомнительными случаев (2+,.. 8,1%) (рис 1b) и 101 отрицательных случаев (81,4%), 7 из которых были забиты 1+ (5,6%) (рис . 1в). Средний возраст на момент постановки диагноза имеет тенденцию к увеличению в соответствии со статусом HER2 (отрицательным 61,76 лет; сомнительны, 66,3 лет, и положительный результат, 68,58 лет), хотя это не достигало статистической значимости. Ни один из пациентов в категории IHC 3+ были моложе 46 лет и старейшей пациента в серии (92-летняя женщина) была среди них. Там не было никакой связи между экспрессией HER2 и пола пациентов. Инжир. 1 Иммуногистохимическое анализ экспрессии HER2 в желудочных карцином с использованием антитела 4B5 в секциях цельной ткани. (А) HER2-положительный случай (3+); (Б) HER2-сомнительны случай (2+); (С) HER2-отрицательный случай (1+); (D) внутриопухолевые гетерогенность белка в HER2-положительном случае (3+). (AC: x400 поле увеличения; D: x200 поле увеличения)
Был положительная связь между экспрессией белка HER2 и хорошо moderatly дифференцированных опухолей (P &
л; 0,001), а также с кишечной подтипа Лорена (P
= 0,009).
Опухоли, возникающие в дистальном отделе желудка составила 76,9% IHC 3+ случаев, в то время как 23,1%, где найти в кардии желудка или в GEJ, но это изменение не было статистически значимым. Нет IHC 3+ опухоль не показала диффузный или неопределенную морфологии и только два (15,4%) были рассмотрены низкодифференцированного. Каждый IHC 3+ опухоли показали лимфоваскулярная вторжение и все они были диагностируется на поздней стадии заболевания, главным образом, в категории рТ3 (76,9%). Одиннадцать случаев (84,6%) были положительными для метастазов в лимфатических узлах, в среднем 7,5 положительных узлов в случае. Тем не менее, не наблюдалось статистической значимости между HER2 белка оверэкспрессии и пТл, П.Н. или статус пм.
По сравнению с IHC 3+ случаев, HER2-двусмысленные опухоли (2+) представил несколько аналогичный профиль, когда морфологические данные были приняты во внимание. Ни одного случая не показал диффузное или неопределенную гистологию, с преобладанием кишечной подтипа (9 случаев, 90,0%) и умеренно дифференцированные опухоли (8 случаев, 80,0%). Большинство опухолей в этой ситуации также нарушена дистального желудка и был поставлен диагноз на поздней стадии заболевания (9 случаев, 90,0%). Тем не менее, произошло снижение доли случаев, показывающих лимфоваскулярная вторжение и метастазов в лимфатических узлах (6 случаев, 60,0%) в сравнении с числами, найденных среди IHC 3+ случаев (13 случаев, 100,0% и 11 случаев, 84,6%, соответственно) .
HER2-отрицательных карцином (результат 0 и 1+) агрегируются все опухоли с диффузной или неопределенному морфологии, а также большинство тех, с плохо дифференцированной гистологического класса и ранней стадии заболевания на момент постановки диагноза.
IHC 2+ случаи были представлены SISH но не амплификации гена обнаружено не было. Поэтому случаи с конечной HER2-положительным статусом были составлены исключительно IHC 3+ опухолей, что составляет 10,5% от всех GC в этой серии. HER2 позитивности была связана с кишечной подтипа (P
= 0,048), а умеренно дифференцированные опухоли (P = 0,004
) и наличие лимфоваскулярной вторжения (P
= 0,031).
Что касается внутриопухолевой белка HER2 неоднородность, расширение IHC 3+ областей колебалась от 10 до 99% положительных неопластических клеток (рис. 1d). Был также вариации в расширении HER2 иммунореактивного областей в неоднозначного категории, в пределах от 10 до 40% опухолевых клеток. В обеих категориях, внутриопухолевые белок гетерогенность в основном видели в карцином смешанного типа, в которых HER2 выражение сильно коррелируют с областями кишечного типа.
Помимо их оценка HER2, во многих случаях отображается цитоплазматический иммунореактивность в нормальных клетках слизистой оболочки желудка (87 случаев , 70,2%), метапластический эпителий (30 случаев, 24,2%) и фокусы
дисплазии (24 случаев, 19,4%) (рис. 2). Этот паттерн экспрессии был замечен в обоих метапластического и дисплазией эпителия, несмотря на характер метаплазией или степень дисплазии. Ядерное выражение часто встречается среди карцином диффузного типа, но все эти иммуноокрашиванию районы не были приняты во внимание при озвучивании иммуногистохимического профиля HER2. Инжир. 2 Возможные подводные камни в иммуногистохимического анализа экспрессии белка HER2 с использованием антитела 4B5. Цитоплазма неспецифический окрашивание в нормальном foveolar слизистой оболочки желудка (слева) и в фокусе
желудочной дисплазии высокой степени (справа) (x200 поле увеличения)
Обсуждение
В нашем исследовании мы нашли окончательный HER2- положительный статус на 10,5%. Общий уровень HER2 положительность найден в исследовании ToGA был 810 3665 пациентов (22,1%) [6]. Эти цифры представляют собой одну из самых больших наборов данных тестирования HER2 в образцах GC, полученных от пациентов из 24 различных стран в Азии, Европе и Латинской Америке. Хотя 22,1% приходится на более чем в два раза количества положительных опухолей, которые мы нашли в нашей серии, тога испытание HER2 положительность критерии отбора были включены все случаи с экспрессии белка с помощью IHC (3+ и 2+ случаев) или амплификации гена с помощью только ISH. Более подробные данные, касающиеся тестирования HER2 в исследовании ToGA был недавно опубликован Показательно, что именно 610 случаев из 3665 образцов опухолей (16,6%), на самом деле считается положительным HER2, либо увеличив счет IHC 3+ или IHC 2+ с генной амплификации с помощью флуоресценции на месте
гибридизации (FISH) в [30]. Столб специальный
Поисковый анализ пришел к выводу, что пациенты в этих категориях были те, кто совершенно других выиграли от лечения TZB [6]. Таким образом, точный процент пациентов, имеющих право на лечение с TZB по скринингу HER2, выполненного на испытании ToGA составила 16,6%, а когда результаты IHC рассматриваются в одиночку, только 398 случаев (10,9%) были фактически положительный HER2 (3+) [30 ]. В нашем исследовании, так как в настоящее время нет IHC 2+ случаи показали амплификации гена путем SISH, мы нашли IHC 3+ скорость и окончательный положительный HER2 статус 10,5%.
GC в бразильских пациентов, как правило, возникают в антральном, связанный с Helicobacter пилори
хронической инфекции, поэтому, наша серия состоит в основном из карцином дистальной желудка (80,6%). Поскольку экспрессия HER2 была значительно связана с GC кардии и GEJ [17, 30-33], мы ожидали найти еще более низкий уровень позитивности среди наших дел. Результаты тоге испытаний показали разницу в показателях позитивности между HER2 Европа /Азия и Центральной /Южной Америке (23,8 и 16,1% соответственно, в том числе всех случаев 3 + FISH-положительных и IHC). Авторы связаны контрастные результаты, как из-за меньшего числа пациентов, обследованных в Латинской Америке (484 из 3665 пациентов) вместо возможного изменения в биологии опухоли [30]. К сожалению, мы не смогли найти информацию, в частности, в отношении экспрессии HER2 в GC бразильских пациентов, включенных в исследование ToGA. Если кросс-данных между топографии опухоли и стран пациентов происхождения может быть восстановлена, она также может помочь объяснить, расходящиеся HER2-позитивных результатов GC в Латинской Америке.
Подобно нашим результатам, в недавней крупной европейской серии [34], а также в японской когорте 1461 пациентов [35], не было никакой разницы в HER2 позитивности между проксимальной и дистальной опухолей желудка. Тем не менее, две крупные китайские серии [17, 33] недавно показали значительно более высокую экспрессию HER2 в проксимальных GC, по согласованию с ToGA пробных выводов [30] и с результатами серии 2,798 южнокорейских пациентов [32]. Авторы подразумевали, что виды рака кишечного типа, как правило, чаще в GEJ и, так как различные этиология может играть определенную роль в канцерогенезе опухолей из этих двух местах, это может частично оправдать различные скорости экспрессии HER2, в соответствии с топографией опухоли [30]. В дополнение к генетической родословной по этническому, множественные желудочных путей канцерогенеза может быть в значительной степени зависит от пищевых привычек и хронических хеликобактерной
инфекции [3]. Хотя это, вероятно, также оказывает определенное влияние на уровень позитивности HER2, обнаруженных в различных популяциях с GC, соотношение между этими факторами и выражения HER2 остается неизвестным, с опубликованными несколько работ [36, 37].
Количество IHC 3+ случаев найдено в нашем исследовании, можно частично объяснить тем фактом, что участки цельной ткани были исключительно для оценки HER2, вместо эндоскопических биопсий. Недавнее исследование в паре первичных гастрэктомий и их эндоскопических биопсий для сравнения экспрессии HER2 оценки и нашел скорость согласования лишь 57%, в основном благодаря внутриопухолевой HER2 неоднородности [38]. HER2 генетической гетерогенности на ISH было показано ранее на рак молочной железы, но это, кажется, более сложным вопросом на GC образцов [39]. Экспрессия белка гетерогенность по IHC, как правило, называют, как изменчивость интенсивности иммуногистохимического и расширение HER2-положительных областей, также является проблемой, которая может существенно повлиять на отбор образцов для тестирования HER2 в ГХ. На самом деле, HER2 экспрессия гетерогенность была продемонстрирована не только нашего исследования, но и другими авторами [39, 40], в том числе исследования, включающего 2727 гастрэктомий [32]. В результате участки цельной ткани, полученные из резецированных первичных опухолей желудка может предложить большее представление разными подгруппами клональной популяции клеток рака, которые могли бы помочь избежать ложноотрицательных результатов из-за неоднородности HER2. Так как пациенты с местно-распространенным или метастатическим GC не может пройти первичную гастрэктомию, участки цельной ткани не всегда доступны и другие образцы GC должны использоваться вместо того, чтобы, поднимая вопрос о том, какие являются наиболее подходящими для тестирования HER2: эндоскопических биопсий против
метастатических поражений. Для эндоскопических биопсий, рекомендация является количество жизнеспособных представительных фрагментов опухоли (в идеале 6-8) и, если возможно, патологоанатом должен также выполнять тестирование HER2 на другом образце, когда отрицательный результат обнаруживается на опухоль эндоскопической биопсии [40].
Кроме того, GC образцы из проб ToGA были испытаны для экспрессии HER2 с комплектом HercepTest, который использует кроличьи поликлональные антитела к HER2 [6], в то время как кролика моноклональное антитело (4B5) использовали в нашем исследовании. Другие исследования сообщают о более низкие показатели чувствительности для HercepTest по сравнению с 4B5 клона для выявления экспрессии белка HER2 [15, 41, 42]. Это может также объяснить аналогичный IHC 3+
процент случаев, найденных в нашей серии и на суде ToGA, несмотря на преобладание опухолей от дистального желудка среди наших пациентов. Данные по экспрессии HER2 в бразильских пациентов с GC очень ограниченным и существует широкий разброс по опубликованным результатам. Первые два исследования, когда-либо проводившихся в Бразилии нашли HER2 скорость оверэкспрессия 12 и 5,4%, в том числе IHC 3+ и 2+ случаи просуммированы [23, 24]. Тем не менее, оценка классификации для рака молочной железы используется для оценки состояния HER2, в котором вся клеточная мембрана должна быть загрязнена, а не только боковые или базолатеральных стенки, что свидетельствует о недооценке HER2 позитивности. В более поздних исследованиях с использованием конкретных критериев HER2 тем самым увеличив счет ГК, IHC 3+ случаев колебалась от 0,8% до 11,6% [19-22, 25, 26]. Исследования, показывающие самые низкие цены (0,8%, 3% и 6%) использовали микрочипы опухолевой ткани (TMAS), полученные из хирургических образцов и других антител анти-HER2, а не 4B5 [19, 20, 22]. Эти результаты трудно сравнить с нашими из-за методологических различий, особенно когда и опухолевый ТМА экспрессия белка гетерогенность сталкивающихся. Таким образом, может представлять ТМА образцы более похожими на эндоскопических биопсий, а не для широких слоев цельной ткани из первичных гастрэктомий, которые были использованы в нашем исследовании.
Наши результаты подтверждают текущие результаты литературы по бразильским пациентов с GC тестируемых для экспрессии HER2 с помощью высокочувствительным антитела к HER2 в опухолевых участках цельной ткани. В самом деле, недавний анализ из бразильского онкологического центра сравнили производительность HercepTest, SP3 и 4B5 антител между секциями цельной ткани и в ТМА серии 199 гастрэктомий [21]. Авторы обнаружили, самый высокий уровень HER2 положительности, используя те же параметры нашего исследования: 4B5 антител в секциях опухолевых тканей в целом (11,6%), значение наиболее похожий на нашего нахождения (10,5%). Самый низкий уровень позитивности HER2 был идентифицирован среди HercepTest и ТМА комплект (3%) [21]. Несмотря на изображения высокой чувствительности найденного с 4B5 антителом, некоторые авторы также сообщают обширные цитоплазматический фоновое окрашивание желудочного foveolar слоя и очагов <бр> кишечной метаплазии /дисплазии, как показано в нашем исследовании, которое наводит на мысль внутреннюю клонального характеристику, а не методологической проблемы [15, 21, 41, 42]. На самом деле, HER2 окрашивание дисплазией эпителия коррелирует с амплификации гена с помощью ИСГ [43]. Несмотря на то, что не было никаких трудностей в различении HER2-положительные опухолевые клетки из этих областей, мы подчеркиваем, что окрашивание последнего не следует учитывать при тем самым увеличив счет экспрессии HER2.
До написания настоящей рукописи авторы не смогли получить только три другие исследования, касающиеся ISH для выявления амплификации гена в образцах GC от бразильских пациентов [19, 21, 25]. Begnami и др. нашел общий коэффициент усиления 8% с использованием рыбы, но процент IHC 2+ усиленных случаев не упоминается [19]. Подобно нашим данным, еще одна группа не нашла каких-либо усиленных случаев среди IHC 2+ опухолей, хотя FISH был использован метод [25]. Кроме нашего исследования, только еще один применен серебряный двойной ISH светлое в IHC 2+ случаях [21]. Результаты показали широкий диапазон скоростей амплификации (от нуля до 100%), в соответствии с первичным антителом, используемой для IHC и образцах тканей (разделы цельной ткани в сравнении
) ТМА. 4B5 антител на 198 участках в целом тканей выявлено 20 случаев с двусмысленным счетом HER2 (10,1%), из которых только 6 случаев (30%) показали амплификации гена путем SISH [21]. Процент случаев с окончательным HER2 положительным статусом составила 14,6%, немного выше, чем тот, который мы непокрытой, который может быть частично связано с более низкой частотой дистального GC (43,2%) в своей серии. Они пришли к выводу, что наиболее точным методом IHC для оценки экспрессии HER2 в GC было использовать 4B5 антител по разделам цельной ткани [21], который был именно метод, используемый в нашем исследовании.
Более того, мы обнаружили связь между HER2-положительные опухоли и некоторые патологические параметры, такие как кишечный подтипа Лорена (P = 0,048
), а умеренно дифференцированными опухолями (P = 0,004
) и наличие лимфоваскулярной вторжения (P
= 0,031). Кишечный подтип было доказано, что патологическая особенность наиболее неизменно ассоциируется с HER2 положительности в многочисленных исследованиях [17, 32, 34, 35, 44, 45], в том числе ToGA суда [30] и некоторых бразильских пациентов [19, 22 , 23, 26]. Так как HER2 положительность, как ожидается, будет найден на опухоли кишечного типа, мы настоятельно рекомендуем, что, когда дело с опухолью смешанного типа, участки, показывающие кишечной морфологии должны быть выбраны для HER2 скоринга.
Ассоциация HER2 позитивности с гистологическим класса и наличие лимфоваскулярной вторжения также сообщалось некоторыми авторами [19, 25, 31, 46], но не других работах [20, 47].

• вставки желудочный зонд под прямым контролем зрения с использованием видео ларингоскоп King Vision ™: рандомизиро…
• Корреляция между явными коэффициентами диффузии и HER2 статуса в рака желудка: пилот study