Associatie tussen HER2-status bij maagkanker en clinicopathologische features: een retrospectief onderzoek met behulp van hele weefsel sections

associatie tussen HER2-status bij maagkanker en clinicopathologische features: een retrospectief onderzoek met behulp van whole-weefselcoupes
Abstracte achtergrond
Gastric kanker wordt meestal gediagnosticeerd in een vergevorderd stadium van de ziekte en de behandeling opties zijn schaars. Trastuzumab is onlangs goedgekeurd voor gemetastaseerde of lokaal gevorderde carcinomen ontstaan ​​in de maag of in de gastro-oesofageale overgang bij HER2-positieve tumoren. Gegevens over de frequentie van HER2-positieve gevallen onder Braziliaanse patiënten beperkt. Ons doel was om HER2-eiwit en gen-status te karakteriseren in een reeks van de Braziliaanse patiënten met maagkanker en haar associatie met klinische en pathologische gegevens te evalueren.
Methods
histologische dia's uit 124 primaire gastrectomies werden beoordeeld en hun pathologische rapporten werden opgehaald uit de bestanden op een Braziliaanse universitair ziekenhuis. Geautomatiseerde immunohistochemie voor HER2 werd uitgevoerd op de hele weefsel secties uit elke tumor. HER2-dubbelzinnig gevallen door immunohistochemie werden in situ
hybridisatie voor genamplificatie evaluatie om automatische dual ingediend. HER2-status werd geconfronteerd met clinicopathologische parameters om statistisch significante associaties te beoordelen.
Resultaten
Immunohistochemie analyse toonde aan dat 13/124 gevallen (10,5%) waren HER2-positief (3+), 10/124 gevallen (8,1%) werden dubbelzinnig (2+) en 101/124 gevallen (81,4%) waren negatief, die 7 gevallen 1+. Geen van de dubbelzinnige gevallen toonde genamplificatie. De totale HER2 positiviteit bedroeg 10,5%. Er was een verband tussen HER2 expressie en intestinale histologische subtype Lauren (P
= 0,048), goed tot matig gedifferentieerde tumoren (P
= 0,004) en de aanwezigheid van lymfovasculaire invasie (P
= 0,031). Er werd geen verband gevonden tussen HER2 status en tumor topografie.
Conclusies
Geconfronteerd met gepubliceerde gegevens van andere auteurs, zou het lagere percentage van HER2-positieve gevallen te vinden in onze reeks deels te verklaren door de lagere frequentie van tumoren die zich voordoen in de gastro-oesofageale overgang ten opzichte van distale maag carcinomen Braziliaanse patiënten. Dit kan ook verklaren het gebrek aan statistisch significante associatie tussen HER2 status en tumor topografie in onze studie.
Sleutelwoorden
HER2 Maagkanker Immunohistochemie Genamplificatie clinicopathologische kenmerken Achtergrond
Ongeveer één miljoen nieuwe gevallen van maagkanker (GC ) schatting jaarlijks voor bij de wereld, overeenkomend met 8% van alle kankergevallen diagnoses wereldwijd [1, 2]. GC wordt ook de tweede belangrijke oorzaak van kanker-gerelateerde sterfgevallen wereldwijd beschouwd en meer dan 700.000 sterfgevallen worden verwacht als gevolg van deze ziekte jaarlijks [1, 3]. De verdeling van patiënten met GC in verschillende delen van de wereld is niet homogeen: meer dan 70% van de nieuwe gevallen en sterfgevallen in ontwikkelingslanden. De hoogste percentages zijn te vinden in Oost-Azië, Oost-Europa en Zuid-Amerika [1]. Het National Institute of Cancer van Brazilië schat dat GC bestaat uit meer dan 5% van alle maligniteiten in dit land [4].
Behandeling opties voor GC zijn over het algemeen beperkt, omdat het meestal gediagnosticeerd in een vergevorderd stadium van de ziekte en daarom de vijf-jaars overlevingskans is altijd laag, ongeveer 20% in de meeste delen van de wereld [2, 5]. Volgens de ToGA studie, een recente internationale fase III gerandomiseerd onderzoek, behandeling in een combinatie van chemotherapie en trastuzumab (TZB) is aanzienlijk verbeterd overleving bij patiënten met HER2-positieve geavanceerde GC [6]. TZB is een recombinant monoklonaal antilichaam gericht HER2, een transmembraan eiwit dat behoort tot de familie van humane epidermale groeifactorreceptoren [7]. HER2 intracellulaire domein blijkt tyrosinekinase-activiteit, dat in staat is intracytoplasmatische tweede messengers die nucleaire expressie van genen geassocieerd met angiogenese, celproliferatie coördineren en overleving [8]. Overexpressie van het HER2-eiwit, een product van een proto-oncogen gelegen op chromosoom 17, is geassocieerd met en progressie van kanker van de borst, eierstok, speekselklieren, prostaat en maagdarmkanaal kankers [9].
Basis ToGA proef resultaten, hebben de internationale regelgevende instanties keurde onlangs het gebruik van TZB in HER2-positieve gemetastaseerde of lokaal gevorderde carcinomen ontstaan ​​in de maag of in de gastro-oesofageale overgang (GEJ) [10]. Carcinomen van de in aanmerking komende patiënten voor een behandeling met TZB moet HER2-positieve status, blijkend uit eiwit overexpressie (score 3+) door immunohistochemie (IHC) of genamplificatie presenteren in situ
hybridisatie (ISH) voor tumoren met dubbelzinnige IHC resultaten (score 2+) [11, 12]. Sindsdien zijn veel studies gericht op het presenteren van de frequentie van HER2-positieve GC in verschillende populaties, met een grote variatie aan methoden voor eiwit en gen detectie. Derhalve resultaten opmerkelijk tussen 2 en 45% van HER2 overexpressie GC serie [13-17]. Een grote systematische review met inbegrip van de gegevens van 49 studies vond een gemiddelde tarief van 18% van HER2 positiviteit bij 11.337 patiënten met GC [18]. Toch is de prevalentie van HER2-positieve gevallen onder de Braziliaanse patiënten blijft onbekend, met weinig gepubliceerde gegevens [19-26]. Aangezien de Braziliaanse openbare gezondheidszorg nog niet het gebruik van TZB voor GC behandeling in dit land heeft onderschreven, zijn wij van mening dat de detectie van HER2-positieve GC in de Braziliaanse patiënten wetenschappelijke basis kunnen dienen voor de oprichting van nieuwe volksgezondheidsbeleid en definieer betere klinische protocollen voor de behandeling van deze patiënten in Brazilië verbeteren.
Daarom is in deze studie, wilden wij HER2 expressie karakteriseren GC in een aantal Braziliaanse patiënten behulp hele weefsel tumorsecties van chirurgische exemplaren en is bij evaluatie tussen HER2-eiwit en gen status bij klinische en pathologische gegevens.
Methods Ondernemingen de huidige studie werd goedgekeurd door de ethische commissie van onze instelling (Comité de Ética e Pesquisa COEP-UFMG) onder CAAE protocol nummer 32898114.9.0000.5149. Schriftelijke informed consent werd verkregen in overeenstemming met de institutionele richtlijnen.
We bestudeerden 142 opeenvolgende patiënten die primaire gastrectomie ondergingen tussen 2007 en 2011 op Clinics Hospital, de Federale Universiteit van Minas Gerais, Brazilië, waarvan de histopathologische diagnose was GC. Geen van de patiënten had neoadjuvante chemotherapie of andere soort behandeling ontving de tumor voorafgaand aan chirurgie. Alle 142 gevallen hadden hun pathologische rapporten opgehaald en om de diagnose van GC bevestigen, werden de oorspronkelijke hematoxyline eosine gekleurde coupes tegelijkertijd beoordeeld door twee pathologen (RSL en MMDAC), waarvan één een expert in gastrointestinale pathologie (MMDAC) . Klinische gegevens (leeftijd en geslacht van de patiënt) en pathologische parameters (tumor topografie, maximale diameter van de tumor, het podium, histologische graad en subtype, aanwezigheid van lymfovasculaire en bloed-vaartuig invasie) werden geregistreerd. Tumoren werden verdeeld in twee groepen op basis van de maag topografie distale en proximale tumoren, de laatste categorie opgenomen carcinomen van de GEJ. Het TNM systeem criteria en recomendations vanaf de 7e editie van de American Joint Committee on Cancer Staging Manual werden gebruikt voor tumor enscenering [27, 28]. De index van de klier vorming en cytologisch pleomorfisme werden beschouwd voor de histologische indeling in goed, matig of slecht gedifferentieerde tumoren. Lauren histologisch classificatiesysteem gebruikt voor tumor subtypering [29]. YouTheater 4 urn dikte hele weefselcoupes werden verkregen van formaline gefixeerd paraffine ingebedde tumormonsters en geautomatiseerde IHC ingediend met een BenchMark XT ™ platform (Ventana Medical Systems , Arizona, USA) en de primaire voorverdunde konijn monoklonaal antilichaam anti-HER2 /neu (kloon 4B5). Alle objectglaasjes werden tegengekleurd met hematoxyline subsequentially. Een pre-geteste HER2-positieve borstkanker monster werd als uitwendige positieve controle. Achttien gevallen niet genoeg tumorweefsel bevatten voor daaropvolgende IHC protocollen en werden van deze studie uitgesloten, waardoor 124 bepaalde gevallen voor analyse.
Drie pathologen (RSL, HG en CBN) tegelijk immuun-objectglaasjes geanalyseerd met een multi-head microscoop en behaalde een consensus score voor HER2 expressie volgens de aanbevelingen van Hofmann's en Rüschoff voor GC chirurgische specimens [11, 12]. De zaken werden ingedeeld in vier groepen (0, 1+, 2+ en 3+), afhankelijk van de verlenging en de intensiteit van de expressie: 0, geen reactiviteit of membraanreactiviteit in < 10% van de cellen; 1+, zwakke /nauwelijks waarneembare membraanreactiviteit in > 10% van de cellen, en cellen reactief slechts in een gedeelte van hun membraan; 2+, zwakke tot matige volledige of basolaterale membraanreactiviteit in > 10% van de cellen; 3+, sterke volledig of basolaterale membraanreactiviteit in > 10% van de cellen [11]. Slechts een vliezige expressiepatroon geschikt was voor evaluatie. De gevallen opgenomen in de categorie 3+ positief voor HER2-eiwit overexpressie werden beschouwd, terwijl de 0 en 1+ zaken werden als negatief beschouwd.
Cases gescoord als 2+ dubbelzinnige voor HER2-eiwit expressie en nieuw werden beschouwd 4 micrometer dikte groot- weefsel secties werden in situ
hybridisatie (SISH) naar zilver brightfield ingediend met gebruikmaking van dezelfde geautomatiseerde platform (BenchMark XT ™) en de INFORM HER2 Dual ISH DNA Probe Cocktail assay (Ventana Medical Systems, Arizona, USA). De HER2 Kopen en chromosoom 17 (CEP17) kopie-aantallen werden in 20 niet-overlappende kernen geteld gelijktijdig door twee waarnemers (RSL en CBN). HER2
genomische profiel werd gedefinieerd als niet-versterkte, als het gemiddelde HER2 Twitter /CEP17 ratio < 2,0 en versterkt als de HER2 Twitter /CEP17 ratio ≥2.0. Als de verhouding daalde tussen 1,8 en 2,2, werden nog eens 20 kernen gescoord en de totale verhouding berekend. IHC 2+ gevallen blijkt genamplificatie door SISH en IHC 3+ gevallen werden beide beschouwd als positief voor HER2 definitieve status [11, 12]. Ondernemingen De statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van SPSS versie 19.0 software (SPSS Inc., Chicago, IL ). De Pearson chi-kwadraat test werd gebruikt om IHC resultaten en HER2 definitieve status met klinische en pathologische parameters correleren. Alle P
waarden waren tweezijdig en P Restaurant < . 0,05 werd als statistisch significant
Resultaten
klinisch-pathologische kenmerken en hun associatie met HER2 uiteindelijke status en IHC score is getoond in Tabel 1. Patiënten leeftijd bij diagnose varieerde 28-92 jaar (mediaan: 62,33 jaar), en er waren 64 mannen (51,6%) en 60 vrouwen (48,4%) bij 124 patiënten in deze studie. Tumoren werden geïdentificeerd bij voorkeur aan het distale maag (80,6%) vergeleken met tumoren die ontstaan ​​in de gastrische cardia of het GEJ. Tumorgrootte gevarieerd tussen 0,5 en 14,0 cm (gemiddeld 5,31 cm) en gevorderde tumoren (pT2, pT3 en pT4 categorieën) waren goed voor 107 gevallen (86,3%). Volgens histologische indeling, 13 gevallen (10,5%) werden goed gedifferentieerd, 45 gevallen (36,3%) matig gedifferentieerd, en 66 gevallen (53,2%), slecht gedifferentieerde tumoren. intestinale histologische subtype Lauren was de meest gediagnosticeerde, goed voor 61 gevallen (49,2%). Diffuse gemengde subtypes werden waargenomen bij 21 (16,9%) en 33 (26,6%) gevallen, respectievelijk. De negen overige gevallen (7,3%) werden geclassificeerd als onbepaald. Lymfovasculaire invasie werd gevonden in 94 gevallen (75,8%), en 85 patiënten (68,5%) hadden lymfklier metastase bij diagnose, met een gemiddelde van 9,27 positieve klieren per case (bereik 1-63 positieve klieren) .table 1 Associatie tussen HER2 status en clinicopathologische parameters
Overall
HER2-positieve
HER2-negatieve
P
waarde
HER2 (3 +)

HER2 (2+)
HER2 (0, 1+) ​​
P
waarde
n =
124 ( %)
13 (10.5)
111 (89,5)
13 (10.5)
10 (8.1)

101 (81,4)
Leeftijd bij diagnose
0,803
0.590
≥60 jaar
82 (66,1)
9
73
9
8
65 Restaurant < 60 jaar
42 (33,9) verhuur 4
38 verhuur 4 2
36
Geslacht
0,865
0,459
Man
64 (51,6)
7
57
7
7
50
Vrouw
60 (48,4)
6
54
6
3
51
Tumor topografie
0.720
0,709
distale maag
100 (80,6)
10 | 90
10 | 9
81
proximale maag /GEJ
24 (19,4)
3
21
3 1
20
histologische subtype
0,048
0.009
Intestinale
61 (49,2)
11
50
11
9
41
Zend
21 (16,9)
0
21
0
0
21
Mixed
33 (26,6) 2
31 verhuur 2 1
30
Unditermined
9 (7.3)
0
9
0
0
9
histologische graad
0.004 Restaurant < 0,001
Nou
13 (10,5)
4
9 verhuur 4 1
8
Redelijk
45 (36,3)
7
38
7
8
30
Slecht
66 (53,2) 2
64 verhuur 2 1
63
Lymfovasculaire invasie
0,031
0.060
Positieve
94 (75,8)
13
81
13
6
75
Negatief
30 (24.2)
0
30
0 verhuur 4
26
bloedvat invasie
0,395
0.170
Positieve
44 (35,5)
6
38
6 1
37
Negatief
80 (64,5)
7
73
7
9
64
pT-status
0,271
0,165
pT1
17 (13,7)
0
17
0 1
16
pT2
32 (25,8)
3
29
3 2
27
pT3
69 (55,6)
10 | 59
10 | 5
54
pT4
6 (4.9)
0
6
0 2
4
pN status van
0.453
0,762
pN0
39 (31.5) 2
37 2
4
33
pN1
46 (37,1)
7
39
7 verhuur 4
35
pN2
24 (19,3)
3
21
3 1
20
pN3
15 (12.1)
1
14
1 1
13
pM statuut
0,548
0,705
pM0
121 (97,6)
13
108
13
10 | 98
PM1
3 (2.4)
0
3
0
0
3
Bold cijfers vertegenwoordigen P
waarden met statistische significantie
Immunohistochemische analyse bleek 13 positieve gevallen (3+; 10,5%) voor het HER2-eiwit overexpressie (figuur 1a), 10 dubbelzinnige gevallen (2+;.. 8,1%) (afbeelding 1b) en 101 negatieve gevallen (81,4%), waarvan 7 werden gescoord 1+ (5,6%) (Fig . 1c). De mediane leeftijd bij diagnose hadden de neiging om te verhogen op basis van HER2-status (negatief, 61,76 jaar, dubbelzinnig, 66,3 jaar, en positief, 68,58 jaar), hoewel dit niet statistisch significant was. Geen van de patiënten in de categorie IHC 3+ jonger dan 46 jaar en de oudste patiënt in de reeks (een 92 jaar oude vrouw) was één van hen. Er was geen verband tussen de HER2 expressie en geslacht van de patiënt. Fig. 1 Immunohistochemische analyse van HER2 expressie in maagcarcinomen met het antilichaam 4B5 geheel-weefselcoupes. (A) een HER2-positieve geval (3+); (B) een HER2-dubbelzinnig geval (2+); (C) een HER2-negatieve geval (1+); (D) intratumorale eiwit heterogeniteit in een HER2-positieve geval (3+). (AC: x400 vergroting gebied; D: x200 gebied vergroting)
Er was een positieve associatie tussen HER2 eiwitexpressie en goed te moderatly gedifferentieerde tumoren (P
< 0,001), alsook met intestinale subtype Lauren (P
= 0,009).
Tumoren die ontstaan ​​in de distale maag goed voor 76,9% van IHC 3+ gevallen, terwijl 23,1% zijn gevonden in de gastrische cardia of het GEJ, maar dit verschil was niet statistisch significant. Geen IHC 3+ tumor toonde een diffuus of onbepaalde morfologie en slechts twee (15,4%) werden beschouwd als slecht gedifferentieerde carcinomen. Elke IHC 3+ tumor toonde lymfovasculaire invasie en ze waren allemaal gediagnosticeerd in een vergevorderd stadium van de ziekte, vooral in de pT3 categorie (76,9%). Elf gevallen (84,6%) waren positief voor lymfeklieren metastase, met een gemiddelde van 7,5 positieve klieren per geval. Er werd echter geen statistische significantie waargenomen tussen HER2-eiwit overexpressie en pT, pN of pm-status.
In vergelijking met IHC 3+ gevallen, HER2-dubbelzinnig tumoren (2+) een enigszins vergelijkbaar profiel gepresenteerd wanneer morfologische gegevens rekening werd gehouden. Geen geval toonde diffuse of onduidelijke histologie, met een overwicht van intestinale subtype (9 gevallen, 90,0%) en matig gedifferentieerde tumoren (8 gevallen, 80,0%). De meerderheid van de tumoren in deze instelling het gedrang eveneens de distale maag en waren in een vergevorderd stadium van de ziekte (9 gevallen, 90,0%) gediagnosticeerd. Toch was er een daling van het aantal gevallen blijkt lymfovasculaire invasie en lymfeklier (6 gevallen, 60,0%) ten opzichte aantallen gevonden bij IHC 3+ gevallen (13 gevallen, 100,0% en 11 gevallen, 84,6%, respectievelijk) .
HER2-negatieve carcinomen (scores 0 en 1+) geaggregeerd alle tumoren met een diffuse of onbepaalde morfologie, evenals de meerderheid van de mensen met een slecht gedifferentieerd histologische rang en vroeg stadium van de ziekte bij diagnose.
IHC 2+ zaken werden voorgelegd aan SISH maar geen genamplificatie werd gedetecteerd. Daarom gevallen een laatste HER2-positieve status werd uitsluitend samengesteld door IHC 3+ tumoren, die 10,5% van GC in deze serie. HER2 positiviteit werd geassocieerd met intestinale subtype (P
= 0,048), goed tot matig gedifferentieerde tumoren (P
= 0,004) en de aanwezigheid van lymfovasculaire invasie (P
= 0,031).
Betreffende intratumorale HER2-eiwit heterogeniteit, uitbreiding van IHC 3+ gebieden varieerde 10-99% positieve neoplastische cellen (Fig. 1d). Er was ook een variatie in het verlengde van HER2 immunoreactief gebieden in de dubbelzinnige categorie, variërend van 10 tot 40% van de tumorcellen. In beide categorieën, werd intratumorale eiwit heterogeniteit meestal gezien in gemengd type carcinomen, waarbij HER2 expressie sterk gecorreleerd met intestinale-type gebieden.
Afgezien van hun HER2 score, weergegeven veel gevallen een cytoplasmatisch immunoreactiviteit in normale maagslijmvlies cellen (87 gevallen , 70,2%), metaplastisch epitheel (30 gevallen, 24,2%) en foci
dysplasie (24 gevallen, 19,4%) (fig. 2). Dit expressiepatroon werd waargenomen bij zowel metaplastisch en dysplastische epitheel, ondanks de aard van de metaplasie of mate van dysplasie. Nucleaire expressie werd vaak gezien bij diffuse soort carcinomen, maar al deze immunostained gebieden werden niet in aanmerking voor het scoren van de HER2 immunohistochemische profiel genomen. Fig. 2 Mogelijke valkuilen in de immunohistochemische analyse van HER2-eiwit expressie met behulp van het 4B5 antilichaam. Cytoplasma niet-specifieke kleuring in normale foveolar maagslijmvlies (links) en in een focus
van maag high-grade dysplasie (rechts) (x200 veld vergroting)
Discussie
In onze studie vonden we een laatste HER2 positieve status van 10,5%. De totale HER2 positiviteit tarief gevonden in de ToGA studie was 810 van de 3665 patiënten (22,1%) [6]. Deze cijfers vormen een van de grootste verzamelingen van HER2 testgegevens in GC monsters, verkregen van patiënten uit 24 verschillende landen in Azië, Europa en Latijns-Amerika. Hoewel 22,1% goed voor meer dan het dubbele van het bedrag van de positieve tumoren vonden we in onze reeks, de ToGA proef HER2 positiviteit screening criteria opgenomen alle gevallen met eiwit expressie door IHC (3+ en 2+ gevallen) of genamplificatie door ISH alleen. Meer gedetailleerde gegevens over HER2 testen in de ToGA onderzoek is onlangs gepubliceerd waaruit blijkt dat precies 610 gevallen uit 3665 tumormonsters (16,6%) waren in feite beschouwd als HER2-positief, door een van beide scoren IHC 3+ of IHC 2+ met genamplificatie met behulp van fluorescentie in situ
hybridisatie (FISH) [30]. Een post-hoc
verkennende analyse geconcludeerd dat de patiënten in deze categorieën waren degenen die volkomen de meest geprofiteerd van de behandeling met TZB [6]. Zo is het exacte percentage van de patiënten die in aanmerking komen voor een behandeling met TZB volgens HER2 screening uitgevoerd op de ToGA proef was 16,6% en bij IHC resultaten alleen worden beschouwd, slechts 398 gevallen (10,9%) waren eigenlijk HER2-positief (3+) [30 ]. In onze studie, omdat er geen IHC 2+ gevallen bleek genamplificatie door SISH, vonden we een IHC 3+ beoordelen en een definitieve HER2-positieve status van 10,5%.
GC in de Braziliaanse patiënten de neiging te ontstaan ​​in het antrum, geassocieerd met Helicobacter pylori
chronische infectie, daarom worden onze bestaat voornamelijk uit carcinomen van de distale maag (80,6%). Sinds HER2 expressie is sterk in verband gebracht met GC van de cardia en GEJ [17, 30-33], verwachtten we een nog lager percentage positieve bij onze cases te vinden. ToGA trial resultaten toonden een verschil in HER2 positiviteit tarieven tussen Europa /Azië en Midden- /Zuid-Amerika (respectievelijk 23,8 en 16,1%, met inbegrip van alle FISH-positieve en IHC 3+ gevallen). De auteurs bijbehorende de contrasterende resultaten als gevolg van het lagere aantal patiënten gescreend in Latijns-Amerika (484 van 3665 patiënten) in plaats van een mogelijke variatie in tumorbiologie [30]. Helaas konden we niet vinden van informatie die specifiek betrekking HER2 expressie in GC van de Braziliaanse patiënten die deelnamen aan de ToGA studie. Als cross-gegevens tussen tumor topografie en patiënten 'landen van herkomst kunnen worden teruggehaald, kan het ook helpen verklaren uiteenlopende HER2-positieve GC tarieven in Latijns-Amerika.
Vergelijkbaar met onze resultaten, in een recente grote Europese reeks [34], alsmede in een Japanse cohort van 1461 patiënten [35], was er geen verschil in HER2 positiviteit tussen proximale en distale maag tumoren. Echter, twee grote Chinese series [17, 33] onlangs bleek significant hoger HER2 expressie in proximale GC, in overleg met ToGA proef bevindingen [30] en met de resultaten van een reeks van 2798 Zuid-Koreaanse patiënten [32]. De auteurs hebben gesuggereerd dat intestinale-type kankers zijn gewoonlijk vaker in de GEJ en, als verschillende etiologieën een rol kunnen spelen bij carcinogenese van tumoren uit deze twee plaatsen, kan dit gedeeltelijk duidelijk HER2 expressie tarieven rechtvaardigen volgens tumor topografie [30]. Naast de genetische afkomst naar etniciteit kunnen meerdere maagkanker pathways sterk worden beïnvloed door voedingsgewoonten en chronische Helicobacter pylori infectie
[3]. Hoewel dit heeft waarschijnlijk ook enige invloed op HER2 positiviteit tarieven gevonden in verschillende populaties met GC, de relatie tussen deze factoren en HER2 expressie blijft onbekend, met enkele artikelen gepubliceerd [36, 37].
Het aantal IHC 3+ gevallen gevonden in ons onderzoek gedeeltelijk kon worden verklaard door het feit dat hele weefselcoupes uitsluitend gebruikt voor HER2 evaluatie plaats van endoscopische technieken. Een recente studie gepaarde primaire gastrectomies en hun endoscopische biopten om HER2 expressie scores te vergelijken en vond een concordantie van slechts 57%, vooral te wijten aan intratumorale HER2 heterogeniteit [38]. HER2 genetische heterogeniteit van ISH is eerder aangetoond borstkanker, maar het lijkt een meer complexe kwestie van GC specimens [39] zijn. Eiwitexpressie heterogeniteit IHC, gewoonlijk aangeduid als variabiliteit in immunohistochemische intensiteit en uitbreiding van HER2-positieve gebieden, is ook een probleem dat grote gevolgen kan hebben voor steekproef voor HER2 testen in GC. In feite heeft HER2 expressie heterogeniteit aangetoond niet alleen ons onderzoek maar ook door andere auteurs [39, 40], waaronder een studie omvattende gastrectomies 2727 [32]. Hierdoor kan hele weefselsecties verkregen gereseceerd primaire maagtumoren een grotere vertegenwoordiging van verschillende sub klonale kanker celpopulatie die kunnen helpen voorkomen vals-negatieve resultaten als gevolg van HER2 heterogeniteit bieden. Omdat patiënten met lokaal gevorderde of gemetastaseerde GC primaire gastrectomie niet zou ondergaan, whole-coupes zijn niet altijd beschikbaar en andere GC monsters moeten worden gebruikt, maar het verhogen van de vraag welke het meest geschikt zijn voor het testen van HER2 zijn: endoscopische biopten versus
metastatische laesies. Voor endoscopische biopten, de aanbeveling is een haalbare aantal representatieve tumor fragmenten (idealiter 6-8) en, indien mogelijk, moet de patholoog voeren ook HER2 testen op een ander monster bij een negatief resultaat wordt gevonden op een tumor endoscopische biopsie [40].
Bovendien GC monsters uit de toGA onderzoek werden getest op HER2 expressie met de HercepTest kit, die een konijn polyklonaal anti-HER2-antilichaam [6] gebruikt, terwijl een konijn monoklonaal antilichaam (4B5) werd in onze studie. Andere studies hebben lagere gevoeligheid bekijken van HercepTest gerapporteerd ten opzichte van 4B5-kloon voor de detectie van HER2 eiwitexpressie [15, 41, 42]. Dit zou ook goed zijn voor de soortgelijke IHC 3+ percentage van de gevallen gevonden in onze serie en op de ToGA proef, ondanks het overwicht van tumoren uit de distale maag onder onze patiënten.
Data op HER2 expressie in de Braziliaanse patiënten met GC zijn zeer beperkt en er is een grote variatie van gepubliceerde resultaten. De eerste twee studies ooit in Brazilië uitgevoerd vond een HER2-overexpressie van 12 en 5,4%, met inbegrip van IHC 3+ en 2+ gevallen bij elkaar opgeteld [23, 24]. De indeling score voor borstkanker werd gebruikt voor HER2 toestandsbeoordeling, waarbij de gehele celmembraan moeten worden gekleurd, en niet alleen zij- of basolaterale wanden, die onderschatting van HER2 positiviteit suggereert. In recenter onderzoek met specifieke HER2 scorecriteria voor GC, IHC 3+ gevallen varieerde van 0,8% tot 11,6% [19-22, 25, 26]. Studies die de laagste prijs (0,8%, 3% en 6%) gebruikt tumorweefsel microarrays (TMA) verkregen uit chirurgische monsters en andere anti-HER2 antilichamen plaats 4B5 [19, 20, 22]. Deze resultaten zijn moeilijk te vergelijken met ons om methodologische verschillen, vooral wanneer TMA en tumorale eiwitexpressie heterogeniteit blootstaan. Aldus kan TMA monsters meer op endoscopische biopten plaats van grotere geheel-weefselcoupes van primaire gastrectomies, die werden gebruikt in deze studie geven.
Onze resultaten bevestigen actuele literatuur bevindingen Braziliaanse patiënten met GC getest op HER2 expressie onder toepassing van een uiterst gevoelige anti-HER2 antilichaam geheel weefsel tumorsecties. Als een zaak van de feiten, een recente analyse van een Braziliaanse kanker centrum vergeleek de prestaties van HercepTest, SP3 en 4B5 antilichamen tussen hele weefsel secties en TMA's in een reeks van 199 gastrectomies [21]. De auteurs hebben het hoogste percentage positieve HER2 met dezelfde parameters van onze studie: 4B5 antilichaam geheel weefsel tumorsecties (11,6%), een waarde zeer vergelijkbaar met onze bevindingen (10,5%). Het laagste percentage positieve HER2 werd gekwalificeerd als TMA en HercepTest kit (3%) [21].
Ondanks de hogere gevoeligheid gevonden met het antilichaam 4B5, zijn sommige auteurs ook blijken grote cytoplasmatische achtergrondkleuring van de maag foveolar laag en foci
van intestinale metaplasie /dysplasie, gezien in onze studie, die een intrinsieke eigenschap klonale plaats een methodologisch probleem [15, 21, 41, 42] suggereert. In feite is HER2 kleuring van dysplastische epitheel gecorreleerd genamplificatie door ISH [43]. Hoewel er geen problemen die het onderscheid HER2-positieve neoplastische cellen uit die gebieden, benadrukken wij dat de kleuring van deze niet moeten worden beschouwd als het maken van HER2 expressie.
Tot het schrijven van dit manuscript de auteurs konden alleen ophalen drie andere studies over ISH voor genamplificatie detectie in GC monsters van Braziliaanse patiënten [19, 21, 25]. Begnami et al. vond een totale versterking van 8% het gebruik van vis, maar het percentage van IHC 2+ versterkt gevallen werd niet vermeld [19]. Vergelijkbaar met onze bevindingen hebben andere groep geen geamplificeerd gevallen bij IHC 2+ tumoren vinden, hoewel FISH was de gebruikte methode [25]. Naast onze studie, maar een ander toegepast zilveren brightfield dual ISH in IHC 2+ gevallen [21]. De resultaten toonden uiteenlopende amplificatie rates (van nul tot 100%), afhankelijk van het primaire antilichaam voor IHC en weefselmonsters (hele weefselcoupes versus
TMA). 4B5 antilichaam op 198 hele weefselcoupes bleek 20 gevallen met een twijfelachtige HER2 score (10,1%), waarvan slechts 6 gevallen (30%) toonden genamplificatie door SISH [21]. Het percentage gevallen met een definitieve HER2-positief was 14,6%, een iets hoger tarief dan wij ontdekt, dat mede door de lagere frequentie van distale GC (43,2%) in de serie zijn. Zij hebben geconcludeerd dat de meest accurate methode IHC gaan HER2 expressie in GC was het 4B5 antilichaam op hele weefselsecties [21], die precies methode die in ons onderzoek was gebruikt.
Bovendien vonden we een verband tussen HER2 positieve tumoren en sommige pathologische parameters, zoals intestinale subtype Lauren (P
= 0,048), goed tot matig gedifferentieerde tumoren (P
= 0,004) en de aanwezigheid van lymfovasculaire invasie (P
= 0,031). De intestinale subtype is bewezen dat het pathologische kenmerk meest onveranderlijk geassocieerd met HER2 positiviteit in meerdere studies [17, 32, 34, 35, 44, 45], waaronder de ToGA proces [30] en soms Braziliaanse patiënten [19, 22 zijn , 23, 26]. Aangezien HER2 positiviteit zal naar verwachting worden gevonden op de intestinale-type tumoren, raden we dat, bij de behandeling van een mixed-type tumor, in gebieden waar een intestinale morfologie moeten worden geselecteerd voor HER2 scoren.
Vereniging van HER2 positiviteit met histologische graad en de aanwezigheid van lymfovasculaire invasie ook gemeld door sommige auteurs [19, 25, 31, 46], maar anderen [20, 47].

• Maagsonde inbrengen onder direct zicht met behulp van de Koning Vision ™ video laryngoscoop: een gerandomiseerde, prospectieve, klinische trial
• Correlatie tussen schijnbare diffusie coëfficiënten en HER2 status maagkanker: pilotstudie