Association entre le statut HER2 dans le cancer gastrique et les caractéristiques clinico: une étude rétrospective utilisant des sections entières de tissus

Association entre le statut HER2 dans le cancer gastrique et les caractéristiques clinico: une étude rétrospective utilisant des sections entières de tissus
Résumé de l'arrière-plan
Le cancer gastrique est généralement diagnostiqué à un stade avancé de la maladie et les options thérapeutiques sont rares. Le trastuzumab a été récemment approuvé pour les carcinomes métastatiques ou localement avancés résultant dans l'estomac ou dans la jonction gastro-oesophagien chez les patients atteints de tumeurs HER2-positives. Toutefois, les données sur la fréquence des cas de HER2-positif chez les patients brésiliens sont limitées. Notre objectif était de caractériser la protéine HER2 et le statut de gène dans une série de patients brésiliens atteints de cancer gastrique et pour évaluer son association avec des données clinico.
Méthodes
diapositives histologiques à partir de 124 gastrectomies primaires ont été examinés et leurs rapports pathologiques ont été récupérés à partir de les fichiers dans un hôpital universitaire brésilien. immunohistochimie automatisé pour HER2 a été réalisée sur des sections entières de tissus de chaque tumeur. cas HER2 équivoque par immunohistochimie ont été soumis à l'hybridation automatisée à double pour une évaluation in situ de l'amplification génique dans. Résultats de statut HER2 a été confronté à des paramètres clinicopathologiques afin d'évaluer statistiquement des associations significatives.
analyse immunohistochimique a révélé que 13/124 cas (10,5%) étaient HER2 positifs (3+), 10/124 cas (8,1%) étaient équivoques (2+) et 101/124 cas (81,4%) étaient négatifs, étant 7 cas 1+. Aucun des cas ambigus a montré une amplification génique. Le taux de positivité HER2 global était de 10,5%. Il y avait une association entre l'expression de HER2 et le sous-type histologique intestinal Laurén (P
= 0,048), les tumeurs bien différenciées modérément (P
= 0,004) et la présence de l'invasion lymphovasculaire (P = 0,031
). Aucune association n'a été trouvée entre le statut HER2 et de la topographie de la tumeur.
Conclusions
Face aux données publiées par d'autres auteurs, le plus faible pourcentage de cas de HER2-positif trouvé dans notre série pourrait être partiellement expliquée par la faible fréquence des tumeurs résultant à la jonction gastro-oesophagienne en comparaison avec les carcinomes gastriques distales chez les patients brésiliens. Cela pourrait aussi expliquer l'absence d'association statistiquement significative entre le statut HER2 et de la topographie de la tumeur dans notre étude.
Mots-clés
HER2 cancer gastrique immunohistochimie amplification génique caractéristiques clinicopathologiques Contexte
Environ un million de nouveaux cas de cancer de l'estomac (GC ) sont estimés à se produire chaque année dans le monde, ce qui correspond à 8% de tous les diagnostics de cancer dans le monde [1, 2]. GC est également considéré comme la deuxième cause de décès liés au cancer dans le monde et plus de 700.000 décès devraient survenir en raison de cette maladie chaque année [1, 3]. Cependant, la répartition des patients avec GC dans différentes parties du globe est pas homogène: plus de 70% des nouveaux cas et des décès surviennent dans les pays en développement. Les taux d'incidence les plus élevés se trouvent en Asie de l'Est, Europe de l'Est, et en Amérique du Sud [1]. L'Institut National du Cancer du Brésil estime que GC comprend plus de 5% de toutes les tumeurs malignes dans ce pays [4]. Les options de traitement pour
GC sont généralement limités, car il est généralement diagnostiqué à un stade avancé de la maladie et, par conséquent, le taux de survie à cinq ans est toujours faible, autour de 20% dans la plupart des régions du monde [2, 5]. Selon l'étude ToGA, une récente étude de phase III randomisée internationale, le traitement en combinaison de chimiothérapie et trastuzumab (TZB) a considérablement amélioré la survie des patients avec HER2-positif GC avancée [6]. TZB est un anticorps monoclonal recombinant ciblant HER2, une protéine transmembranaire qui appartient à la famille des récepteurs humains de facteur de croissance épidermique [7]. HER2 domaine intracellulaire présente une activité tyrosine kinase capable de générer des seconds messagers intracytoplasmiques qui coordonnent l'expression nucléaire de gènes associés à l'angiogénèse, la prolifération cellulaire et la survie [8]. La surexpression de la protéine HER2, un produit d'un proto-oncogène situé sur le chromosome 17, a été associée à la carcinogenèse et la progression tumorale du sein, des ovaires, les glandes salivaires, de la prostate et les cancers du tractus gastro-intestinal [9].
Basé sur essai ToGA les résultats, les organismes de réglementation internationaux ont récemment approuvé l'utilisation de TZB dans HER2-positif métastatique ou localement avancé carcinomes survenant dans l'estomac ou dans la jonction gastro-oesophagien (GEJ) [10]. Les carcinomes de patients éligibles pour le traitement avec TZB doivent présenter le statut HER2-positif, attesté par surexpression de la protéine (score 3+) par immunohistochimie (IHC) ou l'amplification de gènes par l'hybridation de situ (ISH) pour les tumeurs avec des résultats équivoques IHC (score en 2+) [11, 12]. Depuis lors, de nombreuses études ont mis l'accent sur la présentation de la fréquence de HER2-positif GC dans différentes populations, avec une grande variation sur les méthodes utilisées pour les protéines et la détection du gène. Par conséquent, les résultats varient notablement 2-45% de la surexpression de HER2 dans la série GC [13-17]. Une grande revue systématique, y compris les données de 49 études a révélé un taux médian de 18% de positivité HER2 dans 11.337 patients avec GC [18]. Néanmoins, la prévalence des cas de HER2-positif chez les patients brésiliens reste inconnu, avec peu de données publiées [19-26]. Étant donné que le système de santé publique brésilienne n'a pas encore approuvé l'utilisation de TZB pour le traitement de GC dans ce pays, nous croyons que la détection de HER2-positif GC chez les patients brésiliens peut fournir une base scientifique pour la mise en place de nouvelles politiques de santé publique et mieux définir clinique protocoles pour améliorer le traitement de ces patients au Brésil.
par conséquent, dans la présente étude, nous avons cherché à caractériser l'expression de HER2 dans GC dans une série de patients brésiliens, en utilisant des sections tumorales ensemble des tissus à partir de spécimens chirurgicaux, et d'évaluer l'association entre la protéine HER2 et le statut de gène avec des données clinico.
Méthodes
la présente étude a été approuvée par le Comité d'éthique de notre institution (Comitê de Ética e Pesquisa EPCC-UFMG) sous CAAE numéro de protocole 32898114.9.0000.5149. Le consentement éclairé écrit a été obtenu conformément aux directives institutionnelles.
Nous avons étudié 142 patients consécutifs ayant subi une gastrectomie primaire entre 2007 et 2011 à l'hôpital Cliniques, Université fédérale de Minas Gerais, au Brésil, dont le diagnostic histopathologique était GC. Aucun des patients avaient reçu une chimiothérapie néoadjuvante ou un autre type de traitement pour leur tumeur avant la chirurgie. Tous les 142 cas avaient leurs rapports pathologiques récupérés et, afin de confirmer le diagnostic de la GC, les lames colorées originales hématoxyline-éosine ont été simultanément examinées par deux pathologistes (RSL et MMDAC), dont l'un est un expert en pathologie gastro-intestinale (MMDAC) . Les données cliniques (l'âge et le sexe des patients) et les paramètres pathologiques (topographie de la tumeur, diamètre de la tumeur maximale, stade, le grade histologique et sous-type, présence de lymphovasculaire et des vaisseaux sanguins invasion) ont été enregistrées. Les tumeurs ont été divisés en deux groupes en fonction de la topographie gastrique tumeurs distale et proximale, cette dernière catégorie notamment les cancers de la JGO. Les critères du système TNM et recomendations de la 7ème édition du American Joint Committee on Manuel de stadification du cancer ont été utilisés pour la mise en scène tumeur [27, 28]. L'indice des glandulaire formation et cytologique polymorphisme ont été considérés pour le grade histologique dans des tumeurs bien, moyennement ou mal différenciés. système de classification histologique de Laurén a été utilisé pour le sous-typage de la tumeur [29].
New 4 sections entières tissulaires um d'épaisseur ont été obtenus à partir d'échantillons de tumeurs fixés au formol de paraffine et soumis à automatisé IHC, en utilisant une plate-forme BenchMark XT ™ (Ventana Medical Systems , Arizona, Etats-Unis) et l'anticorps prédilué monoclonal de lapin primaire anti-HER2 /neu (4B5 clone). Toutes les lames ont été contre-colorées avec de l'hématoxyline subsequentially. Un échantillon de cancer du sein HER2-positif pré-testé a été utilisé comme témoin positif externe. Dix-huit cas ne contenaient pas le tissu tumoral assez pour les protocoles IHC ultérieurs et ont été exclus de cette étude, ce qui entraîne 124 cas appropriés pour l'analyse de. Trois pathologistes (RSL, HG et CBN) tout à la fois analysées diapositives immunocolorées utilisant un multi-tête microscope et a obtenu un score de consensus pour l'expression HER2 selon les recommandations de Hofmann et Rüschoff est pour GC spécimens chirurgicaux [11, 12]. Les cas ont été classés en quatre groupes (0, 1+, 2+ et 3+), en fonction de l'extension et de l'intensité de l'expression: 0, aucune réactivité, ou la réactivité membraneuse dans < 10% des cellules; 1+, faible réactivité membraneuse /à peine perceptible dans > 10% des cellules et les cellules sont réactifs seulement dans une partie de leur membrane; 2+, faible à modéré réactivité membraneuse complète ou basolatérale in > 10% des cellules; 3+, une forte réactivité membraneuse complète ou basolatérale in > 10% des cellules [11]. Seul un motif membraneuse d'expression était adaptée à l'évaluation. Les cas inclus dans la catégorie 3+ ont été considérés comme positifs pour la protéine HER2 surexpression, alors que 0 et 1+ cas ont été considérés comme négatifs.
Cas notés comme 2+ ont été considérés comme équivoques pour la protéine HER2 expression et nouvelle 4 um d'épaisseur sistes coupes de tissus ont été soumis à fond clair argent dans l'hybridation (la SISH) de situ en utilisant la même plate-forme automatisée (BenchMark XT ™) et le HER2 double ISH sonde ADN test Cocktail INFORM (Ventana Medical Systems, Arizona, Etats-Unis). Le HER2
et le chromosome 17 (CEP17) copier des numéros ont été comptés dans 20 noyaux non chevauchants simultanément par deux observateurs (RSL et CBN). profil génomique de HER2 a été défini comme non-amplifié si le ratio moyen HER2
/de CEP17 était < 2.0 et amplifié si le rapport HER2
/de CEP17 était ≥2.0. Si le rapport se situait entre 1,8 et 2,2, encore 20 noyaux ont été marqués, et le rapport global calculé. 2+ cas IHC montrant l'amplification du gène par Sish et IHC 3+ cas ont été tous deux considérés comme positifs pour HER2 statut final [11, 12].
L'analyse statistique a été réalisée en utilisant le logiciel SPSS, version 19.0 (SPSS Inc., Chicago, IL ). Le test chi carré de Pearson a été utilisé pour corréler les résultats IHC et le statut final HER2 avec des paramètres clinicopathologiques. Tous les P
valeurs étaient des deux côtés, et P
< . Les résultats de 0,05 a été considérée comme statistiquement significative
caractéristiques clinicopathologiques et leur association avec statut final HER2 et IHC scores sont présentés dans le tableau 1. L'âge des patients au moment du diagnostic variait de 28 à 92 ans (médiane: 62,33 ans), et il y avait 64 hommes (51,6%) et 60 femmes (48,4%) chez les 124 patients inclus dans cette étude. Les tumeurs ont été identifiés de préférence à l'estomac distal (80,6%) par comparaison avec les tumeurs survenant dans le cardia ou de la JGO. La taille des tumeurs variait entre 0,5 et 14,0 cm (moyenne, 5,31 cm) et les tumeurs avancées (catégories pT2, pT3 et pT4) représentaient 107 cas (86,3%). Selon le grade histologique, 13 cas (10,5%) étaient bien différenciés, 45 cas (36,3%) modérément différenciés, et 66 cas (53,2%) des tumeurs peu différenciées. sous-type histologique intestinal Laurén a été le plus fréquemment diagnostiqué, comptant pour 61 cas (49,2%). sous-types réflex et mixtes ont été observés chez 21 (16,9%) et 33 (26,6%) des cas, respectivement. Les neuf autres cas (7,3%) ont été classés comme indéterminée. invasion lymphovasculaire a été trouvée dans 94 cas (75,8%), et 85 patients (68,5%) avait métastase ganglionnaire au moment du diagnostic, avec une moyenne de 9,27 noeuds positifs par cas (plage, 1 à 63 noeuds positifs) .Table 1 Association entre HER2 état et les paramètres clinicopathologiques
global
HER2 positif

HER2 négatif
P
valeur
HER2 (3 +)
HER2 (2+)
HER2 (0, 1+) ​​
P
valeur
n =
124 ( %)
13 (10,5)
111 (89,5)
13 (10,5)
10 (8.1)

101 (81,4)
âge au moment du diagnostic
0,803
0.590
≥60 ans
82 (66,1) 9

73
9 8
65
< 60 ans
42 (33,9) 4
38
4 2
36
Sexe
0,865
0,459
64 (51,6) 7

57
7
7
50
Femme
60 (48,4)
6 Masculin
54
6 3
51
Tumor topographie
0,720
0,709
estomac distal
100 (80,6)
10
90
10
9
81
estomac proximal /GEJ
24 (19,4) 3
21
3 1
20
sous-type histologique
0,048
0,009
Intestinal
61 (49,2) 11

50
11
9
41

21 diffus (16,9)
0
21
0
0
21
Mixed 33 (26,6) 2
31
2 1
30
Unditermined
9 (7.3)
0
9
0
0
9
Le grade histologique
0,004
< 0,001
Eh bien
13 (10.5) 4
9 4
1 8
Modérément
45 (36,3) 7

38
7 8
30
mal
66 (53,2) 2
64
2 1
63
invasion lymphovasculaire
0,031
0,060
positif
94 (75,8) 13

81
13
6
75
négatif
30 (24.2)
0
30
0 4
26
vaisseau sanguin invasion
0,395
0,170
positive
44 (35,5)
6
38
6 1
37
négatif 80 (64,5) 7

73
7
9
64
pT statut
0,271
0,165
pT1
17 (13,7)
0
17
0 1
16
pT2
32 (25,8)
3
29
3 2
27
pT3
69 (55,6) 10

59
10
5
54
pT4
6 (4.9)
0
6
0 2
4
état pN
0,453
0,762
pN0
39 (31,5) 2
37 2
4
33
pN1
46 (37,1) 7

39
7
4
35
pN2
24 (19,3) 3
21
3 1
20
pN3
15 (12.1)
1
14 1
1
13
statut pM
0,548
0,705
pM0
121 (97,6)
13
108
13
10
98
pM1
3 (2.4)
0 3
0
0 3
Les chiffres en gras représentent P
des valeurs avec une signification statistique
L'analyse immunohistochimique a révélé 13 cas positifs (3+; 10,5%) pour la protéine HER2 surexpression (figure 1a), 10 cas équivoques (2+;.. 8,1%) (figure 1b) et 101 cas négatifs (81,4%), dont 7 ont été marqués 1+ (5,6%) (Fig . 1c). L'âge médian au moment du diagnostic a tendance à augmenter en fonction du statut HER2 (négatifs, 61.76 ans; équivoques, 66,3 ans, et positif, 68,58 ans), bien que cela n'a pas atteint la signification statistique. Aucun des patients dans la catégorie IHC 3+ étaient âgés de moins de 46 ans et le plus ancien patient dans la série (une vieille femme de 92 ans) était parmi eux. Il n'y avait pas d'association entre l'expression de HER2 et le sexe des patients. Figue. 1 Analyse immunohistochimique de l'expression de HER2 dans les cancers gastriques à l'aide de l'anticorps 4B5 dans des sections entières de tissus. (A) un cas de HER2-positif (3+); (B) un cas de HER2-équivoque (2+); (C) un cas de HER2-négatif (1+); (D) intratumorale hétérogénéité des protéines dans un cas de HER2-positif (3+). (AC: x400 grossissement de ch& D: x200 champ grossissement)
Il y avait une association positive entre la protéine HER2 expression et bien à des tumeurs moderatly différenciées (P
< 0,001), ainsi qu'avec le sous-type intestinal Laurén (P
= 0,009).
tumeurs résultant dans l'estomac distal représentaient 76,9% des cas 3+ IHC, tandis que 23,1% où trouvé dans le cardia gastrique ou dans le GEJ, mais cette variation n'a pas été statistiquement significative. Non IHC 3+ tumeur a montré une diffuse ou la morphologie indéterminée et seulement deux (15,4%) ont été considérés comme des carcinomes peu différenciés. Chaque 3+ tumeur IHC a montré l'invasion lymphovasculaire et ils ont tous été diagnostiqués à un stade avancé de la maladie, principalement dans la catégorie pT3 (76,9%). Onze cas (84,6%) étaient positifs pour les métastases ganglionnaires, avec une moyenne de 7,5 noeuds positifs par cas. Cependant, aucune signification statistique n'a été observée entre la protéine HER2 surexpression et pT, pN ou le statut pM.
Par rapport à 3+ cas IHC, les tumeurs HER2-équivoques (2+) présente un profil légèrement similaire lorsque les données morphologiques a été prise en compte. Aucun cas a montré l'histologie diffuse ou indéterminée, avec une prédominance du sous-type intestinal (9 cas, 90,0%) et les tumeurs modérément différenciées (8 cas, 80,0%). La majorité des tumeurs dans ce cadre également compromis l'estomac distal et ont été diagnostiqués à un stade avancé de la maladie (9 cas, 90,0%). Cependant, il y avait une diminution de la proportion de cas montrant invasion lymphovasculaire et métastase ganglionnaire (6 cas, 60,0%) en comparaison avec les chiffres trouvés parmi IHC 3+ cas (13 cas, 100,0% et 11 cas, 84,6%, respectivement) .
carcinomes HER2-négatif (scores 0 et 1+) agrégées toutes les tumeurs avec une morphologie diffuse ou indéterminée, ainsi que la majorité des personnes ayant un grade histologique peu différencié et le stade précoce de la maladie au moment du diagnostic.
IHC 2+ cas ont été soumis à Sish mais aucune amplification du gène a été détecté. Par conséquent, les cas ayant un statut final HER2-positif ont été exclusivement composées par IHC 3+ tumeurs, ce qui représente 10,5% de tous les GC dans cette série. Positivité HER2 a été associé à sous-type intestinal (P
= 0,048), les tumeurs bien différenciées modérément (P
= 0,004) et la présence de l'invasion lymphovasculaire (P = 0,031
).
En ce qui concerne la protéine HER2 intratumorale hétérogénéité, l'extension des zones IHC 3+ variait de 10 à 99% des cellules tumorales positives (Fig. 1d). Il y avait aussi une variation de l'extension des zones immunoréactives HER2 dans la catégorie équivoque, allant de 10 à 40% des cellules tumorales. Dans les deux catégories, intratumorale hétérogénéité des protéines a été surtout vu dans les carcinomes de type mixte, dans lequel HER2 expression fortement corrélée avec les zones de type intestinal.
En dehors de leur pointage de HER2, de nombreux cas ont montré une immunoréactivité cytoplasmique dans les cellules de la muqueuse gastrique normale (87 cas , 70,2%), l'épithélium métaplasique (30 cas, 24,2%) et les foyers
de dysplasie (24 cas, 19,4%) (Fig. 2). Ce schéma d'expression a été observée dans l'épithélium métaplasique, et les deux dysplasique, en dépit de la nature de la métaplasie ou le degré de dysplasie. expression nucléaire a été fréquemment observé chez les carcinomes de type diffus, mais tous ces domaines immunohistochimique n'a pas été pris en compte pour le score du profil immunohistochimique HER2. Figue. 2 pièges possibles dans l'analyse immunohistochimique de l'expression de la protéine HER2 à l'aide de l'anticorps 4B5. Cytoplasmique coloration spécifique non dans la muqueuse gastrique fovéolaire normale (à gauche) et dans un foyer
de dysplasie de haut grade gastrique (à droite) (champ grossissement x200)
Discussion
Dans notre étude, nous avons trouvé une HER2- finale état positif de 10,5%. Le taux global de positivité HER2 trouvé dans l'étude ToGA était de 810 3,665 patients (22,1%) [6]. Ces chiffres représentent l'un des plus grands ensembles de données de test HER2 dans des échantillons de GC, obtenus à partir de patients de 24 pays différents en Asie, en Europe et en Amérique latine. Bien que les comptes de 22,1% pour plus que doubler la quantité de tumeurs positives que nous avons trouvé dans notre série, l'essai ToGA positivité HER2 critères de sélection comprenaient tous les cas avec l'expression des protéines par IHC (3+ et 2+ cas) ou l'amplification de gènes par ISH seul. Des données plus détaillées concernant les tests de HER2 dans l'étude ToGA a été récemment publiée révèle que précisément 610 cas sur 3,665 échantillons de tumeurs (16,6%) étaient en fait considérés comme HER2 positif, soit par notation IHC 3+ ou IHC 2+ avec amplification génique par fluorescence in situ
hybridation (FISH) [30]. Une
analyse exploratoire post hoc a conclu que les patients dans ces catégories étaient ceux qui tout à fait le plus bénéficié d'un traitement avec TZB [6]. Ainsi, le pourcentage exact de patients éligibles à un traitement par TZB selon le dépistage HER2 effectué sur l'essai ToGA était de 16,6% et, lorsque les résultats IHC sont considérés comme seuls, seulement 398 cas (10,9%) ont été effectivement HER2 positif (3+) [30 ]. Dans notre étude, puisque les cas de non IHC ont montré une amplification génique par SISH, nous avons trouvé le taux d'un IHC et un statut final HER2 positif de 10,5% de. GC chez les patients brésiliens ont tendance à se produire dans l'antre, associé à Helicobacter
pylori infection chronique, par conséquent, notre série se compose principalement de cancers de l'estomac distal (80,6%). Depuis l'expression HER2 a été fortement associée à GC du cardia et GEJ [17, 30-33], nous nous attendions à un taux de positivité encore plus faible chez nos cas. Les résultats des essais Toga ont montré une différence dans les taux de positivité HER2 entre l'Europe /Asie et Amérique centrale /Amérique du Sud (23,8 et 16,1%, respectivement, y compris tous les cas 3+ FISH-positif et IHC). Les auteurs associés les résultats contrastés en raison de la diminution du nombre de patients dépistés en Amérique latine (484 sur 3,665 patients) au lieu d'une variation possible dans la biologie de la tumeur [30]. Malheureusement, nous ne pouvions pas trouver des informations concernant spécifiquement l'expression de HER2 dans GC des patients brésiliens inscrits dans l'étude ToGA. Si croisée des données entre la topographie de la tumeur et les pays d'origine des patients pourrait être récupéré, il peut aussi aider à expliquer divergentes des taux de GC HER2-positives en Amérique latine.
Similaires à nos résultats, dans une récente grande série européenne [34], ainsi que dans une cohorte de 1461 patients japonais [35], il n'y avait pas de différence entre la positivité HER2 proximale et distale tumeurs gastriques. Cependant, deux grandes séries chinois [17, 33] ont récemment montré significativement plus élevé d'expression de HER2 dans GC proximal, en accord avec les résultats des essais ToGA [30] et avec les résultats d'une série de 2798 patients sud-coréens [32]. Les auteurs ont laissé entendre que les cancers de type intestinal sont généralement plus fréquentes dans le GEJ et, comme différentes étiologies peuvent jouer un rôle dans la carcinogenèse des tumeurs de ces deux endroits, ce qui pourrait en partie justifier des taux d'expression de HER2 distincts selon la topographie de la tumeur [30]. En plus de l'ascendance génétique selon l'origine ethnique, de multiples voies de carcinogenèse gastriques peuvent être fortement influencées par les habitudes alimentaires et l'infection de Helicobacter pylori chronique [3]. Bien que cela a probablement aussi une certaine influence sur les taux de positivité HER2 trouvés dans différentes populations avec GC, la relation entre ces facteurs et l'expression HER2 reste inconnue, avec quelques articles publiés [36, 37].
Le nombre de cas 3+ IHC trouvé dans notre étude pourrait être expliqué en partie par le fait que des sections entières tissulaires ont été exclusivement utilisées pour l'évaluation de HER2, au lieu de biopsies endoscopiques. Une étude récente jumelé gastrectomies primaires et leurs biopsies endoscopiques pour comparer HER2 scores d'expression et a trouvé un taux de concordance de 57% seulement, principalement en raison de l'hétérogénéité intratumorale HER2 [38]. HER2 hétérogénéité génétique par ISH a été précédemment démontré sur le cancer du sein, mais il semble être un problème plus complexe sur des spécimens de GC [39]. Protein expression hétérogénéité par IHC, généralement désigné comme la variabilité de l'intensité et l'extension des zones de HER2-positives immunohistochimique, est également un problème qui pourrait influer grandement sur la sélection de l'échantillon pour le test HER2 dans GC. En fait, l'expression HER2 hétérogénéité a été démontrée non seulement par notre étude, mais aussi par d'autres auteurs [39, 40], y compris une étude comprenant 2,727 gastrectomies [32]. En conséquence, des pans entiers des tissus obtenus à partir de tumeurs gastriques primaires réséquées peuvent offrir une plus grande représentation de la population des cellules cancéreuses différentes sous clonale qui pourrait aider à éviter des résultats faussement négatifs en raison de HER2 hétérogénéité. Puisque les patients avec GC localement avancé ou métastatique pourraient ne pas subir une gastrectomie primaire, des sections entières de tissus ne sont pas toujours disponibles et d'autres échantillons de GC doit être utilisé à la place, ce qui soulève la question de savoir qui sont les mieux adaptés pour les tests HER2: biopsies endoscopiques par rapport à
lésions métastatiques. Pour les biopsies endoscopiques, la recommandation est un nombre viable de fragments de tumeur représentatifs (de préférence 6-8) et, si possible, le médecin doit également effectuer des tests HER2 sur un autre spécimen lorsqu'un résultat négatif est détecté sur une biopsie endoscopique de tumeurs [40].
en outre, des échantillons GC de l'essai ToGA ont été testés pour l'expression de HER2 avec le kit de HercepTest, qui utilise un anticorps polyclonaux de lapin anti-HER2 [6], alors qu'un anticorps monoclonal de lapin (4B5) a été utilisée dans notre étude. D'autres études ont rapporté des taux de sensibilité plus faibles pour HercepTest en comparaison avec 4B5 clone pour la détection de l'expression de protéine HER2 [15, 41, 42]. Cela pourrait aussi expliquer la IHC similaire 3+ Les données de pourcentage de cas identifiés dans notre série et sur le ToGA procès, malgré la prédominance des tumeurs de l'estomac distal chez nos patients. Sur l'expression de HER2 chez les patients brésiliens avec GC sont très limitée et il y a une grande variation sur les résultats publiés. Les deux premières études jamais menées au Brésil ont constaté un taux de HER2 surexpression de 12 et 5,4%, y compris IHC 3+ et 2+ cas additionnés [23, 24]. Cependant, le score de classement pour le cancer du sein a été utilisé pour l'évaluation du statut HER2, dans lequel la membrane cellulaire entière doit être tachée, et non seulement les murs latéraux ou basolatéral, ce qui suggère sous-estimation de positivité HER2. Dans des recherches plus récentes utilisant des critères de notation HER2 spécifiques pour GC, 3+ cas IHC allaient de 0,8% à 11,6% [19-22, 25, 26]. Des études montrant les taux les plus bas (0,8%, 3% et 6%) ont utilisé des microréseaux de tissus tumoraux (AGT) obtenus à partir de prélèvements chirurgicaux et d'autres anticorps anti-HER2 plutôt que 4B5 [19, 20, 22]. Ces résultats sont difficiles à comparer avec les nôtres en raison de différences méthodologiques, en particulier lorsque les AGT et l'hétérogénéité tumorale de l'expression des protéines sont confrontés. Ainsi, AGT pourrait représenter des échantillons plus semblables à des biopsies endoscopiques plutôt que de grandes sections ensemble des tissus de gastrectomies primaires, qui ont été utilisées dans notre étude.
Nos résultats corroborent les résultats de la littérature actuelle sur les patients brésiliens avec GC testés pour l'expression de HER2 en utilisant un un anticorps anti-HER2 très sensible dans les sections tumorales ensemble des tissus. En fait, une analyse récente d'un centre de cancer brésilien a comparé la performance de HercepTest, SP3 et 4B5 anticorps entre les sections ensemble des tissus et des AGT dans une série de 199 gastrectomies [21]. Les auteurs ont constaté que le taux le plus élevé de HER2 de positivité en utilisant les mêmes paramètres de notre étude: anticorps 4B5 dans les sections tumorales ensemble des tissus (11,6%), une valeur plus semblable à notre constatation (10,5%). Le taux de positivité HER2 plus bas a été identifié parmi les AGT et kit HercepTest (3%) [21].
Malgré la sensibilité plus élevée trouvée avec l'anticorps 4B5, certains auteurs ont également rapporté fond cytoplasmique vaste coloration de la couche et des foyers fovéolaire gastrique
de l'intestin métaplasie /dysplasie, comme vu dans notre étude, ce qui suggère une caractéristique intrinsèque clonale plutôt que d'un problème méthodologique [15, 21, 41, 42]. En fait, HER2 coloration de l'épithélium dysplasique a été corrélée à une amplification génique par ISH [43]. Bien qu'il n'y ait pas de difficultés à distinguer les cellules néoplasiques HER2-positives de ces domaines, nous soulignons que la coloration de ce dernier ne doit pas être considéré lors de la notation expression HER2.
Jusqu'à la rédaction du présent manuscrit, les auteurs ont pu récupérer uniquement trois autres études concernant ISH pour la détection d'amplification de gènes dans des échantillons provenant de patients brésiliens GC [19, 21, 25]. Begnami et al. trouvé un taux global d'amplification de 8% en utilisant FISH, mais le pourcentage de cas IHC 2+ amplifiés n'a pas été mentionné [19]. Semblable à nos constatations, un autre groupe n'a pas trouvé de cas amplifiés parmi les tumeurs IHC de, bien que FISH était la méthode employée [25]. Outre notre étude, un seul autre appliqué argent double fond clair ISH dans les cas IHC de [21]. Les résultats ont montré une large gamme de taux d'amplification (de zéro à 100%), selon l'anticorps primaire utilisé pour IHC et des échantillons de tissus (sections ensemble des tissus par rapport à
AGT). anticorps 4B5 sur 198 sections ensemble des tissus a révélé 20 cas avec un score de HER2 équivoque (10,1%) dont seulement 6 cas (30%) ont montré une amplification génique par SISH [21]. Le pourcentage de cas ayant un statut final positif HER2 était de 14,6%, un taux légèrement plus élevé que celui que nous avons découvert, ce qui pourrait être dû en partie à la fréquence inférieure de GC distale (43,2%) dans leur série. Ils ont conclu que la méthode IHC plus précise pour évaluer l'expression HER2 dans GC était d'utiliser l'anticorps 4B5 sur des sections entières de tissus [21], ce qui était exactement la méthode employée dans notre étude.
De plus, nous avons trouvé une association entre tumeurs HER2 positives et certains paramètres pathologiques, tels que le sous-type intestinal Laurén (P = 0,048
), les tumeurs bien différenciées modérément (P
= 0,004) et la présence de l'invasion lymphovasculaire (P = 0,031
). Le sous-type intestinal a été prouvé être la caractéristique pathologique la plus invariablement associée à la positivité de HER2 dans plusieurs études [17, 32, 34, 35, 44, 45], y compris l'essai ToGA [30] et certains avec les patients brésiliens [19, 22 , 23, 26]. Association Depuis positivité HER2 devrait être trouvé sur les tumeurs de type intestinal, nous encourageons fortement que, lorsqu'ils traitent avec une tumeur de type mixte, les zones présentant une morphologie intestinale devraient être sélectionnés pour HER2 scoring. De positivité HER2 avec le grade histologique et la présence d'une invasion lymphovasculaire a également été rapporté par certains auteurs [19, 25, 31, 46], mais pas par d'autres [20, 47].

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