Vzťah medzi H. pylori infekcie a klinicko-funkcií a prognózu rakoviny žalúdka

Vzťah medzi H. pylori infekcie a klinicko-funkcií a prognózu rakoviny žalúdka
abstraktné
pozadia
cieľom bolo zistiť vzťah medzi H. pylori a klinicko-funkcií a prognózu rakoviny žalúdka pomocou kvantitatívnej detekciu H. pylori .
Metódy
157 pacientov bolo zaradených všetci pacienti mali záznam o klinicko-parametrov. Vzorky, vrátane nádorových a nenádorových boli detekované pre H. pylori pomocou real-time PCR a analyzované klinické údaje spätne. . Premenné nezávisle na sebe majú vplyv na prognózu boli skúmané pomocou multivariačný analýzy za použitia Cox proporcionálneho rizika modelu
Výsledky
infekcie H. pylori bola vyššia u non-neoplastické tkanive, ako nádorové tkanivá (p menšie ako 0,05), H. pylori infekcie a jeho kópie sa týkali mieste nádoru a N inscenačné (p menšie ako 0,05). Celkového prežívania (OS) vo všetkých 157 pacientov nemá žiadnu súvislosť so stavom infekcie H. pylori (p = 0,715). Čo sa týka pacientov, ktorí podstúpili operáciu kuratívnu, relaps-free survival (RFS), nemá žiadnu súvislosť so stavom H. pylori infekcie (p = 0,639). Medzi H. pylori pozitívnych pacientov, OS a RFS tých s vyššími kópie boli dlhší ako u pacientov s nízkymi kópiami, ale nebol zistený žiadny významný štatistický rozdiel.
Závery
stav H. pylori infekcie a jej kópia boli spojené na N stagingu. OS a RFS u pacientov s pozitívnym stavu H. pylori nemá žiadny významný rozdiel od pacientov s negatívnym stavu H. pylori.
Pozadie
rakovina žalúdka je druhou najčastejšou príčinou úmrtí na rakovinu, keď sa znížil výskyt dramaticky v niektorých vyspelých krajinách v posledných desaťročiach [1], pacienti s touto chorobou často majú zlú perspektívu [2]. Dokonca aj po potenciálne kuratívnu operácii, viac ako polovica pacienti majú k recidíve nádoru. Zapojenie lymfatických uzlín, hĺbka invázie, veku a umiestnenia nádoru boli identifikované ako najvýznamnejšie patologickým prognostické faktory [3, 4]. Avšak, NCCN klinická prax Všeobecné zásady rakoviny žalúdka naznačuje, že u pacientov s rakovinou žalúdka by eradikáciu Helicobacter pylori (H. pylori), aby sa znížilo riziko recidívy, ktorý bol definovaný ako trieda dôkaz [5].
H. pylori, gram -negativní mikroaerofilní špirála baktérie, bola prvýkrát navrhnutá, ktoré majú byť spojené s rakovinou žalúdka by spoluobjaviteľ Marshall v roku 1983 [6]. V roku 1994 Medzinárodná agentúra pre výskum rakoviny (IARC) klasifikované ako H. pylori určitú klasifikovaný karcinogén [7, 8]. Po tom, mnoho štúdií, ktoré boli vykonané, vrátane epidemiologických vyšetrovaní [9], experimentálnych štúdií [10], zvieracích experimentálnych dát [11, 12], kontrolných prípad klinických štúdiách [13, 14]. Väčšina z týchto štúdií posilnila skutočnosť, že H. pylori je hlavnou príčinou adenokarcinóme žalúdka. Avšak, toto hľadisko je ešte sporný a viac je potrebné spoľahlivé údaje. Ako H. pylori infekcie vedie k rakovine žalúdka, nie je doteraz úplne jasné, ako rôzne patogénne faktory môžu pôsobiť na rôznych stupňoch, ako sú faktory virulencie [15], poškodenie DNA, hostiteľské faktory [16, 17] a COX-2 [ ,,,0],18]. Výskyt rakoviny žalúdka je multi-faktor a multi-proces kroku.
V súčasnej dobe neexistuje žiadny presvedčivý dáta pre vzťah medzi stavom alebo kópií H. pylori infekcie a klinicko-funkcií. Okrem toho, že prognóza rozdiely v prežitie pacientov, ktorí sú pozitívne na H. pylori v porovnaní s tými, ktorí sú negatívne zostáva neznámy. Vo variabilnej časti pacientov s karcinómom žalúdka, infekcia H. pylori nemôže byť detekovaný a rôzne klinické a patologické rysy boli popísané v tejto podskupine [19, 20]. Okrem toho z nedávnej Nemecká štúdie poskytli dôkazy o lepšiu prognózou u pacientov s infekciou H. pylori v porovnaní s negatívnymi prípadmi [21] a talianskej štúdie ukázali, že negatívny stav H. pylori bola spojená so zlou prognózou u pacientov s rakovinou žalúdka [22] , Avšak, ak je nám známe, tieto klinicky relevantné nálezy boli doteraz neboli potvrdené vo veľkých skúseností z iných centier. Väčšina z týchto štúdií používaných sérologické analýzy ako jedinú metódu pre hodnotenie stavu H. pylori, niektoré z nich ešte doplnená metóda molekulu PCR; takže výsledky týchto štúdií sú len ťažko presvedčivé. V skutočnosti existuje mnoho typov spôsobov stanovených pre detekciu H. pylori, vrátane kultúry, histopatologické diagnózy, ureázy test, molekula metódy, sérologické analýzy a UBT, ale iba kultúra, Real-Time PCR a UBT majú vysoký stupeň citlivosti a špecifickosť [23].
V súčasnej štúdii sme použili metódu real-time PCR pre detekciu H. pylori stav infekcie a jej kópie, a cieľom bolo preskúmať možný dosah stav H. pylori na klinicko-funkcií žalúdočné rakoviny u pacientov, ktorí podstúpili operáciu a boli sledovaní po dobu významnú dobu posúdiť rozdiely bez relapsu a celkovým prežitím.
Pacienti a metódy
pacientov
Súbor pacientov tvorilo zo 157 po sebe idúcich pacientov (107 mužov a 50 žien) naplánované na operáciu od 1. januára 2002 do 31. decembra 2006 v Sun Yat-Sen University Cancer Center, Guangzhou, Čína. Priemerný vek pacientov bol 57,2 y (rozsah: 27-78 y), Všetky pacientov zaradených do tejto štúdie mali histologicky potvrdená diagnóza primárnej žalúdočné rakoviny, ktorá bola potvrdená patologicky po operácii. Pacienti, ktorí podstúpili non-resekčných operáciách, a tí s typom Siewerta Aj CARDIA adenokarcinóm boli vylúčení zo štúdie u pacientov s eradikačnej terapie H. pylori alebo liečbe antibiotikami, zlúčeniny bizmutu obsahujúcich, blokátory H2 receptorov alebo inhibítory protónovej pumpy počas 4 týždňov tiež bol zo štúdie vylúčený. Chirurgia pozostávala z medzisúčtu alebo totálnej gastrektómii u všetkých pacientov. Štandardizovaný technika bola použitá pre chirurgické resekciu a lymfadenektómia, ako je popísané na inom mieste [3]. Vek, pohlavie, typ operácie, umiestnenie nádoru, TNM štádiu, chemoterapia, vzorka dĺžku, veľkosť nádoru, a diferenciáciu nádoru, boli zaznamenané pre každého pacienta v databáze. Dĺžka nádor a šírka čerstvých vzoriek boli zaznamenané patológov. pTNM klasifikácia nasledoval kritériá 6. vydanie UICC [24]. Všetci pacienti, ktorí podstúpili akýkoľvek typ chemoterapie boli na režime 5-FU-báze, a základný režim bol FOLFOX6 alebo XELOX. Všetky experimentálny výskum, ktorý je hlásený v rukopise získali informovaný súhlas od subjektov štúdie a bolo eticky vykonaná so súhlasom vhodného etickej komisie v Sun Yat-sen University of Cancer Center.
Nádorové tkanivo a nenádorových tkanivo zo všetkých pacientov bola zhromaždená z resekcii vzoru v operačnom sále počas 30 minút po odstránení žalúdka. Nenádorových tkanív bol odstránený z normálnej žalúdočné tkaniva vo vzdialenosti najmenej 5 cm od nádoru. Keď nádor zúčastňuje celý antra, non-neoplastickým sliznice bol odstránený zo strednej alebo hornej tretine žalúdka. Vzorky boli okamžite zmrazený v kvapalnom dusíku, spracované, kódovaný, a skladované pri -80 ° C v tkanivovej banky nachádzajúce sa v laboratóriu vedeckého výskumu oddelenia.
DNA extrakcie a real-time PCR pre H.pylori
ako nádorové tkanivá a nenádorových tkanív získané od všetkých pacientov v štúdii bola vyvolá z tkanivovej banky. DNA bola extrahovaná z 50 mg tvrdých tkanív (ako nádorové a Non-neoplasitic) pomocou QIAamp DNA stolice MINIKIT (Qiagen). Aby sa zvýšila výťažnosť čistenej DNA, celý supernatant (500 ul) bol použitý pre ďalšie čistenie DNA po pridaní tablety InhibitEX, prispôsobenie nasledujúce kroky protokolu Qiagen pre toto zmenilo množstvo vzorky. Z H. pylori izoluje, DNA bola extrahovaná s použitím QIAamp DNA MINIKIT podľa protokolu pre izoláciu genómovej DNA z bakteriálnych kultúr (Qiagen).
GenBank sa hľadala pre sekvencia génov kódujúcich 16S rRNA H. pylori. Zverejnené sekvencie boli vyrovnané pomocou ClustalW http: ... //Www EBI ac uk /ClustalW /a primery a sondy boli navrhnuté za použitia softvéru Primer Express (Perkin-Elmer /Applied Biosystems, Foster City , Calif.) a konštrukcia sondy softvéru LightCycler (Roche Diagnostics, Mannheim, Nemecko). Vyhľadávanie BLAST bola vykonaná pre kontrolu špecificity DNA sekvencií primerov a sond http :. //Www. NCBI NLM NIH gov /BLAST /
test obsahoval dva PCR ... priméry (Daan Gene Co., Ltd. Sun Yat-sen University, Guangzhou, Čína): primer1 F (5'-GCT AAG AGA TCA GCC TAT GTC -3 ") a Primer2 R (5'-CCG TGT CTC AGT TCC AGT GT-3 '), určené k amplifikácii fragmentu o 118 pároch báz a 16S rDNA, spolu so sondou, Tensensor (5'-LCRed705-GCA GGT TGT TTA ATT CGA AGA TAC ACphos- 3'), značená fluorofor LC Red 705 (Daan Gene Co., Ltd. Sunjatsen University, Guangzhou, Čína).
Každý Real-Time PCR bola vykonávaná v konečnom objeme 50 ul, ktorý obsahuje vyrovnávaciu pamäť 10 ul (10 mM Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM chloridu draselného a 1,5 mM MgCl 2), 2 ul cDNA, 1 ul každého priméru (F 10 pmol /ul, R 10 pmol /ul), 1 ul každého deoxynukleotid (10 mM), 1 ul Taq polymerázy (3U /ul) (Daan Gene Co., Ltd. Sun Yat-sen University, Guangzhou, Čína) a 1 ul sondy (Daan Gene Co., Ltd. Sun Yat-sen University , Guangzhou, Čína). Každá reakčná zmes bola amplifikovaná nasledujúce: denaturácia pri 93 ° C po dobu 3 minút, potom nasleduje 40 cyklov denaturácie pri 93 ° C počas 30 sekúnd; teplotné hybridizácia pri 55 ° C počas 45 sekúnd; a predĺženie pri 72 ° C počas 40 sekúnd. Amplifikácia bola vykonaná s ABI 7500 DNA motora (Applied Biosystems Inc., CA, USA). Použité H. pylori štandardnej amplifikácie krivky, aby sa štandardná krivka lineárna regresná graf, a potom zmenil hodnoty Ct do počtu kópií H. pylori.
Následná
Všetci pacienti po prepustení z nemocnice, zadaný follow-up program podľa štandardného protokolu [25]. Počas prvých 2 rokov po operácii, follow-up každé 3 mesiace sa skladala z klinického vyšetrenia, rutinné krvné testy, hodnotenie koncentrácia nádorových markerov a brušné ultrasonografii alebo CT; endoskopia bola vykonaná každých 6 mesiacov počas prvých 2 rokov po operácii. Pre budúce 3 roky, pacienti boli sledovaní po každých 6 mesiacov a podstúpil endoskopie každých 12 mesiacov. Na relapsu (definovaný ako lokálne recidívy alebo metastáz u vzdialených miest), všetci pacienti boli plne predstavený odhaliť chorobu na iných miestach. Prežitie bolo merané od dňa, kedy resekcia nádoru na smrť alebo na posledný deň bola pacientka známe, že je nažive. Následná-up bol uzavretý v decembri 2008. priemerné sledovanie v 24,4 mesiacov (rozmedzie 0.2-81.8 mesiace).
Štatistická analýza
prípady boli považované za pozitívny na H. pylori, kedy bol prítomný 16S rRNA na real-time PCR amplifikácie produktu buď v nádorovom tkanive alebo nenádorových tkanív, a prípady boli definované ako pozitívne pre H. pylori v normálnej tkanive, kedy bol prítomný na real-time PCR amplifikácie produktu v Non-neoplastické tkanive 16S rRNA , Všetci pacienti boli rozdelení do dvoch skupín; Skupina A 82 pacientov pozostávala z pacientov, ktorí boli pozitívni na infekciu H. pylori, skupina B z 75 pacientov pozostávala z pacientov, ktorí mali negatívny výsledok pre amplifikáciu produktu PCR v reálnom čase. Ďalej Skupina A bola rozdelená do dvoch skupín podľa mediánu (1338.5copies) kopíruje počet H. pylori, jedna skupina infekcie HP s vysoko kópií (počet ≥1338.5 kópia) 41 prípadoch, druhej skupine infekcie HP s nízkym -copies (< 1338,5 počet kópií). 41 prípadov
Štatistická analýza bola vykonaná pomocou softwaru SPSS pre Windows (verzia 13.0; SPSS Inc., Chicago, IL). Súvislosť medzi H-pylori stavu infekcie a klinicko-funkcií bola porovnaná za použitia Pearsonovho Chi-kvadrát testu (2-sledoval testov v každom). Študent t testu nezávislé vzorka bol použitý pre porovnanie veku v čase operácie. prežitia bez relapsu bola vypočítaná pre všetkých pacientov, ktorí nemali lokálne alebo vzdialené recidívy a celkové prežitie bol vypočítaný pre tých pacientov, ktorí boli nažive, bez ohľadu na relapsu stavu. Dlhodobé prežitie bola hodnotená pomocou metódy Kaplan-Meier, s ohľadom na smrť alebo recidíva na rakovinu ako koncový bod; u pacientov, ktorí zomreli na iné ako recidívy príčiny boli považované za vyradené v čase smrti. Log-rank test bol použitý pre štatistické porovnanie medzi faktormi. Premenné nezávisle ovplyvňujúce prognózu boli skúmané pomocou viacrozmerné analýzy s využitím Coxovho modelu proporcionálneho rizika. Hosťujúci celok štatistika bola použitá k výberu premenných pre vstup do modelu. Štatistická úroveň P < 0.05 v prípade začlenenia prognostických premenných.
Výsledky
H. pylori stave, ako je stanovené kvantitatívne detekciou real-time PCR
H. pylori zo 157 prípadov pacientov s rakovinou žalúdka, každý vrátane tumoru a nenádorových tkanív; celkom 314 vzoriek. 49 pacientov (31,2%) dokázaná pozitívna H. pylori v nádorovom tkanive, a 69 pacientov (43,9%) preukázala pozitívny v non-neoplastické tkaniva (obrázok 1). Kombinovaná pozitívne ako v nádore a nenádorových tkanív 36 pacientov (22,9%), zatiaľ čo 82 (52,2%) pacientov môžu byť detekované s H. pylori v niektorého z vzoriek. Počet H. pylori kópií sa pohybuje v rozmedzí od 2,51 x 10 2 ~ 1,45 × 10 8. Obrázok 1 Detekcia H. pylori v nádore a nenádorových tkanív (dve skupiny porovnanie P = 0,003).
Pridruženie medzi patologickým Vlastnosti a H. pylori infekcie Status
tabuľke 1 sú uvedené výsledky pre porovnanie klinické a patologické rysy medzi pacientmi v skupine a a skupiny B. pacientov v skupine a, novotvary boli častejšie nachádza v hornej časti žalúdka (37,8% vs. 18%) a vyššieho PN klasifikácie (N2 /N3) bolo pozorovaná, zatiaľ čo ešte nižšia PN klasifikácie (N0 /N1) bol pozorovaný u skupiny B. Pred operáciou, pacientov, ktorí boli negatívne na H. pylori mali vyššie koncentrácie karcinoembryonálneho antigénu (CEA), než robil tých, ktorí boli pozitívne na H. pylori. Neboli zistené žiadne štatisticky významné rozdiely medzi vzhľadom na pohlaví, veku, veľkosti nádoru, nádorové mieste, hrubého typu, hĺbky invázie tumoru, vzdialené metastázy, UICC fáze CA199 a expresie génu p53 medzi dvoma groups.Table 1 Súvislosť medzi patologickým Vlastnosti a H. pylori Status
klinicko-Funkcia
skupiny a (pozitívne)
(n = 82) (%)
skupina B (záporný)
(n = 75) (%)
hodnota P
Pohlavie
0,287
Muž
59 (72,0)
48 (64,0)
Žena
23 (38,0)
27 (36,0)
Age
0,128 Hotel < 57,2 rokov
45 (54,9)
32 (42,7)
≥57.2 rokov
37 (45.1)
43 (57,8)
nádoru mieste
0,040
Horní
31 (37,8)
18 (24,0)
stredné alebo nižšia
51 (62,2)
57 (76,0)
veľkosť nádoru (stredná ± SD)
5,64 ± 2,82
5,84 ± 2,99
0,671
Gross typu
0,816
Early GC I
1 (1,2)
1 (1.3)
Early GC III
10 (12,2)
7 (9.3)
Borrmann Aj
15 (18,3)
12 (16,0)
Borrmann II
37 (45,1)
32 (42,7)
Borrmann III
11 (13,4)
15 (20,0)
Borrmann IV
8 (9.8)
8 (10,7)
Histologické Rozlišovať
0,236
No
36 (43,9)
28 (37,3)
Zle
35 (42,7)
31 (41,3)
sliznice /Signet ring-cell
11 (13,4)
16 (21,3)
Hĺbka invázie tumoru
0,749
T1
4 (4.9)
2 (2.7)
T2
9 (11,0)
9 (12,0)
T3
58 (70,7)
54 (72,0 )
T4
11 (13,4)
10 (13,3)
lymfatických uzlín
0,039
N0
30 (36,6)
16 (21,3)
N1
29 (35,4)
29 (38,7)
N2
14 (17,1)
19 (25,3)
N3
9 (11,0)
11 ( 14.7)
vzdialených metastáz
0,822
M0
71 (86,6)
64 (84,0)
M1
11 (13,4)
11 (16,0)
UICC etapa
0,124
Aj
10 (12,2)
6 (8.0)
II
20 (24,4)
13 (17,3)
III
32 (39.0)
32 (42,7)
IV
20 (24,4)
24 (32,0)
operáciu
0,943
Liečebné
65 (79,8)
62 (85,3)
paliatívna
17 (20,7)
11 (14,7)
nádorového markeru CEA
0,026 Hotel < 5 ug /L
64 (11,0 )
51 (68,0)
dosiahli ≥ 5 ug /L
9 (78,0)
19 (25,3)
CA199
0,346 Hotel < 30 ug /L
44 (53,7)
44 (58,7)
≥30 ug /l
12 (14,6)
18 (24,0)
P53
0,827
pozitívny
9 ( 11.0)
8 (10,7)
negatívne
40 (48,8)
40 (53,3)
Súvislosť medzi patologickým vlastnosti a H. pylori Kópie
vyššie vyplýva, že tri klinicko-patologické rysy uvedených boli spojené s status H. pylori infekcie bola analyzovaná, aby sa zistilo, či boli spojené s kópiami H. pylori. V tabuľke 2 porovnaní klinických a patologických rysov medzi pacientmi v skupine 1 s high-kópiou H. pylori a skupiny 2 s nízkymi kópiou H. pylori je reported.Table 2 o pridružení medzi patologickým Vlastnosti a H. pylori Kópia

H. pylori s vysokým titrom
(41cases,%)
H. pylori s nízkym titrom
(41 prípadov,%)
hodnota P
nádoru mieste
0,013
Horní
21 (51,2)
10 (24,4)
Stredná alebo nižšie
20 (48,8)
31 (75,6)
lymfatických uzlín
0,014
N0
20 (48,8)
10 (24,4)
N1
13 (31.7)
16 (39,0)
N2
6 (14,6)
8 (19.5) N3
2 (4.9)
7 (17,1)
CEA
0,269 Hotel < 5 ug /l
34 (82,9)
30 (73,2)
≥ 5 mg /L Sims 3 (7,3)
6 (14,6)
z pacientov v skupine s high-kópiou H. pylori, novotvary boli častejšie nachádza v hornej časti žalúdka (51,2% vs. 18%) a viac nižšia PN klasifikácie (N0 /N1) bola pozorovaná, zatiaľ čo vyspelejšie PN klasifikácie (N0 /N1) bolo pozorovaných v skupine s nízkymi kópiou H. pylori. Avšak, žiadny štatisticky významný rozdiel bol pozorovaný v koncentráciách CEA medzi týmito dvoma skupinami (tabuľka 2).
Infekcia H. pylori a prežitie
možného vplyvu stavu H. pylori na dlhodobé prežitie pacientov bola skúmaná pomocou jednorozmerné a viacrozmerné analýzy. Celková analýza prežitia bola vykonaná u 157 pacientov, ktorí podstúpili chirurgický zákrok. Na konci sledovania, 75 pacientov bolo ešte nažive, 82 pacientov zomrelo nádoru, a jeden pacient zomrel z iných príčin; 5-ročné prežitie súvisiace s rakovinou v celej sérii bola 48,4%.
Jednorozmerné analýzy ukázali súvislosť medzi celkové prežitie a histologického rozlíšiť, chirurgia, UICC fázy a koncentrácie CA-199 (dáta nie sú ukázaná). Avšak, taká asociácia nemôže nájsť medzi stavom infekcie H. pylori a celkové prežívanie (p = 0,715) (obrázok 2). V mnohorozmerné analýzy, histologické rozlišovať, chirurgia a UICC fázy boli nezávislé prognostické faktory pre celkové prežitie. Koncentrácia CA-199 nebola významne spojená s celkovým prežitím v mnohorozmerné analýzy (dáta nie sú uvedené). Vplyv stavu H. pylori na prognózu bola pozorovaná u všetkých podskupín podľa stupňa UICC skúmaného; rozdiel nebol nájdený ako štatisticky významné (dáta nie sú uvedené), Okrem toho je účinok stavu H. pylori na prognózu boli hodnotené vo všetkých podskupín ohľadom na rôzne nádorové miestach, nebolo zistené, že rozdiel je štatisticky významný ( Ďalšie súbory 1 a 2). Ďalšia analýza pre pacientov, ktorí boli pozitívne na H. pylori boli vykonané; Kaplan Meierovej analýzy prežitia ukázali, že celkové prežívanie u pacientov s vysokým kópiou H. pylori infekcie, bol lepší ako u pacientov s nízkym kópií, ale rozdiel nebol štatisticky významný (p = 0. 068) (obrázok 3) Spojenie medzi H. pylori kópie a prognóza boli hodnotené vo všetkých podskupín ohľadom na rôzne nádorové miest, nie je štatisticky význam (Ďalšie súbory 3 a 4). Obrázok 2 Súvislosť medzi celkové prežitie a H. pylori infekcie postavenie 157 pacientov s rakovinou žalúdka (p = 0,715).
Obrázok 3 pridružení medzi celkové prežitie a počtom kópií H. pylori u pacientov, ktorí boli pozitívne na H. pylori (p = 0. 068).
bez relapsu analýza prežitia bola vykonaná u 129 pacientov, ktorí podstúpili resekciu R0. Na konci sledovania, 73 pacientov bolo ešte nažive, 56 pacientov zomrelo z recidívy alebo vzdialených metastáz. Potenciálny vplyv na stav H. pylori k relapsu bez prežitia pacientov bola skúmaná pomocou jednorozmerné a viacrozmerné analýzy.
Jednorozmerná analýzy ukázali súvislosť medzi relapsu bez prežitia a histologického odlíšenie, nádorové mieste, hĺbkou invázia tumoru (pT stupeň), lymfatické uzliny metastázy (PN stupeň). Avšak, taká asociácia nemôže nájsť medzi stavom infekcie H. pylori (p = 0,639) (obrázok 4), sa počet kópií H. pylori, infekcie H. pylori v tkanivovej a bez relapsu prežitie non-neoplastických. V mnohorozmerné analýzy, histologické rozlíšiť, tumor v mieste, hĺbka invázie nádoru (pT fáza), lymfatické uzliny metastázy (PN etapa) boli nezávislé prognostické faktory bez relapsu prežitie. Vplyv stavu H. pylori na prognózu bola pozorovaná u všetkých podskupín podľa stupňa UICC skúmaného, ​​nebolo zistené, že rozdiel je štatisticky významný (dáta nie sú uvedené). Dáta pre celkové prežívanie pacientov, ktorí podstúpili R0 resekcii boli takmer rovnaké ako tie, pre prežitie bez relapsu. Histologické diferencovať nádoru miesto, hĺbka invázie nádoru (pT fáza), lymfatické uzliny metastázy (PN fáza) boli nezávislé prognostické faktory pre celkové prežívanie (dáta nie sú uvedené). Obrázok 4 asociácie medzi bez relapsu prežitie a H. pylori infekcie 129 pacientov, ktorí podstúpili chirurgický zákrok kuratívny (p = 0,639).
Diskusia
Medzi početnými spôsobmi popísanými vyššie, najsľubnejšie pre budúcnosť je použitie real-time PCR [26]. Nová real-time PCR technika je prielom v diagnostike H. pylori, pretože umožňuje nielen rýchle a presné detekciu H. pylori, ale aj jeho kvantifikácia [23]. V spôsobe PCR v reálnom čase, existuje mnoho génov pre výber pre amplifikáciu, a primárny pár 16S rRNA a 23S rRNA vykazovali vysokú špecifickosť a citlivosť [27]. V súčasnej štúdii sme zvolili 16S rRNA pre zosilnenie PCR v reálnom čase; . Výsledky ukázali, že 52,2% z 157 rakoviny žalúdka boli pozitívne na H. pylori infekcie, ktorá sa priblížil výsledky iných štúdií pri použití rovnakej metódy [28]
hlavné zistenie aktuálnej štúdie boli: 1) H. pylori infekcia bola v non-neoplastické tkanive väčšia ako v nádorovom tkanive; 2) Infekcia H. pylori sa týkala miesta nádoru, N staging, rovnako ako úroveň CEA; Okrem toho, tumor miesto a N Inscenácia vznikla v súvislosti s H. pylori kópiou číslom. Vo vysoko-infikovaných pacientov, N staging mal skoršie štádiá (N0 /N1) a nádorových miesta v hornej časti žalúdka boli nájdené, zatiaľ čo hladina CEA bola nesúvisí s H. pylori kópiou čísla; a 3) a celkové prežívanie bez relapsu prežitie u pacientov s pozitívnym stavu H. pylori nemal žiadny významný rozdiel od pacientov s negatívnym stavu H. pylori; a v H. pylori pozitívnych pacientov, prognóza je lepšia u pacientov s vysokým počtom kópií H. pylori ako u pacientov s nižším počtom kópií, ale výsledok nebol žiadny významný štatistický rozdiel.
sme zaznamenali vyššiu frekvenciu infekcie H .Pylori v non-neoplastické tkanive než v nádorovom tkanive pacientov s rakovinou žalúdka. Možným vysvetlením môže byť, že 1), akonáhle nádor vznikol v mieste, kde H. pylori žil, nádor by sa meniť mikroprostredie, ktorý by nebol vhodný pre H. pylori prežiť v akomkoľvek more.2) Niektorí bádatelia [ ,,,0],29] zdôrazniť, že H. pylori bude pohltený neutrofilných granulocytov, čo je bohatý na nádorovom tkanive. Hostiteľský imunitnú odpoveď na nádoru zvyšuje indukciu apoptózy u baktérií.
Klinicko-funkcie H. pylori pozitívnych pacientov boli porovnané s tými, v skupine pacientov s negatívnym stavu H. pylori. Štatistická analýza ukázala, že umiestnenie hornej časti brucha bol častejší u H. pylori pozitívnych pacientov; Medzi pacientmi, ktorí boli pozitívne na H. pylori, kópie H. pylori v hornej polohe žalúdku boli vyššie ako v strednej alebo spodnej časti brucha. Všeobecne platí, že v žalúdku, najmä žalúdočné pyloru je najvhodnejšie miesto pre H. pylori rast. Diagnostika a množstvo infekcie H. pylori bola vykonaná za použitia non-neoplastickou tkanivo vo vzdialenosti najmenej 5 cm od nádoru. Preto miest odberu vzoriek sa líši v závislosti na nádoru mieste, napríklad na hornej rakovina žalúdka môže vzorka non-neoplastickou tkanivo zo strednej alebo spodnej časti brucha, a stredné alebo nižšie rakovina žalúdka môže vzorku z hornej. Okrem toho, odber vzoriek Jeden bod zo dutine alebo korpusu môže mať za následok chyby vzorkovacej H. pylori diagnostikou a stanovením množstva H. pylori, takže si myslíme, že tento výsledok nie je schopná dospieť k záveru, že infekcia H. pylori bol príbuzný miesta nádoru.
tiež sme zistili vyššiu mieru pokročilejšom štádiu PN v H. pylori-negatívnych pacientov; Okrem toho, PN Inscenácia vznikla v súvislosti s H. pylori kópiou číslom. U pacientov s vysokým kópií, N staging má skoršej fáze (N0 /N1). Teoreticky, nádorové invázie a metastázy spojené s matrixových metaloproteinázy (MMP), vylučované žalúdočné nádorové bunky, ktoré môžu degradovať extracelulárnej matrix, mení štruktúru vaskulárnej bazálnej membrány a podporujú rakovinových buniek invázie a metastáz [30, 31]. MMP-2 je jedným z najdôležitejších MMP v procese nádorovej invázie a metastáz. Moniga a spol. [32] uvádzajú, že MMP-2 expresie má silnú koreláciu s postupom lymfatických uzlín rakoviny žalúdka. Potom, čo H. pylori došlo k napadnutiu žalúdok, môže stimulovať sekréciu MMP-1, MMP-2, MMP-3 a TIMP-3 od žalúdka nádorové bunky [33], a nakoniec výzvu a urýchliť inváziu pokroku a metastázovaniu rakovina žalúdka. Avšak súčasná štúdia preukázala Opačný záver, a tak sme naznačujú, že infekcia H. pylori je pozitívnym faktorom pre lymfatických uzlín.
Údaje zo súčasnej štúdie ukázali, že infekcia H. pylori bola súvisí s úrovňou CEA v hostiteľskej sére. Pokiaľ je nám známe, je to prvýkrát, kedy sa hlási taký vplyv tohto faktora na úrovni CEA. U pacientov s pozitívnym stavu H. pylori má nízku úroveň v porovnaní s tými, ktorí boli negatívne, ale úroveň CEA bola nesúvisí s H. pylori kópiou číslo; Možné vysvetlenie je autoimunitné reakcie vyvolané H. pylori inhibuje rast nádorovej bunky [34], a nakoniec sa znížila úroveň CEA v hostiteľskej sére.
Sa datuje až do roku 1995, štúdia z Taiwanu [35, 36], ak je nám známe, bol prvý hlásiť vzťah medzi stavom infekcie H. pylori a výsledok pacientov s rakovinou žalúdka, multivariačný analýza ukázala, že iba TNM štádium bol nezávislý prognostický faktor; Avšak, definícia stavu H. pylori bola vykonaná len sérologicky, počet pacientov bol malý, a následné bola pomerne krátka. V roku 2006 prospektívnej štúdie identifikovaný stav H. pylori ako nezávislý prognostický faktor [21]. Kultúra vyšetrenie, histologické analýzy a sérologické stanovenie bolo vykonané pre definovanie stavu H. pylori. Čím lepšiu prognózu poznamenal, u pacientov s infekciou H. pylori bolo vysvetlené na základe zlepšenej imunitnú reakciu proti nádoru [21]. Rovnako sa predpokladá, že preto, že H. pylori zložky napodobňujú špecifické receptory alebo povrchových molekúl na žalúdočných epiteliálnych buniek, auto-protilátky by mohli vyvolať skríženú reakciu proti buniek karcinómu žalúdka [34]. Avšak, niekoľko autorov vyvolali pochybnosti, pokiaľ ide o skutočnú prognostický význam stavu H. pylori, čo naznačuje, že H. pylori negativita môže byť jednoducho v súvislosti s pokročilejšie progresiu nádoru [37, 38]. Nedávna štúdia v Taliansku [22] ukázal, že pacienti s negatívnou stav H. pylori vyzeral, že má zlú prognózu, ale metódy tejto štúdie je tiež sporné, pretože oni používali kombinačné metódy PCR pre Vaca a sérologické analýzy definovať stav infekcie H. pylori. Teoreticky, PCR môže detekovať iba jednu kópiu cieľovej DNA pri testovaní vo vode, ale väčšina štúdií ukázali, že štandardné citlivosť PCR a účinnosť neboli tak presné [23, 39], a analýza sérologické nedá rozlíšiť, či je pacient majúci súčasná infekcie alebo infekcie v minulosti [23, 40]; Obe metódy prispeje čiastočne negatívny chyby.
Ukázali sme, že UICC fáza, histologické rozlíšiť a operácie boli nezávislé prognostické faktory celkové prežitie všetkých pacientov s rakovinou žalúdka, a v mieste nádoru, histologický diferencovať hĺbka invázie nádoru, lymfatické uzliny metastázy boli nezávislé prognostické faktory bez relapsu prežitia u pacientov, ktorí podstúpili kuratívne chirurgický zákrok. Avšak, stav H. pylori infekcie nie je nezávislý prognostický faktor nebol zistený žiadny rozdiel v prežitie týchto pacientov s alebo bez H. pylori, ale ďalšia analýza pozitívnych pacientov H. pylori bolo zistené, že prognóza pacientov s vysokým kópiou množstvo H. pylori bola lepšia ako tie s nízkym počtom kópií, ale výsledok nebol žiadny významný štatistický rozdiel.
pri pokusoch na očkovanie [41] s cholery toxoidom s ľuďmi, H. pylori infekcie pôsobí ako adjuvans pre indukciu z reakcie lokálnej B-buniek v žalúdočnej sliznici.

• P01.11. Amalaki rasayana, ájurvédského príprava: posúdiť jej účinok proti experimentálnym žalúdočných vredov u potkanov albínov
• Funkčné zmeny spojené s organogenézy gastrointestinálneho traktu počas metamorfózy v grónskeho (Hippoglossus Hippoglossus)