Relation entre l'infection à H. pylori et les caractéristiques clinico et le pronostic du cancer gastrique

Relation entre l'infection à H. pylori et les caractéristiques clinico et le pronostic du cancer gastrique
Résumé de l'arrière-plan
Destiné à évaluer la relation entre H.pylori et les caractéristiques clinico et le pronostic du cancer de l'estomac par la détection quantitative de H. pylori .
Méthodes
157 patients ont été inclus, tous les patients avaient un enregistrement de paramètres clinicopathologiques. Spécimens y compris la tumeur et non néoplasiques ont été détectés pour H.pylori par PCR en temps réel et analysé les données cliniques de façon rétrospective. . Variables affectant indépendamment du pronostic ont été étudiés au moyen d'une analyse multivariée en utilisant le modèle de Cox proportionnel: Résultats
infection à H. pylori était plus grande dans le tissu non néoplasique que le tissu tumoral (p < 0,05), H.pylori l'infection et ses copies étaient liées au site de la tumeur et N mise en scène (p < 0,05). La survie globale (OS) dans les 157 patients n'a aucune corrélation avec l'état de l'infection par H. pylori (p = 0,715). Quant aux patients qui ont subi une chirurgie curative, la survie sans récidive (RFS) n'a pas de corrélation avec l'état de l'infection par H. pylori (p = 0,639). Parmi les H.pylori patients positifs, OS et RFS de ceux avec des copies plus élevés étaient plus que chez les patients avec de faibles copies, mais il n'y avait pas de différence statistique significative
. Conclusions
état de l'infection à H. pylori et ses copies étaient liées à N mise en scène. Le système d'exploitation et RFS chez les patients ayant un statut H.pylori positif a pas de différence significative par rapport aux patients ayant un statut négatif H.pylori.
Contexte
Le cancer gastrique est la deuxième cause la plus fréquente de décès par cancer, bien que l'incidence a diminué de façon spectaculaire dans certains pays développés au cours des dernières décennies [1], les patients atteints de cette maladie ont généralement un mauvais perspectives [2]. Même après la chirurgie potentiellement curative, plus de la moitié des patients ont une récidive tumorale. atteinte des ganglions lymphatiques, de la profondeur de l'invasion, l'âge, l'emplacement et de la tumeur ont été identifiés comme des facteurs pronostiques les plus importants clinicopathologiques [3, 4]. Cependant, NCCN guide de pratique clinique du cancer gastrique suggère que les patients atteints de cancer gastrique doivent éradiquer Helicobacter pylori (H.pylori) pour réduire le risque de récidive, qui a été défini comme une preuve de classe [5].
H.pylori, un Gram bactérie spirale microaerophilic séronégatifs, a été proposé pour la première à être associée à un cancer gastrique par co-découvreur Marshall en 1983 [6]. En 1994, l'Agence internationale pour la recherche sur le cancer (CIRC) a classé H.pylori comme cancérogène classi définitive [7, 8]. Après cela, beaucoup d'études ont été menées, y compris les enquêtes épidémiologiques [9], des études expérimentales [10], animal données expérimentales [11, 12], les essais cliniques de contrôle des cas [13, 14]. La plupart de ces études a renforcé le fait que H.pylori est la principale cause de l'adénocarcinome gastrique. Toutefois, ce point de vue est encore controversée et plus de données fiable est nécessaire. Comment l'infection par H. pylori conduit à un cancer gastrique est pas encore tout à fait clair, comme une variété de facteurs pathogènes peut agir à différents stades, comme les facteurs de virulence [15], lésions de l'ADN, facteurs de l'hôte [16, 17] et de la COX-2 [ ,,,0],18]. L'incidence du cancer gastrique est un multi-facteurs et processus en plusieurs étapes.
À l'heure actuelle, il n'y a pas de données convaincantes pour la relation entre H.pylori statut ou copies infection et les caractéristiques clinico. En outre, les différences de pronostic de la survie des patients qui sont positifs pour H. pylori par rapport à ceux qui sont négatifs demeurent inconnus. Dans une proportion variable de patients atteints d'un cancer de l'estomac, l'infection par H. pylori ne peut être détectée et les caractéristiques cliniques et pathologiques distincts ont été décrits dans ce sous-groupe [19, 20]. En outre, une récente étude allemande a fourni des preuves d'un meilleur pronostic chez les patients atteints d'une infection par H. pylori par rapport aux cas négatifs [21] et une étude italienne a montré que l'état négatif H.pylori a été associée à un mauvais pronostic chez les patients atteints de cancer gastrique [22] . Cependant, à notre connaissance, ces résultats cliniquement pertinentes ont été pas encore été validés dans les grandes expériences d'autres centres. La plupart de ces études ont utilisé l'analyse sérologique comme la seule méthode pour évaluer l'état H.pylori, quelques-uns même ajouté la méthode de molécule de PCR; de sorte que les résultats de ces études ne sont guère convaincantes. En fait, il existe de nombreux types de procédés prévus pour détecter la H.pylori, y compris la culture, le diagnostic histopathologique, test de l'uréase, la méthode molécule, analyse sérologique et UBT, mais seulement la culture, PCR en temps réel et UBT ont un degré élevé de sensibilité et la spécificité [23].
Dans l'étude actuelle, nous avons utilisé la méthode de PCR en temps réel pour détecter H.pylori état d'infection et de ses copies, et visait à étudier l'impact potentiel de l'état H.pylori sur les caractéristiques clinico La population de l'étude de cancer gastrique des patients ayant subi une chirurgie et ont été suivis pendant une période de temps significative pour évaluer les différences dans la survie sans récidive et la survie globale.
patients et méthodes patients
Le composé de 157 consécutive patients (107 hommes et 50 femmes) programmés pour une chirurgie à partir du 1er Janvier 2002 au 31 Décembre 2006 à Sun Yat-Sen University Cancer Center, Guangzhou, Chine. L'âge médian des patients était de 57,2 ans (extrêmes: 27-78 ans), Tous les patients inclus dans cette étude avaient un histologiquement confirmé le diagnostic du cancer gastrique primaire qui a été confirmé pathologiquement après la chirurgie. Les patients ayant subi une chirurgie non-exérèse, et ceux avec le type Siewert I Cardia adénocarcinome ont été exclus de l'étude, les patients atteints de H.pylori traitement d'éradication ou d'un traitement avec des antibiotiques, des composés contenant du bismuth, les bloqueurs des récepteurs H2 ou des inhibiteurs de la pompe à protons dans les 4 semaines avaient également été exclus de l'étude. La chirurgie est composée de sous-total ou gastrectomie totale chez tous les patients. Une technique normalisée a été utilisée pour la résection chirurgicale et curage, comme décrit ailleurs [3]. Âge, sexe, type de chirurgie, l'emplacement de la tumeur, le stade TNM, chimiothérapie, spécimen longueur, taille de la tumeur, et la différenciation de la tumeur, ont été enregistrées pour chaque patient dans une base de données. la longueur de la tumeur et la largeur des échantillons frais ont été enregistrés par les pathologistes. classement pTNM a suivi les critères de la 6e édition de l'UICC [24]. Tous les patients qui ont subi tout type de chimiothérapie étaient sur le traitement à base de 5-FU, et le régime de base était FOLFOX6 ou XELOX. Toutes les recherches expérimentales qui est rapporté dans le manuscrit ont obtenu le consentement éclairé des sujets de l'étude et a été éthiquement réalisée avec l'approbation d'un comité d'éthique appropriées à Sun Yat-sen University of Cancer Center.
Tissu tumoral et non néoplasique les tissus de tous les patients ont été recueillis à partir du spécimen réséquées dans la salle d'opération dans les 30 minutes après le retrait de l'estomac. un tissu non néoplasique a été retiré du tissu gastrique normale à une distance d'au moins 5 cm de la tumeur. Quand néoplasme impliqué l'ensemble du sinus maxillaire, la muqueuse non néoplasique a été retirée du troisième intermédiaire ou supérieure de l'estomac. Les échantillons ont été immédiatement congelés dans de l'azote liquide, traités, codés et stockés à -80 ° C dans une banque de tissus situé dans le laboratoire du département de la recherche scientifique Extraction ADN. Et PCR en temps réel pour H.pylori
tissu deux de la tumeur et les tissus non-néoplasiques obtenu à partir de tous les patients inclus dans l'étude a été récupéré à partir de la banque de tissus. L'ADN est extrait à partir de 50 mg de tissus solides (à la fois de la tumeur et non neoplasitic) à l'aide du tabouret minikit QIAamp DNA (Qiagen). Afin d'augmenter le rendement de l'ADN purifié, l'ensemble du surnageant (500 pi) a été utilisée pour une autre purification de l'ADN après l'addition du comprimé Inhibitex, en adaptant les étapes suivantes du protocole de Qiagen à cette quantité d'échantillon modifié. A partir des isolats de H. pylori, l'ADN a été extrait en utilisant le minikit QIAamp DNA selon le protocole pour l'isolement d'ADN génomique à partir de cultures bactériennes (Qiagen).
GenBank a recherché des séquences des gènes codant pour l'ARNr 16S de H. pylori. Les séquences publiées ont été alignées en utilisant CLUSTALW http:... //Www ebi ac uk /clustalw /, et des amorces et des sondes ont été conçues en utilisant le logiciel Primer Express (Perkin-Elmer /Applied Biosystems, Foster City , Calif.) et le logiciel de conception de la sonde LightCycler (Roche Diagnostics, Mannheim, Allemagne). Une recherche BLAST a été effectué pour vérifier la spécificité des séquences d'ADN des amorces et des sondes http:.. //Www NCBI nlm nih gov /BLAST /
Le test contenait deux PCR... amorces (Daan Gene Co., Ltd de l'Université Sun Yat-sen, GuangZhou, Chine): primer1 F (5'GCT AAG AGA TCA GCC TAT GTC -3 ') et Primer2 R (5'GCC TGT CTC AGT TCC AGT GT- 3 ') conçu pour amplifier un fragment de 118 paires de base de l'ADNr 16S, avec une sonde, Tensensor (5'-LCRed705-GCA TGT GGT TTA ATT CGA AGA TAC ACphos- 3'), marqué avec le fluorophore LC Rouge 705 (Daan Gene Co., Ltd de Sun Yat-sen University, GuangZhou, Chine).
Chaque PCR en temps réel a été réalisée dans un volume final de 50 pi contenant un tampon de 10 pi (10 mM de Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM KCl et 1,5 mM de MgCl 2), 2 ul d'ADNc, 1 pl de chaque amorce (F 10 pmol /pl, R 10 pmol /pl), 1 pi de chaque désoxynucléotide (10 mM), 1 pl de Taq polymérase (3U /pl) (Daan Gene Co., Ltd de Sun Yat-sen University, GuangZhou, Chine) et 1 sonde ul (Daan Gene Co., Ltd de l'Université Sun Yat-sen , GuangZhou, Chine). Chaque mélange réactionnel a été amplifié de la manière suivante: dénaturation à 93 ° C pendant 3 minutes, suivie de 40 cycles de dénaturation à 93 ° C pendant 30 secondes; recuit à 55 ° C pendant 45 secondes; et extension à 72 ° C pendant 40 secondes. Les amplifications ont été réalisées avec un moteur d'ADN ABI 7500 (Applied Biosystems Inc, CA, USA). H.Pylori courbes d'amplification standard utilisé pour faire la courbe standard de régression courbe linéaire, puis changé les valeurs Ct dans le nombre de copies H.Pylori.
Suivi
Tous les patients, après la sortie de l'hôpital, est entré dans une programme de suivi selon le protocole standard [25]. Au cours des 2 premières années après la chirurgie, un suivi tous les 3 mois consistaient en un examen clinique, des tests de routine de sang, l'évaluation de la concentration des marqueurs tumoraux, et une échographie abdominale ou tomodensitométrie; endoscopie a été réalisée tous les 6 mois pour les 2 premières années après la chirurgie. Pour les 3 prochaines années, les patients ont été suivis tous les 6 mois et ont subi une endoscopie tous les 12 mois. À la rechute (défini comme une récidive locale ou de métastases à des sites distants), tous les patients ont été organisés entièrement pour détecter la maladie à d'autres sites. La survie a été mesurée à partir de la date de la résection de la tumeur à la mort ou à la dernière date à laquelle le patient a été connu pour être vivant. Le suivi a été fermé en Décembre 2008. La mi période de suivi était de 24,4 mois (extrêmes, 0.2-81.8 mois) Coques analyse statistique de. Ont été considérés comme positifs pour H. pylori lorsque l'ARNr 16S était présent en temps réel de l'amplification par PCR du produit soit dans le tissu tumoral ou un tissu non néoplasique, ainsi que les cas étaient définis comme positifs pour H.pylori dans un tissu normal lorsque l'ARNr 16S était présent sur PCR en temps réel l'amplification du produit dans le tissu non-néoplasique . Tous les patients ont été divisés en deux groupes; Groupe A de 82 patients était composé de patients qui étaient positifs pour l'infection par H. pylori, le groupe B de 75 patients était composé de patients qui ont eu des résultats négatifs pour PCR en temps réel des produits d'amplification. En outre, le groupe A a été divisé en deux groupes par la médiane numéro (1338.5copies) des copies de H. pylori, un groupe d'infection HP avec haute-copies (nombre ≥1338.5 de copie) de 41 cas, l'autre groupe d'infection HP à faible -copies (< 1338,5 nombre de copies). 41 cas
L'analyse statistique a été réalisée en utilisant le logiciel SPSS pour Windows (version 13.0, SPSS Inc, Chicago, IL). L'association entre le statut de l'infection H-pylori et les caractéristiques clinico a été comparée à l'aide Pearson test du chi carré (2-tailed tests dans chaque). Le test t de Student indépendant de l'échantillon a été utilisé pour la comparaison de l'âge au moment de la chirurgie. la survie sans rechute a été calculé pour tous les patients qui avaient pas eu récidive locale ou à distance et la survie globale a été calculée pour les patients qui étaient en vie, quel que soit le statut de rechute. La survie à long terme a été évaluée en utilisant la méthode de Kaplan-Meier, compte tenu de la mort ou de rechute d'un cancer comme critère d'évaluation; patients qui sont décédés de causes autres que la récurrence de la tumeur ont été considérés comme censurés au moment de la mort. Le test du log-rank a été utilisé pour les comparaisons statistiques entre les facteurs. Variables affectant indépendamment du pronostic ont été étudiés au moyen d'une analyse multivariée en utilisant le modèle de Cox des risques proportionnels. La statistique du score a été utilisé pour sélectionner les variables d'entrée dans le modèle. Un niveau statistique de P < 0,05 a été utilisée pour l'inclusion des variables pronostiques
. Résultats
H.pylori Statut tel que déterminé par la détection quantitative de PCR en temps réel de H. pylori à partir de 157 cas de patients atteints de cancer gastrique, y compris chaque tumeur et un tissu non néoplasique; un total de 314 spécimens. 49 patients (31,2%) ont démontré H.pylori positif dans le tissu tumoral, et 69 patients (43,9%) ont montré positif dans le tissu non néoplasique (figure 1). Le combiné positif à la fois la tumeur et les tissus non-néoplasique est de 36 patients (22,9%), tandis que 82 (52,2%) des patients peuvent être détectés avec H.pylori dans l'une quelconque des spécimens. Le nombre de copies H.Pylori varie de 2,51 × 10 2 ~ 1,45 × 10 8. Figure 1: Détection de H. pylori dans la tumeur et les tissus non-néoplasiques (comparaison de deux groupes P = 0,003).
L'association entre clinicopathologiques et Infection Status H.pylori
Le tableau 1 présente les résultats d'une comparaison de la caractéristiques cliniques et pathologiques entre les patients du groupe a et le groupe B. Parmi les patients du groupe a, néoplasmes étaient plus souvent situés dans l'estomac supérieur (37,8% vs 18%), et une classification pN plus avancé (N2 /N3) était observe alors une classification plus faible pN (N0 /N1) a été observée dans le groupe B. Avant la chirurgie, les patients qui étaient négatifs pour H. pylori avaient des concentrations plus élevées de l'antigène carcinoembryonnaire (CEA) que ceux qui étaient positifs pour H. pylori. Aucune différence statistiquement significative en ce qui concerne le sexe, l'âge, la taille de la tumeur, le site de la tumeur, le type brut, la profondeur de l'invasion tumorale, métastases à distance, le stade UICC, CA 19.9 et l'expression du gène P53 ont été observées entre les deux groups.Table 1 Association Entre Caractéristiques anatomocliniques et H.pylori Statut
Caractéristiques clinicopathologiques
Groupe A (positif)
(n = 82) (%)
Groupe B (négatif)
(n = 75) (%)
valeur P
Sexe
0,287
Homme
59 (72,0) 48
(64,0)
Femme
23 (38,0)
27 (36,0)
0,128
<
âge; 57,2 ans
45 (54,9) 32 (42,7
)
≥57.2 ans
37 (45.1)
43 (57,8)
site de la tumeur
0,040
Upper
31 (37,8)
18 (24,0)
Moyen ou inférieur
51 (62,2)
57 (76,0)
taille de la tumeur (moyenne ± écart-type)
5,64 ± 2,82 ± 5,84
2.99
0,671
Type brut
0,816
GC Early I
1 (1.2)
1 (1.3) Early GC III
10 (12,2)
7 (9.3)
Borrmann I
15 (18,3)
12 (16,0)
Borrmann II
37 (45,1)
32 (42,7)
Borrmann III
11 (13,4)
15 (20,0)
Borrmann IV
8 (9.8)
8 (10.7)
histologiques Différencier
0,236
bien
36 (43,9)
28 (37,3)
mal
35 (42,7) 31
cellule (41,3)
muqueux /chevalière
11 (13.4)
16 (21,3)
Profondeur de l'invasion tumorale
0,749
T1
4 (4.9)
2 (2.7)
T2
9 (11,0)
9 (12,0)
58 (70.7) de T3
54 (72,0 )
11 (13.4)
10 (13.3)
ganglionnaire métastase de T4
0,039
N0
30 (36,6)
16 (21.3)
N1
29 (35,4)
29 (38,7)
N2
14 (17.1)
19 (25,3)
N3
9 (11,0)
11 ( 0,822
M0 de 14,7)
métastases à distance
71 (86,6)
64 (84,0)
M1
11 (13,4)
11 (16,0)
stade UICC
0,124
I
10 (12,2)
6 (8,0)
II
20 (24,4)
13 (17,3)
III
32 (39,0)
32 (42,7)
IV
20 (24,4)
24 (32,0)
chirurgie
0,943
Curatif
65 (79,8)
62 (85,3)
palliatifs 17 (20,7)
11 (14,7)
marqueur de tumeur
CEA
0,026
< 5 ug /L
64 (11.0 )
51 (68,0)
≥5 ng /L
9 (78,0)
19 (25,3)
CA 19.9
0,346
< 30 ug /L
44 (53,7)
44 (58,7)
≥30 ng /L
12 (14,6)
18 (24,0)
P53
0,827
positif 9 ( 11.0)
8 (10.7)
négatif
40 (48,8)
40 (53,3) The Association entre clinicopathologiques et copies H.Pylori
Les trois caractéristiques clinico mentionnés ci-dessus que ont été associés à l'état de l'infection à H. pylori ont été analysées pour voir si elles ont été associées aux copies H.Pylori. Dans le tableau 2, une comparaison des caractéristiques cliniques et pathologiques entre les patients du groupe 1, haute-copies H.pylori et le Groupe 2 avec bas-copies H.pylori est reported.Table 2 L'association entre clinicopathologiques et copies H.Pylori

H.pylori-haut titre
(41cases,%)
H.pylori faible titre
(41cases,%)
valeur P
site de tumeur
0,013
Upper
21 (51,2)
10 (24,4)
Moyen ou Bas
20 (48,8)
31 (75,6)
ganglionnaire métastase
0,014
N0
20 (48,8)
10 (24,4)
N1
13 (31,7)
16 (39,0)
N2
6 (14,6)
8 (19,5)
N3
2 (4.9)
7 (17.1)
CEA
0,269
< 5 ug /L
34 (82,9)
30 (73,2)
≥ 5 ug /L
3 (7.3)
6 (14.6)
Parmi les patients du groupe avec haut-copies H.pylori, néoplasmes étaient plus souvent situés dans l'estomac supérieur (51,2% vs 18%), et une classification pN plus faible (N0 /N1) a été observé alors qu'un plus avancé classification pn (N0 /N1) a été observée dans le groupe à faible copies H.pylori. Cependant, aucune différence statistiquement significative n'a été observée dans les concentrations de CEA entre les deux groupes (tableau 2).
Infection à H. pylori et la survie
L'impact potentiel de l'état H.pylori sur la survie à long terme des patients a été étudiée par analyse univariée et multivariée. l'analyse de la survie globale a été réalisée chez 157 patients ayant subi une chirurgie. À la fin du suivi, 75 patients étaient encore en vie, 82 patients étaient décédés de la tumeur, et 1 patiente étaient morts d'autres causes; le taux de survie à 5 ans liée au cancer dans toute la série était de 48,4%.
analyses unidimensionnelles ont montré une association entre la survie globale et différencier histologique, la chirurgie, le stade UICC et la concentration de CA-199 (données non présentées). Cependant, une telle association ne peut être trouvée entre H.pylori état de l'infection et la survie globale (p = 0,715) (Figure 2). Dans les analyses multivariées, différencier histologique, la chirurgie et le stade UICC étaient des facteurs pronostiques indépendants pour la survie globale. La concentration de CA-199 n'a pas été associée de façon significative la survie globale dans les analyses multivariées (données non présentées). L'effet de l'état H.pylori sur le pronostic a été observée dans tous les sous-groupes en fonction du stade UICC examiné; la différence n'a pas été jugée statistiquement significative (données non présentées), En outre, l'effet du statut H.pylori sur le pronostic ont été évalués dans tous les sous-groupes concernant les différents sites tumoraux, la différence n'a pas été jugée statistiquement significative ( fichiers supplémentaires 1 et 2). Une analyse plus poussée pour les patients qui étaient positifs pour H. pylori ont été réalisées; Kaplan Meier analyse de survie a montré que la survie globale chez les patients avec des copies de haute infection H.pylori était meilleure que chez les patients avec de faibles copies, mais la différence n'a pas été statistiquement significative (P = 0. 068) (figure 3) L'association entre copies H.Pylori et le pronostic ont été évalués dans tous les égards des sous-groupes pour les différents sites tumoraux, Il n'y a pas de signification statistique (fichiers supplémentaires 3 et 4). Figure 2 Association entre la survie globale et H.pylori infection Statut de 157 patients atteints de cancer gastrique (p = 0,715).
Figure 3 Association entre la survie globale et le nombre de copies H.Pylori chez les patients qui étaient positifs pour H. pylori Relapse-Free analyse de survie de (P = 0. 068). a été réalisée chez 129 patients ayant subi une résection R0. À la fin du suivi, 73 patients étaient encore en vie, 56 patients étaient décédés de récidive de la tumeur ou de métastases à distance. L'impact potentiel de l'état H.pylori sur la survie sans récidive des patients a été étudiée par analyse univariée et multivariée.
Univariée analyse a montré une association entre la survie sans rechute et différencier histologique, site de la tumeur, la profondeur de l'invasion tumorale (stade pT), ganglionnaire métastases (stade pN). Cependant, une telle association ne peut être trouvée entre H.pylori état d'infection (p = 0,639) (figure 4), le nombre de copies H.Pylori, l'infection par H. pylori dans la survie des tissus et sans rechute non néoplasique. Dans les analyses multivariées, différencier histologique, site de la tumeur, la profondeur de l'invasion tumorale (stade pT), ganglionnaire métastases (stade pN) étaient des facteurs pronostiques indépendants pour la survie sans rechute. L'effet de l'état H.pylori sur le pronostic a été observée dans tous les sous-groupes en fonction du stade UICC examiné, la différence n'a pas été jugée statistiquement significative (données non présentées). Les données relatives à la survie globale des patients ayant subi une résection R0 étaient presque les mêmes que celles pour la survie sans rechute. différencier histologiques, site de la tumeur, la profondeur de l'invasion tumorale (stade pT), ganglionnaire métastases (stade pN) étaient des facteurs pronostiques indépendants pour la survie globale (données non présentées). Figure 4 Association entre la survie sans rechute et de l'infection à H. pylori de 129 patients ayant subi une chirurgie curative (p = 0,639) Discussion de
. Parmi les nombreuses méthodes décrites ci-dessus, la plus prometteuse pour l'avenir est l'application de PCR en temps réel [26]. La nouvelle technique de PCR en temps réel est une percée dans le diagnostic de H.pylori, car elle permet non seulement une détection rapide et précise de H. pylori, mais aussi sa quantification [23]. Dans le procédé de PCR en temps réel, il existe de nombreux gènes pour sélectionner pour l'amplification et l'amorce de la paire d'ARNr 16S et 23S a montré une grande spécificité et une sensibilité [27]. Dans l'étude actuelle, nous avons choisi l'ARNr 16S pour l'amplification de PCR en temps réel; . Les résultats ont montré que 52,2% des 157 cancers gastriques étaient positifs pour l'infection à H. pylori, qui a approché les résultats d'autres études utilisant la même méthode [28]
Les principales conclusions de l'étude étaient les suivants: 1) H.pylori l'infection était plus élevé dans les tissus non-néoplasiques que dans le tissu tumoral; 2) l'infection par H. pylori était liée au site de la tumeur, N mise en scène, ainsi que le niveau du CEA; En outre, le site de la tumeur et N mise en scène était liée au nombre de copies H.pylori. Chez les patients très infectés, la mise en scène N avait un stade plus précoce (N0 /N1) et les sites de tumeur dans l'estomac supérieure ont été trouvés, alors que le niveau CEA était sans rapport avec le nombre de copies H.pylori; et 3) la survie globale et la survie sans récidive chez les patients ayant un statut H.pylori positif avaient pas de différence significative par rapport aux patients ayant un statut négatif H.pylori; et chez les patients positifs H.Pylori, le pronostic était meilleur dans ceux avec le nombre élevé de copies de H. pylori que dans ceux avec le numéro de copies inférieur, mais le résultat avait pas de différence statistique significative.
Nous avons enregistré une fréquence plus élevée de l'infection par H .Pylori dans un tissu non néoplasique que dans le tissu tumoral des patients atteints d'un cancer gastrique. L'explication possible pourrait être que 1) une fois une tumeur a été soulevée dans l'endroit où le H.pylori a vécu, la tumeur allait changer le microenvironnement, qui ne serait pas approprié pour le H.pylori pour survivre dans toute plus.2) Certains chercheurs [ ,,,0],29] a indiqué que la H.pylori serait engloutie par la granulocytes neutrophiles, ce qui est abondant dans le tissu néoplasique. La réponse immunitaire de l'hôte à la tumeur augmente l'induction de l'apoptose par les bactéries.
Les caractéristiques clinicopathologiques des patients H. pylori-positifs ont été comparés à ceux du groupe de patients ayant un statut négatif H.pylori. L'analyse statistique a révélé que l'emplacement de l'estomac supérieure était plus fréquente chez les patients H. pylori-positifs; parmi les patients qui étaient positifs pour H. pylori, les copies de H. pylori dans un endroit haut de l'estomac étaient également plus élevés que dans l'estomac moyen ou inférieur. En général, l'estomac, en particulier le pylore gastrique est l'endroit le plus approprié pour H.pylori de croître. Le diagnostic de l'infection et la quantité H.pylori a été réalisée en utilisant un tissu non néoplasique à une distance d'au moins 5 cm à partir de la tumeur. Par conséquent, les sites d'échantillonnage étaient différents selon le site de la tumeur, par exemple, le cancer de l'estomac supérieur peuvent prélever les tissus non-néoplasique de l'estomac moyen ou inférieur, et le milieu ou le cancer de l'estomac inférieur peuvent déguster de la partie supérieure. En outre, un échantillonnage de points de antrum ou corpus peut entraîner des erreurs d'échantillonnage de diagnostic et d'évaluation du montant H.pylori H.pylori, donc nous pensons que ce résultat ne soit pas en mesure de conclure que l'infection à H. pylori était liée au site de la tumeur.
Nous avons également constaté un taux plus élevé de plus avancé stade pN chez les patients H. pylori-négatifs; en outre, la mise en scène pN était liée au nombre de copies H.pylori. Dans les hautes-copies patients, la N mise en scène a un stade plus précoce (N0 /N1). Théoriquement, l'invasion tumorale et des métastases associées aux métalloprotéases matricielles (MMP) sécrétées par la cellule cancéreuse gastrique, ce qui peut dégrader la matrice extracellulaire, de changer la structure de la membrane basale vasculaire et de promouvoir l'invasion des cellules cancéreuses et les métastases [30, 31]. MMP-2 est l'une des MMPs les plus importants dans le processus d'invasion tumorale et les métastases. Monig et al. [32] ont rapporté que la MMP-2 expression a une forte corrélation avec les progrès de la métastase ganglionnaire du cancer gastrique. Une fois H.pylori a infecté l'estomac, il peut stimuler la sécrétion de MMP-1, MMP-2, MMP-3 et TIMP-3 à partir de cellules de cancer gastrique [33], et enfin inciter et accélérer l'invasion de progression et la métastase des cancer de l'estomac. Les données de Toutefois, l'étude a montré une conclusion inverse, nous suggérons que l'infection à H. pylori est un facteur bénéfique pour ganglionnaire métastase. de la présente étude indiquent que l'infection par H. pylori a été liée au niveau du CEA dans le sérum de l'hôte. À notre connaissance, il est la première fois de déclarer une telle influence de ce facteur sur le niveau du CEA. Les patients ayant un statut H.pylori positif avaient un niveau faible par rapport à ceux qui étaient négatifs, mais le niveau du CEA était sans rapport avec le nombre de copies H.pylori; une explication possible était des réponses auto-immunes induites par H.pylori ont inhibé la croissance des cellules cancéreuses [34], et enfin diminué le niveau du CEA dans le sérum de l'hôte.
Datant de 1995, des études de Taiwan [35, 36], à notre connaissance, a été le premier à signaler la relation entre H.pylori état de l'infection et les résultats des patients atteints de cancer gastrique, une analyse multivariée a montré que seul le stade TNM était le facteur pronostique indépendant; Toutefois, la définition du statut de H. pylori a été réalisée seulement par sérologie, le nombre de patients était petite, et le suivi a été plutôt courte. En 2006, une étude prospective a identifié le statut H.pylori comme un facteur pronostique indépendant [21]. Examen de la culture, l'analyse histologique et test sérologiques ont été effectuées pour définir le statut de H. pylori. Le meilleur pronostic noté chez les patients atteints d'une infection à H. pylori a été expliqué sur la base d'une réponse immunitaire améliorée contre la tumeur [21]. Il a également été supposé que parce que les composants H.Pylori simulent des récepteurs spécifiques ou des molécules de surface des cellules épithéliales gastriques, des auto-anticorps peuvent induire une réaction croisée contre des cellules de cancer gastrique [34]. Cependant, plusieurs auteurs ont soulevé des doutes quant à la valeur pronostique réel de l'état H.pylori, suggérant que H.pylori la négativité peut être simplement liée à la progression tumorale plus avancé [37, 38]. Une étude récente en Italie [22] a révélé que les patients ayant un statut négatif H.pylori semble avoir un mauvais pronostic, mais les méthodes de cette étude est également douteux, car ils ont utilisé la combinaison des méthodes de PCR pour vacA et sérologiques analyse pour définir le statut de l'infection à H. pylori. Théoriquement, la PCR peut détecter une seule copie de l'ADN cible lorsqu'il est testé dans l'eau, mais la plupart des études ont montré que la sensibilité PCR standard et l'efficacité ne sont pas si exacte [23, 39], et l'analyse sérologique ne peut pas distinguer si le patient a un une infection actuelle ou une infection par le passé [23, 40]; les deux méthodes contribueront en partie à un faux négatif.
Nous avons montré que le stade UICC, différencier histologique et la chirurgie ont été les facteurs pronostiques indépendants de la survie globale de tous les patients atteints de cancer gastrique, et le site de la tumeur, différencier histologique, la profondeur de l'invasion tumorale, des ganglions lymphatiques métastases étaient les facteurs pronostiques indépendants de la survie sans rechute pour les patients ayant subi une chirurgie curative. Cependant, l'état de l'infection à H. pylori n'a pas été un facteur pronostique indépendant car il n'y avait pas de différence dans la survie de ces patients avec ou sans H.pylori, mais une analyse plus poussée des patients positifs H.Pylori a révélé que le pronostic de ceux avec des copies de haute nombre de H.pylori était mieux que ceux avec un faible nombre de copies, mais le résultat avait pas de différence statistique significative.
dans les expériences de vaccination [41] avec le choléra tétanique des êtres humains, H.Pylori infection agit comme un adjuvant pour l'induction d'une réponse des cellules B locale dans la muqueuse gastrique.

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