Közötti kapcsolat H. pylori fertőzés és a klinikopatológiai jellemzők és gyomorrák prognózisa katalógusa Abstract katalógusa alapon
célja annak értékelése volt a kapcsolat a H. pylori és klinikopatológiai jellemzők és gyomorrák prognózisa kvantitatív kimutatására a H. pylori .
módszerek katalógusa 157 beteget vontak be, minden beteg volt a rekord a klinikopatológiai paraméterek. Példányok beleértve a tumor és a nem neoplasztikus detektáltuk a H. pylori által Real-Time PCR és elemeztük klinikai adatok visszamenőleg. Változók függetlenül befolyásoló prognózist vizsgáltuk útján többváltozós analízis felhasználásával a Cox-féle arányos kockázati modell.
Eredménye
H.pylori fertőzés nagyobb volt a nem neopláziás szövetek, mint a tumorszövetben (p < 0,05), a H. pylori fertőzés és másolatain voltak kapcsolatosak, hogy a tumor helyére és az N stádium (p < 0,05). A teljes túlélés (OS) minden 157 beteg nincs összefüggés a H. pylori fertőzés állapot (p = 0,715). Ami a beteg átesett kuratív műtét, relapszus-mentes túlélés (RFS) nincs összefüggés a H. pylori fertőzés állapot (p = 0,639). Között a H. pylori pozitív betegek, az operációs rendszer és RFS a felsőfokú másolatok hosszabbak voltak a betegek alacsony kópia, de nem volt statisztikailag jelentős különbséget. Katalógusa Következtetések katalógusa pylori fertőzés állapotáról és annak másolatai voltak kapcsolatban N stádium. Az operációs rendszer és a RFS betegeknél pozitív H. pylori status nincs jelentős különbség a negatív betegeknél a H. pylori státuszt. Katalógusa Háttér katalógusa gyomorrák a második leggyakoribb daganatos halálok, de az előfordulási csökkent drámaian néhány fejlett országokban az elmúlt évtizedekben [1], ilyen betegségben szenvedő betegeknél általában a rossz kilátások [2]. Még azután is, potenciálisan kuratív műtét, több mint a fele a betegek tumor kiújulásának. Nyirokcsomó-érintettség, mélysége invázió, az életkor és a tumor helyét azonosították a legjelentősebb klinikopatológiai prognosztikai faktorok [3, 4]. Azonban NCCN Clinical Practice Guideline Gyomorrák azt sugallja, hogy gyomorrákos betegeknél kell Helicobacter pylori (H. pylori), hogy csökkentse a kiújulás kockázata, amely definíció szerint osztály bizonyítékok [5].
Pylori egy Gram -kizáró mikroaerofil spirális baktérium, először javasolta, hogy vonják be a gyomorrák által felfedezője Marshall 1983-ban [6]. 1994-ben a Nemzetközi Ügynökség Rákkutató (IARC) besorolni H. pylori egy határozott Classi rákkeltő [7, 8]. Ezt követően számos tanulmány végeztek, beleértve az epidemiológiai vizsgálatok [9], kísérleti vizsgálatok [10], az állatok kísérleti adatok [11, 12], eset-kontroll klinikai vizsgálatok [13, 14]. A legtöbb ilyen vizsgálatok megerősítették azt a tényt, hogy a H. pylori az a fő oka a gyomor adenokarcinóma. Ugyanakkor ebből a szempontból is ellentmondásos és megbízhatóbb adatokra van szükség. Hogyan pylori fertőzés vezet gyomorrák még nem teljesen tiszta, mint a különböző patogén tényezők hatnak különböző szakaszaiban, mint például a virulencia faktorok [15], a DNS-károsodás, host faktorok [16, 17] és a COX-2 [ ,,,0],18]. Az előfordulási gyomorrák egy többtényezős és többlépcsős folyamat.
Jelenleg nincs meggyőző adatok közötti kapcsolat H. pylori fertőzés állapotáról vagy másolatok és a klinikopatológiai jellemzők. Különben is, a prognózis különbségek betegek túlélése, akik pozitív H. pylori szemben azokkal, akik negatív továbbra is ismeretlen. Egy változó arányban a gyomor rákos betegek, H.pylori fertőzés nem észlelhető és eltérő klinikai és patológiai jellemzői leírták Ebben az alcsoportban [19, 20]. Továbbá egy nemrégiben német tanulmány bizonyítékot szolgáltatott jobb kórjóslatát H. pylori fertőzés képest negatív esetekben [21], valamint egy olasz tanulmány kimutatta, hogy a negatív H. pylori státuszt rossz prognózissal társul a gyomorrákos betegeknél [22] . Ahhoz azonban, hogy tudomásunk szerint ezek klinikailag releváns megállapításokat még nem érvényesített nagy tapasztalatokat más központokban. A legtöbb ilyen tanulmányok alkalmazott szerológiai elemzés, mint az egyetlen módja, hogy értékelje a H. pylori állapot, néhány közülük még hozzá a molekula módszer PCR; így az említett vizsgálatok eredményei aligha meggyőző. Tény, hogy sok fajta előírt módok detektálására H. pylori, beleértve a kultúrát, kórszövettani diagnózis, ureáz teszt molekula módszer, szerológiai analízis és UBT, de csak a kultúra, Real-Time PCR és UBT nagyfokú érzékenység és specificitása [23].
a jelenlegi tanulmányban alkalmazott módszer Real-Time PCR kimutatására pylori fertőzés állapotáról és annak másolatait, és amelynek célja, hogy vizsgálja meg a lehetséges hatását a H. pylori státuszt a klinikopatológiai jellemzők A gyomorrák átesett betegek műtét és követtünk jelentős ideig, hogy értékelje különbségek visszaesés túlélés és a teljes túlélés. katalógusa betegek és módszerek
betegek katalógusa A vizsgálati populáció 157 egymást követő beteg (107 férfi és 50 nő) tervezett sebészet 2002. január 1. és 2006. december 31-Szun Jat-szen Egyetem Rákkutató Központ, Guangzhou, Kína. A medián életkor a betegek 57,2 y (tartomány: 27-78 év), minden bevont betegek ebben a vizsgálatban résztvevő szövettanilag igazolt diagnózis elsődleges gyomorrák, hogy megerősítették kórosan műtét után. Átesett betegek nem-reszekciós műtét, és azok a Siewert I-es típusú cardia adenocarcinoma kizártuk a vizsgálatból, a betegek, akiknek a H. pylori felszámolása terápia vagy kezelés antibiotikummal, bizmut-tartalmú vegyületek, H2-receptor blokkolók vagy proton-pumpa inhibitorok 4 héten belül is kizárták volna a vizsgálatból. A sebészeti beavatkozás részösszeg vagy teljes gastrectomia minden betegnél. A szabványosított technikát alkalmaztunk a sebészi eltávolítását és nyirokcsomó-eltávolítás, amit a leírásban máshol [3]. Kor, nem, a műtét típusa, a tumor helyen, TNM-beosztása, kemoterápia, a minta hossza, a daganat méretét, és a tumor differenciálódásának, feljegyeztük minden beteg esetében egy adatbázisban. Tumor hosszát és szélességét a friss egyedeket által rögzített patológusok. pTNM besorolás követte a kritériumoknak a 6. kiadás a UICC [24]. Minden beteg átesett bármilyen típusú kemoterápia volt az 5-FU-alapú kezelést, és az alapvető rend volt FOLFOX6 vagy XELOX. Minden kísérleti kutatások, hogy a jelentések a kézirat kapott tájékoztatáson alapuló beleegyezését az alanyok a vizsgálat és már etikailag végzett jóváhagyásával megfelelő etikai bizottság Szun Jat-szen Egyetem Rákkutató Központ. Katalógusa daganatos szövetet és nem daganatos szövetet minden beteg gyűjtöttünk a reszekált próbadarabból a műtőben 30 percen belül eltávolítása után a gyomrot. Nem daganatos szövetet eltávolítjuk a normál gasztrikus szövetet a parttól legalább 5 cm-re a daganat. Amikor daganata részt az egész antrum, nem daganatos nyálkahártya lekerült a középső vagy a felső harmadában a gyomorban. A mintákat azonnal lefagyasztottuk folyékony nitrogénben, feldolgozott, kódolt, és -80 ° C-on egy szövetben bank található a laboratórium tudományos kutatási részleg. Katalógusa DNS kivonása és Real-Time PCR H. pylori katalógusa mind a tumorszövet és nem daganatos szövet nyert valamennyi beteg be a vizsgálatba kivettük az szöveti bank. DNS-t extraháltunk 50 mg szilárd szövet (mind tumor, mind nem-neoplasitic) segítségével a QIAamp DNS széklet MINIKIT (Qiagen). Annak érdekében, hogy növelje a hozamot tisztított DNS-t, a teljes felülúszót (500 pl) használtuk a további DNS-tisztítási hozzáadása után a InhibitEX tabletta, alkalmazkodva a következő lépéseket a Qiagen protokollt a megváltozott minta összeget. Tól H. pylori izolátumok, DNS-t extraháltunk segítségével a QIAamp DNS MINIKIT protokoll szerint izolálására genomi DNS a bakteriális tenyészeteket (Qiagen).
GenBank keresték szekvenciákat kódoló gének 16S rRNS H. pylori. A közzétett szekvenciák illesztését segítségével ClustalW a http: //www. Ebi. Ac. Uk /ClustalW /, és a primereket és próbákat terveztünk segítségével Primer Express szoftver (Perkin-Elmer /Applied Biosystems, Foster City Kalifornia.), valamint a LightCycler szonda tervező szoftver (Roche Diagnostics, Mannheim, Németország). BLAST keresés végeztünk, hogy ellenőrizze a specificitását DNS-szekvenciák a primerek és próbák a http: //www. NCBI. NLM. NIH. Gov /BLAST /.
A vizsgálat tartalmazott két PCR primereket (Daan Gene Co., Ltd. a Szun Jat-szen Egyetem, Guangzhou, Kína): primer1 F (5'-GTC AAG AGA TCA GCC TAT GTC -3) és primer2 R (5'CCG TGT CTC AGT TCC AGT GT- 3 '), amelynek célja, hogy megsokszorozzunk egy 118 bázispár hosszúságú, 16S rDNS együtt egy szondát, Tensensor (5'-LCRed705-GCA TGT GGT TTA ATT CGA AGA TAC ACphos- 3'), jelölt a fluorofor LC Red 705 (Daan Gene Co., Ltd. a Szun Jat-szen Egyetemen, Guangzhou, Kína).
Mindegyik Real-Time PCR-t végeztünk a végtérfogat 50 pl tartalmazó puffer 10 ul (10 mM Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM KCI és 1,5 mM MgCI
2), 2 mikroliter cDNS, 1 nl minden egyes láncindító (F 10 pmol /