Relación entre la infección por H. pylori y las características clinicopatológicas y el pronóstico del cáncer gástrico

Relación entre la infección por H. pylori y las características clinicopatológicas y el pronóstico del cáncer gástrico
Resumen Antecedentes

El objetivo fue evaluar la relación entre H.Pylori y las características clínico y el pronóstico del cáncer gástrico mediante la detección cuantitativa de H.Pylori .
Métodos
se inscribieron 157 pacientes, todos los pacientes tenían un registro de parámetros clínico. Las muestras que incluye el tumor y se detectaron no neoplásico para H.Pylori por PCR en tiempo real y se analizaron retrospectivamente los datos clínicos. . Las variables que afectan de forma independiente el pronóstico se investigaron mediante análisis multivariante utilizando el modelo de riesgos proporcionales de Cox
Resultados
infección por H. pylori fue mayor en el tejido no neoplásico que el tejido tumoral (p < 0,05), H.Pylori infección y sus copias estaban relacionados con el sitio del tumor y el estadio N (p < 0,05). La supervivencia global (SG) en los 157 pacientes no tiene correlación con el estado de infección por H. pylori (p = 0,715). En cuanto a los pacientes que se sometieron a una cirugía curativa, la supervivencia libre de recaída (RFS) no tiene correlación con el estado de infección por H. pylori (p = 0,639). Entre los pacientes positivos H.Pylori, OS y RFS de los que tienen copias más altos eran más largos que en los pacientes con copias bajos, pero no hubo diferencia estadística significativa.
Conclusiones
estado de infección por H. pylori y sus copias se relacionaron a N puesta en escena. El sistema operativo y RFS en pacientes con estado H.Pylori positivo tiene ninguna diferencia significativa entre los pacientes con estado negativo H.Pylori.
Antecedentes
El cáncer gástrico es la segunda causa más común de muerte por cáncer, aunque la incidencia ha disminuido espectacularmente en algunos países desarrollados en las últimas décadas [1], los pacientes con esta enfermedad suelen tener un pronóstico desalentador [2]. Incluso después de la cirugía potencialmente curativa, más de la mitad de los pacientes tienen recurrencia del tumor. compromiso de los ganglios linfáticos, profundidad de la invasión, la edad y la localización del tumor han sido identificados como los factores de pronóstico clínico-patológicos más significativos [3, 4]. Sin embargo, la NCCN Guía de Práctica Clínica de Cáncer Gástrico sugiere que los pacientes con cáncer gástrico deben erradicar Helicobacter Pylori (H.Pylori) para reducir el riesgo de recurrencia, que se definió como una evidencia de clase [5].
H.Pylori, una bacteria Gram bacteria espiral microaerofılico -negativo, fue propuesto por primera vez que se asocia con el cáncer gástrico por la co-descubridor Marshall en 1983 [6]. En 1994, la Agencia Internacional para la Investigación sobre el Cáncer (IARC) clasificó H.Pylori como un carcinógeno CLASSI definitiva [7, 8]. Después de eso, una gran cantidad de estudios se han llevado a cabo, incluidas las investigaciones epidemiológicas [9], los estudios experimentales [10], los datos experimentales en animales [11, 12], los ensayos clínicos de casos y controles [13, 14]. La mayor parte de estos estudios fortalecieron el hecho de que H.Pylori es la principal causa de adenocarcinoma gástrico. Sin embargo, este punto de vista sigue siendo controvertido y más se requieren datos fiables. ¿Cómo infección por H. pylori conduce al cáncer gástrico todavía no está completamente claro, como una variedad de factores patógenos puede actuar en diferentes etapas, tales como factores de virulencia [15], el daño del ADN, factores del huésped [16, 17] y la COX-2 [ ,,,0],18]. La incidencia del cáncer gástrico es un multi-factorial y proceso de múltiples pasos.
En la actualidad, no hay datos convincentes para la relación entre el estado o copias infección por H. pylori y las características clínico-patológicas. Además, las diferencias en el pronóstico de supervivencia de los pacientes que son positivos para H.Pylori en comparación con aquellos que son negativos sigue siendo desconocido. En una proporción variable de pacientes con cáncer gástrico, infección por H. pylori no se puede detectar y las características clínicas y patológicas distintas han sido descritos en este subgrupo [19, 20]. Por otra parte, un reciente estudio alemán proporcionó evidencia de un mejor pronóstico en pacientes con infección por H. pylori en comparación con los casos negativos [21] y un estudio italiano mostró que el estado negativo H.Pylori se asocia con un mal pronóstico en pacientes con cáncer gástrico [22] . Sin embargo, a nuestro entender, estos resultados clínicamente relevantes han sido todavía no se han validado en grandes experiencias de otros centros. La mayoría de estos estudios se utilizó el análisis serológico como el único método para evaluar el estado H.Pylori, algunos de ellos incluso añaden el método de PCR molécula; por lo que los resultados de estos estudios son poco convincente. De hecho, hay muchos tipos de procesos previstos para detectar la H.Pylori, incluyendo la cultura, el diagnóstico histopatológico, prueba de ureasa, método de molécula, análisis serológicos y UBT, pero sólo la cultura, PCR en tiempo real y UBT tienen un alto grado de sensibilidad y especificidad [23].
en el presente estudio, se utilizó el método de PCR en tiempo real para detectar H.Pylori estado de infección y sus copias, y tuvo como objetivo investigar el impacto potencial de la condición de H.Pylori de las características clinicopatológicas de cáncer gástrico de los pacientes que se sometieron a cirugía y fueron seguidos durante un período significativo de tiempo para evaluar las diferencias en la supervivencia libre de recaída y la supervivencia global.
pacientes y métodos pacientes
El México La población del estudio consistió en 157 consecutiva pacientes (107 hombres y 50 mujeres) programados para cirugía de enero 1, 2002 hasta diciembre 31, 2006 at Sun Yat-Sen Universidad del Centro del cáncer, Guangzhou, china. La edad media de los pacientes fue de 57,2 (rango: 27-78 y), Todos los pacientes incluidos en este estudio tenían un diagnóstico confirmado histológicamente de cáncer gástrico primario que fue confirmado patológicamente después de la cirugía. Los pacientes que se sometieron a cirugía de resección no, y los de tipo I Siewert cardias adenocarcinoma fueron excluidos del estudio, los pacientes con el tratamiento de erradicación del H. pylori o tratamiento con antibióticos, compuestos que contienen bismuto, bloqueadores de los receptores H2 o inhibidores de la bomba de protones dentro de las 4 semanas también habían sido excluidos del estudio. La cirugía consistió en gastrectomía total o subtotal en todos los pacientes. Una técnica estandarizada se utilizó para la resección quirúrgica y la linfadenectomía, como se describe en otra parte [3]. Edad, sexo, tipo de cirugía, la localización del tumor, el estadio TNM, la quimioterapia, la muestra de longitud, el tamaño del tumor, y la diferenciación del tumor, se registraron para cada paciente en una base de datos. longitud del tumor y la anchura de las muestras frescas fueron registrados por los patólogos. pTNM clasificación seguido los criterios de la 6ª edición de la UICC [24]. Todos los pacientes que se sometieron a cualquier tipo de quimioterapia estaban en el régimen basada en 5-FU, y el régimen básico fue FOLFOX6 o XELOX. Toda la investigación experimental que se reporta en el manuscrito han obtenido el consentimiento informado de los sujetos del estudio y ha realizado éticamente con la aprobación de un comité de ética apropiados en Sun Yat-sen Universidad del Centro del Cáncer. El tejido tumoral Opiniones y no neoplásico tejidos de todos los pacientes se recogió de la pieza resecada en la sala de operaciones dentro de los 30 minutos después de la eliminación del estómago. tejido no neoplásico se eliminó del tejido gástrica normal a una distancia de al menos 5 cm de la tumor. Cuando neoplasia implicado todo el antro, mucosa no neoplásica fue retirado de la tercera media o superior del estómago. Las muestras se congelaron inmediatamente en nitrógeno líquido, procesadas, codificadas y almacenadas a -80 ° C en un banco de tejidos ubicada en el laboratorio del departamento de investigación científica.
Extracción de ADN y PCR en tiempo real para H.Pylori
tanto el tejido tumoral y el tejido no neoplásico obtenido a partir de todos los pacientes incluidos en el estudio fue recuperado del banco de tejidos. Se extrajo el ADN a partir de 50 mg de tejido sólido (ambos tumor y no neoplasitic) utilizando el minikit de ADN en heces QIAamp (Qiagen). Con el fin de aumentar el rendimiento de ADN purificado, se utilizó todo el sobrenadante (500 l) para la purificación adicional de ADN después de la adición de la tableta Inhibitex, la adaptación de las siguientes etapas del protocolo Qiagen a esta cantidad de muestra alterada. De H.Pylori aísla, el ADN se extrajo usando el minikit de ADN QIAamp de acuerdo con el protocolo para el aislamiento de ADN genómico a partir de cultivos bacterianos (Qiagen).
GenBank se buscaron secuencias de los genes que codifican 16S rRNA de H.Pylori. Las secuencias publicadas fueron alineados utilizando CLUSTALW http:... //Www EBI ac uk /ClustalW /, y los cebadores y sondas fueron diseñados utilizando el software Primer Express (Perkin-Elmer /Applied Biosystems, Foster City , Calif.) y el software de diseño de la sonda LightCycler (Roche Diagnostics, Mannheim, Alemania). Una explosión de búsqueda se realizó para comprobar la especificidad de las secuencias de ADN de los cebadores y sondas http:.. //Www NCBI NLM NIH gov /BLAST /Francia El ensayo contenía dos PCR... cebadores (Daan génica Co., Ltd. de la Universidad Sun Yat-sen, Guangzhou, china): primer1 F (5'-AAG GCT AGA TCA GCC TAT GTC -3 ') y primer2 R (5'-CCG TGT CTC AGT TCC AGT GT- 3 ') diseñados para amplificar un fragmento de par 118 de base de 16S rDNA, junto con una sonda, Tensensor (5'-LCRed705-GCA TGT GGT TTA ATT CGA AGA TAC ACphos- 3'), marcado con el fluoróforo LC Red 705 (Daan génica Co., Ltd. de Sun Yat-sen Universidad, Guangzhou, china).
Cada PCR en tiempo real se realizó en un volumen final de 50 l que contiene un tampón de 10 l (10 mM Tris-HCl (pH 8,0), KCl 50 mM y MgCl 1,5 mM 2), 2 l de ADNc, 1 l de cada cebador (F 10 pmol /l, R 10 pmol /l), 1 l de cada desoxinucleótido (10 mM), 1 l de Taq polimerasa (3U /l) (Daan génica Co., Ltd. de Sun Yat-sen Universidad, Guangzhou, china) y 1 l de sonda (Daan génica Co., Ltd. de la Universidad Sun Yat-sen , Guangzhou, China). Cada mezcla de reacción se amplificó como sigue: desnaturalización a 93 ° C durante 3 minutos seguido por 40 ciclos de desnaturalización a 93 ° C durante 30 segundos; recocido a 55 ° C durante 45 segundos; y extensión a 72 ° C durante 40 segundos. Las amplificaciones se llevaron a cabo con un motor de ADN ABI 7500 (Applied Biosystems Inc, CA, EE.UU.). H. pylori curvas de amplificación estándar usado para hacer el gráfico de regresión lineal de la curva estándar, y luego cambian los valores de Ct en el número de copias de H. pylori.
Seguimiento
Todos los pacientes, después de salir del hospital, entraron en una seguimiento de programa de acuerdo con el protocolo estándar [25]. Dentro de los primeros 2 años de la cirugía, un seguimiento cada 3 meses consistieron en un examen clínico, exámenes de rutina de sangre, evaluación de la concentración de marcadores tumorales, y la ecografía abdominal o tomografía computarizada; endoscopia se realiza cada 6 meses durante los primeros 2 años de la cirugía. Para los próximos 3 años, los pacientes fueron seguidos cada 6 meses y se les realizó una endoscopia cada 12 meses. En la recaída (definida como recurrencia local o metástasis en sitios distantes), todos los pacientes se realizaron plenamente para detectar la enfermedad en otros sitios. La supervivencia se mide a partir de la fecha de la resección del tumor hasta la muerte o hasta la última fecha en que el paciente era conocido por estar vivo. El seguimiento se cerró en diciembre de 2008. La mitad del período de seguimiento fue de 24,4 meses (rango, 0.2-81.8 meses) Análisis estadístico.
Casos fueron considerados positivos para H.Pylori cuando el 16S rRNA estaba presente en la amplificación de productos de PCR en tiempo real, ya sea en el tejido del tumor o el tejido no neoplásico, y los casos se definieron como positivas para H.Pylori en el tejido normal cuando el 16S rRNA estaba presente en la amplificación de productos de PCR en tiempo real en el tejido no neoplásico . Todos los pacientes se dividieron en dos grupos; Un grupo de 82 pacientes estaba compuesto por pacientes que fueron positivos para la infección por H. pylori, el Grupo B de 75 pacientes estaba compuesto por pacientes que tuvieron resultados negativos para la amplificación de productos de PCR en tiempo real. Además, el grupo A se dividió en dos grupos por la mediana (1338.5copies) copias número de H.Pylori, un grupo de la infección por HP con alta copias (número ≥1338.5 copia) de 41 casos, el otro grupo de la infección por HP con baja -Copias (< 1.338,5 número de copias). de 41 casos
El análisis estadístico se realizó utilizando el software SPSS para Windows (versión 13.0; SPSS Inc., Chicago, IL). La asociación entre el estado de la infección por H. pylori y las características clinicopatológicas se comparó con Pearson Chi-cuadrado (2-cola pruebas en cada uno). Se utilizó la prueba t de Student para muestras independientes para la comparación de la edad al momento de la cirugía. la supervivencia libre de recaída se calculó para todos los pacientes que no habían tenido una recaída local o distante y la supervivencia global se calculó para aquellos pacientes que estaban vivos, independientemente del estado de la recaída. La supervivencia a largo plazo se evaluó utilizando el método de Kaplan-Meier, considerando la muerte o la recaída de cáncer como el punto final; los pacientes que murieron por causas distintas de la recurrencia del tumor fueron considerados como censurados en el momento de la muerte. Se utilizó la prueba de log-rank para las comparaciones estadísticas entre factores. Las variables que afectan de forma independiente el pronóstico se investigaron mediante análisis multivariante utilizando el modelo de riesgos proporcionales de Cox. La puntuación estadística se utilizó para seleccionar las variables de entrada en el modelo. A nivel estadístico de P < 0,05 se utilizó para la inclusión de las variables pronósticas.
Resultados
H.Pylori Estado según lo determinado por PCR en tiempo real
detección cuantitativa de H.Pylori de 157 casos de pacientes con cáncer gástrico, incluyendo cada tumor y tejido no neoplásico; un total de 314 especímenes. 49 pacientes (31,2%) demostraron H.Pylori positivo en el tejido tumoral, y 69 pacientes (43,9%) demostraron positivo en el tejido no neoplásico (Figura 1). El positivo combinado tanto en tumor y el tejido no neoplásico es de 36 pacientes (22,9%), mientras que 82 (52,2%) pacientes se pueden detectar con H.Pylori en cualquiera de las muestras. El número de copias de H. pylori varía de 2,51 × 10 2 ~ 1,45 × 10 8. Figura 1 Detección de H.Pylori en tumor y el tejido no neoplásico (dos grupos de comparación P = 0,003). La asociación entre
Características clínico y H.Pylori Infección Estado
Tabla 1 muestra los resultados de una comparación de la características clínicas y patológicas entre los pacientes en el Grupo a y Grupo B. de los pacientes del Grupo a, los tumores se encuentran con mayor frecuencia en la parte superior del estómago (37,8% vs 18%), y una clasificación más avanzada pN (N2 /N3) fue mientras observa una clasificación más baja pN (N0 /N1) se observó en el grupo B. Antes de la cirugía, los pacientes que fueron negativos para H.Pylori tenían mayores concentraciones de antígeno carcinoembrionario (CEA) que aquellos que fueron positivos para H.Pylori. No se observaron diferencias estadísticamente significativas con respecto al género, la edad, el tamaño del tumor, localización del tumor, el tipo bruto, la profundidad de la invasión tumoral, metástasis a distancia, la etapa de la UICC, CA 19-9 y la expresión del gen P53 entre los dos groups.Table 1 Asociación entre las características clínico-patológicas y H.Pylori Estado
Características clinicopatológicas
Grupo A (positivo) gratis (n = 82) (%) guía empresas B (negativo) gratis (n = 75) (%)
valor del grupo P
Sexo Masculino
0,287

59 (72,0) 48
(64.0)
Mujer
23 (38,0)
27 (36,0)
Edad
0,128 Hotel < 57,2 años
45 (54,9) 32 (42,7
)
≥57.2 años
37 (45,1) guía 43 (57,8)
La localización tumoral
0.040
superior
31 (37,8)
18 (24,0)
media o baja
51 (62,2)
57 (76,0)
El tamaño del tumor (media ± DE)
5,64 ± 2,82 5,84 ± 2,99

0,671
tipo bruto
0.816
GC temprana I
1 (1.2)
1 (1.3)
temprana CG III
10 (12.2) página 7 (9.3)
Borrmann I
15 (18.3) página 12 (16,0)
Borrmann II
37 (45,1)
32 (42,7)
Borrmann III página 11 (13,4)
15 (20,0)
Borrmann IV página 8 (9.8) página 8 (10,7)
histológico Diferenciar
0.236
Bueno
36 (43,9)
28 (37,3)
mal
35 (42,7) 31
celular (41.3)
mucosa /anillo de sello página 11 (13,4)
16 (21,3)
profundidad de la invasión tumoral
0,749
T1
4 (4,9) página 2 (2.7)
T2 página 9 (11.0) página 9 (12,0)
T3
58 (70,7)
54 (72,0 )
T4 página 11 (13,4)
10 (13,3)
metástasis en nódulos linfáticos
0.039
N0
30 (36,6)
16 (21,3)
N1
29 (35,4)
29 (38,7)
N2 página 14 (17,1) página 19 (25,3)
N3 página 9 (11.0) página 11 ( 14.7)
Las metástasis a distancia M0
0,822

71 (86,6)
64 (84,0)
M1 página 11 (13,4) página 11 (16,0)
UICC etapa
0,124
I
10 (12.2) página 6 (8,0)
II
20 (24,4) página 13 (17,3) 32
III
(39.0)
32 (42,7)
IV
20 (24,4)
24 (32,0)
cirugía curativa
0.943

65 (79,8)
62 (85.3)
paliativos
17 (20,7) página 11 (14,7)
marcador tumoral CEA

0,026 Hotel < 5 g /L
64 (11,0 ): perfil 51 (68,0)
≥5 mg /l página 9 (78,0): perfil 19 (25,3)
CA 19-9
0,346 Hotel < 30 mg /L
44 (53,7)
44 (58,7)
≥30 g /l página 12 (14,6)
18 (24,0)
P53
0,827
positivo página 9 ( 11.0) página 8 (10,7)
negativo
40 (48,8)
40 (53,3) Francia El Asociación entre características clínico y Copias H.pylori
Las tres características clínico-patológicos anteriormente citados, se asociaron con el estado se analizaron infección por H. pylori para ver si estaban asociados con las copias de H. pylori. En la Tabla 2, una comparación de las características clínicas y patológicas entre los pacientes del grupo 1, de alto copias H.Pylori y el Grupo 2 con bajas copias H.Pylori es reported.Table 2 La asociación entre características clínico y Copias de H. pylori

H.Pylori alta titulación gratis (41cases,%) guía empresas H.Pylori bajo el título
(41cases,%)
valor de p
La localización tumoral
0,013
superior
21 (51,2)
10 (24,4)
media o baja
20 (48,8) 31
metástasis (75,6)
ganglios linfáticos
0,014
N0
20 (48.8): perfil 10 (24,4)
N1 página 13 (31.7)
16 (39,0)
N2 página 6 (14,6) página 8 (19,5)
N3 página 2 (4.9) página 7 (17.1)
CEA
0,269 Hotel < 5 g /L
34 (82,9)
30 (73,2)
≥ 5 mg /L página 3 (7.3) página 6 (14,6)
de los pacientes en el grupo con altas copias H.Pylori, los tumores se encuentran con mayor frecuencia en la parte superior del estómago (51,2% vs 18%), y una clasificación más baja pN (N0 /N1) se observó, mientras que una más avanzada clasificación pN (N0 /N1) se observó en el grupo con bajo nivel de copias H.Pylori. Sin embargo, no se observaron diferencias estadísticamente significativas en las concentraciones de CEA entre los dos grupos (Tabla 2).
Infección por H. pylori y Supervivencia comentario El potencial impacto del estado H.Pylori en la supervivencia a largo plazo de los pacientes se investigó mediante análisis univariante y multivariante. El análisis global de supervivencia se realizó en 157 pacientes que se sometieron a cirugía. Al final del seguimiento, 75 pacientes seguían con vida, 82 pacientes habían muerto de tumor, y 1 paciente habían muerto por otras causas; la tasa de supervivencia a 5 años relacionada con el cáncer en toda la serie fue de 48,4%.
análisis univariados mostraron una asociación entre la supervivencia global y diferenciar histológico, la cirugía, la etapa de la UICC y la concentración de CA-199 (datos no mostrados). Sin embargo, esta asociación no se encuentra entre el estado de infección por H. pylori y la supervivencia global (p = 0,715) (Figura 2). En el análisis multivariado, se diferencian histológico, la cirugía y la etapa de la UICC fueron factores pronósticos independientes para la supervivencia global. La concentración de CA-199 no se asoció significativamente con la supervivencia global en los análisis multivariantes (datos no mostrados). El efecto del estado H.Pylori en el pronóstico se observó en todos los subgrupos de acuerdo con la etapa de la UICC examinado; no se encontró que la diferencia sea estadísticamente significativa (datos no mostrados), Además, el efecto del estado H.Pylori en el pronóstico se evaluaron en todos los subgrupos respecto a los diferentes sitios de tumor, no se encontró que la diferencia sea estadísticamente significativa ( Más archivos 1 y 2). Un análisis más detallado de los pacientes que fueron positivos para H.Pylori se realizaron; Kaplan Meier análisis de supervivencia demostró que la supervivencia global en pacientes con altos copias infección por H. pylori fue mejor que en los pacientes con copias bajos, pero la diferencia no fue estadísticamente significativa (p = 0. 068) (Figura 3.) La asociación entre copias de H. pylori y el pronóstico se evaluaron en todos los subgrupos lo que respecta a los diferentes sitios de tumor, no hay significación estadística (archivos adicionales 3 y 4). Figura 2 Asociación entre la supervivencia global y H.Pylori estado de infección de 157 pacientes con cáncer gástrico (p = 0,715).
Figura 3 Asociación entre la supervivencia global y el número de copias de H. pylori en pacientes que fueron positivos para H.Pylori El análisis de supervivencia libre de recaída (P = 0. 068).
se realizó en 129 pacientes que se sometieron a una resección R0. Al final del seguimiento, 73 pacientes seguían con vida, 56 pacientes habían muerto a causa de la recurrencia del tumor o metástasis a distancia. El impacto potencial de la condición de H.Pylori en la supervivencia libre de recaída de los pacientes se investigó mediante análisis univariante y multivariante.
Univariante análisis mostraron una asociación entre la supervivencia libre de recaída y diferenciar histológico, localización tumoral, la profundidad de la invasión tumoral (pT), la metástasis de los ganglios linfáticos (estadio pN). Sin embargo, esta asociación no se encuentra entre el estado de infección por H. pylori (p = 0,639) (Figura 4), el número de copias de H. pylori, infección por H. pylori en la supervivencia del tejido y libre de recaída no neoplásico. En el análisis multivariado, se diferencian histológico, localización tumoral, la profundidad de la invasión tumoral (pT), los ganglios linfáticos-metástasis (PN etapa) fueron factores pronósticos independientes para la supervivencia libre de recaída. El efecto del estado H.Pylori en el pronóstico se observó en todos los subgrupos de acuerdo con la etapa de la UICC examinado, no se encontró diferencia estadísticamente significativa (datos no mostrados). Los datos de supervivencia global de los pacientes que se sometieron a una resección R0 fueron casi los mismos que los de la supervivencia libre de recaída. Diferenciar histológico, localización tumoral, la profundidad de la invasión tumoral (pT), los ganglios linfáticos-metástasis (PN etapa) fueron factores pronósticos independientes para la supervivencia global (datos no mostrados). Figura 4 Asociación entre la supervivencia libre de recaída y la infección por H. pylori de 129 pacientes que se sometieron a cirugía curativa (p = 0,639).
Discusión Estar entre los numerosos métodos descritos anteriormente, los más prometedores para el futuro es la aplicación de PCR en tiempo real [26]. El nuevo tiempo real técnica de PCR es un gran avance en el diagnóstico de H.Pylori, ya que permite no sólo una detección rápida y precisa de H.Pylori, sino también su cuantificación [23]. En el método de PCR en tiempo real, hay muchos genes para seleccionar para la amplificación, y el par de cebadores de 16S rRNA y 23S rRNA mostraron una alta especificidad y sensibilidad [27]. En el presente estudio, hemos elegido el 16S rRNA para la amplificación de PCR en tiempo real; . Los resultados mostraron que el 52,2% de los 157 cáncer gástrico fueron positivos para la infección por H. pylori, que se acercó a los resultados de otros estudios utilizando el mismo método [28]
Las principales conclusiones de este estudio fueron: 1) H.Pylori infección fue mayor en el tejido no neoplásico que en el tejido tumoral; 2) infección por H. pylori se relaciona con el sitio del tumor, el estadio N, así como el nivel de CEA; Por otra parte, el sitio del tumor y el estadio N que está relacionada con el número de copias H.Pylori. En pacientes altamente infectados, la puesta en escena N tuvo una etapa anterior (N0 /N1) y sitios de tumor en parte superior del estómago se encontraron, mientras que el nivel de CEA no estaba relacionado con el número de copias H.Pylori; y 3) la supervivencia global y la supervivencia libre de recaída en pacientes con estado H.Pylori positivo tuvieron diferencias significativas entre los pacientes con estado negativo H.Pylori; y en pacientes H. pylori positivos, el pronóstico es mejor en aquellos con alto número de copias de H.Pylori que en aquellos con menor número de copias, pero el resultado hubo diferencia estadística significativa.
Se registró una mayor frecuencia de infección con H .Pylori en el tejido no neoplásico que en el tejido tumoral de los pacientes con cáncer gástrico. La posible explicación podría ser que 1) una vez que un tumor se presentó en el lugar donde vivía el H.Pylori, el tumor cambiaría el microambiente, lo que no sería adecuado para la H.Pylori para sobrevivir en cualquier más.2) Algunos eruditos [ ,,,0],29] señaló que la H.Pylori se envolvió por el de granulocitos neutrófilos, que es abundante en el tejido neoplásico. La respuesta inmune del huésped para el tumor aumenta la inducción de la apoptosis por las bacterias.
Las características clinicopatológicas de los pacientes H.Pylori-positivos fueron comparados con los del grupo de pacientes con estado negativo H.Pylori. El análisis estadístico reveló que la ubicación superior del estómago es más frecuente en pacientes H.Pylori-positivos; entre los pacientes que fueron positivos para H.Pylori, las copias de H.Pylori en la ubicación superior del estómago también fueron más altos que en el estómago media o baja. En general, el estómago, especialmente el píloro gástrico es el lugar más adecuado para H.Pylori crezca. El diagnóstico y la cantidad de infección por H. pylori se realizó a través del tejido no neoplásico a una distancia de al menos 5 cm de tumor. Por lo tanto, los sitios de muestreo fueron diferentes según la localización del tumor, por ejemplo, el cáncer de estómago que se pueden muestrear el tejido no neoplásico del estómago media o baja, y el cáncer de estómago media baja o pueden degustar desde la parte superior. Por otra parte, un muestreo de puntos de antro o cuerpo puede dar lugar a error de muestreo de diagnóstico y evaluación de la cantidad de H. pylori H. pylori, así que creo que este resultado no es capaz de concluir que la infección por H. pylori se relaciona con el sitio del tumor.
también encontramos una mayor tasa de etapa más avanzada en los pacientes pN H.Pylori-negativos; Además, pN puesta en escena estaba relacionada con el número de copias H.Pylori. En los pacientes de alto copias, la puesta en escena N tiene una fase anterior (N0 /N1). Teóricamente, la invasión tumoral y la metástasis asociados con las metaloproteinasas de la matriz (MMPs) secretadas por la célula de cáncer gástrico, lo que puede degradar la matriz extracelular, cambiar la estructura de la membrana basal vascular y promover la invasión de células del cáncer y la metástasis [30, 31]. MMP-2 es una de las MMPs más importantes en el proceso de invasión tumoral y metástasis. Monig et al. [32] informó de que la MMP-2 expresión tiene una fuerte correlación con el progreso de la metástasis de los ganglios linfáticos del cáncer gástrico. Una vez H.Pylori ha infectado el estómago, puede estimular la secreción de MMP-1, MMP-2, MMP-3 y TIMP-3 de células de cáncer gástrico [33], y, finalmente, provocar y acelerar la invasión y la metástasis de progreso cáncer gástrico. Sin embargo, el presente estudio mostró una tesis contraria, por lo que sugerimos que la infección por H. pylori es un factor beneficioso para la metástasis de los ganglios linfáticos.
Los datos de este estudio indicaron que infección por H. pylori se relaciona con el nivel de CEA en el suero del huésped. Para nuestro conocimiento, es la primera vez que reportar una influencia de este factor como en el nivel de CEA. Los pacientes con estado H.Pylori positivo tenían un nivel bajo en comparación con aquellos que fueron negativos, pero el nivel de CEA no estaba relacionado con el número de copias H.Pylori; una posible explicación era respuestas autoinmunes inducidas por H.Pylori inhibieron el crecimiento de células de cáncer [34], y finalmente se redujo el nivel de CEA en el suero del huésped.
, que data de 1995, los estudios de Taiwán [35, 36], Por lo que sabemos, fue el primero en informar de la relación entre el estado de infección por H. pylori y el resultado de los pacientes con cáncer gástrico, el análisis multivariado demostró que sólo el estadio TNM fue el factor pronóstico independiente; Sin embargo, la definición de la condición de H.Pylori se realizó sólo por serología, el número de pacientes fue pequeño, y el seguimiento fue más bien corto. En 2006, un estudio prospectivo identificado estado H.Pylori como un factor pronóstico independiente [21]. examen del cultivo, histológicas y de ensayo serológico se llevaron a cabo para definir el estado H.Pylori. El mejor pronóstico observado en pacientes con infección por H. pylori se explicó sobre la base de una respuesta inmune mejorada contra el tumor [21]. También se ha asumido que porque los componentes de H. pylori imitan receptores específicos o moléculas de superficie sobre las células epiteliales gástricas, auto-anticuerpos podrían inducir una reacción cruzada contra células de cáncer gástrico [34]. Sin embargo, varios autores han planteado dudas con respecto al valor pronóstico real del estado H.Pylori, lo que sugiere que H.Pylori negatividad puede ser simplemente relacionado con la progresión tumoral más avanzado [37, 38]. Un estudio reciente en Italia [22] reveló que los pacientes con estado negativo H.Pylori parecía tener un mal pronóstico, pero los métodos de este estudio también es dudoso, ya que utilizan la combinación de métodos de PCR para el análisis de vacA y serológica para definir la situación de infección por H. pylori. Teóricamente, la PCR puede detectar sólo una copia del ADN diana cuando se prueba en el agua, pero la mayoría de los estudios han demostrado que la sensibilidad de PCR estándar y eficacia no eran tan exacta [23, 39], y el análisis serológico no puede distinguir si el paciente está teniendo una infección actual o una infección en el pasado [23, 40]; ambos de los métodos contribuirá en parte a un falso negativo.
Hemos demostrado que la etapa de la UICC, diferenciar histológico y la cirugía fueron los factores pronósticos independientes de la supervivencia global de los pacientes con cáncer gástrico, y la localización del tumor, Diferenciar histológico, la profundidad de la invasión tumoral, metástasis en nódulos linfáticos fueron los factores pronósticos independientes de la supervivencia libre de recaída de los pacientes que se sometieron a cirugía curativa. Sin embargo, el estado de infección por H. pylori no era un factor pronóstico independiente ya que no había diferencia en la supervivencia de estos pacientes con o sin H.Pylori, pero un análisis más detallado de los pacientes H. pylori positivos reveló que el pronóstico de aquellos con altos copias número de H.Pylori era mejor que aquellos con bajo número de copias, pero el resultado hubo diferencia estadística significativa.
en experimentos de vacunación [41] con el toxoide de cólera en seres humanos, H. pylori infección actúa como un adyuvante para la inducción de una respuesta de células B local en la mucosa gástrica.

• P01.11. Amalaki Rasayana, una preparación ayurvédica: evaluar su efecto contra las úlceras gástricas experimentales en P01.11 rats
• modificaciones funcionales asociados con la organogénesis tracto gastrointestinal durante la metamorfosis en el fletán (Hippoglossus hippoglossus)