Aferentné signalizáciu z potkana žalúdka kyselinu napádal je potlačená a vylučovanie žalúdočnej kyseliny je umocnená lafutidine

Aferentné signalizácia z potkana žalúdka kyseliny napádal je inhibovaná a vylučovanie žalúdočnej kyseliny je zvýšená lafutidine
Abstract
pozadie
Lafutidine je histamín H antagonista 2 receptor, pred žalúdočným prostredím účinok, ktorý súvisí s jeho antisekrečnej aktivitu a schopnosť aktivovať senzorické neuróny v závislosti na mechanizmus obrany. Súčasná štúdia skúmala, či intragastrické podanie lafutidine (10 a 30 mg /kg) modifikuje predominanciou aferentné signalizácia, sliznice, žalúdočné kyslosť a vyprázdňovanie žalúdka po výzve žalúdočnej kyseliny.
Metódy
Dospelé potkany boli liečené vozidlá, lafutidine (10 až 30 mg /kg) alebo cimetidín (10 mg /kg) a po 30 minútach ich žalúdky boli vystavené exogénny HCI (0,25 M). Po dobu 2 hodín post-HCl, pH intragastrické, objem žalúdka, žalúdočné kyslosti a rozsah makroskopické žalúdočnej sliznice boli stanovené a aktivácia neurónov v mozgovom kmeni bola vizualizované c-Fos imunocytochemie.
Výsledky
výzvou žalúdočnej kyseliny zvýšenú expresiu c-Fos v nucleus tractus solitario ale spôsobila iba minimálne poškodenie žalúdočnej sliznice. Lafutidine znížil HCl vyvolanej expresie c-Fos v NTS a povýšil žalúdočné pH po žalúdočnej podaní prebytku kyseliny chlorovodíkovej. Ďalšia analýza ukázala, že žalúdočným účinok lafutidine proti prebytku kyseliny bol oneskorený a šiel súbežne s uľahčovaní vyprázdňovania žalúdka, merané nepriamo prostredníctvom zmien žalúdočných objemu a zníženie kyslosti žalúdka. H 2 receptor antagonista cimetidín majú podobné, ale slabšie účinok.
Záver
Tieto pozorovania naznačujú, že inhibuje lafutidine predominanciou aferentné signalizáciu o urážky žalúdočnej kyseliny, čo môže byť odrazom inhibičný účinok na žalúdočné bolesti indukovanej kyselinou , Schopnosť lafutidine pre zníženie kyslosti žalúdočného obsahu po vystavení nadmernej kyseliny chlorovodíkovej nemožno vysvetliť jeho antisekrečnej aktivitu, zdá sa však odráža riedenie a /alebo vyprázdňovanie kyseliny zaťaženie do dvanástnika. Tento profil opatrenia kladie dôraz na myšlienku, že antagonisti H 2 receptora môžu chrániť žalúdočnej sliznici z kyseliny zranenia nezávisle na ich schopnosti potlačovať sekréciu žalúdočnej kyseliny.
Pozadie
expozície žalúdočnej sliznici potkanov pri vedomí do prebytku HCI (0,25 M) je signalizovaná prostredníctvom predominanciou prívodov, na jadro tractus solitario (NTS) v mozgovom kmeni, kde je možné neurónové aktivácia zviditeľnené c-fos mRNA in situ hybridizácia a c-Fos imunocytochémia [1, 2]. Analýza správanie reakciou na výzvu žalúdočnej kyseliny naznačuje, že vagové aferentné neuróny hrajú dôležitú úlohu v nocicepcia žalúdočnej kyseliny [3]. Predominanciou aferentné signalizácia výzvou žalúdočnej kyseliny je známe, že je inhibovaná morfínu [1], kombináciou glutamátu NMDA a tachykinínov NK 1 a NK 2 receptorov [4] a antisekrečnými činidlami, ako je cimetidín a omeprazol [2].
ako cimetidín, lafutidine je antagonista histamínu H 2 receptor, ktoré bolo preukázané, že chráni pred žalúdočné zranenia typu príbuznej kyseline u hlodavcov [5-8]. Okrem toho existuje dôkaz, že pred žalúdočným prostredím pôsobenie lafutidine zahŕňa uvoľnenie neuropeptidov z aferentných nervových zakončení v žalúdku [7, 8]. S ohľadom na túto farmakologickým profilom bola položená otázka, či lafutidine by mali mať možnosť upraviť predominanciou aferentné signalizáciu výzvu žalúdočnej kyseliny do mozgového kmeňa. Preto je prvým cieľom tejto štúdie bolo testovanie účinku na expresiu lafutidine žalúdočnej kyseliny vyvolané c-Fos v potkaním mozgového kmeňa. Okrem toho sa pH žalúdka, bol zaznamenaný a stupeň makroskopických žalúdočné zranenia kvantifikované.
V priebehu týchto pokusov bolo zistené, že lafutidine uľahčuje odstránenie záťaže kyseliny exogénny zo žalúdka. Vzhľadom k tomu, sekrécie endogénneho žalúdočnej kyseliny je potlačená pri zaťažení kyseliny exogénne, pôsobenie lafutidine zvýšiť intragastrické pH nemožno vysvetliť jeho antisekrečnej činnosti v dôsledku histamínu H 2 blokády receptora. V dôsledku toho, tento účinok lafutidine pravdepodobne odráža riedenie a /alebo vyprázdňovanie kyseliny zaťaženie do dvanástnika. Táto úvaha je podporovaná pozorovaním, že vystavenie žalúdka do prebytku kyseliny inhibuje vyprázdňovanie žalúdka a spôsobuje vylučovanie tekutín [2, 9]. Druhým cieľom tejto štúdie bolo teda preskúmať, či lafutidine modifikuje časový priebeh žalúdočnej poranenia, žalúdočné objemu a žalúdočnej kyslosť v nadväznosti na zaťaženie kyseliny exogénne a či nejaký vplyv lafutidine z týchto parametrov je zdieľaný cimetidínom.
Metódy
Zvieratá
štúdia bola vykonaná s žena Vek-uzavreté Sprague-Dawley (divízia Laboratory Animal Science a genetiky, Ústav biomedicínskeho výskumu, lekárskej univerzite vo Viedni, Himberg, Rakúsko) s hmotnosťou 170 - 250 g. Zvieratá bola umiestnená v skupinách po 3 klietok, kde sa riadenou teplotou (21 ° C) a 12 h cyklu svetlo /tma (svetlo o 6:00, zhasnutia v 18:00). Všetky experimenty boli schválené etickej komisie na ministerstve pre vedu a výskum a vykonávali v súlade so smernicou Rady Európskych spoločenstiev z 24. novembra 1986 (86/609 /EHS). Tieto experimenty boli navrhnuté takým spôsobom, že počet použitých zvierat a ich utrpenie bol minimalizovaný.
Experimentálne protokoly
Dve štúdie boli vykonané. Sedem dní pred žalúdočnej stáčanie kyseliny experimentu boli zvieratá náhodne rozdelení do liečebných skupín pomocou software náhodnosti (Randomizer pre klinické skúšky 1.8.0, Ústav medicínsku informatiku, štatistiku a dokumentácie, lekárska univerzita Graz, Rakúsko). V deň pred nakladacie experimentu kyseliny, boli krysy bez potravy a hladovali počas 18 hodín, aby sa zabezpečilo, že žalúdok je prázdny, ale mala voľný prístup k vode. V prvej štúdii boli skúmané účinky dvoch dávok lafutidine (10 a 30 mg /kg), c-Fos expresiu žalúdočnej kyseliny vyvolané v mozgovom kmeni pri vedomí potkanov spolu s žalúdočnou kyselinou a zranenia. Lafutidine alebo jej nosič (0,5% karboxymetylcelulóza) bola podávaná perorálne 30 minút pred tým, než žalúdok bol vystavený škodlivým koncentráciu kyseliny (0,25 M HCl) žalúdočnou sondou. Po žalúdočný ošetrení boli zvieratá už nie je dovolené piť, kým záznam experimentálnych parametrov. Dve hodiny po žalúdočnej kyseliny načítava počet c-Fos-imunoreaktívnych neurónov v mozgovom kmeni, intragastrického pH a rozsahu macrosopic zmeny žalúdočnej sliznice boli stanovené.
V druhom pokuse, účinky jednej dávky lafutidine (30 boli skúmané mg /kg) alebo cimetidín (10 mg /kg), na časový priebeh žalúdočnej kyslosti objemu, a poranenia po expozícii pri zaťažení kyseliny exogénne. Lieky, ako aj ich vozidlo boli podávané do žalúdka sondou 30 minút pred tým, než žalúdok bol vystavený pôsobeniu kyseliny chlorovodíkovej. Po žalúdočný ošetrení boli zvieratá už nie je dovolené piť, kým záznam experimentálnych parametrov. Žalúdočné objem, kyslosť a zranenia boli kvantifikované na 3 časových bodoch po podaní zaťažení kyseliny intragastrického: 0, 60 a 120 min. Všetky parametre boli zaznamenané v rovnakých pokusoch.
Lafutidine a cimetidín ošetrenie
Lafutidine (Taihe, Tokyo, Japonsko) a cimetidín (Sigma, Viedeň, Rakúsko), boli suspendované v karboxymetylcelulózy (0,5%) pri koncentrácii 2 a 6 mg /ml (lafutidine) a 2 mg /ml (cimetidín). Lafutidine (10 a 30 mg /kg), cimetidín (10 mg /kg), alebo jej vehikulum bolo podávané perorálne žalúdočnou sondou v objeme 5 ml /kg 30 minút pred tým, než žalúdok bol vystavený pôsobeniu kyseliny chlorovodíkovej. Intragastrický aplikácia bola vykonaná s mäkkým dieťa plniacej trubice (vonkajší priemer 2,6 mm, SIMS Portex, Hythe, Spojené kráľovstvo).
Nakladanie žalúdočnej kyseliny
HCI (0,25 M) bol podávaný do žalúdka v objeme 10 ml /kg cez rovnaký mäkkého kŕmenie dieťaťa trubice, ktorý bol použitý pre správu lafutidine. Po tomto intragastrický kyselina načítanie zvieratá bola zakázaná piť až záznam experimentálnych parametrov.
C-Fos imunocytochemie
c-Fos-ako imunoreaktivita bola vizualizované, ako bolo opísané skôr [2, 10]. Dve hodiny po stáčanie kyseliny žalúdočného, ​​boli krysy usmrtené intraperitoneálnou injekciou nadmernej dávky pentobarbitalu (200 mg /kg). Po eutanázii, boli zvieratá transkardiálně perfundovaná pufrovaným paraformaldehydu (4%, 75 ml), zatiaľ čo zostupná aorta sa upnúť. Tieto brainstems boli vybraté a fixované cez noc v pufrovanom paraformaldehydu (4%) pri teplote 4 ° C. Potom boli tkanivá cryoprotected po dobu 48 hodín v 20% sacharózy pri teplote 4 ° C, zmrazí ponorením do metylbután na suchom ľade a uchovávajú sa pri -70 ° C až do použitia. Sériovej koronárnej rezy s hrúbkou 40 um boli vyrezané z mozgového kmeňa po celej dĺžke oblasti postrema (AP) s kryostatu.
Imunocytochemie bola vykonaná s voľne pohyblivou časťou, ktoré sú najprv boli premyté raz v 0,1 M fyziologického roztoku pufrovaného fosfátom (PBS) a potom dvakrát premyté premývacím pufrom (WB; 0,1 M PBS s 0,3% Triton X 100), a inkubované v 0,3% H 2O 2 po dobu 30 minút. Po troch ďalších premytí (každý po dobu 10 min v WB), boli tkanivá inkubované s primárnou protilátkou (králičie polyklonálne anti-c-Fos, 1: 20000, Santa Cruz Biotech, Santa Cruz, Kalifornia, USA) po dobu 40 hodín pri 4 ° C ° C. Táto protilátka bola rozpustená v 0,1 M PBS obsahujúcom 0,3% Triton X 100, 1% hovädzí sérový albumín a 2,5% kozie sérum. Potom boli rezy premyté trikrát v WB a inkubované po dobu 45 minút v roztoku, ktorý obsahuje biotinylizované sekundárnej protilátky (kozí anti-králičí IgG, Vectastain Elite Kit, Vector Laboratories, Burlingame, Kalifornia, USA). Po troch ďalších premytí v WB, ktoré boli inkubované po dobu 1 hodiny v avidín-biotín komplex (Vectastain Elitná Kit). Tkanivá boli opláchnuť neskôr a vyvinutý s 3,3-Diaminobenzidine (DAB) substrátu (Vectastain Elite Kit) intenzívnejšie síranom niklu za 200 sekúnd. Následne boli rezy namontované na želatínou pokryté šmýkačky, vysuší na vzduchu a vyčistil v xylolu (100%). Sklíčka sa posunie s prekrytím Entellan (Merck, Darmstadt, Nemecko). Pre kontrolu špecifickosti signálu protilátky anti-c-Fos, pridá sa c-Fos blokovanie peptid (Santa Cruz Biotech) na riedenie primárnej protilátky.
Imunocytochemicky spracované mozgového kmeňa časti bola skúmaná pomocou svetelného mikroskopu (Axiophot , Zeiss, Oberkochen, Nemecko), spojený s počítačového systému analýzy obrazu (MCID-M2, verzia 3.0, 1.1 Rev, Imaging Research Inc., Brock University, St. Catharines, Ontario, Kanada). Rezy boli kódované tak, aby skúšajúci nevedeli, aká liečba skupina prišli. Boli analyzované štyri časti z mozgového kmeňa každého zvieraťa, a všetky c-Fos-pozitívne bunky boli náhodne, počítané na jednej strane NTS a AP. Aby sa zabránilo tomu, že rovnaké bunky sa počítali dvakrát, iba každý druhý oddiel odfotil pre analýzu. Vo všetkých bodoch v každej časti každého zvieraťa boli spriemerované, aby počet c-Fos-pozitívnych buniek v NTS a AP tohto zvieraťa. Tieto priemerné hodnoty z každého zvieraťa boli následne použité pre výpočet priemerný počet c-Fos-pozitívnych buniek v sekcii v jednostrannom NTS a AP každej testovanej skupiny.
Stanovenie žalúdočné objemu
Krysy sa usmrtia intraperitoneálne injekcie predávkovania pentobarbitalu (200 mg /kg) okamžite (0 min), 60 alebo 120 minút po stáčaní kyseliny žalúdočnej. Po expozícii žalúdka zo strany stredovej laparotómii, kardio a pyloru bola upnutá. Žalúdok sa vyreže a zváži (hmotnosť 1). Po zhromaždení jej obsah vo fľaštičke, žalúdok sa znova odváži (hmotnosť 2). Objem žalúdočného obsahu sa vypočíta ako rozdiel hmotnosti 2 - hmotnosť 1 a vyjadrené relatívne vzhľadom k telesnej hmotnosti (g /kg telesnej hmotnosti). Okrem toho je objem žalúdka obnoviť 60 a 120 minút po naložení žalúdočnej kyseliny bol vyjadrený v vzťahu k objemu meraného ihneď (0 min) po naložení žalúdočnej kyseliny.
Intragastrického pH
Po eutanázii, brucho sa začalo stredová čiara laparotómia. Žalúdok sa vyreže a otvorí a intragastrické pH bolo stanovené pomocou pH-metra, ktorý bol vybavený Micro linky pH elektródy (ThermoOrion, New Hyde Park, NY, USA) a kalibruje sa štandardnými puframi o pH 4,01, 7,00 a 10,00.
Titrácia žalúdočného obsahu
žalúdočného obsahu boli vyprázdnené do skúmaviek, krátko odstredí pri 5600 x g (10000 otáčok za minútu) a zriedený v pomere 1:10, 1:25 alebo 1:50 v 5 ml destilovanej vody, tak koeficient sadzieb v závislosti od objemu žalúdočného obsahu, ktoré boli získané späť. Ak nebolo žalúdočnej šťavy opäť, bolo použité zodpovedajúce množstvo tráveniny. Titrácia bola vykonaná pomocou 0,1 M NaOH na TitroLine Alpha titračný prístroj (Schott-Geräte GmbH, Hofheim, Nemecko) až do koncového bodu pH 7,0 bolo dosiahnuté. Množstvo kyseliny ekvivalentov prítomných v žalúdku bola vypočítaná ako mmol, a žalúdočné kyslosť meria 60 a 120 minút po naložení žalúdočnej kyseliny bol vyjadrený v súvislosti s kyslosti okamžite meranej (0 min) po načítaní žalúdočnej kyseliny.
Žalúdočné zranenie
integrita žalúdočnej sliznice sa skúmala na makroskopickej úrovni. Pre kvantifikáciu makroskopicky viditeľné poškodenia, žalúdok bol pritlačený na rovnej ploche na silikónovým elastomerom potiahnuté doštičky a pokryté PBS. Žalúdok bol fotografovaný, obraz preniesť do osobného počítača a makroskopické žalúdočné ujma s počítačovým Planimetrie pozorovateľom, ktorý bol nevedomý experimentálnej liečby [1]. Oblasť sliznice vzťahuje viditeľného poškodenia hemoragickej bola vyjadrená ako percento z celkovej plochy glandulární sliznice. Štatistiky
Štatistické vyhodnotenie výsledkov bola vykonaná na SPSS 15.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) s jednosmernou analýzou rozptylu (ANOVA). Tieto testy boli vykonané aj napriek skutočnosti, že dáta niektorých experimentálnych skupín nespĺňa kritérium normálneho rozdelenia, pretože toto obmedzenie bolo vysvetlené obmedzený počet zvierat v skupine, a preto, že nie je žiadny dôvod sa domnievať, non-normálne rozdelenie , Homogenita rozptylov bola hodnotená v teste Levente. Ak bola nájdená významná interakcia medzi testovanými faktormi, post-hoc analýza rozdielov skupiny bol vykonaný s Tukom HSD (úprimne významný rozdiel) skúškou alebo v prípade nehomogenity odchýlok, s testom Games-Howell. Všetky dáta sú uvádzané ako priemer ± SEM, n s odkazom na počet potkanov v každej skupine. Vzhľadom na povahu prieskumnej štúdie, hodnoty pravdepodobnosti ≤ 0,1 [11, 12], boli považované za štatisticky významné
Výsledky
Štúdia 1 :. Účinky lafutidine na c-Fos expresiu v mozgovom kmeni, intragastrického pH a žalúdočnej sliznice po stáčaní kyseliny žalúdočnej
expozície potkanov žalúdočnej sliznice do HCI (0,25 M) zvyšuje expresiu c-Fos v NTS a AP do značnej miery (obrázkoch 1A, B a 2A, B), ale vzhľadom k fyziologickým roztokom, nespôsobil žiadne významné poškodenie žalúdočnej sliznice (Danzer et al., 2004). Podobné pozorovania bola vykonaná v tejto štúdii, vzhľadom k tomu, že v priemere menej ako 0,2% glandulární sliznice prezentované s makroskopické abnormality, väčšinou petechie (obrázok 2C). Pričom hodnota pH tohto roztoku kyseliny chlorovodíkovej podávaný do žalúdka bolo 0,51, pH v žalúdočnej šťavy 2 h po HCI výzvu vzrástol na viac ako 2,5 (obrázok 2D). Obrázok 1 žalúdočnej kyseliny vyvolané expresie c-Fos v nucleus tractus solitario (NTS) a area postrema (AP) v krýs liečených nosičom (A) a ďalšie krýs liečených lafutidine (B). Lafutidine (30 mg /kg), alebo jej nosič (0,5% karboxymetylcelulóza) bola podávaná perorálne 30 minút pred tým, než žalúdok bol vystavený zaťaženiu exogénny kyseliny (0,25 M HCl). Dve hodiny po HCl c-Fos-pozitívnych buniek v mozgovom kmeni boli vizualizované imunocytochemickému.
Obrázok 2 Účinok lafutidine (10 a 30 mg /kg), vzhľadom k vozidlu, na počet c-Fos pozitívnych buniek (a) jadro tractus solitario (NTS) a (B) oblasť postrema (AP), (C), makroskopické zmeny žalúdočnej sliznice (vyjadrené ako percento oblasti glandulární sliznice) a (D) intragastrické pH meria 2 h po vystavenie žalúdka do HCI (0,25 M). Lafutidine alebo nosič sa podáva žalúdočnou sondou 30 minút pred podaním kyseliny chlorovodíkovej. Hodnoty predstavujú priemery ± SEM, n = 8, pokiaľ nie je uvedené inak. * P ≤ 0,1, ** P ≤ 0,05 v porovnaní s nosičom.
Po podaní žalúdočný lafutidine (10 a 30 mg /kg), oblasť žalúdočné zranenia boli nominálne nižšia, ale tento účinok nedosiahol štatistickú významnosť (Obr 2C) , Naproti tomu, intragastrické pH bola zvýšená buď dávkou lafutidine (obrázok 2D), do značnej miery, ako odhaľuje jednocestný ANOVA (F (2,20) = 11,08, P 0,001) a post-hoc test. Výraz kyselina vyvolané c-Fos v NTS (obrázkoch 1A, B a 2A) bola znížená o lafutidine (10 a 30 mg /kg), a jednosmerné ANOVA je popísané v tomto zmysle, že je štatisticky významný (F (2,19) = 4,30, P = 0,029). . Naopak, schopnosť lafutidine na tlmenie expresie kyseliny vyvolané c-Fos v AP nedosiahol štatistickú významnosť (Obrázky 1A, B a 2B)
Štúdia 2: Účinky lafutidine na časový priebeh žalúdočných objem, kyslosť a poranenia po žalúdočnej stáčanie kyseliny
ako v štúdii 1, úlohou žalúdka s 0,25 M kyselinou chlorovodíkovou spôsobila menšie makroskopické poškodenie, ktoré v priemere sa vzťahuje menej než 0,2% plochy glandulární sliznice (obrázok 3A). Rozsah poškodenia významne nelíšili medzi časovými bodmi 0, 60 a 120 min po HCI v nosičom a cimetidín liečených krýs. V lafutidine potkanov, avšak rozsah poškodenia 120 min po kyslé úloha bol podstatne menší než bezprostredne po naložení žalúdočnej kyseliny (obrázok 3A). Obrázok 3 Účinok lafutidine (30 mg /kg) a cimetidín (10 mg /kg), vzhľadom k vozidlu, na (A) makroskopické zmeny žalúdočnej sliznice (vyjadrené ako percento oblasti glandulární sliznice), (B) intragastrický kyslosť (kyselina ekvivalenty v mmol) a (C), hmotnosť obsahu žalúdka (g /kg telesnej hmotnosti), merané ihneď (0 min), 60 a 120 min po expozícii žalúdka do HCI (0,25 M). Lafutidine, cimetidín alebo nosičom sa podáva žalúdočnou sondou 30 minút pred podaním kyseliny chlorovodíkovej. Hodnoty predstavujú prostriedky + SEM, n = 8. ** P ≤ 0,05 priebehu času 0 min pod rovnakým liečby + P ≤ 0,1, ++ P ≤ 0,05 proti času 60 min pod rovnakým liečby ° P ≤ 0,1 ° C, ° P ≤ 0,05 v porovnaní s nosičom v rovnakom časovom okamihu po-HCl.
množstvo kyseliny ekvivalentov prítomných v žalúdočnej dutine výrazne znížil počas 2 h interval post-HCl vo všetkých liečebných skupinách (obrázok 3B). Väčšina z poklesu kyslosti žalúdočného obsahu došlo počas 60 minút po-HCl, a nebol zistený žiadny významný rozdiel v žalúdočných úrovne kyslosti 0 a 60 minút po HCl medzi tromi liečebnými skupinami. V lafutidine potkanov došlo k ďalšiemu výraznému poklesu žalúdočnej kyslosti v priebehu 60 až 120 min po-HCl, zmena, ktorá nebola zistená u nosičom a cimetidín potkanov (obrázok 3b). Zníženie žalúdočnej kyslosti 120 minút po HCI v lafutidine potkanov bola významne výraznejší ako u zvierat ošetrených vehikulom (Obrázok 3B). Pri žalúdočnej kyslosť meria 60 a 120 min po-HCl bola vyjadrená vzhľadom k kyslosti okamžite meranej (0 min) po naložení žalúdočnej kyseliny, sa zistilo, že pokles žalúdočnej kyslosti 120 minút po HCl vidieť v lafutidine potkana sa vyslovuje, v porovnaní s tým, je vidieť na nosičom a cimetidín potkanov (obrázok 4A). Obrázok 4 Účinok lafutidine (30 mg /kg) a cimetidín (10 mg /kg), vzhľadom k vozidlu, na (A) kyslosti žalúdočného obsahu a (B), hmotnostná žalúdočného obsahu, merané 60 a 120 minút po expozícii žalúdka do kyseliny chlorovodíkovej (0,25 M) a vyjadrí sa ako percento z príslušných hodnôt nameraných bezprostredne po naložení žalúdočnej kyseliny (0 min). Lafutidine, cimetidín alebo nosičom sa podáva žalúdočnou sondou 30 minút pred podaním kyseliny chlorovodíkovej. Hodnoty predstavujú prostriedky + SEM, n = 8. ** P ≤ 0,05 priebehu času 0 min pod rovnakým liečby + P ≤ 0,1, ++ P ≤ 0,05 proti času 60 min pod rovnakým liečby ° P ≤ 0,1 ° C, ° P ≤ 0,05 v porovnaní s nosičom v rovnakom časovom okamihu po-HCl.
hmotnosť vzhľadom k telesnej hmotnosti (g /kg), žalúdočný obsah sa vypočíta ako nepriame meranie vyprázdňovanie žalúdka. Ako je ukázané na obrázku 3C, žalúdočné hmotnostný obsah významne poklesla v priebehu času vo všetkých liečebných skupinách a 60, ako aj 120 min po-HCl bola významne menšia, než bezprostredne po načítaní žalúdočnej kyseliny. Lafutidine- a cimetidín Potkany sa líšil od potkanov ošetrených vehikulom v dvoch ohľadoch. Po prvé, ihneď po kyslé žalúdočné výzve hmotnostný obsah bol v lafutidine- a cimetidín liečených zvierat významne vyššia než u kontrolných potkanov (obrázok 3C). Po druhé, ak sa meria 120 minút po HCl v lafutidine- a cimetidín liečených zvierat, tento parameter bol významne nižší ako meria 60 minút po-HCl, zatiaľ čo u potkanov ošetrených vehikulom zaznamenané žalúdočný obsah závažia 60 a 120 min po HCl neboli významne odlišné od seba navzájom (obrázok 3C).
od pôvodného objemu žalúdka lafutidine- a cimetidín liečených zvierat bola vyššia ako u kontrolných potkanov (3C), časový priebeh žalúdočných zmien objemu rozdielneho zaobchádzania skupiny je ťažké porovnať medzi sebou, pretože to by mohlo byť rozdielne ovplyvnené pôvodného objemu. Z tohto dôvodu je obsah žalúdka späť 60 a 120 min po HCl boli vyjadrené ako percento objemu meraného ihneď (0 minút) po naložení žalúdočnej kyseliny (obrázok 4). Týmto spôsobom bolo zistené, že pokles v žalúdočnej objem 120 minút po HCl v lafutidine potkanov bol výraznejší ako u krýs ošetrených vehikulom (Obrázok 4B).
Diskusia
hlavné výsledky tejto štúdie možno zhrnúť nasledujúcim spôsobom. Lafutidine inhibuje predominanciou aferentné signalizáciu o urážky žalúdočnej kyseliny, ktorá zvyšuje možnosť, že lafutidine inhibuje žalúdočné bolesti indukovanej kyselinou. Schopnosť lafutidine pre zníženie kyslosti žalúdočného obsahu po vystavení nadmernej kyseliny chlorovodíkovej nemožno vysvetliť jeho antisekrečnej aktivitu a pravdepodobne odráža riedenie a /alebo vyprázdňovanie kyseliny zaťaženie do dvanástnika.
Predominanciou aferentné signalizáciu z urážky žalúdočnej kyseliny bola vizualizované c-Fos expresiu v dreňovej mozgového kmeňa, čo je štandardná metóda funkčná neuroanatomy k vymedzeniu stimulácie vyvolanej aktivácii neurónov [13, 14]. Týmto spôsobom už skôr bolo ukázané, že expozícia potkana žalúdka k prekročeniu koncentrácie kyseliny chlorovodíkovej stimuluje neuróny v mozgovom kmeni [1, 2]. Vzhľad proteínu c-Fos bol meraný 2 hodiny po-HCl, vzhľadom na to, že preklad c-fos mRNA do c-Fos proteínu dosahuje maximum medzi 1 a 3 hodiny po stimule [2]. obmedzenej sme analýzu mozgového kmeňa, pretože vystavenie potkana žalúdka do kyseliny chlorovodíkovej sa nepodarilo indukovať žiadnu c-fos mRNA a c-Fos proteínu v dorzálním rohu zadnej hrudnej miechy, ktorý je príjemcom žalúdočné vstup cez miechových aferentných neurónov [1, 2]. Tieto údaje a schopnosť chronickej bilaterálne subdiaphragmatic vagotómia k potlačeniu expresie kyseliny vyvolané žalúdočné c-fos mRNA [1] by naznačovali, že žalúdočnou kyselinou chlorovodíkovou výzva je signalizované do mozgového kmeňa cez predominanciou afferents.
Indukcia c-fos mRNA a c-Fos proteínu v NTS, centrálne projekčné oblasti predominanciou aferentných vlákien, je vzťah k žalúdku podávané koncentrácie HCl [1, 2]. Porovnávacia analýza medulárneho c-Fos indukcie a poškodenie žalúdočnej ukazuje, že aferentné signalizácia výzvou žalúdočnej kyseliny, nie je v priamom vzťahu k tvorbe zjavné sliznice, pretože c-Fos expresiu v NTS môže byť vyvolaný koncentrácia kyseliny chlorovodíkovej (0,15 - 0,35 M), ktoré nevyvolávajú žiadny badateľný makroskopické lézie a vydávať málo histologické poškodenia [1, 2]. Vzhľadom k tomu, supraphysiological koncentrácia kyseliny chlorovodíkovej (0,15 M alebo vyššia), je nutné pre indukciu c-fos v NTS, že bola odvodená, že iba masívne zvýšenie protónového gradientu cez kyseliny tesnej žalúdočnej sliznice bariéry je schopný riadiť dostatočné protóny do lamina propria, kde môžu rozrušiť vágových aferentné nervové vlákna a to buď priamo, alebo nepriamo prostredníctvom neuroaktivní faktorov uvoľňovaných v tkanive [2]. Toto experimentálne nastavenie sa teda myšlienka modelovať patofyziologické okolnosti, kedy backdiffusion kyseliny lumen stimulujú vágových aferentných vlákien.
Údaje aktuálneho štúdie ukazujú, že lafutidine podávané do žalúdka pri dávkach (10 a 30 mg /kg) zistil skôr, aby žalúdočným [5 , 6, 15] znížil aferentné signalizáciu o urážky žalúdočnej kyseliny do NTS. Toto pozorovanie je v súlade s možnosťou ďalšieho histamínu H antagonistu receptora 2, cimetidínu a protónov omeprazol inhibítora čerpadlo pre zníženie expresie kyseliny vyvolané žalúdočné c-Fos v mozgovom kmeni potkanov [2]. Vzhľadom k tomu, behaviorálne reakcie na výzvu žalúdočnej kyseliny ukazujú, že expresia c-Fos v NTS je korelátom nocicepcia žalúdočnej kyseliny [2, 3], môže byť navrhnuté, aby lafutidine má inhibičný účinok na žalúdočnú chemonociception. Tento antinociceptívny účinok, je však pravdepodobné, že by vysvetliť antisekrečnej aktivitu lafutidine, vzhľadom na to, že vystavenie žalúdočnej sliznice do prebytku kyseliny, ako je exogénny 0,25 M kyseliny chlorovodíkovej sa samo o sebe potláčať sekréciu kyseliny endogénnej negatívnym mechanizmu spätnej väzby [16-19 ]. V dôsledku toho, dva alternatívne vysvetlenie je potrebné stanoviť.
Jedna vysvetlenie, že príde na myseľ, je predpokladať, že lafutidine, ako cimetidín [2], sa stretáva s vagu aferentných dráh, ktoré signalizujú kyseliny problému žalúdočnej sliznice do mozgového kmeňa. Lafutidine môže tak urobiť (1) tým, že inhibuje stimuláciu vagu aferentných neurónov kyselinou prieniku žalúdočnej sliznici, (2) zošliapnutím signálne vedenia vo vagu aferentných neurónov, (3) tým, že blokuje synaptickej transmisie medzi centrálnymi zakončenie predominanciou afferents a NTS neurónov a /alebo (4) tým, že zníži vzrušivosť neurónov mozgového kmeňa exprimujúcich c-Fos v odozve na vstup zo žalúdka.
, ktorá z týchto možností platí pre účinky lafutidine a cimetidínu vyžaduje identifikáciu miesta pôsobenia kde 2 antagonistov receptora H zasahovať zásobujúcich vagu dráh. Už skôr bolo ukázané, že vagové aferentných neurónov, ktoré signalizujú problém žalúdočnej kyseliny do NTS sú necitlivé k neurotoxickým účinku kapsaicínu [1], a že aktivácia tejto dráhy kyselinou je nezávislá na prostaglandíny [20]. Predominanciou aferentné systém inhibovaný lafutidine sa tak zdá byť zásadne líši od kapsaicín citlivé miechových aferentných neurónov, ktoré sa považujú za sprostredkovateľa schopnosť lafutidine chrániť gastrointestinálne sliznice pred zranením [6-8, 15, 21-23]. Aj keď sa zdá byť inhibovaná pomocou 2 mechanizmu receptora závislé H vagové aferentné, kapsaicín citlivé chrbtice aferentné sú aktivované alebo senzitizujú lafutidine, ale nie iné antagonisty H 2 receptorov, čo má za následok uvoľnenie ochrannej messenger kalcitonín gene-related peptid [6-8, 15, 21-23]. Prostaglandíny môže tiež hrať úlohu v žalúdočnom účinku lafutidine proti stresu [23].
Ďalšie vysvetlenie inhibičného účinku lafutidine na c-Fos expresiu kyselinou vyvolanej žalúdočnej v mozgovom kmeni berie do úvahy, že lafutidine významne znížil kyslosť exogénne zaťaženie žalúdočnej kyseliny. Akýmikoľvek mechanizmus lafutidine uľahčuje odstránenie záťaže žalúdočnej kyseliny, bude to tiež znížiť podnet k predominanciou aferentné signalizáciu na NTS. Ktorý z týchto dvoch mechanizmov, - priama inhibícia predominanciou aferentné systému alebo zníženie pevnosti stimulačného - je dôležitejšie nemôže byť rozhodnuté bez elektrofyziologického charakterizáciu účinku H 2 receptorov na predominanciou aferentné systému
priame. analýza žalúdočným účinku lafutidine v súčasnej štúdie bolo mimo rozsahu, pretože zaťaženie žalúdočnej kyseliny sa tu používa (0,25 M HCl), ktoré bolo len minimálne poškodenie žalúdka, ktorá bola na nerozoznanie od pozorovali po intragastrický podaní fyziologického roztoku [2]. V dôsledku toho, poškodenie žalúdočnej kyseliny vyvolané zostal nezmenený lafutidine v štúdii 1, hoci tam bola tendencia k potlačeniu tvorby žalúdočnej lézie. Analýza časového priebehu účinku lafutidine v štúdii 2, sa však zistilo, že lafutidine, na rozdiel od vozidla, urýchliť zotavenie z HCl-indukovanej poškodenia žalúdočnej.
Gastroprotektívnymi potenciál lafutidine Ďalej sa predpokladá, od jej vplyvu na zvýšenie intragastrického pH a na zníženie žalúdočnej kyseliny po expozícii pri zaťažení kyseliny exogénne. Vzhľadom k tomu, ako bolo uvedené vyššie, endogénna sekrécia žalúdočnej kyseliny je potlačená pri zaťažení exogénne kyseliny, ako je vysoká ako 0,25 M kyseliny chlorovodíkovej, pôsobením lafutidine k zníženiu žalúdočnej kyseliny, môže byť výsledkom riedenie, neutralizácia alebo vyprázdňovanie kyseliny zaťaženie do dvanástnika. Už skôr bolo zistené, že vystavenie žalúdka do supraphysiological koncentráciou kyseliny inhibuje vyprázdňovanie žalúdka a spôsobuje vylučovanie tekutín [2, 9], ktoré sa v súčasnej štúdii sa odrazil relatívne pomalý pokles žalúdočné objeme vyše 2 h intervale stĺpika . -HCl
Lafutidine a cimetidín objavil na urýchlenie vyprázdnenia žalúdka počas doby 60 až 120 minút po-HCl ako nepriamo odvodiť z poklesu žalúdočné objemu, ktorý bol výraznejší ako u zvierat ošetrených nosičom.

• Žalúdočné adenomyoma v žalúdku tele: prípad report
• Tri prípady laparoskopickej totálnej gastrektómii s intrakorporální esophagojejunostomy na rakovinu žalúdka v zvyšných troch prípadoch stomach