Įcentrinis signalizacijos nuo rūgšties ginčijo žiurkių skrandžio yra slopinamas ir skrandžio rūgšties eliminacija yra stiprinamas lafutidine

įcentriniai signalizacijos nuo rūgšties ginčijo žiurkių skrandžio slopino ir skrandžio rūgšties eliminacija yra stiprinamas lafutidine
tezės
Background pervežimas Lafutidine yra histamino H 2 receptorių antagonistas, The gastroprotektinio poveikis yra susijęs su jo antisekrecinio veiklos ir jos gebėjimas aktyvuoti jutimo neuronų priklausoma mechanizmą į gynybą. Šis tyrimas nagrinėjo, ar intragastrinį administravimas lafutidine (10 ir 30 mg /kg) keičia nervo klajoklio jutimo signalus, gleivinės sužalojimai, intragastrinį rūgštingumą ir skrandžio ištuštinimą po skrandžio rūgšties įspėtas.
Metodai
suaugusioms žiurkėms buvo gydomi automobiliui, lafutidine (10 - 30 mg /kg) arba cimetidino (10 mg /kg), ir 30 min vėliau jų skrandžiai buvo veikiami į egzogeninį HCl (0,25 M). Per 2 h po HCl, intragastrinį pH, skrandžio tūrio, skrandžio rūgštingumą ir apimtį makroskopinis skrandžio gleivinės traumos buvo nustatyti ir neuronų smegenų aktyvacijos laikotarpiu buvo regimos C-Fos imunocitocheminiais.
Rezultatai
skrandžio rūgštis iššūkis sustiprino c-Fos išraišką branduolys Tractus solitarii bet sukelia tik minimalų žalos skrandžio gleivinę. Lafutidine sumažino HCl sužadintą išraiška c-Fos į NBA ir padidėjusi intragastrinį pH po intragastrinį administravimo perteklių HCl. Tolesnė analizė parodė, kad gastroprotektinio poveikis lafutidine prieš rūgšties perteklių buvo atidėtas ir išvyko kartu su padėjimu skrandžio ištuštinimo, matuojamas netiesiogiai naudojant skrandžio apimties pokyčius, o skrandžio rūgštingumo sumažinimo. H 2 receptorių antagonistas cimetidinas turėjo panašių, bet silpnesnius efektus.
Išvada
Šios pastabos rodo, kad lafutidine slopina nervo klajoklio jutimo signalus iš skrandžio rūgšties įžeidimą, kuris gali atspindėti slopina veiksmą rūgšties sukelto skrandžio skausmas , Iš lafutidine gebėjimas mažėjimą intragastrinį rūgštingumą po sąlyčio su pertekliniams HCl negali būti paaiškinti jo antisekrecinio veiklos, bet atrodo, kad atspindėtų praskiedimą ir /arba būtų išpilamas rūgšties apkrovos į dvylikapirštės žarnos. Šis veiksmų aprašymą pabrėžia mintį, kad O 2 receptorių antagonistai gali apsaugoti skrandžio gleivinę nuo rūgšties traumos nepriklausomai nuo jų gebėjimo nuslopinti skrandžio rūgšties sekreciją.
Fone
poveikis skrandžio gleivinę, sąmoningas žiurkės viršija HCl (0,25 m) pranešė per pasireikšti klajoklio nervo dirginimo aferentų, į branduolį Tractus solitarii (NTS) į smegenų, kur neuronų aktyvavimo gali būti matomos c-fos mRNR in situ hibridizacijos ir c-Fos imunocitocheminiais [1, 2]. Analizė elgesio reakcijų į skrandžio rūgšties iššūkį rodo, kad klaidžiojantys įcentriniai neuronai atlieka svarbų vaidmenį skrandžio rūgšties [3] nocicepsijai. Klaidžiojantys įcentrinis signalizacijos skrandžio rūgšties iššūkis yra žinoma, kad būti slopinamas morfino [1], pagal glutamato NMDA ir tachikinino NK derinys 1 ir NK 2 receptorių antagonistai [4] ir sekreciją veiksnių, tokių kaip cimetidinas ir omeprazolo [2].
kaip cimetidinas, lafutidine yra histamino H 2 receptorių antagonistas, kuris buvo įrodyta, kad apsaugo nuo rūgščių, susijusių su skrandžio traumos graužikams [5-8]. Be to, yra įrodymų, kad gastroprotektinio veiksmas lafutidine apima spaudai neuropeptidų iš jutimo nervų galūnės skrandyje [7, 8]. Atsižvelgiant į šį farmakologines kilo klausimas, ar lafutidine galės keisti nervo klajoklio jutimo signalus skrandžio rūgšties iššūkis prie smegenų. Todėl pirmasis šio tyrimo tikslas buvo išbandyti lafutidine poveikį skrandžio rūgšties sukelta išraiška c-Fos žiurkės smegenų. Be to, skrandžio pH buvo įrašytas ir makroskopines skrandžio traumos kiekybiškai laipsnis.
Į šių eksperimentų buvo pastebėta, žinoma, kad lafutidine palengvina egzogeninio rūgšties apkrovos pašalinimą iš skrandžio. Nuo sekrecijos endogeninio skrandžio rūgšties slopina egzogeninės rūgšties kroviniu, iš lafutidine veiksmų kelti intragastrinį pH negalima paaiškinti savo antisekrecinio veiklos dėl histamino H 2 receptorių blokados. Kaip pasekmė, šis lafutidine poveikis yra tikėtina, kad atspindėtų praskiedimą ir /arba ištuštinimo rūgšties apkrovos į dvylikapirštės žarnos. Ši argumentacija yra palaikoma pastebėjimu, kad poveikis skrandžio į rūgšties perteklių, slopina skrandžio ištuštinimą ir sukelia skysčio išsiskyrimą [2, 9]. Antrasis šio tyrimo tikslas buvo, taigi ištirti, ar lafutidine keičia laikui bėgant skrandžio traumos, skrandžio tūrio ir skrandžio rūgštingumas po egzogeninės rūgšties kroviniu ir ar gali lafutidine įtaka šių parametrų dalijasi cimetidinas.
Metodai
Gyvūnai Viesbutis The tyrimas buvo atliktas su Moteriška Amžius atitikimo Sprague-Dawley žiurkių (skyriaus laboratorinių gyvūnų mokslo ir genetikos katedros Biomedicininių tyrimų Vienos medicinos universitetas, Himberg, Austrija) svėrimo 170 - 250 g. Gyvūnai buvo laikomi grupėmis 3 per narvo kontroliuojamomis temperatūros (21 ° C) ir 12 val šviesos /tamsos ciklo (šviečia ant 6:00, šviesas išjungti 18:00). Visi eksperimentai buvo patvirtinti Etikos komiteto Federalinės ministerijos Mokslo ir mokslinių tyrimų ir atliko pagal Europos Bendrijų Tarybos 1986 m lapkričio 24 (86/609 /EEB) direktyvos. Eksperimentai buvo suprojektuotas taip, kad naudojamas gyvūnų skaičių ir jų kančias, buvo minimalus.
Eksperimentiniai protokolus
Du tyrimai buvo atlikti. Prieš septynias dienas iki skrandžio rūgšties pakrovimo eksperimentą, gyvūnai buvo atsitiktinai skiriamas gydymo grupių naudojant tikimybių programinę įrangą (Randomizer klinikiniams tyrimams 1.8.0 institutas, medicinos informatikos, statistikos ir dokumentų, Medicinos Universitetas Gracas, Austrija). Dieną prieš rūgšties pakrovimo eksperimento, žiurkės buvo atimta maisto ir badavusios 18 h iki užtikrina, kad skrandžio buvo tuščias, bet galėjo laisvai patekti į vandens. Pirmajame tyrime, dviejų dozių lafutidine (10 ir 30 mg /kg) skrandžio rūgšties sukelta C-Fos išraiškos sąmoningos žiurkių smegenų poveikis buvo nagrinėjama kartu su skrandžio rūgštingumą ir traumos. Lafutidine arba jo transporto priemonė (0,5% karboksimetilceliuliozė) buvo skiriamas peroraliai 30 min prieš skrandžio buvo veikiami kenksmingų koncentracijos rūgšties (0,25 M HCl) per zondą. Po to, kai intragastrinį gydymo gyvūnai buvo nebeleidžiama gerti, kol įrašymo iš eksperimentinių parametrų. buvo nustatytas praėjus dviem valandoms po skrandžio rūgšties įdėjimas C-Fos-imunoreaktyviųjų neuronų smegenų, intragastrinį pH ir macrosopic skrandžio gleivinės traumos, kiek skaičių.
Antroje eksperimento, iš vienos dozės lafutidine poveikis (30 buvo ištirti mg /kg) arba cimetidino (10 mg /kg), laikui bėgant skrandžio tūrio, rūgštingumo ir traumos po kontakto su egzogeninį rūgšties apkrovos. Vaistai, taip pat jų transporto priemonė buvo skiriami intragastrically per zondą 30 min prieš skrandžio buvo veikiami HCl. Po to, kai intragastrinį gydymo gyvūnai buvo nebeleidžiama gerti, kol įrašymo iš eksperimentinių parametrų. Skrandžio tūrio, rūgštingumą ir žalos buvo kiekybiškai ne 3 kartus kiekis pavartojus intragastrinį rūgšties kroviniu: 0, 60 ir 120 min. Visi parametrai buvo registruojami tose pačiose eksperimentų.
Lafutidine ir cimetidinas gydymo
Lafutidine (Taihō, Tokijas, Japonija) ir cimetidinas ( "Sigma, Viena, Austrija) buvo suspenduotos karboksimetilceliuliozės (0,5%), esant 2 koncentracija ir 6 mg /ml (lafutidine) ir 2 mg /ml (cimetidino). Lafutidine (10 ir 30 mg /kg), cimetidino (10 mg /kg) arba jo transporto priemonė buvo skiriamas peroraliai skiriant po 5 ml tūrio per zondą /kg 30 min prieš skrandžio buvo veikiami HCl. Intragastrinį administracija buvo atliktas su minkštas kūdikių padavimo vamzdis (išorinis skersmuo 2,6 mm, SIMS PORTEX, Hythe, Jungtinė Karalystė).
Skrandžio rūgšties pakrovimo
HCl (0,25 M), buvo skiriamas intragastrically esant 10 ml /kg per tą patį minkšta kūdikių maitinimo vamzdį, kuris buvo naudojamas administravimo lafutidine. Po to intragastrinį rūgštis pakrovimo gyvūnai nebeleidžiama gerti, kol įrašymo eksperimentinių parametrus.
C-Fos imunocitocheminiais
C-Fos-kaip reaktyvumas buvo ryškinamos, kaip aprašyta anksčiau [2, 10]. Dvi valandas po to, kai intragastrinį rūgšties pakrovimo, žiurkės buvo numarinti pagal injekciją į pilvą pasikeičiant pentobarbitalio (200 mg /kg) perdozavimo. Po eutanazijos, gyvūnai buvo transcardially nušvies buferiniame paraformaldehido (4%, 75 ml), o mažėjančia aorta buvo stipriai priveržti. Kad brainstems buvo pašalinta ir pinigų skaičiaus per naktį buferiniame paraformaldehido (4%), esant 4 ° C temperatūroje. Tada audiniai buvo cryoprotected 48 h iš 20% masės sacharozės, esant 4 ° C, užšaldyti panardinimo į metilbutano ant sauso ledo ir saugomi -70 ° C temperatūroje, kol bus panaudotas. Serijos koronarinės skyriai 40 pm storio buvo sumažinti iš per visą ilgį plotas postrema (AP) su kriostatas smegenų.
Imunocitocheminiais buvo atliktas su laisvai plaukioja ruožai, kuriuose pirmą kartą buvo plaunami kartą 0,1 M fosfatinio buferio druskų tirpalu (PBS), tada nuplauti du kartus plovimo buferiu (WB; 0,1 M PBS su 0,3% Triton X 100), ir inkubuojami 0,3% H 2O 2 už 30 min. Po to, kai dar trims plauna (kiekvienas 10 min WB), audiniai buvo inkubuojamos su pirminiais antikūnais (triušis polikloninis anti-c-Fos, 1: 20.000, Santa Cruz Biotech ", Santa Cruz, California, JAV) 40 h 4 ° C. Tai antikūnas buvo ištirpinta 0,1 M PBS, kurių sudėtyje yra 0,3% Triton X 100, 1% galvijų serumo albumino ir 2,5% ožkų serumo. Po to sekcijos tris kartus buvo plaunamos į WB ir inkubuojami 45 min tirpale, kuriame yra biotinilintą antriniu antikūnu (ožkos anti-triušio IgG, bet Vectastain Elite Kit, Vector Laboratories, Burlingame, Kalifornija, JAV). Po trijų kitų plovimų į PB jie buvo inkubuojami 1 h avidino-biotinas sudėtingos (Vectastain Elite rinkinį). Audiniai buvo nuplauti po ir sukūrė su 3,3-diaminobenzidinas (TBP) Substratas (Vectastain Elite rinkinį) suintensyvėjo su nikelio sulfatas 200 s. Vėliau skyriai buvo montuojamas ant želatinos dengtas skaidres, vytinta ir apėmęs ksilolą (100%). Skaidrės buvo coverslipped su Entellan (Merck, Darmstadt, Vokietija). Kontroliuoti dėl anti-C-Fos antikūnų signalo specifiką, a n-Fos blokuoja peptidų (Santa Krusas Biotech ") buvo pridėta prie pirminio antikūno praskiedimo.
Immunocytochemically perdirbtų smegenų skyriai buvo išnagrinėti su šviesos mikroskopu (Axiophot , Carl Zeiss, Oberkochen, Vokietija), sujungtas su kompiuterine vaizdo analizės sistema (MCID-M2, versija 3.0, red 1.1, vaizdo Research, Brock universiteto Šv Catharines, Ontarijas, Kanada). Skyriai buvo koduojami taip, kad ekspertas nežinojo, koks gydymas grupė jie atėjo. buvo analizuojami keturi skyriai iš kiekvieno gyvūno smegenų, ir visi c-Fos-teigiamas ląstelės atsitiktine tvarka buvo suskaičiuoti ant vienos pusės NBA ir AP. Tam, kad būtų išvengta, kad tos pačios ląstelės buvo skaičiuojamas du kartus, tik kas antras skyrių buvo priimtas analizei. Visi skaičiuoja kiekvienos kiekvieno gyvūno skyriuje buvo vidutiniškai suteikti C-Fos-teigiamas ląstelių NBA ir AP tą gyvūną skaičių. Šios vidutinės vertės iš kiekvieno gyvūno buvo naudojama apskaičiuoti vidutinį skaičių, C-Fos-teigiamų ląstelių viename skirsnyje vienašalės NBA ir AP kiekvieno eksperimentinės grupės.
Nustatymas skrandžio tūrio
žiurkės buvo numarinti iki pilvaplėvės ertmę injekcija kurio pentobarbitalio (200 mg /kg) perdozavimo nedelsiant (0 min), 60 arba 120 min po intragastrinį rūgšties apkrovai. Po poveikio, kurį vidurinę laparotomija skrandžio, The Cardia ir fazė prievartyje buvo prispaustas. Skrandžio buvo pašalintų ir pasverti (svorį, spalvą 1). Po to, kai surinkimo jos turinį į buteliuką, skrandžio buvo iš naujo pasverti (svorį, spalvą 2). Skrandžio turinio tūris buvo apskaičiuojamas pagal skirtumą svorio 2 - svorio 1 ir išreikštas lyginant su kūno mase (g /kg kūno masės). Be to, skrandžio tūris atsigavo 60 ir 120 minutės po skrandžio rūgšties pakrovimo pat buvo išreikštas lyginant su išmatuotą tūrį nedelsiant (0 minutės) po skrandžio rūgšties Kraunasi.
Intragastrinį pH
Po eutanaziją, pilvo buvo atidaryta A vidurinės linijos laparotomija. Skrandis buvo pašalintų ir atidarė, o intragastrinį pH nustatomas pH-metro, kuris buvo įrengta Mikro Line pH elektrodas (ThermoOrion, Naujoji Hyde Park, NY, JAV) ir kalibruotas su standartiniais buferių pH 4.01, 7.00 ir 10.00.
titravimas skrandžio turinio Viesbutis The skrandžio turinio buvo ištuštinti į vamzdelius, trumpai centrifuguojamas 5.600 × g (10000 rpm) ir praskiesti santykiu 1:10, 1:25 ar 1:50 5 ml distiliuoto vandens, praskiedimo kursų priklausomai nuo skrandžio turinio, kad buvo regeneruotų tūrio. Jei ne skrandžio sultys buvo susigrąžinta, buvo naudojamas tinkamas kiekis chyme. Titravimas atliekamas su 0,1 M NaOH ant Titroline Alpha titravimo aparatas (Schott-Geräte GmbH, Hofheim Vokietija), kol pH pasekmės = 7,0 buvo pasiektas. Užtikrinama rūgšties ekvivalentų esančių skrandžio suma buvo apskaičiuota kaip mmol, o skrandžio rūgštingumas matuojamas 60 ir 120 min po skrandžio rūgšties pakrovimo pat buvo išreikštas lyginant su rūgštingumo išmatuotas nedelsiant (0 minutės) po skrandžio rūgšties pakrovimo.
Skrandžio žalos
skrandžio gleivinės vientisumą buvo nagrinėjami po makroskopiniame lygiu. Kiekybiškai makroskopinis matomas žalą, skrandis buvo prikabintos butas silicio elastomero dengtos plokštės ir padengta PBS. Skrandis buvo fotografuotas, vaizdas perkeliamas į asmeninį kompiuterį, o makroskopinį skrandžio įvertinta žala su kompiuterine planimetrijos stebėtojas, kuris nežinojo apie eksperimentinę gydymo [1]. Gleivinės dengiamas plotas matomas hemoraginis žalą buvo išreikštas bendras plotas liaukų gleivinės procentais.
Statistika
Statistiniai rezultatų vertinimas buvo atliktas SPSS 15,0 (SPSS Inc., Chicago, IL, JAV) su vieną pusę dispersinė analizė (ANOVA). Šie tyrimai buvo atlikti nepaisant to, kad kai kurių eksperimentinių grupių duomenys neatitiko normalaus pasiskirstymo kriterijų, nes šis apribojimas buvo paaiškinta ribotas gyvūnų skaičių vienai grupei ir todėl, kad nebuvo jokios priežasties manyti, yra ne normalus pasiskirstymas , Iš dispersijų homogeniškumo buvo įvertintas su Levene testo. Jei buvo nustatyta reikšminga sąveika tarp bandymų veiksnių, post-hoc analizė grupinių skirtumų buvo su Tukey HSD (sąžiningai reikšmingas skirtumas) bandymą arba, tuo atveju, inhomogeneity dispersijų, su žaidimai-Howell testą. Visi duomenys yra pateikiami kaip reiškia ± SEM, n nuoroda į žiurkių kiekvienoje grupėje skaičius. Atsižvelgiant į tiriamąją tyrimo pobūdžio, tikimybė vertės ≤ 0,1 [11, 12] buvo laikomi statistiškai reikšmingas
rezultatai
Tyrimas 1. Effects lafutidine ant C-Fos išraiška smegenų, intragastrinį pH ir skrandžio gleivinės sužalojimas po intragastrinį rūgšties pakrovimo
veikimas žiurkių skrandžio gleivinės į HCl (0,25 M) sustiprino c-Fos išraišką į NBA ir AP dideliu mastu (duomenys 1A, B ir 2A, B), bet, lyginant su fiziologiniu tirpalu, nesukėlė jokių didelių skrandžio gleivinės pažeidimas (Danzer et al., 2004). Panaši pastaba buvo pateikta šioje studijoje, turint omenyje, kad vidutiniškai mažiau nei 0,2% pateiktą su makroskopinių anomalijų, dažniausiai petechijos (2c pav) liaukinio gleivinę. Nors HCl tirpalo administruoja intragastrically pH buvo 0,51, į skrandžio sulčių 2 val po HCl iššūkį pH padidėjo iki daugiau nei 2,5 (2d pav). 1 pav Skrandžio rūgštis sukėlė išraiška c-Fos branduolio Tractus solitarii (NTS) ir plotas postrema (AP) žiurkės gydomi transporto priemonė (A), o kitas žiurkė gydomi lafutidine (B). Lafutidine (30 mg /kg) arba jo transporto priemonė (0,5% karboksimetilceliuliozė) buvo skiriamas peroraliai 30 min prieš skrandžio buvo veikiami egzogeninį rūgšties apkrovą (0,25 M HCl). Dvi valandos po HCl c-Fos-teigiami ląstelės smegenų buvo ryškinamos imunocitocheminį.
2 paveikslas poveikis lafutidine (10 ir 30 mg /kg), palyginti su transporto priemonės, C-Fos teigiamų ląstelių skaičius (a), branduolys Tractus solitarii (NBA) ir (B), plotas postrema (AP), (C), makroskopinis skrandžio gleivinės sužalojimas (išreikštas iš liaukinio gleivinės ploto procentais) ir (d), intragastrinį pH matuojamas 2 val po poveikis skrandžio į HCl (0,25 M). Lafutidine arba transporto priemonė buvo vartojamas skrandžio zondą 30 min prieš vartojant HCl. Vertės atstovauja priemones + SEM, n = 8, jei nenurodyta kitaip. * P ≤ 0,1, ** p ≤ 0,05, palyginti su transporto priemonės.
Po intragastrinį administravimo lafutidine (10 ir 30 mg /kg), skrandžio traumos plotas buvo formaliai sumažino, tačiau šis poveikis nebuvo statistiškai reikšmingas (2C paveikslas) , Priešingai, intragastrinį pH padidėjo abiejų lafutidine dozės (2d pav) dideliu mastu kaip atskleidė vieną pusę ANOVA (F (2,20) = 11,08, p < 0,001) ir post-hoc testas. Rūgštis-prisiminė išraiška c-Fos į NTS (duomenys 1A, B ir 2A) buvo sumažintas lafutidine (10 ir 30 mg /kg), o ANOVA atskleisti šį poveikį, kad būtų statistiškai reikšmingas (F (2,19) = 4,30, p = 0,029). . Priešingai, iš lafutidine gebėjimą sumažintų rūgšties-prisiminė išraiška c-Fos į AP nepasiekė statistinio reikšmingumo (duomenys 1A, B ir 2B)
2 Tyrimas: effects lafutidine nuo laiko žinoma skrandžio tūris, rūgštingumą ir žalos po intragastrinį rūgštis pakrovimo
kaip tyrimo 1 uždavinys skrandį su 0,25 M HCl sukėlė nedidelę makroskopinį žalą, kuri vidutiniškai kuriems mažiau nei 0,2% liaukų gleivinės (3a paveikslas) srityje. Žalos mastas reikšmingai nesiskyrė tarp laiko kiekis 0, 60 ir 120 minutės po HCl vienos transporto priemonės ir cimetidinu gydytų žiurkių. Be lafutidine gydytų žiurkių, tačiau žala 120 min apimtis po rūgšties iššūkis buvo gerokai mažesnis nei iš karto po skrandžio rūgšties pakrovimo (3a pav.) Skaičius 3 poveikis lafutidine (30 mg /kg kūno svorio) ir cimetidino (10 mg /kg kūno svorio), palyginus su transporto priemonės, (A) makroskopiniame skrandžio gleivinės sužalojimo (išreikštas kaip liaukų gleivinės ploto procentas), (B) intragastrinį rūgštingumas (rūgšties ekvivalentai mmol) ir (C), svoris skrandžio turinio (g /kg kūno svorio), išmatuotas iš karto (0 minutės), 60 ir 120 minutės po to, kai žmogaus sąlyčio su skrandžio atgal į HCl (0,25 M). Lafutidine, cimetidinu ar transporto priemonė buvo vartojamas skrandžio zondą 30 min prieš vartojant HCl. Reikšmės atstovauti priemonės + SEM n = 8. ** p ≤ 0,05, lyginant laikas 0 minutės pagal to paties gydymo, + P ≤ 0,1, ++ p ≤ 0,05, lyginant laikas 60 minutės pagal tą patį gydymą, ° P ≤ 0,1, ° . ° P ≤ 0,05, palyginti su transporto priemonės tuo pačiu laiko momentu po HCl
rūgšties ekvivalentų, esančių skrandžio spindžio ir suma žymiai sumažėjo per 2 val intervalo post-HCl visuose gydymo grupių (Fig.3B). Dauguma skrandžio rūgštingumo kritimo įvyko per 60 min po-HCl, ir nebuvo reikšmingo skirtumo tarp trijų tiriamųjų grupių skrandžio rūgštingumo 0 ir lygių 60 min po-HCl. Be lafutidine gydytų žiurkių ten buvo dar vienas svarbus lašas skrandžio rūgštingumo laikotarpiu 60 - 120 minutės po HCl, kad pakeitimas nebuvo matyti vienos transporto priemonės ir cimetidinu gydytų žiurkių (3b pav.) Į skrandžio rūgštingumas 120 min post-HCl sumažėjimas lafutidine gydytų žiurkių buvo žymiai ryškesnis nei transporto priemonių gydytų gyvūnų (3b pav.) Kai skrandžio buvo išreikšta, palyginti su rūgštingumo matuojant iš karto rūgštingumas matuojamas 60 ir 120 minutės po HCl (0 minutės) po to, kai skrandžio rūgšties pakrovimo, buvo nustatyta, kad skrandžio rūgštingumas 120 min post-HCl lašas matyti lafutidine-gavusių žiurkių buvo labiausiai ryškus, palyginti su vertinamas vienos transporto priemonės ir cimetidinu gydytų žiurkių (4a pav.) Skaičius 4 poveikis lafutidine (30 mg /kg kūno svorio) ir cimetidino (10 mg /kg kūno svorio), palyginus su transporto priemonės, (A) intragastrinį rūgštingumo ir (B) masės skrandžio turinio matuojamas 60 ir 120 min po sąlyčio su skrandžio į HCl (0,25 M) ir išreikštas atitinkamų verčių, išmatuotų iš karto po to, kai skrandžio rūgšties apkrovai (0 min) procentiniu dydžiu. Lafutidine, cimetidinu ar transporto priemonė buvo vartojamas skrandžio zondą 30 min prieš vartojant HCl. Reikšmės atstovauti priemonės + SEM n = 8. ** p ≤ 0,05, lyginant laikas 0 minutės pagal to paties gydymo, + P ≤ 0,1, ++ p ≤ 0,05, lyginant laikas 60 minutės pagal tą patį gydymą, ° P ≤ 0,1, ° ° P ≤ 0,05, palyginti su transporto priemonės tuo pačiu laiko momentu po HCl.
skrandžio turinio, palyginti su kūno mase (g /kg) svorio buvo apskaičiuotas kaip netiesioginis skrandžio ištuštinimo. Kaip parodyta Fig.3C, skrandžio turinio svoris žymiai sumažėjo per tam tikrą laiką visuose gydymo grupių ir 60, taip pat kaip 120 min po HCl buvo žymiai mažesnis nei iš karto po to, kai skrandžio rūgšties pakrovimo. Lafutidine- ir cimetidinas gydytų žiurkių skyrėsi nuo transporto priemonių gydytų žiurkių dviem aspektais. Pirma, iš karto po to, kai rūgšties iššūkį skrandžio turinio svoris buvo žymiai didesnis lafutidine- ir cimetidinu gydytų gyvūnų nei kontrolės žiurkėmis (3c pav.) Antra, kai matuojama 120 min pašto-HCl lafutidine- ir cimetidinu gydytų gyvūnų, šis parametras buvo gerokai mažesnis nei matuojamas 60 min po-HCl, o transporto priemonių gydytų žiurkių skrandžio turinio svoriai registruojami 60 ir 120 minutės po HCl reikšmingai nesiskyrė viena nuo kitos (3c pav.)
nuo pradinio skrandžio tūrio lafutidine- ir cimetidinu gydytų gyvūnų buvo didesnis nei kontrolinių žiurkių (3c pav), laikas, žinoma skrandžio tūrio pokyčius skirtingo požiūrio grupės yra sunku palyginti viena su kita, nes jis gali būti skirtingai įtakos pradinio tūrio. Dėl šios priežasties, skrandžio turinys atsigavo 60 ir 120 minutės po HCl, taip pat buvo išreikštas tūrio procentais, matuojant iš karto (0 min) po skrandžio rūgšties pakrovimo (4 paveikslas). Tokiu būdu buvo nustatyta, kad skrandžio tūris 120 min post-HCl sumažėjimas lafutidine gydytų žiurkių buvo ryškesnis nei transporto priemonių gydytų žiurkių (4b pav.)
Diskusijos
pagrindinis rezultatus dabartinio tyrimo gali būti apibendrinti taip. Lafutidine slopina nervo klajoklio jutimo signalus iš skrandžio rūgšties įžeidimą, kuris kelia galimybė, kad lafutidine slopina rūgšties sukelto skrandžio skausmą. Iš lafutidine gebėjimas sumažinti intragastrinį rūgštingumą šių pozicijų į perteklių HCl negalima paaiškinti savo antisekrecinio veiklos ir greičiausiai atspindi atskiesti ir /arba ištuštinti rūgšties kroviniu į dvylikapirštę žarną.
Nervo klajoklio jutimo signalus iš skrandžio rūgšties įžeidimą buvo regimos c-Fos reikšti savo mintis meduliarinė smegenų, standartinis metodas funkcinės neuroanatomija į apibrėžti skatinimo-prisiminė aktyvacijos neuronų [13, 14]. Tokiu būdu prieš tai buvo parodyta, kad žiurkės skrandžio atgal į koncentracijos HCl perteklinių poveikio stimuliuoja neuronų smegenų [1, 2]. Iš C-Fos baltymų atsiradimas buvo matuojamas 2 h po-HCl, turint omenyje, kad c-fos mRNR vertimas į C-Fos baltymų pasiekia maksimumą tarp 1 ir 3 h po stimulas [2]. Mes ribotas mūsų analizę į smegenų, nes poveikis žiurkių skrandžio į HCl nepavyko sukelti bet kokį C-fos iRNR ir C-Fos baltymų užpakalinio rago užpakalinės krūtinės stuburo smegenis, kuris gauna skrandžio įvesties per stuburo jutimo neuronų [1, 2]. Šie duomenys ir lėtinio dvišalis subdiaphragmatic vagotomy gebėjimas slopinti skrandžio rūgšties-prisiminė posakį C-fos iRNR [1] Nurodyti, kad skrandžio iššūkis su HCl signalizuoti per pasireikšti klajoklio nervo dirginimo aferentų smegenų.
C-fos mRNR indukcijos ir c-Fos baltymas NBA, centrinės projekcijos plotas pasireikšti klajoklio nervo dirginimo aferentų, yra susijęs su intragastrically administruoja HCl koncentracija [1, 2]. Palyginamoji analizė meduliarinė C-Fos indukcijos ir skrandžio žalą rodo, kad įcentrinis signalizacijos skrandžio rūgšties iššūkis nėra tiesiogiai susijęs su akivaizdžiomis gleivinės traumos formavimo, nes C-Fos išraiška NBA gali būti sukeliami HCl koncentracija (0,15 - 0,35 m), kuris neskatinkite jokių pastebimų makroskopinių pažeidimų ir sukelti tiek histologiniai žalą [1, 2]. Nes suprafiziologinį koncentracijos HCl (0,15 M arba daugiau) yra reikalaujama, kad sukelti c-fos į NK, ji buvo daryti išvadą, kad tik labai padidėja protonų gradiento visoje rūgštis nepraleidžiančioje skrandžio gleivinės barjerą gali vairuoti pakankamai protonus į plono sluoksnio Propria kur jie gali sužadinti nervo klajoklio įcentrinis nervų skaidulų tiesiogiai arba netiesiogiai per neuroactive veiksnių išleistas į [2] audinio. Taigi, šis eksperimentinis nustatymas yra manoma, kad modelis patofiziologinių aplinkybės, kai backdiffusion iš luminal rūgšties stimuliuoja nervo klajoklio aferentinius.
dabartinės studijų duomenys rodo, kad lafutidine administruoja intragastrically dozėmis (10 mg ir 30 mg /kg) nustatyta anksčiau, kad būtų gastroprotektinio [5 , 6, 15] sumažino jutimo signalus iš skrandžio rūgšties įžeidimas NBA. Šis pastebėjimas yra suderinamas su kitos histamino H 2 receptoriaus antagonisto, cimetidino, ir protonų siurblio inhibitorius omeprazolio gebėjimą sumažinti skrandžio rūgšties-sukėlė išraiška c-Fos žiurkių smegenų [2]. Kadangi elgesio reakcijos su skrandžio rūgšties iššūkį rodo, kad C-Fos išraiška NBA yra skrandžio rūgšties nocicepsijai koreliuoja [2, 3] ji gali būti siūloma, kad lafutidine turi slopinamąjį poveikį skrandžio chemonociception. Tai antinociceptive poveikis, tačiau tai mažai tikėtina, kad būtų paaiškinti antisekrecinio veiklos lafutidine, nes iš skrandžio gleivinės į perteklių egzogeninės rūgštimi, tokia kaip 0,25 M HCl ekspozicija bus savaime slopina endogeninio rūgšties sekreciją neigiamu grįžtamuoju mechanizmą [16-19 ]. Kaip pasekmė, du alternatyvūs paaiškinimai reikia numatyti.
Vienas paaiškinimas, kuris ateina į galvą, yra manyti, kad lafutidine, kaip cimetidinas [2], trukdo pasireikšti klajoklio nervo dirginimo jutimo būdų, kad signalizuojančias rūgšties iššūkį skrandžio gleivinės į smegenų. Lafutidine gali padaryti (1) slopindamas pasireikšti klajoklio nervo dirginimo jutimo neuronų stimuliacija rūgštimi įsibrauti skrandžio gleivinę (2), paspaudžiant signalo laidumas pasireikšti klajoklio nervo dirginimo jutimo neuronų (3), blokuoja Synaptic perdavimo tarp centrinių galūnės pasireikšti klajoklio nervo dirginimo aferentų ir NBA neuronai ir /arba (4), mažinant smegenų kamieno neuronų išreiškė c-fos reaguojant į įvesties iš skrandžio jaudrumą.
Kuris iš šių galimybių taikoma ir lafutidine ir cimetidinas poveikio būtina identifikuoti veiksmus, kurių svetainėje H 2 receptorių antagonistai trukdyti jutimo pasireikšti klajoklio nervo dirginimo kelius. Prieš tai buvo parodyta, kad klaidžiojantys įcentriniai neuronai, kad signalas skrandžio rūgšties uždavinį NK yra nejautrios neurotoksinio poveikio kapsaicino [1] ir, kad šiuo būdu aktyvavimo rūgšties yra nepriklausoma nuo prostaglandinų [20]. Taigi nervo klajoklio įcentrinis sistema slopina lafutidine atrodo iš esmės skiriasi nuo to, kapsaicino jautrus stuburo jutimo neuronų, kurie manė, kad tarpininkauti lafutidine gebėjimą apsaugoti virškinimo trakto dalies gleivinę nuo traumų [6-8, 15, 21-23]. Nors klaidžiojantys aferentai atrodo, slopino per H 2 receptorių priklauso nuo mechanizmo, kapsaicino jautrus stuburo aferentai yra aktyvuota arba įjautrintos iki lafutidine, bet ne kitus O 2 receptorių antagonistai, kurios rezultatus apsauginio spaudai pasiuntinys kalcitoninas genų, susijusių su peptido [6-8, 15, 21-23]. Prostaglandinai taip pat gali vaidinti tam tikrą vaidmenį gastritas poveikio lafutidine su stresu [23].
Kitas paaiškinimas dėl slopinamojo poveikio lafutidine dėl skrandžio rūgšties sukelta C-Fos reikšti savo mintis smegenų atsižvelgia į tai, lafutidine reikšmingai sumažino rūgštingumas egzogeninio skrandžio rūgšties apkrovos. Iki kokios mechanizmas lafutidine palengvina skrandžio rūgšties kroviniu panaikinimo, jis taip pat mažina dėl nervo klajoklio įcentriniai signalizacijos į NBA stimulas. Kuris iš šių dviejų mechanizmų - tiesioginis slopinimo nervo klajoklio jutimo sistemos ar sumažinimo stimulas stiprumas - yra svarbesnis negali būti sprendžiama be Elektrofiziologijos apibūdinimo H 2 receptorių antagonistai dėl nervo klajoklio jutimo sistemos poveikis
tiesioginis. analizė gastritas poveikio lafutidine dabartinėje tyrimo metu buvo iš taikymo sritį, nes čia naudojama skrandžio rūgšties kiekis (0,25 M HCl) sukeltas tik minimaliai skrandžio žalą buvo atskirti nuo pastebimas po intragastrinį administravimo [2] fiziologiniu tirpalu. Kaip pasekmė, skrandžio rūgšties sukelto sužalojimo liko nepakitęs iki lafutidine tyrime 1, nors ten buvo tendencija slopinimo skrandžio pažeidimų formavimosi. Analizė laikui bėgant į lafutidine tyrime 2 efekto, tačiau, atskleidė, kad lafutidine, skirtingai nuo transporto priemonės, paspartino išieškojimo iš HCl sukeltas skrandžio žalą.
Gastritas potencialą lafutidine toliau yra numatoma iš jo poveikį sustiprinti intragastrinį pH ir sumažinti skrandžio rūgštingumą po ekspozicijos egzogeninės rūgšties kroviniu. Nes, kaip buvo aptarta anksčiau, endogeninė skrandžio rūgšties sekrecija yra užslopinta egzogeniniu rūgšties apkrovai, kaip aukštas, kaip 0,25 M HCl, į lafutidine kad slopindamas skrandžio rūgštingumą gali būti skiedimo, neutralizavimas arba ištuštinti rūgšties apkrovos į dvylikapirštės žarnos rezultatas. Prieš tai buvo nustatyta, kad poveikis skrandžio į suprafiziologinį koncentracijos rūgšties slopina skrandžio ištuštinimo ir sukelia skysčio sekreciją [2, 9], kuris dabartiniame tyrime buvo atspindi palyginti lėtai sumažėjo skrandžio tūris virš 2 h intervalo kampo

• Skrandžio adenomyoma skrandyje kūno: byla ataskaita
• Trys atvejai, laparoskopinės viso pašalintas skrandis su intrakorporaliniu esophagojejunostomy skrandžio vėžio likutis skrandžio