Aferentes sinalização a partir do estômago de ratos desafiados-ácido é inibida e a eliminação de ácido gástrico é reforçada por lafutidine

Aferente sinalização a partir do estômago de ratos desafiados-ácido é inibida e a eliminação de ácido gástrico é reforçada por lafutidine
Resumo
fundo
Lafutidine é uma histamina H 2 antagonista do receptor, o efeito gastroprotector do que está relacionada com a sua actividade anti-secretora e sua capacidade de ativar um mecanismo dependente de neurônio sensorial de defesa. O presente estudo investigou se a administração intragástrica de lafutidine (10 e 30 mg /kg) modifica a sinalização vagal aferente, lesão da mucosa, acidez intragástrica e esvaziamento gástrico após o desafio ácido gástrico.
Métodos
ratos adultos foram tratados com veículo, lafutidine (10 - 30 mg /kg) ou cimetidina (10 mg /kg), e 30 minutos mais tarde, os seus estômagos foram expostas a HCl exógena (0,25 M). Resultados Durante o período de 2 h de pós-HCl, pH intragástrico, o volume gástrico, acidez gástrica e extensão da lesão da mucosa gástrica macroscópica foram determinados e a ativação dos neurônios no tronco cerebral foi visualizada por c-Fos imunocitoquímica.
desafio ácido gástrico aumentou a expressão de c-Fos no núcleo do trato solitarii mas causou apenas danos mínimos na mucosa gástrica. Lafutidine reduziu a expressão HCl-evocado de c-Fos no NTS e elevou o pH intragástrico após a administração intragástrica de HCl em excesso. Outras análises mostraram que o efeito gastroprotective de lafutidine contra o excesso de ácido foi adiada e foi em paralelo com a facilitação do esvaziamento gástrico, medida indiretamente através de mudanças de volume gástrico e uma redução da acidez gástrica. O H 2 receptor antagonista cimetidina teve efeitos semelhantes, mas mais fracas.
Conclusão
Estas observações indicam que lafutidine inibe a sinalização aferente vagal de um insulto ácido gástrico, o que pode refletir uma ação inibitória sobre a dor gástrica induzida por ácido . A capacidade de lafutidine para diminuir a acidez intragástrica após exposição a HCl em excesso não pode ser explicada pela sua actividade anti-secretora, mas parece reflectir de diluição e /ou o esvaziamento da carga de ácido para o duodeno. Este perfil de acções enfatiza a noção de que os antagonistas 2 receptor H pode proteger a mucosa gástrica contra lesões ácido, independentemente da sua capacidade para suprimir a secreção de ácido gástrico.
Fundo
exposição da mucosa gástrica de ratos conscientes em excesso HCl (0,25 M) é sinalizado através de aferentes vagais, ao solitarii núcleo do trato (NTS) no tronco cerebral, em que a activação neuronal pode ser visualizado por ARNm de c-fos de hibridação in situ e c-Fos imunocitoquímica [1, 2]. A análise das reacções comportamentais ao desafio ácido gástrico indica que os neurónios aferentes vagais desempenhar um papel importante na nocicepção ácido gástrico [3]. A sinalização vagais aferentes de desafio de ácido gástrico é conhecido por ser inibido por morfina [1], por uma combinação de glutamato NMDA e de taquicinina NK 1 e NK antagonistas do receptor 2 [4] e por agentes anti-secretores, tais como cimetidina e omeprazol [2].
como cimetidina, lafutidine é uma histamina antagonista de 2 receptor de H, que tem sido demonstrado para proteger da lesão gástrica relacionadas com o ácido em roedores [5-8]. Além disso, há evidências de que a acção gastroprotectora do lafutidine envolve a libertação de neuropéptidos das terminações nervosas aferentes no estômago [7, 8]. Tendo em vista este perfil farmacológico surgiu a questão de saber se lafutidine seria capaz de modificar a sinalização aferente vagal de desafio ácido gástrico para o tronco cerebral. Por conseguinte, o primeiro objectivo deste estudo foi para testar o efeito sobre a expressão de lafutidine evocados-ácido gástrico de c-Fos no tronco cerebral de ratos. Além disso, o pH gástrico foi registado e o grau de lesão gástrica macroscópica quantificada.
No decurso destas experiências descobriu-se que lafutidine facilita a remoção da carga de ácido exógeno a partir do estômago. Uma vez que a secreção de ácido gástrico endógena é suprimida por uma carga de ácido exógeno, a acção de lafutidine para aumentar o pH intragástrico não pode ser explicada pela sua actividade anti-secretora devido à histamina H 2 o bloqueio do receptor. Como consequência, este efeito de lafutidine é susceptível de reflectir de diluição e /ou o esvaziamento da carga de ácido para o duodeno. Este raciocínio é suportada pela observação de que a exposição do estômago para o excesso de ácido inibe o esvaziamento gástrico e a secreção de fluido provoca [2, 9]. O segundo objetivo deste estudo foi, portanto, para explorar se lafutidine modifica o curso de tempo de lesão gástrica, o volume gástrico e acidez gástrica após uma carga ácida exógena e se alguma influência de lafutidine sobre estes parâmetros é compartilhada por cimetidina.
Métodos
Animals
O estudo foi realizado com ratos Sprague-Dawley fêmeas da mesma idade (Division of Science Laboratory animal e Genética do Departamento de Investigação Biomédica da Universidade médica de Viena, Himberg, Áustria) pesando 170-250 g. Os animais foram alojados em grupos de 3 por gaiola, sob temperatura controlada (21 ° C) e de 12 h ciclo de luz /escuridão (luzes acesas às 6:00, luzes desligadas às 18:00). Todos os experimentos foram aprovados por uma Comissão de Ética no Ministério Federal da Ciência e Investigação e conduzida de acordo com a Directiva do Conselho das Comunidades Europeias de 24 de Novembro de 1986 (86/609 /CEE). As experiências foram concebidas de tal maneira que o número de animais utilizados e o seu sofrimento foi minimizado.
Protocolos experimentais
Dois estudos foram realizados. Sete dias antes do experimento de carga de ácido gástrico, os animais foram divididos aleatoriamente em grupos de tratamento usando um software de randomização (Randomizer para ensaios clínicos 1.8.0, Instituto de Informática Médica, estatísticas e documentação, Médico da Universidade de Graz, Áustria). No dia antes do ensaio de carga de ácido, os ratos foram privados de alimentos e em jejum durante 18 h, para assegurar que o estômago estava vazio, mas tiveram livre acesso à água. No primeiro estudo, os efeitos de duas doses de lafutidine (10 e 30 mg /kg) sobre a expressão evocados-ácido gástrico c-fos no tronco cerebral de ratos conscientes foram examinadas, juntamente com a acidez gástrica e lesão. Lafutidine ou do seu veículo (0,5% de carboximetil celulose) foi administrado por via oral 30 minutos antes de o estômago foi exposto a uma concentração de ácido nocivo (M HCl 0,25) por gavagem. Após o tratamento intragástrico os animais já não estavam autorizados a beber até que a gravação dos parâmetros experimentais. Foram determinadas duas horas após o carregamento do ácido gástrico número de neurónios c-Fos-imunorreactivas no tronco cerebral, do pH intragástrico e a extensão da lesão da mucosa gástrica macrosopic.
Na segunda experiência, os efeitos de uma única dose de lafutidine (30 mg /kg) ou cimetidina (10 mg /kg) sobre o tempo de curso do volume de gástrica, acidez e lesão após a exposição a uma carga de ácido exógeno foram examinados. As drogas, bem como o seu veículo foram administrados intragastricamente por gavagem 30 minutos antes do estômago foi exposto a HCl. Após o tratamento intragástrico os animais já não estavam autorizados a beber até que a gravação dos parâmetros experimentais. O volume gástrico, acidez e lesões foram quantificadas em 3 pontos do tempo após administração da carga de ácido intragástrico: 0, 60 e 120 min. Todos os parâmetros foram registados nas mesmas experiências.
Tratamentos Lafutidine e cimetidina
Lafutidine (Taiho, Tóquio, Japão) e cimetidina (Sigma, Viena, Áustria) foram suspensos em carboximetilcelulose (0,5%) a uma concentração de 2 e 6 mg /ml (lafutidine) e 2 mg /ml (cimetidina). Lafutidine (10 e 30 mg /kg), cimetidina (10 mg /kg) ou o seu veículo foi administrado por via oral por gavagem com um volume de 5 ml /kg 30 min antes do estômago foi exposto a HCl. A administração intragástrica foi realizada com um tubo de alimentação infantil macio (diâmetro externo 2,6 milímetros; SIMS Portex, Hythe, Reino Unido). Loading ácido gástrico
HCl (0,25 M) foi administrada intragastricamente a um volume de 10 ml /kg através do mesmo tubo de alimentação infantil macio que foi utilizada para a administração de lafutidine. Após este ácido intragástrico carregar os animais não foram autorizados a beber até que a gravação dos parâmetros experimentais.
C-Fos imunocitoquímica
c-Fos-like imunorreatividade foi visualizado como descrito anteriormente [2, 10]. Duas horas após o carregamento ácido intragástrico, os ratos foram sacrificados por injecção intraperitoneal de uma sobredose de pentobarbital (200 mg /kg). Após a eutanásia, os animais foram perfundidos transcardialmente com paraformaldeído tamponizado (4%, 75 ml) enquanto a aorta descendente foi apertada. Os tronco cerebral foram removidos e pós-fixados durante a noite em paraformaldeído tamponizado (4%) a 4 ° C. Em seguida, os tecidos foram crioprotegidos durante 48 horas em 20% de sacarose a 4 ° C, congelados por imersão em metilbutano em gelo seco e armazenadas a -70 ° C até à sua utilização. cortes coronais em série de 40 um de espessura foram cortadas a partir do tronco cerebral ao longo de todo o comprimento da área postrema (AP) com um criostato.
imunocitoquimica foi efectuada com secções de flutuação livre que primeiro foram lavadas uma vez em solução salina tamponada com fosfato 0,1 M (PBS), em seguida, lavadas duas vezes em tampão de lavagem (WB; 0,1 M de PBS com 0,3% de Triton X 100), e incubadas em 0,3% H 2O 2 durante 30 min. Após mais três lavagens (cada uma durante 10 min em BM), os tecidos foram incubados com o anticorpo primário (soro policlonal de coelho anti-c-Fos, 1: 20000, Santa Cruz Biotech, Santa Cruz, Califórnia, EUA) durante 40 h a 4 ° C. Este anticorpo foi dissolvido em 0,1 M de PBS contendo 0,3% de Triton X 100, 1% de albumina de soro bovino e soro de cabra a 2,5%. Em seguida, as secções foram lavadas três vezes em WB e incubadas durante 45 min numa solução contendo o anticorpo biotinilado secundário (IgG de cabra anti-coelho, Vectastain Elite Kit, Vector Laboratories, Burlingame, Califórnia, EUA). Após três lavagens em outros WB foram incubadas durante 1 h em complexo (kit Vectastain Elite) avidina-biotina. Os tecidos foram lavados depois e desenvolvido com 3,3-diaminobenzidina (DAB) substrato (Kit Elite Vectastain) intensificou-se com sulfato de níquel por 200 s. Subsequentemente, as secções foram montadas em lâminas cobertas de gelatina, e compensados ​​em xilol seco ao ar (100%). As lâminas foram lamínulas com Entellan (Merck, Darmstadt, Alemanha). Para controlar a especificidade do sinal do anticorpo anti-c-Fos, um péptido c-Fos bloqueio (Santa Cruz Biotech) foi adicionado a uma diluição de anticorpo primário. As secções de tronco cerebral
imunocitoquimicamente transformados foram examinadas com um microscópio de luz (Axiophot , Zeiss, Oberkochen, Alemanha) acoplado a um sistema computadorizado de análise de imagem (MCID-M2, versão 3.0, Rev 1.1, Imaging Research Inc., Brock University, St. Catharines, Ontario, Canadá). As seções foram codificados de tal forma que o examinador não sabia qual grupo de tratamento de onde vieram. Quatro secções de tronco cerebral de cada animal foram analisados, e todas as células de c-fos-positivas foram contadas aleatoriamente em um dos lados do NTS e AP. A fim de evitar que as mesmas células foram contadas duas vezes, apenas cada segunda secção foi retirada para análise. Todas as contagens em cada secção de cada animal foram a média para dar o número de células de c-fos-positiva no NTS e AP desse animal. Estes valores médios de cada animal foram então usados ​​para calcular o número médio de células de c-Fos-positivos por secção no NTS unilaterais e AP de cada grupo experimental.
Determinação do volume gástrico
Os ratos foram sacrificados por injecção intraperitoneal injecção de uma overdose de pentobarbital (200 mg /kg) imediatamente (0 min), 60 ou 120 minutos após a carga de ácido intragástrico. Após a exposição do estômago por uma laparotomia mediana, o cárdia e piloro foram presas. O estômago foi excisado e pesado (peso 1). Depois de recolher o seu conteúdo em um frasco, o estômago foi re-pesado (peso 2). O volume do conteúdo gástrico foi calculado pela diferença de peso 2 - peso 1 e expressa em relação ao peso corporal (g /kg de peso corporal). Além disso, o volume gástrico recuperado de 60 e 120 minutos após a carga de ácido gástrico também foi expressa em relação ao volume, medida imediatamente (0 min), após o carregamento do ácido gástrico.
PH intragástrico
Após a eutanásia, o abdómen foi aberto por uma laparotomia mediana. O estômago foi extirpado e abertos, e o pH intragástrico foi determinada com um medidor de pH que foi equipado com um eléctrodo de pH Micro Line (ThermoOrion, New Hyde Park, NY, EUA) e calibrado com soluções padrão de pH 4,01, 7,00 e 10,00.
Titulação do conteúdo gástrico
os conteúdos gástricos foram esvaziados para dentro de tubos, brevemente centrifugada a 5600 × g (10000 rpm) e diluiu-se 1:10, 1:25 ou 1:50 em 5 ml de água destilada, a taxa de diluição dependendo do volume do conteúdo gástrico que foram recuperados. Se não suco gástrico foi recuperado, foi utilizada a quantidade apropriada de quimo. A titulação foi realizada com NaOH 0,1 M numa titulação Aparelho TitroLine alfa (Schott-Geräte GmbH, Hofheim, Alemanha), até que o ponto final de pH = 7,0 foi atingido. A quantidade de equivalentes de ácido presente no estômago foi calculado da mmol, e acidez gástrica medida 60 e 120 minutos após a carga de ácido gástrico também foi expressa em relação à acidez medida imediatamente (0 min), após o carregamento do ácido gástrico.
Lesão gástrica
a integridade da mucosa gástrica foi examinada ao nível macroscópico. Para quantificar os danos macroscopicamente visíveis, o estômago foi fixado plana sobre uma placa revestida com elastómero de silicone e coberta com PBS. O estômago foi fotografada, a imagem transferida a um computador pessoal e lesão gástrica macroscópica avaliada com planimetria computadorizada por um observador que desconhecia o tratamento experimental [1]. A área coberta por danos da mucosa hemorrágica visível foi expressa como uma percentagem da área total da mucosa glandular. Estatísticas
A avaliação estatística dos resultados foi realizada sobre o SPSS 15.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, EUA) com one-way análise de variância (ANOVA). Estes testes foram realizados apesar do fato de que os dados de alguns grupos experimentais não cumpria o critério da distribuição normal, porque essa limitação foi explicado pelo número limitado de animais por grupo e porque não havia nenhuma razão para supor uma distribuição não-normal . A homogeneidade das variâncias foi avaliada pelo teste de Levene. Se foi encontrada uma interação significativa entre os fatores de teste, a análise post-hoc de diferenças entre os grupos foi feita com o Tukey HSD (diferença honesta significativa) de teste ou, em caso de falta de homogeneidade das variâncias, com o teste de Games-Howell. Todos os dados são apresentados como média ± EPM, N referindo-se o número de ratos em cada grupo. Tendo em vista o caráter exploratório do estudo, valores de probabilidade ≤ 0,1 [11, 12] foram considerados como estatisticamente significativos
Resultado
Estudo 1:. Efeitos da lafutidine na expressão de c-Fos no tronco cerebral, pH intragástrico e lesão da mucosa gástrica após o carregamento ácido intragástrico
exposição da mucosa gástrica do rato a HCl (0,25 M) aumentou a expressão de c-Fos no NTS e AP numa extensão significativa (Figuras 1A, B e 2A, B), mas, em relação à solução salina, não causar qualquer dano da mucosa gástrica significativa (Danzer et al., 2004). Uma observação semelhante foi feita no presente estudo, uma vez que, em média, menos de 0,2% da mucosa glandular apresentava alterações macroscópicas, principalmente petéquias (Figura 2C). Embora o pH da solução de HCl administrada intragastricamente foi de 0,51, o pH do suco gástrico 2 h após o desafio HCl tinha subido para mais de 2,5 (Figura 2D). Figura 1-expressão evocado ácido gástrico de c-Fos no núcleo do trato solitarii (NTS) e área postrema (AP) num rato tratado com veículo (A) e de ratos tratados com uma outra lafutidine (B). Lafutidine (30 mg /kg) ou do seu veículo (0,5% de carboximetil celulose) foi administrado por via oral 30 minutos antes de o estômago foi exposto a uma carga de ácido exógeno (M HCl 0,25). Duas horas pós-HCl células c-Fos-positivas no tronco cerebral foram visualizadas por imunocitoquímica.
Figura 2 Efeito de lafutidine (10 e 30 mg /kg), em relação ao veículo, sobre o número de células positivas para c-fos em (a) a solitarii núcleo do trato (NTS) e (B) a área postrema (AP), (C) a lesão da mucosa gástrica macroscópica (expressa como uma percentagem da área da mucosa glandular) e (D) o pH intragástrico medida 2 h após a exposição do estômago de HCl (0,25 M). Lafutidine ou veículo foi administrado por gavagem gástrica 30 min antes da administração de HCl. Os valores representam médias + SEM, n = 8, se não indicado de outra forma. * P ≤ 0,1, ** P ≤ 0,05 comparativamente ao veículo.
Após a administração intragástrica de lafutidine (10 e 30 mg /kg), a área de lesão gástrica foi nominalmente reduzido, mas este efeito não foi estatisticamente significativa (Figura 2C) . Em contraste, o pH intragástrico foi aumentada em qualquer das doses de lafutidine (Figura 2D), de forma significativa, como revelado por ANOVA de uma via (F (2,20) = 11,08, P < 0,001) e o teste post-hoc teste. A expressão evocados-ácido de c-Fos no NTS (Figuras 1A, B e 2A) foi reduzida por lafutidine (10 e 30 mg /kg), e uma ANOVA divulgado este efeito seja estatisticamente significativa (F (2,19) = 4,30, P = 0,029). . Pelo contrário, a capacidade de lafutidine para atenuar expressão evocados-ácido de c-Fos na AP não atingiram significância estatística (Figuras 1A, B e 2B)
Estudo 2: Efeitos de lafutidine sobre o curso de tempo de gástrica de volume, acidez e ferimentos após intragástrico carregamento ácido
Como no estudo 1, desafio do estômago com HCl 0,25 M causado dano macroscópico menor, que em média percorrida menos de 0,2% da área da mucosa glandular (Figura 3A). A extensão dos danos não diferiram significativamente entre os pontos de tempo 0, 60 e 120 minutos pós-HCl em ratos tratados com veículo e-cimetidina. Em ratos tratados com lafutidine, no entanto, a extensão do dano 120 minutos após a provocação ácido foi significativamente menor do que imediatamente após o carregamento de ácido gástrico (Figura 3A). Figura 3 Efeito de lafutidine (30 mg /kg) e cimetidina (10 mg /kg), em relação ao veículo, em (A), lesão da mucosa gástrica macroscópica (expressa como uma percentagem da área da mucosa glandular), (B) intragástrico acidez (em equivalentes de ácido mmol) e (C) o peso do conteúdo gástrico (g /kg de peso corporal), medida imediatamente (0 min), 60 e 120 minutos após a exposição do estômago de HCl (0,25 M). Lafutidine, cimetidina ou veículo foi administrado por gavagem gástrica 30 min antes da administração de HCl. Os valores representam médias + SEM, n = 8. ** P ≤ 0,05 versus tempo 0 minutos sob o mesmo tratamento, + P ≤ 0,1, ++ P ≤ 0,05 versus tempo de 60 minutos sob o mesmo tratamento, ° P ≤ 0,1, ° ° P ≤ 0,05 comparativamente ao veículo ao mesmo ponto de tempo pós-HCl.
a quantidade de equivalentes de ácido presente no lúmen gástrico caiu significativamente durante o intervalo de 2 h de pós-HCl em todos os grupos de tratamento (Figura 3B). A maior parte da gota da acidez gástrica ocorreu dentro de 60 minutos pós-HCl, e não houve diferença significativa nos níveis de acidez gástrica 0 e 60 min pós-HCl entre os três grupos de tratamento. Em ratos tratados com lafutidine houve mais uma queda significativa da acidez gástrica durante o período de 60-120 minutos pós-HCl, uma alteração que não foi observada em ratos tratados com veículo e-cimetidina (Figura 3B). A diminuição da acidez gástrica 120 minutos pós-HCl em ratos lafutidine-tratado foi significativamente mais acentuado do que nos animais tratados com veículo (Figura 3B). Quando gástrica acidez medida 60 e 120 minutos pós-HCl foi expressa em relação à acidez medida imediatamente (0 min), após o carregamento do ácido gástrico, verificou-se que a queda de gástrica acidez 120 minutos pós-HCl observada em ratos tratados com lafutidine foi mais pronunciado, em comparação com o observado em ratos tratados com veículo e-cimetidina (Figura 4A). Figura 4 Efeito da lafutidine (30 mg /kg) e cimetidina (10 mg /kg), em relação ao veículo, em (A) acidez intragástrica e (B) em peso do conteúdo gástrico medido 60 e 120 minutos após a exposição do estômago à HCl (0,25 M) e expresso como uma percentagem dos seus respectivos valores de medição imediatamente após o carregamento de ácido gástrico (0 min). Lafutidine, cimetidina ou veículo foi administrado por gavagem gástrica 30 min antes da administração de HCl. Os valores representam médias + SEM, n = 8. ** P ≤ 0,05 versus tempo 0 minutos sob o mesmo tratamento, + P ≤ 0,1, ++ P ≤ 0,05 versus tempo de 60 minutos sob o mesmo tratamento, ° P ≤ 0,1, ° ° P ≤ 0,05 comparativamente ao veículo ao mesmo ponto de tempo pós-HCl.
o peso do conteúdo gástrico em relação ao peso corporal (g /kg) foi calculado como uma medida indirecta de esvaziamento gástrico. Como mostrado na Figura 3C, o peso do conteúdo gástrico caiu significativamente ao longo do tempo, em todos os grupos de tratamento e 60, bem como 120 minutos pós-HCl foi significativamente menor do que imediatamente após o carregamento do ácido gástrico. Lafutidine- ratos tratados com cimetidina e diferiram de ratos tratados com veículo, em dois aspectos. Primeiro, imediatamente após o desafio com o peso de ácido do conteúdo gástrico foi significativamente maior em animais tratados com lafutidine- e cimetidina do que nos ratos de controlo (Figura 3C). Em segundo lugar, quando medida 120 minutos pós-HCl em animais lafutidine- e tratados com cimetidina, este parâmetro era significativamente inferior do que a medida 60 min pós-HCl, enquanto que em ratos tratados com veículo, os pesos conteúdo gástrico gravado 60 e 120 minutos pós-HCl não foram significativamente diferentes um do outro (Figura 3C).
Uma vez que o volume inicial gástrica em animais lafutidine- e tratados com cimetidina foi maior do que nos ratos de controlo (Figura 3C), o curso de tempo das alterações do volume gástrico no tratamento diferente grupos é difícil comparar uma com a outra porque pode ser diferencialmente influenciado pelo volume inicial. Por esta razão, o conteúdo gástrico recuperado de 60 e 120 minutos pós-HCl foram também expressos como uma percentagem do volume medida imediatamente (0 min) após o carregamento de ácido gástrico (Figura 4). Deste modo, verificou-se que a diminuição do volume de gástrica 120 minutos pós-HCl em ratos tratados com lafutidine foi mais pronunciada do que em ratos tratados com veículo (Figura 4B).

Discussão Os principais resultados deste estudo podem ser resumidos como se segue. Lafutidine inibe a sinalização vagais aferentes de um insulto de ácido gástrico, o que levanta a possibilidade de que lafutidine inibe a dor gástrica induzida por ácido. A capacidade de lafutidine para diminuir a acidez intragástrica após exposição a HCl em excesso não pode ser explicada pela sua actividade anti-secretora e é susceptível de reflectir de diluição e /ou o esvaziamento da carga de ácido para o duodeno.
Sinalização vagais aferentes de um insulto ácido gástrico estava visualizados por expressão de c-Fos no tronco cerebral medular, um método padrão em neuroanatomia funcional para delinear a ativação evocadas por estímulo dos neurônios [13, 14]. Desta forma, foi previamente demonstrado que a exposição do estômago de rato a concentrações em excesso de HCl estimula os neurónios no tronco cerebral [1, 2]. A aparência da proteína c-Fos foi medida 2 h de pós-HCl, uma vez que a tradução de ARNm de c-fos em proteína c-Fos atinge o seu máximo entre 1 e 3 h pós-estímulo [2]. Foram estabelecidos limites a análise para o tronco cerebral, porque a exposição do estômago de rato a HCl não conseguiu induzir qualquer ARNm de c-fos e a proteína c-Fos no corno dorsal da região posterior da medula torácica que recebe a entrada gástrica através de neurónios aferentes espinais [1, 2]. Estes dados e a capacidade de vagotomia subdiafragmática bilateral crónica para suprimir a expressão evocada pelo ácido gástrico de c-fos mRNA [1] indicam que desafio gástrica com HCl é sinalizada no tronco cerebral através de aferentes vagais.
A indução de mRNA c-fos e a proteína c-Fos no NTS, a área de projecção central dos aferentes vagais, está relacionada com a concentração de HCl administrada intragastricamente [1, 2]. Uma análise comparativa da indução de c-fos medular e danos gástricos indica que a sinalização aferente do desafio ácido gástrico não está directamente relacionada com a formação da lesão da mucosa evidente, uma vez que a expressão de c-Fos no NTS podem ser evocados por concentrações de HCl (0,15 - 0,35 M), que não induzem quaisquer lesões macroscópicas sensíveis e causar poucos danos histológica [1, 2]. Porque as concentrações suprafisiológicas de HCl (0,15 M ou superiores) são necessárias para induzir c-Fos no NTS, foi inferido que só um aumento massivo no gradiente de protões através da barreira da mucosa gástrica de ácido estanque é capaz de conduzir protões suficientes em a lâmina, onde podem estimular as fibras nervosas vagais aferentes, quer directa ou indirectamente através de factores neuroactivos libertados no tecido [2]. Esta configuração experimental é, portanto, pensado para modelar circunstâncias fisiopatológicos onde retrodifusão de ácido luminal estimula aferentes vagais.
Os dados do estudo mostram que lafutidine administrados intragastricamente em doses (10 e 30 mg /kg) declarado anteriormente não gastroprotective [5 , 6, 15] reduziu a sinalização aferente de um insulto de ácido gástrico para o NTS. Esta observação é consistente com a capacidade de outro histamina H antagonista do receptor 2, cimetidina, omeprazol e o inibidor da bomba de protões para reduzir a expressão evocados-ácido gástrico de c-Fos no tronco cerebral de rato [2]. Uma vez que as reacções comportamentais ao desafio ácido gástrico indicam que a expressão de c-Fos no NTS é um correlato da nocicepção ácido gástrico [2, 3] que pode ser proposto que lafutidine tem um efeito inibitório sobre chemonociception gástrico. Este efeito antinociceptivo, no entanto, é improvável que ser explicado pela actividade anti-secretora de lafutidine, dado que a exposição da mucosa gástrica em excesso de ácido exógeno, tal como HCl 0,25 M, por si só irá suprimir a secreção endógena de ácido por um mecanismo de feedback negativo [16-19 ]. Como consequência, duas explicações alternativas precisam ser previsto.
Uma explicação que vem à mente é assumir que lafutidine, como a cimetidina [2], interfere com vias aferentes vagais que sinalizam desafio ácido da mucosa gástrica para o tronco cerebral. Lafutidine pode fazê-lo (1) através da inibição da estimulação de neurónios aferentes vagais por ácido não incomoda a mucosa gástrica, (2), pressionando condução do sinal em neurónios aferentes vagais, (3) através do bloqueio da transmissão sináptica entre as terminações centrais dos aferentes vagais e NTS neurónios e /ou (4) através da redução da excitabilidade dos neurónios do tronco cerebral que expressam c-Fos, em resposta a entrada a partir do estômago.
qual destas possibilidades aplica-se aos efeitos de lafutidine cimetidina e requer a identificação do local de acção, onde antagonistas do receptor H 2 interferir com as vias aferentes vagais. Foi previamente demonstrado que os neurónios aferentes vagais que sinalizam desafio de ácido gástrico para o NTS são insensíveis ao efeito neurotóxico da capsaicina [1] e que a activação desta via por ácido é independente de prostaglandinas [20]. O sistema vagais aferentes inibida por lafutidine parece, assim, ser fundamentalmente diferente da dos neurónios aferentes espinais sensíveis à capsaicina que se pensa mediar a capacidade de lafutidine para proteger a mucosa gastrointestinal de lesão [6-8, 15, 21-23]. Enquanto aferentes vagais pareceu ser inibido através de um mecanismo dependente do receptor H 2, aferentes espinais sensíveis à capsaicina são activados ou sensibilizada por lafutidine, mas não outros antagonistas 2 do receptor H, o que resulta na libertação do protector mensageiro calcitonina relacionado com o gene do peptídeo [6-8, 15, 21-23]. As prostaglandinas podem também desempenhar um papel no efeito gastroprotector do lafutidine contra o stress [23].
Outra explicação para o efeito inibitório da lafutidine sobre a expressão de c-fos evocados-ácido gástrico no tronco cerebral leva em conta que lafutidine diminuiu significativamente a acidez da carga de ácido gástrico exógena. Qualquer que seja o mecanismo lafutidine facilita a eliminação da carga de ácido gástrico, que também irá diminuir o estímulo para a sinalização vagais aferentes ao NTS. Qual dos dois mecanismos - inibição direta do sistema aferente vagal ou redução da força de estímulo - é mais relevante não pode ser decidida sem caracterização eletrofisiológica do efeito do H 2 antagonistas dos receptores no sistema vagais aferentes
Um direta. a análise do efeito de protector gástrico lafutidine no presente estudo foi de fora do escopo porque a carga de ácido gástrico usado aqui (M HCl 0,25) induziu apenas danos gástricos mínima que era indistinguível da observada depois da administração intragástrica de solução salina [2]. Como consequência, lesão induzida por ácido gástrico permaneceu inalterada por lafutidine no estudo 1, embora houvesse uma tendência para a supressão da formação de lesão gástrica. Análise do decurso de tempo do efeito de lafutidine no estudo 2, no entanto, revelou que lafutidine, ao contrário do veículo, acelerou a recuperação de lesão gástrica induzida por HCl.
O potencial de gastroprotetora lafutidine está ainda prevista a partir do seu efeito para aumentar a intragástrico pH e reduzir a acidez gástrica após a exposição a uma carga de ácido exógeno. Uma vez que, como discutido acima, a secreção gástrica ácida endógena é suprimida por uma carga de ácido exógeno tão elevada como HCl 0,25 M, a acção de lafutidine para diminuir a acidez gástrica pode ser o resultado de diluição, neutralização ou de esvaziamento da carga de ácido para o duodeno. Foi previamente descobriram que a exposição do estômago para concentrações suprafisiológicas de ácido inibe o esvaziamento gástrico e provoca a secreção de fluido [2, 9], que no presente estudo foi espelhada pela diminuição relativamente lenta do volume gástrico ao longo do intervalo pós 2 h . -HCl
Lafutidine e cimetidina apareceu para acelerar o esvaziamento gástrico durante o período de 60-120 minutos pós-HCl como indirectamente deduzida a partir de um decréscimo no volume gástrico que foi mais pronunciada do que nos animais tratados com veículo.

• adenomyoma gástrica no corpo do estômago: um relatório do caso
• Três casos de gastrectomia total laparoscópica com esophagojejunostomy intracorporeal para câncer gástrico em remanescentes stomach