Tuovissa signaloinnin happo-haastoi rotan mahan estyy ja mahahapon poistamista tehostetaan lafutidine

afferent signalointia happo-haastoi rotan vatsa on estetty ja mahahapon poistamista tehostetaan lafutidine
Abstract
tausta
Lafutidine on histamiini H 2-reseptorin antagonisti, gastroprotektiivinen vaikutus, joka liittyy sen eritystä estävää aktiivisuutta ja sen kykyä aktivoida tuntohermosolun riippuva mekanismi puolustukseen. Tämä tutkimus selvitti mahalaukun sisäinen anto lafutidine (10 ja 30 mg /kg) muutetaan vagaalisten tuovissa signalointi, limakalvon vaurioita, intragastrisella happamuutta ja mahalaukun tyhjenemistä jälkeen mahahapon haaste. Tool Menetelmät
Adult rottia hoidettiin ajoneuvo, lafutidine (10-30 mg /kg) tai simetidiinin (10 mg /kg), ja 30 minuuttia myöhemmin niiden mahat altistettiin eksogeeniselle HCI: a (0,25 M). Aikana 2 h post-HCI, mahan pH-arvo, mahalaukun tilavuus, mahalaukun happamuutta ja laajuus makroskooppisen mahalaukun limakalvon vauriot määritettiin ja aktivointi neuronien aivorungon visualisoitiin c-Fos immunosytokemia.
Tulokset
mahahapon haaste parannettu ilmaisua c-Fos tumassa tractus solitarii mutta aiheuttivat vain vähäisiä vaurioita mahan limakalvon. Lafutidine vähensi HCl-herätti ilmentyminen c-Fos että NTS ja koholla mahan pH-arvo seuraavat mahalaukun sisäinen anto ylimääräisen HCl. Tarkempi analyysi osoitti, että gastroprotektiivinen vaikutus lafutidine vastaan ​​Happo viivästyi ja meni rinnalla helpottamista mahalaukun tyhjenemistä, mitattuna epäsuorasti mahalaukun tilavuuden muutoksia, ja vähentää mahalaukun happamuutta. H 2-reseptorin antagonisti simetidiinilla samanlainen mutta heikompi vaikutus.
Päätelmä
Nämä havainnot osoittavat, että lafutidine estää kiertäjähermo- afferent signalointia mahahapon loukkaus, joka voi heijastaa estävä vaikutus hapon aiheuttama vatsakipua . Kyky lafutidine laskevan mahalaukun sisällön happamuutta altistuksen jälkeen ylimäärä HCl ei voida selittää sen estävät eritystä vaan näyttää heijastavan laimennus ja /tai tyhjennys hapon kuorman pohjukaissuoleen. Tämä profiili toimien korostaa käsitystä, että H 2-reseptoriantagonistit voivat suojata mahalaukun limakalvon happo loukkaantumisen riippumatta niiden kyvystä estää mahahapon eritystä.
Tausta
Altistuminen mahalaukun limakalvon tietoisen rottien liialliseen HCI: a (0,25 M) signaloidaan, kautta vagaalinen afferentit, tumaan tractus solitarii (NTS) aivorungossa, jossa hermosolujen aktivointi voidaan visualisoida c-fos mRNA in situ -hybridisaatio ja c-Fos immunosytokemia [1, 2]. Analyysi käyttäytymiseen reaktioita mahahapon haasteeseen osoittaa, että vagaalisia afferent neuronien tärkeä rooli mahahapon nosiseptioon [3]. Vagaalisen tuovissa signalointi mahahapon haaste tiedetään estävät morfiinin [1], yhdistelmällä glutamaatin NMDA ja takykiini- NK 1 ja NK 2-reseptoriantagonisteja [4] sekä estäviä aineita kuten simetidiini ja omepratsoli [2].
Kuten simetidiiniä, lafutidine on histamiini H 2-reseptorin antagonisti, joka on osoitettu suojaavan happamien liittyvän mahalaukun vamman jyrsijöillä [5-8]. Lisäksi on näyttöä siitä, että gastroprotektiivinen toiminta lafutidine liittyy vapautumista neuropeptidipitoisuudessa peräisin afferent hermopäätteitä vatsassa [7, 8]. Tämän farmakologisen profiilin kysymys siitä, onko tämä lafutidine pystyisi muuttamaan kiertäjähermo- tuovissa signalointi mahahapon haaste aivorungon. Siksi ensimmäinen Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli testata vaikutusta lafutidine mahahapon aikaansaaman ilmentymisen c-Fos rotan aivorungon. Lisäksi mahan pH muistiin ja aste makroskooppinen mahalaukun vahingon määrällisesti.
Kun näiden kokeiden havaittiin, että lafutidine helpottaa poistamista eksogeenisen hapon kuorman mahasta. Koska eritystä endogeenisen mahahapon vaimennetaan eksogeeninen happo kuormaa, toiminta lafutidine nostaa mahan pH-arvo ei voi selittää sen eritystä ehkäisevä vuoksi histamiini H 2-reseptorin eston. Näin ollen tämä vaikutus lafutidine johtuu todennäköisesti laimennus- ja /tai tyhjennyksen hapon kuorman pohjukaissuoleen. Tätä näkemystä tukee se havainto, että altistuminen vatsassa ylimääräinen happo estää mahalaukun tyhjenemistä ja aiheuttaa nesteen eritystä [2, 9]. Toisena tavoitteena oli selvittää siten tutkia, onko lafutidine muuttaa ajan kuluessa mahalaukun vamman, mahalaukun tilavuuden ja mahan happamuutta jälkeen eksogeenisen hapolla kuormaa ja onko vaikutusta lafutidine näihin parametreihin jakavat simetidiinin. Tool Menetelmät
Eläimet
Tutkimus toteutettiin naisten samanikäisiin Sprague-Dawley-rottia (Division of Laboratory Animal Science and Genetics, Department of Biomedical Research, Medical University of Vienna, Himberg, Itävalta) painavat 170-250 g. Eläimiä pidettiin ryhmissä 3 häkkiä kohden kontrolloidussa lämpötilassa (21 ° C) ja 12 tunnin valo /pimeä sykli (valot päälle klo 06:00, valot pois klo 18.00). Kaikki kokeet hyväksynyt eettinen komitea liittovaltion tiede- ja tutkimus- ja toteutettiin direktiivin mukaisesti Euroopan yhteisöjen neuvoston 24. marraskuuta 1986 (86/609 /ETY). Kokeet suunniteltiin siten, että käytettyjen eläinten määrä ja niiden kärsimyksiä minimoitiin.
Kokeelliset protokollat ​​
Kaksi tutkimusta suoritettiin. Seitsemän päivää ennen mahahapon lastaus kokeilu, eläimet satunnaistettiin hoitoryhmään käyttäen satunnaistaminen ohjelmisto (Randomizer for Clinical Trials 1.8.0, Institute of Medical Informatics, tilastot ja dokumentointi, Medical University Graz, Itävalta). Päivänä ennen happo lastaus kokeessa rotat pidettiin ravinnotta ja paastosivat 18 tuntia, jotta vatsa oli tyhjä, mutta oli vapaa pääsy veteen. Ensimmäisessä tutkimuksessa, vaikutuksia kaksi annosta lafutidine (10 ja 30 mg /kg) mahahapon aikaansaaman c-Fos ilmentymisen aivorungon tajuissaan rotilla tutkittiin yhdessä mahan happamuutta ja vammoja. Lafutidine tai sen vehikkeliä (0,5% karboksimetyyliselluloosa) annettiin peroraalisesti 30 minuuttia ennen vatsa oli altistunut haitalliselle hapon konsentraatio (0,25 M HCI) letkuruokinnalla. Kun vatsansisäisinä hoito eläimiä ei enää saa juoda kunnes tallennus koeparametreihin. Kaksi tuntia sen jälkeen, kun mahahapon lataamisen määrä c-Fos-immunoreaktiivisia neuronien aivorungon, mahan pH-arvo ja laajuus macrosopic mahalaukun limakalvon vauriot määritettiin.
Toisessa kokeessa, vaikutukset kerta-annoksen lafutidine (30 mg /kg) tai simetidiinin (10 mg /kg) ajankul- mahalaukun tilavuus, happamuus ja loukkaantumisen jälkeen altistumisen eksogeenisen hapolla kuormitus tutkittiin. Lääkkeet sekä niiden ajoneuvojen annettiin mahansisäisesti letkulla 30 minuuttia ennen vatsa oli altistunut HCl. Kun vatsansisäisinä hoito eläimiä ei enää saa juoda kunnes tallennus koeparametreihin. Mahalaukun tilavuus, happamuus ja vahinkoa kvantitoitiin 3 ajankohtina antamisen jälkeen mahansisäisillä acid kuormitus: 0, 60 ja 120 min. Kaikki parametrit kirjattiin samassa kokeessa.
Lafutidine ja simetidiini hoitoja
Lafutidine (Taiho, Tokio, Japani) ja simetidiini (Sigma, Wien, Itävalta) suspendoitiin karboksimetyyliselluloosan (0,5%), jonka pitoisuus on 2 ja 6 mg /ml (lafutidine) ja 2 mg /ml (simetidiini). Lafutidine (10 ja 30 mg /kg), simetidiini (10 mg /kg) tai sen vehikkeliä annettiin suun kautta letkuruokinnalla tilavuudessa 5 ml /kg 30 minuuttia ennen vatsan altistettiin HCI: a. Intragastrinen anto toteutettiin pehmeällä imeväisruokinnasta putki (ulkohalkaisija 2,6 mm, SIMS Portex, Hythe, Iso-Britannia).
Mahahappo lastaus
HCI (0,25 M) annettiin vatsansisäisesti tilavuudessa 10 ml /kg läpi samat pehmeän imeväisruokinnasta putki, jota käytettiin annon lafutidine. Tämän jälkeen mahansisäisillä happo lastaus eläimiä ei enää saa juoda kunnes tallennus koeparametreihin.
C-Fos immunosolukemialliset
c-Fos-kaltainen immunoreaktiivisuus tehtiin näkyväksi kuten aiemmin on kuvattu [2, 10]. Kaksi tuntia sen jälkeen intragastrisen happo lastaus, rotat tapettiin injektoimalla vatsaonteloon yliannostuksen pentobarbitaali (200 mg /kg). Seuraavat eutanasia, eläimet sydämen läpi valutettiin puskuroitua paraformaldehydiä (4%, 75 ml), samalla kun laskeva aortta kiinnitetty. Brainstems poistettiin ja jälkikiinnitettiin yön yli puskuroidussa paraformaldehydissä (4%) 4 ° C: ssa. Sitten kudokset kylmäsuojattiin 48 h 20% sakkaroosia 4 ° C: ssa, jäädytettiin upottamalla metyylibutaani kuivan jään päällä ja niitä säilytettiin -70 ° C: ssa käyttöön asti. Serial koronan osa 40 um paksuus leikattiin aivorungon koko pituudelta postrema-alueelle (AP), jossa kryostaatissa.
Immunosytokemia suoritettiin vapaasti kelluva osaa, jotka ensimmäinen pestiin kerran 0,1 M fosfaattipuskuroituun suolaliuokseen (PBS), sitten pestiin kahdesti pesupuskurilla (WB; 0,1 M PBS: llä, jossa on 0,3% Triton X 100), ja niitä inkuboitiin 0,3% H 2O 2 30 min. Kolmen pesua (kukin 10 min WB), kudokset inkuboitiin primaarisen vasta-aineen (kanin polyklonaalinen anti-c-Fos, 1: 20000, Santa Cruz Biotech, Santa Cruz, California, USA) 40 tunnin ajan 4 ° C. Tämä vasta-aine liuotettiin 0,1 M PBS: ssä, joka sisälsi 0,3% Triton X 100, 1% naudan seerumin albumiinia ja 2,5% vuohen seerumia. Sen jälkeen leikkeitä pestiin kolme kertaa WB ja inkuboitiin 45 min liuoksessa, joka sisälsi biotinyloidun sekundaarisen vasta-aineen (vuohen anti-kani-IgG, Vectastain Elite Kit, Vector Laboratories, Burlingame, Kalifornia, USA). Sen jälkeen, kun kolme muuta pesun WB niitä inkuboitiin 1 h avidiini-biotiini-kompleksin (Vectastain Elite Kit). Kudokset huuhdellaan jälkeenpäin ja kehitettiin 3,3-diaminobentsidiini (DAB) alustan (Vectastain Elite Kit) tiivistetään nikkelisulfaatti 200 s. Tämän jälkeen leikkeet kiinnitettiin liivate peittämälle dioja, ilmakuivattiin ja selvitetty ksyloliin (100%). Objektilasit peitettiin Entellaniin (Merck, Darmstadt, Saksa). Kontrolloida spesifisyys anti-c-Fos-vasta-signaalin, c-Fos estävän peptidin (Santa Cruz Biotech) lisättiin ensisijaisen vasta-laimennus.
Immunosytokemialli- käsitelty aivorungon leikkeet tutkittiin valomikroskoopilla (Axiophot , Zeiss, Oberkochen, Saksa) kytkettynä tietokoneistetun kuva-analyysi-järjestelmän (Jäljitys-M2, versio 3.0, Rev 1.1, Imaging Research Inc., Brock University, St. Catharines, Ontario, Canada). Leikkeitä koodattu siten, että tutkija ei tiedä mikä hoitoryhmässä he tulivat. Neljästä osasta peräisin aivorungon kunkin eläimen analysoitiin, ja kaikki c-Fos-positiiviset solut satunnaisesti laskettiin toisella puolella NTS ja AP. Jotta voitaisiin välttää, että samat solut laskettiin kahdesti, vain joka toinen osa otettiin analyysiin. Kaikki lasketaan jokaisessa jaksossa kunkin eläimen otettiin keskiarvo, jolloin määrä c-Fos-positiivisten solujen NTS ja AP tuon eläimen. Nämä keskiarvot kustakin eläimestä käytettiin sitten laskea keskimääräinen lukumäärä c-Fos-positiivisia soluja kohti osio yksipuolinen NTS ja AP kunkin koeryhmän.
Määrittäminen mahalaukun tilavuuden
rotat tapettiin vatsaonteloon injektio yliannostuksen pentobarbitaali (200 mg /kg) välittömästi (0 min), 60 tai 120 minuutin kuluttua mahansisäisillä happo lastaus. Altistuksen jälkeen vatsan jonka keskiviivan laparotomy, cardia ja pylorus puristettiin. Vatsa leikattiin ja punnittiin (paino 1). Keräämisen jälkeen sen sisältö lääkepulloon, maha punnittiin uudelleen (paino 2). Tilavuus mahalaukun sisällön laskettiin erotus painon 2 - paino 1 ja ilmaistu suhteessa kehon paino (g /painokilo). Lisäksi mahalaukun tilavuus talteen 60 ja 120 min jälkeen mahahapon lastaus ilmaistiin myös suhteessa tilavuuteen mitataan välittömästi (0 min) jälkeen mahahapon lastaus.
Mahan pH-arvo
jälkeen eutanasiaa, vatsa avattiin jonka keskiviivan laparotomy. Vatsa leikattiin ja avattiin ja mahan pH-arvo määritettiin pH-mittarilla, joka oli varustettu Micro Line pH-elektrodi (ThermoOrion, New Hyde Park, NY, USA) ja kalibroitu standardin puskurit pH 4,01, 7,00 ja 10,00.
titraus mahan sisällön
mahan sisältö tyhjennettiin putkiin, sentrifugoitiin lyhyesti nimellä 5600 x g (10000 rpm) ja laimennettiin 1:10, 1:25 tai 1:50 5 ml: ssa tislattua vettä, laimennussuhteen riippuen tilavuudesta mahan sisällön, joka otettiin talteen. Jos mahanesteessä otettiin talteen, sopiva määrä chyme käytettiin. Titraus suoritettiin 0,1 M NaOH: lla on Titroline Alpha titrauslaite (Schott-Geräte GmbH, Hofheim, Saksa), kunnes loppupiste pH = 7,0 saavutettiin. Määrä happoekvivalentteja läsnä mahassa laskettiin mmol, ja mahan happamuus mitattiin 60 ja 120 min jälkeen mahahapon lastaus myös ilmaistu suhteessa happamuus mitataan välittömästi (0 min) jälkeen mahahapon lastaus.
Mahalaukun vamma
eheys mahalaukun limakalvon tarkastettiin makroskooppisesti. Määrällisesti makroskooppisesti näkyviä vaurioita, vatsa oli kiinnitetty tasaisesti silikonielastomeeria-päällystetylle levylle ja peitetty PBS. Vatsa oli valokuvattu, kuva siirretään tietokoneelle, ja makroskooppiset mahalaukun vahingon tietokoneistetuissa planimetry tarkkailija, joka ei tiennyt kokeellinen hoito [1]. Limakalvon kattama alue näkyviä verenvuototaudin vaurioita ilmaistiin prosentteina kokonaispinta-alasta rauhasjärjestelmää limakalvon.
Tilastot
tilastollinen tulosten arviointi suoritettiin SPSS 15.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) yksisuuntainen varianssianalyysi (ANOVA). Nämä testit tehtiin siitä huolimatta, että tiedot joidenkin koeryhmään eivät täytä kriteeriä normaalijakaumaa, koska tämä rajoitus selittyi rajoitettu määrä eläintä ryhmää kohti ja koska ei ollut syytä olettaa, ei-normaali jakauma . Homogeenisuus varianssit arvioitiin kanssa Levene testi. Jos merkittävä vuorovaikutus koe tekijöiden todettiin, post-hoc-analyysi ryhmäeroja tehtiin Tukey HSD (rehellisesti merkitsevä ero) testi tai, kun kyseessä on homogeeninen varianssit, jossa Games-Howell testi. Kaikki tiedot esitetään keskiarvoina ± SEM, n viitaten rottien lukumäärä kussakin ryhmässä. Ottaen huomioon tunnustelevia luonteesta tutkimuksen, todennäköisyys arvot ≤ 0,1 [11, 12] pidettiin tilastollisesti merkitsevä.
Tulokset
Tutkimus 1: Effects of lafutidine c-Fos ilmaisun aivorungon, mahan pH-arvo ja mahalaukun limakalvon loukkaantumisen jälkeen mahan hapon loading
Altistuminen rotan mahalaukun limakalvon HCl (0,25 M) parantaa ilmentymistä c-Fos in NTS ja AP merkittävässä määrin (kuviot 1A, B ja 2A, B), mutta suhteessa suolaliuos, ei aiheuttanut merkittävää mahalaukun limakalvon vaurio (Danzerin ym. 2004). Samanlainen havainto tehtiin tässä tutkimuksessa, sillä keskimäärin alle 0,2% rauhasjärjestelmää limakalvon esittelyyn makroskooppisten poikkeavuuksia, useimmiten verenpurkaumat (kuvio 2C). Kun taas pH: n HCl-liuosta annettiin mahansisäisesti oli 0,51, pH: n mahanesteessä 2 tuntia sen jälkeen, kun HCl: a haaste oli noussut yli 2,5 (kuvio 2D). Kuvio 1 Mahahapon aikaansaaman ilmentymisen c-Fos tumassa tractus solitarii (NTS) ja postrema-alueelle (AP) rotan vehikkeliä (A) ja toinen rotan käsiteltiin lafutidine (B). Lafutidine (30 mg /kg) tai sen vehikkelin (0,5% karboksimetyyliselluloosa) annettiin peroraalisesti 30 minuuttia ennen vatsan altistettiin eksogeenisen hapon kuorman (0,25 M HCI). Kahden tunnin kuluttua HCI: ää c-Fos-positiivisten solujen aivorungon visualisoitiin immunosytokemialla.
Kuvioon 2 vaikutus lafutidine (10 ja 30 mg /kg), ajoneuvon suhteen, määrän c-Fos positiivisten solujen (A) nucleus tractus solitarii (NTS) ja (B) postrema-alueelle (AP), (C) makroskooppinen mahalaukun limakalvon vauriota (ilmaistuna prosentteina alueen rauhasten limakalvon) ja (D) mahan pH-arvo mitattiin 2 h kuluttua altistuminen vatsan HCl: llä (0,25 M). Lafutidine tai vehikkeli annettiin mahaletkulla 30 minuuttia ennen antoa HCl. Arvot edustavat keinot + SEM, n = 8, ellei toisin mainita. * P ≤ 0,1, ** P ≤ 0,05 versus ajoneuvo.
Jälkeen mahalaukun sisäinen anto lafutidine (10 ja 30 mg /kg), alue mahalaukun vahingon nimellisesti alennettu mutta tämä vaikutus ei ollut tilastollisesti merkitsevä (kuvio 2C) . Sen sijaan, mahan pH-arvo oli kasvanut joko annoksella lafutidine (kuvio 2D) merkittävässä määrin paljasti yksisuuntainen ANOVA (F (2,20) = 11,08, P < 0,001) ja post-hoc testata. Happo-mieleen ilmentymisen c-Fos on NTS (kuviot 1A, B ja 2A) väheni lafutidine (10 ja 30 mg /kg), ja yksisuuntainen ANOVA on esitetty tämä vaikutus on tilastollisesti merkitsevä (F (2,19) = 4,30, P = 0,029). Päinvastoin kyky lafutidine vaimentaa happo-mieleen ilmentymisen c-Fos AP ei ollut tilastollisesti merkitsevä (kuviot 1A, B ja 2B).
Tutkimus 2: Effects of lafutidine on ajankul- mahalaukun tilavuus, happamuus ja loukkaantumisen jälkeen mahalaukun sisällön happo lastaus
Kuten tutkimuksessa 1, haaste mahan 0,25 M HCI aiheuttanut pienehköjä makroskooppisia vahinkoja, jotka keskimäärin kattoi alle 0,2% pinta-alasta Rauhasten limakalvon (kuvio 3A). Vahinkojen suuruus ei merkittävästi eroa ajankohtina 0, 60 ja 120 min jälkeisen HCl: ajoneuvo- ja simetidiini saaneilla rotilla. In lafutidine saaneilla rotilla, mutta vahingon laajuus 120 min kuluttua happo haaste oli huomattavasti pienempi kuin heti mahahapon lastaus (kuvio 3A). Kuvio 3 vaikutus lafutidine (30 mg /kg) ja simetidiini (10 mg /kg), ajoneuvon suhteen, on (A) makroskooppinen mahalaukun limakalvon vauriota (ilmaistuna prosentteina alueen rauhasten limakalvon), (B) intragastrisen happamuus (happoekvivalenttia mmol) ja (C) paino mahalaukun sisällön (g /painokilo) mitataan välittömästi (0 min), 60 ja 120 min altistuksen jälkeen vatsan HCl: llä (0,25 M). Lafutidine, simetidiini tai vehikkeliä annettiin mahaletkulla 30 minuuttia ennen antoa HCl. Arvot edustavat keinot + SEM, n = 8. ** P ≤ 0,05 versus aika 0 min samoissa hoito, + P ≤ 0,1, ++ P ≤ 0,05 vs. aika 60 min samoissa hoito, ° P ≤ 0,1, ° ° P ≤ 0,05 vs. ajoneuvon samalla piste post-HCl.
määrä happoekvivalentteja läsnä mahan onteloon laski huomattavasti 2 tunnin välein post-HCl kaikissa hoitoryhmissä (kuvio 3B). Suurin osa laskusta mahan happamuutta tapahtui 60 min jälkeisen HCl, ja ei ollut merkittävää eroa mahan happamuuden 0 ja 60 min jälkeisen HCl välillä kolmessa hoitoryhmässä. In lafutidine saaneilla rotilla oli edelleen merkittävä pudotus mahalaukun happamuuden aikana 60-120 min post-HCl, muutos, joka ei nähty ajoneuvo- ja simetidiini saaneilla rotilla (kuvio 3B). Lasku mahan happamuutta 120 min post-HCI: lafutidine saaneilla rotilla oli merkittävästi voimakkaampaa kuin vehikkelillä käsiteltyjen eläinten (kuvio 3B). Kun mahan happamuutta mitataan 60 ja 120 min jälkeisen HCl ilmaistiin suhteessa happamuus mitataan välittömästi (0 min) jälkeen mahahapon lastaus, todettiin, että lasku mahalaukun happamuuden 120 min jälkeisen HCl nähdään lafutidine saaneilla rotilla oli eniten lausutaan, verrattuna nähdään ajoneuvo- ja simetidiini saaneilla rotilla (kuvio 4A). Kuvio 4 vaikutus lafutidine (30 mg /kg) ja simetidiini (10 mg /kg), ajoneuvon suhteen, on (A) mahan happamuutta ja (B) painosta mahalaukun sisällön mitattu 60 ja 120 min altistuksen jälkeen vatsan HCl (0,25 M), ja ilmaistaan ​​prosentteina vastaavien arvojen mitataan heti mahahapon loading (0 min). Lafutidine, simetidiini tai vehikkeliä annettiin mahaletkulla 30 minuuttia ennen antoa HCl. Arvot edustavat keinot + SEM, n = 8. ** P ≤ 0,05 versus aika 0 min samoissa hoito, + P ≤ 0,1, ++ P ≤ 0,05 vs. aika 60 min samoissa hoito, ° P ≤ 0,1, ° ° P ≤ 0,05 vehikkeliä samalla kohta post-HCl.
paino mahalaukun sisällön suhteen paino (g /kg) laskettiin epäsuorana mittana mahalaukun tyhjenemistä. Kuten kuviossa 3C, mahan sisällön paino laski huomattavasti aikaa kaikissa hoitoryhmissä ja 60 sekä 120 min jälkeisen HCl oli huomattavasti pienempi kuin heti mahahapon lastaus. Lafutidine- ja simetidiini saaneilla rotilla poikkesivat ajoneuvon käsiteltyjen rottien kahdella tavalla. Ensinnäkin, heti happo haaste mahan sisällön paino oli huomattavasti korkeampi lafutidine- ja simetidiini hoidettujen eläinten kuin verrokkirotissa (kuvio 3C). Toiseksi, kun se mitataan 120 min jälkeisen HCl: lafutidine- ja simetidiini-käsiteltyjen eläinten, tämä parametri oli merkittävästi pienempi kuin mitattu 60 min jälkeisen HCI, kun taas ajoneuvon saaneilla rotilla mahalaukun sisällön painot kirjattiin 60 ja 120 min post-HCl eivät olleet merkittävästi erilaisia ​​keskenään (kuvio 3C).
Koska alkuperäisen mahalaukun tilavuuden lafutidine- ja simetidiini-käsiteltyjen eläinten oli suurempi kuin verrokkirotissa (kuvio 3C), ajankul- mahalaukun tilavuuden muutoksista erilainen kohtelu ryhmät on vaikea verrata keskenään, koska se saattaa olla differentiaalisesti vaikuttaa alkuperäisestä tilavuudesta. Tästä syystä mahan sisällön talteen 60 ja 120 min jälkeisen HCl ilmaistiin myös prosenttiosuutena määrästä mitataan välittömästi (0 min) jälkeen mahahapon lastaus (kuva 4). Tällä tavoin on havaittu, että lasku mahalaukun tilavuus 120 min post-HCI: lafutidine saaneilla rotilla oli jyrkempi kuin vehikkelillä käsitellyillä rotilla (kuvio 4B).
Keskustelu
merkittäviä tuloksia nykyisen tutkimuksen voidaan tiivistää seuraavasti. Lafutidine estää kiertäjähermo- afferent signalointia mahahapon loukkaus, joka nostaa esiin mahdollisuuden, että lafutidine estää hapon aiheuttama vatsakipua. Kyky lafutidine laskevan mahalaukun sisällön happamuutta altistuksen jälkeen ylimäärä HCl ei voida selittää sen eritystä estävää aktiivisuutta ja on todennäköisesti osoitus laimennus ja /tai tyhjennys hapon kuorman pohjukaissuoleen.
Vagaalisia tuovissa signalointia mahahapon loukkaus oli visualisoidaan c-Fos ilmentymistä medullaarinen aivorungon, standardimenetelmää funktionaalisten neuroanatomian hahmotella ärsyke aikaansaaman aktivoitumisen neuronien [13, 14]. Tällä tavoin se on aiemmin osoitettu, että altistus rotan vatsan yli pitoisuuksia HCl: a stimuloi hermosolujen aivorungon [1, 2]. Ulkonäkö c-Fos proteiinia mitattiin 2 tunnin jälkeinen HCl, koska käännös c-fos mRNA c-Fos-proteiinin saavuttaa maksiminsa välillä 1 ja 3 tuntia post-ärsyke [2]. Me rajoitettu analyysimme on aivokudoksen, koska altistuminen rotan vatsan HCl ole todettu mitään c-fos mRNA ja c-Fos-proteiinin takasarveen takaosan rintakehän selkäydin joka vastaanottaa maha- tai kuulokkeiden kautta selkärangan afferent neuronien [1, 2]. Nämä tiedot ja kyky kroonisen kahdenvälisten supradiafragmaattisen vagotomy tukahduttaa mahahapon aikaansaaman ilmentymistä c-fos mRNA [1] osoittaa, että mahalaukun haaste HCUIä signaloidaan aivorungon kautta vagaalisten afferenttien.
Induktio c-fos mRNA ja c-Fos-proteiinin NTS, keskiskenaarion alueella vagaalisten afferenttien, on sukua mahalaukunsisäisesti suolahappopitoisuuden [1, 2]. Vertaileva analyysi medullaarinen c-Fos induktio ja mahalaukun vaurioita osoittaa, että afferent signalointia mahahapon haaste ei liity suoraan muodostumiseen avoin limakalvon vaurioita, koska c-Fos ilmentymisen NTS voidaan herättämän HCl pitoisuuksilla (0,15 - 0,35 M), jotka eivät indusoi tuntuvia makroskooppisia leesioita ja aiheuttaa vähän histologisia vaurioita [1, 2]. Koska supraphysiological pitoisuuksia HCl (0,15 M tai korkeampi) vaaditaan aiheuttamaan c-Fos että NTS, se on päätellyt, että vain lisääntynyt valtavasti protonigradienttia poikki happo-tiukka mahalaukun limakalvon pystyy ajamaan riittävästi protoneja osaksi lamina propria jossa he voivat kiihottaa vagaalisia tuojahermosolut kuituja joko suoraan tai epäsuorasti neuroaktiivisiksi tekijät julkaistiin kudoksessa [2]. Tämä koejärjestely on siis ajateltu mallintamaan patofysiologisia olosuhteita, joissa backdiffusion Ontelonsisäisen hapon stimuloi vagaalisten afferenttien.
Tiedot Nykyisen tutkimuksen osoittavat, että lafutidine annettiin mahansisäisesti annoksina (10 ja 30 mg /kg) havaittu aiemmin olevan gastroprotective [5 , 6, 15] vähensi afferent signalointia mahahapon loukkaus NTS. Tämä havainto on yhdenmukainen sen kanssa, että toisen histamiini H 2-reseptorin antagonisti, simetidiini, ja protonipumpun estäjä omepratsoli vähentää mahahapon aikaansaaman ilmentymisen c-Fos rotan aivorungon [2]. Koska käyttäytymiseen reaktiot mahahapon haasteeseen osoittavat, että c-Fos ilmentymisen NTS on korrelaattina mahahapon kudosvaurion [2, 3] voidaan ehdottaa, että lafutidine on estävä vaikutus mahalaukun kemiallista kipuärsytystä. Tämä antinosiseptiivinen vaikutus on kuitenkin todennäköisesti selittyy eritystä toimintaa lafutidine, koska altistuminen mahalaukun limakalvon ylimääräisen eksogeenisen hapolla kuten 0,25 M HCI tulee itsestään tukahduttaa endogeenisen erityksen negatiivista palautetta mekanismin [16-19 ]. Tämän seurauksena kaksi vaihtoehtoista selitystä on pohdittava.
Yksi selitys, joka tulee mieleen on olettaa, että lafutidine, kuten simetidiini [2], häiritsee vagaalinen tuovissa polkuja että signaali happo haaste mahalaukun limakalvon aivorungon. Lafutidine voi tehdä niin (1) estämällä stimulaatio vagaalisia afferenttien neuronien hapolla sekaantumatta mahalaukun limakalvon, (2) painamalla signaali johtumalla vagaalisten afferenttien neuronien (3) estämällä synapsivälitystä välillä keskeinen loppuja vagaalisten afferenttien ja NTS neuronien ja /tai (4) vähentämällä excitability aivokudos neuronien ilmentävät c-Fos vastauksena tulon mahasta.
Mikä näistä mahdollisuuksista koskee vaikutuksia lafutidine ja simetidiini vaatii tunnistamista vaikutuskohta jossa H 2-reseptoriantagonisteja häiritse tuovissa vagaalisen polkuja. Aikaisemmin on osoitettu, että vagaalisen afferenttien neuronien, että signaali mahahapon haaste NTS ovat epäherkkiä neurotoksisten vaikutusta kapsaisiinin [1], ja että aktivointi tämän reitin, jonka happo on riippumaton prostaglandiinien [20]. Vagaalisen tuovissa järjestelmä estyy lafutidine vaikuttavat siksi täysin erilainen kuin kapsaisiinin herkkien selkärangan afferent neuronit, joiden ajatellaan välittävän kykyä lafutidine suojata ruoansulatuskanavan limakalvolla loukkaantumiselta [6-8, 15, 21-23]. Vaikka vagaalisen afferenttien näyttävät estyy kautta H 2-reseptori-riippuvainen mekanismi, kapsaisiini-herkkä selkärangan afferentit aktivoidaan tai herkistetään lafutidine, mutta ei muita H 2-reseptoriantagonistit, mikä johtaa vapautumisen suojaavan messenger kalsitoniinigeeniin liittyvä peptidi [6-8, 15, 21-23]. Prostaglandiinit voi myös olla rooli gastroprotektiivinen vaikutus lafutidine stressiä vastaan ​​[23].
Toinen selitys estävä vaikutus lafutidine on mahahapon aikaansaaman c-Fos ilmentymisen aivorungon otetaan huomioon, että lafutidine vähensi happamuus eksogeenisen mahahapon kuormaa. Millä tahansa mekanismilla lafutidine helpottaa poistaminen mahahapon kuormitus, se myös vähentää ärsyke vagaalisten afferenttien merkinannon NTS. Kumpi näistä kahdesta mekanismista - suora esto Vagaalisen afferent järjestelmä tai vähentämistä ärsyke lujuus - on enemmän merkitystä ei voida päättää ilman electrophysiological luonnehdinta vaikutuksen H 2-reseptoriantagonisteja on Vagaalisen tuovissa järjestelmä.
Suoraa analyysi gastroprotektiivinen vaikutuksen lafutidine nykyisessä tutkimuksessa oli pois soveltamisalasta, koska mahahapon kuorman here (0,25 M HCI) indusoi vain vähäisiä mahalaukun vaurioita, jotka oli mahdoton erottaa nähnyt mahalaukunsisäisen annon suolaliuosta [2]. Tämän seurauksena mahalaukun hapon aiheuttama vamma pysyi muuttumattomana lafutidine tutkimuksessa 1, vaikka oli taipumusta tukahduttaminen mahalaukun leesionmuodostus. Analyysi ajankul- vaikutuksen lafutidine tutkimuksessa 2 kävi kuitenkin ilmi, että lafutidine, toisin kuin ajoneuvo, nopeutti toipumista HCl aiheuttamaa mahalaukun vaurioita.
Gastroprotektiivinen potentiaali lafutidine on lisäksi ajateltu sen vaikutuksen tehostamiseksi mahansisäisillä pH ja vähentää mahan happamuutta altistuksen jälkeen eksogeenisen hapon kuormaa. Koska, kuten edellä on kuvattu, endogeenisen mahahapon eritystä vaimennetaan eksogeenisen hapon kuorman niinkin korkea kuin 0,25 M HCl: a, toiminta lafutidine vähentää mahan happamuus voi johtua laimennus, neutralointi tai tyhjennys hapon kuorman pohjukaissuoleen. Aiemmin on todettu, että altistuminen vatsan supraphysiological pitoisuuksia happoa estää mahalaukun tyhjenemistä ja aiheuttaa nesteen eritystä [2, 9], joka nykyisessä tutkimuksessa heijastui suhteellisen hidas lasku mahalaukun tilavuudesta yli 2 tunnin välein post

• Mahalaukun adenomyoma vatsassa kehon: tapausselostus
• Kolme tapausta laparoskooppisia yhteensä gastrektomia kanssa intrakorporeaaliseen esophagojejunostomy mahalaukun syövän jäänne vatsassa