Значение выражения NTR1 и его корреляция с бета-катенина и EGFR при раке желудка

Значение выражения NTR1 и его корреляции с бета-катенина и EGFR при раке желудка
Аннотация
Справочная информация
Несколько отчетов указывают на высокое сродство рецептора NT (нейротензина), NTR1 (нейротензин рецептор 1), в многочисленные вредные функции связаны с опухолевой прогрессии нескольких типов рака. В последнее время также было показано, что ген NTR1 является мишенью онкогенных путей Wnt /APC, связанных с бета-катенин /Tcf транскрипционный комплекс и НТ может стимулировать пролиферацию раковых в механизме EGFR-зависимой. В данном исследовании мы исследовали NTR1, β-катенина и экспрессии EGFR при раке желудка. Были проанализированы возможные ассоциации выражения NTR1 с клинико-патологическими факторами, прогноз, β-катенин и EGFR.
Методы
NTR1, β-катенина и экспрессия EGFR в раковых тканях желудка и прилегающих нормальных тканях 210 случаях был обнаружен Иммуногистохимия. . Были проанализированы возможные ассоциации выражения NTR1 с клинико-патологическими данными, прогноз, бета-катенина и EGFR
Результаты
1. NTR1 экспрессия в опухолевых тканях была значительно выше, чем в соседних нормальных тканях (P &
л; 0 .01). 2. Его выражение было положительно коррелирует с патологической степени, Т стадии, N стадии и стадии TNM и не коррелировала с пола, возраста, размера опухоли и классификации Лорен. 3. Коэкспрессия NTR1 и ядерного -катенина был в 53 (25,2%) случаев и выражение NTR1 положительно коррелировал с -катенином ядерной транслокации. Выражение NTR1 не коррелировала с экспрессией EGFR, но при критическом значении (P
= 0,05). 4. лог-рангового, высшим выражением NTR1, высшего сорта, патологической классификации диффузии Лорен и продвинутой стадии TNM показал худший прогноз (P &
л; 0 .05). Возраст, пол, размер опухоли, β-катенин и EGFR не имел прогностическое значение. Многофакторный анализ Кокса показал, что экспрессия NTR1 и TNM клиническая стадия (P &
л; 0 .05). были независимыми прогностическими факторами для пациентов с GC
Заключение
По иммуногистохимии, мы обнаружили, что высокая экспрессия NTR1 в GC образцах, которые показали плохой прогноз, к тому же, выражение NTR1 было связано с вторжением и миграции GC. Эти результаты дают новую и важную информацию о прогрессировании ГХ. Это исследование показало, что NTR1 может играть важную роль в опухолевой прогрессии GC и имеют свой потенциал, чтобы быть прогностическим биомаркером или терапевтическим молекулярной мишенью в GC. Взаимодействие между NTR1 и бета-катенин может участвовать в развитии GC. Тем не менее, отношения между NTR1 и EGFR необходимо дальнейшее расследование.
Ключевые слова
рак желудка, NTR1 β-катенин, EGFR, клиническая патология, прогноз фон
рака желудка является частой причиной связанной с раком смерти в мире [1]. В Китае, рак желудка занимает третье наиболее распространенной формой рака [2]. Хотя создание скрининга, ранней диагностики и лечебной работы значительно возросла пережитков, рецидивов и метастазов остается серьезной проблемой для пациентов с раком желудка. Развитие рака желудка часто ассоциируется с целым рядом молекулярных аномалий, в том числе инактивации различных генов-супрессоров опухолей и /или активации различных онкогенов [3, 4], но механизм развития, инвазию и метастазирование рака желудка до сих пор не Чисто. Исследования молекулярных изменений при раке желудка может предложить новые идеи в механизмы, ответственные за желудка канцерогенеза и привести к развитию биомаркеров для раннего выявления рака желудка и прогнозирования его прогноза.
Нейротензин (NT) и родственным рецептор (нейротензин рецептора 1, NTR1) являются нейропептида-рецепторных комплексов часто дерегулирование в течение опухолевого процесса. NT представляет собой 13-аминокислотный пептид, ранее признаваемые для его распределения вдоль желудочно-кишечного тракта [5] кишечного тракта. Эффекты NT опосредуются связывания с тремя нейротензина рецепторами NTR-1, -2, и -3. NTR1 и NTR2 являются G-белком рецепторы, в то время как NTR3 принадлежит надсемейства рецепторов sortilin. Периферийные функции NT, в основном, опосредованы через его взаимодействие с NTR1, высокое сродство рецептора связан с белком [6] Сч /G11. Несколько сообщений вовлекают NTR1 в многочисленных вредных функций, связанных с опухолевой прогрессии нескольких типов рака, в том числе поджелудочной железы, простаты, толстой кишки, легких и рака головы и шеи [7, 8]. В естественных условиях и в пробирке эффекты NT отменены специфическим антагонистом NTR1, SR48692, что означает, что NTR1 является главным медиатором этих преобразующих действий [9].
Активации NTR1 приводит к пролиферации клеток, выживание, подвижность и инвазивность в определенных типах раковых клеток с помощью трансдукции сигнала через PKC, внеклеточной регулируемой киназы 1 и 2, RhoGTPases, NF-kB, или фокальной активации адгезии киназы [10-12]. Некоторые исследования показывают, что NT может стимулировать пролиферацию раковых много в механизме EGFR-зависимых, в том числе передней кишки, нейроэндокринные опухоли, простаты, толстой кишки и немелкоклеточного рака легкого [13]. В последнее время было показано, что ген NTR1 является мишенью онкогенных путей Wnt /APC, связанных с бета-катенин /Tcf транскрипционный комплекс, как известно, активирует гены, участвующие в клеточной пролиферации и трансформации [14].
Экспрессию NTR1 и его связь с EGFR и бета-катенин при раке желудка не сообщалось. В данном исследовании мы исследовали NTR1, β-катенина и экспрессии EGFR при раке желудка. Были проанализированы возможные ассоциации выражения NTR1 с клинико-патологическими факторами, прогноз, β-катенин и EGFR.
методов
Пациенты
В общей сложности 210 пациентов с гистологически подтвержденной аденокарциномой желудка, вторгающихся в подслизистый слой или глубже были ретроспективно включены в этом исследовании. Все пациенты получали лечебную гастрэктомию с лимфодиссекция в нашем отделении Уси Народной больницы аффилированными Нанкин медицинского университета (Уси, Китай) в период с января 2011 по декабрь 2011 Ни один из пациентов прошли курс химиотерапии или лучевой терапии до хирургического вмешательства. Согласованный отдаленная незлокачественный образца (5 см от очага поражения) была также получена от каждого пациента и использовали в качестве контроля. В клинико-патологические характеристики пациентов включали возраст, пол, размер опухоли, патологическая класс, классификация Лорен, TNM стадия и состояние метастазов в лимфатических узлах.
Средний возраст пациентов составил 64 года, в пределах от 34 до 90 лет. Существовали 160 мужчин и 50 женщин (3,2: 1). Согласно дифференцировки опухоли, было 93 (44,3%) хорошо и умеренно дифференцированные опухоли и 117 (55,7%) бедные и недифференцированные опухоли. Согласно TNM стадии, 51 (24,3%) пациентов находились на стадии T1-2, а левая 159 (75,7%) пациентов находились на стадии T3-4. 157 (74,8%) больных были положительными и 53 (25,2%) были отрицательными для метастазов в лимфатических узлах. Были III-IV пациентов 63 (30,0%) этап I-II и 147 (70,0%) стадии. Последующая информация, в том числе исхода пациентов и временной интервал между датой хирургической резекции и дата смерти, связанной с раком, была собрана. Эти случаи потеряны для последующего наблюдения и умер от других, чем рак желудка причины были расценены как цензурированной данные для анализа выживаемости. Исследование было одобрено нашими комитетами по этике местных. Образцы были получены с информированного согласия в соответствии с этическим стандартом Хельсинкской декларации 1975 г., пересмотренный в 2000 году
иммуногистохимии
Парафиновые срезы были обработаны в соответствии с иммуногистохимического комплектом Envision, и результаты были проанализированы с использованием двух- слепым методом. Два патолога оценивали оценки независимо друг от друга. ПБС, вместо первичного антитела, использовали в качестве негативного контроля. Для NTR1 (поликлональные антитела, Abcam, используя концентрацию /мл 5 мкг) окрашивания, степень выраженности был классифицирован как негативный (положительное окрашивание на &л; 10% опухолевых клеток), положительным (положительное окрашивание ≥10% и &ЛТ; 50% опухолевых клеток), или сильно положительным (положительное окрашивание с участием ≥50% опухолевых клеток) [15]
Согласно Aust и др.. [16], полу-количественная оценка бета-катенина (. Моноклональное антитело, MAB-259, Фучжоу Maixin Biotech Co., Ltd, Предварительно разбавлено) ядерная транслокация проводили путем оценки процент положительных ядер следующим образом: 0; 1: 0 до 5%; 2: 5 до 25%; 3: до 25%, и отсечкой &К раствору 5% положительных ядер β-катенина (2 балла или более) считают значимым для ядерной транслокации белка
EGFR (моноклональное антитело, РМА-0554. , Фучжоу Maixin Биотех., Ltd, Предварительно разбавлено) реакционная способность оценивалась как 0, если не было мембранозной реакционная способность в опухоли или в качестве 1+, 2+, или 3+ в зависимости от интенсивности выше фонового уровня [17 ]. Счет 1+ до 3+ была определена как положительная и оценка 0 был определен как отрицательный [18].
Статистический анализ
Все данные были проанализированы с помощью SPSS 18.0. х 2 теста (или точный критерий Фишера) были использованы для образцов, классифицированных в процентах; Спирмен анализ был использован для определения корреляции между двумя переменными. Оба метода Каплана-Мейера и лог-рангового были использованы для анализа одного варианта, и модель Кокса была использована для анализа отношений между выживаемостью и нескольких переменных. P
&л; 0,05 считали статистически значимыми.
Результаты
экспрессии NTR1 в опухолевых тканях была значительно выше, чем в соседних нормальных тканях и положительно коррелирует с патологической степени, Т стадии, N стадии и стадии TNM
в соответствии с критериями создана для иммуноокрашиванием, 71,0% (149/210) опухолей были положительными для NTR1 окрашивания. Только 28 (13,3%) случаев были положительными в смежной нормальной слизистой оболочки желудка. В качестве х 2-тест, NTR1 экспрессия опухолевых тканей была значительно выше (P &
л; 0,01) (рис. 1). Инжир. 1 Выражение NTR1 в желудочном раковых тканей (200 ×). Сильно положительное выражение NTR1 в intestinal- (а) и диффузного типа (б) желудка раковых тканей; отрицательное выражение NTR1 в смежной нормальной слизистой оболочки желудка (с)
путем анализа Спирмена, экспрессия NTR1 положительно коррелировала с патологической класса (рис. 2), Т стадия, N стадия и стадия TNM и не коррелирует с полом, возраст, размер опухоли и классификация Лорена (таблица 1). Инжир. 2 Выражение NTR1 в кишечном типа желудочных раковых тканей (200 ×). Выражение Положительное NTR1 в хорошо дифференцированной кишечника типа желудка раковых тканей (а); Сильно положительное выражение NTR1 в плохом дифференцированной кишечника типа желудка раковых тканей (б)
Таблица 1 клиникопатологическими черты и выражение NTR1 в 210 больных раком желудка
Пункт

NTR1 интенсивности Expression

р
-value *

Негативный

положительный

Сильно положительный

Age
0,302
&лт; 60
15
27
23
≥60
46
53
46
Секс
0,315
Мужчина
44
61 <бр> 55
Female
17
19
14
Опухоль размер (см)
0,291
&Лт; 5
34
21
31 <бр> ≥5
27
59
38
Патологическая оценка
0,027
Ну и умеренные
34
34
25
Бедный и недифференцированные <бр> 27
46
44
классификации Лорен
0,125
кишечными
32
39
27
Diffusion
18
20
24
Смешанная
11
21
18
T этап
0.001
T1-2
26
14
11
T3-4
35
66
58
N этап
0,000
Положительный
33
66
58
Негативный
28
14
11
TNM стадия
0,011
I- II
28
18
17
III-IV
33
62
52 <бр> * Спирмен анализ
выражения NTR1 положительно коррелировал с β-катенина ядерной транслокации и не коррелировала с экспрессией EGFR
Использование иммуногистохимического анализа, мы наблюдали коэкспрессии NTS1 и ядерной -катенина в 25,2% (53 ) случаев и выражение NTR1 положительно коррелирует с β-катенина ядерной транслокации (P &
л; 0,05) (рис. 3, 4 и 5) и не коррелировала с EGFR выражением (рис. 6), однако при критическом значении (P
= 0,05) (таблица 2). Инжир. Выражение 3 β-катенин при раке желудка и смежной нормальной слизистой оболочки желудка (200 ×). Выражение Ядерный бета-катенин при раке желудка (а) и Nomal бета-катенина мембраны окрашивания в смежной нормальной слизистой оболочки желудка (б)
Рис. 4 Выражение NTR1 и β-катенина в кишечном типа желудочных раковых тканей (200 ×). Его окрашиванием изображение (а), IHC окрашивание NTR1 (б) и экспрессию ядерных бета-катенин (с) в том же районе тех же случаев кишечного типа. × 200
рис. 5 Выражение NTR1 и β-катенина в диффузного типа желудочных раковых тканей (200 ×). IHC окрашивание NTR1 и β-катенина в том же случае случаев диффузного типа. × 200
рис. Выражение 6 EGFR при раке желудка и смежной нормальной слизистой оболочки желудка. Положительный EGFR выражение (оценка 3+), при раке желудка (а) и отрицательным выражением EGFR в смежной нормальной слизистой оболочки желудка (б)
Таблица 2 Соотношение между NTR1 и экспрессией ядерной транслокации и EGFR -катенином в желудочном
рака Пункт

интенсивность Expression NTR1

р
-value *

Негативный

положительный

Сильно положительный
<бр> выражение Ядерный бета-катенин
0,034
Негативный
42
60
36
Позитивный
19
20
33
EGFR выражения
0,050
Отрицательные (0 баллов)
29
24
21
Позитивный (оценка 1-3 +)
32
56
48 *
анализ Спирмена
Высшее выражение NTR1, выше патологическая оценка, классификация и TNM стадия диффузии Лорен показала худший прогноз и выражение высокой NTR1 и TNM клинической стадии были независимыми прогностическими факторами для пациентов с GC
Мы провели анализ выживаемости NTR1 на 210 случаев рак желудка с последующими данными. В течение 1 года и 3-летняя выживаемость 210 случаев были 78,9% и 68,0%. Пациенты с более высоким уровнем экспрессии NTR1 показали более неблагоприятный прогноз, чем те, без выражения (P &
л; 0 .01) (рис 7.). По лог-рангового, высшее выражение NTR1 (P = 0.000
), высшего сорта патологического (P = 0,014
), диффузия Лорен классификации (P
= 0,004), расширенный T стадии (P <бр> = 0,026), TNM стадия (P = 0,000
) и N этап (P = 0,000
) показал худший прогноз, и возраст, пол и размер опухоли не имел прогностическое значение. Многофакторный анализ Кокса показал, что следующие факторы были независимыми прогностическими факторами для пациентов с GC: экспрессия NTR1 и TNM клиническая стадия (P &
л; 0 .05) (таблица 3). Инжир. 7 Общие кривые выживаемости пациентов с раком желудка по результатам иммунным NTR1. Высшее выражение NTR1 (P = 0,000
) показал худший прогноз
Таблица 3 Множественный коэффициент регрессии Кокса модель переменной формы рака желудка
Пункт

B

SE <бр>
Wald

ДФ

Sig.a

Exp (B)

95,0% ДИ для Exp (B)
<бр> Нижняя

• Клинико-патологическими характеристики и результаты в стадии I-III коллоидный аденокарциномы желудка: ретросп…
• Гастрэктомия в комплексном лечении распространенного рака желудка с синхронным метастазов в печени: в персп…