Die Bedeutung der NTR1 Ausdruck und ihre Korrelation mit β-Catenin und EGFR in Magenkrebs

Die Bedeutung der NTR1 Ausdruck und ihre Korrelation mit β-Catenin und EGFR in Magenkrebs
Zusammenfassung
Hintergrund
Mehrere Berichte zeigen den hochaffinen Rezeptor von NT (Neurotensin), NTR1 (Neurotensinrezeptor 1), zahlreiche schädliche Funktionen auf neoplastischen Progression von mehreren Krebsarten verknüpft. Kürzlich hat es sich auch gezeigt, dass NTR1 Gen ein Ziel der Wnt /APC onkogenen Wege mit dem β-Catenin /Tcf Transkriptionskomplex und NT können Krebsproliferation in einem EGFR-abhängige Stimulierung Mechanismus verbunden ist. In dieser Studie untersuchten wir NTR1, β-Catenin und EGFR-Expression bei Magenkrebs. Die möglichen Assoziationen von NTR1 Ausdruck mit klinisch-pathologischen Faktoren, Prognose, β-Catenin und EGFR wurden analysiert.
Methoden
NTR1, β-Catenin und EGFR-Expression in Magenkrebsgewebe und den angrenzenden normalen Geweben von 210 Fällen festgestellt wurde Immunhistochemie. . Die möglichen Assoziationen von NTR1 Ausdruck mit klinisch-pathologischen Daten, Prognose, β-Catenin und EGFR analysiert wurden
Ergebnisse
1. NTR1 Expression in Tumorgewebe als signifikant höher war in benachbarten normalen Geweben (P
< 0 .01). 2. Seine Expression war positiv mit pathologischen Grad, T-Stadium, N-Stadium und TNM-Stadium korreliert und war nicht mit Geschlecht, Alter, Tumorgröße und Lauren-Klassifikation korreliert. 3. Eine Coexpression von NTR1 und Kern β-Catenin wurde in 53 (25,2%) der Fälle und NTR1 Expression positiv mit β-Catenin nukleäre Translokation korreliert. NTR1 Expression wurde nicht mit EGFR-Expression korreliert sind, aber bei einem kritischen Wert (P
= 0,05). 4. Mit dem Log-Rank-Test, eine höhere Expression von NTR1, höhere pathologischen Grad, Diffusion Lauren-Klassifikation und erweiterte TNM-Stadium schlechtere Prognose zeigte (P
< 0, 05). Alter, Geschlecht, Größe des Tumors, β-Catenin und EGFR hatte keine prognostische Bedeutung. Multivariate Cox-Analyse zeigte, dass NTR1 Expression und TNM klinischen Phase (P
< 0, 05). Waren die unabhängige prognostische Faktoren für Patienten mit GC
Fazit von Immunhistochemie
fanden wir, dass eine hohe Expression von NTR1 in GC Proben, die eine schlechte Prognose zeigte, außerdem war NTR1 Ausdruck Invasion und Migration von GC verwandt. Diese Ergebnisse liefern neue und wichtige Informationen über die Progression von GC. Diese Studie zeigte, dass NTR1 kann eine wichtige Rolle in der Tumorprogression von GC spielen und ihr Potential eine prädiktive Biomarker oder eine therapeutische molekulares Ziel in GC zu sein. Die Wechselwirkung zwischen NTR1 und β-Catenin kann bei der Entwicklung von GC teilnehmen. Allerdings muss die Beziehung zwischen NTR1 und EGFR weiter untersucht werden.
Schlüsselwörter Magenkrebs, NTR1 β-Catenin, EGFR, Klinische Pathologie, Prognose hintergrund und Magenkrebs ist eine häufige Ursache von Krebs-Todesfälle in der Welt [1]. In China zählt Magenkrebs die dritthäufigste Krebserkrankung [2]. Obwohl die Einrichtung von Screening, hat sich deutlich Überbleibsel Früherkennung und kurative Operation erhöht, Rezidiv und Metastasierung bleibt eine große Herausforderung für Patienten mit Magenkrebs. Magenkrebs Entwicklung wird oft mit einer Reihe von molekularen Anomalien, einschließlich der Inaktivierung von verschiedenen Tumor-Suppressor-Gene und /oder Aktivierung verschiedener Onkogene [3, 4], aber der Mechanismus der Entwicklung, Invasion und Metastasierung von Magenkrebs ist noch nicht klar. Untersuchungen der molekularen Veränderungen in Magenkrebs kann für Magen Karzinogenese verantwortlich neue Einblicke in die Mechanismen zur Verfügung stellen und für die Entwicklung von Biomarkern für die Früherkennung von Magenkrebs und die Vorhersage der Prognose führen.
Neurotensin (NT) und sein verwandtes Rezeptor (Neurotensinrezeptor 1, NTR1) sind Neuropeptid-Rezeptor-Komplexe häufig während der neoplastischen Prozess dereguliert. NT ist ein 13-Aminosäure-Peptid, die zuvor für ihre Verteilung entlang des Gastrointestinaltrakts erkannt [5]. Die Wirkungen von NT werden durch Bindung an drei Neurotensinrezeptoren NTR-1, -2 und -3 vermittelt. Die NTR1 und NTR2 sind G-Protein-gekoppelte Rezeptoren, während die NTR3 im sortilin Rezeptor-Superfamilie gehört. Die peripheren Funktionen der NT werden hauptsächlich durch seine Wechselwirkung mit NTR1 vermittelt, einem hochaffinen Rezeptor gekoppelt an ein Gq /G11 Protein [6]. Mehrere Berichte NTR1 in zahlreichen schädlichen Funktionen im Zusammenhang mit neoplastischen Progression von mehreren Krebsarten verwickeln, einschließlich Bauchspeicheldrüsen-, Prostata-, Dickdarm-, Lungen- und Kopf-Hals-Tumoren [7, 8]. In vivo und in vitro NT Effekte durch die spezifische Antagonisten von NTR1 abgeschafft werden, SR48692, was bedeutet, dass NTR1 ein Hauptvermittler dieser Transformation Aktionen ist [9].
NTR1 Aktivierung führt zu Zellproliferation, Überleben, Mobilität und Invasivität in bestimmten Krebszelltypen über die Signaltransduktion durch PKC, extrazelluläre Signal-regulierte Kinase 1 und 2, RhoGTPasen, NF-kappaB, oder focal adhesion kinase Aktivierung [10-12]. Einige Studien deuten darauf hin, dass NT viele Krebsproliferation in einem EGFR-abhängigen Mechanismus zu stimulieren, einschließlich foregut neuroendokrinen Tumor, Prostata-, Dickdarm- und nicht-kleinzelligem Lungenkrebs [13]. Vor kurzem wurde gezeigt, dass NTR1 Gen ein Ziel der Wnt /APC onkogenen Wege mit dem β-Catenin verbunden ist /Tcf Transkriptionskomplex, bekannten Genen in der Zellproliferation und Transformation [14] beteiligt zu aktivieren.
Die Expression NTR1 und seine Beziehung mit EGFR und β-Catenin in haben Magenkrebs nicht berichtet worden. In dieser Studie untersuchten wir NTR1, β-Catenin und EGFR-Expression bei Magenkrebs. Die möglichen Assoziationen von NTR1 Ausdruck mit klinisch-pathologischen Faktoren, Prognose, β-Catenin und EGFR wurden analysiert.
Methoden
Patienten Insgesamt 210 Patienten mit histologisch
Adenokarzinom des Magens bestätigt wurden die Submukosa oder tiefer eindringenden retrospektiv eingeschlossen in dieser Studie. Alle Patienten erhielten die kurative Gastrektomie mit Lymphknotendissektion in unserer Abteilung von Wuxi Volkskrankenhaus, angeschlossen an die Nanjing Medical University (Wuxi, China), die zwischen Januar 2011 und Dezember 2011 Kein Patient unterzog sich einer Chemotherapie oder Strahlentherapie vor der Operation. Ein angepaßtes entfernten Nicht-Krebsprobe (5 cm von der Läsion entfernt) wurde ebenfalls von jedem Patienten und dient als Kontrolle erhalten. Die klinisch-pathologischen Merkmale der Patienten im Alter enthalten, Geschlecht, Größe des Tumors, pathologischen Grad, Lauren-Klassifikation, TNM-Stadium und Lymphknotenmetastasen Status.
Die mittlere Alter der Patienten betrug 64 Jahre, im Bereich von 34 bis 90 Jahren. Es wurden 160 Männer und 50 Frauen (3,2: 1). Nach Tumor-Differenzierung gab es 93 (44,3%) gut und mäßig differenzierten Tumoren und 117 (55,7%) schlecht und undifferenzierte Tumoren. Nach TNM-Stadium, 51 (24,3%) der Patienten waren bei T1-2 Bühne, während die linke 159 (75,7%) der Patienten bei T3-4 Bühne. 157 (74,8%) Patienten waren positiv und 53 (25,2%) waren für Lymphknotenmetastasen negativ. Es waren 63 (30,0%) im Stadium I-II und 147 (70,0%) im Stadium III-IV-Patienten. Follow-up-Informationen, einschließlich der Patienten Ergebnis und das Zeitintervall zwischen dem Zeitpunkt der chirurgischen Resektion und dem Zeitpunkt der durch Krebs verursachten Tod wurde gesammelt. Diese Fälle verloren Follow-up und starben an anderen Ursachen als Magenkrebs wurden als zensierte Daten für die Analyse des Überlebens betrachtet. Die Studie wurde von unserer lokalen Ethikkommissionen genehmigt. Die Proben wurden mit Einverständniserklärung gemäß dem ethischen Standard der Helsinki-Erklärung von 1975 erhalten, wie im Jahr 2000 überarbeitet
Immunhistochemie
Paraffin Scheiben behandelt wurden nach dem EnVision immunhistochemischen-Kit, und die Ergebnisse wurden analysiert, um ein zwei mit Blind-Methode. Zwei Pathologen ausgewertet Partituren unabhängig. PBS anstelle des primären Antikörpers wurde als negative Kontrolle verwendet. Für NTR1 (polyklonaler Antikörper, Abcam, um eine Konzentration von 5 ug /ml verwendet) -Färbung, der Grad der Expression wurde als negativ klassifiziert (positive Färbung von < 10% der Tumorzellen), positive (positive Färbung von ≥10% und < 50% der Tumorzellen) oder stark positiv (positive Anfärbung ≥50% der Tumorzellen) [15]
nach Aust et al beteiligt sind.. [16], eine semiquantitative Auswertung von β-Catenin (. Monoklonaler Antikörper MAB-259, Fuzhou Maixin Biotech Co., Ltd, vorverdünnt) wurde die nukleäre Translokation durch Abschätzen der Prozentsatz positiver Kerne wie folgt durchgeführt: 0; 1: 0 bis 5%; 2: 5 bis 25%; 3: bis zu 25% und einem Cut-off von > 5% der positiven β-Catenin-Kerne (Score 2 oder mehr) wurde für die nukleäre Translokation des Proteins signifikant angesehen
EGFR (monoklonaler Antikörper, RMA-0554. , Fuzhou Maixin Biotech. Co., Ltd, Pre-verwässert) Reaktivität wurde als 0 bewertet, wenn es keine membranartige Reaktivität innerhalb des Tumors war, oder wie 1+, 2+ oder 3+ abhängig von der Intensität über der Hintergrundebene [17 ]. Die Partitur von 1+ auf 3+ wurde als positiv definiert, und die Punktzahl von 0 wurde definiert als negativ [18].
Statistische Analyse
Die Daten wurden mit SPSS 18.0 analysiert. x 2 Tests (oder exakte Fisher-Test) für die Proben als Prozentsatz eingestuft wurden verwendet; Die Spearman-Analyse wurde verwendet, um die Korrelation zwischen zwei Variablen zu bestimmen. Sowohl die Kaplan-Meier-Methode und Log-Rank-Test wurden für einzelne Variantenanalyse verwendet, und ein Cox-Modell verwendet wurde, die Beziehungen zwischen Überlebensraten und mehrere Variablen zu analysieren. P
< 0,05 wurde als statistisch signifikant betrachtet.
Ergebnisse

• Clinicopathological Eigenschaften und Ergebnisse in Phase I-III muzinöse Adenokarzinom des Magens: eine retrospektive Studie an einem einzigen medizinischen center
• Gastrectomy in umfassende Behandlung von fortgeschrittenem Magenkrebs mit synchroner Lebermetastasen: einer prospektiv vergleichende study