De betekenis van NTR1 meningsuiting en de correlatie met β-catenine en EGFR bij maagkanker

De betekenis van NTR1 meningsuiting en de correlatie met β-catenine en EGFR bij maagkanker
Abstracte achtergrond
Verschillende rapporten geven aan de receptor met hoge affiniteit van NT (neurotensine), NTR1 (neurotensine receptor 1), in talrijke nadelige taken vervult die aan neoplastische progressie van verschillende soorten kanker. Recent is ook aangetoond dat NTR1 gen is een doel van de Wnt /APC oncogene routes verbonden met β-catenine /Tcf transcriptioneel complex en NT kunnen kankercelproliferatie stimuleren een EGFR-afhankelijk mechanisme. In deze studie hebben we onderzocht NTR1, β-catenine en EGFR-expressie bij maagkanker. De mogelijke associaties van NTR1 expressie met klinische en pathologische factoren, prognose, β-catenine en EGFR geanalyseerd.
Methods
NTR1, β-catenine en EGFR expressie in maagkanker weefsels en de aangrenzende normale weefsels van 210 gevallen werd gedetecteerd door immunohistochemie. . De mogelijke associaties van NTR1 expressie met clinicopathologische data, prognose, β-catenine en EGFR werden geanalyseerd
Resultaten
1. NTR1 expressie in tumorweefsels was significant hoger dan in aangrenzend normaal weefsel (P
< 0 0,01). 2. De expressie positief gecorreleerd aan pathologische graad, T-trap, N-stadium en TNM en is niet gecorreleerd met geslacht, leeftijd, tumorgrootte en classificatie Lauren. 3. Een co-expressie van NTR1 en nucleaire β-catenine was 53 (25,2%) van de gevallen en NTR1 expressie positief gecorreleerd aan β-catenine nucleaire translocatie. NTR1 expressie was niet gecorreleerd met EGFR expressie, maar op een kritische waarde (P
= 0,05). 4. Door log-rank test, hogere expressie van NTR1, hogere pathologische rang, indeling diffusie Lauren's en geavanceerde TNM stadium toonde slechtere prognose (P Restaurant < 0 0,05). Leeftijd, geslacht, tumorgrootte, β-catenine en EGFR had geen prognostische betekenis. Multivariate analyse toonde aan dat Cox NTR1 expressie en TNM klinische fase (P
< 0 0,05). Waren de onafhankelijke prognostische factoren voor patiënten met GC
Conclusie
door immunohistochemie vonden we dat een hoge expressie van NTR1 GC monsters, die een slechte prognose toonde bovendien NTR1 expressie had met invasie en migratie van GC. Deze bevindingen geven nieuwe en belangrijke informatie over de voortgang van GC. Dit onderzoek liet zien dat NTR1 een belangrijke rol in tumorprogressie GC kan spelen en zijn potentieel om een ​​voorspellend biomarker of therapeutisch moleculaire doelwit GC zijn. De interactie tussen NTR1 en β-catenine kunnen deelnemen aan de ontwikkeling van GC. Echter, de relatie tussen NTR1 en EGFR moet verder worden onderzocht.
Sleutelwoorden
Maagkanker, NTR1 β-catenine, EGFR, klinische pathologie, Prognose Achtergrond
Maagkanker is een frequente oorzaak van kanker gerelateerde sterfgevallen ter wereld [1]. In China, maagkanker gelederen de derde meest voorkomende kanker [2]. Hoewel de instelling van screening, vroegtijdige diagnose en curatieve werking sterk toegenomen overleving, recidief en metastase blijft een grote uitdaging voor patiënten met maagkanker. Maag kankerontwikkeling wordt vaak geassocieerd met een aantal moleculaire abnormaliteiten, waaronder inactivatie van verschillende tumorsuppressorgenen en /of activatie van verschillende oncogenen [3, 4], maar het mechanisme van de ontwikkeling, invasie en metastase van maagkanker is nog niet duidelijk. Onderzoek naar de moleculaire veranderingen bij maagkanker kunnen nieuwe inzichten in de mechanismen die maagcarcinogenese en leiden tot de ontwikkeling van biomarkers voor de vroege opsporing van maagkanker en het voorspellen van de prognose.
Neurotensine (NT) en het verwante receptor (neurotensine receptor 1, NTR1) zijn neuropeptide-receptor complexen veelvuldig gedereguleerd in het neoplastische proces. NT is een 13-aminozuur peptide voorheen opgenomen voor de verdeling ervan langs het maagdarmkanaal [5]. De effecten van NT worden gemedieerd door binding aan receptoren drie neurotensine NTR-1, -2 en -3. De NTR1 en NTR2 zijn G-proteïne gekoppelde receptoren, terwijl het NTR3 behoort tot de superfamilie sortilin. De randapparatuurfuncties van NT worden hoofdzakelijk gemedieerd door de interactie met NTR1, een hoge affiniteit receptor gekoppeld aan een Gq /G11 eiwit [6]. Verscheidene rapporten impliceren NTR1 talrijke nadelige taken vervult die aan neoplastische progressie van verschillende soorten kanker, zoals pancreas-, prostaat-, colon-, long- en hoofd- en nekkanker [7, 8]. In vivo en in vitro NT effecten worden opgeheven door de specifieke antagonist van NTR1, SR48692, hetgeen impliceert dat NTR1 is een belangrijke mediator van deze transformatie acties [9].
NTR1 activatie leidt tot celproliferatie, overleving, mobiliteit en invasiviteit in bepaalde typen kankercellen via signaaltransductie door middel van PKC, extracellulair signaalgereguleerde kinase 1 en 2, RhoGTPases, NF-KB of focal adhesion kinase activatie [10-12]. Sommige studies suggereren dat NT veel kankercelproliferatie kan stimuleren een EGFR-afhankelijk mechanisme, waaronder voordarm neuro-endocriene tumor, prostaat-, colon- en niet-kleincellige longkankers [13]. Recentelijk is aangetoond dat NTR1 gen is een doel van de Wnt /APC oncogene routes verbonden met β-catenine /Tcf transcriptionele complex, bekend om genen betrokken bij proliferatie en transformatie [14] cellen activeren. Ondernemingen De expressie van NTR1 en de relatie met EGFR en β-catenine bij maagkanker zijn niet gemeld. In deze studie hebben we onderzocht NTR1, β-catenine en EGFR-expressie bij maagkanker. De mogelijke verenigingen van NTR1 expressie met clinicopathologische factoren, prognose, β-catenine en EGFR werden geanalyseerd.
Methods
Patiënten
Een totaal van 210 patiënten met een histologisch bevestigde maagdarmkanker invasie van de submucosale laag of dieper werden retrospectief opgenomen in dit onderzoek. Alle patiënten kregen de curatieve gastrectomie met lymfeklierdissectie in onze afdeling van Wuxi People's Hospital Affiliated naar Nanjing Medical University (Wuxi, China) tussen januari 2011 en december 2011. Geen van de patiënten onderging chemotherapie of radiotherapie vooraf aan operatie. Een afgestemd verre niet-kwaadaardige monster (5 cm afstand van de lesie) werd ook verkregen van elke patiënt en gebruikt als controle. De klinisch-pathologische kenmerken van de patiënten opgenomen leeftijd, geslacht, tumorgrootte, pathologische rang, Lauren's indeling, TNM podium en lymfeklieren metastase-status. Ondernemingen De mediane leeftijd van de patiënten was 64 jaar, variërend 34-90 jaar. Er waren 160 mannen en 50 vrouwen (3,2: 1). Volgens tumor differentiatie, waren er 93 (44,3%), goed en matig gedifferentieerde tumoren en 117 (55,7%) slecht en ongedifferentieerde tumoren. Volgens TNM fase, 51 (24,3%) van de patiënten waren T1-2 stadium, terwijl de linker 159 (75,7%) van de patiënten waren T3-4 podium. 157 (74,8%) van de patiënten waren positief en 53 (25,2%) waren negatief voor lymfklier metastase. Er waren 63 (30,0%) fase I-II en 147 (70,0%) fase III-IV patiënten. Follow-up informatie, waaronder resultaten van patiënten en het tijdsinterval tussen de datum van chirurgische resectie en de datum van de kanker-gerelateerde sterfte werd verzameld. Die zaken lost to follow-up en stierven uit andere dan maagkanker oorzaken werden beschouwd als gecensureerde data voor de analyse van de overleving. De studie werd goedgekeurd door onze plaatselijke ethische comités. Monsters werden verkregen met geïnformeerde toestemming overeenkomstig de ethische standaard van de Verklaring van Helsinki van 1975, zoals herzien in 2000
Immunohistochemie
Paraffine plakjes werden behandeld volgens de EnVision immunohistochemische kit, en de resultaten werden geanalyseerd met een dubbele blind methode. Twee pathologen geëvalueerd scores onafhankelijk. PBS in plaats van het primaire antilichaam werd gebruikt als negatieve controle. Voor NTR1 (polyklonaal antilichaam, Abcam, met een concentratie van 5 ug /ml) kleuring, de mate van expressie werd gecategoriseerd als (positieve kleuring van < 10% van de tumorcellen), positief (positieve kleuring van ≥10% en <, 50% van de tumorcellen), of sterk positief (positieve kleuring met ≥50% van de tumorcellen) [15]
Volgens Aust et al.. [16], een semi-kwantitatieve evaluatie van β-catenine (. Monoklonaal antilichaam MAB-259, Fuzhou Maixin Biotech Co., Ltd, voorverdund) nucleaire translocatie werd uitgevoerd door het schatten van het percentage positieve kernen als volgt: 0; 1: 0-5%; 2: 5 tot 25%; 3: tot 25%, en een cut-off van > 5% van de positieve β-catenine kernen (score 2 of meer) was significant voor de nucleaire translocatie van het eiwit beschouwd
EGFR (monoklonaal antilichaam, RMA-0554. , Fuzhou Maixin Biotech. Co., Ltd, Pre-verwaterd) reactiviteit werd gescoord als 0 als er geen membraanreactiviteit binnen de tumor, of als 1+, 2+ of 3+ afhankelijk van de intensiteit boven het achtergrondniveau [17 ]. De score van 1+ naar 3+ werd gedefinieerd als positief en de score van 0 werd gedefinieerd als negatief [18].
Statistische analyse Leer Alle gegevens werden geanalyseerd met behulp van SPSS 18.0. x 2 testen (of Fisher's exact test) werden gebruikt voor monsters geclassificeerd als percentages; De Spearman analyse werd gebruikt om de correlatie tussen twee variabelen te bepalen. Zowel de Kaplan-Meier-methode en log-rank test werden gebruikt voor enkele variant analyse en een Cox model werd gebruikt om de relaties tussen de overlevingscijfers en meerdere variabelen te analyseren. P Restaurant < 0,05 werd beschouwd als statistisch significant.
Resultaten
NTR1 expressie in tumorweefsel significant hoger dan in aangrenzende normale weefsels en is positief gecorreleerd met pathologische graad, T-trap, N-stadium en TNM
Volgens de criteria vastgesteld voor immunokleuring, 71,0% (149/210) van tumoren waren positief voor NTR1 kleuring. Slechts 28 (13,3%) gevallen waren positief in aangrenzend normaal maagslijmvlies. Via de x 2-test NTR1 expressie van tumorweefsels was significant hoger (P
< 0,01) (Fig. 1). Fig. 1 Expressie van NTR1 bij maagkanker weefsels (200 ×). Sterk positief NTR1 expressie in darm- (a) en diffuus-type (b) van maagkanker weefsels; negatieve NTR1 expressie in de aangrenzende normale maagslijmvlies (c)
Ter Spearman analyse werd NTR1 expressie positief gecorreleerd met pathologische graad (fig. 2), T stadium, N stadium TNM en is niet gecorreleerd met geslacht, leeftijd, grootte van de tumor en classificatie Lauren's (tabel 1). Fig. 2 Expressie van NTR1 in intestinale-type maagkanker weefsels (200 ×). NTR1 positieve expressie in goed gedifferentieerd intestinale-type maagkanker weefsels (a); Sterk positief NTR1 uitdrukking in arme gedifferentieerde intestinale-type maagkanker weefsels (b)
Tabel 1 Clinicopathologische kenmerken en de expressie van NTR1 in 210 maagkankerpatiënten
Artikel
NTR1 Expression intensiteit

p
-waarde *
Negatief
positieve
sterk positief
Age
0,302 Restaurant < 60
15
27
23
≥60
46
53
46
Sex
0,315
Man
44
61
55
Female
17
19
14
Tumor grootte (cm)
0,291 Restaurant < 5
34
21
31
≥5
27
59
38
Pathologische leerjaar
0,027
Well en gematigde
34
34
25

• Klinisch-pathologische kenmerken en resultaten in fase I-III mucinous adenocarcinoom van de maag: een retrospectief onderzoek op een enkele medische center
• Gastrectomy in uitgebreide behandeling van gevorderde maagkanker met synchrone levermetastasen: een prospectief vergelijkende study