Целебные Потенциал Picrorhiza kurroa (Scrofulariaceae) корневищ против индометацин-индуцированной язвой желудка:. Механистического исследования

Целебные Потенциал Picrorhiza kurroa
(Scrofulariaceae) корневища против индометацин-индуцированной язвой желудка:. Механистической разведки
Аннотация
Справочная информация
Настоящее исследование было предпринято с целью оценить потенциал корневища индийского лекарственного завод, Picrorhiza kurroa
в заживлении индометацин-индуцированной острой изъязвления желудка у мышей и исследовать его способность модулировать окислительного стресса и уровни простагландина (PGE <суб> 2) и EGF в процессе.
Методы
Мужской швейцарских мышей-альбиносов, язвенные с индометацином (18 мг /кг, перорально, разовая доза) обрабатывали до 7 дней с различными дозами метанола экстракта P. kurroa
корневищ (обозначенный как PK). Заживление способность наиболее эффективной дозы PK (20 мг /кг, почтовое отделение × 3 г), сравнивали с омепразола (Омез) (3 мг /кг, р. О. × 3 г). Последствия лекарственной терапии для одного и трех дней на биохимические показатели оценивали путем сравнения результатов с этим неочищенных мышей 1 3-й и й день изъязвления. Ткани желудка мышей были использованы для биохимического анализа.
Результаты
макроскопического индексы показали максимальную изъязвления на 3 й день после того, как индометацин администрацию, которая эффективно врачуются ПК. В соответствии с оптимизированным режимом лечения, ПК и Омез уменьшенный индексы язвенных на 45,1% (Р &
л; 0,01), и 76,3%, соответственно (Р &
л; 0,001)., По сравнению с необработанными изъязвлённую мышей
по сравнению с изъязвленной необработанных мышей, у пациентов, получавших ПК в течение 3-х дней показали, снизился уровень реактивных соединений тиобарбитуровой кислоты (ТБК) (32,7%, P &
л; 0,05) и белка карбонила (37,7%, P &
л; 0,001), и увеличилась муцина (42,2%, P &
л; 0,01), через слизистую оболочку PGE <югу> 2 (21,4%, P &
л; 0,05), а также выражения ЦОГ-1 и 2 (26,9% и 18,5%, P &
л; 0,05), EGF (149,0%, P &
л; 0,001) и VEGF (56,9%, P &
л; 0,01). Омез уменьшил TBARS (29,4%, P &
л; 0,05), и белок карбонильного (38,9%, P &
л; 0,001) и увеличение муцина (38,3%, P &
л; 0,01), без изменения других параметров существенно.
Заключение
Рк (20 мг /кг, перорально × 3-х дней) могли бы эффективно излечивать индометацином индуцированных изъязвления желудка у мышей путем снижения окислительного стресса, а также содействие муцина секреции, синтез простагландинов и приумножения выражения циклооксигеназы ферментов и факторов роста.
Предпосылки
желудочно-кишечной токсичности, связанной с нестероидными противовоспалительными препаратами (НПВП) является важной медицинской проблемой, несмотря на недавние фармацевтических достижений [1]. Кроме того, вызывая образование язв желудка, НПВС также ингибируют заживление язв [2, 3]. Следовательно, профилактика желудочно-кишечных расстройств по-прежнему вызывает озабоченность как клинического врача и исследователей. Несмотря на их эффективность в управлении НПВС индуцированной язвы желудка, имеющиеся в настоящее время синтетические противоязвенные препараты придают побочные эффекты, а также дороги, особенно для сельского населения. С этой целью мы уже сообщали, многообещающий анти-ульцерогенное активность ряда растительных продуктов [4-6]
Picrorhiza kurroa
. (Семья: Scrofulariaceae, общее название: Picrorhiza, katuka, kutki) представляет собой небольшой многолетнее травянистое растение растет в холмистых районах Северо-западного региона Гималаев в Индии и Непале. Листьев, коры и подземные части растения, в основном корневища широко используются в традиционных индийских (аюрведический) систем медицины с древних времен. Хотя это показывает антиоксидантное, противовоспалительное и иммуномодулирующее деятельность, наиболее ценится за его гепатопротекторное действие. Горькие корневища Picrorhiza
были использованы на протяжении тысяч лет в Индии для лечения людей с несварением желудка [7], и запор из-за недостаточной секреции пищеварительных [8]. Picrorhiza
рассматривается как trophorestorative травы для печени, а также мощный иммунный стимулятор [9]. Его составляющая, picroliv также сообщалось, обладают желчегонным действием [10], а также предотвратить повреждения печени, вызванные этанолом [11], химических веществ [12] и микроорганизм [13].
Основной целью данного исследования было изучение исцеления свойство метанола экстракта P. kurroa
корневища (обозначенный как PK) против индометацин-индуцированной острой язвой желудка мышей визави
что коммерческого препарата, омепразола (Омез). Индометацин, представитель семейства нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП), вызывает язвы желудка с помощью различных процессов, в том числе генерации РОС, ингибирование синтеза простагландинов, инфильтрацией полиморфноядерных лейкоцитов, индукции апоптоза и инициации перекисного окисления липидов [14, 15]. Следовательно, заживление язвы потенциала препаратов, оцениваемых гистопатологией, коррелировала с их эффектами в снижении индометацин-индуцированного окислительного стресса. Антиоксидант активность испытуемых проб оценивали с точки зрения их способности защищать окислительное повреждения липидов, белков и тиол-зависимой антиоксидантной защиты организма в желудочном тканях. Кроме того, НПВП-индуцированной гастропатии также связано с уменьшением синтеза простагландинов [16]. Следовательно, роль испытываемых образцов в секреции слизи увеличивается, и экспрессия эпидермального фактора роста (ЭФР), а также подъемные PGE <суб> 2 синтеза также были исследованы.
Методами
Растительный материал
корневище P. kurroa
(обозначается как ПК), закупаемых на местном рынке был использован для настоящей работы. Завод был таксономически идентифицирован (присоединение нет. 324139) Ботаническим службы Индии, Индийского ботанического сада, Kokata, Индия.
Химические
2-тиобарбитуровой кислоты (ТБК), этанол, бутанол и этилацетат, закупленные в E. Merck (Мумбаи, Индия), в то время как трихлоруксусной кислоты (TCA) был от Томаса Бейкера (Мумбаи, Индия). Альциановый синий, индометацин, бычий сывороточный альбумин (БСА), haematoxylene, квасцы, эозин, бутилгидрокситолуол (ВНТ), гидрохлорид гуанидина, трифторуксусной кислоты (ТФК), омепразола (Омез), 3,3 '-diaminobenzidine (ДАБ), кроличье анти -mouse EGF и Trizma базы были закуплены у Sigma Chemicals (Сент-Луис, штат Миссури, США). Другие используемые реагенты были 35% перекиси водорода (Ланкастер, Моркэмб, Великобритания), 2,4-динитрофенилгидразина (DNPH), динатрийгидрофосфат и однозамещенный фосфат натрия (BDH, Пул Дорсет, Великобритания), сахароза и 5,5'-дитиобис -2-nitrobenzioc кислоты (DTNB) (SRL, Мумбаи, Индия), лошади и козья сыворотка (Banaglore Genie, Banaglore, Индия), PGE <югу> 2 метаболита набора (Cayman Chemical, штат Мичиган, США) и конъюгированного с пероксидазой козьего анти- кролика IgG (EMD Biosciences, Sandiego, США).
Измерительные приборы
Оптическую спектрофотометрии проводили при 25 ° С, используя Jasco V-550 УФ-Вид спектрофотометр. Длина волны сканирования и измерения оптической плотности были сделаны в кварцевых кюветах 1 мл 1 см длины пути.
Приготовление растительных экстрактов
воздушно-сухих корневищ P. kurroa
(250 г) нарезать на мелкие кусочки, замачивают в метаноле (1 л) в течение двух дней и надосадочную жидкость сливают. После повторения всего процесса в три раза, объединенные экстракты фильтровали через нейлоновую сетку, и упаривают в вакууме и, наконец, лиофилизируют. Сырой экстракт, обозначенный как ПК по всей рукописи, хранили в вакуумном эксикаторе.
Приготовление лекарства
Препараты были приготовлены из ПК и Омез в виде водных суспензий, в 2% гуммиарабик в качестве транспортного средства, и вводят мышам перорально.
Фармакологические тесты
Животные и экспериментальный протокол для изъязвления
Мужские швейцарские альбиносы мышей разводили в д-р BC Рой послевузовском институт фундаментальных медицинских наук, Калькутта, Индия и BARC Лаборатория вивария фонда , Мумбаи, Индия. Они были приобретены после получения разрешения (послевузовском Институт фундаментальных медицинских наук, Комитет по этике животных Колката 507 /CPCSEA, Санкция No. ИКАЭ /SB-2/2004 /UCM-16, от 06.15.04 и BARC животных Комитет по этике (BAEC) , лабораторных животных объект. не санкционировать нет. BAEC /03/05, от 11.07.05) от соответствующих комитетов по этике животных двух центров и были обработаны следующие международных руководящих принципов животных комитет по этике. 6-8 недель мышей (25-30 г) были выращены на сбалансированной диете лаборатории в соответствии с NIN, Хайдарабад, Индия и дали водопроводной воды вволю. Их содержали при температуре 20 ± 2 ° C, 65-70% влажности, и дневной /ночной цикл (12 ч /12 ч). В начале каждого эксперимента все животные были идентифицированы с помощью типичных выемками в ухе и конечностей, а затем рандомизированное. Это было сделано, чтобы выполнить все эксперименты слепым способом. Язвы у мышей индуцировали введением индометацина (18 мг /кг, р. О.), Растворенный в дистиллированной воде, и суспендируют в носителе, камеди акации (2%) в виде однократной дозы. Наши исследования с 5, 10, 15, 18, 20, 25 и 30 мг /кг, р. о. индометацина показало, что самые низкие дозы (5 и 10 мг /кг), при условии незначительной изъязвление через 6 часов его введения, в то время как более высокие дозы (25 и 30 мг /кг) приводило к смерти. Выбранная доза (18 мг /кг) получают оптимальную изъязвления с воспалением и через слизистую оболочку инсульта, не вызывая какой-либо смертности мышей. Животных лишали пищи, но имели свободный доступ к водопроводной воде 24 часа до язвы индукции.
Стандартизация дозы препарата для
стандартизации доз лекарственных средств, PK (5, 10, 20 и 40 мг /кг) была дана в виде разовой дозы в день до семи дней. Первая доза PK и Омез получили 6 ч после введения индометацина. В последующие шесть дней, испытательные образцы были даны в 9 утра на каждый день. Пять мышей были взяты в каждой группе, и каждый эксперимент повторяли три раза. Мыши были умерщвлены на 1 й, 3 й, 5 й и 7 й дни, через 4 часа после введения последней дозы PK. Степень заживления язвы оценивали от макроскопических оценки ущерба (MDS) из необработанных и обработанных Изъязвлённая мышей в соответствующие дни. Оптимизированный режим лечения (препараты доза и период лечения) оценивали с МДС из групп мышей, получавших лечение выше.
Оценка изъязвления и исцеления от МДС
Мышей умерщвляли после передозировки с тиопентала. Желудок от нормальных и обработанных групп были быстро удалены, открыты вдоль большой кривизны, и тщательно промывают физиологическим раствором. Изъязвленной участки слизистой оболочки желудка были визуализированы с использованием прозрачного листа и рассекает микроскопом. МДИ оценивали [17] путем классификации травмы желудка по шкале 0-4, в зависимости от серьезности гиперемии и геморрагических поражений: 0 - почти нормальной слизистой оболочкой, 0,5 - гиперемии, 1 - один или два поражения, 2 - серьезные повреждения , 3 - очень тяжелые поражения, 4 - слизистая оболочка полна поражений. (поражения - геморрагических эрозий, гиперемия - сосудистые скоплениями). Эксперименты проводились двумя исследователями, ослепленных к группе и лечения животных. Секции были закодированы, чтобы устранить предвзятость наблюдателя. Данные для анализа представлены в виде среднего значения ± SEM из обзора как минимум из трех секций на одно животное и пять животных в каждой группе.
Исследования о биохимических показателей
Результаты показали, РМР максимальное заживление язвы после трех дней медикаментозное лечение. Изъязвления желудка у необработанных мышей также достиг пика на 3 й день после того, как индометацин администрации. Таким образом, мы оценивали биохимические параметры при оптимизированного режима лечения [PK (20 мг /кг) и Омез (3 мг /кг)] до 3 й день только изъязвления. Для этого, следующие семь групп каждая из которых содержит 5 мышей были выбраны из тех, которые используются для анализа МДИ, а данные, приведенные получены из трех повторностей:
Группа I - нормальные контрольные мыши; II группа - сгнила мышей, и умерщвляли через 10 ч (считается как один день); III группа - сгнила мышей, и умерщвляли на 3 й день; Группа IV-V - сгнила мышей, обрабатывали PK и Омез соответственно на 1 день, и умерщвляли через 4 ч после введения опытных образцов; Группа VI-VII -. Изъязвлённая мышей, получавших PK и Омез соответственно в течение 3 дней, и умерщвляли в 3 й день, через 4 часа после последней дозы испытуемых образцов
Количественное определение белков и липидов повреждений во время изъязвление и целительного
железистой ткани желудка были собраны из пяти животных для каждой ткани, промывали соответствующим буфером и использовали для биохимических исследований. Влажные массы тканей регистрировали и опыты были проведены в трех повторностях. Железистые участки из-под контроля, язвенные и обработанных лекарством мышей, отобранных на разных временных интервалах гомогенизируют с гомогенизатор стеклянной трубки-тефлоновые в 50 мМ фосфатном буфере, рН 7,4 и центрифугируют при 1200 х г для получения надосадочной жидкости. Количество белка карбонилов в гомогенате ткани, определяли в соответствии с описанным способом [18]. ДНФГ (4 мл, 10 мМ) в 2 М HCl добавляли к надосадочной жидкости (1,0 мл), который выдерживали в течение 1 ч с прерывистым встряхивании. Добавляли Охлажденную льдом 20% водный раствор ТХУ (5 мл) и полученную смесь инкубировали в течение 15 мин. Осажденный белок промывают 3 раза этанол-этилацетат (1: 1), растворенного в 1 мл раствора, содержащего 6 М гуанидин HCl в 20 мМ фосфата калия (одноосновной) доводили до рН 2,3 с помощью трифторуксусной кислоты. После центрифугирования, поглощение супернатанта считывали при 362 нм (Е = 2,2 × 10 4 M -1 см -1).
Для анализа перекисного окисления липидов (с точки зрения ТБКРВ), 10% гомогенат от каждого из соответствующих образцов готовили в буфере (320 мМ сахарозы, 5 мМ HEPES, 20 мМ ЭДТА и 0,01% ВНТ). Они были подвергнуты дифференциальному центрифугированию (1200 • g и 12000 • g), чтобы получить митохондриальные гранулы, которые отмывали буфером (150 мМ KCl и 20 мМ фосфатный буфер) и, наконец, суспендированные в 50 мМ фосфатном буфере, рН 7,4. Мембранную фракцию митохондриальной (1 мл) обрабатывали трихлоруксусной кислотой ТВА-HCl (2 мл, 15% трихлоруксусной кислоты, 0,375% ТВА, 0,25 N HCl), содержащего 0,01% ВНТ, нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин, охлаждают и центрифугируют , Поглощение супернатанта измеряли при 535 нм (Е = 1,56 × 10 5 M -1 см -1) [19].
Измерение небелковому тиола (NP-TSH )
После описанным способом [20], измеряли через слизистую оболочку желудка NP-TSH. Если коротко, то фундальную гомогенатах желудка от контрольной, изъязвлённую, мышей, обработанных лекарством, были сделаны в 0,2 М Трис-HCl, рН 8,2, содержащем 20 мМ ЭДТА, и центрифугировали. Аликвоту гомогената (1 мл) осаждали охлажденным льдом 20% ТСА (1 мл) и центрифугировали. Жидкость над осадком (1 мл) добавляют к 2 мл 0,8 М Трис-HCl, рН 9, содержащего 20 мМ ЭДТА, и смешивают с 0,1 мл 10 мМ DTNB. Поглощение желтого хромогена при 412 нм (Е = 13,6 × 10 4 M -1 см -1) было прочитано.
Муцин анализа
После описанным способом [21] , свободный муцина в желудочном тканей оценивалось. В кратком изложении, железистой части желудка была отделена от полости желудка, взвешивают и сразу же переносили в 10 мл 0,1% вес /об Альциановый синий (AB) (в растворе 0,16 М сахарозы, забуференной 0,05 мМ раствором ацетата натрия, рН доводили до 5,8). После окрашивания в течение 2 ч, избыток красителя удаляли из ткани с помощью двух последовательных промывок с 10 мл раствора 0,25 М раствором сахарозы. Краситель в виде комплекса с стенки желудка слизи экстрагировали 10 мл 0,5 М хлорида магния путем прерывистого встряхивания (1 мин) с интервалом в 30 мин в течение 2 ч. Синий экстракт (2 мл) энергично встряхивают с равным объемом диэтилового эфира. Полученную эмульсию центрифугируют со скоростью 3600 оборотов в минуту в течение 10 мин, а поглощение водного слоя считывали при 580 нм. Количество Ab извлеченный на г влажного железистой ткани рассчитывали из стандартной кривой, полученной с использованием различных концентраций Ab.
ЦОГ-1 и ЦОГ-2 Анализ экспрессии
В течение 30 минут уборки, изъязвленной части ткани желудка фиксировали в нейтральном забуференном 10% физиологического раствора формальдегида и разрезали. Через 24 ч после фиксации с последующей встраивания в парафиновый блок, он был разрезан на отрезки 5 микрон на предметное стекло и выражения ЦОГ-1 и ЦОГ-2, были количественно определены следующие сообщенным методике [22], с незначительной модификацией. После депарафинизации в ксилоле, срезы обрабатывали градуированных серии спирта и затем регидратации в PBS при рН 7,5. Срезы последовательно обрабатывают 3% раствором перекиси водорода в PBS, и белка блокаторы (5% бычьего сывороточного альбумина, 5% нормальной козьей сыворотки в PBS), и инкубировали в течение ночи при 4 ° С с первичным антителом (мышиным анти-ЦОГ-1 и ЦОГ 2, 1: 200). После инкубации в течение 2 ч при комнатной температуре с пероксидазой, конъюгированный кроличий анти-мышиного антитела (вторичного 1: 500), положительная реакция была обнаружена при воздействии стабильной ДАБ в течение 2 до 5 мин. В контрольных участках, антитела были опущены, и только ЗФР. После того, как counterstaining слайды гематоксилином Майера, интенсивности цветных immunolocalized продуктов оценивали с помощью программного обеспечения BIOVIS MV500. Пять областей из каждой секции были отсканированы и вычисляли интегральную оптическую плотность (IOD) в каждой области. ОМО отрицательного контроля вычитают из ОМО каждой экспериментальной секции для каждого животного во всех группах.
Простагландин анализ
После уборки желудка, Corpus (полная толщина) вырезают, взвешивают (100 мг ) и суспендировали в 10 мМ натрий-фосфатного буфера, рН 7,4 (1 мл). Ткань измельчали ​​мелко ножницами и инкубировали при 37 ° С в течение 20 мин. После центрифугирования (9000 × г), простагландин Е <суб> 2 (ПГЕ <суб> 2) уровни в супернатанте измеряли с помощью ELISA [23], а концентрации выражены в пг /мг белка.
ЭФР экспрессии анализ
иммунным ЭФР проводилось [22] после аналогичного метода, используемого для ЦОГ-1 и ЦОГ-2, с незначительными изменениями. В этом случае, после блокирования эндогенной пероксидазы и лечение с белком-блокаторы, срезы ткани инкубировали в течение ночи при 4 ° С с первичным антителом при соответствующем разведении. В контрольных участках, только PBS, добавляли опуская антитела. После инкубации в течение 1 ч при комнатной температуре с пероксидазой козьим антителом против кроличьих IgG, положительная реакция была обнаружена при воздействии ДАБ в течение 2 до 5 мин. После того, как counterstaining слайды гематоксилином Майера, интенсивности цветных immunolocalized продуктов были количественно определены с помощью программного обеспечения BIOVIS MV500. Пять областей из каждой секции были отсканированы и вычисляли интегральную оптическую плотность (IOD) в каждой области. ОМО отрицательного контроля вычитают из ОМО каждой экспериментальной секции для каждого животного во всех группах.
Количественный анализ сыворотки VEGF
сыворотке VEGF измеряли с использованием образцов крови, отобранной из нисходящей аорты, с коммерчески доступные ELISA наборы следующие инструкции производителя.
желудочный секреторную анализ (pylorous модель лигирование)
Для изучения влияния исследуемых препаратов на желудочную секрецию, проводили пилорическая перевязка желудка стандартизирована в нашей лаборатории. Одна группа мышей (экспериментальный контроль) получили 2% аравийской камеди в дистиллированной воде (0,2 мл на мышь, перорально), в то время как различные группы лечения получали PK (20 мг /кг × 3 д), Омез (3 мг /кг × 3 г), индометацин (18 мг /кг × 1 г), как таковые или вместе с PK (20 мг /кг × 3 г), Омез (3 мг /кг × 3 d) соответственно. На 3 й день, вскрывают брюшную полость животных под легким эфирным наркозом для привратника перевязки (PL). После закрытия брюшной полости, животные были помещены в клетки под легкой сдержанностью и позволяют восстановиться после анестезии. Через 6 ч животных забивали, вскрывают брюшную полость и лигатуры помещали вокруг пищевода. Желудок был удален, и содержимое сливают в градуированную пробирку центрифуги после того, сделав небольшой ник вдоль большой кривизны, примыкающей к пилорического лигирования. Содержимое желудка собирали, измеряли, центрифугировали и подвергали биохимическому анализу.
Статистический анализ
Данные представлены в виде среднего значения ± SEM. Параметрические данные, которые включает в себя были проанализированы все биохимические показатели с помощью парного теста 'T' для парных данных или одного дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим добавлением множественных сравнений Даннет после теста. Непараметрических данных (макроскопических скоринг) анализировали с использованием теста Крускала-Уоллиса (непараметрический ANOVA) с последующим множественных сравнений Данна после теста. Вероятность значение P &
ЛТ; 0,05 считалось существенным. IC <югу> 50 значение PK оценивался с помощью пробит-анализа и уровень значимости анализа был исследован с помощью теста хи-квадрат.

Результаты Добыча и фитохимических анализ
Процесс экстракции дали метанол экстракт, PK в 12,57% вес /вес урожая. Анализ ТСХ показал, PK это будет сложной смесью большого количества органических соединений, большинство из них присутствует в виде гликозидов как показали реакция молиша. Наличие апоцинин, andorsin, picrosides I и II, и katukoside наряду с другими неустановленными соединений в PK была подтверждена сравнением его профиля TLC с теми из подлинных образцов.
Стандартизация дозы PK для желудка заживление язвы у мышей
доза PK для эффективного заживления язвы были оптимизированы путем проведения обработки с PK (5, 10, 20 и 40 мг /кг) до семи дней и сравнивая значения МДС обработанных и необработанных мышей в соответствующие дни , Временной ход степени изъязвления желудка (как об этом свидетельствуют от значений МДС) и его профилактика различными дозами ПК приведены на рис. 1. Мыши, получающие только носитель не показали никаких поражений слизистых оболочек. Лечение мышей с индометацином (18 мг /кг) получают типичные зависимые от времени острых повреждений слизистой оболочки желудка. Изъязвление достигло максимума на 3 й день изъязвлением, когда значение МДС увеличилось на 162,1% по сравнению с на один день (Р &
л; 0,001). После этого происходит постепенное восстановление из-за естественного исцеления, а также на 7 й день после изъязвления, величина МДС была снижена на 49,2% по сравнению с, что в один прекрасный день (P &
л; 0,01). Рисунок 1 Временной ход язвы желудка и его профилактики различными дозами ПК. Изъязвления желудка у мышей индуцировали путем перорального введения индометацина (18 мг /кг массы тела). Различные дозы PK использовались для экспериментов. Индексы язвы измеряли в разные дни 4 ч после введения последней дозы PK и значения представляют собой среднее ± S.E.M. (П = 15). аР
&л; 0,01, Б.П.
&л; 0,001 по сравнению с 1-й день изъязвляется необработанных мышей; сП
&л; 0,01, Д.П.
&л; 0,001 по сравнению с группой мышей III.
ПК, на всех выбранных дозах показали максимальное заживление язв на 3 й день изъязвления, а эффект зависит от дозы. По сравнению с соответствующими изъязвлённую управления, сокращение МДС (45,1% -52,9%, Р
≪ 0,01) П.К. (20 и 40 мг /кг) были одинаковыми, и значительно лучше, чем при его более низкой дозе (10 мг /кг). Эффект от PK (5 мг /кг) был незначительным. В аналогичных условиях, лечение с Омез (3 мг /кг) в течение 3-х дней снижало стоимость МДС на 76,3% (р &
л; 0,001) по сравнению с группой мышей III. Заживление наблюдается на продление лечения до семи дней с ПК было лучше, чем наблюдаемое с режимом лечения трехдневной. Тем не менее, большая часть это было связано с autohealing, с меньшим количеством вклада ПК.
В целом, лечение с ПК (20 мг /кг) и Омез (3 мг /кг) в течение 3 дней после того, как язва индукции, предусмотренных оптимальное заживление язвы , С учетом этих, все последующие эксперименты проводились с тем же самым режимом лечения. Выбранная доза Омез, которая также рекомендуемая терапевтическая доза для человека была оптимизирована нами [6].
Для необработанных мышей наблюдался пик изъязвления (максимум МДС) на третий день индометацин администрации. Следовательно, на этот раз точка была выбрана, чтобы выяснить IC <суб> 50 значение PK. С учетом значения МДС на 3 й день сгнила необработанных мышей, как 100%, IC <югу> 50 значение PK было установлено, что 23,30 ± 3,50 мг /кг.
Качественная оценка
макроскопического обследования показало, что индометацин введение привело к заметному повреждению железистой части мышей слизистой оболочки желудка. В течение 6 ч после введения индометацина, поверхностные эрозии и умеренное воспаление в желудке, что указывало на острый изъязвления. В день индукции язв, потеря foveolar структуры вместе с загадочной архитектурой была характерной чертой в большинстве необработанных мышей. Кроме того, наблюдалось мягкий воспалительный инфильтрат, содержащий нейтрофилы в собственной пластинке слизистой оболочки. Лечение как с ПК и Омез даже на один день ограниченный ущерб с неоднородными областях оголенные структурного эпителия.
Индометацином индуцированный гастропатия стал гораздо произносятся на третий день показывая выбито несколько областей изъязвления с воспалительный инфильтрат, содержащий нейтрофилов и макрофагов в слизистая оболочка, суб-слизистую оболочку и мышцы пальто наряду с геморрагическим серозной. замеченные большое количество аномальных клеток с измененным ядром в соотношении цитоплазмы. Лечение с помощью ПК и Омез в течение 3-х дней привело к уменьшению числа воспалительных клеток наряду с увеличением числа здоровых нормальных клеток в слизистой оболочке желудка, а также подслизистой оболочки, серозной и мышечных слоев с минимальным слизистых оболочек носа.
Влияние PK и Омез на перекисное окисление липидов и белков окисления в ткани желудка
эффекты индометацин потребления одних и после введения PK и Омез по степени перекисного окисления липидов (измеряется в терминах ТБК), окисление белков (измеренный с точки зрения содержания белка карбонильного ), тиол-зависимой системы обороны (НП-ТСГ) и муцина содержание в желудочном тканях мышей приведены в таблице 1 и таблице 2.Table 1 Действие лекарственного PK и Омез на уровни ТБК, белковых карбонилов, не- белок тиол и муцин в изъязвленной желудка ткани micea на один день изъязвления
Параметры

мышей группы I нормальное управление

Группа II 1-й день изъязвление управления

Группа III PK лечение

Группа IV Омез лечение

ТБК (нмоль /мг белка)
0,85 ± 0,03
1,18 ± 0.05c
0,94 ± 0.06d
0,89 ± 0.07d
белковых карбонилов (нмоль /мг белка)
1,08 ± 0,05 1,62 ±
0.09b
1,49 ± 0.12
1,53 ± 0,07
NP-TSH (нмоль /мг ткани)
1,99 ± 0,09 1,66 ±
0.08b
1,86 ± 0,08 1,81 ±
0,09
муцина (мкг /г ткани)
335,03 ± 14,43 213,02 ±
0.59b
240,33 ± 20,49 253,33 ±
14.53d
aStomach изъязвления у мышей индуцировали путем перорального введения индометацина (18 мг /кг) , П. К. (20 мг /кг /день × 1 день) и Омез (3 мг /кг /день × 1 день) были использованы в качестве испытуемых образцов. Анализы проводились через 4 часа после введения испытуемых образцов. Значения представляют собой среднее ± SEM (N = 15). ЬР
&л; 0,05, сП
&л; 0,01 по сравнению с нормальными мышами; дР
&л; 0.05 мышей по сравнению с группой II.
Таблица 2 Влияние PK и Омез на уровни ТБК, белковых карбонилов, небелковой тиола и муцина в изъязвленной желудка ткани micea на третий день изъязвления
Параметры

Группа I нормальные контрольные

III группа 3-й день изъязвление управления

Группа V PK лечение

VI группа Омез лечение

ТБК (нмоль /мг белка)
1,02 ± 0,06 1,53 ±
0.06c
1,03 ± 0.09d
1,08 ± 0.05d
белковые карбонилов (нмоль /мг белка)
1,18 ± 0,07 2,61 ±
0.17c
1,62 ± 0.10f
1,59 ± 0.09f
NP-ТСГ (нмоль /мг ткани)
2,06 ± 0,09 1,73 ±
0,09 ± 2,06
0.14d
2,05 ± 0.1d
муцин (мкг /г ткани)
343,30 ± 16,91 213,29 ±
17.91b
303,34 ± 17.4e
295,06 ± 15.62e
aStomach изъязвления у мышей индуцировали путем перорального введения индометацина (18 мг /кг). П. К. (20 мг /кг /день × 3 дней) и Омез (3 мг /кг /сут × 3 дней) были использованы в качестве испытуемых образцов. Анализы проводились на день три изъязвления, через 4 часа после приема последней дозы препарата. Значения представляют собой среднее ± SEM (N = 15). ЬР
&л; 0,05, сП
0,001 по сравнению с нормальными мышами, Д.П.
&л; 0,05, Э.П.
&л; 0,01, Ф.П.
&л; . 0,001 по сравнению с группой мышей III
введение индометацином заметно стимулировали процессы перекисного окисления липидов в тканях желудка, повышая содержание TBARS на 38,8% (Р
≪ 0,01) и 53% (P &
л; 0,001) соответственно на 1 3-й и й день изъязвления, по сравнению с нормальными контрольными мышами. Лечение с помощью ПК и Омез показал немедленный эффект, уменьшение содержания TBARS на 20,3% и 24,6% соответственно по сравнению с группой мышей II (P &
л; 0,05). Лечение с помощью ПК и Омез в течение трех дней, свел ее на 32,7% и 29,4% по сравнению с мышами из группы III (Р
≪ 0,05).
По сравнению с нормальным значением, содержание белка карбонилпроизводных изъязвленной мышей выше (50%), в первый день (Р &
л; 0,05), который вырос на 120,3% при пиковой изъязвлением (Р
&л; 0,001). Ни один из испытуемых препаратов показал непосредственное влияние на один день.

• Защитные эффекты (1- (4-гидрокси-фенил) -3-м-толил-пропенона халкона в индометацин-индуцированного желудочной эр…
• Желудочный патоген Helicobacter Pylori человек имеет потенциал ацетон карбоксилазы, что повышает его способность кол…