Cura Potencial de Picrorhiza kurroa (Scrofulariaceae) rizomas contra ulceração gástrica induzida por indometacina: a exploration.

mecanicista cura potencial do Picrorhiza kurroa
(Scrofulariaceae) rizomas contra ulceração gástrica induzida por indometacina:. Uma exploração mecanicista da arte abstracta
Fundo
o presente estudo foi realizado para avaliar o potencial dos rizomas da planta medicinal indiana, Picrorhiza kurroa
na cura de úlceras de estômago aguda induzida por indometacina em ratos e analisar a sua capacidade de modular o estresse oxidativo e os níveis de prostaglandina (PGE 2) e EGF durante o processo.
Métodos
ratos albinos Swiss machos, ulceradas com indometacina (18 mg /kg, po, dose única) foram tratados até 7 dias com diferentes doses de o extrato de P. kurroa
rizomas (designado como PK). A capacidade de cura da dose mais eficaz de PK (20 mg /kg, p. O. X 3 d) foi comparada com a de omeprazol (omez) (3 mg /kg, p. O. 3 × d). Os efeitos da droga para o tratamento de um a três dias sobre os parâmetros bioquímicos foram avaliados pela comparação dos resultados com a de ratinhos não tratados de um a r e 3 dias estr de ulceração. Os tecidos do estômago dos ratos foram utilizados para a análise bioquímica.
Resultados
Os índices macroscópicos revelaram máxima ulceração no 3 dia rd após indometacina administração, o que foi efetivamente curado por PK. De acordo com o regime de tratamento optimizado, PK e omez reduziu os índices de úlcera por 45,1% (P
< 0,01), e 76,3%, respectivamente (P
< 0,001)., Em comparação com os ratinhos não tratados ulceradas
comparado com os ratinhos não tratados ulceradas, aqueles tratados com PK durante 3 dias mostrou diminuição dos níveis de substâncias reactivas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) (32,7%, P
< 0,05) e carbonilo de proteínas (37,7%, P <
; 0,001), e aumento de mucina (42,2%, P
< 0,01), mucosa PGE 2 (21,4%, P
< 0,05), e as expressões de COX-1 e 2 (26,9% e 18,5%, P
< 0,05), o EGF (149,0%, P
< 0,001) e o VEGF (56,9%, P
< 0,01). Omez reduzida TBARS (29,4%, P
< 0,05), e carbonilo de proteínas (38,9%, P
< 0,001), e aumento de mucina (38,3%, P
< 0,01), sem alterando significativamente os outros parâmetros.
Conclusão
PK (20 mg /kg, po x 3 dias) possa efectivamente curar a ulceração do estômago induzidas por indometacina em ratos por redução do stress oxidativo, e promoção da secreção, a síntese de prostaglandina e aumentar a mucina expressões de enzimas ciclo-oxigenase e fatores de crescimento.
Fundo
toxicidade gastrointestinal associada com os medicamentos anti-inflamatórios não-esteróides (AINEs) é um importante problema médico apesar dos recentes avanços farmacêuticos [1]. Além de induzir ulceração gástrica, os NSAIDs também aparecem para inibir a cicatrização da úlcera [2, 3]. Consequentemente, a prevenção do distúrbio gastrointestinal continua a ser motivo de preocupação para ambos praticante clínico e pesquisadores. Apesar de sua eficácia na gestão da ulceração gástrica induzida NSAID, os medicamentos anti-ulcerosos sintéticos disponíveis atualmente conferem efeitos colaterais, e também são caros, especialmente para a população rural. Para este fim, temos relatado atividade anti-ulcerogênico promissora de vários produtos vegetais [4-6]
Picrorhiza kurroa
. (Família: Scrofulariaceae, nome comum: Picrorhiza, Katuka, kutki) é uma pequena erva perene que cresce nas partes montanhosas da região Norte-ocidental do Himalaia na Índia e Nepal. A folha, casca e as partes subterrâneas da planta, principalmente rizomas são amplamente utilizados nos sistemas tradicionais indianos (Ayurveda) da medicina desde os tempos antigos. Embora mostra anti-oxidantes, anti-inflamatória, e actividades imunomoduladoras, que é mais valioso para o seu efeito hepatoprotector. Os rizomas amargas de Picrorhiza
têm sido utilizados por milhares de anos na Índia para tratar pessoas com indigestão [7], e constipação devido a secreção digestivo insuficiente [8]. Picrorhiza
é considerado como uma erva trophorestorative para o fígado, bem como um estimulante imune potente [9]. Seu constituinte, picroliv também é relatado para ter efeito colerético [10], e prevenir lesões hepáticas causadas pelo etanol [11], produtos químicos [12] e microorganismo [13].
O objetivo principal deste estudo foi investigar a cura propriedade do extracto de metanol de P. picrorrhiza
rizoma (designado como PK) contra a ulceração gástrica induzida por indometacina aguda de ratinhos vis-à-vis que
do fármaco comercial, omeprazol (omez). A indometacina, um representante da não esteróide anti-inflamatório família (AINE), faz com que as úlceras gástricas através de vários processos, incluindo a geração de ROS, a inibição da síntese das prostaglandinas, a infiltração de leucócitos polimorfonucleares, indução de apoptose, e a iniciação da peroxidação lipídica [14, 15]. Assim, a úlcera capacidades das drogas, avaliadas por exame histopatológico de cura, foi correlacionada com os seus efeitos na redução do estresse oxidativo induzido por indometacina. A actividade antioxidante das amostras de teste foi testada em termos da sua capacidade de proteger a danos oxidativos de lípidos, proteínas, e de defesa antioxidante tiol-dependente nos tecidos gástricos. Além disso, a gastropatia induzida por NSAID é também atribuído à síntese diminuída das prostaglandinas [16]. Por conseguinte, o papel das amostras de ensaio em aumentar a secreção de muco, e a expressão do factor de crescimento epidérmico (EGF), bem como elevar a PGE 2 de síntese foram também investigados.
Métodos
material vegetal of the rizoma de P. kurroa
(designado como PK), adquiridos no mercado local foi utilizado para o presente trabalho. A planta foi taxonomicamente identificados (acesso. 324.139) pela Pesquisa Botânica da Índia, indiano Jardim Botânico, Kokata, na Índia.
Chemicals
ácido (TBA) 2-tiobarbitúrico, etanol, butanol e acetato de etila foram adquiridos a partir de E. Merck (Mumbai, Índia), enquanto que o ácido tricloroacético (TCA) era de Thomas Baker (Mumbai, Índia). Azul Alcian, indometacina, albumina de soro bovino (BSA), haematoxylene, alúmen, eosina, hidroxitolueno butilado (BHT), cloridrato de guanidina, ácido trifluoroacético (TFA), omeprazol (omez), 3,3 '-diaminobenzidine (DAB), anti-coelho -mouse EGF e base Trizma foram adquiridos de Sigma Chemicals (St. Louis, MO, EUA). Outros reagentes utilizados foram de 35% de peróxido de hidrogénio (Lancaster, Morecambe, UK), 2,4-dinitrofenil-hidrazina (DNPH), fosfato de hidrogénio dissódico e di-hidrogeno fosfato de sódio (BDH, Piscina Dorset, Reino Unido), sacarose e 5,5'-ditiobis -2-nitrobenzioc (DTNB) (SRL, Mumbai, Índia), cavalo e soro de cabra (Banaglore Genie, Banaglore, Índia), PGE 2 kit metabolito (Cayman Chemical, Michigan, EUA) e conjugado com peroxidase anti-cabra IgG de coelho (EMD Biosciences, Sandiego, EUA).
Instrumentação
A espectrofotometria de absorvância foi realizada a 25 ° C utilizando um Jasco V-550 UV-Vis. varreduras de comprimento de onda e medições de absorvância foram feitas em 1 ml de células de quartzo de percurso de 1 cm.
Preparação de extratos vegetais
Os rizomas secos ao ar de P. kurroa
(250 g) foram cortadas em pedaços finos, embebido em metanol (1 L) durante dois dias e o sobrenadante decantado. Depois de repetir todo o processo três vezes, os extractos combinados foram filtrados através de uma malha de nylon, e evaporou-se in vácuo e finalmente liofilizada. O extracto em bruto, designado como PK em todo o manuscrito, foi armazenado num exsicador de vácuo.
Preparação das drogas
As drogas foram preparados a partir de PK e omez como suspensões aquosas de 2% de goma acácia como o veículo, e administrado aos ratos por via oral.
testes farmacológicos
Animais e protocolo experimental de ulceração
ratos albinos Swiss machos foram criados pelo Dr. BC Roy Pós Instituto Universitário de Ciências Médicas básicas, Kolkata, Índia e BARC Laboratory animal House Facility , Mumbai, na Índia. Estes foram adquiridos depois de obter um certificado (Pós Instituto Universitário de Ciências Médicas Básicas, Comissão de Ética Kolkata animal 507 /CPCSEA, Sanção No. IAEC /SB-2/2004 /UCM-16, datada de 06.15.04 e Comissão de Ética BARC Animal (BAEC) , biotério. sancionar não. BAEC /03/05, de 11.07.05) a partir dos respectivos Comitês de Ética em animais dos dois centros e foram manuseados em conformidade com orientações Comitê de Ética animais internacionais. Os ratos de idade 6-8 semanas (25-30 g) foram criados em uma dieta equilibrada laboratório como por NIN, Hyderabad, India e dado tap água ad libitum. Elas foram mantidas a 20 ± 2 ° C, ciclo de 65-70% de humidade, e de dia /noite (12 h /12 h). No início de cada experiência, todos os animais foram identificados por entalhes típicos na orelha e os membros e, em seguida, randomizado. Isto foi feito para executar todas as experiências de um modo cego. Ulceração em ratinhos foi induzida pela administração de indometacina (18 mg /kg, p. O.) Dissolvido em água destilada e suspendeu-se no veículo, goma de acácia (2%) na forma de uma dose única. Os nossos estudos com 5, 10, 15, 18, 20, 25 e 30 mg /kg, p. o. de indometacina revelou que as doses mais baixas (5 e 10 mg /kg) fornecida ulceração menor após 6 horas da sua administração, enquanto as doses mais elevadas (25 e 30 mg /kg) conduziu a mortalidade. A dose escolhida (18 mg /kg) produziu ulceração óptima, com a inflamação da mucosa e insulto, sem causar qualquer mortalidade de ratinhos. Os animais foram privados de comida, mas tiveram livre acesso à água da torneira 24 h antes da indução de úlcera.
Padronização da dose de droga
Para a padronização das doses de droga, PK (5, 10, 20 e 40 mg /kg) foi dado como uma única dose por dia até sete dias. A primeira dose de PK e omez foram administrados 6 horas após a administração de indometacina. Nos seguintes seis dias, as amostras de teste foram administradas em nove horas em cada dia. Cinco ratinhos foram tomadas em cada grupo e cada experiência foi repetida três vezes. Os ratos foram sacrificados no 1 st, 3 rd, 5 th e 7 th dias, 4 horas após a administração da última dose de PK. A extensão da cicatrização da úlcera foi avaliada a partir dos escores de danos macroscópicos (MDS) dos camundongos ulceradas tratados e não tratados nos respectivos dias. O regime otimizado tratamento (dose drogas e período de tratamento) foram avaliadas a partir do MDS dos grupos de ratos receberam o tratamento acima.
Avaliação da ulceração e cicatrização da MDS
Os ratos foram sacrificados após uma overdose com tiopental. O estômago dos grupos normais e tratados foram removidos rapidamente, abertos ao longo da maior curvatura, e cuidadosamente lavados com solução salina normal. As áreas da mucosa gástrica ulceradas foram visualizadas utilizando uma folha transparente e um microscópio de dissecação. O MDS foi avaliada [17], através da classificação da lesão gástrica numa escala 0-4, com base na gravidade das lesões hemorrágicas e hiperemia: 0 - mucosa quase normal, 0,5 - hiperemia, 1 - uma ou duas lesões, 2 - lesões graves , 3 - lesões muito graves, 4 - mucosa completa das lesões. (lesões - erosões hemorrágicas, hiperemia - congestões vasculares). As experiências foram realizadas por dois investigadores cegos ao grupo de tratamento e os animais. As seções foram codificados para eliminar um viés do observador. Os dados para as análises são apresentados como a média ± SEM a partir da revisão de um mínimo de três secções por animal e cinco animais por grupo.
Estudos sobre os parâmetros bioquímicos
Os resultados MDS revelou a cura máxima úlcera após três dias de tratamento da toxicodependência. A ulceração do estômago nos ratos não tratados também atingiu pico no 3 dia rd após indometacina administração. Por isso, foram avaliados os parâmetros bioquímicos sob o regime de tratamento otimizado [PK (20 mg /kg) e omez (3 mg /kg)] até o 3 dia rd de apenas ulceração. Para isso, as seguintes sete grupos, cada um contendo 5 ratinhos foram seleccionados a partir daqueles utilizados para o ensaio de SMD e os dados apresentados são derivados de três repetições:
Grupo I - ratos de controlo normais; Grupo II - ratos ulcerada, e sacrificados após 10 h (considerado como um dia); Grupo III - ratos ulcerada, e sacrificados no 3 dia rd; Grupo IV-V - ratinhos ulcerado, tratada com PK e omez, respectivamente, para um dia, e sacrificados quatro horas após a administração das amostras de teste; Grupo VI-VII -. Camundongos ulceradas, tratadas com PK e omez, respectivamente, para 3 dias, e sacrificados no 3 dia rd, 4 h após a última dose das amostras de ensaio
quantificação dos danos proteínas e lipídios durante ulceração e cura
Os tecidos glandulares do estômago foram reunidas a partir de cinco animais para cada tecido, lavado com solução tampão apropriada e utilizado para estudos bioquímicos. Os pesos molhados dos tecidos foram registados e as experiências foram realizadas em triplicado. As porções glandulares do controlo, os murganhos ulceradas e tratados com o fármaco em intervalos de tempo diferentes foram homogeneizadas com um homogeneizador de teflon tubo de vidro num tampão de fosfato 50 mM, pH 7,4 e centrifugado a 1200 x g para obter o sobrenadante. A quantidade de carbonilos proteicos no homogenato de tecido, foi determinada seguindo um método descrito [18]. DNPH (4 ml, 10 mM) em HCl 2 M foi adicionada ao sobrenadante (1,0 ml), que foi incubada durante 1 hora com agitação intermitente. foi adicionada solução de TCA a 20% aquoso (5 ml) arrefecido com gelo e a mistura foi incubada durante 15 min. A proteína precipitada foi lavada 3 vezes com etanol-acetato de etilo (1: 1), dissolvido em 1 ml de uma solução contendo guanidina-HCl 6 M em fosfato de potássio 20 mM (monobásico), ajustada a pH 2,3 com ácido trif luoroacético. Após centrifugação, a absorvência do sobrenadante foi lida a 362 nm (∈ = 2,2 × 10 4 H -1 cm -1).
Para a análise da peroxidação lipídica (em termos de TBARS), um homogeneizado a 10% de cada uma das respectivas amostras foi preparada num tampão (sacarose 320 mM, HEPES a 5 mM, EDTA a 20 mM e 0,01% de BHT). Estes foram submetidos a centrifugação diferencial (1200 x g e 12.000 x g) para se obter os grânulos mitocondrial, que foram lavadas com o tampão (150 mM de KCl e 20 mM de tampão de fosfato) e finalmente suspensas num tampão de fosfato 50 mM, pH 7,4. A fracção de membrana mitocondrial (1 ml) foi tratada com TCA-TBA-HCl (2 mL, 15% TCA, 0,375% de TBA, de 0,25 N de HCl) contendo 0,01% de BHT, aqueceu-se num banho de água a ferver durante 15 min, arrefecido e centrifugado . A absorvência do sobrenadante foi medida a 535 nm (∈ = 1,56 × 10 5 M -1 cm -1) [19].
Medição de tiol não proteico (NP-TSH )
Seguindo um método relatado [20], a mucosa gástrica NP-TSH medido. Resumidamente, os homogeneizados de estômago fúndica do controle ratinhos tratados com a droga, ulceradas, foram feitas em tampão de 0,2 M Tris-HCl, pH 8,2, contendo EDTA 20 mM e centrifugou-se. Uma alíquota do homogenato (1 ml) foi precipitada com gelo-frio TCA a 20% (1 ml) e centrifugado. O sobrenadante (1 ml) foi adicionada a 2 ml de tampão 0,8 M Tris-HCl, pH 9 contendo EDTA 20 mM e misturou-se com 0,1 ml de DTNB 10 mM. A absorvância do cromogénio amarela a 412 nm (∈ = 13,6 × 10 4 H -1 cm -1) foi lido.
Ensaio de mucina
Seguindo um método relatado [21] , a mucina livre nos tecidos gástricos foi estimado. Resumidamente, a porção glandular do estômago foi separada a partir do lúmen do estômago, pesados ​​e transferidos imediatamente para 10 ml de 0,1% p /v de azul Alcian solução (Ab) (em solução 0,16 M de sacarose tamponado com uma solução de acetato de sódio 0,05 mM, pH ajustado para 5,8). Após a coloração, durante 2 h, o excesso de corante foi removido do tecido por duas lavagens sucessivas com 10 ml de solução 0,25 M de sacarose. O corante complexado com o muco parede gástrica foi extraída com 10 ml de cloreto de magnésio 0,5 M, por agitação intermitente (1 min) a intervalos de 30 min durante 2 horas. O extracto de azul (2 ml) foi vigorosamente agitada com um volume igual de éter dietílico. A emulsão resultante foi centrifugada a 3600 rpm durante 10 min, e a absorvência da camada aquosa foi lida a 580 nm. A quantidade de Ab extraída por g de tecido glandular húmido foi calculada a partir de uma curva padrão preparada com várias concentrações de Ab.
COX-1 e COX-2 de expressão ensaio
dentro de 30 min de colheita, as porções da ulceradas tecidos do estômago foram fixados em formol salino neutro tamponado a 10% e seccionados. Após 24 h de fixação, seguido por incorporação num bloco de parafina, que foi cortada em secções de 5 micron sobre uma lâmina de vidro e as expressões de COX-1 e COX-2 foram quantificados na sequência de um procedimento relatado [22], com ligeira modificação. Após desparafinização em xileno, as secções foram tratadas com uma série graduada de álcool e, subsequentemente, re-hidratadas em PBS a pH 7,5. As secções foram tratadas sequencialmente com 3% de peróxido de hidrogénio em PBS, e bloqueadores de proteína (5% de albumina de soro de bovino, 5% de soro normal de cabra em PBS), e incubadas durante a noite a 4 ° C com o anticorpo primário (murganho anti-COX-1 e COX 2, 1: 200). Após incubação durante 2 h à temperatura ambiente com anticorpo conjugado com peroxidase de coelho anti-ratinho secundário (1: 500), uma reacção positiva foi detectada pela exposição a DAB estável durante 2 a 5 min. Em secções de controlo, os anticorpos foram omitidos, e foi adicionado apenas PBS. Após contracoloração das lâminas com hematoxilina de Meyer, as intensidades de produtos imunolocalizada coloridas foram avaliados utilizando software Biovis MV500. Cinco áreas de cada seção foram digitalizados e calculou-se a densidade óptica integrada (IOD) em cada área. O IOD do controlo negativo foi subtraída da IOD de cada secção experimental para cada animal em todos os grupos.
Ensaio Prostaglandina
Após a colheita do estômago, o corpo (espessura total) foi excisado, pesados ​​(100 mg ) e suspendeu-se em tampão de fosfato de sódio 10 mM, pH 7,4 (1 ml). O tecido foi cortado finamente com uma tesoura e incubou-se a 37 ° C durante 20 min. Após centrifugação (9000 x g), a prostaglandina E 2 (PGE 2) níveis no sobrenadante foram medidas por ELISA [23], e as concentrações são expressas como proteínas pg /mg.
EGF expressão O ensaio
imunocoloração de EGF foi efectuado [22] seguindo um método semelhante ao utilizado para a COX-1 e COX-2, com pequenas modificações. Neste caso, depois de bloquear a peroxidase endógena e o tratamento com os bloqueadores de proteína, as secções de tecido foram incubadas durante a noite a 4 ° C com anticorpo primário a uma diluição adequada. Em secções de controlo, apenas a PBS foi adicionado omitindo os anticorpos. Após incubação durante 1 h à temperatura ambiente com IgG anti-coelho de cabra conjugado com peroxidase, uma reacção positiva foi detectada pela exposição a DAB durante 2 a 5 min. Após contracoloração das lâminas com hematoxilina de Meyer, as intensidades de produtos imunolocalizada coloridas foram quantificados utilizando software Biovis MV500. Cinco áreas de cada seção foram digitalizados e calculou-se a densidade óptica integrada (IOD) em cada área. O IOD do controlo negativo foi subtraído do IOD de cada seção experimental para cada animal em todos os grupos.
Ensaio de VEGF no soro
O VEGF no soro foi medida usando as amostras de sangue tiradas da aorta descendente, com comercialmente kits ELISA disponíveis seguindo as instruções do fabricante.
ensaio de secreção gástrica (modelo de ligadura pylorous)
Para estudar os efeitos dos fármacos de teste sobre a secreção gástrica, foi realizada a ligação pilórica do estômago normalizado no nosso laboratório. Um grupo de ratinhos (controle experimental) receberam 2% de goma acácia em água destilada (0,2 ml por ratos, po), enquanto que os diferentes grupos de tratamento foram dadas PK (20 mg /kg x 3 d), omez (3 mg /kg x 3 d), indometacina (18 mg /kg x 1 d) como tal ou juntamente com PK (20 mg /kg x 3 d), omez (3 mg /kg x 3 d), respectivamente. No 3 dia rd, o abdómen dos animais foi aberto sob anestesia com éter de luz para ligadura do piloro (PL). Após o encerramento do abdómen, os animais foram colocados em gaiolas sob retenção da luz e deixou-se recuperar da anestesia. Após 6 h, os animais foram sacrificados, o abdómen foi aberto e uma ligadura foi colocado em torno do esófago. Estômago foi removido e o conteúdo foi drenado para um tubo de centrífuga graduado depois de fazer um pequeno entalhe ao longo da maior curvatura adjacente à ligação pilórica. Os conteúdos gástricos foram recolhidos, medido, centrifugadas, e submetidos a análise bioquímica.

Análise estatística Os dados são apresentados como média ± SEM. Os dados paramétricos que inclui foram analisados ​​todos os parâmetros bioquímicos usando um teste emparelhado 't' para os dados emparelhados ou uma análise de variância (ANOVA) seguido de um Dunnet comparações múltiplas pós-teste. dados não paramétricos (pontuação macroscópica) foram analisados ​​por meio do teste de Kruskal-Wallis (não paramétrico ANOVA), seguido de comparações múltiplas de um Dunn pós-teste. Um valor de probabilidade de P Art < 0,05 foi considerado significativo. O IC 50 valor de PK foi estimada utilizando a análise Probit eo nível de significância das análises foi investigada pelo teste do qui-quadrado.
Resultados
Extracção e análise fitoquímica
O processo de extração produziu o extracto de metanol, PK em 12,57% w /w de rendimento. A análise por CCF da PK revelou tratar-se de uma mistura complexa de um grande número de compostos orgânicos, a maioria destes estar presente como glicósidos, conforme revelado por teste de molisch. Presença de apocinina, andorsin, picrosides I e II, e katukoside juntamente com outros compostos não identificados em PK foi confirmada por comparação do seu perfil de TLC com aqueles das amostras autênticas.
Padronização da dose de PK para a cicatrização da úlcera gástrica em ratos
a dose de PK para a cicatrização da úlcera eficaz foram optimizadas efectuando o tratamento com PK (5, 10, 20 e 40 mg /kg) até sete dias e comparando os valores de SMD de ratos tratados e não tratados nos respectivos dias . O curso de tempo da extensão da ulceração do estômago (como revelado por valores MDS) e a sua prevenção por diferentes doses de PK são mostrados na Fig. 1. Os ratos que receberam apenas o veículo não mostraram lesões nas mucosas. Tratamento de ratinhos com indometacina (18 mg /kg) produziu lesões agudas típicos dependentes do tempo na mucosa gástrica. A ulceração máximo atingido no dia 3 dias estr de ulceração quando o valor MDS aumentou 162,1% comparada com a de um dia (P
< 0,001). Depois disso, houve uma recuperação gradual devido à cura natural, e no 7 dias após a ulceração, o valor MDS foi reduzida em 49,2% em relação ao que no primeiro dia (P
< 0,01). Figura 1 O curso de tempo de ulceração do estômago e a sua prevenção por diferentes doses de PK. ulceração do estômago em ratos foi induzida por administração oral de indometacina (18 mg /kg de peso corporal). Diferentes doses de PK foram utilizadas para as experiências. Os índices de úlcera foram medidas em diferentes dias 4 h após a última dose de PK e os valores são a média ± S.E.M. (N = 15). aP Art < 0,01, a BP Art < 0,001 em comparação com 1º dia ulcerada ratos não tratados; cP Art < 0,01, DP Art < 0,001 em comparação com o grupo de ratinhos III.
PK, em todas as doses escolhidas mostrou cura máxima úlcera na 3 dias estr de ulceração, e o efeito foi dependente da dose. Em comparação com os controlos respectivos ulceradas, as reduções MDS (45,1% -52,9%, P
< 0,01) de PK (20 e 40 mg /kg) foram semelhantes, e significativamente melhor do que na sua dose mais baixa (10 mg /kg). O efeito de PK (5 mg /kg) foi insignificante. Em condições semelhantes, o tratamento com omez (3 mg /kg) durante 3 dias reduziu o valor MDS 76,3% (P
< 0,001) em comparação com a do grupo de ratos III. A cura observados sobre a extensão do tratamento até sete dias com PK foi melhor do que a observada com o regime de tratamento de três dias. No entanto, uma grande parte deste foi devido a autohealing, com menor contribuição por PK.
Geral, o tratamento com PK (20 mg /kg) e omez (3 mg /kg) durante 3 dias após a indução da úlcera fornecidos cicatrização da úlcera óptima . Em vista destes, todas as experiências subsequentes foram realizados com o mesmo regime de tratamento. A dose escolhida de omez, que também é a dose terapêutica recomendada para os seres humanos foi optimizado por nós [6].
Para os ratinhos não tratados, foi observado ulceração pico (máximo MDS) no terceiro dia da administração de indometacina. Assim, este ponto de tempo foi escolhido para descobrir o IC 50 valor de PK. Considerando os valores MDS do dia 3 rd ulcerada ratos não tratados como 100%, a IC foi encontrado 50 valor de PK para ser 23,30 ± 3,50 mg /kg.
Avaliação qualitativa
Os exames macroscópicos revelou que a administração de indometacina levou a um dano significativo para a porção glandular da mucosa gástrica ratinhos. Dentro de 6 h após a administração de indometacina, a erosão superficial e leve inflamação no estômago foi observada indicando ulceração aguda. No dia da indução da úlcera, perda de estrutura foveolar juntamente com arquitectura críptica foi a característica proeminente na maioria dos ratinhos não tratados. Além disso, observou-se discreto infiltrado inflamatório contendo neutrófilos na lâmina. O tratamento com PK e ambos omez mesmo durante um dia restrito a danos com áreas irregulares do epitélio estrutural desnudada.
Indometacina gastropatia induzida tornou-se muito pronunciada no terceiro dia mostrando perfurados para fora múltiplas áreas de ulceração com infiltrado contendo neutrófilos e macrófagos inflamatórios no mucosa, sub-mucosa e músculo casaco junto com serosa hemorrágico. Um grande número de células anormais com núcleo alterada a relação de citoplasma foram notados. O tratamento com PK e omez durante 3 dias, levou à redução do número de células inflamatórias, juntamente com um aumento no número de células normais saudáveis ​​na mucosa gástrica, assim como camadas de submucosa, serosa e musculares com congestão mínimo da mucosa.
Efeito de PK e omez sobre a peroxidação lipídica e oxidação de proteínas no tecido do estômago
os efeitos da ingestão de indometacina por si só e após a administração de PK e omez sobre a extensão da peroxidação lipídica (medida em termos de TBARS), oxidação de proteínas (medida em termos de conteúdo de proteína carbonil ), o sistema de defesa dependentes de tiol (NP-TSH) e conteúdo de mucina nos tecidos gástricos dos ratinhos estão apresentados na Tabela 1 e Tabela 1 2.Table o efeito de PK e omez sobre os níveis de TBARS, carbonilos proteicos, não- tiol proteínas e mucina no tecido gástrico ulcerada de micea no primeiro dia de ulceração
Parâmetros
ratos do Grupo I normal de controle
controle ulcerada II 1º dia
Grupo
Grupo III PK-tratados
Grupo IV omez tratados
TBARS (nmol /mg de proteína)
0,85 ± 0,03
1,18 ± 0.05C
0,94 ± 0.06d
0,89 ± 0.07d
carbonilos proteína (nmol /mg de proteína)
1,08 ± 0,05
1,62 ± 0.09b
1,49 ± 0,12
1,53 ± 0,07
NP-TSH (nmol /mg de tecido)
1,99 ± 0,09
1,66 ± 0.08b
1,86 ± 0,08
1,81 ± 0,09
mucina (ug /g de tecido)
335,03 ± 14,43 213,02 ± 0.59b

240,33 ± 20,49 253,33 ±
14.53d
aStomach ulceração em ratinhos foi induzida por administração oral de indometacina (18 mg /kg) . PK (20 mg /kg /dia x 1 dia) e omez (3 mg /kg /dia x 1 dia) foram usadas como as amostras de teste. Os ensaios foram realizados a 4 h após a administração das amostras de teste. Os valores são a média ± SEM (n = 15). bP Art < 0,05, cP Art < 0,01 comparado com os ratos normais; dP Art < 0,05 comparado com o grupo de ratinhos II.
Tabela 2 O efeito de PK e omez sobre os níveis de TBARS, carbonilos proteicos, tiol não proteico, e mucina gástrica no tecido ulcerado de micea no dia três de ulceração
Parâmetros
Grupo I
controles normais
Grupo III 3º dia controle ulcerada
Grupo V PK-tratados
Grupo VI omez tratados
TBARS (nmol /mg de proteína)
1,02 ± 0,06
1,53 ± 0.06c
1,03 ± 0.09d
1,08 ± 0.05d carbonilos
proteína (nmol /mg de proteína)
1,18 ± 0,07
2,61 ± 0.17c
1,62 ± 0.10f
1,59 ± 0.09f
NP-TSH (nmol /mg de tecido)
2,06 ± 0,09
1,73 ± 0,09
2,06 ± 0.14d
2,05 ± 0.1d
mucina (ug /g de tecido)
343,30 ± 16,91
213,29 ± 17.91b
303,34 ± 295,06 ± 17.4e
15.62e
aStomach ulceração em ratinhos foi induzida por administração oral de indometacina (18 mg /kg). PK (20 mg /kg /dia x 3 dias) e omez (3 mg /kg /dia x 3 dias) foram usadas como as amostras de teste. Os ensaios foram realizados em três dias de ulceração, 4 h após a última dose do fármaco. Os valores são a média ± SEM (n = 15). bP Art < 0,05, cP
0,001 em comparação com ratos normais, DP Art < 0,05, EP Art < 0,01, FP Art < . 0,001 em comparação com o grupo III ratinhos
administração Indometacina marcadamente estimulada peroxidação lipídica nos tecidos gástricos, elevando o teor de TBARS por 38,8% (P
< 0,01) e 53% (P
< 0,001), respectivamente no 1 r e 3 dias estr de ulceração, comparada com a dos ratinhos de controlo normais. O tratamento com PK e omez mostrou efeito imediato, reduzindo o conteúdo de TBARS por 20,3% e 24,6%, respectivamente, em comparação com o grupo de ratinhos II (P
< 0,05). O tratamento com PK e omez durante três dias reduziu-a em 32,7% e 29,4% em comparação com os ratinhos do grupo III (P
< 0,05).
Em comparação com o valor normal, o teor de carbonilo de proteínas dos ratos com úlcera foi mais elevado (50%) no primeiro dia (P
< 0,05), que aumentou 120,3% em ulceração pico (P
< 0,001). Nenhum dos medicamentos de teste, mostrou impacto imediato no dia um.

• Os efeitos protectores de (1- (4-hidroxi-fenil) -3 chalcona-m-tolil-propenona em lesões erosivas gástrica induzida por indometacina em ratos
• O agente patogénico humano gástrica Helicobacter pylori tem um potencial carboxilase acetona que aumenta a sua capacidade de colonizar murganhos