XiangshaLiujunzi decocção alivia os sintomas da dispepsia funcional através do controlo do eixo cérebro-intestinal e produção de neuropeptides

XiangshaLiujunzi decocção alivia os sintomas da dispepsia funcional através do controlo do eixo cérebro-intestinal e produção de neuropeptídeos da arte abstracta
Fundo
xiangshaliujunzi medicina chinesa decocção (XSLJZD) desempenha um papel-chave no tratamento da dispepsia funcional (FD), uma desordem gastrointestinal clínica comum. No entanto, o mecanismo desta doença não é clara. eixo cérebro-intestinal regula o comportamento ingestão de alimentos, e este mecanismo de regulação é mediada por neuropeptídeos. eixo comprometimento cerebral-gut e alteração neuropeptídeo podem ser os mecanismos patológicos da FD, e regulação do eixo cérebro-gut pode influenciar a acção da medicina.
Métodos
Em nosso experimento, o efeito da XSLJZD em FD foi avaliado em termos da ingestão de alimentos, teste de preferência sacarose e eletromiograma. . Mudanças na neuropeptídeos [grelina, colecistoquinina (CCK) e polipeptídeo intestinal vasoativo (VIP)] foram detectadas por imunohistoquímica, PCR em tempo real e ELISA
Resultados
XSLJZD aumento da ingestão alimentar eo percentual de preferência sacarose (> 75%). No entanto, a resposta à detenção gástrico diminuído. Além disso, o aumento XSLJZD grelina, CCK, proteínas e genes VIP no estômago. XSLJZD também aumentou proteínas de grelina, CCK e VIP no soro. Em contraste, XSLJZD diminuiu a expressão de ARNm destes neuropeptídeos no hipotálamo.
Conclusões
XSLJZD aliviados os sintomas de DQ pelos upregulating a produção de grelina, CCK e VIP e através do aumento dos níveis destes neuropéptidos em circulação. Esta descoberta pode ajudar a elucidar o mecanismo de FD e pode fornecer uma visão mais aprofundada a farmacocinética de XSLJZD.
Palavras-chave
Xiangshaliujunzi decocção com dispepsia funcional do cérebro-gut eixo fundo peptídeo Brain-gut dispepsia
funcional (FD) é um distúrbio gastrointestinal clínica comum caracterizada por dor e desconforto persistente ou recorrente. Esse desconforto é experimentado principalmente na parte superior do abdómen, sem evidências de anormalidades estruturais orgânicas associadas a esses sintomas. Numa pesquisa doméstico, aproximadamente 25% da população normal nos Estados Unidos sofre de FD [1]. Na China, uma estatística definitiva para FD é falta; no entanto, vários trabalhos indicam que 8,66 a 11% dos pacientes optar por internação hospitalar por causa da plenitude abdominal [2-4]. Foram propostos uma série de mecanismos fisiopatológicos para explicar vários sintomas clínicos, incluindo hipersensibilidade a distensão gástrica, alojamento gástrica diminuída de uma refeição, o esvaziamento gástrico retardado, alterado sensibilidade duodenal de lipídios ou ácidos, motilidade duodenojejunal anormal e do sistema nervoso central (SNC) disfunção; No entanto, a evidência relativa a estes sintomas varia em pacientes [5, 6]. Assim, o mecanismo definitiva permaneça desconhecida.
FD, um exemplo de desordens gastrointestinais funcionais, é uma condição patológica comum que afecta o intestino, o qual é controlado pelo sistema nervoso [7]. O trato gastrointestinal (TGI) e do sistema nervoso, incluindo SNC e sistema nervoso entérico (ENS), estão envolvidos em uma comunicação de duas vias extrínseca por nervos parassimpático e simpático. Estes nervos contém fibras eferentes e aferentes sensoriais fibras necessários para a sinalização do intestino-cérebro. nervos aferentes compreendem muitos sensores nos terminais no intestino relacionadas com mecano visceral, quimioterapia e receptores Noci; quando excitado, estes sensores podem desencadear vários reflexos viscerais que regulam funções GIT, incluindo o apetite [8-10]. Os distúrbios que afetam a regulação da comunicação bidirecional entre o cérebro eo intestino (eixo cérebro-gut) são importantes na patogênese dessas doenças [11]. Os neuropeptídeos são mediadores importantes no sistema nervoso e entre neurónios e outros tipos de células. Neuropéptidos, tais como a grelina, colecistoquinina (CCK) e polipéptido intestinal vasoactivo (VIP), possivelmente estão implicados na comunicação bidireccional intestino-cérebro [12]. A grelina é uma hormona péptido 28-amino ácido [13], a qual é produzida predominantemente por células P /D1 da glândula gástrica oxíntica; esse hormônio é encontrado principalmente no estômago proximal [14, 15]. A grelina está envolvida em muitas atividades biológicas porque este hormônio desempenha papéis autócrinos e parácrinos em processos regulatórios, como a regulação do apetite, motilidade intestinal, liberação do hormônio do crescimento, imunomodulação [16, 17] e o início da ingestão de alimentos sob controle neural [18]. CCK pertence à família intestino-cérebro de hormonas peptídicas [19]. Esta hormona é segregada pelo sistema gastrointestinal em resposta à ingestão de alimentos; Além disso, a CCK é libertado por neurónios especializados no plexo mioentérico e o cérebro [20]. Em um estudo anterior, a injeção intravenosa de CCK suprime a fome e alimentação em humanos [21-23]. CCK também participa na transdução do sinal no eixo cérebro-intestinal através das fibras aferentes primárias do nervo vago, e as mesmas fibras provavelmente provocar a expressão de receptores de grelina [24]. VIP, um neuropéptido de 28 aminoácidos, é distribuído nos neurónios centrais e periféricos; este neuropeptídeo está envolvido em muitas funções intestinais fisiológicos, como a regulação da motilidade, atividade secretora e vasodilatação, inibição reflexo peristáltico no bom camada muscular e relaxamento do esfíncter circular [25]. Neuronal VIP é também um mediador da resposta neuronal ao estômago induzida por aspirina estado inflamatório [26]. Estes estudos demonstraram que a desordem do eixo cérebro-intestinal pode ser a patogénese da FD
Xiangshaliujunzi decocção (XSLJZD), uma decocção clássico usado durante Qing na China, desempenha um papel chave no tratamento de FD.; XSLJZD é mais eficaz do que os medicamentos procinéticos no tratamento desta doença [27]. No entanto, o mecanismo pelo qual XSLJZD alivia FD permanece desconhecida. Nós estudamos o mecanismo da XSLJZD modificado na perspectiva do eixo cérebro-intestinal e neuropeptídeos. Este mecanismo de regulação podem ser o modo específico para tratar FD.
Métodos Animais

ratos machos Sprague-Dawley foram usadas em todas as experiências (SPF Animal Laboratory Technology Co., Ltd., Pequim, China) . Os experimentos foram realizados de acordo com o Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório publicado pelos Institutos Nacionais de Saúde (NIH Publicações No. 85-23, revista em 1996) e com a aprovação do Comitê de Terapia animal de Beijing Medical Centre. As crias de rato de 10 dias de idade receberam 0,2 ml de 0,1% de iodoacetamida (IA) em 2% de sacarose por gavagem oral diariamente durante 6 dias. O grupo de controlo recebeu 0,2 ml de sacarose a 2% [28]. As 6 semanas de idade ratos tratados com IA foram aleatoriamente divididos em quatro grupos: grupo de modelo (n
= 12; recebeu mesmo volume de água como veículo), XSLJZD-grupo tratado (n
= 12; tratada com XSLJZD), baixa dose grupo tratado com XSLJZD (n
= 12; tratada com meia dose de XSLJZD) e grupo tratado com domperidona (n
= 12). Os ratos tratados com sacarose 6 semanas de idade foram designados como o grupo de controlo (n = 12
). Os ratos 6 semanas de idade receberam 5 ml /kg de cada fármaco ou água diariamente por gavagem oral, durante 10 dias.
Drogas
XSLJZD é composta por oito ervas medicinais chinesas diferentes (Tabela 1). Os componentes foram preparados pelo Departamento Farmacêutico de Xiyuan Hospital, afiliado com a Academia Chinesa de TCM. foram preparados extractos puras dos componentes. Os componentes foram dissolvidos na água. Metade da dose (12,5 mg /kg) e dose completa (25 mg /kg) de XSLJZD foram administradas aos ratos na baixa dose e grupos tratados com XSLJZD, respectivamente. A domperidona (3 mg /kg Xian Janssen Pharmaceutical Co., Ltd.) foi administrada aos ratos no grupo tratado com domperidona. A dosagem total de XSLJZD administrado a ratos foi convertida a partir da dosagem administrada a seres humanos. Enquanto isso, os grupos de modelos e de controlo recebeu 5 mL /kg água diariamente por sonda oral durante 10 days.Table 1 Componentes da solução XSLJZD
Nome científico
Parte usados ​​
Proporção de ingredientes (100%)
Astragalus mongholicus
Root
12
Codonopsis pilosula
Root
12
Rhizoma Atractylodis Macrocephalae
Rizoma
12
Poria cocos
Sclerotium
12
Fructus aurantil
Fruit
12
villosum Amomum
Fruit
6,4
Ligusticum Chuanxiong Hort.
Sclerotium
9.6
corydalis Rhizoma
Rhizoma
9,6
produtos medicamentosos Leaven
fermentação
12
Glycyrrhiza uralensis Fisch.
Root
2,4
Food medição de consumo
o consumo alimentar foi medido antes e depois do tratamento medicamentoso. Após 18 h de jejum, os ratos foram alojados individualmente. A comida foi fornecido durante 7 h, eo consumo de alimentos foi calculada.
Teste de sacarose preferência (SPT)
SPT [29-31] foi conduzida antes e depois das drogas foram administradas aos ratos. Antes do ensaio foi realizado, os ratos foram tratados para se adaptar a uma solução de sacarose. Na sessão de treino, os ratos foram alojados individualmente durante 48 horas em uma gaiola com duas garrafas; uma garrafa continha 1% de solução de sacarose, enquanto que a água da torneira outro frasco continha. Os frascos foram colocados para o lado esquerdo e para o lado direito do compartimento de alimentação; as posições destes frascos foram trocadas em um intervalo de 12 h, para evitar possíveis efeitos de preferência lado em comportamento de beber. Após a sessão de treino foi completada apenas água da torneira foram fornecidas durante 6 h. Comida e água foram então retido dos ratos durante 18 h. Na sessão de teste, os ratos tiveram acesso a dois frascos contendo solução de sacarose a 1% e água, durante 1 h. preferência sacarose (SP) foi quantificada com a seguinte equação: SP = [ingestão de sacarose (g)] /[ingestão de sacarose (g) + ingestão de água (g)]. A proporção de ratos em cada grupo com um valor de SP de >. 75% foram contadas e comparadas pelo teste do qui-quadrado
distensões balão gástrico para eletromiografia (EMG) testando [28]
Depois de ser submetido a jejum durante a noite , os ratos foram anestesiados por via intraperitoneal com 1% de pentobarbital de sódio (3 mg /kg) após os fármacos foram administrados durante 10 dias. Balões (2,5 cm de comprimento) feitos de preservativos de látex foram ligado a um cateter longo. Uma incisão epigástrica foi feita, e o balão foi colocado no estômago através de uma incisão na ponta do fundo. Os piloro não foi obstruída, e não se observou qualquer obstrução do esvaziamento gástrico. Um tubo de polietileno para insuflar o balão com ar gástrica foi exteriorizado na parte de trás do pescoço. Eletromiografia (EMG) estudos foram realizados uma semana após a cirurgia. Antes da experiência, todos os animais foram anestesiados intraperitonealmente com pentobarbital de sódio a 1% (3 mg /kg). . Em seguida, um par de fios de aço inoxidável foi implantado no acromiotrapezius (um músculo do pescoço superficial) e exteriorizados na parte de trás do pescoço para registos EMG
Na experiência, os ratos receberam uma série de 20 s distensões balão gástrico: 10, 20, 30, 40 e 50 mmHg (medida com um esfigmomanômetro) em um intervalo de 2 minutos entre distensões. A BL-420S sistema experimental biológica e funcional foi utilizado para gravar EMG continuamente e para visualizar dados. EMG foi corrigido, e a área sob a curva foi calculada para 20 s período de distensão. A actividade da linha de base, obtidos 20 s antes da distensão, foi subtraída da EMG induzidas por distensão. Os dados foram apresentados como a alteração a partir da linha de base como uma função da pressão de distensão.
Imunohistoquímica
Após 10 dias de tratamento com droga, os ratos foram anestesiados com pentobarbital de sódio a 1%. Os cérebros e os estômagos foram removidos, fixados com formalina a 10% e embebidos em parafina. Os tecidos foram subsequentemente cortado em secções de 10 um, montados em Superfrost Além disso, as lâminas (1 secção /lâmina) e armazenado à temperatura ambiente. Antes do experimento foi conduzido, as lâminas foram deparaffinised utilizando xileno, submetida a recuperação de antigénios mediada por calor de microondas utilizando tampão de citrato a pH 6 durante 45 min e foram arrefecidos para a temperatura ambiente. Os espécimes foram imersos em 3% H 2O 2 para 20 min para inactivar a peroxidase endógena e subsequentemente foram lavadas com PBS (três vezes durante 2 min cada). As secções foram incubadas durante a noite a 4 ° C com os anticorpos seguintes: anticorpo policlonal de coelho anti-grelina (1: 100, Abbiotec), anticorpo policlonal de coelho anti-VIP (01:20, Abcam) e anticorpo policlonal de coelho anti-CCK-8 (1: 100, Abbiotec) em tampão contendo 0,01 M de PBS. Por 09:00 do dia seguinte, as lâminas foram lavadas com PBS (três vezes durante 2 min cada) e foram incubadas em Polink-2 Plus® Polímero Sistema de Detecção de HRP (ZSGB-bio, Pequim) de acordo com as instruções do fabricante. Em seguida, as secções foram lavadas três vezes com PBS, visualizado utilizando DAB durante 10 min a 37 ° C e lavou-se com água corrente durante 2 minutos. Após a desidratação, as lâminas foram montadas com bálsamo neutro. As seções foram visualizados sob um microscópio, e as imagens foram obtidas utilizando uma câmara. Pelo menos três secções por rato e três ratos por grupo foram analisados. A média de densidade óptica integrada (MOD) foi calculado usando o software de análise 6.0 Imagem-Pro Plus versão.
PCR em tempo real
Após 10 dias de tratamento da toxicodependência, os ratos foram anestesiados com 10% de hidrato de cloral. O hipotálamo e estômagos desses ratos foram removidos. mRNA foi quantificado utilizando RT-PCR quantitativo. O ARN total foi extraído a partir de hipotálamo e no estômago dos ratos, utilizando Promega SV sistema de isolamento de ARN total (Promega, EUA) de acordo com as instruções do fabricante. O ARN total (2 ug) foi sujeitos a transcrição reversa usando PromegaGoScript (Promega, EUA) de acordo com as instruções do fabricante. As condições de ciclos térmicos são utilizados listados a seguir: activação inicial a 95 ° C durante 30 s; 40 ciclos de desnaturação a 95 ° C durante 5 segundos, emparelhamento a 60 ° C durante 30 s; e derreter a determinação da curva a 65 ° C a 95 ° C durante 5 s. Os iniciadores foram concebidos utilizando o iniciador-BLAST (NCBI, EUA) de acordo com as sequências de mRNA (por GenBank) de grelina (NM_021669.2), VIP (NM_053991.1), CCK (NM_012829.2) e gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase ( GAPDH; NM_017008.4, como controlo). Os produtos de PCR foram corridos num gel de agarose 0,8% para confirmar que estes produtos eram do tamanho esperado. Os resultados foram normalizados contra a expressão de GAPDH. As sequências dos iniciadores estão listadas como se segue. Os iniciadores directo e inverso, do gene GAPDH foram 5'-GGCACAGTCAAGGCTGAGAATG-3 'e 5'-ATGGTGGTGAAGACGCCAGTA-3', respectivamente. Os iniciadores directos e inversos de gene grelina foram 5'-CCAAGGCCATGGTGTCTTCA-3 'e 5'-CTGCAGTTTAGCTGGTGGCTTC-3', respectivamente. Os iniciadores directo e inverso do gene VIP foram 5'-TCAGTTCCTGGCGATCCTGAC-3 'e 5'-CTCCGCTAAGGCATTCTGCAA-3', respectivamente. Os iniciadores directo e inverso, do gene de CCK foram 5'-CCCGATACATCCAGCAGGTC-3 'e 5'-AAATCCATCCAGCCCATGTAGTC-3', respectivamente. 2 -ΔΔCt foi calculado, e as diferenças entre os grupos foram analisados ​​por meio de testes não paramétricos.
ELISA
Os ratos foram anestesiados com 10% de hidrato de cloral após 10 dias de tratamento da toxicodependência. As amostras de sangue foram recolhidas em tubos estéreis em branco e deixou-se coagular durante 2 h à temperatura ambiente. Posteriormente, estas amostras foram centrifugadas a 1000 rpm durante 15 min. O soro foi removido e armazenado a -80 ° C. Grelina, VIP, e CCK foram quantificadas utilizando kits ELISA específicos fornecidos pela CUSABIO (Wuhan, China). Cada soro (100 ul) foi misturado com o diluente da amostra de acordo com as instruções do fabricante. A absorvância foi determinada a 450 nm. A análise dos dados Todos os valores
, excepto aqueles obtidos por teste de preferência sacarose, foram apresentados como média ± SE. One-way ANOVA ou o teste não paramétrico foi realizado para comparação. comparações post hoc foram realizadas utilizando teste de Student-Newman-Keuls ou Mann-Whitney U
teste. A análise estatística foi realizada no SPSS 17.0. P
. ≪ 0,05 foi considerado estatisticamente significativo
Resultados
XSLJZD aumentou a ingestão de alimentos dos ratos com FD
Após jejum durante a noite, ratos com FD consumiu menor quantidade de alimentos do que os ratos de controle durante uma 7 período h (10,7 ± 0,6 vs 8,7 ± 0,5; P = 0,01
; N
= 10 em cada grupo). O grupo tratado com XSLJZD consumida uma maior quantidade de alimentos que o grupo de modelo (10,7 ± 0,9 vs 8,7 ± 0,5; P = 0,04
; N
= 10 em cada grupo). Do mesmo modo, o grupo tratado com thedomperidone consumida uma maior quantidade de alimentos que o grupo de modelo (12,4 ± 0,7 vs 8,7 ± 0,5; P = 0,00
). Não se observou qualquer diferença significativa entre o grupo tratado com dose baixa de XSLJZD e o grupo de modelo (8,4 ± 1,2 vs 8,7 ± 0,5; P
> 0,1) (Fig. 1). FIG. ingestão de um alimento de cada grupo. A ingestão de alimentos foi menor no grupo de modelo em comparação com o grupo controle. No grupo tratado com XSLJZD e grupo tratado com domperidona, foi maior em comparação com o grupo de modelos. * P
< 0,05 comparado com o grupo de controlo; ** P
< 0,01 comparado com o grupo de controlo; △ P Art < 0,05 comparado com o grupo de modelo; △△ P Art < 0,01 comparado com o grupo de modelos. Os dados foram apresentados como média ± SE
XSLJZD aumentou a percentagem de consumo de sacarose (> 75%) de ratos com FD
No teste de preferência a sacarose, não foi observada nenhuma diferença significativa em termos de sacarose e ingestão de água entre o grupos (P Restaurant > 0,05). No entanto, a percentagem de ratos com valor de SP > 75% foi significativamente reduzida em ratos com TF (30%) em comparação com os ratos de controlo (80%; P = 0,001
; N
= 10 em cada grupo ), tal como indicado pelo teste de qui-quadrado. A percentagem aumentou significativamente no grupo tratado com XSLJZD (75%) e no grupo tratado com domperidona (75%) em comparação com os ratos com TF (30%; P = 0,004
; N
= 10 em cada grupo). O grupo tratado com dose baixa de XSLJZD não exibiu diferença significativa relativamente ao grupo do modelo (Fig. 2). FIG. 2 Percentagem de ratos em cada grupo, com preferência sacarose valor (SP) > 75%. A percentagem do valor SP > 75% no grupo de modelo foi menor em comparação com o grupo controle. No grupo tratado com XSLJZD e grupo tratado com domperidona, o percentual foi maior em comparação com o grupo de modelos. ** P Art < 0,01 comparado com o grupo controle e △△ P Art < 0,01 em comparação com o grupo de modelo pelo teste do qui-quadrado. Os dados foram apresentados como percentagem de ratos em cada grupo com o valor de SP > 75%
XSLJZD reduzida a hipersensibilidade a distensão gástrica de ratos com TF
Após o tratamento de 10 dias, o teste foi realizado EMS. Em comparação com os ratos de controlo, os ratos com TF aumentou significativamente em EMG a pressões de distensão de 20 mmHg (179,3 versus 282,5%%; P = 0,000
; n = 3
em cada grupo), 30 mmHg (254,9% vs. 420,1%; P
= 0,000) e 40 mmHg (315,4% vs. 412,3%; P
= 0,002). No entanto, não se observou nenhuma diferença significativa em 50 mmHg. XSLJZD inibiu a actividade de EMG de ratos com FD à distensão gástrica de uma maneira dependente da dose. XSLJZD provocou um efeito significativo a 20 (277,2% vs. 282,5%; P
= 0,016), 30 (398,3% vs. 420,1%; P
= 0,003) e 40 mmHg (405,5% vs. 412,3%; P
= 0,015). dose baixa afetou significativamente as respostas EMG apenas com 30 (362,4% vs. 420,1%; P
= 0,034) e 40 mmHg (353,3% vs. 412,3%; P
= 0,038) em comparação com os ratos com FD, como indicado por ANOVA de uma via. Além disso, o grupo de controle não diferiram significativamente do grupo domperidona-tratamento (P Art > 0,1) (Fig. 3). FIG. 3 eletromiográficas (EMG) resposta à distensão gástrica de ratos em cada grupo. uma resposta de EMG a distensão gástrica de cada grupo na distensão de 10 mmHg para 50 mmHg. No grupo tratado com XSLJZD, EMG foi reduzida significativamente em comparação com o grupo de modelo de distensão de 20 mmHg, 30 mmHg e 40 mmHg. ** P Art < 0,01 comparado com o grupo controle. Os dados foram apresentados como média ± SE. b resposta representativas EMG em 30 mmHg de cada grupo
Expressão de neuropeptídeos relativa no cérebro e o estômago de cada grupo
grelina, CCK-8 e VIP foram expressas como neuropeptídeos granular no citoplasma do hipotálamo (Figs. 4, 5 e 6) e o estrato basal do estômago (Fig. 7, 8 e 9). As expressões destes neuropeptídeos foram menores no cérebro e no estômago de ratos com TF em comparação com as dos ratos de controlo. No estômago e o hipotálamo, grelina, CCK-8 e VIP dos ratos com TF foram inferiores aos dos ratos de controlo (P
< 0,05; n = 3
em cada grupo). grupos tratados com XSLJZD de baixa dose não diferiram significativamente do grupo modelo. No entanto, aumentou significativamente XSLJZD grelina, CCK-8 e VIP de ratos com FD (P
< 0,05; n = 3
). A grelina, CCK-8 e VIP do grupo tratado com domperidona foram também mais elevados do que aqueles do grupo modelo, excepto para VIP no hipotálamo (P
< 0,05; n = 3
) (Tabela 2 e Fig . 10). FIG. 4 Expressão da grelina no hipotálamo de cada grupo. um grupo de controle. b grupo Modelo. Grupo C XSLJZD-tratada. d baixa dose XSLJZD grupo tratado. Grupo E Domperidone-tratada. Grelina distribuído no citoplasma de hipotálamo. (As secções de tecido foram vistos em 100 vezes.) As células positivas para grelina eram castanhos e circular ou em forma de pêra. Menos células positivas pode ser vista no grupo de modelo
fig. 5 Expressão de CCK-8 no hipotálamo de cada grupo. um grupo de controle. b grupo Modelo. Grupo C XSLJZD-tratada. d baixa dose XSLJZD grupo tratado. Grupo E Domperidone-tratada. CCK-8 distribui principalmente no citoplasma de hipotálamo. (As secções de tecido foram vistos em 100 vezes.) As células positivas para CCK-8 eram castanhos e circular ou oval. Menos células positivas pode ser vista no grupo de modelo e uma dose baixa de grupo tratado com XSLJZD
fig. 6 A expressão de VIP no hipotálamo de cada grupo. um grupo de controle. b grupo Modelo. Grupo C XSLJZD-tratada. d baixa dose XSLJZD grupo tratado. Grupo E Domperidone-tratada. Neuropepide VIP distribui principalmente no citoplasma de hipotálamo. (As secções de tecido foram vistos em 100 vezes.) As células positivas para VIP eram castanhos e circular ou oval. Menos células positivas pode ser vista no grupo de modelo e uma dose baixa de grupo tratado com XSLJZD e domperidona grupo-tratado
fig. 7 Expressão da grelina no estômago de cada grupo. um grupo de controle. b grupo Modelo. Grupo C XSLJZD-tratada. d baixa dose XSLJZD grupo tratado. Grupo E Domperidone-tratada. A grelina foi expressa como neuropetide granular no citoplasma do estrato basal do estômago (secções de tecido foram vistos em 20 × ampliação.) Brown células foram positivas para a grelina. grupo Modelo expressa inferior grelina que o grupo controle, XSLJZD significativamente aumentada grelina de ratos com FD
Fig. 8 Expressão de CCK-8 no estômago de cada grupo. um grupo de controle. b grupo Modelo. Grupo C XSLJZD-tratada. d baixa dose XSLJZD grupo tratado. Grupo E Domperidone-tratada. CCK-8 distribui principalmente no estrato basal do estômago. (As secções de tecido foram vistos em 20 × ampliação.) Positiva CCK-8 expresso como grânulos marrom, distribuídos em citoplasma. Expressão de CCK-8 foi menor no grupo de modelo e grupo tratado com dose baixa de XSLJZD, maior no grupo de controlo, o grupo tratado com XSLJZD e grupo tratado com domperidona
fig. 9 A expressão de VIP no estômago de cada grupo. um grupo de controle. b grupo Modelo. Grupo C XSLJZD-tratada. d baixa dose XSLJZD grupo tratado. Grupo E Domperidone-tratada. VIP foi expressa como neuropetide granular no citoplasma do estrato basal do estômago (secções de tecido foram vistos em 20 × ampliação.) Brown células foram positivas para VIP. Expressão de VIP foi menor no grupo de modelo e maior no grupo controle, grupo tratado com XSLJZD e grupo tratado com domperidona
Tabela 2 valor de MOD de neuropeptídeos relativos no estômago e no hipotálamo de cada grupo
Part
Grupos
grelina
CCK-8
VIP
estômago
Controle
0,583 ± 0,008 0,714 ± 0,042

0,823 ± 0,025
Modelo
0,368 ± 0,010 **
0,467 ± 0,057 *
0,486 ± 0,025 **
XSLJZD
0,716 ± 0,050 * △△
0,706 ± 0,090 △
0,861 ± 0,107 △△ XSLJZD
Baixa dose de
0,356 ± 0,044 **
0,498 ± 0,039 0,652 ± 0,082

Domperidone
0,543 ± 0,163 △△
0,863 ± 0,122 △△
0,711 ± 0,092 △
Hipotálamo
Controle
0,497 ± 0,036 0,825 ± 0,081

0,561 ± 0,077
Modelo
0,268 ± 0,010 **
0,372 ± 0,006 **
0,365 ± 0,017 *
XSLJZD
0,417 ± 0,017 △△
0,995 ± 0,088 △△
0,594 ± 0,105 △
baixa dose XSLJZD
0,372 ± 0,011 * △
0,540 ± 0,050 *
0,391 ± 0,012
Domperidone
0,441 ± 0,059 △△
0,824 ± 0,163 △△
0,449 ± 0,046
* P
< 0,05 comparado com o grupo de controlo; ** P
< 0,01 comparado com o grupo de controlo; Δ P
< 0,05 comparado com o grupo de modelo; ΔΔ P Art < 0,01 comparado com o grupo de modelo
Fig. 10 Valor médio da densidade óptica integrada (MOD) de neuropeptídeos relativos. um valor MOD de neuropeptídeos no estômago. b valor de MOD de neuropeptídeos no hipotálamo. * P Art < 0,05 comparado com o grupo controle; ** P Art < 0,01 comparado com o grupo controle. △ P Art < 0,05 comparado com o grupo de modelo; △△ P Art < 0,01 comparado com o grupo de modelos. Os dados foram apresentados como média ± SE
XSLJZD aumentou os neuropeptídeos no soro de ratos com FD
grelina foi reduzida no soro de ratos com TF em comparação com a dos ratos de controlo (46,72 ± 4,92 vs. 189,9 ± 49,96; P = 0,007
; N
= 7 em cada grupo). Em contraste, a grelina foi aumentada no grupo tratado com XSLJZD em comparação com o grupo de modelo (186,4 ± 40,13 vs 46,72 ± 4,92; P = 0,009
; N
= 7 em cada grupo). Não foi observada diferença significativa entre o grupo controle, grupo tratado com XSLJZD baixa dose e grupo tratado com domperidona em termos de grelina no soro. Semelhante a grelina, CCK foi reduzida no soro de ratos com TF em comparação com a dos ratos de controlo (22,77 ± 3,59 vs. 77,19 ± 14,36; P = 0,003
; N
= 7 em cada grupo). CCK foi aumentada por XSLJZD de uma forma dependente da dose. Os grupos tratados com XSLJZD baixas doses não diferiram significativamente com os ratos com FD em termos de CCK no soro (P Restaurant > 0,10); No entanto, o grupo tratado com XSLJZD exibiu um aumento significativo da CCK no soro comparado com o de ratos com TF (82,97 ± 13,47 vs 22,77 ± 3,59; P = 0,001
; N
= 7 em cada grupo). VIP foi reduzida no soro de ratos com FD (16,95 ± 5,15 vs. 75,61 ± 20,12; P
= 0,003; n
= 7 em cada grupo), em comparação com os do grupo de controlo. VIP no grupo tratado com XSLJZD significativamente aumentada em comparação com os do grupo de modelo (62,71 ± 19,05 vs. 16,95 ± 5,15; P = 0,017
; n
= 7 em cada grupo). Não foi observada diferença significativa na VIP de grupos tratados com XSLJZD de baixa dosagem e grupos tratados com domperidona. No entanto, uma dose moderada de XSLJZD poderia aumentar VIP no soro (Fig. 11). FIG. 11 Expressão dos neuropeptídeos relativas no soro. uma expressão de grelina de cada grupo. b Expressão de CCK de cada grupo. c A expressão de VIP de cada grupo. ** P
< 0,01 comparado com o grupo de controlo; ΔΔ P Art < 0,01 comparado com o grupo de modelos. Os dados foram apresentados como média ± SE
XSLJZD aumentou a expressão do gene dos neuropeptídeos relativos no estômago
No estômago, as expressões de ARNm de grelina, CCK e VIP de ratos com TF foram mais baixos em comparação com os do controlo ratos (P
< 0,05; n =
6 em cada grupo). As expressões de mRNA de VIP CCK e do grupo tratado com XSLJZD foram superiores aos do grupo de modelo. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final.

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