Therapeutisch potentieel van PRL-3 targeting en klinische betekenis van PRL-3
genomische versterking bij maagkanker
Abstracte achtergrond
fosfatase van het regenereren van de lever-3 (PRL-3) heeft de aandacht verdiend als een cruciale molecuul in de verschillende stappen van metastasering. In het onderhavige onderzoek onderzochten we de mechanismen reguleren PRL-3 expressie en beoordeelde de klinische potentieel van PRL-3-gerichte therapie bij maagkanker.
Methods
PRL-3 genome amplificatie werd geanalyseerd met behulp van kwantitatieve polymerase chain reactie en /of fluorescentie in situ hybridisatie in 77 primaire maagtumoren. De antikanker activiteit van PRL-3 remmer (1-4-broom-2-benzylideen rhodanine) behandeling werd geëvalueerd tegen kankercellen met verschillende genetische en expressie toestand.
Resultaten
PRL-3 genoomamplificatie was nauw overeenstemmende hoge niveau van de proteïne expressie in cellijnen en werd gevonden in 20% (8/40) bij humane primaire tumoren met expressie, die allemaal stadium waren III /IV ziekte (40%, 8/20), maar geen (0 /37) onder die zonder expressie. Daarnaast werd PRL-3 genomische versterking in verband met metastatische lymfeklier-status, wat leidt tot een vergevorderd stadium en daardoor slechte resultaten bij patiënten met lymfeklier metastasen (P
= 0,021). PRL-3 kleine interfererende RNA stevig onderdrukt metastatische eigenschappen, waaronder proliferatie, invasie, en verankering-onafhankelijke kolonie formatie. Hoewel noch PRL-3 genome amplificatie of expressie verantwoordelijk voor de gevoeligheid voor PRL-3 remmer was, de remmer toonde dosisafhankelijke antikanker werkzaamheid en opvallend geïnduceerde apoptose op alle geteste cellijnen met PRL-3 expressie.
conclusies
We hebben voor het eerst aangetoond dat PRL-3 genome amplificatie is een van de belangrijkste mechanismen voor het induceren van de expressie, vooral in verder gevorderd en dat PRL-3-gerichte therapie kan een groot potentieel hebben tegen maagkanker met zijn uitdrukking.
Trefwoorden
PRL-3 maagkanker genome versterking gerichte therapie lymfeklier Achtergrond
maagkanker (GC) is de vierde meest voorkomende vorm van kanker en de tweede belangrijkste oorzaak van kanker gerelateerde sterfgevallen wereldwijd [1 ]. Recente verbeteringen in diagnostische instrumenten en methoden hebben vergemakkelijkt opsporing van de eerste GC en daardoor uitstekend overleven op lange termijn. Echter, patiënten met gevorderde ziekte op het moment van diagnose blijven slechte resultaten. Metastase is een multi-step proces, waarbij de lokale invasie, verspreiding, en het herstel in de verre organen, en is de belangrijkste determinant van de sterfte [2]. Daarom kan een beter begrip van de metastase manier om tal van innovatieve therapeutische strategieën GC openen. Ondernemingen De eiwit tyrosine fosfatasen (PTP's) vormen een grote familie van enzymen die als belangrijke regulerende componenten in signaaltransductiewegen dienen [3] . De fosfatasen regenererende lever (PRL-1, -2 en -3), behoren tot een kleine klasse van PTP superfamilie, een unieke COOH-eindstandige motief prenylering, die kritisch hun cellulaire lokalisatie en functie beïnvloedt [4]. PRL-3 werd eerst geïdentificeerd zijn specifiek overexpressie gebracht in levermetastasen afgeleid van colorectale kanker [5], en vervolgens de overexpressie ervan is beschreven in verschillende tumor types, waaronder GC [6]. PRL-3 kan kankerinvasie, migratie, groei en angiogenese, hetzij via defosforylering die wordt gekatalyseerd door katalytische domein of lokalisatie plasmamembraan leiding van COOH-terminale motief prenylatie [7-9]. Zo heeft PRL-3 geheten als cruciale molecuul in meerdere stappen van metastase en derhalve een nieuw therapeutisch doelwit. Anderzijds, zijn de mechanismen induceren PRL-3 expressie niet volledig opgehelderd. Amplificatie van genomische gebieden die oncogenen is het belangrijkste mechanisme van de daaruit voortvloeiende overexpressie en de ontwikkeling van kanker, en heeft dus belang gerichte therapieën [10]. PRL-3
genamplificatie gedeeltelijk verantwoordelijk voor de overexpressie van colorectale kanker en slokdarmkanker [5, 11]. Het verband tussen genomische amplificatie en GC ongrijpbaar in beide mechanistische en therapeutisch oogpunt. In de huidige studie onderzochten we de kenmerken van de PRL-3
genomische versterking in GC en de klinische potentieel van PRL-3-gerichte therapie verder onderzocht.
Methods
cellijnen en weefselmonsters
de GC-cellijn MKN7 werd vriendelijk verschaft uit de Cell Resource Center for Biomedical Research Institute of Development, Aging en Kanker, Tohoku University (Sendai, Japan). Zeven andere GC cellijnen (GCIY, AZ521, KatoIII, SH10, H111, MKN74 en NUGC4) werden gekocht bij RIKEN Bioresource Center (Ibaraki, Japan). Deze cellijnen hebben betrekking op de twee hoofdtypen van GC [12], intestinale type (MKN7, MKN74, AZ521, en H111 cellen) en diffuse type (GCIY, KatoIII, SH10 en NUGC cellen) [13-15]. MKN7, NUGC4 en AZ521 cellen werden vastgesteld op basis van lymfeklier metastase (LNM), en MKN74 cellen werden uit de lever metastase. KATOIII en GCIY cellen werden vastgesteld op basis van uitgezaaide pleuravocht en ascites, respectievelijk. H111 en SH10 cellen werden vastgesteld op basis van de xenotransplantatie. Normaal skeletspier C2C12 cellen werden gekocht bij DS Pharma Biomedical Co., Ltd (Osaka, Japan). AZ521 en C2C12 cellen werden gekweekt in DMEM medium (GIBCO, Carlsbad, CA) aangevuld met 10% foetaal runderserum (FBS). De overige cellen werden gekweekt in RPMI1640 medium (GIBCO) aangevuld met 10% FBS. 1-4-broom-2-benzylideen rhodanine werd gekocht bij Calbiochem Corp. (San Diego, CA), die werd geïdentificeerd als een PRL-3-remmer met hoge doorvoer screening door chemische bibliotheek Korea Chemical Bank en remde PRL-3 fosfataseactiviteit [16]. Inderdaad, fosforylering van KRT8, PRL-3 interagerende eiwitten geïnduceerd door katalytisch inactieve mutant van PRL-3, maar niet door wilde type werd bevestigd door PRL-3 remmer op een dosis-afhankelijke wijze [17]. Bovendien antikanker werkzaamheid van PRL-3 remmer toonde ook vergelijkbaar met die van siRNA behandeling bij slokdarmkanker of colorectale kanker [11, 17] zijn.
Van 173 formaline-gefixeerde, paraffine-ingebedde, weefselmonsters series waarin we toe werd PRL-3 expressie status middels immunohistochemische kleuring (IHC) in GC [6], 77 gepaarde primaire tumorweefsels en de overeenkomstige normale mucosa weefsels werden willekeurig geselecteerd uit patiënten met verschiltrappen volgens de 13
e editie van de Japanse classificatie van maagcarcinoom (JCGC) [18]; 40 paren met positieve PRL-3 expressie (10 patiënten in fase I, 10 in II, 10 in III, en 10 in IV) en 37 paren met een negatieve uitdrukking (10 patiënten in stadium I, 10 in II, 9 in III, en 8 in IV). Alle patiënten ondergingen gastrectomie volgens de richtlijnen maag kankerbehandeling Japan [19] en histopathologische onderzoeken werden uitgevoerd volgens de JCGC. De 6 e editie van de International Union Against Cancer (UICC) /TNM indeling werd ook gebruikt [20]. Tabel 1 geeft de gedetailleerde informatie over 77 patiënten. Alle weefselmonsters werden verzameld op de Kitasato University Hospital, en geïnformeerde toestemming werd verkregen van alle patiënten. De huidige studie werd goedgekeurd door de ethische commissie van de Kitasato University.Table 1 Correlatie tussen PRL-3-gen amplificatie en clinicopathologische variabelen bij 77 patiënten met maagkanker
|
PRL-3 genamplificatie
|
Variabelen
Totaal aantal
negativiteit
Positiviteit
p
waarde
|
|
Number
(%)
Nummer
(%)
|
PRL-3 expressie
0.006
Negativiteit
37
37
(100 )
0
(0)
Positiviteit
40
32
(80)
8
(20)
Leeftijd (jaar)
0,726 Restaurant < 60
34
30
(88) verhuur 4
(12)
≥60
43
39
(91)
4
(9)
Gender
0.710
Man
51
45
(88)
6
(12)
Female
26
24
(92) 2
(8)
Lymfatische permeatie
0,343
Absence
15
15
(100)
0
(0)
Presence
62
54
(87)
8
(13)
Vascular permeatie
0,263
afwezigheid
25
| 
Een fysieke en genetische kaart van Cannabis sativa maken
Colitis ulcerosa
Colitis ulcerosa en een ontbrekende microbe in de darm
Plantaardige diëten verbeteren de gezondheid van het hart via het darmmicrobioom
Nieuwe strategie kan de darm-hersencommunicatie versterken
Darmmicrobioom gekoppeld aan gedragsproblemen bij kinderen
Slaapkwaliteit kan een indicator zijn voor later onderzoek naar de ziekte van Alzheimer
Een nieuwe studie van de onderzoekers van de Universiteit van Californië, Berkeley heeft aangetoond dat de geleidelijk afnemende kwaliteit van de slaap bij 50- en 60-plussers een aanwijzing kan zijn v
Darmbacteriën gekoppeld aan metabole veranderingen en autisme in nieuwe studie
Onderzoekers van het California Institute of Technology hebben een belangrijke ontdekking gedaan die kan verklaren hoe darmbacteriën kunnen bijdragen aan autisme-achtig gedrag. Het team ontdekte dat
Probiotica kunnen therapeutische voordelen bieden voor biopolaire patiënten
Een onderzoek van Baltimores Sheppard Pratt Health-systeem heeft aangetoond dat probiotica kunnen dienen als een potentiële therapeutische benadering van bipolaire stoornissen en andere psychiatrische