Thymidinefosforylase /β-tubuline III uitdrukkingen voorspellen van de respons in het Chinees gevorderde maagkanker patiënten die eerste lijn capecitabine plus paclitaxel

thymidinefosforylase /β-tubuline III uitdrukkingen de respons in het Chinees gevorderde maagkanker patiënten te voorspellen ontvangen van de eerste line-capecitabine plus paclitaxel
Abstract achtergrond
Om de rol van thymidinefosforylase en β-tubuline III in de klinische uitkomst van de Chinese gevorderde maagkanker patiënten te beoordelen ontvangt eerste lijn capecitabine plus paclitaxel.
Methods
de klinische gegevens en tumor biopsies voorafgaande behandeling vanaf 33 gevorderde maagkanker patiënten die capecitabine plus paclitaxel (cohort 1, experimentele groep) en 18 patiënten die capecitabine plus cisplatine (cohort 2, controlegroep) in Peking kanker ziekenhuis van juli 2003 tot december 2008 werden retrospectief verzameld en geanalyseerd op thymidine fosforylase en β-tubuline III expressies met immunohistochemie. De relaties tussen de uitingen van biomarkers en respons of overleving werden bepaald door een statistische analyse.
Resultaten
De mediane leeftijd van de 51 patiënten was 57 jaar (range, 27-75) met mannelijke 34 en vrouwelijke 17, en de respons , mediane progressievrije overleving en de totale overleving was 43,1%, 120d en 265D. Onder cohort 1, het responspercentage, de mediane progressievrije overleving en de totale overleving in β-tubuline III positieve (n = 22) en negatieve patiënten (n = 11) waren 36,4% /72,7% (positief versus negatief, P
= 0,049), 86d /237d (P
= 0,046) en 201d /388d (P
= 0,029), respectievelijk; de respons (87,5% versus 14,3%, P
= 0,01) en de mediane progressievrije overleving (251D vs 84d, P
= 0,003) in thymidinefosforylase positieve & β-tubuline III negatieve patiënten (n = 8) was ook significant hoger dan in thymidinefosforylase negatieve & P-tubuline III positieve patiënten (n = 7). Er was geen correlatie tussen β-tubuline III expressie en respons of overleving bij cohort 2 (n = 18)
Conclusies
in Chinese gevorderde maagkanker, thymidinefosforylase positieve &.; β-tubuline III negatieve misschien respons en de prognose voor capecitabine plus paclitaxel chemotherapie te voorspellen. Verdere prospectieve evaluatie in grote monsters moeten worden uitgevoerd om deze voorlopige bevindingen te bevestigen. Achtergrond
Maagkanker blijft een van de meest voorkomende oorzaken van kanker overlijden wereldwijd [1], met name in China [2]. Hoewel de verbetering van diagnostische werkwijzen stelt sommige patiënten radicale genezing ontvangen bij vroege ziekte is ongeveer 40% van de patiënten nog steeds de mogelijkheid van radicale genezing missen bij de diagnose verder ongeveer 50% van de patiënten optreden recidief en metastase draait. Voor deze patiënten, chemotherapie is nog steeds de belangrijkste methode algemeen in de wereld aanvaard. Verscheidene middelen zijn nu beschikbaar voor systemische chemotherapie bij patiënten met maagkanker, waaronder fluoropyrimidines, platina, taxanen enzovoort. Maar fluoropyrimidines zijn van fundamenteel belang bij maagkanker. Voor gevorderde maagkanker patiënten (AGC), combinatie chemotherapie met twee of drie geneesmiddelen is het meest gemeen met superioriteit in vergelijking met de beste ondersteunende zorg in de eerste lijn of tweede lijn therapie [3-6].
Capecitabine is een oraal toegediend chemotherapeutisch middel dat is ontworpen om 5-fluorouracil (5-FU) bij voorkeur in tumoren genereren. Het is een prodrug die wordt omgezet in 5-FU in de tumoren via een pad met drie enzymatische stappen en twee intermediaire metabolieten betrokken. Voor deze laatste enzymatische stap de metaboliet 5'-deoxy-5-fluoruridine (5'-DFUR) wordt omgezet in 5-FU door thymidine fosforylase (TP) die actiever tumorweefsels dan in normale weefsels [7]. Zo kan de overexpressie van TP in tumorweefsels de concentratie van 5-FU te verhogen en dus het antikanker effect. Huidige bewijs geven aan dat het expressieniveau van TP het klinische verloop van capecitabine kan beïnvloeden niet-kleincellige longkanker, gastro-intestinale adenocarcinoom, borstkanker, hoofd- en nekkanker, etc. [8-11]. Twee grote fase III klinische studies toonden aan dat capecitabine 5-FU kunnen vervangen in klinische administratie [12, 13]. Ook capecitabine in combinatie met cisplatine of paclitaxel is bewezen een effectieve combinatietherapie gebruikt bij patiënten met gevorderde maagkanker als eerste lijn of tweede lijns behandeling [13-15] be.
Taxaan met inbegrip van paclitaxel (PTX) en docetaxel, een andere werkzame antitumormiddel voor maagkanker. Taxaan bindt aan P-tubuline, dat een van de belangrijkste bestanddelen van microtubuli en oefent zijn groeiremmende effecten bij de stabilisatie van microtubule, waardoor de groeistop van tumorcellen bij de G2 /M-fase [16]. Verschillende mechanismen zijn voorgesteld als zijnde verantwoordelijk voor taxaan weerstand: ① De overexpressie van MDR1
gen dat codeert voor P-glycoproteïne kunnen taxanen en andere kationische drugs, waardoor het behoud van geneesmiddelen belemmeren uitstromen [17]; ② Puntmutatie in tubuline is geïdentificeerd belast taxaan resistentie [18, 19] zijn. ③ De selectieve overexpressie van β-tubuline isotypen een ander resistentiemechanisme [20]. Tot nu toe zijn ten minste zeven verschillende β-tubuline isotypen (klasse I, II, III, IVa, IVb, V en VI) gemeld in menselijke, met een complexe verdelingspatroon in verschillende weefsels [20]. Sommige onderzoeken hebben de aanwezigheid van klasse III β-tubuline (β-tubuline III, TUBB3) remde het samenstel van β-tubuline subeenheden bevorderd door paclitaxel [21] en TUBB3 uitgedrukt in aantal paclitaxel-resistente cellen [22]. Veel preklinische studies hebben aangetoond hoge expressieniveaus van TUBB3 geassocieerd met paclitaxel resistentie in menselijke longkankercellen [23], ovariale kanker [22], prostaatkanker [24] en borstkanker [25] cellijnen. In studies van longkanker, borstkanker en eierstokkanker, zijn er reverse relaties tussen TUBB3 expressie en paclitaxel werkzaamheid of prognose van patiënten [26-28].
Nu de doelstelling van paclitaxel wordt ß-tubuline, en de studie had gemeld dat er zelden mutaties in β-tubuline maagkanker (geen mutaties werden gevonden in 50 tumormonsters) [29], vonden wij dat de overexpressie van TUBB3 was de meest waarschijnlijke mechanisme van paclitaxel weerstand bij maagkanker. Deze studie werd ontworpen om de klinische implicaties van TP en TUBB3 uitdrukkingen in capecitabine plus paclitaxel chemotherapie voor gevorderde maagkanker patiënten te demonstreren, en mogelijke voorspellers te identificeren voor patiënten met maagkanker behandeld met capecitabine plus paclitaxel.
Methods
patiënten in aanmerking te komen Leer Alle patiënten in deze studie werden retrospectief verzameld volgende criteria: patiënten hadden histologisch bevestigd uitgezaaide maagdarmkanker en ten minste één meetbare laesie afhankelijk van het effect evaluatiecriteria in vaste tumoren richtlijnen [30]; patiënten werden behandeld met capecitabine plus paclitaxel of cisplatine in gastro-intestinale afdeling van Peking kanker ziekenhuis van juli 2003 tot december 2008 en had ten minste twee cycli van chemotherapie voltooid; geen een chemotherapie behalve voor neoadjuvant of adjuvant chemotherapie (adjuvante chemotherapie afgerond meer dan 12 maanden) werd gedaan; Alle patiënten ondergingen endoscopische biopsie uit primaire maag voor de chemotherapie
Behandelingsregimes
De eerstelijns chemotherapie met capecitabine plus paclitaxel of cisplatine werden toegediend aan patiënten als volgt:. capecitabine (Roche Laboratories Inc., Nutley, NJ) was oraal toegediend in een dosis van 1250 mg /m 2 maal dagelijks van day1 (d1) naar day14 (d14) van 3-wekelijkse cyclus; paclitaxel (Hainanhaiyao Co., Ltd., China) werd gegeven in een dosis van 80 mg /m 2 door een 180-min i.v. infusie op d1 en d8 van elke cyclus; cisplatine (Qilu Pharmaceutical CO., LTD., China) werd gegeven in een dosis van 80 mg /m 2 door een 240-min i.v. infusie op d1 van elke cyclus. De behandeling werd voortgezet tot ziekteprogressie of onaanvaardbare toxiciteit, of bij patiënten /besluit artsen.
Response Evaluation
Chemotherapeutische respons werd om de twee maanden door computertomografie (CT) volgens de Response Beoordelingscriteria in solide tumoren geëvalueerd (RECIST) criteria. Derscheid gemaakt door volledige respons (CR), partiële respons (PR), stabiele ziekte (SD) en progressieve ziekte (PD). CR en PR-patiënten werden gedefinieerd als responders, SD en PD-patiënten als nonresponders. De progressievrije overleving (PFS) en totale overleving (OS) werden berekend vanaf de eerste dag van de behandeling tot progressie van de ziekte en overlijden door welke oorzaak, respectievelijk.
Immunohistochemie-analyse voor TP en TUBB3
Al tumor monsters werden met terugwerkende kracht verzameld van patiënten en tweetrapswerkwijze van immunohistochemie (IHC) werd gebruikt om TP en TUBB3 detecteren tumorsecties. Formaline gefixeerde paraffine-ingebed weefsel secties met 4 micrometer dik werden van paraffine ontdaan in xyleen en gehydrateerd in gegradeerde alcoholen. Na antigeenterugtrekking in 0,01 M citraatbuffer (pH 6,0), werden secties behandeld met endogeen peroxidase beperken vloeistof (Beijing Cowin Biotech Co., Ltd., Lot. CW0117) gedurende 10 min. Coupes werden gespoeld en geïncubeerd met TUBB3 en TP (Beijing Cowin Biotech Co., Ltd.) monoklonale antilichamen gedurende 60 min, respectievelijk. Na spoelen met fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS), werden de coupes geïncubeerd met algemene type IgG-HRP Polymer (Beijing Cowin Biotech Co., Ltd., Lot. CW0117) gedurende 10 min, gevolgd door chromogeen 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride dihydraat (DAB) voor ongeveer 2-7min. Tenslotte werden secties conterstained met hematoxyline gedurende 1 min gevolgd door gedehydreerd in gegradeerde alcoholen, vrijgemaakt in xyleen en bedekt met dekglaasjes. Elk experiment opgenomen negatieve controle. Secties werden onderzocht en gescoord door twee onafhankelijke professionele pathologen van de afdeling pathologie zonder enige kennis van deze studie. TP eiwit werd verspreid in het cytoplasma en de nucleaire, TUBB3 in cytoplasma. Kleuring werd telt voor intensiteit van kleuring volgens voorgaande beschrijving [31]. Kort, intensiteit van kleuring (1, zwak, 2, matig, 3, sterk) en het percentage cellen gekleurd (1, 0% ~ 10%; 2, 11% ~ 50%, 3, 51% ~ 100%) berekend . Eindelijk waren de expressie als positief of negatief te zijn op basis van de mediaan kleuring score (intensiteit score plus percentage score) als volgt: negatief voor score ≤ 3, positief voor score > 3.
Statistische analyse
Volgens TP en TUBB3 proteïne expressieniveaus patiënten werden verdeeld in twee groepen (positief en negatief). De relatie tussen TP, TUBB3 uitdrukkingen en reactie capecitabine plus paclitaxel of cisplatine werden geanalyseerd met Fisher's exact test. Kaplan-Meier curves en log-rank test werden gebruikt om de relatie tussen expressie van biomarkers en overleving te analyseren. Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA).
Resultaten
Patient Demografie
Fifty-one patiënten werden opgenomen in deze studie tussen juli 2003 tot december 2008 in ons ziekenhuis met mannelijke 34, vrouw 17, gemiddelde leeftijd 57 jaar (range 27-75 jaar). Drieëndertig patiënten (mannen 20, vrouwen 13, gemiddelde leeftijd 57 jaar [range 27-74 jaar]) ontvingen capecitabine plus paclitaxel met een mediane 6 cycli van chemotherapie (cohort 1) en achttien patiënten (14 mannelijke, vrouwelijke 4, gemiddelde leeftijd 57 jaar [range 42-75 jaar]) ontvingen capecitabine plus cisplatine met een mediane 6 cycli van chemotherapie (cohort 2). De kenmerken van 51 patiënten zijn weergegeven in tabel 1 1.Table Patient demografische en klinische kenmerken
Kenmerk
Cohort 1 (n = 33)
Cohort 2 (n = 18)
Totaal (n = 51)

No. Patiënten
%
No. Patiënten
%
No. Patiënten
%
Sex
Man
20
60,6
14
77,8
34
66,7
vrouwelijke
13
39,4 verhuur 4
22,2
17
33,3
Leeftijd, jaren
Median
57
57
57
Range
27-74
42-75
27-75
KPS
90-100
23
69,7
14
77,8
37
72.5
70-80
10 | 30.3 verhuur 4
22,2
14
27.5
sites van metastasen
lever
12
36,4
6
33,3
18
35,3
Lung 1
3,0 verhuur 4
22,2
5
9.8
Lymfklieren
33
100
17
94,4
50
98,0
Peritoneum
6
18,2
3
16,7
9
17.6
Anderen *
8
24.2 verhuur 4
22,2
12
23,5
histologische differentiatie #
Poor
25 | 75.8
11
61,1
36
70,6
goede kwaliteit 8
24,2
7
38,9
15
29.4
LET OP: * Inclusief eierstok, bijnieren, subcutane of buikwand bekkenholte, bot en borstholte. #Poor, Met inbegrip van slecht gedifferentieerde adenocarcinoom, zegelring cell carcinoma en mucinous adenocarcinoom; Goed, met inbegrip van matige goed gedifferentieerd adenocarcinoom. KPS, Karnofsky performance status.
Response Evaluation and Survival
Tot februari 2010 hadden alle patiënten evalueerbaar geweest voor de reactie en 43 patiënten overleden. De totale respons (CR + PR) bij 51 patiënten was 43,1%, met 22 partiële responders (43,1%), 18 patiënten met stabiele ziekte (35,3%) en 11 patiënten met progressieve ziekte (21,6%). De mediane PFS en OS van 51 patiënten waren 120 dagen en 265 dagen, respectievelijk. Er waren geen significante verschillen in respons en overleving tussen cohort 1 en 2 cohort (tabel 2). De respons, mediane PFS en OS in cohort 1 en cohort 2 was 48,5%, 120 dagen, 252 dagen en 33,3%, 116 dagen, 265 dagen, respectively.Table 2 respons en overleving voor alle patiënten

Cohort 1 (n = 33)
Cohort 2 (n = 18)

P
Totaal (n = 51)
Outcome
No.
%
No.

%

No.
%
CR + PR No.
16
48.5
6
33.3
22
43,1
SD No.
11
33,3
7
38,9
18
35,3
PD No.
6
18.2
5
27,8
11
21,6
Respons
16
48.5
6
33,3
0,668
22
43,1
mediane PFS (dagen)
120
116
120
95% CI
77,2-162. 8
0-267,1
0,377
79,7-160,3
mediane OS (dagen)
252
265
265
95% CI

• Klasse III β-tubuline is een voorspellende marker voor taxaanbevattende chemotherapie bij recidiverende en gemetastaseerde maagkanker
• Vereniging van verminderde expressie van RASSF1A met promotor methylatie in primaire maagkanker van patiënten van centraal China