Eiwitexpressie profiel van Gasterophilus intestinalis larven veroorzaken paard maag larven en karakterisering van het paard immuunreactie

Eiwitexpressie profiel van Gasterophilus intestinalis
larven veroorzaken paard maag larven en karakterisering van het paard immuunreactie
Abstracte achtergrond
is weinig informatie beschikbaar over de immunologische aspecten van parasitaire Gasterophilus intestinalis
(Diptera, Oestridae ) larven waardoor paard maag myiasis. De doelstellingen van dit onderzoek waren het eiwitgehalte van larvale ruwe extracten van de migrerende tweede en derde larven (L2 en L3) van G. intestinalis
om de immuunrespons van paarden karakteriseren analyseren.
Resultaten
Het proteomische profiel van L2 en L3, onderzocht met één- en tweedimensionale benaderingen bleek een migratiepatroon aan elke larvale stadium. Verder werden Western blots uitgevoerd met paard sera en sera van Balb /c muizen geïmmuniseerd met de larvale ruwe extracten van L2 of L3, onthullen een ander immuunreactie in natuurlijk geïnfecteerde paarden vs
. kunstmatig opgewekte immuunreactie in muizen. De vergelijkingen van de immunoblot profielen tonen dat de fase L2 meer immunogeen zijn dan de fase L3 waarschijnlijk als gevolg van de hoogste enzymatische productie van L2 terwijl doortrekken de gastheerweefsels. Vijftien eiwitten werden geïdentificeerd door middel van massaspectrometrie.
Conclusie
Dit werk geeft nadere informatie in het begrip van de interactie tussen G. intestinalis Kopen en hun gastheer en door bij te dragen een nieuwe opzet van de proteomics profiel van de belangrijkste larvale stadia. achtergrond
Negen soorten Gasterophilus
(Diptera, Oestridae) zijn vliegen beschreven waardoor, in het larvale stadium, gastro-intestinale myiasis in paardachtigen. Terwijl Gasterophilus intestinalis
(De Geer, 1776) en Gasterophilus nasalis
(Linnaeus, 1758) worden wereldwijd gedistribueerd en zijn vaak de enige soort gemeld in vele delen van de Nieuwe Wereld, worden de resterende soorten alleen gerapporteerd in zeer beperkte gebieden van Europa, Oost-landen [1] en Afrika [2]. Volwassen bot vliegen deponeren hun eieren op het haar van de hosts 'op verschillende locaties, afhankelijk van de soort van Gasterophilus
[3]. G. pecorum
is een uitzondering als vrouwtjes leggen hun eieren op gras, bladeren en stengels van planten [1]. Besmetting treedt op wanneer de eieren in het paard de mond worden geïntroduceerd door dierlijke likken en verzorging. De eerste larvale stadium (L1) luiken, begint te migreren en de rui in het tweede larvale stadium (L2) in de mondholte [4]. Larven van verschillende soorten Gasterophilus Wat zijn specifiek aanwezig zijn in één of meer gebieden van het maagdarmkanaal waar de derde larvale stadium (L3) aan het slijmvlies verbonden blijft ongeveer 8-10 [5] maanden. De klinische verschijnselen die optreden bij de migratie en rijping fasen van de larven zijn moeilijk te diagnosticeren, maar het is aangetoond dat verschillende soorten Gasterophilus
kan ernstige schade gedurende hun levenscyclus [6-9] veroorzaken.
In de afgelopen jaar onderzoek naar de immunologie en immunopathologie van vele oestrid larven veroorzaken larven zijn toegenomen vanwege hun belangrijke implicaties in diagnostiek en in vaccinatieprogramma's [10]. Terwijl immunologische studies vooral waren gericht op Hypoderma
vee grub-infectie [11], en schapen nasale oestrosis door schapenhorzel
[12], de immunologie van Gasterophilus
spp. veroorzaakt myiasis kreeg weinig aandacht. Dit is ook te wijten aan moeilijkheden bij het bestuderen immunologische gastheer-parasiet interacties in de gastrointestinale mucosa interface. Bijgevolg nu toe geen belangrijke immunogenen zijn gerapporteerd [13]. Eén studie omvat de ontwikkeling van antilichamen voor de diagnose van larven van G. intestinalis
larven hoewel de specificiteit van de immuunreactie niet in het optreden van gelijktijdige paard parasitaire infectie [14] werd getest. Meer recent, veel proteomics-gebaseerde analyses, gecombineerd met twee-dimensionale gel-elektroforese, hebben een alomvattende aanpak om beter te begrijpen biologische en immunologische processen van ziekteverwekkers en ziekten [15-17] aangeboden. Het doel van deze studie was L2 en L3 eiwitten van G. intestinalis Kopen en om de immuunrespons van paarden en geïmmuniseerde muizen tegen de larvale antigenen geanalyseerd karakteriseren.
Resultaten
1-D analyse van het ruwe extract larvale (LCE) L2 en L3
migratie van de LCE2 op de 1-D-zilver gekleurde gel toonde een specifiek patroon (Figuur 1A) met 14 groepen die uit de gel werden geïsoleerd voor verdere identificatie met behulp van massaspectrometrie (MS) ( Tafel 1). De keuze van de banden was gebaseerd op de intensiteit van de band op de zilvergekleurde gel, evenals de immunoreactiviteit waargenomen na immunoblotting met paardenserum (Figuur 1B) of L2-muizen serum (figuur 1C). Drie eiwitten in 4 van de 14 geselecteerde banden gaf een significant score (p < 0,05) en werden geïdentificeerd als actine (Figuur 1A, band 8), glyceraldehyde 3-fosfaat dehydrogenase (GAPDH) (Figuur 1A, band 9) en hemoglobine (Figuur 1A, banden 13 en 14). Een ander migratiepatroon werd waargenomen voor de LCE3 op de 1-D-zilver gekleurde gel (figuur 1D). Analoog werden immunoblots uitgevoerd met paard sera (figuur 1E) en sera van L3-muizen (Figuur 1F). De selectie van 13 banden, aangegeven met pijlen (figuur 1D), was gebaseerd op dezelfde criteria als hierboven. Zij werden geïsoleerd voor verdere identificatie van MS (Tabel 2). Tien eiwitten van de 13 geselecteerde bands gaven een belangrijke score (p < 0,05) en werden geïdentificeerd als de alfa-keten van larvale serum eiwit (figuur 1D, banden 1-4), arylphorin (figuur 1D, band 6), beta-keten van larvale serum eiwit (figuur 1D, band 7), hemoglobine (figuur 1D, banden 10-12) en mureïne lipoproteïne (figuur 1D, band 13) .table 1 massaspectrometrie identificatie van eiwitten geïdentificeerd uit de LCE van L2.
Band ID
Protein naam
Species
toetreding nummer

MW (Da)
pi
Protein score
8
Protein vergelijkbaar met actine-87E isoform 2
Drosophila melanogaster

AAM29410
37.816
5,36
223
9
glyceraldehyde-3-fosfaat dehydrogenase
Drosophila hydei
S24630
35.369
8.2
224
13
Hemoglobine
Gasterophilus intestinalis
O96457
17.912
8.44
440
14
Hemoglobine
Gasterophilus intestinalis

O96457
17.912
8.44
144
Spots opdrachten verwijzen naar Figuur 1. Eiwitten genoteerd zijn geïdentificeerd met een aanzienlijke kans score bij p < 0,05 in MSDB.
Tabel 2 massaspectrometrie identificatie van eiwitten geïdentificeerd uit de LCE van L3.
Band ID

Eiwit naam
Species
aantal toetreding Gids MW (Da)
pi
Protein score
1
Larvale serum eiwit 1 alfa-keten voorloper
Drosophila melanogaster
LSP1A_DROME
98.802
5,72
92 2
Larvale serum eiwit 1 alfa-keten voorloper
Drosophila melanogaster
LSP1A_DROME
98.802
5,72
89
3
Larvale serum eiwit 1 alfa-keten voorloper
Drosophila melanogaster

LSP1A_DROME
98.802
5,72
98 verhuur 4
Larvale serum eiwit 1 alfa-keten voorloper
Drosophila melanogaster
LSP1A_DROME
98.802
5,72
102
6
Arylphorin subunit A4 voorloper
roodwangbromvlieg
ARY1_CALVI
92.282
5,59
71
7
Larvale serum eiwit beta 1 keten voorloper
Drosophila melanogaster
LSP1B_DROME
95.849
5,41
69
10

• Endoscopische sluiting van maagsonde perforaties met titanium clips: een vier-case report
• Enorme maag bezoar veroorzaakt door honingraat, een ongewone complicatie van de gezondheid faddism: een zaak report