Sąvoka ir klinikinė reikšmė miR-132 skrandžio vėžiu sergantiems pacientams

Sąvoka ir klinikinė reikšmė miR-132 skrandžio vėžiu sergantiems pacientams
tezės
Priežastis ir tikslas
Pasaulis-132 vaidina svarbų vaidmenį reguliuojant neuronų morfologija ir ląstelių jaudrumą. Mažai žinoma apie miR-132 poveikį vėžio. Šio tyrimo tikslas yra įvertinti PPN-132 ir jos klinikinę reikšmę skrandžio vėžiu išraiška.
Metodai
vėžinių audinių ir atitinkami normalius audinius nuo 79 pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu, buvo ištirta dėl miR-132 išraiškos naudojant kiekybine PGR ir tarp Pasaulis-132 ekspresijos lygį ir klinikos veiksnių ir prognozės asociacija buvo analizuojami.
rezultatai
79 klinikinių mėginių skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, PPN-132 ekspresijos lygis vėžio audiniuose buvo žymiai didesnis nei atitinkami normaliuose audiniuose (P
= 0,001). Aukštojo ekspresijos lygis PPN-132 buvo susiję su dažnesniu limfmazgių metastazių (P, pervežimas = 0,033), daugiau limfinės naviko embolija (P, pervežimas = 0,007), ir dar daugiau pažengęs (P, pervežimas = 0,016). Be to, išraiška miR-132 buvo nepriklausoma prognostinis faktorius bendro išgyvenamumo (P, pervežimas = 0,020).
Išvada
Pasaulis-132 gali būti naudojama kaip veiksminga prognostinis faktorius skrandžio vėžiu sergantiems pacientams.
Virtualus skaidres
virtualus Pristatymas (-os) už šį straipsnį galima rasti čia: http:... //www diagnosticpathol nologija diagnomx eU /vs /8168577241196050
Raktiniai žodžiai
skrandžio vėžio prognozė biologiniams žymenims Įvadas
Nors skrandžio vėžio dažnis buvo žymiai mažėja jau keletą dešimtmečių, tai dar ketvirtoji dažniausia vėžio ir antra dažniausia priežastis, dėl vėžio mirties [1, 2]. Genų keletą atrodo prisidėti prie piktybinės biologinės elgsenos skrandžio vėžio [3, 4]. Labai svarbu nustatyti prognoziniai veiksniai, siekiant padidinti terapinį efektą ir sumažinti neigiamą poveikį vėžiui gydyti.
Mikro RNR yra endogeninių mažų nekoduojamame RNR, kurios veikė kaip genų reguliavimo reguliuojant Messenger RNR klasė vertimo raštu ir degradacija [5]. Mikro RNR atlieka labai svarbų vaidmenį reguliuojant normalias funkcijas, tokias kaip proliferaciją, diferenciaciją ir apoptozės. Be to, reguliacijos sutrikimas ir miRNAs prisidėti prie kancerogenezės ir vėžio progresavimo [6, 7]. Kaip miRNAs šeimos nario, miR-132 vaidina svarbų vaidmenį uždegimas, angiogenezės, ir neuronų vystymuisi [8-10]. Neseniai, kai kurie tyrimai parodė, kad miR-132 reguliacijos sutrikimas buvo susijęs su žmogaus navikų, pavyzdžiui, nesmulkiųjų ląstelių plaučių vėžio, osteosarkomos, krūties vėžio, kepenų ląstelių karcinoma, prostatos vėžio, ir kasos vėžio [11-16] įvairovė. Tačiau nėra jokių pranešimų apie raiškos ir klinikinė reikšmė miR-132 skrandžio vėžio.
Šiame tyrime Mir-132 išraiška skrandžio vėžiu sergantiems pacientams buvo nagrinėjama ir tarp miR-132 ir klinikos parametrų asociacija buvo analizuojami , Be to, mes įvertinti kai kurių baltymų, dalyvaujančių ląstelių ciklo kontrolės (p21, p53), audinių proliferacijos ir diferenciacijos (c-myc) išraiška. p21 ir p53 baltymai yra auglio supresorinių genų produktų, kurie yra aktyvuota moduliuojant ląstelių proliferaciją per kontrolės G1 arešto kontrolės punkto ląstelės ciklą [17, 18]. C-MYC baltymas yra transkripcijos faktorius tipas.
Pacientai ir metodai
žmogaus skrandžio vėžiu ir atitinkantis normaliuose audiniuose buvo gauti iš 79 pacientų, kuriems buvo atlikta pašalintas skrandis ne iš skrandžio vėžio ir minkštųjų audinių sarkomą, Fudano universiteto Šanchajuje vėžio departamento centras, nuo 2007 sausio ir gruodžio 2009. Dalinis skrandžio pašalinimas buvo atlikta 36 pacientams, ir iš viso skrandžio pašalinimas buvo atlikta kitų 43 pacientų. buvo garantuota visiems pacientams bent 4 cm rezekcijos maržos iš bendrojo naviko. Iš 71 pacientų gavo adjuvantinis chemoterapija. Po to, kai rezekcija, bandiniai buvo nedelsiant užšaldomos skystame azoto ir tada saugomi -80 ° šaldytuve. Įtraukimo kriterijai šiame tyrime buvo adenokarcinoma ir išsamūs patologinių duomenų; Atmetimo kriterijai buvo neoadjuvantu terapija, pilvaplėvės platinimas ir tolima metastazės. Duomenys buvo gauti iš jų veiklos bei patologinių ataskaitas ir tolesnes duomenys buvo gauti telefonu poliklinikos ir klinikinių duomenų bazę. Raštiškas sutikimas buvo gautas iš visų pacientų, ir šis tyrimas patvirtino Etikos komiteto Šanchajaus vėžio centro Fudano universitete.
RNR gavybos ir kiekybinė realaus laiko PGR
RNR iš audinių išskirta su TRIzol reagento (Invitrogen, Carlsbad, CA, JAV) pagal gamintojo instrukcijas. Kiekybiniai realaus laiko PGR (KRL-PGR) tyrimai buvo atlikti, siekiant aptikti endogeninio išraiška miR-132 pagal Applied Biosystems metodu. Trumpai tariant, kDNR buvo atvirkštinis transkripcija iš visų RNR mėginių naudojant Mirna konkrečių kamieninių kilpa gruntą nuo TaqMan MicroRNA tyrimai ir reagentų iš TaqMan® MicroRNA atvirkštinės transkripcijos rinkinys (ABI, Forest City, CA, JAV). Tada PGR produktai buvo papildytas iš kDNR mėginių, naudojant TaqMan MicroRNA Assays kartu su TaqMan® Universal PGR Master Mix ir PGR produkto kiekio buvo stebimi naudojant Taikomoji BIOSYSTEMS 7900 Sequence Detection System. U6 mažos branduolinės RNR buvo naudojamas kaip vidaus kontrolės. Santykinis miR-132 buvo apskaičiuojamas naudojant 2 (-Delta DeltaC (t)) metodą [19].
Imunohistocheminiais dažymo
p21, p53, ir C-myc buvo aptikta imunohistocheminio metodu. Visi pirminiai antikūnai ir pelės monokloniniai antikūnai buvo įsigytas iš Dako (Hamburgas Vokietija.). Imunohistocheminį dažymo atliko sustiprintai, pavadintą polimero sistemą (ELPS) metodu. Po nakties inkubacijos 4 ° C temperatūroje su anti-P21, p53 ir C-MYC antikūnų, skyriai buvo gydomi pagal standartinius imunoperoksidaziniu metodus naudojant avidino biotino peroxidise sudėtingos Kit (LSAB + Kit /HRP; DaKo). Tada peroxidise reakcija buvo sukurtas diaminobenzidinu (Dako). Neigiama kontrolė skyriai buvo taikoma ta pati procedūra, išskyrus, kad pirmasis antikūnas, buvo pakeistas fosfatinio buferio druskų tirpalo (PBS) [20].
Imunohistocheminiais dažymo balais
Visi griežinėliai buvo įvertintas dviem patologai be žinių apie klinikinės baigties. Iš imunoreaktyvi ląstelės ir dažymo intensyvumas procentais buvo įvertintas kiekvieno mėginio. Iš imunoreaktyviųjų ląstelių procentas buvo rūšiuojami nuo nuo 0 iki 4 skalės: ne dažymo gavo kaip 0, 1-10% ląstelių tamsintas gavo kaip 1, 11-50% kaip 2, 51-80%, kaip 3, o 81- 100%, kaip 4. dažymo intensyvumas buvo klasifikuojami kaip 0-3: 0 yra apibrėžiamas kaip neigiamas, 1 labai silpnas, 2, kaip prižiūrima, ir 3 kaip stiprus, atitinkamai. Pirminiai duomenys buvo konvertuoti į imunohistocheminio balas (IHS) padauginus kiekio ir intensyvumo balai. Dėl galutinės analizės atvejai turėjo rezultatą mažiau nei 1 buvo laikomi neigiami, ir ≥ 1 buvo laikomas teigiamu, [20].
Statistinės analizės Viesbutis The pacientų funkcijų ir klinikos ypatumus buvo analizuojami naudojant du pailginta Stjudento t
-test nuolat kintamų ir χ 2 testas kategoriška kintamasis. Bendras išgyvenamumas kreivės buvo apskaičiuojamas Kaplan-Meier metodu ir buvo nagrinėjamas ilgą rangas bandymą tarp išgyvenimo kreivių skirtumai. Nepriklausomi prognostiniai veiksniai buvo nagrinėjami pagal daugiamatis išgyvenamumo analizė, naudojant Cox proporcinės rizikos modelį. Priimtas reikšmingumo lygmuo p
< 0,05. Statistinės analizės ir grafika buvo atlikta naudojant SPSS 13.0 statistinį paketą (SPSS Inc., Čikaga, IL)
rezultatai
klinikos charakteristikos
Nebuvo 62 vyrai ir 17 moterys. (3,6: 1), vidurkio Amžius 58 metų. Nebuvo 7 (8,9%) Anksti skrandžio vėžio ir 72 (91,1%) išplitusiu skrandžio vėžiu. Pasak histologinis tipas, gerai diferencijuotas navikas buvo pastebėtas 3 (3,8%) pacientų, vidutiniškai diferencijuoti 11 (13,9%) pacientų, o blogai diferencijuoti navikai likusiose 65 (82,3%) pacientų. 79 pacientų, 25 (31,6%) buvo esančios viršutinio trečdalio, 15 (19,0%) navikuose buvo navikai viduriniame trečdalyje, 36 (45,6%) buvo navikai apatiniame trečdalyje skrandžio, ir 3 (3,8%) turėjo navikai užima du trečdalius ar daugiau pilvo. Limfmazgių metastazės buvo stebimas 57 pacientams metastazės lygis buvo 72,2%. Patologinės etape pasiskirstė taip: 10 (12,6%) pacientai priklausė I etapas, 24 (30,4%), II ir 45 (57%) III
išraišką ir koreliaciją PPN-132, p21, p53. ir c-MYC
Pasaulis-132 lygiai 79 vėžinių (T) ir atitinkami sveikų audinių (N) išnagrinėjo KRL-PGR. Dauguma navikų audiniuose, (57/79, 72%) parodė, padidėjęs miR-132 palygintos su atitinkamomis normaliuose audiniuose, su padidėjimo mediana 2,3 karto. Pasaulis-132 lygiai vėžinių audinių (vidurkis ± SN 0,35 ± 0,58) buvo reikšmingai didesnis nei atitinkamų noncancerous audinių (vidurkis ± SD, 0,15 ± 0,35, p
< 0,05). Į p21, p53, ir C-myc posakiai išnagrinėjo imunohistocheminį dažymo. P21 išraiška buvo teigiamas 64,6% visų skrandžio vėžio audiniuose. P21 dažymo buvo pastebėta, kad karcinoma ląstelių branduoliuose. p53 išraiška buvo teigiamas 74,7% visų skrandžio vėžio audiniuose. p53 dažymo buvo pastebėta, kad karcinoma ląstelių branduoliuose. c-myc išraiška buvo teigiamas 44,3% visų skrandžio vėžio audiniuose. c-myc dažymo buvo pastebėta, kad karcinoma ląstelių citoplazmoje. ir miR-132 išraiška buvo susijęs su p53 ir C-myc. Nebuvo koreliacija su p21. Be to, p53expression buvo susijęs su c-myc (1 lentelė) .table 1 Teigiami rezultatai koreliacijas tarp biologinių žymenų
biologiniams žymenims

koreliacijos koeficientai (r)
P value

miR-132
P53
0.274
0.015
miR-132
c-myc
0.228
0.044
P53
c-myc
0.235
0.038
Klinikinė reikšmė miR-132 skrandžio vėžio
79 skrandžio vėžiu sergančių pacientų buvo suskirstyti į dvi grupes, įskaitant miR-21 didelės raiškos grupėje (T /N > 0,5, n = 33) ir mažai išraiška grupėje (T /N < 0,5, n = 46) atsižvelgiant į mediana T /N santykiu ir miR-132 išraiška. buvo analizuojami tarp Pasaulis-132 saviraiškos ir patologinių parametrų koreliacija. Rezultatai parodė, kad pacientams, sergantiems didelio Pasaulis-132 išraiškos turėjo dažniau limfmazgių metastazių (P
= 0,033), daugiau limfos naviko embolija (P
= 0,007), ir dar daugiau pažengęs (P
= 0,016 ). Tačiau nebuvo jokių reikšmingų skirtumų apie lytį, amžių, histologinio tipo, naviko vietą, naviko dydį, nervų invazijos ir T etape (2 lentelė). Į bendrą išgyvenamumą, pacientai su Mir-132 aukštos raiškos turėjo žymiai prasčiau prognozę nei tie, su Pasaulis-132 mažos raiškos (P
= 0,000) (1 pav). Vienmatės analizės bendro išgyvenamumo parodė, kad santykinė išraiška miR-132, nervų invazijos, limfinės naviko embolija ir patologinės etape buvo prognostiniai faktoriai,. Daugiamatė išgyvenamumo analizė, įskaitant visus reikšmingus paminėtų vieną požymį analizės prognostinių faktorių, buvo atliktas siekiant nustatyti nepriklausomus prognozinius veiksnius skrandžio vėžio. Daugiamatė analizė parodė, kad Mir-132 raiškos lygis ir patologinis etapas buvo nepriklausomi prognostiniai veiksniai (3 lentelė) .table 2 Pasaulis-132 saviraiškos ir klinikos veiksnių
Kintamieji
High išraiška n = 33

Žemas išraiška n = 46
P
Lytis
0,618
Vyras
25
37
Moteris
8
9
Amžius
0.556
< 60
≥60
15
0,412
prastai
18
22
24
histologinis rūšiavimas -differentiated
28
36
Vidutiniškai diferencijuoti
5
7
gerai diferencijuota
0 3
naviko vietą
0,467
viršutinis trečdalis
10
15
viduriniame trečdalyje
8 7
apatinis trečdalis
15
21
Dviejų trečią ar daugiau
0
3
naviko dydis (cm)
0.862
< 5
18
26
≥5
15
20
Nervų invazija
0.096
Taip
22
22
Nėra
11
24
limfinės navikas embolijos
0,005
Taip
26
22
Nėra
7
24
T etapas
0.070
T1, T2
6
17
T3 T4
27
29
limfmazgių metastazės
0,033 pervežimas Taip
28
29
Nėra
5
17
Patologinė etapas
0,016
Aš
2
8
II
6
18
III
25
20
1 pav palyginimas išlikimo pagal PPN-132 išraiška. Nebuvo didelių skirtumų tarp Pasaulis-132 aukštos raiškos ir miR-132 mažos raiškos (p pervežimas = 0,000).
3 lentelė daugiamatė analizė pacientams, COX modelio
Kintamojo
χ2

P
Vale
÷
95% PI
Pasaulis-132 išraiška
5.447
0,020
2,414
1,152-5,059
Nervų invazija
1.918
0,166
1.890
0.768-4.655
Limfinė naviko embolija
0.173
0,677
0,838
0.366-1.923
Patologinė etapas
8,742
0,003
4,356
1.642-11.555
Diskusijos
prognozinių veiksnių skrandžio vėžio nustatymo buvo būtini prognozuojant pacientų išgyvenamumą ir nustatyti optimalius gydymo strategijas, , Invazijos ir limfmazgių metastazių gylis buvo svarbiausi prognostiniai veiksniai skrandžio vėžio. Kaip į prognozę per tą patį patologinės etape skrandžio vėžio kintamumo rezultatas, būta daug tyrimų dėl konkrečių biologinių žymenų daug identifikuoti pacientus prognozei [21-28]. Biologiniai žymenys, pavyzdžiui, MicroRNA, c-met, L1CAM, endotelio lipazės baltymų, kintamojo kopijų skaičiaus mitochondrijų DNR (mtDNA), TIMP3, hK6 ir Ezrin buvo nuodugniai ištirtas. Kaip naują biologinis žymuo, iš miRNAs prognozuojant prognozę potencialas vis studijavo. Pasaulis-132 yra labai užkonservuoti Mirna transkribuoti iš intergenic regione žmogaus chromosoma 17 d transkripcijos faktorius cAMP atsakas elementas privalomas baltymų [29]. Dauguma šoninių Pasaulis-132 reglamentavimo ir biologinių funkcijų ataskaitų atsirado iš tyrimų, atliktų neuronų kontekste. Be to, miR-132 taip pat buvo aprašyta nuo kitose srityse, pavyzdžiui, uždegimas, ląstelių transformavimo ir tumorogenezės skaičius. ir miR-132 buvo parodyta, kad būti iki reguliuojama arba žemyn nukreipto reguliuojamos skirtingų žmogaus vėžio [16, 30, 31]. Kai kurie tyrimai parodė, kad Pasaulis-132 galėtų skatinti ląstelių proliferaciją [31]. Tačiau vis dar nėra pranešimų apie miR-132 skrandžio vėžio.
Šiame tyrime mes ištirti Pasaulis-132 išraišką skrandžio vėžio ir nustatė, jeigu ji galėtų prognozuoti pacientų rezultatus. Mes nustatėme, kad Pasaulis-132 išraiška buvo didesnis vėžinių audinių palyginti su atitinkamomis normalius audinius. Tiksli priežastis Mir-132 aukštos raiškos skrandžio vėžys yra nežinoma. Parkas JK ir kt. pranešė [31], kad B2AR agonistas terbutaliną padidina Pasaulis-132 išraiška. Pasaulis-132 buvo transkripciškai aktyvuota CREB neuronuose [32]. B2AR antagonistai slopina aktyvavimo CREB [33]. Todėl įmanoma, kad modeliavimas B2AR padidinti Pasaulis-132 išraišką po aktyvavimo CREB.
Rezultatai parodė, kad didelės Pasaulis-132 išraiška skrandžio vėžio reikšmingai koreliavo su agresyviais klinikos savybių, tokių kaip dažniau limfmazgių metastazių daugiau limfinės navikas embolijos ir labiau pažengusios stadijos. Šie rezultatai rodo, kad ląstelę miR-132 vaidina svarbų vaidmenį skrandžio vėžio progresavimą. Įdomu tai, kad mes nustatėme, kad miR-132 išraiška buvo susijęs su p53 ir C-myc. Kai ankstesni tyrimai parodė, kad kai kurie mikro RNR gali tarpininkauti ir reguliuoti auglio slopinimas, kuria p53 ar c-myc [34, 35]. Jiang L ir kt., [34] nustatyta, kad turi-Pasaulis-125a-3p gali sukelti apoptozę per p53 keliu. Zhang N, ir kt. [35] nustatė, kad Pasaulis-150 galėtų skatinti plaučių vėžio ląstelių proliferaciją nukreipiant p53. Wang B ir kt. [36] nustatė, kad buvo dvigubai neigiamu grįžtamuoju ryšiu tarp miR-122 ir C-myc į kepenų vėžį. Li X, ir kt. [37] nustatė, kad C-MYC skatino brandžios miR-23A, miR24-2 ir miR27a išraiška, o vėliau skatina krūties karcinoma ląstelių migraciją ir invazija. Tačiau tiksli koreliacija tarp miR-132 ir p53, C-MYC yra neaiškus ir dar turi būti išaiškinta, būsimoms studijoms. Mes tyrė Pasaulis-132 raiškos sąsajas su prognozė skrandžio vėžiu sergančių pacientų, nustatė, kad pacientams, sergantiems didelio Pasaulis-132 išraiškos turėjo blogesnę bendrą išgyvenimą, kad tie, su mažu Pasaulis-132 išraiška. Dar svarbiau, daugiamatis analizė atskleidė, kad didelis Pasaulis-132 išraiška buvo nepriklausoma prognostinė rodiklis. Tai buvo nesutarimų ar miR-132 Data patį prognostinę vertę įvairių rūšių navikų. Parker ir kt. pranešė [38], kad aukštos raiškos miR-132 buvo susijęs su blogos prognozės pacientams, sergantiems pirmine glioblastoma. Tačiau, Yang et al. [12] pranešė, kad osteosarkoma pacientams, turintiems mažas Pasaulis-132 išraiškos turėjo blogesnę bendrą ir išgyvenimo be ligos. Tai buvo įmanoma, kad ir miR-132, atliko skirtingus funkcijas skirtingų auglių. Wang ir kt. [39] nustatė, kad miR-132 raiška nuslopintą in vitro ląstelių proliferaciją ir in vivo naviko augimui. Li ir kt. [13] parodė, kad raiškos miR-132 gali slopinti krūties vėžio ląstelių proliferaciją. Atvirkščiai, parkas ir kt. [31] pranešė, kad per išraiškos PPN-132 padidino kasos vėžio ląstelių proliferaciją.
Kartu paėmus, mūsų tyrimas parodė, kad Pasaulis-132 buvo aktyvinama skrandžio vėžio ir gali būti nepriklausoma molekulinės biologinis prognozuoti skrandžio prognozė vėžys. Tuo tarpu, kaip mažos imties tyrimų rezultatas, didelė atveju tyrimas yra būtinas, siekiant patvirtinti prognostinę vertę PPN-132 skrandžio vėžio.
Deklaracijos
Autoriai "originalas pateiktas failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos autorių originalios pateiktų failų vaizdų. 13000_2014_947_MOESM1_ESM.tif Autorių originalus failas 1 paveiksle konkuruojančių interesų Viesbutis The autoriai pareiškė, kad nėra konkuruojantys interesai egzistuoja
autoriams. Įnašai
sumanyta ir sukurta eksperimentus: XWL HMY HC YNW. Atlieka eksperimentus: XWL. Analizavo duomenis: XWL HMY. Prisidėjo reagentai /Medžiagos /analizės įrankiai: HC YNW. Parašė knygą: XWL. Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.

• Palyginimas veiksmingumo kitu maršrutu administracijos chemoterapijos apie nerezekuojamu išplitusiu skrandžio cancer
• Mišrūnė adeno (neurolingvistinio) endokrininės karcinoma atsiranda nuo negimdinio skrandžio gleivinės viršutinio krūtinės esophagus