A kifejezés és klinikai jelentősége a miR-132 gyomorrákban patients

expressziója és klinikai jelentősége a miR-132 gyomorrákos betegek katalógusa Abstract katalógusa Háttér és cél katalógusa miR-132 játszik szerepet szabályozásában neuronális morfológia és sejtes ingerlékenységet. Keveset tudunk a hatását miR-132 rákos megbetegedésekben. A jelen vizsgálat célja, hogy értékelje a kifejezés a miR-132 és a klinikai jelentősége gyomorrákban. Katalógusa módszerek
rákos szövetek és megfelelő normál szövetekben 79 gyomorrákos betegeknél vizsgáltuk expressziójának miR-132 kvantitatív PCR és a szövetség között miR-132 expressziós szintek és klinikopatológiai faktorok és a prognózis elemeztük. katalógusa Eredmények
79 klinikai mintákban a gyomorrákos betegek, miR-132 expressziós szintje a rákos szövetekben szignifikánsan magasabb volt, mint az a megfelelő normális szövetekben (p
= 0,001). Magasabb szintű expresszióját miR-132 kapcsolatban voltak gyakoribbak nyirokcsomómetastasis (P katalógusa = 0,033), több nyirokrendszeri daganat az embólia (P = 0,007 katalógusa), és sokkal előrehaladottabb (P = 0,016 katalógusa). Emellett kifejezése miR-132 egy független prognosztikai tényezője teljes túlélést (p = 0,020 katalógusa). Katalógusa Következtetés
miR-132 szolgálhat egy hatékony prognosztikus faktor gyomorrákos betegek. Katalógusa Virtual diák
A virtuális tárgylemez (ek) e cikk megtalálható itt: http: //www. diagnosticpathol lógia. diagnomx. eu /vs /8168577241196050 katalógusa kulcsszavak katalógusa Gyomor- rák prognózisa Biológiai markerek Bevezetés katalógusa Bár az előfordulási gyomorrák jelentősen csökken több évtizede, még mindig a negyedik leggyakoribb rák a második leggyakoribb rákos halálok [1, 2]. Egy többszörös gének úgy tűnik, hogy hozzájárul a malignus biológiai viselkedésének gyomorrák [3, 4]. Nagyon fontos, hogy azonosítsa a prognosztikai faktorok maximalizálása érdekében a terápiás hatás, és minimalizálják a káros hatásokat a rákos betegek kezelésében.
MikroRNS egyik osztályát az endogén kis nem kódoló RNS-ek, hogy működnek gén szabályozó szabályozása által hírvivő RNS fordítás és lebomlás [5]. A mikroRNS játszanak döntő szerepet szabályozásában a normális funkcióit, mint például proliferáció, differenciálódás és apoptózis. Továbbá szabályozási zavarának miRNS hozzájárulnak a karcinogenezis és a rák progressziójának [6, 7]. Tagjaként miRNS család, miR-132 fontos szerepet játszik a gyulladásban, angiogenezis, és a neurális fejlődés [8-10]. Nemrégiben néhány tanulmány kimutatta, hogy a szabályozási zavarának miR-132 volt kapcsolatos, hogy a különböző emberi tumorok, mint például a nem kissejtes tüdőrák, oszteoszarkóma, emlőrák, hepatocelluláris karcinóma, prosztatarák, hasnyálmirigyrák [11-16]. Azonban nincsenek tudósít a véleménynyilvánítás és klinikai jelentősége a miR-132 gyomorrákban.
Ebben a vizsgálatban a miR-132 expresszió gyomorrákos betegek megvizsgálták, és a szövetség között miR-132 és klinikopatológiai paraméterek elemezték . Továbbá, mi értékeltük a kifejezés néhány résztvevő fehérjék a sejtciklus szabályozása (P21, p53), szöveti proliferáció és differenciálódás (c-myc). p21 és p53 fehérjék azok a termékek, a tumor-szuppresszor gének, amelyek aktiválják modulálása sejtproliferáció keresztül az irányítást a G1 leállást ellenőrzőpont a sejtciklus [17, 18]. c-myc fehérje egy olyan típusú transzkripciós faktor. katalógusa Betegek és módszerek
emberi gyomorrák és a megfelelő normális szövetekre nyert 79 átesett betegek gastrectomián Tanszékén gyomorrák és lágyrész szarkóma, Fudan Egyetem Shanghai Rák Center, között 2007. január 2009. december részleges gastrectomia végeztünk 36 betegnél, és a teljes gastrectomia végeztünk a többi 43 beteg. Legalább 4 cm reszekciós szél bruttó tumort garantált minden beteg esetében. Összesen 71 beteg kapott adjuváns kemoterápiát. Reszekció után, a mintákat azonnal lefagyasztottuk folyékony nitrogénben, és ezután tároljuk -80 ° hűtőszekrényben. Inclusion kritériumok közül a jelen vizsgálatban adenokarcinóma és teljes patológiai adatok; A kizárási kritériumok voltak neoadjuváns kezelés, peritoneális terjesztése, illetve távoli áttét. Az adatokat letölteni el működési és patológiai jelentéseket, és nyomon követése adatokat kaptunk telefonon ambuláns és a klinikai adatbázisban. Az írásos beleegyezését adta volna nyert összes beteg, és ezt jóváhagyta a vizsgálatot etikai bizottsága Shanghai Cancer Center Fudan Egyetem. Katalógusa RNS extrakció és kvantitatív valós idejű PCR
A teljes RNS szöveti kivontuk Trizol reagens (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) a gyártó utasításai szerint. Kvantitatív valós idejű PCR (QRT-PCR) vizsgálatokat végeztünk, hogy észleli a endogén expresszióját miR-132 szerint az Applied Biosystems módszerrel. Röviden, a cDNS-t reverz transzkripcióval teljes RNS mintákból egy miRNS-specifikus szár-hurok primert a Taqman microRNS Assay és reagensek a TaqMan® mikro-RNS reverz transzkripciós készlet (ABI, Forest City, CA, USA). Ezután PCR termékeket amplifikált cDNS mintákat a TaqMan microRNS Assay együtt TaqMan® Universal PCR Master Mix és az összeget a PCR-termék nyomon követtük az Applied Biosystems 7900 Sequence Detection System. U6 kis nukleáris RNS-t használjuk belső kontrollként. A relatív mennyisége miR-132 alkalmazásával számoltuk 2 (-Delta DeltaC (t)) módszer [19].
Immunhisztokémiai
p21, p53, és a c-myc detektáltuk immunhisztokémiai módszerrel. Az elsődleges ellenanyagok és egér monoklonális antitesteket vásárolt Dako (Hamburg. Németország). Immunhisztokémiai festéssel végeztük a fokozására jelzett polimer rendszer (elps) módszerrel. Egy éjszakán át 4 ° C-anti-p21, p53, és c-Myc ellenanyag, metszeteket szerint kezelt szabvány immunperoxidáz módszerekkel streptavidin biotin peroxidise komplex készlet (LSAB + Kit /HRP; Dako). A peroxidise reakcióelegyet ezután fejlesztették diaminobenzidin (Dako). Negatív kontroll metszeteket végezni ugyanazt az eljárást, kivéve, hogy az első ellenanyag váltotta foszfát-puffer sóoldattal (PBS) [20].
Immunhisztokémiai pontozási
minden szeleteket értékeltük Két patológus ismerete nélkül klinikai kimenetelt. A százalékos immunreaktív sejtek és festődés intenzitását értékeltük az egyes mintákban. A százalékos immunreaktív sejtek osztályozzák skálán 0-4: nincs festés pontozzák, mint 0, 1-10% festett sejtek szerzett mint 1, 11-50% a 2., 51-80%, mint 3 és 81- 100% 4. A festési intenzitást osztályoztuk 0-3: 0 definiáljuk negatív, 1 mint gyenge, a 2. moderált, és 3 erős, ill. A nyers adatokat alakítunk immunhisztokémiai pontszámot (IHS) szorzataként mennyiségének és intenzitásának pontszámok. A végső elemzés, az esetek volt a pontszám kevesebb, mint 1 tekintették negatív, és ≥ 1 volt tekinthető pozitív [20].
Statisztikai analízis
A betegek jellemzői és klinikopatológiai jellemzők alkalmazásával elemeztük a két -farokkal Student-féle t-próba katalógusa folyamatos változó és χ 2 teszt kategorikus változó. A teljes túlélési görbéket a Kaplan-Meier módszerrel, és a különbségek túlélési görbéket vizsgáltuk hosszú-rank teszt. A független prognosztikai tényezőket vizsgálták a többváltozós túlélési analízissel Cox-féle arányos kockázati modellt. Az elfogadott szignifikanciaszint P katalógusa < 0,05. A statisztikai elemzéseket és grafikák az SPSS 13.0 statisztikai csomaggal (SPSS Inc., Chicago, IL). Katalógusa Eredmények katalógusa Klinikopatológiai jellemzők
Voltak 62 hím és 17 nőstény (3,6: 1), az átlagos életkora 58 év. Volt 7 (8,9%) a korai gyomorrák és 72 (91,1%) a fejlett gyomorrák. Szerint a szövettani típus, jól differenciált tumorok észleltek 3 (3,8%) beteg, mérsékelten differenciált 11 (13,9%) beteg, és rosszul differenciált tumorok fennmaradó 65 (82,3%) betegnél. A 79 beteg, 25 (31,6%) volt daganat található, a felső harmada, 15 (19,0%) volt a daganatok középső harmadában, 36 (45,6%) volt a daganatok az alsó harmadában a gyomor és a 3 (3.8%) volt tumorok elfoglalt kétharmada vagy több gyomor. Nyirokcsomó metasztázis volt megfigyelhető 57 beteg, a metasztázis arány 72,2% volt. A terjesztési patológiai stádium a következő volt: 10 (12,6%) beteg tartozott I. stádiumú, 24 (30,4%) II-es és 45 (57%) III.
A kifejezés és korreláció a miR-132, p21, p53 és c-myc
miR-132 szint 79 rákos (T) és a megfelelő normális szövetekben (N) vizsgáltuk qRT-PCR. A legtöbb tumor szövetekben (57/79, 72%) mutatott emelkedett miR-132, mint a megfelelő normál szövetek, a medián növekedése 2,3-szeres. miR-132 szinteket rákos szövetekben (átlag ± SD, 0,35 ± 0,58) szignifikánsan magasabb, mint a megfelelő nem-rákos szövetekben (átlag ± SD, 0,15 ± 0,35, p
< 0,05). A kifejezések a p21, p53, és a c-myc vizsgáltunk immunhisztokémiai festéssel. p21 expresszió pozitív volt 64,6% -a az összes gyomorrák szöveteket. P21 festődés volt megfigyelhető a nucleus karcinóma sejtekben. p53 expresszió pozitív volt 74,7% -a az összes gyomorrák szöveteket. p53 festődést figyeltünk meg a nucleus karcinóma sejtekben. c-myc expresszió pozitív volt 44,3% -a az összes gyomorrák szöveteket. c-myc volt festődés citoplazmájában karcinóma sejtekben. miR-132 expressziós társult p53 és c-myc. Nem volt összefüggés a p21. Emellett p53expression társult c-myc (1. táblázat) .table 1 Pozitív eredmények közötti összefüggések biológiai markerek
biológiai markerek
korrelációs együttható (r) Matton P value

miR-132
P53
0.274
0.015
miR-132
c-myc
0.228
0.044
P53
c-myc
0.235
0.038
Klinikai jelentősége miR-132 gyomorrákban katalógusa 79 gyomorrákos betegek két csoportra osztottuk, beleértve a miR-21 magas expressziós csoport (T /N > 0,5, n = 33) és alacsony expressziót (T /N < 0,5, n = 46) szerint a medián T /N arányát a miR-132 expresszió. A korreláció miR-132 expresszió és patológiai paraméterek elemeztük. Az eredmények azt mutatták, hogy a betegek nagy miR-132 expresszió volt gyakoribb nyirokcsomó áttét (P katalógusa = 0,033), több nyirokrendszeri daganat az embólia (P = 0,007 katalógusa), és sokkal előrehaladottabb (P = 0,016 katalógusa ). Azonban nem volt szignifikáns különbség a nemek, az életkor, a szövettani típus, lokalizációja, a daganat mérete, idegrendszeri invázió, és a T stádium (2. táblázat). A teljes túlélés, a betegek a miR-132 magas expressziót szignifikánsan rosszabb a prognózisa, mint azok a miR-132 alacsony expresszió (p
= 0,000) (1. ábra). Egyváltozós elemzés teljes túlélés azt mutatta, hogy a relatív expresszióját miR-132, ideges invázió, nyirok daganat embóliára patológiai stádiuma prognosztikai előrejelző. A többváltozós túlélési analízis, beleértve az összes lényeges prognosztikai faktorok említett egyváltozós elemzés végeztünk, hogy meghatározzák a független prognosztikai faktorok gyomorrák. A többváltozós elemzés azt mutatta, hogy a miR-132 expressziós szintjét és a patológiai stádiuma független prognosztikai faktorok (3. táblázat) .table 2 miR-132 expresszió és a klinikopatológiai faktorok katalógusa változók
Nagy kifejezés n = 33 katalógusa
Alacsony kifejezés n = 46 Matton P
nemek katalógusa 0,618 katalógusa Férfi katalógusa 25 katalógusa 37 fiatal női katalógusa 8
9 katalógusa Kor
0.556 katalógusa < 60 katalógusa 18 katalógusa 22 katalógusa ≥60 katalógusa 15 katalógusa 24 katalógusa szövettani osztályozás katalógusa 0.412 katalógusa Gyengén -differentiated katalógusa 28 katalógusa 36 katalógusa Közepesen differenciált katalógusa 5 katalógusa 7 katalógusa jól differenciált katalógusa 0 katalógusa 3 katalógusa tumor helyét katalógusa 0,467 katalógusa felső harmadik katalógusa 10 katalógusa 15 katalógusa Közel harmadik katalógusa 8 katalógusa 7 katalógusa Alsó harmadik katalógusa 15 katalógusa 21 katalógusa kétharmada vagy több katalógusa 0
3 katalógusa daganat mérete (cm) hotelben 0,862 katalógusa < 5 katalógusa 18 katalógusa 26 katalógusa ≥5 katalógusa 15 katalógusa 20 katalógusa Idegrendszeri invázió
0,096
Igen katalógusa 22 katalógusa 22 katalógusa No katalógusa 11 katalógusa 24 katalógusa nyirokrendszeri daganat emboli katalógusa 0.005 katalógusa Igen
26 katalógusa 22 katalógusa Nem
7 katalógusa 24 katalógusa T fázisban katalógusa 0.070 katalógusa T1, T2 katalógusa 6 katalógusa 17 katalógusa T3, T4 katalógusa 27 katalógusa 29 katalógusa nyirokcsomó metasztázis katalógusa 0,033 katalógusa Igen
28 katalógusa 29 katalógusa No katalógusa 5 katalógusa 17 katalógusa patológiai stádium katalógusa 0.016 katalógusa I
2 | 8
II
6 katalógusa 18 katalógusa III
25 katalógusa 20 katalógusa 1. ábra a túlélési szerint a kifejezés a miR-132. Szignifikáns különbség a miR-132 magas expresszióját és miR-132 alacsony expressziós (P katalógusa = 0,000). Katalógusa 3. táblázat többváltozós elemzése betegek Cox modell katalógusa Változó Matton χ2
katalógusa P katalógusa vale Matton RR Matton 95% CI Matton miR-132 expressziós katalógusa 5,447 katalógusa 0.020 katalógusa 2,414 katalógusa 1,152-5,059 katalógusa Idegrendszeri invázió
1,918 katalógusa 0.166 katalógusa 1.890 katalógusa 0,768-4,655 katalógusa nyirokrendszeri daganat emboli katalógusa 0.173 katalógusa 0,677 katalógusa 0.838 katalógusa 0,366-1,923
patológiai stádium katalógusa 8,742 katalógusa 0.003 katalógusa 4,356 katalógusa 1,642-11,555 katalógusa Megbeszélés katalógusa azonosítása prognosztikai faktorok gyomorrák elengedhetetlen volt előrejelzésére betegek túlélése és meghatározó az optimális terápiás stratégiák . A mélysége invázió és a nyirokcsomó-áttétek voltak a legfontosabb prognosztikai faktorok gyomorrák. Ennek eredményeként a változékonysága prognózis belül azonos patológiai szakaszában gyomorrák, ott volt egy csomó kutatás specifikus biológiai markerek azonosítása betegek prognózisa [21-28]. A biológiai markerek, mint például mikro-RNS, a c-Met, L1CAM, endoteliális lipáz fehérje, változó kópiaszámát mitokondriális DNS (mtDNS), TIMP3, hK6, és Ezrin vizsgálták kiterjedten. Mint új biomarker, a potenciális miRNS előrejelzésében prognózis egyre vizsgálták. miR-132 egy erősen konzervált miRNS átvezeti egy gének közötti régió humán 17. kromoszóma által a transzkripciós faktor cAMP válasz elem kötő fehérje [29]. A legtöbb jelentés mérkőzés miR-132 szabályozása és biológiai funkcióit alakult ki a vizsgálatok során az idegi kontextusban. Továbbá, a miR-132 is leírták számos más területeken, mint például a gyulladás, a sejt átalakulás és tumorgenesisben. miR-132-ben kimutatták, hogy up-szabályozott vagy alulszabályozott különböző humán rákos megbetegedések [16, 30, 31]. Egyes tanulmányok kimutatták, hogy a miR-132 elősegítheti sejtburjánzást [31]. Azonban még mindig nem számoltak be a miR-132 gyomorrákban.
Ebben a tanulmányban azt vizsgáltuk, miR-132 expresszió gyomorrák és meghatározni, ha képesek megjósolni a betegség lefolyása. Azt találtuk, hogy a miR-132 expresszió nagyobb volt rákos szövetekben képest megfelelő normál szövetekben. A pontos oka a miR-132 magas expresszióját gyomorrákban nem ismert. Park JK et al. számolt [31], hogy a B2AR agonista terbutalin növeli miR-132 expresszió. miR-132-t transzkripció által aktivált CREB a neuronokban [32]. B2AR antagonisták gátolták aktiválása CREB [33]. Ezért lehetséges, hogy a szimuláció B2AR növeli miR-132 expressziós következő aktiválását CREB.
Az eredmények azt mutatták, hogy a magas miR-132 expresszió gyomorrák szignifikáns korrelációt mutatott agresszív klinikopatológiai jellemzőkkel rendelkezik, mint a gyakoribb nyirokcsomó-metasztázis, több nyirokrendszeri daganat embóliára előrébb tart. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy túlszabályzását miR-132 fontos szerepet játszott a gyomorrák progresszió. Érdekes módon azt találtuk, hogy a miR-132 expressziós társult p53 és c-myc. Egyes korábbi vizsgálatok azt mutatták, hogy néhány mikroRNS közvetíthetik, és szabályozzák a tumorszuppressziónak által kifejtett p53 vagy a c-myc-cel [34, 35]. Jiang L et al. [34] megállapította, hogy van-miR-125a-3p idézhet apoptózis útján p53. Zhang N, et al. [35] megállapította, hogy a miR-150 elősegítheti a proliferációs tüdőrákos sejtek célzott p53. Wang B et al. [36] megállapította, hogy a kettős negatív visszacsatolási hurok között miR-122 és c-myc májsejt rák. Li X. et al. [37] megállapította, hogy a c-Myc elősegítette a kifejezés az érett miR-23a, miR24-2, és miR27a és ezt követően támogatni emlőkarcinóma-migráció és invázió. Azonban a pontos összefüggést a miR-132 és a p53, c-myc nem egyértelmű, és még nem tisztázott a későbbi vizsgálatok. Megvizsgáltuk a korreláció a miR-132 expresszió gyomorrák prognózisa betegek, megállapította, hogy a betegek nagy miR-132 expresszió volt rosszabb teljes túlélés, hogy az alacsony miR-132 expresszió. Ennél is fontosabb, többváltozós elemzés kimutatta, hogy a magas miR-132 expressziója független prognosztikai tényező. Ez volt a vita, hogy a miR-132 játszott azonos prognosztikai értéke a különböző daganatok. Parker et al. számolt [38], hogy a magas expressziója miR-132 volt rossz prognózissal társul primaer glioblastoma multiforme. Azonban Yang és mtsai. [12] számolt be, hogy osteosarcoma betegek alacsony miR-132 expresszió volt rosszabb az általános és a betegségmentes túlélés. Lehetséges volt, hogy a miR-132 játszott különböző funkciók különböző daganatok. Wang et al. [39] megállapította, hogy a túlzott mértékű expressziója a miR-132 elnyomott in vitro sejt-proliferáció és az in vivo tumor növekedését. Li és mtsai. [13] azt mutatta, hogy overexpressziója miR-132 gátolhatják a proliferációt a mellrák sejt. Fordítva, Park és mtsai. [31] beszámolt arról, hogy túlzott expressziója a miR-132 fokozott a hasnyálmirigy-rák sejtek proliferációját.
Egybevetve, a mi tanulmány azt mutatta, hogy a miR-132-ben felülszabályozott gyomorrák, és lehet egy független molekuláris biomarker előrejelzésére a prognózis a gyomor rák. Eközben eredményeként kis minta kutatás, egy nagy ügy kutatásokra van szükség, hogy erősítse meg a prognosztikus miR-132 gyomorrákban. Katalógusa nyilatkozatok katalógusa Szerzők eredeti beküldötteknek képeket
alábbiakban a linkeket a szerzők eredeti beküldötteknek képeket. 13000_2014_947_MOESM1_ESM.tif A szerzők eredeti fájlt az 1. ábra szerinti versengő érdekek
A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa szerzôk hozzájárulása katalógusa terveztek és a kísérletek: XWL HMY HC YNW. Elvégzett kísérletek: XWL. Elemezte az adatokat: XWL HMY. Hozzájárult reagensek /anyagok /elemző eszközök: HC YNW. Írta a papírra: XWL. Minden szerző elolvasta és jóváhagyta a végleges kéziratot. Katalógusa

• Összehasonlítása hatékonyságát különböző beadási kemoterápia eltávolítható, előrehaladott gyomorrák
• Vegyes adeno (neuro) endokrin carcinoma származó ectopiás gyomornyálkahártya a felső háti nyelőcső