Neier Étude Aktivitéit an ultrastructural Ännerungen am Linnen gastric Kriibs Zell vun nordëstleche Thai iessen weisen Planz dovu VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background entschlof VerfÜgung Phytochemical Produiten enger kritescher Roll an der Drogen- Entdeckung Prozess hunn. Dat versprécht Méiglechkeet, necessitates awer, déi brauchen virun benotzen hir wëssenschaftlech Kontrollen ze confirméieren. Dofir, sol- dëser Etude (1) vun der neier Étude Aktivitéit ze diskutéieren, (2) cytotoxicity Potential, an (3) den Effekt op ultrastructural Verfall vun gastric Kriibs Zell Linnen duerch aussetzt ufale vun dräi lokal nordëstleche Thai iessen Planzen. VerfÜgung Method VerfÜgung Planzen, Syzygium gratum, Justicia gangetica VerfÜgung an Limnocharis flava VerfÜgung mat ethyl acetate ofgebaut goufen, an all Brutto erauslafe fir hir total phenolics Inhalt vun Folin-Ciocalteu Method analyséiert. Hir neier Étude Aktivitéit war mat der ABTS System évaluéieren. D'dovu waren duerno fir cytotoxicity op zwee gastric Kriibs Zell Linnen Kato-III an NUGC-4, an am Verglach mat Hs27 Här iwert mech selwer als eng Kontroll mat der MTT assay assayed. D'Zell Nuetsvolen (%), IC
50 Wäerter, wéi och de ultrastructural hire Restaurant goufen der Behandlung mat eng Manéier Analyse vun Varianz (ANOVA) bewäert. VerfÜgung Resultater zu der total phenolic Wäerter vun der ethyl acetate dovu respektiv sech och mat der neier Étude no Muecht, mat Quecksëlwer Produit vun S. gratum soll VerfÜgung den héchsten Niveau vun neier Étude Aktivitéit ginn (engem 10-fantastesch grouss Äntwert) iwwer J. gangetica VerfÜgung an flava VerfÜgung L.. Belaaschtung vun S. gratum VerfÜgung a J. gangetica VerfÜgung dovu zu normal Zell Linnen (Hs27) schéinen marginalen cytotoxicity Effekter. Allerdéngs, duerch eng Dosis-ofhängeg assay S. gratum VerfÜgung a J. gangetica VerfÜgung dovu produzéiert cytotoxicological Auswierkunge vun esou just iwwer 75 Prozent Ballbesëtz vun Kato-III an NUGC-4 Zell Linnen. Ausserdeem war apoptotic charakteristesche ënner Tem an béiden Kriibs Zell Linnen mat deenen zwee dovu dës hierkommen Charakteristiken vun autophagy zu Zell Reien Post aussetzt dovu vum L. flava VerfÜgung fonnt gouf. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Vun dësen dräi Planzen, S. gratum VerfÜgung no der héchster Inhalter vun phenolic awer an neier Étude Muecht. wéi geléist ze enthalen Massa (s) mat cytotoxicity kënschtlech VerfÜgung op Kriibs Zellen, mä net op normal Zell Linnen an Otemschwieregkeeten Kultur an ultrastructural Analyse All vun hinne fonnt. Dëst ass den éischte Rapport vum Effet op bewosst Aménagement wéi apoptosis vun enger ethyl acetate Extrait vum S. gratum VerfÜgung a J. gangetica ze weisen. VerfÜgung Weider Studie elo op eenzelne isolates an hir Funktioun do sinn, op S. prioritizing gratum VerfÜgung a J. gangetica VerfÜgung fir d'Entwécklung vun Roman therapeutics a Männer géint Kriibs. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung Gastric Kriibs Ultrastructure Zell cytotoxicity Tem Background VerfÜgung Gastric Kriibs ass déi véiert stäerkste dacks diagnostizéiert Kriibs an der zweet Équipe Virwaat Ursaach vum Kriibs Zesummenhang Doud an d'Welt [1]. Et gouf ugeholl, datt et am Joer 2008 opgeholl ronn 1 Millioun nei gastric Kriibs Fäll goufen awer vun deenen, déi Majoritéit (713,900) huet an den Entwécklungslänner, mat den héchste incidences fir gastric Kriibs fonnt an Osteuropa an Asien, an Ost- a Mëtteleuropa ginn, an Südamerika [1]. Trotz der Flotte button Intensivéierung vun der Krankheet, seet de Beweis, datt allgemeng gastric Kriibs Tauxe der Trend ass bucking, mat enger Ofsenkung Rapporte vun gastric Kriibs am meeschten Deeler vun der westlecher Welt fonnt [2]. VerfÜgung Leider stäerkste gastric Kriibs Patienten oft sinn um Diplôme Etapp festgestallte wou ass eng Kur net méiglech a Behandlung ass Palliativmedezin mat der beduecht vun der Qualitéit an Quantitéit vum Liewen verbesseren. Och wann, do Behandlung Richtlinnen fir gastric Kriibs sinn, déi fënnef-Joer Iwwerliewe Taux ass manner wéi 50% [3, 4]; engem Saz, datt zu entweder oncologists oder Kriibs erëmfënnt selbstverständlech net erfreelech ass. Zousätzlech, Säit Auswierkunge vun aktuell Traitementer i.e. Agrëff, Chimiotherapie an Stralung sinn net zefriddestellend. Also, viséieren Therapien waren Säit Effekter geloss an d'Medeziner Resultater vun de Patienten ze verbesseren. Dofir, Fuerscher an dat neit Joerdausend sidd ofzebezuelen vill méi Opmierksamkeet op d'Entwécklung vun net nëmmen nei therapeutesch Richtlinnen, an fréi Préventioun Strategien fir gastric Kriibs [5, 6], mee och Roman op Opklärung a speziell therapeutesch Agenten och viséieren.
an de leschten zwee Joerzéngten, hunn phytochemical Produiten eng dominant Roll an der Entdeckung vun neien Drogen huet Kriibs [7] ze viséieren, mat iwwer 60% vun den aktuelle Anti-Kriibs Agenten benotzt ginn aus natierleche Quelle ofgeleet [8]. Beispiller vu weltwäit klinesch nëtzlech antitumor Agenten ofgeleet vun wëll Planzen och ëmgedréint, vinblastine, vincristine, camptothecin Projet, topotecan (eng Weess ausgerëtscht), Mier-buckthorn, lingzhi, irinotecan, an etoposide, déi aus epipodophyllotoxin ofgeleet ass [9, 10]. Anerer sinn aus Uebst a Geméis ofgeleet; net limitéiert op curcumin (turmeric), genistein (soybean), catechins (gréng Téi) [7], mee och Kraider wëll vinca Alkaloïden, podophyllotoxin, berberine, Zitrounen ausgerëtscht Uelegbiller, flavonoid an camptothecin gehéiert; anere Grupp vu villverspriechend anticancer Agenten [11]. Obwuel dës Anti-Kriibs Agenten hu fir geziilt Mechanismus-baséiert Weeër, hir effikass Manipulatioun vun der extrinsic an d'Ausriichtung apoptosis Weeër sinn nach lant en [12-14] agestallt ginn. Paclitaxel isoléieren aus der Schuel vun de Pazifik Yew, Taxus brevifolia VerfÜgung ass ee phytochemical dat verspriechen weist. Et ass engem Alkohol- vum Kondom guttgeheescht unzegesin AIDS-Zesummenhang Kaposi sarcoma benotzt gin, Broscht Kriibs, Net-kleng Zell haett Kriibs a spillt Kriibs. Seng Primär- bewosst Effekt ass anormal Stabiliséierung vun de dynamesch microtubule gekräizt ze verstreeën, fir den Echec vun Zell Divisioun Virwaat geplatzt apoptosis [15-17]. Allerdéngs ass paclitaxel och als Alternativ Behandlung fir aner Zorte vu Kriibs dorënner gastric Kriibs studéiert ginn. Et ass am Moment an de Medeziner Prozesser Phase III [18, 19]. Egal ob se den Accord ginn oder net, de breede Erréchen Ënnerstëtzung an Weiderféieren vun Studie vun Planz dovu mat Donnéeën an gastric Kriibs Behandlung sinn däitlech vun der weider Roll, datt natierlech Produiten an d'Drogen- Entdeckung Prozess Leeschtung. VerfÜgung Wann eng epidemiology que Etude vun nei gastric Kriibs Fäll vun Thailand diagnostizéiert, hu vill méi niddreg incidences am nordëstleche Regioun [20] observéiert ginn. Obwuel, sinn d'prevalence vun Helicobacter pylori VerfÜgung Aids, net anescht ganze nërdlechen Regioun vun Thailand, net geographesch Faktor (zB Plateau, wëller Gamme oder wouer terrain) war verschidde entweder [21]. Dofir, et muss eppes anescht Mëtt fir d'Bevëlkerung an den nordëstleche Regioun ginn, datt de globale incidences vun gastric Kriibs verklengert. Nodeems all mee Genetik Indikatiounen, an Ëmwelt Faktoren, se ugeholl gouf, datt iessen weisen Planzen Bierger déi normalerweis an dëser Regioun verbrannt sinn, kann d'Äntwert op dës Ënnerscheeder schätzen. Dësen neien Daten, an dat versprécht Féierung Erausfuerderungen daitlech eis d'mysteriéis Phänomen ze entdecken, dat ass, ob de phytochemical awer am nordëstleche Thai iessen weisen Planzen hunn chemopreventive oder cytotoxic Potential gastric Kriibs ze kämpfen, oder aner Eegeschafte. Aus deem Grond huet dës Studien also land de cytotoxicity Potential vun dëse lokal iessen Planzen ze diskutéieren. Vun allem Interessi, Planzen S. gratum VerfÜgung, J. gangetica VerfÜgung an L. flava VerfÜgung, sech op epidemiological Donnéeën ausgewielt baséiert dass dat si déi regelméisseg iessen weisen Geméis am nordëstleche Regioun sinn mobiliséiert.
Mir ka datt dës Planzen am verstoppte Eegeschafte handelt hätt, datt dat Kriibs ginn exploitéiert konnt bekämpft, an de Grëff ze studéieren gel hir Potential ze bewäerten. Mir bewäerten d'Brutto phenolic-baséiert dovu vun deene Planzen, a beweisen héich bewosst apoptotic an cytotoxic Effekter an zwou gemeinsam, an Komparativ gastric Kriibs Zell Linnen, Kato-III an NUGC-4. VerfÜgung Method VerfÜgung Plant Material
Dräi lokal iessen weisen Planzen; S. gratum VerfÜgung, J. gangetica VerfÜgung an L. flava VerfÜgung (Table 1) aus dräi verschidden lokal Mäert an Khon Kaen Provënz vun den nordëstleche Deel vun Thailand während Oktober bis 2008. Dezember kaaft huet sech Dës Planzen baséiert op ethnobotanical Informatiounen [22-26] an epidemiological Daten wéi uewe beschriwwen, ausgewielt. Richteg taxonomic Identifikatioun vun Aarten Planz fir dës Etude benotzt gouf duerch denken aus de Chiffer vun Botany an Pharmacology, Fakultéit vun Apdikt, Khon Kaen University, Thailand.Table 1 D'Nimm vun den dräi Planz dovu an anere Recherche referenzéiert, therapeutesch Notzung vun Thai traditionell iwwersi Medikament an dëser Etude VerfÜgung Art opgefouert [Bong Zuel]
Family (Gemeinsam Numm English /Thai)
gemellt grouss Atomer
therapeutesch Notzung vun Thai traditionell Medikament
zu Siweschléifer Deel
Refus.
Syzygium gratum VerfÜgung (Wight) SN Mitra VAR. Gratum VerfÜgung [Ch. Laongpol 6] en, c VerfÜgung Myrtaceae (Eugenia /Phak Mek, Samet chun) VerfÜgung Net nach haut eenzegaarteg an chemesch Struktur sech awer bewisen an antioxidants an d'Préventioun vun oxidative an nitrosative Stress VerfÜgung Prefabrizéierten dyspepsia staark ze ginn an indigestion VerfÜgung Leaves VerfÜgung 22,23 VerfÜgung Justicia gangetica VerfÜgung L. [TkLanguage-PSKKU-0066] b VerfÜgung Acanthaceae (Chinese mauve, exotësche Primrose /Akzeptéiert Numm: Asystasia gangetica VerfÜgung) VerfÜgung 5,11-epoxymegastigmane glucoside (asysgangoside), salidroside, benzyl β-d-glucopyranoside, (6S VerfÜgung, 9R VerfÜgung) -roseoside, ajugol, apigenin 7-O VerfÜgung -β-d- glucopyranoside, apigenin 7-O VerfÜgung -neohesperidoside, an apigenin 7-O VerfÜgung -β-d-glucopyranosyl (1 → 6) -β-d-glucopyranoside VerfÜgung Prefabrizéierten Mo. Péng, Mo. Eehaut, anti- Asthma VerfÜgung Leaves VerfÜgung 24,25 VerfÜgung Limnocharis flava VerfÜgung L. Buchenau [et geet. 173] c VerfÜgung Limnocharitaceae (giel velvetleaf, giel BURR Kapp /Talabhat reusi) VerfÜgung virweisen VerfÜgung Appetizer
26 VerfÜgung aVoucher uplanzen verschéckt um Forest Herbarium (BKF) Stammzellefuerschung, Departement vun national Park, Déieren an Plant Konservatioun, Ministère vun Natural Ressourcen, bthe Herbarium vun der Fakultéit vun Gitt mir eng Waassermeloun Sciences, Khon Kaen Universitéit an cthe Prënz vun Songkla University Herbarium (PSU), Departement vun Biologie, Fakultéit vun Science, Prënz vun Songkla University, Thailand am Ballon Schäffchen bei 50 ° C fir 7 Deeg. VerfÜgung Virbereedunge Planz dovu VerfÜgung Siweschléifer Deeler vun all eenzel Planz Villfalt (Table 1) mat steril destilléiert Waasser rinsed sech detritus a gedréchent ze läschen. Eemol gedréchent, goufen Planz Deeler dann Géigewier an kleng Stécker a Buedem zu enger Geldstrof Pudder engem Zement an pestle benotzt. All Buedem Pudder Planz Material war duerno mat der iwwerschësseg vun der ethyl acetate Léisungsmëttelbad (Fläch-Aldrich FRF-Ltd, Singapur) an eng Reduktioun Fläsch Beweegung. D'ethyl acetate Dampgemësch sech dann fir 72 h bei Raumtemperatur op engem Shaker incubator incubated. No dësem Prozess, huet den supernatants dann zu engem neie Container transferéiert, an d'Reduktioun Prozess mat ethyl acetate gouf dräi Mol widderholl, virun der supernatants vun dësen triplicate extractions kombinéiert huet. Dës goufen dann duerch whatman filter Pabeier Platz 1 Filter, an verdämpt vun engem Raemerich evaporator. Dës Prouf dovu waren dann am weideren Experimenter agestallt. VerfÜgung Entschlossenheet vun insgesamt phenolic Massa VerfÜgung Total phenolic awer an der Planz dovu vun Folin-Ciocalteu Method alles goufen als déi Sachindra beschriwwen [27]. Kuerz gefrot, 0,2 ml all Planz Extrait zu 50% DMSO (Santa Cruz Biotechnologie Galaxy, Bangkok, Thailand) opgeléist gouf oxidized mat 1.0 ml 10-fantastesch-verdënntem Folin-Ciocalteu reagent (Fläch-Aldrich FRF-Ltd, Singapur) an neutraliséiert mat 0,8 ml vu 6% Natrium kënne Léisung (Fläch-Aldrich FRF-Ltd, Singapur). No 1 h incubation, war d'absorbance vun der Léisung bei 764 nm an d'Resultater sech als milligram gallesche Seier gleichgestallt pro Gramm dréchen Gewiicht (mg sollen /g) vertrueden gemooss. D'assay war zu triplicate fir all Prouf Konzentratioun vun 3 getrennt assays. VerfÜgung Entschlossenheet vun neier Étude Aktivitéit gehaal VerfÜgung neier Étude Aktivitéit vun der Planz dovu alles war spectrophotometrically der ABTS System benotzt no der Method vun Re a Kollegen [28]. Kuerz, ABTS radikal, dass een (ABTS • +) Mëschung vun de Chemiker vu 7 mm ABTS (Fläch-Aldrich FRF-Ltd, Singapur) mat 140 mm KaliumiodidPëlle persulphate (Fläch-Aldrich FRF-Ltd, Singapur) generéiert gouf, incubated fir 16 h bei Raumtemperatur am donkel. Neier Étude Aktivitéit vun Schan 0,2 ml vun Planz alles war dovu mat 1,8 ml ABTS • + radikal, dass Mëschung. No incubating der Mëschung fir 6 min, war d'absorbance bei 734 nm opgeholl. ABTS • + radikal scavenging Fähegkeet (%) vun Planz dovu waren berechent baséiert op de folgende Equatioun: ABTS • + radikal scavenging Fähegkeet (%) = [(Abs.control-Abs.test Prouf) /Abs. Kontroll] x100. Wou Abs.control der absorbance vun Kontroll Reaktioun (ouni Planz Extrait) ass an Abs.test Prouf ass de absorbance an der Presenz vun enger Planz ofzebauen. D'Resultater goufen dann am Verglach zu der anti-scavenging Aktivitéit vun Trolox (Fläch-Aldrich FRF-Ltd, Singapur) an den Trolox gleichgestallt neier Étude no Kapazitéit pro Gramm dréchen Gewiicht (TEAC /g) vertrueden. D'assay war zu triplicate fir all Prouf Konzentratioun vun 3 getrennt assays gehaal. VerfÜgung Zell Kultur VerfÜgung Zwee Mënsch gastric carcinoma Zell Linnen Kato-III (ATCC Nr HTB-103) aus American Type Kultur Collection (ATCC, Rockville, MD, USA) an NUGC-4 (JCRB0834) vun der Gesondheet Science Research Resources Bank (Japan Gesondheet Sciences Foundation) goufen fir eng kënschtlech VerfÜgung cytotoxic assays benotzt. De Mënsch foreskin fibroblast Zell Linn Hs27 (ATCC No.1634) huet als eng Kontroll benotzt. Si waren cultured zu steril RPMI 1640 mat 10% (v /v) An et Bovine serum (Biochrom AG, Berlin) op 37 ° C Pleséier mat 5% CO 2 an eng incubator. Zellen sech am normale Otemschwieregkeeten Kultur Kréi an op déifgräifend 80% Niewebaach mat enger Léisung vun 0,25% trypsin-héich (Fläch-Aldrich FRF-Ltd, Singapur) all 3-4 Deeg bis benotzt goufen passaged ugebaut. VerfÜgung An kënschtlech
Plant dovu waren VerfÜgung cytotoxicity assay als éischt vun Mosmann beschriwwen [29] mat Ännerunge proposéiert vun DENIZOT an Lang [30] seng cytotoxic Aktivitéit géint Kato-III an NUGC-4 Zell Linnen via de MTT colorimetric assay évaluéieren. Cultured Zellen (1 × 10 4 Zellen) zu komplett Medien sech an all gutt vun engem flaache 96 gutt zappen transferéiert an dann op 37 ° C an enger humidified Loft Atmosphär mat 5% (v /v) CO 2 fir 24 h an Uerdnung befestegt gutt ze ënnen vun all den Zellen ze loossen. D'cultured Zellen sech dann mat der getest Brutto Extrait (triplicate Wells pro Zoustand) déi nieft vun 2 μL vun Serien dilutions vun all Extrait op eng Usammlung vun 1,25, 2,5, 5, 10 an 20 μg /ML behandelt. D'Zellen sech dann cultured wéi uewe fir aner 72 h virun der Zousätzlech vun 10 μL vun engem 5 mg /ML Léisung vun 3- (4, 5-dimethylthiazol-2-yl) -2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) ( Fläch-Aldrich FRF-Ltd, Singapur) an all gutt. D'incubation war fir aner 4 h weider virum Medien geläscht gouf. Eng Mëschung vun DMSO (150 μL) an glycine (25 μL) war fir all gutt kommen an deer Zell lysis an dissolving vun der formasan Kristaller ze garantéieren, ier d'absorbance bei 540 nm gemooss gouf. Dräi replications vun all Experimenter waren standing an de Prozentsaz vun MTT Konversioun zu sengem formazan kuckt virdrun fir all gutt (Prozent Zell Wuesstem) berechent war vun der sel bei 540 nm vun der Wells deelt mat der Kontroll baséiert op de folgende Equatioun: a mat Zell Wuesstem = [A540 Test - A540 null] × 100 /[A540 Kontroll - A540 null]. Wou A540 null = A540 vun Léisung no der Zell fir 24 h virun der Zousätzlech vun Planz dovu incubated war; A540 Test = A540 vun Léisung der Planz dovu Zousätzlech; an A540 Kontroll = A540 vun Léisung ouni Planz dovu Zousätzlech. Ausserdeem, fir Net-gëfteg assurance vun Planz dovu géint normal Zellen (fibroblast Zell Linn Hs27), eng duebel Portioun (2 Mol vun IC 50 Konzentratioune [10 μg /ml]) vun der dovu ware vun MTT Employé an évaluéieren assay. D'assay war zu triplicate fir all Prouf Konzentratioun vun 3 getrennt assays. VerfÜgung Lait Bäschten inhibitory Konzentratioun (IC50) VerfÜgung der kritt absorbance bei 540 nm gehaal huet benotzt de Prozentsaz vun Zell Iwwerliewe ze bestëmmen unzehuelen, datt 100% Iwwerliewe kritt huet wou mat Léisungsmëttelen nëmmen als Kontrollen behandelt, an datt keng Ennerscheeder an metabolic Aktivitéit gouf tëscht Zellen ënner ënnerscheedlecher Konditiounen Eos. Ënner dëse géieren, gouf no de Prozentsaz Iwwerliewe vun de behandelt Kriibs Zell Linnen an normal cultured Zellen berechent folgend Formule: Prozentsaz vun Iwwerliewe = (A540 behandelt Zellen /A540 Kontroll) × 100 D'mengen ± 1 Standard deviation (Fils) Zell Iwwerliewe (%) war jeeweilegen Planz Extrait Konzentratioun opgezeechent an déi bescht war fit Linn de geschate IC 50 Wäert vun der Konzentratioun ze leeden benotzt, datt 50% vun Zell Iwwerliewe bidden hätt. d'Konzentratioun VerfÜgung vun Planz dovu Féierung 50% inhibitory Konzentratioun (IC 50) waren aus dräi separat Experiment alles. Den IC 50 vun all Planz dovu goufen dunn als behandelt Konzentratioun op 0 an 3 Deeg géint Kato-III an NUGC-4 benotzt, wat fir apoptosis mat engem Transmissioun Elektronen microscopy (Tem) évaluéieren goufen. D'assay war zu triplicate fir all Prouf Konzentratioun vun 3 getrennt assays. VerfÜgung Sample Virbereedung fir Transmissioun vun Elektronen microscopy VerfÜgung Kato-III Zellen (1x10 6 Zellen) an NUGC-4 Zellen gehaal (1x10 6 Zellen mat all Planz Extrait behandelt) souwéi den negativen Kontroll (onbehandelt Kulturen), sech getrennt gesuergt. Kuerz, waren se mat D-Hank d'Léisung (Life Technologien, Bangkok, Thailand) zweemol, a geliwwert an Fall Krunn mat enger Plastikstut scraper, gefollegt vun centrifugation bei 2000 Ziichter fir 15 min, mat der supernatant geläscht rinsed. D'Manéier war zu enger Léisung mat 4% glutaraldehyde (Elektronen Microscopy Sciences, Bangkok, Thailand) an 2% paraformaldehyde (Elektronen Microscopy Sciences, Bangkok, Thailand) an 0,1 M phosphate gefiermt Salins (PBS), pH 7.4, bei 4 ° C fixen fir 1 h, dann mat 0,1 M PBS Katakombe der fixative ze läschen. Uplanzen waren an 1% Osmium tetroxide (Elektronen Microscopy Sciences, Bangkok, Thailand) an der selwechter Prellbock fir 30 min, a léif an enger graded Ethanol Serie fir 10 min all B. ‧. Si huet sech duerno mat zwou Ännerunge vum propylene It geraumt an zu mi Dampgemësch vun propylene It an Araldite 502 resin (Fläch-Aldrich FRF-Ltd, Singapur) Beweegung, um nennen vun 3: 1, 2: 1, 1: 2, an endlech an reng Araldite Ënnerbewosstsinn. Sektiounen vun 1 μm sech Géigewier engem MT-2 Porter-Blum ultramicrotome benotzt. D'Sektiounen sech dono op Koffer GRIDS Descher, Loft gedréchent an Rei mat 2% uranyl acetate (Elektronen Microscopy Sciences, Bangkok, Thailand) zu 7% Alkohol am däischteren Géigesaz, an dann mat der citrate (Elektronen Microscopy Sciences behandelt, Bangkok, Thailand ). Si waren op 80 kV ënnert engem Philips CM 100 Transmissioun Elektronen microscope iwwerpréift Fonctionnementskäschten. VerfÜgung Resultater VerfÜgung statistique Analyse sech ausdrécke wéi ± Fils vum gefaart aus 3 getrennt assays heescht. Verglach tëscht Donnéeën besot huet, andeems een esou eng Analyse vun Varianz (ANOVA) standing gefollegt vun Student d'T-Test. All Statistik analyséiert goufen benotzt SPSS19 gesuergt. Differenzen sech als statistesch relevant bei p &Si besteet ugeholl;. 0,05 VerfÜgung Resultater VerfÜgung Total phenolic Inhalter vu Planzen dovu VerfÜgung Dräi iessen weisen Planzen aus Nordosten Regioun vun Thailand (S. gratum VerfÜgung, J. gangetica VerfÜgung an L. flava VerfÜgung) huet ofgebaut an hirem Ganzen phenolic Inhalt mat de Resultater dës Distanz an Table alles 2. Dorënner Planz dovu, den héchsten Niveau vun insgesamt phenolic Inhalt vun S. gratum VerfÜgung bei 149,789 ± 0,381 mg nogewise gouf sollen /g. Et gouf 10 klappt bedeitend méi grouss an Inhalter wéi déi zu J. gangetica VerfÜgung an L. flava VerfÜgung (16.513 ± 0,130 an 14,334 ± 0,463 mg sollen /g, respektiv, p VerfÜgung &Si besteet; 0,05) identifizéiert huet. Table 2 Mëttler total phenolic Inhalt vun Planz dovu ausdrécke wéi sollen an Anti-scavenging Aktivitéit vun der Planz dovu representéiert wéi TEAC VerfÜgung Plant dovu Total plenolics
(mg sollen /g dréchen Gewiicht) VerfÜgung
Anti-scavenging Aktivitéit (mM TEAC /g dréchen Gewiicht)
S. gratum VerfÜgung (Wight) VerfÜgung 149,789 ± 0,381 VerfÜgung 2,823.521 ± 27,521 VerfÜgung J. gangetica L VerfÜgung. VerfÜgung 16,513 ± 0.130a VerfÜgung 313,141 ± 39.713a VerfÜgung L. flava (L.)
14,334 ± 0.463a VerfÜgung 900,845 ± 20.346a, b
Werter sech ausdrécke wéi heescht ± Fils vum gefaart aus 3 getrennt assays. ap VerfÜgung &Si besteet; 0,05 vs S. gratum VerfÜgung, BP VerfÜgung &Si besteet;. 0,05 vs J. gangetica
neier Étude Pouvoir vun Planz dovu VerfÜgung neier Étude Aktivitéite vun ethyl acetate vun S. ofgebaut gratum VerfÜgung, J. gangetica VerfÜgung an L. flava VerfÜgung zu Table gewise ginn 2. TEAC gleichgestallt Wäerter fir dës Planzen an vill verschidde waren fir aus S. eroffällt gratum VerfÜgung > L. flava VerfÜgung > J. gangetica VerfÜgung (2,823.521 ± 27,521, 900,845 ± 20,346, 313,141 ± 39,713, respektiv, p VerfÜgung &Si besteet; 0,05). Trotzdem, ëm klappt 3-9 héich neier Étude Aktivitéit vun S. gratum VerfÜgung fonnt huet am Verglach mat den aner zwou Aarte dovu publizéiert. Dës sech soll gutt mat total phenolic Inhalter. (Korrelatioun souguer gemaach vun R 2 = 0.935, Y = 16.64x + 324.5). VerfÜgung Zell Wuesstem inhibition VerfÜgung Gastric Kriibs Zell Linnen Kato-III an NUGC-4 an d'mënschlech fibroblast Zell Linn (Kontroll) sech (Serien dilution Konzentratioun [1,25, 2,5, 5, 10 an 20 μg /mL]) zu all Planz Extrait ausgesat, de Wuesstem inhibitory Aktivitéit Effekt ze bestëmmen aus all Planz entschlof. No 72 h, goufen liewensfäeg Zellen vun MTT assay gemooss. Kato-III an NUGC-4 ausgesat Zellen ze S. gratum VerfÜgung a J. gangetica VerfÜgung dovu e groussen Verloscht am liewensfäeg Zellen an enger Portioun-ofhängeg Manéier (Dorënner 1). Um 20 μg /ML all se iwwer 50% Zell Doud entschlof souwuel zu gastric Kriibs Zell Linnen. Allerdéngs, um 10 μg /ML der produzéiert dovu aus nëmmen S. gratum VerfÜgung a J. gangetica VerfÜgung bewisen bedeitendst mächtegst cytotoxicity (p VerfÜgung &Si besteet; 0,05) iwwer 70% Zell Doud vun Kato-III zu induce an NUGC-4 wou mat L. flava VerfÜgung (Dorënner 2) vergläichen. Ausserdeem huet dës zwou Planz dovu keen Effekt op normale Mënsch foreskin fibroblast Zell Linn (Dorënner 2). Am Géigesaz, flava VerfÜgung L. den Auswierkunge manner. Doraus zu ronn 25% vun Zell Doud, mat kee groussen Ënnerscheed tëscht gastric Kriibs Zellen an normal fibroblast Zell (Dorënner 2). Figur 1 Portioun Äntwert Studie vun der Planz dovu op zwee gastric Kriibs Zell Linnen: (A) Kato-III a (B) NUGC-4. D'Zellen sech mat verschiddenen Konzentratioune behandelt (0, 1,25, 2,5, 5, 10 an 20 μg /ml) vun S. gratum VerfÜgung, J. gangetica VerfÜgung an L. flava VerfÜgung fir 72 h. D'antiproliferative Effekt gouf duerch MTT assay gemooss. Resultater goufen als déi heescht ± Fils vum dräi onofhängeg Experimenter ausgedréckt. VerfÜgung 2 Cytotoxicity Test géint Kato-III, NUGC-4 Dorënner an t-27 nom vun S. gratum Quecksëlwer mat 10 μg /ML ethyl acetate incubated, J. gangetica an L. flava. D'antiproliferative Effekt gouf duerch MTT assay gemooss. Resultater goufen als déi heescht ± Fils vum dräi onofhängeg Experimenter ausgedréckt. D'Resultater zougedréckt souwuel S. gratum VerfÜgung a J. gangetica VerfÜgung staark gastric Kriibs Zell Wuesstem zu 70% inhibited an iwwerdeems net normal fibroblast Zellen t CSJ 27 (groussen Ënnerscheed [* p VerfÜgung &Si besteet; 0,05]). Dëst duerch den Effet vun L. flava VerfÜgung Géigesaz, deen e manner Quantitéit vun Zell Wuesstem bewisen, net nëmmen an gastric Kriibs Zellen, mä och op normal fibroblast Zellen esou gutt. VerfÜgung Den IC 50 (μg /ML ) Wäerter sinn am Dorënner 3. d'J. gangetica VerfÜgung Extrait zesummegefaasst huet den niddregsten IC 50 Werter vun 5.45 μg /mL an 5,86 μg /ml fir Kato-III an NUGC-4, respektiv. Zerfall vun der S. gratum VerfÜgung Extrait héich cytotoxicity fir de Kriibs Zell Linnen mat IC zougedréckt 50 Wäerter vun der 7,24 μg /ML - 11,96 μg /ML Rei hierkommen, déi héchsten IC 50 war aus L . flava VerfÜgung 17,20 μg /mL an 14,64 μg /ml fir Kato-III an NUGC-4 respektiv ofzebauen. Dat war vill verschidden (p VerfÜgung &Si besteet; 0,05) wéini déi aner zwee Planz dovu Verglach (Dorënner 3). Figur 3 Vergläichend cytotoxicity vun IC 50 vun S. gratum, J. gangetica an L. flava op Kato-III, NUGC-4 an Hs27 vun MTT assay. Resultater goufen als déi heescht ± Fils vum dräi onofhängeg Experimenter ausgedréckt (* p VerfÜgung &Si besteet; 0,05) an am Verglach zu Hs27-behandelt Zellen. J. gangetica VerfÜgung den niddregsten IC50 zougedréckt hierkommen, déi héchsten war vum L. flava VerfÜgung Grouss Differenzen (p &Si besteet; 0,05). Tëscht S. gratum VerfÜgung an L. flava VerfÜgung tëscht béide Kriibs Zell observéiert goufen Linnen. Ultrastructure hire Restaurant vun Kato-III an NUGC-4 Zell Linnen entschlof vum S. gratum, J. gangetica VerfÜgung an L. flava
fir ze bestëmmen, ob de Wuesstem inhibition vun Planz dovu VerfÜgung verbonne waren mat apoptosis, iwwerpréift mir weider de morphological Ännerunge vun Kato-III an NUGC-4 gastric Kriibs Zell Linnen ënner microscope Transmissioun Elektronen. D'Kontroll Zellen nuklear Strukturen wossten intakt (Dorënner 4A: Kato-III, E: NUGC-4), während déi mat deene vun der Planz dovu bewisen ultrastructural Ännerungen am puer Manéieren behandelt Zellen (Sauerdall 4B-4D: Kato-III, a 4 F-4H: NUGC-4, respektiv). Am Detail, behandelt d'Kato-III Zellen mat S. gratum VerfÜgung engem kondenséiert Keimzell mat chromatin Kondensatioun ugewisen, apoptotic Kierper Opstellung (Dorënner 4B), an ufänken käreg Protokoll. Iwwerdeems fir Kato-III Zellen J. gangetica VerfÜgung behandelt, dës ugewisen chromatin Kondensatioun, Membran gebonnen apoptotic Kierper a villen vesicles (Dorënner 4C). Well d'morphological Ännerungen am L. flava fonnt VerfÜgung Kato-III Zellen behandelt, ugewisen shrunken Keimzell mat chromatin Kondensatioun an villen heterogenous vesicles, dorënner extensiv Charakteristike vun intracellular vacuolization (Dorënner 4D). Figur 4 Elektronen micrographs d'Auswierkunge vun S. gratum, J. gangetica an L. flava op Kato-III (A-D) a NUGC-4 (E-H) 3 Deeg vergläichen Post Behandlung. Skala Bar 2 μm. A) onbehandelt Kato-III Zell weist ganz wéineg vesicles (V), eng zimmlech eenheetlech Form an chromatin uechter Keimzell (N Fragmenter ofgerënnt). B) S. gratum VerfÜgung Kato-III Zell behandelt weist kondenséiert chromatin zu helle (N), apoptotic Kierper Opstellung (arrowhead) a vill vesicles. D'Zell ass ufänken wéi käreg Brochstécker (*). C) Kato-III Zell mat J. gangetica VerfÜgung behandelt. Dëst Zell weist chromatin Kondensatioun ëm d'Peripherie vun der Keimzell, Membran gebonnen organelles (Pfeil) a villen vacuoles (V). D) Kato-III Zell der aussetzt L. flava VerfÜgung enger grousser Zuel vun autophagic vacuoles weist (V), an engem Land Keimzell (N) mat kondenséiert chromatin. E) onbehandelt NUGC-4 Zell weist kee Kondensatioun vun chromatin zu helle (N) an enger éischter eenheetlech ofgerënnt Form. F) NUGC-4 Zell behandelt mat S. gratum VerfÜgung weist chromatin Kondensatioun Keimzell, vill vesicles (v) an vill Membran gebonnen organelles (Pfeil). G) NUGC-4 Zell der aussetzt J. gangetica VerfÜgung weist eng helle kondenséiert chromatin, Membran gebonnen Organell (Pfeil) an vesicles (V). H) Morphological Ännerungen am L. flava observéiert VerfÜgung NUGC-4 Zell behandelt goufen mat chromatin Kondensatioun aus an den helle (N), a vill heterogenous vesicles vun Gréisst verännerlech (V). VerfÜgung S. gratum VerfÜgung behandelt NUGC-4 Zell Linnen Schatzkummer apoptosis mat compacting Keimzell a Produktioun vun Membran gebonnen apoptotic Kierper a villen vesicles (Dorënner 4F). Mä am Verglach, NUGC-4 Zellen mat J. gangetica VerfÜgung behandelt, Grondsteen vun apoptosis mat chromatin Kondensatioun an villen vesicles (Dorënner 4G) produzéiert. Iwwerdeems mat L. flava behandelt Zellen VerfÜgung mat villen heterogenous vesicles an blebbing Randerscheinung chromatin Kondensatioun Keimzell zougedréckt (Dorënner 4H). VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung Serendipitous Observatioune gewisen hunn, datt Planzen, kann traditionell Kraider a Téi fir potenziell harnessed ginn gewannen der Bekämpfung vun medezinesch Kriibs; eng weltwäit Gesondheetsproblem. Mä, et ass net bis dës phytochemicals kënschtlech VerfÜgung an VIVO VerfÜgung getest ginn, datt mir fir sécher weess kann, wéi wäit se am Geescht vun dëser Krankheet ënner Kontroll goen kann [31-34]. An Thailand gastric Kriibs ass eng Plo, awer d'ongewéinlech ënneschten gastric Kriibs incidences am nordëstleche Deel vun Thailand ass vun bedeitend interesséieren. D'Tatsaach, datt S. gratum VerfÜgung, J. gangetica VerfÜgung an L. flava VerfÜgung zu der Géigend Naturvölker sinn an déi lokal Populatioun engem groussen Deel vun der Iddi Nahrungszousaz Form, mer duerfir décidéiert ob dës ze ermëttelen weisen Planzen sinn potentiell Kandidaten fir de sécher an zouverlässeg Kontroll vun gastric Kriibs. Wann et vill Rapporten sinn hir anti-oxidant Aktivitéiten ze klären, déi dës Etude den éischte Beweis vun hirem mächtegst cytotoxic Effekter an apoptotic Aféierungs- baséiert op ultrastrutural charakteristesch op gastric Kriibs. Dës Planzen VerfÜgung sech éischtens mat ethyl acetate ofgebaut an dann analyséiert fir hir phenolic Inhalter Folin-Ciocalteu Method benotzt.