Eng méiglech Abannung vun Nrf2-mediated heme oxygenase-1-Regulatioun vun Schutzpatrounin Effet vun der Proton Pompel inhibitor pantoprazole géint indomethacin-entschlof gastric Schued zu rats

Eng méiglech Abannung vun Nrf2-mediated heme oxygenase-1-Regulatioun vun Schutzpatrounin Effet vun der Proton Pompel inhibitor pantoprazole géint indomethacin-entschlof gastric Schued an deër VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung Proton Pompel ass en integralen Membran FAQ déi ganzen ATP bindend Kassett (ABC) an vill Transport Prozesser an all liewegen Organismen Équipe ass, ënnert déi eng spezialiséiert Form vun pompelen, sou p VerfÜgung -type Proton Pompel genannt, existéiert an der parietal Zellen vun Moo. Heemlech Proton Pompel inhibitors (PPIs) sinn dacks nonsteroidal anti-demagogesch Drogen (NSAIDs) -induced gastric Schued ze verhënneren matzebréngen, déi Seier suppressive Aktiounen virausgesoot net ze erklären. VerfÜgung Method VerfÜgung Fir d'Auswierkunge vun pantoprazole zu Dokument , eent vun PPIs, op der NSAIDs-entschlof gastric Schued, kënschtlech VerfÜgung an VIVO VerfÜgung Studie gemaach goufen. Immunocytochemistry, Western blot Analyse, electrophoretic Mobilitéit Verréckelung assay an RT-Hinnen alleguer waren gehaal der Aféierungs- vun heme oxygenase-1 (HO-1) duerch Nrf2 Aktivéierung zu normal gastric mucosal RGM-1 Zellen oder zu VIVO VerfÜgung Mo. Stoffer ze zéien aus behandelt deër mat indomethacin an /oder pantoprazole. VerfÜgung Resultater VerfÜgung pantoprazole ageschalt Nrf2 duerch inactivation vun Keap1, no deem den Ausdrock vun HO-1 war an enger Portioun-ofhängeg Fassong RGM-1 Zellen vill fräi. Geklomm SINN-DNA war bindend Aktivitéit maximally mat 300 μM vun pantoprazole op 1 h observéiert. Den Ausdrock vun HO-1 vun pantoprazole entschlof vill mat der Luucht an eng kënschtlech VerfÜgung Rouer Opstellung verbonne war (P VerfÜgung &Si besteet; 0,05) an angiogenic Faktoren dorënner VEGF, bFGF, an HIF-1α. Indomethacin fräi Ofstand der Ausstralung vun TNF-α, IL-1ß, IL-8, NOX-1, ICAM-1 an VCAM hierkommen ofgeholl pantoprazole bedeitend der Ausstralung vun indomethacin-entschlof dës demagogesch mediators am Accord mat pantoprazole-entschlof HO-1 (P VerfÜgung &Si besteet; 0,05) wéi mat HO-1 inhibitor dokumentéiert. An VIVO VerfÜgung Modell vun gastric Schued indomethacin-entschlof konnt kënschtlech VerfÜgung -drawn Resultater confirméieren datt bemierkenswäert géint indomethacin-entschlof gastric Schued geschützt pantoprazole, an deem Zénk protoporphyrin (5 mg /kg, IP VerfÜgung) vill ofgeschaaft d'Schutzpatrounin Efficacitéit vun pantoprazole. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung Dës Resultater weisen, datt Nrf2-mediated HO-1 Aféierungs- vun PPIs e wesentleche Schutzpatrounin Effekt géint NSAIDs-entschlof gastric Schued eraus Seier suppressive Aktiounen leeschten. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung Heme oxygenase-1 Proton Pompel inhibitor NSAIDs-entschlof gastropathy Nrf2 Background VerfÜgung NSAIDs grousse Bänn meeschtens op den folgenden zwee Virdeeler baséiert Rezept hunn, ass eng eng Hausse vun iwwer Patienten dowéinst NSAIDs Rezept degenerative änneren-entschlof Péng ze entlaaschten an den aneren ass eng zousätzlech Prozess fir entweder d'Préventioun vun Colon polyps oder d'Flucht aus ischemic Ausdauer Krankheeten [1, 2]. Allerdéngs ass de massive Gebrauch vun NSAIDs limitéiert vun stéirend ongewollt Effekter wéi d'gastric Erosioun /oppent, komplizéiert aus ulcers Heck a méi grave komplizéiert um kleng Daarm an Colon opkommen. Zënter der pharmacological Aktioun vun NSAIDs duerch d'inhibition vun prostaglandin (PG) Synthes via d'Ennerdréckung vun cyclooxygenases (COX) ass [3], indiscernible Diminutioun vun gastroprotective prostaglandin E 2 (PGE 2) ass fir dës gastrointestinal responsabel (gi) ongewollt Effekter. Wann der Erfindung vun selektiv COX-2 inhibitor, coxib, gi Sécherheet ze garantéieren huet wéi d'Léisung Strategie ugeholl gouf, dës Léisung brauch och ze verbesseren. Obwuel NSAIDs als mächtegst anti-oppent Drogen agesat ginn, déi zousätzlech sënnlech Mechanisme vun NSAID toxicity [4, 5] An eis méi mächtegst a sécher Agenten ze entwéckelen. Am Moment VerfÜgung, déi bescht presentéiert NSAIDs-Zesummenhang gi Präventioun toxicity ass entweder d'Formatioun vun NSAIDs an Proton Pompel inhibitors (PPIs) oder de Choix vun coxibs [6, 7]. Zënter der verkënnegt Taux vun gi ulcers während permanente Gebrauch vun NSAIDs war grouss am PPIs Grupp wéi histamine Typ 2 receptor neien (H2-RA) Grupp, hunn PPIs wéi H2-RA bevirdeelegt ginn mat der ongewollt Effet vun NSAIDs eens [8, 9 ]. Nieft fundamental Seier suppressive Aktiounen vun PPIs, verschidde Funktiounen opgedeckt goufen, déi den Ofbau vum pro-apoptotic sécher sinn, Seier-onofhängeg Restauratioun vun proliferating a Reparatur Weeër [10], eng Reduktioun am mucosal oxidative Schued, verkënnegt Spur Aktioun, an endoplasmic reticulum Stress Verspanungen Mechanismus [11-16]. Kanech et al. VerfÜgung [17-19] hunn Rapport och dass PPIs d'Potential Aktivitéiten weisen wéi anticancer baséiert therapeutics op selektiv Aféierungs- vun apoptosis, anti-angiogenesis géint Helicobacter pylori VerfÜgung -associated carcinogenesis, an direkt anti-mutagenic Aktiounen während tumorigenesis. Ee vun de Mechanismen responsabel fir d'Schutzpatrounin Auswierkunge vun PPIs zu gastric Schued NSAIDs-entschlof bleift alles ze gin. VerfÜgung Heme oxygenase-1 (HO-1), eng inducible fir d'éischt an Quote-limitéieren Aktivitéit vun heme ofgeschnidden, gouf ze schützen géint d'cytotoxicity vun oxidative Stress an apoptotic Zell Doud souwéi demagogesch Conditioun [20, 21] bekannt. Fundamental Schutzpatrounin Auswierkunge vun HO-1 géint inflammation sinn via anti-oxidative heme ofgeschnidden mediated, mä och mat der Produktioun vun der anti-demagogesch mediators assoziéiert, fir déi redox ofhängeg transcriptional activator, NF-E2-Zesummenhang Faktor 2 (Nrf2), an seng phosphorylation /Aktivéierung, an oxydéiert Kelch-wëll ech-associating FAQ 1 (Keap1) ass mechanistically ugeholl [22-24]. Zënter dem Wëllen vun HO-1 ass vum Anti-oxidative, anti-demagogesch, an ischemic Verspanungen Äntwerte, zu der aktueller Etude entschlof ginn, Hypothes mir dass d'Schutzpatrounin Auswierkunge vun PPIs géint NSAIDs-entschlof kann gastric Schued HO-1 Zesummenhang ginn a konsequent angiogenesis doriwwer Leitmotiv Seier Ennerdréckung. Ofzeschafen, eis Resultater vum Roman Mechanismen bewisen, datt den Ausdrock vun HO-1 duerch activating Nrf2 /inactivating Keap1 mat der Remuneratioun vun ischemic Ännerung an der attenuation vun demagogesch mediators begleet PPIs induce, doduerch Schutz géint indomethacin-entschlof gastric Schued Saachen. VerfÜgung Methode VerfÜgung spontan a Zell Kulturen VerfÜgung Indomethacin war aus Fläch Aldrich (Saint Louis, MO) kaaft an pantoprazole war vun AMORE Pazifik Gitt mir eng Waassermeloun Co. (Seoul, Korea) gëtt. Antibodies fir β-actin, HO-1, α-tubulin, Keap1, Nrf2 an VEGF all goufe vu Santa Cruz Déi (Santa Cruz, CA) kritt. Normal Grenzwäerter gastric mucosal RGM-1 Zellen vum Prof. Hirofumi Matsui, MD gëtt waren, Dokteraarbecht (Tsukuba Univ., Japan), waren cultured zu Dulbecco d'geännert Eagle d'mëttel- (DMEM) mat 10% (v VerfÜgung /v VerfÜgung ) An et Bovine serum, 100 U /ml penicillin. Mënsch umbilical wiere endothelial Zellen (HUVECs) waren cultured an M199 mëttelfristeg (InnoPharma Écran Seoul, Korea). Zellen sech op 37 ° C an enger humidified Atmosphär mat 5% CO haten 2. Entspriechend Montante vun RGM-1 Zellen oder HUVECs sech géint a fir 24 h incubated, dann huet se mat der uginn Portioun pantoprazole oder indomethacin behandelt a fir d'uginn Mol incubated. HUVECs sech zu 1% O geplënnert 2 a 5% CO 2 hypoxia Kammermusek a fir 0-12 h fir déi kënschtlech VerfÜgung Rouer Opstellung assay incubated. VerfÜgung Elektronen spin Resonanz (ESR) Spektroskopie a Ros Generatioun Miessung VerfÜgung Verschidde Konzentratioune vun pantoprazole Zousatz zu engem Ganzen Volume vun 200 μl wouvun 0,05 mm FeSO 4, 1 mm H 2O 2, 1 mm 5,5-dimethylpyrroline-N-It (DMPO, Fläch Aldrich, Saint Louis, MO), an 50 mm Natrium phosphate um pH 7.4 bei Raumtemperatur. Reaktioune waren déi Schan H 2O 2 ageleet. Magnéitfeld, 338,0 ±: No incubation fir 1 min, aliquots vun de Reaktiounen op engem Quarz Zell an de Spektrum vun transferéiert huet DMPO-leider war mat engem ESR spectrophotometer (Jes-TE300, JEOL, Tokyo, Japan) ënnert dëse Konditiounen iwwerpréift 5.0 Mt; Schleck erëm Muecht, 4,95 MW; Frequenz, 9.421700 GHz; modulation Amplituden 5 Mt; Razzia Zäit, 0,5 min; an Zäit konstant, 0,03 s. Bewosst Ros Inhalter sech gemooss vun der Kontroll oder pantoprazole incubating behandelt RGM-1 Zellen mat 10 μM H 2DCF-DA (Invitrogen Life Technologies, Karlsbad CA) fir 30 min. Fluorescence war mat engem confocal Laser microscope gemooss (LSM710, Carl König, Oberkochen, Däitschland). VerfÜgung Western blot Analyse VerfÜgung Traité Zellen sech zweemol mat PBS gewäsch an duerno am Äis-kal Zell lysis Prellbock (Zell sécher Technology) lysed wouvun 1 mm phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF, Fläch Aldrich). Proteinen am lysates sech duerch SDS-PAGE getrennt a transferéiert ze polyvinylidene fluoride (PVDF) Schläimhait, wat mat der Primärschoul antibodies incubated waren, gewäsch, mat peroxidase-conjugated Secondaire antibodies incubated, rewashed, an dann visualized eng verstäerkte chemiluminescence benotzt (ECL) System ( GE Gesondheetswiesen, Buckinghamshire, UK). VerfÜgung Electrophoretic Mobilitéit gelies Verréckelung assay (EMSA) VerfÜgung Nuclear an cytoplasmic ufale waren héich-PRO Nuclear ofgebaut benotzt an cytoplasmic reagents (Pierce, Rockford, IL), no der Taktik vum Produzent. Neier Étude Äntwert Element (DIR) oligonucleotide Studiebäihëllefe, 5'-Eenzelzäitfueren TCT GCT Série TCA AGG tcc G-3 ", an HIF-1α oligonucleotide Studiebäihëllefe, 5'-TCT GTA CGT GAC CAC ACT CAC CTC-3", war mam Label mat [ ,,,0],γ- 32P] ATP benotzt T4 polynucleotide kinase (Promega, Madison, allem) an aus unincorporated getrennt [γ- 32P] ATP vun gelies filtration engem Nick spin Kolonne (GE Gesondheetswiesen) benotzt. Ier Schan den 32P-oligonucleotide (1x10 5 cpm), 10 μg vun nuklearem Extrait war fir 15 min an gelies Verréckelung bindend gefiermt op Äis gehaalen. Zu der Haaptrei Spezifizitéit vun der NF-κB DNA Interaktioun bestëmmen, mir dobäi eng iwwerschësseg vun unlabeled oligonucleotides. No 20 min vu incubation bei Raumtemperatur, 2 μl vun 0,1% bromophenol blo war ugebaut, an Echantillon sech duerch 6% Nët-denaturing PAGE um 150 V zu engem kal Sall electrophoresed. Endlech, goufen gels gedréchent an ausgesat X-Ray Film (Kodak, Rochester, NY). VerfÜgung Immunocytochemistry VerfÜgung Traité Zellen zu Chambre drënner waren fir 15 min vun 3,7% formaldehyde fest. fir 12 h bei 4 ° C: No wäschen, sech Zellen zu 5% BSA Léisung mat 0,1% Triton X-100 vun PBS fir 1 h bei Raumtemperatur, an dann incubated mat Primärschoul antibody (100 1) gespaart. Zellen sech gewäsch dann 3 Mol, mat Première antibody incubated (1: 300) fir 1 h, an dann mat 4'-6-diamidino-2-phenylindole (DAPI, 100 Dummeldéng /ml) fir 1 min bei Raumtemperatur. No wäschen 3 mol, goufen Zellen mat verlängeren Gold antifade reagent (Invitrogen Life Technologies, Karlsbad CA) Descher. Fluorescence war ënner enger confocal Laser microscope (LSM710, Carl König). VerfÜgung RNS Isolatioun a grouss ëmgedréint Transkriptiouns polymerase Kette Reaktioun (qRT-Hinnen alleguer) visualized VerfÜgung der Behandlung, Medien war vun ka geläscht an Zellen sech mat Dulbecco d'phosphate Katakombe -buffered Salins (DPBS) zweemol. RiboEX (Gene All, Seoul, Korea) war bis Placke derbäi, déi dann fir 10 min bei 4 ° C incubated goufen. RiboEX gouf zu engem 1,5 ml Rouer recoltéiert a plazéiert, a chloroform ugebaut a weider gemëscht. No incubation fir 10 min an Äis Echantillon waren fir 30 min bei 10.000 × g centrifuged. Supernatants goufen ofgebaut a gemëscht mat isopropanol, an Dampgemësch sech fir 1 h bei 4 ° C incubated. No centrifuging bei 13.000 g VerfÜgung fir 30 min, war PELLET mat 70% (v VerfÜgung /v VerfÜgung) Ethanol gewäsch. No Kesselen Ethanol komplett ze verdonschten, goufen Pellets am diethylene pyrocarbonate (DEPC) -treated Waasser (Invitrogen Life Technologies, Karlsbad CA) opgeléist. cDNA war mat ëmgedréint transcriptase ofgeleet bereet aus murine Maloney Leukämie Virus (Promega, Madison, allem), no der Taktik vum Produzent. 94 ° C, 58 ° C fir 30 sec, an 72 ° C fir 45 sec fir 20 sec: Hinnen alleguer war iwwer 30 Zykle vun gesuergt. Oligonucleotide primers fir Hinnen alleguer (Table 1) sech aus Bioneer (Daejeon, Korea) kaaft. All qRT-Hinnen alleguer Experiment an triplicate widderholl a quantification war an mengen ± SD.Table 1 D'Haaptrei vun Hinnen alleguer primers VerfÜgung GAPDH VerfÜgung Stiermer 5'-GGT GCT Série Stoffel GTC GTG GA -3 "gewise VerfÜgung Réckproduktioun 5'-TTC AGC TCT GGG ATG zu Enn TT-3 "VerfÜgung HO-1 VerfÜgung Stiermer 5'-Série AGC ATG tcc CAG Gat TT-3" VerfÜgung Réckproduktioun 5'-GGT TCT GCT TGT TTC GCT CT -3 'VerfÜgung COX-2 VerfÜgung Stiermer 5'-GAA ATG GCT GCA Série TTG AA -3' VerfÜgung 5'-TCA TCT Agt CTG Série TGG GA Réckproduktioun -3 'VerfÜgung HIF-1α
Stiermer 5'-AAC AAA CAG AAT CTG tcc TC-3 "VerfÜgung Réckproduktioun 5'-GGT AAT GGA GAC ATT GCC AG-3" VerfÜgung VEGF VerfÜgung Stiermer 5'-CAA Name Name AGC CCT GGA GT-3 VerfÜgung PDGF VerfÜgung Stiermer 5'-AGG AAG CCA TTC CCG CAG TT-3 '' VerfÜgung 5'-Gat TTC TTG CGC Eenzelzäitfueren CGT TT -3 Réckproduktioun 'VerfÜgung Réckproduktioun 5'-cta zu Enn TCA CCT GGA CCT CT -3 'VerfÜgung bFGF VerfÜgung Stiermer 5'-Stoffel GAA GGA Agées TGG ACG GC-3 "VerfÜgung 5'-AAC Agt ATG GCC TTC TGT CC Réckproduktioun -3' VerfÜgung IL-1β VerfÜgung Stiermer 5'-CAT TGT GGC TGT GGA GAA G-3 "VerfÜgung 5'-ATC ATC CCA CGA GTC ACA GA Réckproduktioun -3 'VerfÜgung IL-8 VerfÜgung Stiermer 5'- CAG ACA GTG GCA GGG ATT CA-3 "VerfÜgung Réckproduktioun 5'-TTG GGG ACA CCC Eenzelzäitfueren AGC OP-3" VerfÜgung TNF-α VerfÜgung Stiermer 5'-TAC Name ACT TCG GGG Name TT -3 ' VerfÜgung Réckproduktioun 5'-CAG CCT TCT CCC TTG AAG AG-3 "VerfÜgung ICAM-1 VerfÜgung Stiermer 5'-TGT GCT TTG Agées ACT GTG GC-3" 5'-GGT TCT GTC Réckproduktioun VerfÜgung CAA CTT CTC AG -3 'VerfÜgung VCAM-1 VerfÜgung Stiermer 5'-Série ACA AAA CAG AAG TGG AAT-3 "VerfÜgung Réckproduktioun 5'-TAC AAG TGG tcc ACT Stoffel TTC -3' VerfÜgung NOX1 VerfÜgung Stiermer 5'-Série AAA TTC TCG GAA CTG CC-3 "VerfÜgung 5'-TGT TGG CTT cta CTG Tag CG Réckproduktioun -3 'VerfÜgung An kënschtlech VerfÜgung angiogenesis assay VerfÜgung Dëst assay eng kommerziell Kit mat laut den Hiersteller d'Uweisunge (Millipore, Billerica, MA) war gesuergt. Fir hypoxic Konditiounen, waren ECMatrix an der Mindeststeier gefiermt gemëscht staark gelies ze maachen, wat dann zu 96 gutt microplates plated war. Mënsch umbilical verfeelt endothelial Zellen (HUVEC, 1.0 × 10 5 /ml) goufen géint mat Kontroll, Indomethacin, indomethacin plus pantoprazole, indomethacin plus pantoprazole plus ZnPPIX bei 37 ° C fir 4 h incubated. Tube Équipe war ënner enger Liicht microscope observéiert. VerfÜgung Indomethacin-entschlof Modell gastric Schued VerfÜgung A Ganzen 48 deër vum Charles River (Rekorder, Japan) kaaft huet. Déieren waren an engem uner- Déier Gebei am Aklang mat Association fir Assessment a Kierper vun schafft Déieren Care International (AAALAC International) Richtlinnen ënnert der Ariichtung genannt CACU (D'Center vun Déieren Care an Benotzt) vun Lee Gil Ja Cancer an Diabetes Institut, Gachon gehandhabt Universitéit der Finanzpolitiker IFLA- Kritik Verwaltungsrot siichtbar. Déieren waren an véier Gruppen ënnerdeelt all aus 12 deër a sech fir 24 h virun der trotzdeem gehongert wéi follegt; all deër sech mat intraperitoneal Sprëtz vun indomethacin (10 mg /kg) gastric Schuedenersaz, zweet Grupp mat intraperitoneal Sprëtz vun 10 mg /kg vun pantoprazole, déi drëtt Grupp mat intraperitoneal Sprëtz vun 30 mg /kg vun pantoprazole, an der véierter ze stoussen verwalte Grupp mat intraperitoneal Sprëtz vun 30 mg /kg vun pantoprazole a 5 mg /kg vun ZnPPIX der Aktivitéit vun HO-1 zu inhibit. Déieren goufen 16 h no all Verwaltung geaffert. D'Mamm vun deër goufen laanscht de gréissere curvature an duerno mat Äis kal phosphate gefiermt Léisungen Katakombe ofgegruewen an opgemaach. D'Zuel vun entweder erosions oder ulcers goufen ënnert dem Paschtouer Fotoen alles. Homogenates vum Kapp gastric mucosa kritt huet an flëssege Stéckstoff Tank bis de assay gehaalen.
Statistique Analyse Resultater sinn wéi d'mengen ± Fils ausgedréckt. D'Date goufen duerch eent-Manéier ANOVA analyséiert, a statistesch Bedeitung tëschent Gruppe war vun Duncan d'Pluralitéit Rei Test alles. Statistique Bedeitung war um P VerfÜgung &Si besteet ugeholl; 0,05. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Pantoprazole fräi HO-1 Ausdrock duerch Nrf2 Aktivéierung VerfÜgung Baséierend op virleefeg studéieren, mir fonnt hunn pantoprazole zougedréckt a dem héchste Aféierungs- vun HO-1 Ausdrock vun RGM-1 Zellen ënnert PPIs, lansoprazole, rabeprazole , omeprazole, an pantoprazole (Donnéeën net gewisen). Pantoprazole fräi Meenungsäusserung vun HO-1 mRNA an FAQ zu enger Portioun-ofhängeg Manéier (Dorënner 1A) an immunocytochemical Analyse verroden och datt de Niveau vun HO-1 war vun pantoprazole Behandlung vun der Zytoplasma vun RGM-1 Zellen an enger Portioun vill fräi -dependent Manéier (Dorënner 1B). Fir d'Mechanismen verstoen Basisdaten der up-Regulatioun vun HO-1 Ausdrock vun pantoprazole, iwwerpréift mir seng Auswierkungen op d'Aktivatioun vun Nrf2, eng grouss Transkriptiouns Faktor datt d'SINN /EpRE-Undriff Ausdrock vun neier Étude Enzymen mediates. Wann mir den Ausdrock Niveau vun keap1 gemooss, behandelt engem repressor vun Nrf2 zu cytoplasmic Ëmwandlung mat 300 μM pantoprazole zu enger anerer Zäit Punkt, vill rofgaang Ausdrock vun Keap1 zu 1 h observéiert gouf (D'Grondidee 2A) suggeréiert datt HO-1 kéint ausserdeem ginn no pantoprazole Behandlung duerch Nrf2 Aktivéierung an Keap1 inactivation. Als zu Dorënner 2A illustréiert, Nrf2 nuklear Co-Lokalisatiouns war evident zu RGM-1 mat pantoprazole behandelt Zellen. Déi maximal SINN-verbindlech Aktivitéit vun Nrf2 war zu 1 h fräi souwéi seng nuklear Lokalisatioun entschlof vun pantoprazole (Dorënner 2B). Fir d'nuklear Heefung vun Nrf2 Gewerkschaften, gehaal mir eng immunocytochemical Analyse der anti-Nrf2 antibody benotzt. Als zu Dorënner 2C gewisen, war Nrf2 mat 300 μM pantoprazole Behandlung an helle translocated. Dës Resultater ugeholl konsequent dass pantoprazole konnt HO-1 Niveau duerch transcriptional Aktivatioun vun Nrf2 zu Grenzwäerter gastric epithelial Zellen Erhéijung. Figur 1 Pantoprazole den Ausdrock vun HO-1 entschlof. (A) RT-Hinnen alleguer a Western blot fir HO-1 Ausdrock laut verschiddenen Stärkungsmëttel vun pantoprazole, 30, 100, an 300 μM, bzw.. Dës Zuele sinn Vertrieder vun de Resultater vun 3 onofhängeg Experimenter kritt. (B) Confocal Imaging vun HO-1. Pantoprazole fräi Meenungsäusserung vun HO-1 op enger Portioun-ofhängeg Fassong normal Grenzwäerter gastric mucosal RGM-1 Zellen. VerfÜgung Dorënner 2 Pantoprazole fräi Nrf2 nuklear br an cytoplasmic keap1 inactivation, Nerve bedeitendst anti-Chemiker. (A) Western blots fir entweder cytosolic Keap1 oder nuklear Nrf2 zu enger anerer Zäit, an der Präsenz vun 300 μM pantoprazole. (B) Electrophoretic Mobilitéit Verréckelung assay (EMSA) fir SINN-DNA bindend Aktivitéit. A signifikativ méi DNA-verbindlech vun Nrf2 war 60 min der pantoprazole Verwaltung fest. (C) Confocal Imaging vun Nrf2 no ​​verschiddene Stärkungsmëttel vun pantoprazole, 100 μM an 300 μM. (D) Elektronen spin Resonanz (ESR) Moosse fir Fenton Reaktioun-generéiert hydroxyl Radikaler. (E) D'Ännerunge vun DCF-DA fluorescence no verschiddene Stärkungsmëttel vun pantoprazole, 30, 100, an 300 μM. Pantoprazole ofgeholl vill H2O2-entschlof oxidative fluorescence. VerfÜgung Zënter der biologescher Bedeitung vun HO-1 pantoprazole leie en Anti-oxidative Aktioun am Zesummenhang mat HO-1 kopéiert. ESR Miessung war ultimate Wee fräi radikal Generatioun benotzt spin adduct zu Spuer, fir déi mir hydroxyl Radikaler mat DMPO als adductor ënner Fenton Reaktioun entsteet. Als zu Dorënner 2D gesinn, 3 mm pantoprazole Nofolleg kloer scavenging Aktioun vun DMPO-adduct-generéieren hydroxyl Radikaler. Zanter ESR Miessung vun der chemescher Reaktioun Conditioun net biologesch System virschaffe konnt an pantoprazole ass net eng berufflech neier Étude no, et dréit definitiv hydroxyl Radikaler och zu scavenge wann et relativ héich Konzentratioun vu pantoprazole ass reaktiv Sauerstoff Aarten ze scavenge. Dës chemesch Resultater aus ESR Etude sech weider gestäerkt mat biologescher Test mat DCF-DA fluorescence Miessung, weist datt pantoprazole zougedréckt a wesentleche DCF-DA Reduktioun vun enger Portioun-ofhängeg Manéier (P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, Dorënner 2E). VerfÜgung Angiogenic Aktiounen konsequent ze pantoprazole-entschlof HO-1 VerfÜgung PPIs fräi der Ausstralung vun VEGF mRNA an FAQ zu RGM-1 Zellen (Dorënner 3A). Fir ob d'fortlafend Aféierungs- vun VEGF zu Dokument mat PPIs zu HO-1 Aféierungs- Zesummenhang ass, widderhuele mer d'Experiment mat PPI eleng oder Co-Behandlung vun pantoprazole an Zénk protoporphyrin (ZnPPIX) als HO-1 inhibitor. Als Resultat, konnt mir d'Expressioun vun VEGF entschlof vun pantoprazole a fortlafend Co-Behandlung vun ZnPPIX kloer erofgaangen den Ausdrock vun PPI-entschlof VEGF an enger Portioun-ofhängeg Manéier (Dorënner 3B) virbruecht. Next, mir den Ännerunge vum Vertrieder angiogenic Faktore ze propagéieren, bFGF, PDGF, an HIF-1α an observéiert dës Begrëffer relevant ze pantoprazole-entschlof HO-1 zu Dorënner 3C. Wéi schlecht, fräi pantoprazole vill dës Ausstralung vun e puer angiogenic Facteuren. Och dës inductions vun bFGF an PDGF sech vill mat Co-Behandlung vun pantoprazole an ZnPPIX attenuated. An fir z'iwwerpréiwen ob dës inductions vun angiogenic Faktor der tatsächlech pantoprazole sech ze angiogenesis dinn, kënschtlech VerfÜgung angiogenesis assay war gemaach (Dorënner 3D). Tube Équipe war vill mat 500 μM indomethacin zu HUVECs attenuated hierkommen 100 μM pantoprazole dës derangements vun angiogenesis behandelt mat indomethacin iwwerwanne kéinten. Allerdéngs, ofgeschaf zousätzlech Behandlung mat ZnPPIX dëse Virdeeler vun angiogenesis vun pantoprazole ënner indomethacin Administratioun bezwéngen. Dës Resultater hindeit, datt pantoprazole kompenséiert NSAIDs-entschlof defekt angiogenesis duerch seng HO-1 Aféierungs- Méiglechen stoussen. Figur 3 Pantoprazole angiogenic Faktoren Zesummenhang mat HO-1 Aféierungs- entschlof. (A) RT-Hinnen alleguer a westlech blot fir VEGF. Grouss inductions vun VEGF sech mat pantoprazole, däitlech no 300 μM pantoprazole (p &Si besteet; 0,05 VerfÜgung) feststellen. Dës Zuele sinn Vertrieder vun de Resultater vun 3 onofhängeg Experimenter kritt. (B) D'Ännerunge vun VEGF an HO-1 mat pantoprazole eleng oder Kombinatioun vun pantoprazole an ZnPPIX. D'Aféierungs- vun VEGF der pantoprazole war vill mat HO-1 inhibitor attenuated, fier d 'deemno vun HO-1 zu PPI-entschlof VEGF. Dës Zuele sinn Vertrieder vun de Resultater vun 3 onofhängeg Experimenter kritt. (C) Aner angiogenic Faktore ze pantoprazole dinn. bFGF an VEGF war ëmmer mat pantoprazole ausgedréckt, mä dës inductions sech mat HO-1 inhibitor attenuated. Dës Zuele sinn Vertrieder vun de Resultater vun 3 onofhängeg Experimenter kritt. (D) an eng kënschtlech VerfÜgung angiogenesis assay. Tube Équipe vun HUVEC war vill mat 50 μM indomethacin ofgeholl. Pantoprazole kompenséiert indomethacin-entschlof defekt angiogenesis wéi mat de Prozentsaz vun Rouer Opstellung évaluéieren, hierkommen HO-1 inhibitor dës angiogenesis iwwerwonne vun pantoprazole-entschlof annuléiert. Dës Zuele sinn Vertrieder vun der an 3 onofhängeg Experimenter kritt Resultater. VerfÜgung Pantoprazole-entschlof HO-1 attenuated indomethacin-verbonne demagogesch iwwerfalen VerfÜgung Heemlech indomethacin ass eng Anti-demagogesch Agent, et gouf bekannt, datt NSAIDs duerch gastric Schued entschlof fräi Ausstralung vun demagogesch mediators dorënner TNF-α, IL-1β, IL-8, an NADPH oxidase-1 (NOX-1). Als zu Dorënner 4A gesinn, 500 μM indomethacin geklomme der Ausstralung vun TNF-α, IL-1β, an IL-8 zu gastric epithelial Zellen, am Ufank ass den Ausdrock vun HO-1 ofgeholl, confirméiert, datt demagogesch mediators kéint mechanistically mat verbonne ginn indomethacin-entschlof gastric epithelial Zell Schued. An dësem Zoustand, Co-Administratioun vun 500 μM indomethacin an 300 μM pantoprazole ofgeholl bedeitend der Ausstralung vun TNF-α, IL-1β, an IL-8 mat statistesch relevant Erhéijunge vun-HO 1 Ausdrock begleet. Ausserdeem, fräi indomethacin Géigespiller bedeitend der Ausstralung vun NOX-1, an deem pantoprazole bedeitend d'fräi Meenungsäusserung vun NOX-1 attenuated suggeréiert datt pantoprazole-entschlof HO-1 opgezwong anti-demagogesch Aktiounen ënner indomethacin. Next, fir weider fir beweisen ob dës attenuations vun demagogesch mediators der pantoprazole vun HO-1 Aféierungs- duerchgesat ginn, widderhuele mer dës Experimenter mat ZnPPIX Administratioun. Als zu Dorënner 4B gesinn, ofgeschaf de Co-Behandlung vun ZnPPIX an der Präsenz vun pantoprazole bedeitend d'Virdeeler vun Anti-demagogesch Aktioun. D'fortlafend inductions vun ICAM-1 an VCAM der indomethacin Behandlung sech fir ischemia an Carlton Uergel Schuedenersaz responsabel, an déi entweder wiere inflammation oder fräi leukocyte Usammlung engagéiert gouf. Behandlung mat indomethacin geklomme der Ausstralung vun ICAM-1 an VCAM zu HUVEC, mä Co-Challenge vun indomethacin an pantoprazole vill rofgaang indomethacin-entschlof ICAM-1 Ausdrock relevant fir fräi kopéiert vun HO-1 (Dorënner 4C). An dëser Bedingung, datt Adjektiver ZnPPIX rauszesichen der attenuation vun ICAM oder VCAM trotz pantoprazole Behandlung, weider dämpen Aktioun vun pantoprazole Iwwerliewe verbonne mat HO-1 kopéiert. Figur 4 Pantoprazole indomethacin-entschlof demagogesch mediators duerch HO-1 attenuated. (A) RT-Hinnen alleguer fir TNF-α, IL-1β, IL-8, an HO-1. 500 μM indomethacin fräi Meenungsäusserung vun demagogesch mediators dorënner TNF-α, IL-1β, IL-8, mä vill HO-1 Ausdrock ofgeholl. NOX-1 ass mat indomethacin vill fräi. Dës Zuele sinn Vertrieder vun de Resultater vun 3 onofhängeg Experimenter kritt. (B) Pantoprazole ofgeholl vill indomethacin-entschlof IL-1β an TNF-α, mä dës dämpen Aktiounen vun pantoprazole sech mat ZnPPIX ofgeschaf, fir d'Conclusioun Virwaat dass anti-demagogesch Aktiounen vun pantoprazole sech Wéint HO-1 kopéiert. Dës Zuele sinn Vertrieder vun de Resultater vun 3 onofhängeg Experimenter kritt. (C) Pantoprazole ofgeholl vill indomethacin-entschlof ICAM-1 an VCAM zu HUVEC Zellen, mä dës dämpen Aktiounen vun pantoprazole sech och mat ZnPPIX den HO-1 inhibitor ofgeschaf. Dës Zuele sinn Vertrieder vun der an 3 onofhängeg Experimenter kritt Resultater. VerfÜgung Pantoprazole-entschlof HO-1 enfeebled indomethacin-entschlof VerfÜgung gastric blesséiert Fir d'Schutzpatrounin Effet vun pantoprazole zu VIVO VerfÜgung, indomethacin (10 mg /kg ermëttelen ) war intraperitoneally fir 16 h an deër verwalt. Behandlung mat indomethacin vill gastric mucosal Verletzungen dorënner hemorrhagic erosions an ulcerations dementéiert. Mä, dësen gastric mat indomethacin dementéiert pathologies sech vill mat intraperitoneal Sprëtz vun 30 mg /kg pantoprazole (Dorënner 5A) attenuated. Well dës Schutzpatrounin Auswierkunge vun 30 mg /kg pantoprazole géint indomethacin-entschlof waren gastric Schuedenersaz vill ofgeschaaft mat Co-Behandlung vun intraperitoneal verwalte 5 mg /kg ZnPPIX, bestätegt mir dass d'Schutzpatrounin Aktioun vun pantoprazole op entwerfen vun HO-1 Aféierungs- baséiert war . Wann der Ausstralung vun HO-1 an ICAM-1 zu mucosal homogenates aus all Grupp gemooss goufen, ofgeholl indomethacin Administratioun bedeitend der Ausstralung vun HO-1 a fräi Meenungsäusserung vun ICAM-1. Wéint fräi HO-1 Ausstralung der pantoprazole awer, wéi och vill attenuated Niveau vun ICAM-1, indomethacin-entschlof war gastric Schued proportionally trotz indomethacin Géigespiller (Dorënner 5B) verbessert. Ze beweisen, wéi pantoprazole der defekt angiogenesis an ischemia vun indomethacin dementéiert verbessert, EMSA benotzt HIF-1α war gesuergt (Dorënner 5C). D'HIF-1α-DNA bindend Aktivitéit war héich an indomethacin eleng Grupp fräi, déi zu gastric homogenates vun pantoprazole Behandlung Grupp vill rofgaang ass, fier pantoprazole vill erliichtert hypoxic Zoustand vun indomethacin entschlof. Geholl zesummen, Nofolleg PPIs staarke Schutz géint indomethacin-entschlof gastric mucosal Schued duerch bedeitendst HO-1 kopéiert, wat doriwwer eraus authentesch Seier suppressive Aktioun ass, wa mer net d'Ännerunge vun gastric Aciditéit Mesure gemaach. Figur 5 Pantoprazole hält un der indomethacin-entschlof gastric Schued duerch jee op der Aféierungs- vun HO-1. (A) Mëttler Index vun indomethacin-entschlof gastric Schuedenersaz. (B) RT-Hinnen alleguer fir HO-1 an ICAM-1 no Grupp. (C) EMSA fir HIF-1α laut Grupp. Indomethacin vill HIF-1α-DNA bindend fräi hierkommen pantoprazole vill HIF-1α-DNA ofgeholl an enger Portioun-ofhängeg Manéier bindend. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung Virun der aktueller Enquête, hunn e puer Fuerscher publizéiert datt PPIs gastric mucosal blesséiert verhënneren kéint vun anere Mechanismen iwwer d'Aktiounen vun hire spezifesche Seier inhibition [11, 14, 25-28], hätt mir méi dofir iwwert Schutzpatrounin Aktioun vun PPIs géint NSAIDs derbäi. Pantoprazole bedeitend dem Wëllen vun HO-1 duerch Nrf2 Aktivéierung relevant zu Anti-demagogesch, anti-oxidative, an ischemia Verspanungen Aktiounen entschlof. Roman Opklärung vun dëser Etude anescht aus anere Ënnersich ass dass pantoprazole weist Schutzpatrounin Aktiounen un der NSAIDs-entschlof Fouss duerch entweder d'Verbesserung vun angiogenic Handicap oder der attenuation vun inflammation propensity. VerfÜgung Becker JC et al. VerfÜgung [16] bewisen datt souwuel omeprazole an lansoprazole Mënsch gastric epithelial an endothelial Zellen géint oxidative Stress gläicht eiser Etude protegéiert, mä benotzt verschidden Arte vu PPIs. Zënter dësem Effet vun der Präsenz vun der HO-1 inhibitor abrogated war, schéngt ZnPPIX, HO-1 e Recht Zilscheif vun PPIs zu souwuel endothelial an gastric epithelial Zellen ze ginn. An dëser Etude, observéiert mir beaflosst Roman fannen dass HO-1 entschlof vun PPIs ofgeholl NSAIDs-ufalen inflammation an angiogenic derangement. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• Epstein-Barr Virus verbonne gastric carcinoma: e Rapport vum Iran an de leschte véier decades
• Association tëscht RUNX3 Promoteur methylation an gastric Kriibs: en meta-Analyse