Értékelését Toll-like receptor 4 Asp299Gly, Thr399Ile és az interleukin-8 -251 polimorfizmus az kialakulásának kockázatát a távolabbi gyomorrák

Értékelését Toll-like receptor 4 Asp299Gly, Thr399Ile és az interleukin-8 -251 polimorfizmus az kialakulásának kockázatát a távolabbi gyomorrák katalógusa Abstract katalógusa Háttér katalógusa Az intenzitás a gyulladás által kiváltott Helicobacter pylori
kolonizáció társul a fejlesztés a disztális gyomorrák (GC). A fogadó válasz H katalógusa. pylori katalógusa összefüggésbe hozták genetikai polimorfizmusok befolyásolják mind veleszületett és adaptív immunválasz.
Célunk volt megvizsgálni, hogy a jelenléte a TLR4 Asp299Gly katalógusa, TLR4 Thr399Ile katalógusa és IL-8-251
a /T polimorfizmus volt semmilyen hatással a fejlesztés a távolabbi GC egy mexikói populáció. katalógusa módszerek katalógusa vizsgáltuk 337 beteg, melyeket két csoportra osztottuk: 78 beteg szövettanilag igazolt távolabbi GC és 259 nem rákos ellenőrzéseket. A H. pylori jelenlétének katalógusa a kontroll populációban által meghatározott pozitív eredményei közül legalább kettő négy diagnosztikai vizsgálatok: a szerológiai, szövettani gyors ureáz teszt és a kultúra. Az emberi DNS-t tisztítunk és genotípusú TLR4 Asp299Gly katalógusa polimorfizmus által Pyrosequencing, a TLR4 Thr399Ile katalógusa PCR-RFLP és IL8-251 katalógusa szerint az erősítés tűzálló mutációs rendszer (fegyver) PCR-. Katalógusa Eredmények
nem rákos kontrollcsoporthoz találták Hardy-Weinberg egyensúly a polimorf lókusz tanult (chi-négyzet HW = 0.58 IL8-251 katalógusa, 0,42 TLR4 Asp299Gly katalógusa és 0,17 a TLR4 Thr399Ile katalógusa). A frekvenciák mutáns allél (homozigóta plusz heterozigóta) összehasonlították azokat az eseteket és ellenőrzések. Nem találtunk szignifikáns különbséget a TLR4- Asp299Gly katalógusa [7,7% disztális GC betegek 7,7% nem rákos (p = 0,82)] és a TLR4 Thr399Ile katalógusa [1,3% GC betegek és az 5 % a kontroll populáció (p = 0,2)]. Ezzel szemben, az IL-8-251
A /T, 80,77% a GC-betegek és 66,4% a kontroll csoport az életkor és a nemek kiegyenlített volt legalább egy példányát a mutáns allél (OR = 2,12, 95% CI = 1,1-4,2) (p = 0,023).
Következtetés katalógusa Ez a tanulmány kimutatta, hogy a IL8-251 * Egy fiatal allél lehet fejlesztéséhez kapcsolódó distalis gyomorrák ez a mexikói populáció. katalógusa Háttér
Helicobacter pylori
szinte kizárólag megtelepedni a nyálkahártya-réteg az emberi gyomor és tartózkodnak a fogadó évek, évtizedek óta, vagy talán egész életen át tartó. Mintegy 10% -ában, a szervezet van társítva változatos klinikai eredmények, beleértve a nem fekélyes diszpepszia, gyomorfekély-betegség, és a disztális gyomorrák [1].
Mindkét fogadó és a környezeti tényezők összefüggésbe hozták ezt a klinikai sokféleségét. Host tényezők főként annak elismerését, hogy a baktériumok által az immunrendszert és szintjének változásában a citokin válasz [2, 3].
Elismerése a kórokozók által közvetített egy sor csíravonal-kódolt receptorok nevezik minta-felismerő receptorok (PRRS). Ezek a receptorok felismerni konzerválódott molekuláris minták, amelyek által megosztott nagy csoportok a mikroorganizmusok. Egy fontos PRR van Toll-like receptor 4 (TLR4), egy transzmembrán receptor, amely felismeri egy sor ligandumok, beleértve a lipopoliszacharid (LPS), amely megtalálható a sejtfal a Gram-negatív baktériumokat, például a H. pylori
[3 ]. Két egyedi nukleotid polimorfizmusok (SNP) a TLR4
gén, Asp-299 → Gly és Thr-399 → Ile átmenetek, kimutatták, hogy vezet hyporeszponzív LPS, csökkentett epiteliális TLR4 sűrűség és csökkentett gyulladásos citokin válasz LPS [ ,,,0],4]. Továbbá, a genetikai variánsai citokinek is kritikus a gyulladásos választ, és több gén a különböző útvonalakat hoztak összefüggésbe gyomorrák, beleértve az interleukin (IL) 1B
, TNF
, az IL-10
és az IL-8
[5-7].
IL-8 citokin funkcionál hatásos kemoattraktáns neutrofilek és limfociták. Leírták, hogy az IL-8 szint nőtt 10-szeres a gyomorrák példányok, összehasonlítva a normál gyomor szövetekben. Egy jól jellemzett SNP T /A, a -251 lókusz leírták és társult magasabb IL-8 termelés és számos betegség [8-11].
Célunk volt megállapítani, hogy a TLR4 Asp299Gly katalógusa, TLR4 Thr399Ile katalógusa és a IL8-251 a /T katalógusa polimorfizmusok társított távoli gyomorrák egy jól meghatározott mexikói populáció. katalógusa módszerek katalógusa betegpopulációban katalógusa vizsgáltuk 78 független betegnél szövettanilag igazolt disztális GC (átlagéletkor = 58.6y, medián életkor = 60, életkor: 22-84, F: M = 0,56). Azt is vizsgálták 259 beteg nem szövettanilag igazolt GC (átlagéletkor = 57.1y, medián életkor = 54, életkor-tartomány = 18-92, N: M = 1,17). Ez a populáció korábban már leírták [7]. Minden beteget vontak be a kórház Universitario "Dr. José González Eleuterio", Universidad Autónoma de Nuevo León. A helyi etikai bizottság jóváhagyta a vizsgálatot és írásos beleegyezését adta az összes tárgyak.
Kórszövettani vizsgálatok
az összes kontroll betegek nyolc biopsziás mintákat kaptunk szövettani értékelést, kettő a kisebb görbület, kettő a nagyobb görbület , kettő a incisura szögletes, és két, a prepyloric régióban. Betegekből származó disztális GC, legalább 8 biopsziákat vettünk a tumor hisztológiai értékelés céljából. Származó biopsziák esetek és a kontrollok fixáltuk, paraffinba ágyazott és festettük hematoxilin-eozin. Egy tapasztalt patológus megvizsgálta a szövettani metszetek.
H. pylori katalógusa állapot katalógusa A H. pylori katalógusa állapotát kontroll populáció határoztuk meg szövettan, gyors ureáz teszt (RUT), szerológiai és kultúra . A rut, egy antrális biopsziás analizáltuk validált nem kereskedelmi vizsgálat [12]. A biopszia került egy teszt ampulla, inkubáljuk 37 ° C-on, és olvassa el 24 órán belül. A színváltozás a narancssárga bíbor jelzett pozitív eredményt. Szerológiai, egy enzimmel kapcsolt immunoszorbens assay (ELISA) alkalmaztunk a jelenlétét igazolják, IgG antitestek a korábban leírtak [13].
Tenyésztést végzünk két corpus és két antrum biopsziák standard módszerekkel. A biopsziákat helyeztük 10% vér-agar (Becton Dickinson, Cockeysville, MD), és inkubáljuk 37 ° C-on legalább egy hétig alatt mikroaerob körülmények között. Törzset azonosítottunk által Gram-festés, oxidáz, a kataláz és ureáz vizsgálatok.
Kontroll betegek tekintettük a H. pylori
fertőzött, amikor legalább két, a diagnosztikai tesztek pozitívak voltak.
A prevalenciája a H. pylori
fertőzés gyomor rákos betegek úgy határoztuk meg, az eredmény a szövettani csak.
genotipizálása
genomiális DNS-t extraháljuk, perifériás vérből a fenol-kloroform-isoamilic alkohol és etanolos kicsapással módszerrel. Amplifikációs tűzálló mutációs rendszer (fegyver) PCR-módszert alkalmaztuk genotípus IL8-251 katalógusa polimorfizmus korábban leírtak szerint [14].
A TLR4 Thr399Ile katalógusa polimorfizmus meghatározása PCR-RFLP [15] és a TLR4 Asp299Gly
polimorfizmus határoztuk meg Pyrosequencing módszer tervezett ebben a vizsgálatban. Kezdetben egy PCR-t végeztünk a primerek F-GAT TAG CAT ACT TAG ACT ACT ACC TCC ATG és az R-CCC TTT CAA TAG TCA CAC TCA CCA GG a reverz primert biotinilezett. A PCR körülményei a következők voltak: 94 ° C-on 5 percig, majd 40 ciklus 94 ° C-59 ° C és 72 ° C-on 30 s minden egyes, és egy végső extenzió 72 ° C-on 5 percig melegítjük. A Pyrosequencing, biotinilált PCR-templátot immobilizált sztreptavidinnel bevont paramágneses Sepharose-on gyöngyök kötőpufferben. A gyöngy-templát komplexet mostuk által elárasztás 70% -os alkohol és 0,5 M NaOH, majd hozzáadjuk 45 ul lágyítás pufferben, amely 15 pmol a szekvenáló láncindító 5'-CAT ACT TAG ACT ACT ACC TC 3 '. Lágyító került sor 80 ° C-on 2 percig. Valós idejű Pyrosequencing végeztük egy automatizált 96-lyukú pyrosequencer PSQ SNP 96 (Pyrosequencing AB, Uppsala, Svédország) használva enzimek és szubsztrátok a gyártó által ajánlott.
Statisztikai analízis
Hardy-Weinberg egyensúlya alléljainak egyedi lókuszon értékelték chi-négyzet statisztika. Statisztikailag szignifikáns különbséget határoztuk Student t katalógusa vizsgálat, chi-négyzet vagy Fisher egzakt teszt, két farkú. A valószínűség (p) értéke < 0,05 értéket tekintettük szignifikánsnak. Esélyhányadosok (OR) 95% -os konfidencia intervallum (CI) számoltunk az Epi-Info 2000 szoftver (Center for Disease Control and Prevention, Atlanta, Ga.). Három analíziseket, amelyben minden esetben és kontrollokat, egy második, amely esetben összevetettük csak a H. pylori katalógusa + ellenőrzések és a harmadik elemzés, amelyben a népesség-alapú ellenőrzéseket párosul 5 éves kor csoport és a nemek és a rákos megbetegedések száma. katalógusa Eredmények katalógusa tanulmányozócsoportoknak jellemzőit és a H. pylori katalógusa állapot katalógusa a genotípusok megoszlása ​​szerint a szövettani lelet látható táblázat 1.Table 1 genotípus és allél frekvenciái az IL-8 251
a /T és TLR-299
és -399
lókuszok a nem-rák és rák megfelelően csoportokat hisztológiai eredmények
katalógusa IL8-251 A /T Matton
TLR4 Asp299Gly
TLR4Thr399Ile
csoport (n) hotelben genotípus katalógusa allél katalógusa genotípus katalógusa allél katalógusa genotípus
allél katalógusa AA katalógusa AT katalógusa TT katalógusa * Egy fiatal * T
1,1 katalógusa 1,2 katalógusa * 1 katalógusa * 2

• Gyomor Helicobacter pylori fertőzés társul fokozott a colorectalis polipok afrikai Americans
• Foszforilált Smad2 előrehaladott Gyomor Carcinoma