Procjena Toll-like receptora 4 Asp299Gly, Thr399Ile i interleukina-8 -251 polimorfizama u riziku za razvoj karcinoma želuca distalnog

Procjena Toll-like receptora 4 Asp299Gly, Thr399Ile i interleukin-8 -251 polimorfizmi u riziku za razvoj karcinoma želuca distalnog
apstraktne pregled pozadine
intenzitetu upale izazvane Helicobacter pylori
kolonizacija je povezana s razvojem distalnog raka želuca (GC). Odgovor domaćin H Netlogu. pylori pregled je povezana s genskih polimorfizama koji utječu na oba urođene i prilagodljivo imuni odgovor.
Naš cilj je bio da se ispita da li je prisutnost TLR4 Asp299Gly Netlogu, TLR4 Thr399Ile Netlogu i IL-8-251
a /T polimorfizma imala nikakvog utjecaja na razvoj distalnog GC u meksičkoj stanovništva
Metode pregled smo proučili 337 pacijenata koji su bili podijeljeni u dvije skupine:. 78 bolesnika s histološki potvrđenih distalni GC i 259 ne-raka kontrola. Prisutnost H. pylori Netlogu u kontrolnoj populaciji je definirano pozitivnim rezultatima najmanje dva od četiri dijagnostičke testove: Serološka, ​​histologiju brzi ureaza ispitivanja i kulture. Ljudska DNK je pročišćena i genotipiziran za TLR4 Asp299Gly pregled polimorfizma po pyrosequencing za TLR4 Thr399Ile Netlogu s PCR-RFLP i IL8-251 Netlogu od strane sustava pojačanje vatrostalne mutacije (ruke) pregled -PCR. Rezultati pregled kontrolna skupina nije rak je utvrđeno da je u Hardy-Weinberg ravnoteže u polimorfnih lokusa studirao (hi-kvadrat HW = 0.58 za IL8-251 Netlogu, 0,42 za TLR4 Asp299Gly Netlogu i 0.17 za TLR4 Thr399Ile Netlogu). Frekvencije mutiranih alela (homozigota plus heterozigotnih) uspoređene su između predmeta i kontrole. Našli smo da nema značajne razlike za TLR4- Asp299Gly pregled [od 7,7% od distalnih GC bolesnika i 7,7% kontrola bez raka (p = 0,82)] i za TLR4 Thr399Ile pregled [1,3% GC pacijente i za 5 % od kontrolne populacije (p = 0,2)]. Nasuprot tome, za IL-8-251
A /T, 80,77% pacijenata GC i 66,4% u dobi kontrolne skupine spolu i imali barem jedan primjerak mutiranog alela (OR = 2,12, 95% CI = 1,1-4,2) (p = 0,023). pregled Zaključak pregled ovog istraživanja pokazali su da je IL8-251 * a pregled alel može biti povezana s razvojem distalnog karcinoma želuca u ovom meksičkom populacije. pregled pozadine pregled Helicobacter pylori
gotovo isključivo koloniziraju sluznicu sloj ljudskog želuca i žive u domaćinu već godinama, desetljećima ili možda doživotno. U oko 10% slučajeva, organizam povezan je s različitim kliničkim ishodima, uključujući i ne-čir dispepsija, peptičkog ulkusa i distalnog karcinoma želuca [1].
Oba domaćina i okolišni čimbenici su povezani s ovim kliničkim raznolikosti. Host faktori uglavnom se odnose na priznavanje bakterija od strane imunološkog sustava i varijacija u razini citokina kao odgovor [2, 3].
Prepoznavanje patogena je posredovana skupa rasplodnih stanica kodiran receptore koji se zovu receptori obrazaca za priznavanje (PRRS). Ti receptori prepoznaju očuvan molekularnih uzoraka, koji se dijele velike grupe mikroorganizama. Važan PRR je Toll-like receptor 4 (TLR4), receptor transmembranski koja prepoznaje niz liganada uključujući lipopolisaharida (LPS), koja se nalazi u staničnoj stijenci Gram-negativnim bakterijama kao što su H. pylori pregled [3 ]. Dva u jednom nukleotidu gena (SNP-ova) u TLR4 pregled gena, ASP-299 → gli i thr-399 → Ile prijelazima, su pokazala da će dovesti do hyporesponsiveness na LPS, smanjene gustoće epitela TLR4 i smanjuje upalni odgovor citokina LPS [ ,,,0],4]. Nadalje, genetske varijante citokina su također kritična za upalne reakcije, te nekoliko gena iz različitih puteva su povezane s raka želuca, uključujući interleukin (IL) -1B pregled, TNF pregled, IL-10 i pregled IL-8
[5-7]. pregled, IL-8 citokinima funkcionira kao za kemijsku pobudu kod neutrofila i limfocita. On je izvijestio da IL-8 povećava razina 10 puta u želučanom uzoraka raka u usporedbi s normalnim želučane tkivima. Dobro karakterizira SNP T /A na -251 lokusa je opisana i povezana s višim IL-8 produkcije i nekih bolesti [8-11].
Naš cilj je bio utvrditi da li je TLR4 Asp299Gly Netlogu, TLR4 Thr399Ile Netlogu i IL8-251 a /t na pregled polimorfizama su povezane s distalnim karcinoma želuca u dobro definiranom meksičkog stanovništva. pregled metoda
populaciji pregled smo proučavali 78 nesrodnih pacijenata s histološki potvrđenim distalni GC (srednja dob = 58.6y, medijan dobi = 60, raspon dobi: 22-84, F: M = 0,56). Također smo ispitivali 259 pacijenata bez histoloških dokaza o GC (prosječna dob = 57.1y, medijan dobi = 54, raspon dobi = 18-92, F: M = 1,17). Ova populacija je prethodno opisano [7]. Svi pacijenti su bili upisani u bolnici Universitario "Dr. José Eleutério González", Universidad Autónoma de Nuevo León. Lokalni Etičko povjerenstvo odobrilo studiju i pismeni informirani pristanak dobiven je od svih ispitanika.
Patohistološko preglede
Od svih kontrolnih pacijenata, osam uzorak biopsije dobivene su za histološki pregled, dva od manje zakrivljenosti, dva od veće zakrivljenosti , dva od incisura angularis, a dva iz prepyloric regiji. Kod pacijenata s distalnom GC najmanje 8 biopsije su dobiveni iz tumora za histološki pregled. Biopsija od slučajeva i kontrola su fiksirani, uklopljeni u parafin i obojeni hematoksilin.eozinskog eozinom. Iskusni patolog pregledao sve histološke slajdove.
H. pylori
status
H. pylori pregled statusa kontrolne populacije određena je histologiju, brzi ureaza testom (RUT), serologiju i kulturu , Za rutina, An sekundarnom biopsija je ispitivana je uhodanim nekomercijalnu testa [12]. Biopsija je stavljena u ispitnoj bočici, inkubiraju na 37 ° C i čitanje unutar 24 h. Promjena boje od narančaste do magenta ukazuje na pozitivan rezultat. Za serologiju, enzim vezanog imunosorbentnog ispitivanja (ELISA) je korišten da se pokaže prisutnost IgG protutijela kao što je opisano [13]. Pregled kultura izvedena je na dva corpus i dva antruma biopsije standardnim metodama. Biopsije su smješteni u 10% krvnom agaru (Becton Dickinson, Cockeysville, MD), te inkubira na 37 ° C u trajanju od najmanje jednog tjedna, pod uvjetima microaerobic. Sojevi su identificirani gram bojenje, oksidaze, katalaze i ureaze ispitivanja. Pregled Kontrolni pacijenti su smatrani H. pylori
zaraženo kad se najmanje dvije od dijagnostičkih testova bili su pozitivni.
Prevalencija H. pylori
infekcija kod pacijenata s rakom želuca određena je rezultat histologiju tek. pregled Genotipizacija pregled Genomska DNA bila je ekstrahirana iz periferne krvi od fenol-kloroformom isoamilic alkohola i precipitacijom s postupkom etanola. Amplifikacijski vatrostalne mutacija sustav (ARMS) -PCR postupak se koristi za genotip na IL8-251
polimorfizam kao što je prethodno opisano [14].
TLR4 Thr399Ile pregled polimorfizma određena je PCR-RFLP [15] i u TLR4 Asp299Gly pregled polimorfizam je određena metodom pyrosequencing projektiranom za tu studiju. U početku, PCRjeizvedenas primerima F-GAT TAG MAČKA ACT TAG ACT ACT ACC ATG TCC i R CCC TTT CAA TAG TCA CAC TCA CCA GG s reverzni primer biotinom. PCR uvjeti su bili 94 ° C kroz 5 min i 40 ciklusa na 94 ° C, 59 ° C i 72 ° C za 30 s svaka, i finalne ekstenzije na 72 ° C tijekom 5 minuta. Za pyrosequencing, biotinom PCR predlošci su imobilizirani na streptavidinom obloženim paramagnetske Sepahrose kuglica u puferu za vezanje. Bead-predloška kompleksi su isprane potapanja u 70% alkoholu i 0,5 M NaOH, a zatim se doda 45 ul pufera za žarenje koja sadrži 15 pmol od sekvencirajuća početnica 5'-CAT ACT TAG ACT ACT ACC TC-3 '. Žarenje održana na 80 ° C kroz 2 min. Real-time pyrosequencing je izvedena u automatiziranom 96 i pyrosequencer PSQ SNP 96 (Pyrosequencing AB, Uppsala, Švedska) pomoću enzima i supstrata preporučene od strane proizvođača. Pregled, statistička analiza
Hardy-Weinberg ravnoteže alela kod pojedinog lokusa ispitana je hi-kvadrat statistika. Statistički značajne razlike utvrđene su Studentov t
testa, hi-kvadrat i Fisher točnim testu, dva repom. Vjerojatnost (p) vrijednost < 0.05 se smatra statistički značajnom. omjeri izgleda (OR) s 95% intervala pouzdanosti (CIS) izračunate su pomoću softvera Epi-Info 2000 (Centar za kontrolu i prevenciju bolesti, Atlanta, Ga.). Tri analize su izvedene, u kojem su bili uključeni svi slučajevi i kontrole, drugi u kojim slučajevima se usporediti samo s H. pylori pregled + kontrola i trećoj analizi u kojoj su kontrole za stanovništvo su odgovarale 5 godina starosti i spol u slučajevima raka.

• Želučani Helicobacter pylori infekcija povezuje s povećanim rizikom od kolorektalnog polipa u afričkim Americans
• Fosforilirani Smad2 u poodmakloj fazi želučani Carcinoma