Prognózisa jelentősége HER-2 /neu túlzott mértékű expressziója /amplifikáció kínai betegekben kuratív kimetszett gyomorrák után a ToGA klinikai vizsgálat

Prognózis jelentősége HER-2 /neu túltermelése /erősítés kínai betegek gyógyítására kimetszett gyomorrák után ToGA klinikai katalógusa Abstract Background katalógusa katalógusa HER-2 /neu-célzott kezelés sikeresen alkalmazható előrehaladott gyomorrák rák, de a szerepe a HER-2 /neu a gyomorrák prognózisa még nem tisztázott. Ebben a vizsgálatban vizsgáltuk az összefüggést a HER-2 /neu expresszió és amplifikáció valamint ezek kapcsolata klinika eredmények betegeknél kuratív kimetszett gyomorrákban.
Módszerek
építettünk szöveti microarray tartalmazó blokkokat > 70% a gyomorrák szövet és kiegyenlített szomszédos normál szövetben gyomor- 227 beteg. Expression of a HER-2 /neu-fehérjét ezekben a mintákban alkalmazásával analizáltuk immunhisztokémiai festéssel. Amplifikációja HER-2 /neu-t szintén analizáltuk az azonos minták fluoreszcens in situ
hibridizáció. Adatok klinikopatológiai jellemzői és a vonatkozó prognosztikai faktorok ezekben a betegekben elemezték.
Eredmények
a 227 gyomorrák mintákat, 11,89% -a volt pozitív a HER-2 /neu túlzott mértékű expressziója /amplifikáció az új pontozási rendszer. A HER-2 /neu túlzott mértékű expressziója /amplifikáció szorosan korrelál a Lauren típusú, mértékű megkülönböztetést, a tumor mérete és nyirokcsomó-metasztázis. HER-2 /neu túltermelése /erősítés megjósolt rossz túlélési egyváltozós elemzés, de nem a Cox-féle arányos kockázati modellt. Katalógusa Következtetés
HER-2 /neu túltermelése /erősítés nem független előrejelzője betegek túlélésének gombabetegség eltávolított gyomorrákban. katalógusa Kulcsszavak katalógusa FISH gyomorrák HER-2 /neu IHC Prognózis Háttér katalógusa Bár az előfordulási gyomorrák csökken világszerte, még mindig viszonylag magas Kínában 420.000 újonnan diagnosztizált betegek száma évente. A halálozási arány a gyomorrák Kínában a harmadik helyen áll az összes rákos halálozás, 320.000 betegek közötti időszakra vonatkozó 2004-2005 [1]. Bár már nagy javulás a korai diagnózis a gyomorrák, kombinálva a közelmúltban elért sebészeti technikák és széles körű felhasználása a kemoterápia és a radioterápia, az 5 éves túlélési arány a gyomorrák továbbra is olyan alacsony, mint 20% -ról 30% [ ,,,0],2]. katalógusa célzott terápia egy új trend a rák kezelésében javítják a teljes túlélést daganatos betegeknél. Ebben a tekintetben a gyomorrák, molekulárisan célzott terápia is egyre állapotát. Az antiangiogén terápia és az anti-epidermális növekedési faktor receptor-terápia alakultak, mint egy új remény [3], különösen az anti-HER-2 gyógyszer, a trasztuzumab. Szerint a ToGA klinikai vizsgálat számolt 2010-ben [4] a betegek, akiknek a HER-2 /neu túlzott mértékű expressziója a kemoterápiát és a trastuzumab volt jelentős hosszabb medián teljes túlélés 13,8 hónap nélkül további káros mellékhatások. Shitara munkatársai katalógusa. is beszámolt, hogy a betegek, akik a HER-2-pozitív előrehaladott gyomorrák volt jobb a prognózisa, mint a betegek, akik negatívak voltak a HER-2 kezelve trastuzumab [5]. Mindezek azt mutatják, hogy a HER-2 /neu-célzott kezelés nagy lehetőséget javításában kezelésére gyomorrák.
Oncogene HER-2 /neu-t eredetileg felfedezett kémiailag indukált patkány neuroglioblastomas [6], és a kromoszómán található 17q21 és kódok transzmembrán glikoprotein, 185kD. A fehérje tartalmaz egy extracelluláris ligandum-kötő doménjét 653 aminosav, egy membrán-áthidaló régió 654-675 aminosavból áll, és egy citoplazmatikus protein-tirozin-kináz-doménjét 675 1255 aminosav. Ez az egyik a tagok a humán epidermális növekedési faktor receptor (HER) család, amely magában foglalja a HER-1 (epidermális növekedési faktor receptor), a HER-2 /neu, HER-3 és a HER-4 [7]. Ezek közül a HER-2 /neu fontos szerepet játszik a normális fejlődés, a differenciálás és az apoptózis a sejt. Gene amplifikációját és túlzott expresszióját a HER-2 /neu-számoltak be a sok ráktípus, beleértve a petefészek [8], a tüdő [9] és prosztatarák [10], amellett, hogy a mell [11]. Például kimutatták, hogy a HER-2 /neu túlzott mértékű expressziója volt kimutatható körülbelül 10% és 34% az invazív emlőrákok, és rossz prognózissal társul. Bár HER-2 /neu tekinthető független prognosztikai tényezője a mellrák, prognosztikai szerepe a gyomorrák továbbra is ellentmondásos, mert több tanulmány keletkezett ellentmondó eredményeket [12-16].
Felmérni a szövetség státusza között Her -2 /neu és prognózisa kínai gyomorrákos betegeknél, végeztünk egy (azt hiszem "a" jobb, az azt jelenti, ez a tanulmány) tanulmány megvizsgálja a két kifejezés és erősítést Her-2 /neu tumorokban gombabetegség eltávolított gyomorrák és korrelált ezeket a méréseket a klinikopatológiai és prognosztikai eredményeket a betegek. katalógusa módszerek
betegek és klinikopatológiai információgyűjtés
összesen 227 gyomorrákos betegeknél a patológiai levéltárában Yangzhong Népi Kórház került ebbe tanulmány 2002 és 2004 között valamennyi beteg (kivéve azokat minősíteni T1N0M0) átesett kuratív műtét és kapott egy hasonló adjuváns kemoterápiás kezelés (5-fluorouracil és ciszplatin). Klinikopatológiai változók például az életkor, a nem, a szövettani típus és patológiai stádium gyűjtötték áttekintésével orvosi grafikonok és patológia rekordokat. Ezek közül a betegek, 157 volt férfi és 70 nő volt, akiknek életkora 24 és 79 év (medián 60 év). Tumor szereplő területek 28 antrumban 50 corpus és 149 cardia. A betegeket napjától műtét halálig, vagy cenzúrázzák 2008. december 31, ami a nyomon követési időszak 1-108 hónap (medián 64 hónap). A tanulmány által jóváhagyott intézményi Etnikai Bizottsága (egyenértékű intézményi Review Board). Mivel ez egy retrospektív tanulmány az archív szövetminták, az Intézményi Etnikai Bizottság lemondott a szükségességét írásos beleegyezését. Katalógusa Tissue microarray építőipari katalógusa Röviden, H & E festett metszeteket készítettünk az elsődleges tumor blokkok meghatározása két reprezentatív tumor régiók és szomszédos normál gyomor szövetekben. Reprezentatív tumor régiókat definiált tumor szilárd területek, amelyek több mint 75% a rákos sejtek nélkül nekrózis. Normál gyomor szöveteket véletlenszerűen kiválasztott szomszédos egy tumor a távolság nagyobb, mint 5 cm, elkerülve a vérzés területeken. Tumor tipizálás és osztályozás szerint végeztük Lauren és az Egészségügyi Világszervezet (WHO) kritériumoknak. Minden gyomorrákos betegeknél került színre a hetedik kiadása a Nemzetközi Rákellenes Unió Tumor-Node-metasztázis (TNM) staging rendszer. Tissue hengerek (1,5 mm átmérő) ezután lyukasztott a meghatározott régiók a blokk egy szövet microarrayer (Gentury, IL, USA) és a bevitt recipiens paraffin blokkokat. Két paraffinba ágyazott szövet microarray (TMA) blokkokat készítettünk. § A kapott TMA blokkok átkerültek tárgylemezre. Voltak összesen két TMA tartalmazó 227 daganatos szövet foltok és 135 szomszédos normál szövetben gyomor foltok minden, a rendelkezésre álló e tanulmány (együttműködve Shanghai Biochip, Shanghai, Kína). Katalógusa Immunhisztokémia katalógusa immunhisztokémia (IHC) festéssel a HER-2 /neu végeztek TMA szakaszok. Formalin-fixált, paraffinba ágyazott metszeteket viaszmentesített xilol és rehidráljuk osztályozni alkohol. Az endogén peroxidáz aktivitás elbontottuk 3% -os hidrogén-peroxidot, majd a szakasz mostuk vízben, és az antigén visszakeresett és elhelyezni a citrát pufferben. A metszeteket mossuk foszfáttal pufferolt sóoldat, pH = 7,2. Az elsődleges monoklonális egér antitest ellen humán HER-2 /neu-fehérje (MAB-0198, Maxin Biotech, Fujian, Kína) alkalmaztunk 1 órán keresztül az inkubátorban, 37 ° C-on. Anti-HER-2 antitest (Dako REAL, En Vison, HRP Rabbit /egér, Dako, Carpinteria, CA, USA) visszük. Diaminobenzidine oldatot használni, mint egy kromogén.
Fluoreszcens in situ
hibridizációs
Fluoreszcens in situ
hibridizáció (FISH) analízist alkalmaztunk a szakaszok. Amplifikálása a HER
-2
gén határoztuk FISH segítségével Vysis kettős színű, kettős fúziós transzlokáció próba készlet vásárolt Abbott Molecular Inc. (DesPlaines, IL, USA). Röviden, a metszeteket paraffint, dehidratált, majd inkubáltuk 30% -os nátrium-hidrogén-szulfát 20 percen át 45 ° C-on. Miután mostuk 2 × SSC Nátrium-citrát-sósav puffer oldatban}, csúszdák kezeltük proteináz K-val 37 ° C-on 25 percig. Ezután hibridizálást végzünk egy éjszakán át 42 ° C-on nedves kamrában, majd a hibridizáció utáni mosások a denaturáló oldatot és 0,1% NP-40, 2 × SCC Nátrium-citrát-sósav puffer oldatban} szobahőmérsékleten. Végül, a lemezeket mostuk, és ellenfestettük 0,2 nmol /liter 4'-6-diamino-2-fenil-és alatt vizsgáltuk konfokális lézer pásztázó mikroszkópot LSM 510 (Carl-Zeiss, Jena, Németország).
Pontozása immunhisztokémia és fluoreszcens in situ hibridizáció katalógusa katalógusa HER-2 immunfestést szerzett az alábbi pontozási rendszer által elfogadott Hofmann a ToGA klinikai vizsgálatban: 0 pont, nincs membránfestôdést vagy < 10% festett sejtek; 1+, halvány /alig észrevehető hártyás reaktivitás 10% a sejtek vagy magasabb vagy reaktivitást csak egy része a sejtmembrán; 2+, gyenge vagy mérsékelt teljes vagy bazolaterális hártyás reaktivitás 10% a tumorsejtek vagy nagyobb; és 3+, erős teljes vagy bazolaterális hártyás reaktivitás 10% a tumorsejtek vagy magasabb. Rengeteg 0 és 1+ negatívnak tekintettük a HER-2 /neu fokozott expressziója és rengeteg 3+ pozitívnak tekintettük. Rengeteg 2+ tekintették túltermelése FISH megerősítette erősítés [4, 17]. Gene amplifikációt úgy definiáltuk, mint a rák sejtmagokat mutató aránya a HER-2 /neu a CEP17 (centromer szonda 17) ≥2, vagy amikor egy HER-2 /neu-jel klaszter volt megfigyelhető.
Összes mintát a TMA metszeteken gyomorrák áttekintették a két patológusok függetlenül, hogy meghatározzák tucat IHC. Mert disszonáns vélemények, a mintákat újra megvizsgálta a két patológusok, hogy konszenzust pontszámot. Katalógusa Statisztikai analízis katalógusa kategorikus adatok segítségével elemeztük χ katalógusa 2

• Preoperatív multidetektoros sorban számítógépes tomográfiás átmeneti limfatikus gyomorrák terjedése
• Az egyrészről az időtartama fluoropirimidin alapú adjuváns kemoterápia és a túlélés szakaszban II vagy III gyomor cancer