Imunohistokemijskom studija pasji spontanog želučane polyps

imunohistokemijskom studija pseće spontanih želučanih polipa pregled apstraktne pregled Pozadina pregled želučane polipa (GP) karakterizira luminalnih overgrowths strše iznad ravnine površine sluznice koja se može klasificirati kao non-neoplastična i neoplastične lezija. Kod ljudi, nedavna istraživanja su skrenuo pozornost na malignog potencijala nekih od tih lezija. Međutim, želučani polipi su rijetki lezije u pasa.
Nalazi pregled U ovoj studiji, prisutnost Helicobacter pregled spp., Stanični proliferativna aktivnost, potencijalni fenotipske promjene, COX-2 i ekspresije p53 u pasji spontanog želuca Istraživane su polipi. Izraz tih molekula je također studirao u normalnoj pasji želučane sluznice kako bi stekao dodatno znanje o važnosti njihovog gubitka ili prekomjernom ekspresijom u želučanih lezija.
Zaključci pregled normalnog izražavanja gotovo svih faktora vrednuje, zajedno s smanjena proliferativna aktivnost jasno ukazuje da se u pasa, spontani želučani polipi nisu samo rijedak nalaz, ali i benigne prirode
virtualni Slajdovi
virtualni slajd (e) za ovaj članak možete naći ovdje. http ... //www diagnosticpathol dručju diagnomx EU /vs /13000_ 2014_ 166 pregled ključnih riječi
Canine želučane polipi COX-2 CdX2 Helicobacter spp Ki67 p53 Uvod pregled želučane polipa (GPS) smatraju heterogena cjelina široko definirati kao luminalnih lezije strše iznad ravnine površine sluznice koja se može biološki klasificirani kao ne-maligne i maligne lezije. Kod ljudi, dalje klasifikacija oslanja se na evaluaciju histogenesis i neoplastičnih potencijala tih [1] lezija. Prema tome, među ne-maligne epitelne želučane polipa, tri podtipa priznaju: fundusa polipi žlijezda; hiperplastičnih polipi (i varijante) i neuroendokrini tumori polipi fundusa žlijezda pregled (neto). predstavljaju najčešći tip i histološki se odlikuju cistically proširene fundusa tipa žlijezde obložene spljoštene parijetalni stanice sa stupnjem arhitektonskog izobličenja. Površina se sastoji foveolar tipa epitel, a javlja se atrofični [1]. U hiperplastičnih polipi obično se promatraju u antruma i histološki sastoji u hiperplastičnih, izdužena i grananje foveolae postavljena u izobilju edematoznog i upaljene strome. Cistična dilatacija od jama je gotovo nepromjenjiv prisutan u dubljim dijelovima i površina je omeđena jednim slojem foveolar tipa epitela [1]. Hiperplastične polipi se javljaju na pozadini od gastritisa i njegov razvoj je posljedica pretjeranom sluznice odgovor na ozljedu. Oni se odnose na Helicobacter pylori
(H. pylori
) infekcije, a neki autori su zaključili da je H. pylori pregled iskorjenjivanje uzroka potpuna regresija ili značajno smanjenje u veličini. Važno je biti svjestan da žarišta displazije ili intramucosal karcinoma može sresti u ovim lezijama [1], [2]. Na kraju, NET, ili takozvani "karcinoidnih" tumori histološki se sastoji od gnijezda, uzice, tubula i nakupinama stanica koje uglavnom postavlja između foveolar osnovi, bez ometanja ukupnu polip arhitekture [3].
Suprotno dokumentirano napredovanje u ljudskoj raka debelog crijeva, udruga liječnika opće prakse s razvojem raka želuca još uvijek nije u potpunosti uspostavljen ali studije naglašavaju maligni potencijal tih lezija. GPS neuobičajeno kod pasa i povremene Slučajni nalazi za vrijeme endoskopije ili obdukcije [4]. Sporadični pseći liječnici opće prakse su rijetke i relevantna literatura je rijetka. Tek nedavno Taulescu et al. [5] opisao patohistološke značajke 15 lezija. Što se tiče ne-maligne Polipoidne izraslina, Svjetska zdravstvena organizacija (WHO) za klasifikaciju tumora u domaćih životinja predstavlja najjednostavniju shemu u kojoj se priznaju samo dva entiteta: hiperpla (regenerativnog) i upalni (benigna limfna) polipi. Prvi su histološki identičan ljudskom istoimene lezije i zlatni standard kasnije je prisutnost normalnog epitela prekriva jezgru granulaciju tkiva infiltrirana od strane raznih upalnih stanica, ponekad u pratnji limfoidnim agregatima s istaknutim germinalnim centrima [4].
Nekoliko studija pokušava uključiti neke od markeri za maligne transformacije u ljudskim želučanih hiperplastičnih polipa su provedena, međutim, određene molekule koje mogu identificirati što polip će malignoj još nije pronađen. Kod psa, ne zna se u tom pogledu.
Ciklooksigenaze (COX) je enzim koji omogućuje sintezu prostaglandina i drugih eikosanoida iz arahidonske kiseline. COX-2 izoforma ima važnu ulogu u razvoju raka želuca kroz apoptoze i inhibicije povećane proliferacije stanica. Iako je nekoliko studija izvijestio povećanu ekspresiju COX-2 u pseći raka nema dostupnih podataka u vezi s COX-2 u pseći želudac tkiva [6].
Cellular kinetiku je mislio da sudjeluje u napredovanju prema raka želuca. Ki-67 antitijelo se koristi za mjerenje indeks proliferacije određenog tkiva uz pretpostavku da veći Ki-67 pokazuje aktivnost stanica tumora i predviđa daljnje ponašanje određenog patologije [7]. Pregled maligne transformacije ljudskog hiperplastične prakse je povezana s displazija, sa p53 igraju ključnu ulogu u tom procesu. [8] Prekomjerna ekspresija mutiranog p53 je u korelaciji s patološkim parametrima tumora agresivnosti i lošom prognozom u ljudski želudac karcinom [9]. Pregled Prema Correa modela [10], ljudski rak želuca se razvija u nekoliko koraka procesu od kroničnog aktivnog gastritisa do intestinalne metaplazije (IM), displazije, i na kraju, rak želuca. IM smatra prekursor lezije, koja se sastoji od transdiferencijacija želučane sluznice u crijevnom fenotipu, naznačen time nenormalnom ekspresijom homeobox transkripcijskog faktora CdX2 [11]. Izražavanje CdX2 u pseće prakse nikada nije karakterizira.
Tako rijetko lezije, molekularna svojstva i neoplastične potencijal pseći prakse ostaje područje interesa. Svrha ovog istraživanja bila je opisati neke molekularne značajke tih lezija, kako bi se bolje razumjeli svoje biološko ponašanje. Osim toga, izraz tih molekula u normalnoj sluznici želuca (NGM) istraživana je ocijeniti značaj njihovog gubitka ili prekomjernom ekspresijom u želučanih lezija pregled Životinje &. Metode
Četiri normalni pseći antralne želučane sluznice primjerci i devet pseći antralne GPS (Slika 1A), primio je između 2007. i 2013. godine, izabrani su iz arhiva Laboratorija Veterinarskog patologiju ICBAS-a (Portugal) i patologiju Odjela za FVM , Cluj-Napoca (Rumunjska). Tkiva su fiksirane u 10% puferiranim formalinom i prevučeni parafinom. Serijski uzastopnih sekcija 3 um debele su napravili, jedan za rutinsko histološku dijagnozu i ostalima za imunihistokemijski studija. Slika 1 Morfološke i imunohistokemijski značajke pseći želudac polipa. (A) bruto aspekt; (B) Hiperplastične polipa; (C) upalni polip; (D) (E) H. pylori pregled immunoexpression. (F) COX-2 immunoexpression; (G) Ki-67 immunoexpression; (H) p53 immunoexpression. Umetnuti: intratubulusne seminom (+ kontrola) (I) CdX2 immunoexpression. Umetnuti: normalno crijevo (+ kontrola). Morfološke i imunohistokemijski značajke pseći želudac polipa. (A) Bruto aspekt pyloric želučane sluznice prikazuje osamljeni polipa (razgraničena područja) (slučaj 9); (B) i (C) Mikroskopski pregled hematoksilinom i eozinom umrljan slajdovima otkrivajući hiperplastične polipa (Slučaj 4) i upalni polipa (case 8). Bar = 500 um i 100 um, redom. (D) Fotomikrografija pokazuje pozitivnu H. pylori pregled izraz u hiperplastične polipa (slučaj 2). Bar = 200 um. (E) Detalj prethodnom slučaju isticanja velike količine Helicobacter pregled spp. organizmi unutar želučanim žlijezdama. Bar = 10 um. (F) Fotomikrografija otkriva jake i difuzne ekspresija COX-2 u razgranatom foveolar epitela hiperplastične polipa (slučaj 1). Bar = 200 um. Umetnuti predstavljanja detalj izražavanja COX-2 u foveolar epitela; (G) Imunološko Ki-67 u hiperplastične epitela (slučaj 3: 32,1%). Bar = 200 um. Umetnuti pokazuje detalj KI-67 izražavanja u prevlaci i na bazi žlijezde. (H) Fotomikrografija otkriva negativan imunohistokemijsku reaktivnost p53 u hiperplastične polipa (slučaj 2). Bar = 200 um. Tkiva psećeg intratubulusne seminom korištena je kao pozitivna kontrola za p53 (umetnuta slika). (I) Negativan CdX2 izraz u hiperplastične polipa (slučaj 1). Bar = 200 um. Tkiva psećeg normalnog crijeva je korištena kao pozitivna kontrola za CdX2 (umetnuta slika). Imunoperoksidaznog-diaminobenzidinu mrlja s Mayerovim hematoksilin counterstain (D-I).
Sekcije samostalno ispitana su tri patologa. Normalna tkiva su kao takvu prema Prachasilpchain et al. [10] i bili su negativni na prisutnost Helicobacter pregled spp. (Potvrđeno modificirane Giemsinom bojom i anti-H. Pylori pregled imunohistokemije). Opće prakse su klasificirani prema klasifikaciji SZO za domaće životinje dijagnostički kriteriji. [3] pregled za imunohistokemijske studiji primijenjena panel protutijela specifičnih za nekoliko antigena (tablica 1). Novolink Max-Polymer sustav detekcije (Novocastra) je korištena u skladu s proizvođačevim instructions.Table 1 antitijela se koriste za pseći želudac tkiva imunohistokemijski pregled Marker
Klon
Dobavljač
Razrjeđivanje
antigena raskrinkavanje
razdoblje inkubacije
Pozitivna kontrola
H. pylori
Polyclonal pregled Zytomed, Deutschland pregled 1: 200 pregled CB /PC pregled, na Netlogu ljudska želučane sluznice s H. pylori
COX-2
SP21
NeoMarkers, SAD
1:75
CB /PC pregled, na Netlogu pasji tumori mliječnih žlijezda pregled p53 pregled Anti-p53
Novocastra, UK pregled 1: 400 pregled CB /PC pregled, na Netlogu pseći intratubulusne seminom pregled CdX2 pregled AMT28 pregled Novocastra, UK pregled 1: 300 pregled CB /PC pregled, na Netlogu Pasji normalno crijeva
Ki-67
MIB-1 pregled Dako Danska pregled, 01:50 pregled CB /PC pregled, limfom na Netlogu Pasji visoki stupanj pregled CB
citrat pufer; PC lonac na pritisak. Pregled na Netlogu preko noći. Pregled Otkrivanje Helicobacter pregled spp. je ocijenjeno kao: negativna, bez organizama, ili pozitivna, prisutnost Helicobacter pregled spp. Bakterijske kolonizacije gustoća je kvantitativno: + pregled, malo (< 10/400 ×); ++ Pregled, umjeren (10-50 /400 ×), a +++, velik broj organizama (> 50/400 ×). Bakterije Lokacija zabilježen je: 0 = nema; 1 = površine sluznice i želučanih jame; 2 = 1 + lumen želučanih žlijezda (400 ×) [12]. COX-2 immunoexpression je zabio za postotak obilježenih stanica (< 25%; 25-50%; 51-75%; > 75%) i intenzitet označavanje (0 negativna; +, slab; ++, umjerena; +++, jak). Ki-67 indeks obilježavanja je definirana kao postotak pozitivnih jezgri određuje brojanjem najmanje 1000 jezgre u izabranim poljima (× 400) [8]. Osim toga, imunoreaktivnost je procijenjena s obzirom na želučane žlijezde podijeljenih u tri zone: Zona 1 (želuca jama); Zona 2 (tjesnac /proliferativna zona) i zona 3 (žlijezda baza) [13]. p53 i CdX2 imunoreaktivnost definirani su kao pozitivni ako razlikuje nuklearna bojanje je priznat u najmanje 10% stanica [8], [14]. pregled nalaza
dostupnih kliničkih podataka, histološka klasifikacija lezija i glavni imunohistokemijske rezultati, s obzirom na kriterije predložene za svaki protutijela, prikazani su u tablici 2.Table 2 dostupne podatke o životinjama, histološki klasifikaciju pasa želučanog tkiva i glavni su imunohistokemijski nalaz
Case
Pasmina pregled
Spol /dob (godine)
Histološka dijagnoza
Helicobacter pregled spp.
COX-2
KI-67 (%)
pregled p53
CdX2
SE
DG
1 pregled Rotvajler pregled M /12 pregled Hiperplastične polip
+++ 2 izvoznici > 75% /+++ izvoznici > 75% /+++ pregled 36,12,3
- - pregled 2
irski seter pregled F /12 pregled Hiperplastične polyp
+++2
>75%/+++
>75%/+++
31,42,3
-
-
3
Poodle
F/12
Hyperplastic polip pregled +++ 2 izvoznici > 75% /+++ izvoznici > 75% /+++ pregled 32,12,3 pregled -
- 4 pregled argentinski mastif pregled F /9 pregled Hiperplastične polip pregled ++ 2 izvoznici > 75% /+++ izvoznici > 75% /+++ pregled 28,92 3 pregled -
- 5 pregled Rotvajler pregled F /14 pregled Hiperplastične polip pregled 2 izvoznici > 75% /+++ izvoznici > 75% /+++ pregled 30,92,3 pregled -
- 6
Mješanac pregled F /16 pregled Hiperplastične polyp
++2
>75%/+++
>75%/+++
16,72,3
-
-
7
Poodle
M/13
Inflammatory polip pregled ++ 2 izvoznici > 75% /+++ izvoznici > 75% /+++ pregled 31,52,3 pregled -
- 8
Njemački ovčar pregled M /9 pregled upalni polip pregled ++ 2 izvoznici > 75% /+++ izvoznici > 75% /+++ pregled 10,82
-
- 9 pregled Boxer pregled M /10 pregled Hiperplastične polip pregled jednog izvoznici > 75% /+++ izvoznici > 75% /+++ pregled 4,62 pregled -
- 10 pregled Mješanac pregled M /2 pregled NGM pregled 0 izvoznici > 75% /++ + pregled > 75% /+ pregled, 18,32 pregled -
- 11 pregled Pudlica cross
F/15
NGM
0
>75%/+++
>75%/++
23,62
-
-
12
Boxer
M/4
NGM
0
>75%/+++
>75%/+
15,62
-
-
13
Mixed uzgajati pregled M /8 pregled NGM
0 izvoznici > 75% /+++ izvoznici > 75% /++ pregled 22,82
- - pregled M pregled muškarac, F pregled ženska pregled COX-2. SE, površine epitela; DG, dublje žlijezde. ≫ 75% imunopozitivne stanica, + slab, ++ umjerena, +++ jak intenzitet pregled Helicobacter pregled spp .: + malo. ++ Umjeren broj; +++ Velik broj organizama. Bakterije položaj 0, nema; 1 = na površini sluznice i unutar želuca jame; 2 = 1 i više lumen želučanih žlijezda; KI-67: zona 2, prevlaka i zona 3, žlijezda baza; p53 i CdX2: -., negativni pregled Od devet GP lezije, sedam su bili klasificirani kao hiperplastičnih polipa (slika 1B) i dvije kao upalni polipi (Slika 1C). su identificirani Nema znakova displazije. Svi liječnici opće prakse pokazala Helicobacter pregled spp. organizmi (Slika 1D), pretežno se nalazi u lumen želuca žlijezde (Slika 1E) (Tablica 2).
Razlike na COX-2 immunoexpression između NGM i GPS su minimalni (Tablica 2). Obje skupine predstavili jak ekspresija COX-2 u više od 75% želučane površnog epitela. Duboko, želučani žlijezde NGM pokazao slab do umjeren ekspresija COX-2, dok su žlijezde prakse pokazali snažan ekspresija COX-2 (Slika 1F). Ipak, liječnici opće prakse predstavili difuzna COX-2 citoplazmi nakupljanje u epitelnim stanicama.
Proliferativni indeks opće prakse bio je veći (srednja vrijednost 24,8%) nego NGM (srednja vrijednost 20,0%). Ki-67 signal je otkriven u proliferativni pretinac NGM dok se u GPS sustavu, to etiketiranje često dosegao zoni 3 (Slika 1G). Pregled I p53 i CdX2 Imunodetekcija bio posve negativan u svim slučajevima pseće NGM i GPS (Slika . 1H i ja)
diskusije & Zaključak pregled studija o COX-2 u ljudskoj NGM izvijestio nedostatak [15], [16], slabe [17] ili generalizirani izraza [18]. Te razlike su možda povezana s primarnim protutijelom (monoklonska ili poliklonska) i na sustav bodovanja usvojene za procjenu imunološkom reakcijom. Dosljedna izraz COX-2 u NGM može objasniti dvije hipoteze: (1) COX-2 je konstitutivno izražena u pasji želučane sluznice; ili (2), novija istraživanja su pokazali da H. pylori
inducirana ekspresija COX-2 u ljudskom sluznice želuca i McCarthy i sur. [19] su zaključili da ekspresija COX-2 u antralnog sluznica je smanjena, ali ne eliminira u epitelu nakon uspješnog iskorjenjivanje H. pylori
. Sung et al. [15] Također je pokazala da iako iskorjenjivanje H. pylori
, samo je skromno smanjenje COX-2 u želučanom epitela, iako je ekspresija COX-2 u lamina propria znatno je smanjen. Unatoč ovi psi se trenutno negativan za Helicobacter pregled spp., Nije moguće isključiti prethodnu infekciju tim organizmima koji bi mogao opravdati uporni ekspresiju COX-2.
Prekomjerna ekspresija COX-2 u dublje žlijezde opće prakse može objasniti prisutnosti različitih količina Helicobacter pregled organizama u ovom želuca kupe koja je, slično kao što se događa kod ljudi koji imaju H. pylori, pregled može dovesti do povećana ekspresija tog enzima kroz proizvodnju proupalnih citokina [15] -. [17]
Po definiciji, GP je hiperproliferacija od želučane sluznice, tako njenog početka, nužno je povezano s povećanjem stanične prometa i mitotičnog djelovanja. Yao i sur. izvijestio proliferacije indeks 22,2% u ljudskim hiperplastičnih prakse. Malo razlika u postotaka dobivenih u obje studije se mogu odnositi na predmetne vrste (ljudski vs pas) i /ili s uzorkom (22 vs 9 slučajeva). Osim toga, povećana proliferaciju sluznice želuca bila je povezana s H. pylori pregled [20] Budući da je infekcija kratko povećava apoptozu površine i proliferacije stanica, a zatim proširuje proliferativni zonu dublje u žlijezda, vjerojatno kao kompenzacijskog odgovora [21] .
proliferativni zonu u antralnog želuca nalazi se u donjoj trećini tipičnih žlijezde jedinica [21], u neposrednoj blizini baze želučanih jama, što predstavlja mjesto na kojem stanične obnove. Ovo je vrlo kratak područje, s vrlo malo pažnje ili bez mitoza, gotovo je unidentifiable u neaktivnom želučane sluznice. U ljudskom NGM, Ki-67 signal prisutan je samo u proliferativne odjeljka [13] kao takva u našem istraživanju (Tablica 2). Međutim, u liječnika opće prakse, ovo etiketiranje često dosegao zona 3 (Slika 1G), vjerojatno zbog toga što se u prevlaci postoje stanice koje se stalno obnavljaju drugima koje migriraju dvosmjerno, na površinu sluznice i dolje u bazu žlijezda, kao što su diferencijaciju u zrele stanice [21]. pregled, Carrasco i sur. [22] opisan p53-pozitivno bojanje u oko 94,1% od pseće želučanog karcinoma. Naši rezultati pojačali prethodne studije na ljudima u kojem je p53 priznate samo u (pred) maligne komponenti [9], a ne ne-tumorskih želučane sluznice [18] ili liječnika opće prakse [8]. Nadalje, Guo et al. [2] pronađena suradnju ekspresiju i CA19-9 i p53 ograničenu na malim područjima atipičnih epitelnih stanica, procjenjuje se kako je adenokarcinom, prisutna u ljudskom hiperplastične foveolar polipa. Osim toga, Ki-67 indeks bio je viši u tim malignim foci usporedbi s okružen sluznice želuca.
Doster et al. [23] opisao izraz CdX2 unutar žarišta metaplastičnim promjene, naime vrčastih stanica, prisutan u svim slučajevima pasa želučanog adenokarcinoma uključene u svojoj studiji. IM je neobična pojava u pasa i do danas nema opisa vezano uz njezinu spontanu pojavu. Kod ljudi, IM obično izazvana stalnim nadražaja sluznice želuca i H. pylori pregled infekcija ostaje važan pokreće faktor. Molekularni putova uključenih u pasji regulacije i funkciju CdX2 su nepoznati. Međutim, budući da je izraz za isti faktor transkripcije je povezana s održavanjem /razvoj crijevne fenotipa u ljudi i pasa, hipoteza da CdX2 slično regulirana u obje vrste je uvjerljivo (podatak nije objavljen). Pregled Helicobacter
spp. prisutan u slučajevima pseći prakse mogu razviti različite strategije kolonizacije, infekcije i patogenost od onih prakticiraju H. pylori
kod ljudi, na kraju opravdava rijetkost IM u želucu psa. Stoga putovi odgovorne za indukciju ekspresije CdX2 pasa može se razlikovati od onih koji su već opisani u ljudi. Potrebna su daljnja istraživanja kako bi potvrdili ovu hipotezu.
Iako određene patološke značajke polipa u korelaciji s rizikom od razvoja raka kod ljudi, kod pasa to je još uvijek nije moguće utvrditi koja lezije će napredovati do raka. U zaključku, ova studija sugerira da pseći sporadični liječnici opće prakse su rijetki nalaz i benigne prirode. Pregled deklaracija
priznanja
I. Amorim (SFRH /BD /76237/2011) priznaje FCT, portugalski zakladu za znanost i tehnologiju (FCT), za financijsku potporu (PTDC /CVT /117610/2010). IPATIMUP je izvanredni Laboratorij za portugalskog Ministarstva znanosti, tehnologije i visokog obrazovanja te je djelomično podržava FCT. Ovaj članak je objavljen u okviru Europskog socijalnog fonda, Operativni program za razvoj ljudskih potencijala 2007-2013 (POSDRU /159 /1,5 /S /136.893).
Autori "izvorni podnio datoteke za slike
Ispod su linkovi na i vlastita originalna poslanih datoteka za slike. Izvorna datoteka 13000_2014_166_MOESM1_ESM.gif autora za sliku 1 suprotstavljenih interesa pregled Niti jedan od autora ovog rada ima financijski ili osobni odnos s drugim osobama ili organizacijama koje bi mogle utjecati na neprimjereno ili pristranosti sadržaj papira. pregled

• Makroskopski opseg želučane sluznice atrofije: povećan rizik za jednjaka karcinoma pločastih stanica u Japanu
• Faktori rizika za dubinu infiltracije u diferenciranim depresivnog početkom želučanog karcinoma: Preliminarna analiza