En immunhistokemisk undersøgelse af hunde spontane gastriske polypper

En immunhistokemisk undersøgelse af hunde spontane gastriske polypper
Abstrakt
Baggrund
gastriske polypper (GP) er karakteriseret ved luminale overvækst rager over planet af slimhindeoverfladen der kan klassificeres som ikke-neoplastiske og neoplastiske læsioner. Hos mennesker har nyere undersøgelser gjort opmærksom på det maligne potentiale af nogle af disse læsioner. Men gastriske polypper er ualmindelige læsioner hos hunde.
Resultater
I denne undersøgelse tilstedeværelsen af ​​Helicobacter
spp., Den cellulære proliferative aktivitet, potentielle fænotypiske ændringer, COX-2 og p53-ekspression i canine spontan gastrisk polypper blev undersøgt. Udtrykket af disse molekyler er også undersøgt i normal hund maveslimhinden for at få yderligere viden om betydningen af ​​deres tab eller overekspression i gastriske læsioner.
Konklusioner
normale udtryk for næsten alle de faktorer, evalueret sammen med den reducerede proliferative aktivitet er stærkt tankevækkende, at i hunde, spontane gastriske polypper er ikke kun en sjælden fund, men også af godartet natur i virtuelle Slides
virtuelle slide (er) for denne artikel kan findes her:. http :... //www diagnosticpathol nologi diagnomx eu /vs /13000_ 2014_ 166
Keywords
canine gastriske polypper COX-2 CDX2 Helicobacter spp Ki67 p53 Introduktion
gastriske polypper (GPS), anses en heterogen enhed defineres bredt som luminale læsioner rager over planet for slimhindeoverfladen der kan biologisk klassificeret som ikke-neoplastiske og neoplastiske læsioner. Hos mennesker yderligere klassificering afhængig af evalueringen af ​​Histogenesen og neoplastisk potentiale i disse [1] læsioner. Følgelig blandt de ikke neoplastiske epitelceller gastriske polypper, er tre undertyper anerkendes: fundiske kirtel polypper; hyperplastiske polypper (og varianter) og neuroendokrine tumorer (NET).
fundiske kirtel polypper repræsenterer den mest almindelige type, og de er histologisk karakteriseret ved cistically udvidede kirtler fundiske type foret med flade parietalceller med en grad af arkitektonisk forvrængning. Overfladen omfatter foveolar typen epitel, som kan forekomme atrofisk [1]. De hyperplastiske polypper er typisk observeret i antrum og histologisk består i hyperplastiske, aflange og forgrening foveolae sat i en rigelig ødematøs og betændt stroma. Cystisk dilatation af miner er næsten uvægerligt til stede i de dybere dele og overflade er foret med et enkelt lag af foveolar-typen epitel [1]. Hyperplastiske polypper opstår på baggrund af gastritis og dens udvikling er en konsekvens af en overdreven slimhinde respons på skade. De er relateret til Helicobacter pylori Hotel (H. pylori
) infektion og nogle forfattere konkluderede, at H. pylori
udryddelse årsag komplet regression eller signifikant fald i dens størrelse. Det er vigtigt at være opmærksom på, at foci af dysplasi eller intramucosal karcinom kan opstå i disse læsioner [1], [2]. Endelig er NET eller de såkaldte "carcinoid" tumorer histologisk sammensat af reder, snore, tubuli, og klynger af celler, der overvejende er indskudt mellem den foveolar grundlag, uden at forstyrre den overordnede polyp arkitektur [3].
Modsætning til dokumenterede progression i human kolorektal cancer, sammenslutningen af ​​læger med udviklingen af ​​mavekræft er stadig ikke fuldt etableret, men undersøgelser understreger maligne potentiale af disse læsioner. Praktiserende læger er ualmindelige hos hunde og er lejlighedsvis tilfældige fund under endoskopi eller postmortem undersøgelser [4]. Sporadiske hunde læger er sjældne og den relevante litteratur er knappe. Først for nylig Taulescu et al. [5] beskrev de histopatologiske træk af 15 læsioner. Med hensyn til ikke-neoplastiske polypagtige vækster, World Health Organization (WHO) til klassificering af tumorer hos husdyr præsenterer en enkleste ordning, hvor kun to virksomheder indregnes: den hyperplastiske (regenerativ) og inflammatoriske (godartet lymfoide) polypper. Førstnævnte er histologisk identisk med den humane enslydende læsion og guldstandarden af ​​senere er tilstedeværelsen af ​​en normalt epitel, der dækker et granulationsvæv kerne infiltreret af en række inflammatoriske celler, undertiden ledsaget af lymfoide aggregater med fremtrædende kimcentre [4].
Flere undersøgelser forsøger at inddrage nogle markører for malign transformation i humane gastriske hyperplastiske polypper udførtes imidlertid et specifikt molekyle, der kan identificere, hvilke polyp vil undergå malign transformation er endnu ikke blevet fundet. Hos hunde er ikke meget kendt med denne henseende.
Cyclooxygenase (COX) er det enzym, der tillader syntese af prostaglandiner og andre eicosanoider fra arachidonsyre. COX-2 isoform spiller en vigtig rolle i gastrisk cancerudvikling gennem apoptose hæmning og øget celleproliferation. Selvom få undersøgelser rapporterede den forøgede ekspression af COX-2 i hunde cancere tilgængelig vedrørende COX-2-ekspression i canine gastriske væv ingen data [6].
Cellular kinetik menes at deltage i progressionen hen imod gastrisk cancer. Ki-67-antistof anvendes til at måle proliferationen indeks for et bestemt væv antages, at højere Ki-67 afslører tumorcelle aktivitet og forudsiger yderligere opførsel af en særlig patologi [7].
Malign transformation af human hyperplastiske GPS er forbundet med dysplasi, med p53 spiller en afgørende rolle i processen [8]. Overekspression af muteret p53 er blevet korreleret med patologiske parametre for tumor aggressivitet og dårlig prognose i human gastrisk carcinom [9].
Ifølge Correa model [10], human gastrisk cancer udvikler sig i en flertrinsproces fra kronisk aktiv gastritis til intestinal metaplasi (IM), dysplasi, og endelig, gastrisk cancer. IM betragtes som precursor læsion bestående af transdifferentiering af maveslimhinden til en intestinal fænotype, kendetegnet ved afvigende ekspression af homeobox transkriptionsfaktor CDX2 [11]. Ekspression af CDX2 i hunde praktiserende læger er aldrig blevet karakteriseret.
Som ualmindelige læsioner, de molekylære egenskaber og neoplastisk potentiale hunde praktiserende læger er fortsat et område af interesse. Formålet med denne undersøgelse er at beskrive nogle molekylære træk ved disse læsioner for bedre at forstå deres biologiske adfærd. Derudover blev ekspressionen af ​​disse molekyler i normal gastrisk mucosa (NGM) undersøgt for at vurdere betydningen af ​​deres tab eller overekspression i gastriske læsioner
Dyr &.; metoder
Fire normale hunde antrale maveslimhinden prøver og ni hunde antral praktiserende læger (figur 1A), modtog mellem 2007 og 2013, blev udvalgt fra arkiverne i Laboratoriet for Veterinary Pathology, ICBAS-UP (Portugal) og Patologi Institut for FVM , Cluj-Napoca (Rumænien). Væv blev fikseret i 10% pufret formalin og indstøbt i paraffin. Serielle konsekutive sektioner 3 um tykke blev fremstillet, én til rutinemæssig histologisk diagnose og de andre for immunohistokemiske undersøgelser. Figur 1 Morfologiske og immunhistokemiske funktioner i hundens mave polypper. (A) Brutto aspekt; (B) hyperplastisk polyp; (C) Inflammatorisk polyp; (D) (E) H. pylori
immunoexpression. (F) COX-2 immunoexpression; (G) Ki-67 immunoexpression; (H) p53 immunoexpression. Indsat: intratubulær seminom (+ kontrol) (I) CDX2 immunoexpression. Indsat: normal tarm (+ kontrol). Morfologiske og immunohistokemiske funktioner i hundens mave polypper. (A) Gross aspekt af den pylorus maveslimhinden viser et ensomt polyp (afgrænset område) (sag 9); (B) og (C) Mikroskopisk undersøgelse af hæmatoxylin og eosin-farvede objektglas afslører en hyperplastisk polyp (tilfælde 4) og en inflammatorisk polyp (sag 8). Bar = 500 um og 100 um, henholdsvis. (D) Photomicrograph viser den positive H. pylori
udtryk i en hyperplastiske polyp (tilfælde 2). Bar = 200 um. (E) Detalje af det tidligere tilfælde fremhæve den store mængde af Helicobacter
spp. organismer inde mavens kirtler. Bar = 10 um. (F) Photomicrograph afslører stærk og diffus COX-2-ekspression i forgrenede foveolar epitel af hyperplastiske polyp (tilfælde 1). Bar = 200 um. Indsat præsentere en detalje af COX-2-ekspression i foveolar epitel; (G) immunfarvning af Ki-67 i hyperplastiske epitel (tilfælde 3: 32,1%). Bar = 200 um. Indsat viser detaljer af KI-67-ekspression i landtangen og i kirtler base. (H) Fotomikrografi afslører en negativ immunhistokemisk reaktivitet af p53 i hyperplastiske polyp (tilfælde 2). Bar = 200 um. Væv fra hunde intratubulær seminom er blevet anvendt som positiv kontrol for p53 (indsat). (I) Negativ CDX2 udtryk i hyperplastiske polyp (tilfælde 1). Bar = 200 um. Væv fra hunde normale tarm er blevet anvendt som positiv kontrol for CDX2 (indsat). Immunoperoxidase-diaminobenzidin pletten med Mayers hæmatoxylin kontrastfarve (D-I).
Sektioner blev uafhængigt undersøgt af tre patologer. Normale væv blev betragtet som sådan ifølge Prachasilpchain et al. [10] og var negative for tilstedeværelsen af ​​Helicobacter
spp. (Bekræftet af modificeret Giemsa farve og anti-H. Pylori
immunhistokemi). Læger blev klassificeret ifølge WHO klassificering for husdyr diagnostiske kriterier [3].
For immunhistokemisk undersøgelse blev et panel af antistoffer specifikke for flere antigener anvendt (tabel 1). Novolink Max-Polymer detection system (Novocastra) blev anvendt i overensstemmelse med producentens instructions.Table 1 Antistoffer anvendes til hunde gastriske væv immunhistokemi
Marker
Clone
Leverandør
fortynding
Antigen demaskering
Inkubationstiden
Positiv kontrol
H. pylori
Polyklonale
Zytomed, Deutschland
1: 200
CB /PC
PÅ
menneskelige maveslimhinden med H. pylori
COX-2
SP21
NeoMarkers, USA
1:75
CB /PC
PÅ
Canine brystkirtler tumor
p53
Anti-p53
Novocastra, UK
1: 400
CB /PC
PÅ
Canine intratubulær seminom
CDX2
AMT28
Novocastra, UK
1: 300
CB /PC
PÅ
Canine normal tarm
KI-67
MIB-1
Dako, Danmark

• Makroskopisk udstrækning af maveslimhinden atrofi: øget risikofaktor for esophageal planocellulært karcinom i Japan
• Risikofaktorer for dybden af ​​infiltration i differentierede deprimeret tidlig gastrisk karcinom: en foreløbig analysis