Olika betydelse mellan intratumoral och peritumoral lymfatiska kärltäthet i magcancer: en retrospektiv studie av 123 cases

olika betydelse mellan intratumoral och peritumoral lymfatiska kärltäthet i magcancer: en retrospektiv studie av 123 fall Bild Sammanfattning
Bakgrund
Patienter med magcancer i Kina har sämre utfall och sämre prognos. Tumörinducerad lymfangiogenes spelar en avgörande roll i metastaser och tumörprogression. De intratumorala och peritumorala lymfkärlen skulle ha olika biologiska effekter. Tre stora tillväxtfaktorer, vaskulär endotel tillväxtfaktor-(VEGF) -A, VEGF-C och VEGF-D, är involverade i aktiveringsprocessen via deras receptorer (VEGFRs). Syftet med föreliggande studie är att undersöka signifikant skillnad mellan intratumoral och peritumoral lymfatiska kärltäthet (LVD) i magcancer och deras korrelationer med lymphangiogenetic tillväxtfaktorer.
Metoder
Intratumoral LVD (I-LVD) och peritumoral LVD ( P-LVD) av 123 patienter med primär magsäckscancer bedömdes efter färgning med D2-40, och bekräftades genom dubbelfärgning med D2-40 /CD34. Proliferativ aktivitet av lymfkärlen endotel utvärderades genom dubbel färgning med D2-40 /Ki-67. De föreningar analyserades mellan I-LVD /P-LVD och expressionsnivån av VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D och receptorn VEGFR-3, vilket mättes genom immunohistokemi (IHC). Sambanden av I-LVD och P-LVD med patientens prognos var också värderas.
Resultat
(1) peritumorala lymfkärlen (PTLs) var relativt förstorat med vidgade lumen jämfört med intratumorala lymfkärlen (ITLs). Ökad P-LVD var betydligt högre än I-LVD (P Hotel < 0,05). (2) P-LVD befanns signifikant associerade med lymfkörtelmetastaser (LNM) (P Hotel < 0,001), lymfkärl invasion (LVI) (P Hotel < 0,001), VEGF-C (P
= 0,003), VEGF-D uttrycksnivån (P
= 0,005) och VEGFR-3-uttryck nivå (P Hotel < 0,001) i peritumorala vävnader, trots att ingen signifikant samband konstaterades mellan ovan varianter med i-LVD . Ökade dock I-LVD visades vara associerad med minskad tumörvolym (P
< 0,001). Varken jag-LVD eller P-LVD korrelerade med VEGF-A uttryck (P Hotel > 0,05). (3) proliferativ aktivitet hos lymfkärlen endotel observerades i PTLs, trots ITLs. (4) Ökad P-LVD, men inte I-LVD, angavs vara en oberoende riskfaktor för lymfkörtel metastas av multivariat logistisk regressionsanalys, och var relaterad till sämre sjukdomsfri överlevnad och total överlevnad.
Slutsatser
PTLs spela roller i magcancer progression. Ökad P-LVD, men inte I-LVD, var signifikant associerad med VEGF-C /D /VEGFR-3-systemet, och kan vara en oberoende riskfaktor för lymfkörtel metastas och en prognostisk faktor i magcancer.
Bakgrund
Gastric cancer är den främsta ledande orsaken till cancerrelaterad död i Kina. Cirka 80% ~ 90% av patienterna diagnostiseras i framskridet stadium med dåligt utfall, vanligen med lymfatiska spridning och fjärrmetastaser. Under de senaste åren har tumörinducerad lymfangiogenes drivs av lymphangiogenic tillväxtfaktorer har etablerat som en ny mekanism för cancerutveckling. Numera allt fler experter tror att intratumorala lymfkärlen (ITLs, de lymphtics inom tumörer) och peritumorala lymfkärlen (PTLs, lymphtics vid periferin) spelar exakt distinkta biologiska roller på tumörbeteende och prognos i olika typer av tumörer. I magcancer, har flera studier indikerat att patienter med högre I-LVD hade högre förekomst av lymfkörtelmetastaser i tidigt skede [1], medan P-LVD kan vara en oberoende riskfaktor för lymfkörteln metastasering och prognos [2]. Dock har funktionen av I-LVD och P-LVD och deras korrelationer med VEGFs uttryck inte klarlagts ännu.
Ett antal studier har visat de avgörande roller VEGFs uttryck på tumörprogression och prognos i magcancer. VEGF-C och VEGF-D, två medlemmar av VEGF-familjen, har definierats som lymphangiogenic tillväxtfaktorer och spelar en viktig roll i tumör lymfangiogenes via aktivering av VEGFR-3, som huvudsakligen uttrycks i lymfatiska endotelceller (LECS). VEGF-C är en dominerande regulator av lymfangiogenes i både tidig och avancerad magsäckscancer [3, 4]. Ökad VEGF-C-uttryck hade en signifikant korrelation med LVD, LVI och lymfkörtel metastas [5], men dess prognostiska värde förblev kontroversiell. VEGF-D var inblandad i lymfatiska spridning av gastric cancerceller och kan vara en oberoende prognostisk markör [6]. VEGFR-3 var också anges som en prognostisk faktor [6]. En annan tillväxtfaktor, VEGF-A, som regleras angiogenes, ansågs också stimulera lymfangiogenes genom att binda till VEGFR-2 nyligen. Ökad VEGF-A uttrycksnivån för gastric cancerpatienter hade visat sig vara relaterade med mikrokärlsdensitet (MVD), hematogen metastas, peritoneal disseminateion och dålig prognos. Det återstår dock okänt om båda intratumorala och peritumorala lymphtics stimuleras av de tre VEGFs utsöndras av tumörceller, eller om I-LVD och P-LVD play signifikant olika biologiska roller i lymfkörteln metastasering och prognos i magcancer.
Metoder
patienter och tumörprover
tumörprover erhölls från 123 patienter med primär magcancer som accepterade gastrektomi vid Institutionen för kirurgi, Tongji Hospital of Tongji University från januari 2000 till december 2003. ingen av dem hade fått preoperational kemoterapi eller strålbehandling. Studiepopulationen bestod av 80 män (65%) och 43 kvinnor (35%). Medelåldern vid diagnos var 65 år (varierade från 28 till 87 år). Trettioen fall av magcancer (EGC) tidigt och 92 fall av avancerad magsäckscancer (AGC) var inblandade i. Histologisk skede baserades på UICC TNM klassificering. Andra kliniska drag sammanfattades i tabell 1. Alla patienter har följts upp kliniskt under minst 5 år efter kirurgi. Den genomsnittliga uppföljningstiden var 56 månader (varierade från 6 till 85 månader). Överlevnadsanalys utfördes, inklusive total överlevnad (OS), sjukdomsfri överlevnad (DFS) och cancerspecifik överlevnad (CSS). OS, DFS och CSS beräknades från dagen för kirurgi med föregående kontakt för levande patienter, till och med dagen för den sista uppföljningen av patienter sjukdomsfria och till dagen för gastric cancer-inducerad död, respektive. Fyra EGC fall och 52 AGC fallen inträffade återfall. Elva patienter hade peritoneal spridning, 26 patienter levermetastaser, och 19 fall återfall i magen efter operation. Fyrtio patienter dog av magcancer. Den aktuella studien godkändes av forskningsetiska kommittén för Tongji sjukhus anslutna med Tongji University. De normala gastriska vävnader samlades som kontrollprover. Alla resultat åstadkoms av två patologer självständigt, och de medel som beräknades för varje fall baserat på de uppgifter obtained.Table 1 korrelationer av LVD med kliniskt patologiska parametrar och VEGFs uttryck
Faktorer
N
I-LVD
P-LVD
vid
medelvärde ± SD
P
medelvärde ± SD
P
Tumör differentiering
0,802
0,739
Hög differentierade
11 8,18 ± 2,44
12,07 ± 4,49
Mederately /dålig differentierade
112
8,00 ± 2,27
12,46 ± 3,60
Tumörstorlek storlek~~POS=HEADCOMP
< 0,001 Hotel < 0,001 Hotel < 3,2 cm
57
8,93 ± 2,34
11,18 ± 3,80
≥ 3,2 cm
66
7,23 ± 1,91
13,50 ± 3,21
djup invasion
0,433
0,026
pT1-2
69
8,16 ± 2,51
11,78 ± 3,52
pT3-4
54
7,83 ± 1,96
13,26 ± 3,71
Lymfkörtel metastaser
0,056 * Hotel < 0,001
Negativ
57
8,47 ± 2,27
10,50 ± 3,42
Positiva
66
7,65 ± 2,24
13,98 ± 3,10
LVI
0.700 Hotel < 0,001
Negativ
83
8,08 ± 2,33
11,23 ± 3,29
Positiv
40
7,91 ± 2,22
14,36 ± 3,44
VI
0,905 Hotel < 0,001
Negativ
86
8,00 ± 2,38
11,65 ± 3,81
Positiv
37
8,05 ± 2,67
14,24 ± 2,53
TNM stadium
0,067 Hotel < 0,001
I - II
71
8,34 ± 2,42
11,33 ± 3,29
III - IV
52
7,58 ± 2,01
13,92 ± 3,66
VEGF-A uttryck
0,527
0,091
Låg
44
7,84 ± 2,51
11,68 ± 3,54
Hög
79
8,26 ± 2,21
12,84 ± 3,69
VEGF-C-uttryck
0,092 *
0,003
Låg
42
7,55 ± 2,37
11,06 ± 3,26
Hög
81
8,00 ± 2,34
13,13 ± 3,69
VEGF-D uttryck
0,514 0,005
Låg
72 7,90 ± 2,47
11,65 ± 3,44
Hög
51
8,18 ± 1,99
13,53 ± 3,73
P
, t-test; P
*, Mann-Whitney U
Test. Förkortning: LVD: lymfatiska kärltäthet; LVI: lymfatiska kärl invasion. VI. Venös invasion
Single immunohistokemi för D2-40, VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D och VEGFR-3 Hus Till immunohistichemical färgning, var 4 pm tjocka paraffininbäddade diabilder skärs från varje studie blockera. Sektioner behandlades med 0,3% H 2O 2 under 10 min vid rumstemperatur. För antigenåtervinning, var objektglasen uppvärmdes i en mikrovågsugn innehållande 0,01 mmol /L natrium-citrat (pH 6,0). Objektglasen inkuberades vid 4 ° C över natten i en fukt bricka med primära antikroppar, VEGF-A (mus-monoklonal antikropp, ett: 100, DAKO), VEGF-C (get polyklonal antikropp, ett: 100, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), VEGF-D (get polyklonal antikropp, ett: 100, Santa Cruz), VEGFR-3 (get polyklonal antikropp, ett: 100, Santa Cruz) och D2-40 (mus-monoklonal antikropp, ett: 100, DAKO), respektive. Objektglasen sköljdes tre gånger i 0,1 mmol /l PBS under 2 min, och inkuberades under 30 min vid rumstemperatur med get-anti-kanin /mus pepparrotsperoxidas (Envision, DAKO, CA) för att identifiera målet. Sektionerna har utvecklats med 3 '3-diaminobensidin. Den normala get-IgG var fungerade som negativ reaktionskontroll för färgning av VEGF-C, VEGF-D och VEGFR-3, och den normala kanin-IgG var fungerade som negativ reaktionskontroll för färgning av VEGF-A och D2-40.
dubbel immunhistokemisk färgning för D2-40 /CD34
dubbla immunhistokemisk färgning för D2-40 /CD34 bearbetades vidare för att utvärdera specificiteten av D2-40 uttryck i lymfatiska endotel. Förslaget enligt tillverkarens anvisningar (nr: 95-9999, Histostain-DS Kit, Zymed, CA). Paraffininbäddade 4 pm sektioner avparaffinerades med xylen och rehydreras. Objektglasen nedsänktes i peroxidas quenching lösning under 10 min. Efter att ha blivit inkuberades över natten vid 4 ° C med de primära antikropparna mot CD34 (monoklonal musantikropp, 1: 100, DAKO, Carpinteria, CA), de sektioner behandlades med serum blockeringslösning, följt av att den inkuberas med biotinylerad sekundär antikropp (DAKO ). Därefter tillsattes alkaliskt fosfatas-konjugat som används för att varje sektion i 10 min. Och sedan, sektionerna behandlades med substratet kromogen blandning och dubbel färgning förstärkare. Serumet blockerande lösningen applicerades igen, objektglasen inkuberades med en annan primär antikropp mot D2-40 (mus-monoklonal antikropp, ett: 200, GM36190, Gene Tech Company Limited, Shanghai, Kina) under 60 min och den biotinylerade andra anti-immunoglobulin (Ig) (DAKO) behandlades. Efter applicering med enzymkonjugat under 10 min, var objektglasen inkuberades med blandningen av substratbuffert, kromogenlösning och 0,6% väteperoxid för HRP och övervakas under ett mikroskop. Kranvatten innehållande 0,05% Tween-20 terminerade reaktionen. För negativa kontroller, var sektionerna färgades med en icke-immunserum i stället för samma koncentration av primär antikropp. De CD34 positiva blodkärl visade den intensiva röda fläcken, och de D2-40 positiva lymfkärl visade mörkt lila fläck.
Dubbel färgning för D2-40 /Ki-67 Hus Till detektera den proliferativa aktiviteten av lymfkärlen var metoden för dubbel immunfärgning för D2-40 /Ki-67 utförs. Den D2-40 antikropp användes för att färga lymfkärl endotel, tillsammans med Ki-67 (kanin monoklonal antikropp, ett: 200, Santa Cruz, USA) för att färga proliferativa celler. Ki-67-färgning (röd) framkallades med alkaliskt fosfatas-konjugerad sekundär antikropp, och därefter D2-40 färgning (brun) utvecklades med peroxidas-konjugerad sekundär antikropp. Proliferativa lymfkärl bekräftades av Ki-67 positivt färgade kärnor som också hade samtidig positiv cytoplasmatisk färgning i D2-40 positiva celler. Hastigheten för dubbelmärkta fartyg bestämdes genom räkning av kärnor av tumörassocierade D2-40-positiva kärl (100 kärnor i varje tumör) [7].
Bedömning av LVD
Intratumoral LVD (hotspots var belägna vid tumör centrum) och peritumoral LVD (hotspots var belägna i periferin vävnad inom 2 mm tumör intill den invasiva fronten) bedömdes separat [2, 7-9]. Kvantitativ analys av lymfkärl densitet utfördes i sektioner som var enda färgas för D2-40. Fem områden med flest lymfkärlen regioner ( "hot spots") valdes vid × 40 förstoring av ljusmikroskop. LVD bedömdes genom att räkna alla färgade fartyg på x 200 förstoring. Medelantalet lymphatics bedömda bestämdes som LVD. Lymfkärl invasion (LVI) detekterades föreligga om åtminstone ett tumörcellkluster var i D2-40 positiva kärl [10]. Scoring och räkning genomfördes oberoende av två forskare som inte hade någon klinisk information om patienterna. Den genomsnittliga P-LVD och I-LVD beräknades för varje enskilt fall.
Bedömning av VEGFs och VEGFR-3 uttryck
Positiv färgning av VEGF-A, -C och -D uttryck definieras som de tidigare studier [6 , 11]. Färgningsresultat för ovanstående tre VEGFs var semikvantitativt bedömas av en immunohistokemisk poäng i kombination med andelen tumörceller som visar specifik immunreaktivitet. Färgningsintensitet gavs med fyra kvaliteter: ingen (0), svag (1), måttlig (2) och stark (3). Andelen positiva karcinomceller gavs med betygen: 0 (0%), 1 (1% ~ 10%), 2 (11% ~ 49%), 3 (50% ~ 100%), respektive. Den totala poängen beräknades genom att multiplicera den färgningsintensitet och den procentuella andelen positiva tumörceller. Median av poängen valdes som cutoff nivå enligt vilka tumörer kategoriseras i låg- (0 ~ 3) och hög-uttryck (4 ~ 6) tumörer [6, 11]. VEGFR-3-positiva kärl bestämdes såsom beskrivits tidigare [12]. Fartygen av tre hot spots områden räknades vid × 400 förstoring. Färgning ansågs som positivt när mer än 5% av endotel uppvisade en färgning [6]. Peritumoral VEGFR-3-positiva kärl (P-VEGFR-3) och intratumorala VEGFR-3-positiva kärl (I-VEGFR-3) bedömdes som ovan LVD.
Statistisk analys
Statistisk analys utfördes med användning av de Statistik paket för samhällsvetenskap (version 11.5, SPSS Inc, Chicago, IL). Prover delades in i två kategorier i enlighet med medianvärdena av I-LVD och P-LVD, respektive. Sambanden av I-LVD och P-LVD med clinicopathologic parametrar och VEGFs uttryck analyserades av oberoende prover t
test eller Mann-Whitney U
test. De korrelationer av VEGFR-3-uttryck med kliniska parametrar analyserades med Pearson Chi-Square test. De relaterade faktorer om lymfkörtel metastas i magcancer uppnåddes med hjälp av multivariant logistisk regressionsanalys. Överlevnadskurvorna erhölls med användning Kalplan-Meier-metoden och jämfördes genom log-rank test. Multivariat överlevnadsanalys utvärderades med hjälp av Cox proportionella riskmetoden. All statistisk analys var två sidor med betydelse definieras som P Hotel < 0.05.
Resultat
Intratumoral och peritumorala lymfatiska egenskaper magcancer sälja The D2-40-positiv lymfkärl hade oregelbunden morfologi och tunnväggiga lumen. Lymfkärl i gastriska vävnader huvudsak ligger i skiktet av submucosa (Figur 1). Lymfkärlen (D2-40-position) och blodkärl (CD34-läge) var klart särskiljas genom ytterligare dubbel färgning (Figur 2). Intratumorala lymfkärl vanligtvis har kollapsat, liten och oregelbunden (figur 3), men vissa noncollapsed lymfkärlen visade öppna lumen, och ibland innehöll invaderande tumörceller kluster (Figur 4). De peritumorala lymfkärl i ytliga och djupa delen av submucosa var alla förstorat med lymfatiska hålrum vidgade (Figur 5, Figur 6). Det lymfatiska kärl invasion observerades i 38 fall. Ingen signifikant korrelation mellan antalet LVD i tumör centrum och i kontrollvävnader (8,02 ± 2,28 mot 8,13 ± 1,04, P Hotel > 0,05). Men antalet P-LVD (12,15 ± 3,75) var betydligt högre än i kontrollvävnader och tumörcentrum (P Hotel < 0,05). Inga statistiska skillnader hittades mellan de två metoderna för att upptäcka lymfkärlen (enda färgning för D2-40 och dubbel färgning för D2-40 /CD34) (I-LVD, 8,02 ± 2,28 mot 7,80 ± 2,33, P-LVD, 12,15 ± 3,75 vs 12,42 ± 3,67, P Hotel > 0,05). Figur 1 D2-40-positiva lymphantics framför allt på lagret av submukosa i gastrisk vävnad (pilar). IHC, förstoring. × 200
Figur 2 Den dubbla immunhistokemisk färgning för D2-40 och CD34 särskiljas klart lymfkärlen (svart pil) från blodkärl (röd pil). . IHC, förstoring: x 400
Figur 3 intratumorala lymfkärl i magcancer har kollapsat (pil); Dubbel immunhistokemisk färgning, förstoring. × 200
Figur 4 invaderande cancerceller kluster var närvarande i lymfkärl invasion (LVI). Dubbel immunhistokemisk färgning för D2-40 /CD34, förstoring. × 400
figur 5 peritumorala lymfkärl i magcancer förstorades med vidgade lumen belägna vid ytliga submucosa. IHC, förstoring. × 200
figur 6 peritumorala lymfkärl i magcancer förstorades med vidgade lumen belägna vid djupa delen av submucosa. IHC, förstoring. × 200
korrelationer av I-LVD och P-LVD med clinicopathologic parametrar och VEGFs uttryck sälja The korrelationerna av I-LVD och P-LVD med clinicopathologic parametrar som visas i tabell 1. Ökad I- LVD var signifikant associerad med mindre tumörstorlek (P Hotel < 0,001). Inga korrelationer hittades mellan I-LVD och VEGFs uttryck, medan P-LVD var signifikant korrelerad med större tumörstorlek (P Hotel < 0,001), djup invasion (P
= 0,026), lymfkörtel metastas (P Hotel < 0,001), LVI (P Hotel < 0,001), venös invasion (VI) (P Hotel < 0,001), TNM stadium (P Hotel < 0,001), VEGF-C ( P
= 0,003) och VEGF-D-expression (P
= 0,005) expression av de tre VEGFs.
visade en positiv cytoplasmatisk färgning i gastric cancerceller. Hög expressionsnivå av VEGF-A (fig 7), VEGF-C (fig 8) och VEGF-D (Figur 9) observerades hos 64,2% (79/123), 65,9% (81/123) och 41,5% (51 /123) av prover, respektive. Varken jag-LVD eller P-LVD befanns signifikant associerade med VEGF-A uttryck (P Hotel > 0,05). Figur 7 VEGF-A uttryck i cytoplasman i magcancer. IHC, förstoring. × 400
figur 8 VEGF-C-uttryck i cytoplasman i magcancer. IHC, förstoring. × 400
Figur 9 VEGF-D-expression i cytoplasman i magcancer. IHC, förstoring. × 200
Proliferativa aktiviteter i intra- och peritumorala lymfkärlen
Proliferativa lymfkärl hittades i tumören periferi (Figur 10). Graden av Ki-67-positiva lymfkärl kärnor i tumören periferi var (0,81 ± 0,13)%. Ingen proliferativ lymfkärl hittades i tumören centret (figur 11). Lymfkärlen invasion kunde observeras i peritumorala vävnader (Figur 12). Figur 10 Ki-67-positiva lymfatiska kärl kärnor (pilar) detekterades i tumören periferi. Dubbel färgning för D2-40 /Ki-67, förstoring. × 400
Figur 11 Ingen Ki-67 positiva uttryck i intratumorala lymfkärlen kärnor. Dubbel färgning för D2-40 /Ki-67, förstoring:. × 400
Figur 12 lymfkärl invasion detekterades i peritumoral vävnaden (pilar). Dubbel färgning för D2-40 /Ki-67, förstoring:. × 400
VEGFR-3-expression i lymfatiska kärl
VEGFR-3-positiva uttryck i tumör periferi (P-VEGFR-3) hittades i 55 av de 123 fall, ibland med cancer cellkluster invaderar (Figur 13). Emellertid hade bara 34 av 123 fall en VEGFR-3-positivt uttryck vid tumörcentrum (I-VEGFR-3) (Figur 14). Dessa kärl var mestadels tunnväggig, oregelbundet formad och innehöll inga eller få RBK. Figur 13 Den VEGFR-3-positiva uttryck i endotelcellerna cytoplasma i tumör periferi (P-VEGFR-3), ibland med cancer cellkluster invaderar (pilar). IHC, förstoring. × 400
Figur 14 VEGFR-3-positiva uttryck var belägna i tumör centrum (pilar). . IHC, förstoring: x 200
perifera tumörvävnader, VEGFR-3 uttryck var signifikant korrelerade snarare med VEGF-C högt uttryck (P Hotel < 0,000), VEGF-D högt uttryck (P
= 0,043), ökad P-LVD (P
< 0,001) och närvaron av LVI (P
= 0,003), än med VEGF-A uttryck, ökade i-LVD, venös invasion och lymfkörtel metastas (P Hotel > 0,05). Inga korrelationer observerades mellan I-VEGFR-3-uttryck och kliniska parametrar (P Hotel > 0,05). (Tabell 2) Tabell 2 Korrelationer av VEGFR-3 uttryck på differenr tumörlokalisation med kliniska parametrar
Faktorer
N
vid I-VEGFR-3
P-VEGFR-3
vid vid N (%)
P

N (%)
P
VEGF-A uttryck
0,107 0,067
Låg
44
16 (36,36) Review 15 (34,09) katalog kick
79
18 (22,78) Review 40 (50,63) Review VEGF-C-uttryck
0,795 Hotel < 0,001
Låg
42
11 (26,19) Review 9 (21,43) katalog kick
81
23 (28,40) Review 46 (56,79) Review VEGF- D uttryck
0,968 0,043
Låg
72
20 (27,78) Review 27 (37,50) katalog kick
51
14 (27,45) Review 28 (54,90) Review P-LVD
0,813 Hotel < 0,001 Hotel < 14
60
16 (26,67) Review 10 (16,67) Review ≥ 14
63
18 (28,57) Review 45 (71,43) Review I-LVD
0,412
0,153 Hotel < 8
58
14 (24,14)
22 (37,93) katalog ≥ 8
65
20 (30,77) Review 33 (50,77) Review Lymfkörtel metastaser
0,934 0,190
Negativ
55
19 (34,55) Review 21 (38,18) Review Positiv
68
15 (22,06) Review 34 (50,00) Review LVI
0,681
0,003
Negativ
76
22 (28,95) Review 26 (34,21) Review Positiv
47
12 (25,53) Review 29 (61,70) katalog VI
0,387
0,448
Negativ
87
26 (29,89) Review 37 (42,53) Review Positiv
36
8 (22,22) Review 18 (50.00)
Förkortning: LVD: lymfatiska kärltäthet; LVI: lymfkärl invasion; VI: venös invasion; I-VEGFR-3: VEGFR-3 positiva uttryck i tumör center; P-VEGFR-3: VEGFR-3 positivt uttryck vid tumörperiferin
prediktiva värdet av LVD för lymfkörtel metastas
Som ett resultat av multivariat logistisk regressionsanalys i tabell 3, VEGF-C-uttryck och P-LVD. signifikant asscoiated med lymfkörtelmetastaser (P
= 0,024, P
= 0,045, respektive). I-LVD, VEGF-A, VEGF-D och P-VEGFR-3-uttryck visade inte det prediktiva värdet för lymfkörtel metastas i magcancer. (Tabell 3) Tabell 3 Multivariate logistisk regressionsanalys för lymfkörtel metastas
Faktorer
Odds ratio
95% KI

P
P-LVD
3,548 1,030 -12,226
0,045
I-LVD
1,300
0,964-1,754
0,085
VEGF-A
0,510
0,138-1,884
0,313
VEGF-C
4,069
1,198-13,820
0,024
VEGF-D
3,162
0,834-11,992
0,091
P-VEGFR-3
2,919
0,747-11,403
0,123
Förkortning: LVD: lymfatiska kärltäthet; P-VEGFR-3. VEGFR-3 positiva uttryck i tumör periferi
Prognostic betydelse I-LVD och P-LVD
univariat överlevnadsanalys, P-LVD var associerat med dålig överlevnad (figur 15, P
< 0,001), sjukdomsfri överlevnad (figur 16, P
< 0,001) och cancerspecifik överlevnad (figur 17, P
< 0,001). Men I-LVD korrelerade med en nonsignificantly trend mot allt respektive ovan (total överlevnad, P
= 0,5835, figur 18, sjukdomsfri överlevnad, P
= 0,2844, figur 19, cancerspecifik överlevnad, P
= 0,6246, figur 20). Figur 15 Förhållandet mellan P-LVD med total överlevnad (P < 0,001).
Figur 16 Förhållandet mellan P-LVD med sjukdomsfri överlevnad (P < 0,001).
Figur 17 Förhållandet mellan P-LVD med cancerspecifik överlevnad (P < 0,001)..
Figur 18 Förhållandet mellan I-LVD med total överlevnad (P = 0,5825) katalog Figur 19 Förhållandet mellan I-LVD med sjukdomsfri överlevnad (P = 0,2844) .
Figur 20 Förhållandet mellan i-LVD med cancerspecifik överlevnad (P = 0,6246).
Multivariate regressionsanalys indicateded att P-LVD kan vara en oberoende prognostisk faktor för både total överlevnad (P
= 0,045 ) och sjukdomsfri överlevnad (P
= 0,031), trots cancerspecifik överlevnad. Dessutom närvaro av LVI och TNM stadium skulle kunna fungera som oberoende prediktorer för alla tre överlevande (LVI, P
= 0,040, 0,043, 0,039, TNM stadium P
= 0,048, 0,001, 0,001, tabell 4) . VEGF-A uttryck var den oberoende prognostiska prediktor endast för total överlevnad (P
= 0,033). Inga statistiskt signifikanta korrelationer för I-LVD, VEGF-C, VEGF-D och P-VEGFR-3 med någon av de överlevande hittades. (Tabell 4) Tabell 4 Cox regressionsanalys av oberoende faktorer som påverkar sjukdomsfri överlevnad, cancerspecifik överlevnad och total överlevnad
Faktorer
cancerspecifika överlevnad
sjukdomsfri överlevnad
överlevnad
vid OR (95% CI) katalog
P
OR (95% CI)
P
OR (95% CI)
P

P-LVD
2,099 (0,91-4,87) Review 0,084
2,418 (1,08-5,40) Review 0,031
2,895 (1,02-8,19) Review 0,045
I-LVD
1,205 (0,56-2,63) katalog 0,639
1,325 (0,62-2,85) Review 0,472
1,959 (0.90-4.24)
0.088
VEGF-A
1.386(0.50-3.83)
0.528
1.364(0.67-2.78)
0.391
2.437(1.10-5.45)
0.030
VEGF-C
2.423(0.89-6.63)
0.085
1.630(0.77-3.47)
0.205
1.562 (0,79-3,34) Review 0,182
VEGF-D
0,511 (0,19-1,36) Review 0,178
1,916 (0,90-4,10) Review 0,094
1,621 (0,81-3,98)
0.190
LVI
2,716 (1,05-7,04) Review 0,040
2,477 (1,03-5,97) Review 0,043
2,578 (1,05-6,34) Review 0,039
LNM
2,115 (0,68-6,60) katalog 0,197
2,428 (1,18-5,02) Review 0,017
3,426 (1.66-7.06)
0.001
VI
2.943(0.89-9.77)
0.078
1.697(0.75-3.87)
0.208
1.477(0.63-3.48)
0.373
P-VEGFR-3
1. 499 (0,98-2,31) katalog 0,067
1,099 (0,53-2,28) Review 0.800
1,402 (0,68-2,90) Review 0,361
TNM stadium
1,523 (1,00-2,31)
0,048
1,674 (1,25-2,25) katalog 0,001
1,656 (1,23-2,23) Review 0,001
Förkortning: P-LVD: peritumoral lymfatiska kärltäthet; I-LVD: intratumoral lymfatiska kärltäthet; LVI: lymfkärl invasion; LNM: lymfkörtel metastas; VI: venös invasion; P-VEGFR-3.: VEGFR-3 positivt uttryck vid tumörperiferin
Diskussion
Nyligen var den D2-40 antikropp, en ny markör för lymfatiska endotel, identifierad som den specifika antikroppen mot human podoplanin [13] . Många studier har visat att immunfärgning av D2-40 är specifik för utvärdering av lymfatisk invasion och lymfatiska mikrokärltätheten i humana cancrar, inklusive i magcancer [14-17]. I denna studie var LVD och lymfkärl invasion identifierats av D2-40 färgning, och bekräftades genom dubbel färgning för D2-40 och CD34, som tydligt diskrimineras lymfkärlen från blodkärl ytterligare.

• P27Kip1, regleras av glykogensyntaskinas-3β, resulterar i HMBA-inducerad differentiering av humana gastriska cancerceller
• En retrospektiv kohortstudie av patienter med mag- och levercancer: effekten av komorbiditet och etnicitet på cancervården och utfall