Annen betydning mellom intratumoral og peritumoral lymfekar tetthet i magekreft: en retrospektiv studie av 123 tilfeller

Annen betydning mellom intratumoral og peritumoral lymfekar tetthet i magekreft: en retrospektiv studie av 123 tilfeller
Abstract
Bakgrunn
Pasienter med magekreft i Kina har dårligere utfall og dårligere prognose. Tumorindusert lymphangiogenesis spiller en avgjørende rolle i metastase og tumorprogresjon. De intratumorale og peritumoral lymfekar skulle ha ulike biologiske effekter. Tre viktige vekstfaktorer, vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF) -en, VEGF-C og VEGF-D, er involvert i aktiveringsprosessen via deres reseptorer (VEGFRs). Formålet med studien er å undersøke signifikant forskjell mellom intratumoral og peritumoral lymfekar tetthet (LVD) i magekreft og deres korrelasjon med lymphangiogenetic vekstfaktorer
. Metoder
intratumorale LVD (I-LVD) og peritumoral LVD ( P-LVD) av 123 pasienter med primær magekreft ble evaluert etter farging med D2-40, og bekreftet ved å dobbelt farging med D2-40 /CD34. Proliferativ aktivitet av lymfekar endotel ble evaluert ved dobbelt farging med D2-40 /Ki-67. De forbindelser ble analysert mellom I-LVD /P-LVD og ekspresjonsnivået av VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D og den reseptor VEGFR-3, som ble målt ved hjelp av immunhistokjemi (IHC). Korrelasjonene av I-LVD og P-LVD med pasient prognose ble også verdsatt.
Resultater product: (1) De peritumoral lymfekar (PTLs) var relativt forstørret med dilatert lumen sammenlignet med intratumorale lymfekar (ITLs). Økt P-LVD var betydelig høyere enn I-LVD (P
< 0,05). (2) P-LVD ble funnet signifikant assosiert med lymfeknutemetastase (LNM) (P
< 0,001), lymfekar invasjon (LVI) (P
< 0,001), VEGF-C (P
= 0,003), VEGF-D uttrykk nivå (P
= 0.005) og VEGFR-tre uttrykk nivå (P
< 0,001) i peritumoral vev, til tross for ingen signifikant sammenheng ble funnet mellom ovenfor varianter med i-LVD . Imidlertid økte I-LVD ble vist å være forbundet med redusert tumorvolum (P
< 0,001). Verken jeg-LVD eller P-LVD var korrelert med VEGF-A uttrykk (P
> 0,05). (3) Det ble ikke observert Proliferativ aktivitet av lymfekar endotel i PTLs, til tross for ITLs. (4) Økt P-LVD, men ikke jeg-LVD, ble angitt å være en uavhengig risikofaktor for lymfeknutemetastase av multivariate logistisk regresjonsanalyse, og var knyttet til verre sykdomsfri overlevelse og total overlevelse.
Konklusjoner
PTLs spille roller i magekreft progresjon. Økt P-LVD, men ikke jeg-LVD, var signifikant assosiert med VEGF-C /D /VEGFR-3 system, og kan være en uavhengig risikofaktor for lymfeknutemetastase og en prognostisk faktor i magekreft.
Bakgrunn
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP er den viktigste ledende årsak til kreft dødsfall i Kina. Om 80% ~ 90% av pasientene blir diagnostisert på avansert stadium med dårlig resultat, ofte med lymfatisk formidling og fjernmetastaser. I løpet av de siste årene, har tumorindusert lymphangiogenesis drevet av lymphangiogenic vekstfaktorer er godt etablert som en ny mekanisme for kreft progresjon. I dag, et økende antall eksperter mener at intratumorale lymfekar (ITLs, de lymphtics innenfor svulster) og peritumoral lymfekar (PTLs, lymphtics i periferien) spiller akkurat forskjellige biologiske roller på tumor atferd og prognose i ulike typer svulster. I magekreft, har flere studier antydet at pasienter med høyere I-LVD hadde høyere forekomst av lymfeknutemetastaser i tidlig stadium [1], mens P-LVD kan være en uavhengig risikofaktor for lymfeknutemetastase og prognose [2]. Imidlertid har funksjon av I-LVD og P-LVD og deres korrelasjon med VEGFs uttrykk ikke avklart ennå., En rekke studier har vist de avgjørende roller VEGFs uttrykk på tumorprogresjon og prognose i magekreft. VEGF-C og VEGF-D, to medlemmer av VEGF-familien, har blitt definert som den lymphangiogenic vekstfaktorer og spiller en viktig rolle i tumor lymphangiogenesis via aktivering av VEGFR-3, som hovedsakelig uttrykkes i lymfatisk endotel-celler (LECS). VEGF-C er en dominerende regulator av lymphangiogenesis i både tidlig og avansert magekreft [3, 4]. Økt VEGF-C uttrykk hadde en signifikant sammenheng med LVD, LVI og lymfeknutemetastase [5], men prognostisk verdi forble kontroversielt. VEGF-D var involvert i lymfatisk spredning av gastrisk kreft celler og kan være en uavhengig prognostisk markør [6]. VEGFR-3 ble også oppgitt som en prognostisk faktor [6]. En annen vekstfaktor, VEGF-A, som regulert angiogenese, ble også ansett for å stimulere lymphangiogenesis ved binding til VEGFR-2 nylig. Økt VEGF-A ekspresjonsnivå av magekreftpasienter som hadde vist seg å være forbundet med microvessel tetthet (MVD), hematogenous metastase, peritoneal disseminateion og dårlig prognose. Imidlertid er det fortsatt ukjent om begge intratumorale og peritumoral lymphtics blir stimulert av de tre VEGFs utskilt av tumorceller, eller om jeg-LVD og P-LVD play signifikant forskjellige biologiske roller i lymfeknutemetastase og prognose i magekreft.
Metoder
pasienter og vevsprøver
vevsprøver ble hentet fra 123 pasienter med primær magekreft som aksepterte gastrektomi ved Kirurgisk avdeling, Tongji Hospital of Tongji University fra januar 2000 til desember 2003. Ingen av dem hadde fått preoperational kjemoterapi eller strålebehandling. Studiepopulasjonen besto av 80 menn (65%) og 43 kvinner (35%). Gjennomsnittsalderen ved diagnosetidspunktet var 65 år (varierte fra 28 til 87 år). Trettien tilfeller av tidlig magekreft (EGC) og 92 tilfeller av avansert magekreft (AGC) var involvert i. Histologisk scenen var basert på UICC TNM klassifisering. Andre kliniske funksjoner ble oppsummert i tabell 1. Alle pasienter har blitt fulgt opp klinisk i minst 5 år etter operasjonen. Den gjennomsnittlige oppfølgingstiden var 56 måneder (varierte fra 6 til 85 måneder). Overlevelsesanalyse ble utført, inkludert total overlevelse (OS), sykdomsfri overlevelse (DFS) og cancer-spesifikk overlevelse (CSS). OS, DFS og CSS ble beregnet fra datoen for operasjonen til siste kontakt for levende pasienter, til datoen for siste oppfølging for sykdomsfrie pasientene, og til datoen for mage-kreft-indusert død, henholdsvis. Fire EGC tilfeller og 52 AGC saker ble forekom tilbakefall. Elleve pasienter hadde peritoneal formidling, 26 pasienter levermetastaser, og 19 tilfeller tilbakefall i magen etter operasjonen. Førti pasienter døde av magekreft. Den aktuelle studien ble godkjent av forskningsetiske komité for Tongji Hospital tilknyttet Tongji University. Den normale mage vev ble samlet inn som kontrollprøver. Alle resultatene ble oppnådd ved to patologer uavhengig, og midlene ble beregnet for hvert enkelt tilfelle basert på data obtained.Table 1 Korrelasjoner av LVD med clinicopathological parametere og VEGFs uttrykk
Faktorer
N
I-LVD
P-LVD


gjennomsnitt ± SD
P
gjennomsnittlig ± SD
P
Tumor differensiering
0,802
0,739
Høy differensiert
11
8.18 ± 2.44
12,07 ± 4,49
Mederately /dårlig differensiert
112
8,00 ± 2,27
12,46 ± 3,60
Tumor størrelse
< 0,001
< 0,001
< 3,2 cm
57
8.93 ± 2.34
11,18 ± 3,80
≥ 3,2 cm
66
7,23 ± 1,91
13.50 ± 3.21
Dybde invasjon
0,433
0,026
pT1-2
69
8.16 ± 2.51
11.78 ± 3.52
pT3-4
54
7.83 ± 1.96
13.26 ± 3.71
lymfeknutemetastaser
0,056 *
< 0,001
Negativ
57
8.47 ± 2.27
10,50 ± 3,42
Positiv
66
7,65 ± 2,24
13.98 ± 3.10
LVI
0,700
< 0,001
Negativ
83
8.08 ± 2.33
11.23 ± 3.29
Positive
40
7.91 ± 2.22
14.36 ± 3.44
VI
0,905
< 0,001
Negativ
86
8,00 ± 2.38
11.65 ± 3.81
Positive
37
8.05 ± 2.67
14,24 ± 2,53
TNM stadium
0,067
< 0,001
I - II
71
8.34 ± 2.42
11.33 ± 3.29
III - IV
52
7.58 ± 2.01
13,92 ± 3,66
VEGF-A uttrykk
0,527
0,091
lav
44
7,84 ± 2,51
11.68 ± 3.54
Høy
79
8.26 ± 2.21
12,84 ± 3,69
VEGF-C uttrykk
0,092 *
0,003
lav
42
7.55 ± 2.37
11,06 ± 3,26
Høy
81
8,00 ± 2,34
13.13 ± 3.69
VEGF-D uttrykk
0,514
0,005
lav
72
7.90 ± 2.47
11.65 ± 3.44
Høy
51
8.18 ± 1.99
13.53 ± 3,73
P
, t-test; P product: *, Mann-Whitney U
Test. Forkortelse: LVD: lymfekar tetthet; LVI: lymfekar invasjon. VI:. Venøs invasjon
Enkelt immunhistokjemi for D2-40, VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D og VEGFR-3
For immunohistichemical flekker, 4 mikrometer tykke parafininnstøpte lysbilder ble kuttet fra hver studie blokkere. Snittene ble behandlet med 0,3% H 2o 2 i 10 minutter ved romtemperatur. For antigen gjenfinning, ble platene oppvarmet i en mikrobølgeovn inneholdende 0,01 mmol /l natriumcitrat (pH 6,0). Platene ble inkubert ved 4 ° C over natten i en fuktighet brett med primære antistoffer, VEGF-A (mus monoklonalt antistoff, 1: 100, DAKO), VEGF-C (geit polyklonalt antistoff, 1: 100, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), VEGF-D (geit polyklonalt antistoff, 1: 100, Santa Cruz), VEGFR-3 (geit polyklonalt antistoff, 1: 100, Santa Cruz) og D2-40 (mus monoklonalt antistoff, 1: 100, DAKO), henholdsvis. Platene ble skyllet tre ganger i 0,1 mmol /l PBS i 2 min, og inkubert i 30 minutter ved romtemperatur med geite-anti-kanin /mus pepperrot peroksidase (Envision, DAKO, CA) for å identifisere målet. Seksjonene ble utviklet med 3 '3-diaminobenzidin. Den normale geit IgG ble servert som negativ reaksjon kontroll for farging av VEGF-C, VEGF-D og VEGFR-3, og normal kanin IgG ble servert som negativ reaksjon kontroll for farging av VEGF-A og D2-40.
Double immunhistokjemisk farging for D2-40 /CD34
dobbel immunhistokjemisk farging for D2-40 /CD34 ble videre behandlet for å vurdere spesifisiteten D2-40 uttrykk i lymfatisk endotel. Forslaget ble i henhold til produsentens instruksjoner (No: 95-9999, Histostain-DS Kit, Zymed, CA). Parafin-embedded 4 mikrometer seksjoner ble deparaffinized med xylen og rehydrert. Platene ble neddykket i peroksidase bråkjøling oppløsning i 10 min. Etter å ha blitt inkubert over natten ved 4 ° C med de primære antistoffer mot CD34 (mus-monoklonalt antistoff, 1: 100, DAKO, Carpinteria, CA), ble seksjonene behandlet med serum blokkeringsløsning, etterfulgt av å bli inkubert med biotinylert sekundært antistoff (DAKO ). Deretter ble den alkaliske fosfatase konjugat benyttes til hver seksjon i 10 min. Og deretter, ble seksjonene behandlet med substratet kromogen blandingen og dobbeltfarging enhancer. Serumet blokkeringsløsning ble påført på nytt, ble platene inkubert med et annet primært antistoff mot D2-40 (mus monoklonalt antistoff, 1: 200, GM36190, Gene Tech Company Limited, Shanghai) i 60 minutter og det biotinylerte andre anti-immunoglobulin (lg) (DAKO) ble behandlet. Etter påføring med enzym-konjugat i 10 minutter, ble platene inkubert med blandingen av substratbuffer, kromogen oppløsning og 0,6% hydrogenperoksyd for HRP og overvåkes under et mikroskop. Vann fra springen inneholdende 0,05% Tween-20 avsluttes reaksjonen. For negative kontroller, ble seksjonene farget med et ikke-immunserum i stedet for den samme konsentrasjon av primært antistoff. CD34 positive blodårene viste intens rød flekk, og D2-40 positive lymfekar viste mørk lilla flekken.
Double farging for D2-40 /Ki-67
For å påvise proliferativ aktivitet av lymfekar ble utført metoden for dobbel farging for D2-40 /Ki-67. Den D2-40 antistoff ble brukt til å farge lymfekar endotelet, sammen med Ki-67 (kanin monoklonalt antistoff, 1: 200, Santa Cruz, USA) å farge proliferative celler. Ki-67 farging (rød) ble utviklet med alkalisk fosfatase-konjugert sekundært antistoff, og deretter D2-40 farging (brun) ble utviklet med peroksydase-konjugert sekundært antistoff. Proliferative lymfekar ble bekreftet av Ki-67 positivt farget atomkjerner som også hadde samtidig positive cytoplasma farging i D2-40 positive celler. Satsen for dobbel-merket fartøy ble bestemt ved å telle kjerner av tumor-assosiert D2-40-positive skip (100 kjerner i hver svulst) [7].
Assesment av LVD
intratumorale LVD (hot spots ble plassert ved tumor midten) og peritumoral LVD (hot spots ble plassert på periferien vev i 2 mm av tumor ved siden av invasiv foran) ble vurdert separat [2, 7-9]. ble utført kvantitativ analyse av lymfekar tetthet i seksjoner som var single-farget for D2-40. Fem områder med de fleste lymfekar regioner ( "hot spots") ble valgt ved × 40 forstørrelse ved lysmikroskopi. LVD ble vurdert ved å telle alle fargede skip ved × 200 forstørrelse. Det midlere antall av lymfekar vurderes ble bestemt som LVD. Lymfekar invasjon (LVI) ble påvist å være til stede hvis minst en tumorcellegruppe var i D2-40 positive fartøy [10]. Scoring og telling ble utført uavhengig av to etterforskere som ikke hadde noen klinisk informasjon om pasientene. Gjennomsnittlig P-LVD og I-LVD ble beregnet for hvert enkelt tilfelle.
Assesment of VEGFs og VEGFR-tre uttrykk
Positiv farging av VEGF-A, ble C og D uttrykk definert som tidligere studier [6 , 11]. Fargingsresultater for de tre ovennevnte VEGFs ble semikvantitativt bedømt ved en immunohistokjemisk stillingen i kombinasjon med prosentandelen av tumorceller som viser spesifikk immunreaktivitet. Fargeintensitet ble gitt med fire karakterer: ingen (0), svak (1), moderat (2) og sterk (3). Prosentandelen av positive karsinomceller ble gitt med karakterene: 0 (0%), 1 (1% ~ 10%), 2 (11% ~ 49%), 3 (50% ~ 100%), henholdsvis. Den totale poengsum ble beregnet ved å multiplisere den fargeintensitet og prosentandelen av positive tumorceller. Median av poengene ble valgt som nivå cutoff i henhold til hvilke svulster ble kategorisert i lav- (0 ~ 3) og høy-uttrykk (4 ~ 6) svulster [6, 11]. VEGFR-3-positive skip ble bestemt som tidligere beskrevet [12]. Fartøyene av tre hot spots områder ble telt ved × 400 forstørrelse. Farging ble betraktet som positive når mer enn 5% av endotel viste en farge [6]. Peritumoral VEGFR-3-positive fartøy (P-VEGFR-3) og intratumorale VEGFR-3-positive fartøy (I-VEGFR-3) ble vurdert som ovenfor LVD.
Statistisk analyse
Statistisk analyse ble utført ved anvendelse av statistikk Package for Social Science (versjon 11.5, SPSS Inc, Chicago, IL). Prøvene ble delt inn i to kategorier i henhold til medianverdier på henholdsvis I-LVD og P-LVD,. Korrelasjonene av I-LVD og P-LVD med clinicopathologic parametere og VEGFs uttrykk ble analysert av uavhengige utvalg t
test eller Mann-Whitney U
test. Korrelasjonene av VEGFR-tre uttrykk med kliniske parametre ble analysert ved Pearson Chi-Square tester. De relaterte faktorer om lymfeknutemetastase i magekreft ble oppnådd ved å bruke multivariant logistisk regresjonsanalyse. Overlevelseskurver ble oppnådd ved hjelp Kalplan-Meier metoden og sammenlignet med log-rank test. Multivariat overlevelsesanalyse ble evaluert ved hjelp av Cox proporsjonale hazard metode. All den statistiske analysen var to sider med betydning defineres som P
< 0.05.
Resultater
intratumoral og peritumoral lymfatiske egenskaper i magekreft Bedrifter Den D2-40-positive lymfekar hatt uregelmessig morfologi og tynne vegger lumen. Lymfekar i gastrisk vev ble for det meste ligger i sjiktet av submucosa (figur 1). Lymfekar (D2-40-posisjon) og blodårer (CD34-posisjon) var tydelig preget av ytterligere dobbelt farging (figur 2). Intratumorale lymfekar vanligvis har kollapset, små og uregelmessig (figur 3), men noen noncollapsed lymfekar viste åpne lumen, og av og til inneholdt invaderer tumorceller klynger (figur 4). De peritumoral lymfekar i overfladiske og dype delen av submucosa var forstørret med det lymfatiske hulrom utvidede (Figur 5, Figur 6). Det lymfatiske fartøyet invasjonen ble observert i 38 tilfeller. Ingen signifikant korrelasjon ble funnet mellom antall LVD i tumor sentrum og i kontroll vev (8,02 ± 2,28 vs 8,13 ± 1,04, P
> 0,05). Imidlertid er tallene for P-LVD (12,15 ± 3,75) var betydelig høyere enn den i kontroll vev og tumor sentrum (P
< 0,05). Ingen statistisk signifikante forskjeller ble funnet mellom de to metoder for å oppdage lymfekar (enkelt flekker for D2-40 og dobbel farging for D2-40 /CD34) (I-LVD, 8,02 ± 2,28 vs 7,80 ± 2,33; P-LVD, 12,15 ± 3,75 vs 12.42 ± 3.67, P
> 0,05). Figur 1 The D2-40-positive lymphantics hovedsakelig plassert på lag av submucosa i gastrisk vev (piler). IHC, forstørrelse. × 200
Figur 2 Den doble immunhistokjemisk farging for D2-40 og CD34 tydelig preget lymfekar (svart pil) fra blodkar (rød pil). . IHC, forstørrelse: × 400
Figur 3 Den intratumorale lymfekar i magekreft ble kollapset (pil); Double immunhistokjemisk farging, forstørrelse. × 200
Figur 4 Den invaderende kreftceller klynge var tilstede i lymfekar invasjon (LVI). Double immunhistokjemisk farging for D2-40 /CD34, forstørrelse. × 400
Figur 5 De peritumoral lymfekar i magekreft ble utvidet med dilatert lumen ligger på overfladiske submucosa. IHC, forstørrelse. × 200
Figur 6 peritumoral lymfekar i magekreft ble utvidet med dilatert lumen ligger på dyp del av submucosa. IHC, forstørrelse. × 200
Korrelasjoner av I-LVD og P-LVD med clinicopathologic parametere og VEGFs uttrykk
Korrelasjonene av I-LVD og P-LVD med clinicopathologic parametere ble vist i tabell 1. Økt I- LVD var signifikant assosiert med mindre tumorstørrelse (P
< 0,001). Ingen korrelasjon ble funnet mellom I-LVD og VEGFs uttrykk, mens P-LVD var signifikant korrelert med større tumorstørrelse (P
< 0,001), dybde av invasjon (P
= 0,026), lymfeknutemetastase (P
< 0,001), LVI (P
< 0,001), vene invasjon (VI) (P
< 0,001), TNM stadium (P
< 0,001), VEGF-C ( P
= 0,003) og VEGF-D uttrykk (P
= 0,005).
uttrykk for de tre VEGFs viste en positiv cytoplasma farging i magekreftceller. Høy ekspresjon nivå av VEGF-A (figur 7), VEGF-C (Figur 8) og VEGF-D (figur 9) ble observert i 64,2% (79/123), 65,9% (81/123) og 41,5% (51 /123) av prøver, henholdsvis. Verken jeg-LVD eller P-LVD ble funnet signifikant assosiert med VEGF-A uttrykk (P
> 0,05). Figur 7 VEGF-A uttrykk i cytoplasma i magekreft. IHC, forstørrelse. × 400
Figur 8 VEGF-C uttrykk i cytoplasma i magekreft. IHC, forstørrelse. × 400
Figur 9 VEGF-D uttrykk i cytoplasma i magekreft. IHC, forstørrelse. × 200
Proliferative aktiviteter i intra- og peritumoral lymfekar
Proliferative lymfekar ble funnet i svulsten periferien, (Figur 10). Satsen for Ki-67-positive lymfatiske fartøyet kjerner i svulsten periferien var (0,81 ± 0,13)%. Ingen proliferativ lymfatiske kar ble funnet i tumoren midten (figur 11). Lymfekar invasjon kunne bli observert i peritumoral vev (figur 12). Figur 10 Ki-67-positive lymfatiske fartøyet atomkjerner (piler) ble oppdaget i svulsten periferien. Double farging for D2-40 /Ki-67, forstørrelse. × 400
Figur 11 Ingen Ki-67 positive uttrykk i intratumorale lymfekar kjerner. Dobbel farging for D2-40 /Ki-67, forstørrelse:. X 400
Figur 12 lymfekar invasjon ble detektert i peritumoral vev (piler). Double farging for D2-40 /Ki-67, forstørrelse. × 400
VEGFR-tre uttrykk i lymfekar
VEGFR-3-positive uttrykk i tumor periferien (P-VEGFR-3) ble funnet hos 55 av de 123 tilfellene, tidvis med kreft cellegruppene invaderende (figur 13). Imidlertid er bare 34 til 123 tilfellene hadde en VEGFR-3-positiv ekspresjon på tumor sentrum (I-VEGFR-3) (figur 14). Disse fartøyene var for det meste tynne vegger, uregelmessig formet og inneholdt ingen eller få RBC. Figur 13 VEGFR-3-positiv ekspresjon i endotelceller cytoplasma i tumor periferien (P-VEGFR-3), av og til med kreftcellegrupper invaderende (piler). IHC, forstørrelse. × 400
Figur 14 VEGFR-3-positive uttrykk ble plassert på svulst sentrum (piler). . IHC, forstørrelse: × 200
I perifere tumorvev, VEGFR-3 uttrykk var signifikant korrelert heller med VEGF-C høy uttrykk (P
< 0.000), VEGF-D høy uttrykk (P
= 0.043), økt P-LVD (P
< 0,001) og tilstedeværelsen av LVI (P
= 0,003), enn med VEGF-A uttrykk, økt i-LVD, venøs invasjon og lymfeknutemetastase (P
> 0,05). Det ble ikke observert korrelasjoner mellom I-VEGFR-tre uttrykk og kliniske parametre (P
> 0,05). (Tabell 2) Tabell 2 Korrelasjoner av VEGFR-tre uttrykk på differenr svulst beliggenhet med kliniske parametre
Faktorer Book N

I-VEGFR-3
P-VEGFR-3


N (%)
P

N (%)
P
VEGF-A uttrykk
0,107
0,067
lav
44
16 (36.36)
15 (34.09)
79
18 (22.78)
40 (50.63)
VEGF-C uttrykk
0,795
<
høy; 0.001
lav
42
11 (26.19)
9 (21.43)
Høy 81
23 (28.40)
46 (56.79)
VEGF- D uttrykk
0,968
0,043
lav
72
20 (27,78)
27 (37.50)
Høy 51
14 (27.45)
28 (54.90)
P-LVD
0,813
< 0,001
< 14
60
16 (26,67)
10 (16,67)
≥ 14
63
18 (28.57)
45 (71.43)
I-LVD
0,412
0,153
< 8
58
14 (24,14)
22 (37.93)
≥ 8
65
20 (30,77)
33 (50.77)
lymfeknutemetastaser
0,934
0.190
Negativ
55
19 (34.55)
21 (38,18)
Positive
68
15 (22,06)
34 (50.00)
LVI
0,681
0,003
Negativ
76
22 (28.95)
26 (34,21)
Positive
47
12 (25,53)
29 (61,70)
VI
0,387
0,448
Negativ
87
26 (29.89)
37 (42.53)
Positive
36
8 (22.22)
18 (50,00)
forkortelse: LVD: lymfekar tetthet; LVI: lymfekar invasjon; VI: venøs invasjon; I-VEGFR-3: VEGFR-3 positivt uttrykk i svulsten sentrum; P-VEGFR-3: VEGFR-3 positive ekspresjon på tumor periferien
logiske verdi av LVD for lymfeknutemetastase
Som et resultat av multivariat logistisk regresjonsanalyse i tabell 3, VEGF-ekspresjon C og P-LVD. ble betydelig asscoiated med lymfeknutemetastase (P
= 0,024, P
= 0,045, henholdsvis). I-LVD, VEGF-A, VEGF-D og P-VEGFR-tre uttrykk viste ikke prediktiv verdi for lymfeknutemetastaser i magekreft. (Tabell 3) Tabell 3 Multivariat logistisk regresjonsanalyse for lymfeknutemetastase
Faktorer
odds ratio
95% KI

P
P-LVD
3,548
1,030 -12,226
0,045
I-LVD
1.300
0,964 til 1,754
0,085
VEGF-A
0,510
0,138 til 1,884
0,313
VEGF-C
4,069
1,198 til 13,820
0,024
VEGF-D
3,162
0,834 til 11,992
0,091
P-VEGFR-3
2,919
0,747 til 11,403
0,123
forkortelse: LVD: lymfekar tetthet; P-VEGFR-3. VEGFR-3 positive uttrykk ved svulsten periferien
Prognostic betydningen av I-LVD og P-LVD
På univariat overlevelse analyse, P-LVD ble assosiert med dårlig total overlevelse (Figur 15, P
< 0,001), sykdomsfri overlevelse (figur 16, P
< 0,001) og kreftspesifikk overlevelse (Figur 17, P
< 0,001). Men jeg-LVD ble korrelert med en-signifikant trend mot all henholdsvis ovenfor (total overlevelse, P
= 0,5835, figur 18, sykdomsfri overlevelse, P
= 0,2844, figur 19; kreftspesifikk overlevelse, P
= 0,6246, figur 20). Figur 15 Forholdet mellom P-LVD med total overlevelse (P < 0,001).
Figur 16 Forholdet mellom P-LVD med sykdomsfri overlevelse (P < 0,001).
Figur 17 Forholdet mellom P-LVD med kreftspesifikk overlevelse (P < 0,001)..
Figur 18 Forholdet mellom I-LVD med total overlevelse (p = 0,5825)
Figur 19 Forholdet mellom I-LVD med sykdomsfri overlevelse (P = 0,2844) .
Figur 20 Forholdet mellom i-LVD med kreftspesifikk overlevelse (P = 0,6246).
Multivariat regresjonsanalyse indicateded at P-LVD kan være en uavhengig prognostisk faktor for både total overlevelse (P
= 0,045 ) og sykdomsfri overlevelse (P
= 0,031), til tross for cancer-spesifikk overlevelse. Videre nærvær av LVI og TNM stadium kan tjene som selvstendig prediktorer for alle de tre overlevelse (LVI, P
= 0,040, 0,043, 0,039, TNM stadium, P
= 0,048, 0,001, 0,001, Tabell 4) . VEGF-A uttrykk var uavhengig prognostisk prediktor bare for total overlevelse (P
= 0,033). Ingen statistisk signifikante korrelasjoner for I-LVD, VEGF-C, VEGF-D og P-VEGFR-3 med en hvilken som helst av de overlevelsene ble funnet. (Tabell 4) Tabell 4 Cox regresjonsanalyse av uavhengige faktorer som påvirker sykdomsfri overlevelse, kreftspesifikk overlevelse og total overlevelse
Factors
kreftspesifikk overlevelse
sykdomsfri overlevelse
Total overlevelse

OR (95% CI)

P
OR (95% CI)
P
OR (95% CI)
P

P-LVD
2,099 (0,91 til 4,87)
0,084
2,418 (1,08 til 5,40)
0,031
2,895 (01.02 til 08.19)
0.045
I-LVD
1,205 (0,56 til 2,63)
0,639
1,325 (0,62 til 2,85)
0,472
1,959 (0.90-4.24)
0.088
VEGF-A
1.386(0.50-3.83)
0.528
1.364(0.67-2.78)
0.391
2.437(1.10-5.45)
0.030
VEGF-C
2.423(0.89-6.63)
0.085
1.630(0.77-3.47)
0.205
1.562 (0,79 til 3,34)
0,182
VEGF-D
0,511 (0,19 til 1,36)
0,178
1,916 (0,90 til 4,10)
0,094
1,621 (0,81 til 3,98)
0.190
LVI
2,716 (01.05 til 07.04)
0,040
2,477 (1,03 til 5,97)
0,043
2,578 (1,05 til 6,34)
0,039
LNM
2,115 (0,68 til 6,60)
0,197
2,428 (01.18 til 05.02)
0,017
3,426 (1.66-7.06)
0.001
VI
2.943(0.89-9.77)
0.078
1.697(0.75-3.87)
0.208
1.477(0.63-3.48)
0.373
P-VEGFR-3
1. 499 (0,98 til 2,31)
0,067
1,099 (0,53 til 2,28)
0,800
1,402 (0,68 til 2,90)
0,361
TNM stadium
1,523 (1,00 til 2,31)
0,048
1,674 (01.25 til 02.25)
0,001
1.656 (1.23 til 2.23)
0,001
forkortelse: P-LVD: peritumoral lymfekar tetthet; I-LVD: intratumoral lymfekar tetthet; LVI: lymfekar invasjon; LNM: lymfeknutemetastase; VI: venøs invasjon; P-VEGFR-3.: VEGFR-3 positive ekspresjon på tumor periferien
diskusjon
Nylig har D2-40 antistoff, en ny markør for lymfatisk endotel, ble identifisert som det spesifikke antistoff mot humant podoplanin [13] . Mange studier har indikert at farging av D2-40 er spesifikk for evaluering av lymfatisk invasjon og lymfatiske microvessel tetthet i humane kreftformer, blant annet i magekreft [14-17]. I denne studien ble LVD og lymfekar invasjon identifisert av D2-40 flekker, og bekreftet ved å dobbelt farging for D2-40 og CD34, som klart diskriminert lymfekar fra blodkar videre.

• P27Kip1, regulert av glykogen syntase kinase-3β, resulterer i HMBA-indusert differensiering av humane magecancerceller
• En retrospektiv kohortstudie av pasienter med mage og lever kreft: effekten av komorbiditet og etnisitet på kreftomsorg og outcomes