Différent importance entre intratumorale et la densité des vaisseaux lymphatiques peritumoral dans le cancer gastrique: une étude rétrospective de 123 cases

différente signification entre la densité des vaisseaux lymphatiques intratumorale et peritumoral dans le cancer gastrique: une étude rétrospective de 123 cas
Résumé de l'arrière-plan
patients avec cancer de l'estomac en Chine ont plus mauvais résultat et moins bon pronostic. lymphangiogenèse induite par des tumeurs joue un rôle crucial dans les métastases et la progression tumorale. Les lymphatics intratumoral et péritumoraux étaient censés avoir des effets biologiques différents. Trois grands facteurs de croissance, facteur de croissance vasculaire endothéliale (VEGF) -A, VEGF-C et VEGF-D, sont impliqués dans le processus d'activation par l'intermédiaire de leurs récepteurs (VEGFR). Le but de l'étude en cours est d'étudier la différence significative entre la densité intratumorale et peritumoral vaisseau lymphatique (LVD) dans le cancer gastrique et leurs corrélations avec les facteurs de croissance lymphangiogenetic
. Intratumorale LVD de méthodes (I-LVD) et LVD peritumoral ( P-LVD) de 123 patients atteints de cancer gastrique primaire ont été évalués après coloration avec D2-40, et confirmé par une double coloration avec D2-40 /CD34. l'activité proliférative de lymphatics endothélium a été évaluée par une double coloration avec D2-40 /Ki-67. Les associations ont été analysées entre I-DBT /P-DBT et le niveau de l'expression du VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D et le récepteur VEGFR-3, qui a été mesurée par immunohistochimie (IHC). Les corrélations de I-LVD et P-LVD avec le pronostic du patient ont également été évalués.
Résultats
(1) Les lymphatics péritumoraux (PTL) étaient relativement élargie avec la lumière dilatés par rapport aux lymphatics intratumoral (ITLS). Augmentation de P-LVD était significativement plus élevée que I-LVD (P
< 0,05). (2) P-LVD a été trouvé significativement associée à des métastases ganglionnaires (LNM) (P
< 0,001), l'invasion des vaisseaux lymphatiques (LVI) (P
< 0,001), le VEGF-C (P
= 0,003), VEGF-D niveau d'expression (P
= 0,005) et VEGFR-3 niveau d'expression (P
< 0,001) dans les tissus péritumoraux, malgré aucune association significative n'a été trouvée entre les variantes ci-dessus avec I-LVD . Cependant, l'augmentation de I-LVD a été démontrée à être associée à une diminution du volume de la tumeur (P
< 0,001). Ni moi-LVD, ni P-LVD a été corrélée avec le VEGF-A expression (P
> 0,05). (3) L'activité proliférative des vaisseaux lymphatiques endothelium a été observée dans PTL, malgré ITLS. (4) Augmentation de P-LVD, mais pas I-LVD, a été indiqué comme étant un facteur de risque indépendant de métastases ganglionnaires par analyse de régression logistique multivariée, et a été liée à la survie pire sans maladie et la survie globale
. Conclusions
PTL jouent un rôle dans la progression du cancer de l'estomac. Augmentation de P-LVD, mais pas I-LVD, était significativement associée à VEGF-C /-D /VEGFR-3 système, et pourrait être un facteur de risque indépendant pour les métastases des ganglions lymphatiques et un facteur pronostique dans le cancer gastrique.
Contexte cancer gastrique
est la principale cause de décès lié au cancer en Chine. Environ 80% ~ 90% des patients sont diagnostiqués à un stade avancé avec un mauvais pronostic, souvent avec la diffusion lymphatique et métastases à distance. Au cours des dernières années, la lymphangiogenèse induite par une tumeur due à des facteurs de croissance lymphangiogéniques a été fermement établi comme un nouveau mécanisme pour la progression du cancer. De nos jours, un nombre croissant d'experts estiment que lymphatics intratumoral (ITLS, les lymphtics dans les tumeurs) et lymphatiques péritumoraux (PTL, lymphtics à la périphérie) jouent des rôles biologiques exactement distincts sur le comportement de la tumeur et le pronostic dans différents types de tumeurs. Dans le cancer gastrique, plusieurs études ont montré que les patients avec plus I-LVD ont eu la plus grande présence de métastases ganglionnaires au début de l'étape [1], alors que P-LVD pourrait être un facteur de risque indépendant de métastases des ganglions lymphatiques et le pronostic [2]. Cependant, la fonction de I-LVD et P-LVD et leurs corrélations avec VEGF expression n'a pas encore été clarifiée.
Un certain nombre d'études ont démontré le rôle crucial de VEGF expressions sur la progression de la tumeur et le pronostic dans le cancer gastrique. VEGF-C et VEGF-D, deux membres de la famille VEGF, ont été définies comme étant les facteurs de croissance lymphangiogéniques et jouent un rôle important dans la lymphangiogenèse tumorale via l'activation de VEGFR-3, qui est principalement exprimé dans les cellules endothéliales lymphatiques (ESL). VEGF-C est un régulateur dominant de la lymphangiogenèse dans les deux cancer gastrique précoce et avancé [3, 4]. Augmentation de l'expression de VEGF-C avait une corrélation significative avec LVD, LVI et métastase ganglionnaire [5], mais sa valeur pronostique est restée controversée. VEGF-D a été impliqué dans la propagation des cellules lymphatiques de cancer gastrique et pourrait être un marqueur pronostique indépendant [6]. VEGFR-3 a également été indiqué comme facteur pronostique [6]. Un autre facteur de croissance, VEGF-A, qui règle l'angiogenèse, a également été envisagée pour stimuler la lymphangiogenèse par liaison à VEGFR-2 récemment. Augmentation de VEGF-A niveau de patients atteints de cancer gastrique d'expression avait été prouvé être liée à la densité de microvaisseaux (MVD), la métastase hématogène, disseminateion péritonéale et de mauvais pronostic. Cependant, on ne sait pas si les deux lymphtics intratumoral et péritumoraux sont stimulés par les trois VEGFs sécrétées par les cellules tumorales, ou si le jeu I-LVD et P-LVD significativement différents rôles biologiques dans les métastases des ganglions lymphatiques et le pronostic dans le cancer gastrique.
Méthodes
patients et tumoraux spécimens
échantillons de tumeur ont été obtenus à partir de 123 patients atteints de cancer gastrique primaire qui ont accepté gastrectomie au Département de chirurgie, Hôpital Tongji de l'Université Tongji de Janvier 2000 à Décembre 2003. Aucun d'entre eux avait reçu préopératoire une chimiothérapie ou un traitement par radiothérapie. La population étudiée était composée de 80 hommes (65%) et 43 femmes (35%). L'âge moyen au moment du diagnostic était de 65 ans (à distance de 28 à 87 ans). Trente et un cas de cancer gastrique précoce (EGC) et 92 cas de cancer gastrique avancé (AGC) ont été impliqués. Stade histologique a été basé sur la classification UICC TNM. Les autres caractéristiques cliniques ont été résumées dans le tableau 1. Tous les patients ont été suivis cliniquement pendant au moins 5 ans après la chirurgie. La durée moyenne du suivi était de 56 mois (à distance de 6 à 85 mois). L'analyse de survie a été réalisée, y compris la survie globale (OS), la survie sans maladie (DFS) et la survie spécifique du cancer (CSS). OS, DFS et CSS a été calculé à partir de la date de la chirurgie au dernier contact pour les patients vivant, à la date du dernier suivi pour les patients sans maladie, et la date du décès gastrique cancer induit, respectivement. Quatre cas EGC et 52 cas AGC ont eu lieu la récidive. Onze patients ont eu la diffusion péritonéale, 26 patients des métastases hépatiques, et 19 cas de rechute dans l'estomac après l'opération. Quarante patients sont décédés d'un cancer gastrique. L'étude actuelle a été approuvée par le Comité d'éthique de la recherche de l'hôpital Tongji affilié à l'Université de Tongji. Les tissus gastriques normales ont été recueillies dans des échantillons de contrôle. Tous les résultats ont été réalisées par deux pathologistes indépendamment, et les moyens ont été calculés pour chaque cas sur la base des données obtained.Table 1 Corrélations de LVD avec des paramètres clinicopathologiques et expressions VEGF
Facteurs
N
I-LVD
P-LVD


moyenne ± SD
P
moyenne ± SD
P
différenciation tumorale
0,802
0,739
High différencié
11
8,18 ± 2,44 ± 4,49
12.07
Mederately /pauvres différencié
112
8,00 ± 2,27 ± 3,60 12,46

Tumor taille
< 0,001
< 0,001
< 57
8,93 ± 2,34
11,18 ± 3,80
≥ 3,2 cm de 3,2 cm de
66
7,23 ± 1,91
13.50 ± 3.21
Profondeur d'invasion
0,433 69
8,16 ± 2,51
11,78 ± 3,52
pT3-4
0,026
pT1-2
54
7,83 ± 1,96
13,26 ± 3,71
ganglionnaire métastase
0,056 *
< 0,001
négatif
57
8,47 ± 2,27
10,50 ± 3,42
66
7,65 ± 2,24
13.98 ± 3.10
LVI positif
0,700
< 0,001
négatif
83
8,08 ± 2,33
11.23 ± 3.29
positive
40
7,91 ± 2,22
14,36 ± 3,44
VI
0,905
< 0,001
négatif
86
8,00 ± l'étape 37
8,05 ± 2,67
14,24 ± 2,53
TNM de 2,38
11.65 ± 3.81
positive
0,067
< 0,001
I - II
71
8,34 ± 2,42
11.33 ± 3.29
III - IV
52
7.58 ± 2.01
13,92 ± 3,66
VEGF-A expression
0,527
0,091 Low
79
8,26 ± 2,21
12,84 ± 3,69
VEGF-C l'expression de 44
7,84 ± 2,51
11,68 ± 3,54
haut
0,092 *
81
8,00 ± 2,34 ± 3,69
13.13
42
7,55 ± 2,37
11.06 ± 3.26
haut de 0,003 Low expression VEGF-D
0,514
0,005
Bas
Haute de 72
7,90 ± 2,47
11.65 ± 3.44
51
8.18 ± 1.99
13.53 ± 3,73
P
, test t; P
*, le test de Mann-Whitney U. Abréviation: LVD: la densité des vaisseaux lymphatiques; LVI: invasion des vaisseaux lymphatiques. VI. Immunohistochimie à l'unité pour l'invasion veineuse D2-40, le VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D et VEGFR-3
Pour la coloration immunohistichemical, 4 lames de paraffine um d'épaisseur ont été découpées dans chaque étude bloque. Les coupes ont été traitées avec 0,3% de H 2 O 2 pendant 10 min à température ambiante. Pour la récupération des antigènes, les lames ont été chauffées dans un four à micro-ondes contenant du citrate /L de sodium 0,01 mmoles (pH 6,0). Les lamelles ont été incubées à 4 ° C pendant une nuit dans un bac d'humidité avec des anticorps primaires, le VEGF-A (anticorps monoclonal de souris, 1: 100, DAKO), le VEGF-C (anticorps polyclonal de chèvre, 1: 100, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), le VEGF-D (anticorps polyclonal de chèvre, 1: 100, Santa Cruz), VEGFR-3 (anticorps polyclonal de chèvre, 1: 100, Santa Cruz) et D2-40 (anticorps monoclonal de souris, 1: 100, DAKO), respectivement. Les lamelles ont été rincées trois fois dans 0,1 mmol /L de PBS pendant 2 min, et on a incubé pendant 30 min à température ambiante avec du raifort de chèvre anti-lapin /souris peroxydase (Envision, Dako, CA) pour identifier la cible. Les sections ont été développées avec 3 '3-diaminobenzidine. L'IgG de chèvre normale a été servi comme témoin négatif de réaction pour la coloration de VEGF-C, VEGF-D et VEGFR-3, et de l'IgG de lapin normal a été servi comme témoin négatif de réaction pour la coloration du VEGF-A et D2-40.
Double coloration immunohistochimique pour D2-40 /CD34
la coloration immunohistochimique pour deux D2-40 /CD34 était encore traitée pour évaluer la spécificité de l'expression D2-40 dans l'endothélium lymphatique. La proposition a été selon les instructions du fabricant (No: 95-9999, Histostain-DS Kit, Zymed, CA). Paraffine 4 um sections ont été déparaffinées avec du xylène et hydratées. Les lames ont été immergées dans une solution de trempe à la peroxydase pendant 10 min. Après avoir été mis en incubation pendant une nuit à 4 ° C avec les anticorps primaires contre CD34 (anticorps monoclonal de souris, 1: 100, DAKO, Carpinteria, CA), les coupes ont été traitées avec du sérum solution de blocage, suivi par mise en incubation avec l'anticorps secondaire biotinylé (DAKO ). Par la suite, le conjugué de phosphatase alcaline a été utilisé pour chaque section pendant 10 minutes. Ensuite, les sections ont été traitées avec le mélange substrat chromogène et le double amplificateur de la coloration. Le sérum solution de blocage a été appliqué à nouveau, les lames ont été incubées avec un anticorps primaire contre D2-40 (anticorps monoclonal de souris, 1: 200, GM36190, Gene Tech Co., Ltd, Shanghai, Chine) pendant 60 min et le deuxième anti-immunoglobuline biotinylé (Ig) (DAKO) a été traitée. Après l'application d'un conjugué avec une enzyme pendant 10 min, les lames ont été incubées avec le mélange de tampon de substrat, une solution chromogène et 0,6% de peroxyde d'hydrogène pour HRP et contrôlées au microscope. L'eau du robinet contenant 0,05% de Tween-20 mis fin à la réaction. Pour les contrôles négatifs, les sections ont été colorées avec un sérum non immun au lieu de la même concentration d'anticorps primaire. Les vaisseaux sanguins positifs CD34 ont montré la tache rouge intense, ainsi que les D2-40 vaisseaux lymphatiques positifs ont montré la tache pourpre foncé.
Double coloration pour D2-40 /Ki-67
Pour détecter l'activité proliférative des vaisseaux lymphatiques , la méthode de la double immunocoloration pour D2-40 /Ki-67 a été réalisée. L'anticorps a été D2-40 utilisé pour colorer les vaisseaux lymphatiques endothélium, avec Ki-67 (un anticorps monoclonal de lapin, 1: 200, Santa Cruz, USA) pour colorer les cellules prolifératives. Ki-67 coloration (rouge) a été développé avec un anticorps secondaire conjugué à la phosphatase alcaline, puis D2-40 coloration (brun) a été développé avec un anticorps secondaire conjugué à la peroxydase. vaisseaux lymphatiques prolifératives ont été confirmés par Ki-67 noyaux positivement colorés qui avaient également concomitante coloration cytoplasmique positive dans D2-40 cellules positives. Le taux des navires à double marqué a été déterminée en comptant les noyaux des vaisseaux D2-40 positifs associés aux tumeurs (100 noyaux dans chaque tumeur) [7].
Assesment de intratumorale LVD LVD (points chauds ont été localisés au centre tumeur) et LVD peritumoral (points chauds ont été localisés au niveau du tissu périphérique à moins de 2 mm de la tumeur adjacente à l'avant invasive) ont été évalués séparément [2, 7-9]. L'analyse quantitative de la densité des vaisseaux lymphatiques a été réalisée dans les sections qui étaient mono-colorées pour D2-40. Cinq domaines avec la plupart des régions ( «lymphatiques hot spots») ont été choisis au × 40 grossissement par microscopie optique. LVD a été évaluée en comptant tous les vaisseaux colorés à × 200 grossissement. Le nombre moyen de lymphatics évalués a été déterminée comme LVD. Invasion des vaisseaux lymphatiques (LVI) a été détecté comme étant présent si au moins une grappe de cellules tumorales était D2-40 vaisseaux positifs [10]. Notation et comptage ont été effectués de manière indépendante par deux enquêteurs qui ont eu aucune information clinique des patients. La moyenne P-LVD et I-LVD ont été calculés pour chaque cas.
Assesment de VEGF et VEGFR-3 expressions
coloration positive de VEGF-A, C et l'expression -D a été définie comme les études antérieures [6 , 11]. les résultats de coloration pour les trois VEGFs ci-dessus sont semi-quantitative évaluée par immunohistochimie un score combiné avec le pourcentage de cellules tumorales présentant une immunoréactivité spécifique. intensité de la coloration a été donné avec quatre grades: aucun (0), faible (1), modérée (2) et fort (3). Le pourcentage de cellules de carcinome positives a été faite en relation avec les notes: 0 (0%) 1 (1% ~ 10%), 2 (11% ~ 49%), 3 (50% ~ 100%), respectivement. Le score total a été calculé en multipliant l'intensité de la coloration et le pourcentage de cellules tumorales positives. La médiane du score a été choisi comme le niveau de coupure selon laquelle les tumeurs ont été classées en faible (0 ~ 3) et de haute expression (4 ~ 6) tumeurs [6, 11]. VEGFR-3-positifs navires ont été déterminés comme décrit précédemment [12]. Les navires de trois zones de points chauds ont été comptées à 400 × grossissement. La coloration a été considérée comme positive lorsque plus de 5% de l'endothélium a montré une coloration [6]. navires peritumoral VEGFR-3-positifs (P-VEGFR-3) et les navires VEGFR-3-positifs intratumoral (I-VEGFR-3) ont été évalués comme ci-dessus LVD. L'analyse statistique
analyse statistique a été effectuée en utilisant les statistiques Forfait pour le logiciel des sciences sociales (version 11.5, SPSS Inc, Chicago, IL). Les échantillons ont été divisés en deux catégories selon les valeurs médianes de I-LVD et P-LVD, respectivement. Les corrélations de I-LVD et P-LVD avec des paramètres et des VEGF clinicopathologiques expressions ont été analysées par le test de échantillons indépendants t ou le test de Mann-Whitney U. Les corrélations de VEGFR-3 expression avec des paramètres cliniques ont été analysés par Tests Pearson Chi-carré. Les facteurs liés au sujet de métastases ganglionnaires dans le cancer gastrique ont été réalisées en utilisant l'analyse de régression logistique multivariée. Les courbes de survie ont été obtenus en utilisant la méthode Kalplan-Meier et comparées par le test du log-rank. analyse de survie multivariée a été évaluée en utilisant la méthode des risques proportionnels de Cox. Toute l'analyse statistique a deux côtés avec une signification définie comme P
< Résultats de 0,05.
intratumorale et caractéristiques lymphatiques péritumoraux dans le cancer gastrique
Les vaisseaux lymphatiques D2-40-positifs avaient une morphologie irrégulière et lumière à parois minces. Les vaisseaux lymphatiques dans les tissus gastriques étaient principalement situées dans la couche de sous-muqueuse (Figure 1). Les vaisseaux lymphatiques (D2-40-position) et les vaisseaux sanguins (CD34-position) ont été clairement distinguées par une autre double coloration (Figure 2). vaisseaux lymphatiques intratumorale étaient généralement effondrés, petite et irrégulière (figure 3), mais certains lymphatics noncollapsed montré lumière ouverte, et parfois contenues envahir les cellules tumorales grappes (Figure 4). Les vaisseaux lymphatiques péritumoraux dans la partie superficielle et profonde de la sous-muqueuse étaient tous élargie avec les cavités dilatées lymphatiques (de la figure 5, figure 6). L'invasion des vaisseaux lymphatiques a été observée dans 38 cas. Aucune corrélation significative n'a été trouvée entre le nombre de LVD dans le centre de la tumeur et dans les tissus de contrôle (8,02 ± 2,28 vs 8,13 ± 1,04, P
> 0,05). Cependant, le nombre de P-LVD (12,15 ± 3,75) étaient significativement plus élevés que dans les tissus de contrôle et le centre de la tumeur (P
< 0,05). Aucune différence statistique n'a été trouvée entre les deux méthodes de détection lymphatics (coloration unique pour D2-40 et double coloration pour D2-40 /CD34) (I-LVD, 8,02 ± 2,28 vs 7,80 ± 2,33; P-LVD, 12,15 ± 3,75 vs 12,42 ± 3,67, P
> 0,05). Figure 1 Les lymphantics de D2-40-positives principalement situées dans la couche de sous-muqueuse dans le tissu gastrique (flèches). IHC, agrandissement:. × 200
Figure 2 La coloration immunohistochimique pour deux D2-40 et CD34 distingue clairement les vaisseaux lymphatiques (flèche noire) à partir de vaisseaux sanguins (flèche rouge). . IHC, d'agrandissement: × 400
Figure 3 Les vaisseaux lymphatiques intratumoral dans le cancer gastrique ont été effondré (flèche); Double coloration immunohistochimique, grossissement:. × 200
Figure 4 Les cellules cancéreuses cluster envahisseurs étaient présents dans l'invasion des vaisseaux lymphatiques (LVI). Double coloration immunohistochimique pour D2-40 /CD34, agrandissement:. × 400
Figure 5 Les vaisseaux lymphatiques péritumoraux dans le cancer gastrique ont été agrandie avec lumière dilatés situés à la sous-muqueuse superficielle. IHC, agrandissement:. × 200
Figure 6 Les vaisseaux lymphatiques péritumoraux dans le cancer gastrique ont été agrandies avec la lumière dilatés situés à une partie profonde de la sous-muqueuse. IHC, agrandissement:. × 200
Corrélations de I-LVD et P-LVD avec des paramètres et des VEGF clinicopathologiques expressions
Les corrélations de I-LVD et P-LVD avec des paramètres clinicopathologiques ont été présentés dans le Tableau 1. Augmentation I- LVD était significativement associée à la taille de la tumeur plus petite (P
< 0,001). Aucune corrélation n'a été trouvée entre I-LVD et VEGF expressions, tandis que P-LVD était significativement corrélée avec la taille plus grande de la tumeur (P
< 0,001), la profondeur de l'invasion (P = 0,026
), métastases ganglionnaires (P
< 0,001), LVI (P
< 0,001), l'invasion veineuse (VI) (P
< 0,001), le stade TNM (P
< 0,001), le VEGF-C ( P
= 0,003) et de l'expression de VEGF-D (P
= 0,005). es expression des trois VEGF ont présenté une coloration cytoplasmique positive dans les cellules cancéreuses gastriques. le niveau d'expression élevée de VEGF-A (figure 7), le VEGF-C (figure 8) et VEGF-D (figure 9) ont été observées chez 64,2% (79/123) 65,9% (81/123) et 41,5% (51 /123) des spécimens, respectivement. Ni moi-LVD, ni P-LVD a été trouvé significativement associée avec le VEGF-A expression (P
> 0,05). La figure 7 VEGF-A expression dans le cytoplasme dans le cancer gastrique. IHC, agrandissement:. × 400
Figure 8 VEGF-C expression dans le cytoplasme dans le cancer gastrique. IHC, agrandissement:. × 400
Figure 9 expression VEGF-D dans le cytoplasme dans le cancer gastrique. IHC, agrandissement:. × 200
activités prolifératives dans lymphatics intra- et péritumoraux
vaisseaux lymphatiques prolifératives ont été trouvés dans la périphérie de la tumeur, (figure 10). Le taux de noyaux lymphatiques des vaisseaux Ki-67-positif dans la périphérie de la tumeur était (0,81 ± 0,13)%. Aucun vaisseau lymphatique proliférative a été trouvé dans le centre de la tumeur (Figure 11). l'invasion des vaisseaux lymphatiques a pu être observé dans les tissus péritumoraux (figure 12). Figure noyaux des vaisseaux lymphatiques 10 Ki-67-positifs (flèches) ont été détectés dans la périphérie de la tumeur. Double coloration pour D2-40 /Ki-67, grossissement:. × 400
Figure 11 Pas de Ki-67 expression positive dans les vaisseaux lymphatiques intratumoral noyaux. Double coloration pour D2-40 /Ki-67, grossissement:. × 400
Figure 12 Lymphatique navires invasion a été détectée dans le tissu peritumoral (flèches). Double coloration pour D2-40 /Ki-67, grossissement:. × 400
VEGFR-3 expression dans les vaisseaux lymphatiques
L'expression VEGFR-3-positif dans la périphérie de la tumeur (P-VEGFR-3) a été trouvé dans 55 des 123 cas, parfois avec des grappes de cellules cancéreuses envahissantes (figure 13). Cependant, seulement 34 des 123 cas avaient une expression de VEGFR-3-positif au centre de la tumeur (I-VEGFR-3) (Figure 14). Ces navires étaient pour la plupart à paroi mince, de forme irrégulière et ne contenaient pas ou peu de globules rouges. Figure 13 L'expression de VEGFR-3-positives dans les cellules endothéliales cytoplasme en périphérie de la tumeur (P-VEGFR-3), avec parfois des amas de cellules cancéreuses envahissent (flèches). IHC, agrandissement:. × 400
Figure 14 Les expressions VEGFR-3-positifs ont été situé au centre de la tumeur (flèches). . IHC, grossissement: x 200
Dans les tissus tumoraux périphériques, VEGFR-3 expressions étaient significativement corrélées plutôt avec le VEGF-C expression élevée (P
< 0,000), le VEGF-D expression élevée (P =
0,043), l'augmentation de P-LVD (P
< 0,001) et la présence de LVI (P
= 0,003), qu'avec le VEGF-A expression, augmenté I-LVD, invasion veineuse et métastase ganglionnaire (P
> 0,05). Aucune corrélation n'a été observée entre I-VEGFR-3 expression et paramètres cliniques (P
> 0,05). (Tableau 2) Tableau 2 Corrélations de VEGFR-3 expression à l'emplacement de la tumeur differenr avec des paramètres cliniques
Facteurs
N

I-VEGFR-3
P-VEGFR-3


N (%)
P

N (%)
P
VEGF-A expression
0,107
0,067
Low
44
16 (36,36)
15 (34.09) de haut
79
18 (22.78)
40 (50.63)
VEGF-C expression
0,795
< 0,001 Low
42
11 (26.19)
9 (21,43) de haut
81
23 (28.40)
46 (56.79)
VEGF expression de D
0,968
0,043
Low
72
20 (27.78)
27 (37.50) de haut
51
14 (27.45)
28 (54.90)
P-LVD
0,813
< 0,001
< 14
60
16 (26.67)
10 (16,67)
≥ 14
63
18 (28.57)
45 (71.43)
I-LVD
0,412
0,153
< 8
58
14 (24.14)
22 (37.93)
≥ 8
65
20 (30.77)
33 (50.77)
métastases ganglionnaires
0,934
0,190
négatif
55
19 (34.55)
21 (38.18)
positif
68
15 (22.06)
34 (50.00)
LVI
0,681
0,003

négatif 76
22 (28.95)
26 (34.21)
positif
47
12 (25.53)
29 (61.70)
VI
0,387
0,448
négatif
87
26 (29.89)
37 (42.53)
positif
36
8 (22.22)
18 (50.00)
Abréviation: LVD: la densité des vaisseaux lymphatiques; LVI: invasion des vaisseaux lymphatiques; VI: invasion veineuse; I-VEGFR-3: VEGFR-3 expression positive dans le centre de la tumeur; P-VEGFR-3: VEGFR-3 expression positive à la périphérie de la tumeur
Valeur prédictive de LVD pour métastase ganglionnaire
À la suite de l'analyse multivariée de régression logistique dans le tableau 3, VEGF-C expression et P-LVD. étaient significativement asscoiated avec métastase ganglionnaire (P = 0,024
, P = 0,045
, respectivement). I-LVD, VEGF-A, VEGF-D et P-VEGFR-3 expression n'a pas montré la valeur prédictive pour les métastases ganglionnaires dans le cancer gastrique. (Tableau 3) Tableau 3 multivariée analyse de régression logistique pour les métastases ganglionnaires
Facteurs
Odds ratio
95% CI

P
P-LVD
3.548
1.030 -12,226
0,045
I-LVD
1.300
0,964 à 1,754
0,085
VEGF-A
0,510
0,138 à 1,884
0,313
VEGF-C
4.069
1,198 à 13,820
0,024
VEGF-D
3.162
0,834 à 11,992
0,091
P-VEGFR-3
2.919
0,747 à 11,403
0,123
Abréviation: LVD: la densité des vaisseaux lymphatiques; P-VEGFR-3. VEGFR-3 expression positive à la périphérie de la tumeur
signification pronostique de
I-LVD et P-LVD Sur l'analyse de survie univariée, P-LVD a été associée à la survie globale médiocre (Figure 15, P
< 0,001), la survie sans maladie (Figure 16, P
< 0,001) et la survie spécifique du cancer (Figure 17, P
< 0,001). Cependant, I-LVD a été corrélée avec une tendance non significative vers tous les respectivement au-dessus (survie globale, P = 0,5835
, Figure 18; la survie sans maladie, P = 0,2844
, Figure 19, la survie spécifique au cancer, P
= 0,6246, Figure 20). Figure 15 Relation entre P-LVD avec la survie globale (P < 0,001).
Figure 16 Relation entre P-LVD avec la survie sans maladie (P < 0,001).
Figure 17 Relation entre P-LVD avec spécifique au cancer de survie (P < 0,001)..
Figure 18 relation entre I-LVD avec la survie globale (P = 0,5825)
Figure 19 relation entre I-LVD avec la survie sans maladie (P = 0,2844) l'analyse multivariée de régression de.
Figure 20 relation entre I-LVD avec la survie spécifique au cancer (P = 0,6246). indicateded que P-LVD pourrait être un facteur indépendant de pronostic pour les deux la survie globale (P = 0,045
) et sans maladie de survie (P = 0,031
), en dépit de la survie spécifique au cancer. En outre, la présence de LVI et le stade TNM pourrait servir les prédicteurs indépendants pour tous les trois survivances (LVI, P = 0,040
, 0,043, 0,039, stade TNM, P
= 0,048, 0,001, 0,001, tableau 4) . VEGF-A expression était le prédicteur pronostique indépendant seulement pour la survie globale (P = 0,033
). Aucune différence statistiquement des corrélations significatives pour I-LVD, le VEGF-C, VEGF-D et P-VEGFR-3 avec l'un des survies ont été trouvés. (Tableau 4) Tableau 4 Cox analyse de régression des facteurs indépendants affectant la survie sans maladie, la survie spécifique au cancer et la survie globale
Facteurs survie
cancer spécifique
sans maladie survie
survie globale

OR (IC à 95%)

P
OR (IC à 95%)
P
OR (IC à 95%)
P

P-LVD
2.099 (0,91 à 4,87)
0,084
2.418 (1,08 à 5,40)
0,031
2.895 (1,02 à 8,19)
0,045
I-LVD
1.205 (0,56 à 2,63)
0,639
1,325 (0,62 à 2,85)
0,472
1.959 (0.90-4.24)
0.088
VEGF-A
1.386(0.50-3.83)
0.528
1.364(0.67-2.78)
0.391
2.437(1.10-5.45)
0.030
VEGF-C
2.423(0.89-6.63)
0.085
1.630(0.77-3.47)
0.205
1.562 (0,79 à 3,34)
0,182
VEGF-D
0,511 (0,19 à 1,36)
0,178
1.916 (0,90 à 4,10)
0,094
1.621 (0,81 à 3,98)
0,190
LVI
2.716 (01.05 à 07.04)
0,040
2.477 (1,03 à 5,97)
0,043
2.578 (1,05 à 6,34)
0,039
LNM
2.115 (0,68 à 6,60)
0,197
2.428 (01/18 à 05/02)
0,017
3.426 (1.66-7.06)
0.001
VI
2.943(0.89-9.77)
0.078
1.697(0.75-3.87)
0.208
1.477(0.63-3.48)
0.373
P-VEGFR-3
1. 499 (0,98 à 2,31)
0,067
1.099 (0,53 à 2,28)
0,800
1.402 (0,68 à 2,90)
0,361
stade TNM
1,523 (1,00 à 2,31)
0,048
1.674 (1,25-2,25)
0,001
1.656 (1,23 à 2,23)
0,001
Abréviation: P-LVD: densité des vaisseaux lymphatiques peritumoral; I-LVD: la densité des vaisseaux lymphatiques intratumorale; LVI: invasion des vaisseaux lymphatiques; LNM: métastase ganglionnaire; VI: invasion veineuse; Rapport de VEGFR-3 expression positive à la périphérie de la tumeur
Récemment, l'anticorps D2-40, un nouveau marqueur pour l'endothélium lymphatique, a été identifié comme étant l'anticorps spécifique contre podoplanin humaine [13]: P-VEGFR-3. . De nombreuses études ont montré l'immunocoloration de D2-40 est spécifique pour l'évaluation de l'invasion lymphatique et la densité des microvaisseaux lymphatique dans les cancers humains, y compris dans le cancer gastrique [14-17]. Dans cette étude, LVD et l'invasion des vaisseaux lymphatiques ont été identifiés par D2-40 coloration, et confirmées par double coloration pour D2-40 et CD34, qui est clairement discriminatoire, lymphatics des vaisseaux sanguins plus loin.

• P27kip1, régulée par la glycogène synthase kinase 3β, aboutit à une différenciation induite par le HMBA des cellules cancéreuses gastriques humaines
• Une étude rétrospective de cohorte de patients atteints de cancers de l'estomac et du foie: l'impact de la comorbidité et l'ethnicité sur les soins du cancer et des résultats