Drugačen pomen med intratumorska in peritumoral limfni gostoto plovila pri raku želodca: retrospektivna študija 123 primerov

Drugačen pomen med intratumorska in peritumoral limfni gostoto plovil pri raku želodca: retrospektivna študija 123 primerov
Abstract
Ozadje
bolnikov z rakom želodca, na Kitajskem imajo slabše rezultate in slabšo prognozo. Tumorsko povzročena limfangiogenezo igra ključno vlogo pri metastaz in napredovanje tumorjev. V intratumorska in peritumoral limfatičen naj bi imeli različne biološke učinke. Trije glavni dejavniki rasti, vaskularni endotelijski rastni faktor- (VEGF) -A, VEGF-C in VEGF-D, so vključeni v proces aktivacije prek svojih receptorjev (VEGFRs). Namen trenutne študije je raziskati pomembne razlike med intratumorska in peritumoral limfni gostoto plovila (LVD) v raka želodca in njihove korelacije z lymphangiogenetic rastnih faktorjev.
Metod
intratumorska LVD (I-LVD) in peritumoral LVD ( P-LVD) od 123 bolnikov s primarnim rakom želodca so bile ocenjene po obarvanju z D2-40, in potrjeno z dvojnim onesnaženjem z D2-40 /CD34. Proliferativni aktivnost limfatičen endotelija je bila ocenjena z dvojnim onesnaženjem z D2-40 /Ki-67. Združenja bili analizirani med I-LVD /P-LVD in nivo izražanja VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D in receptor VEGFR-3, ki je bila izmerjena z imunohistokemijo (IHK). V korelacije I-LVD in P-LVD s prognozo bolnikov so pomemben tudi.
Rezultati
(1) peritumoral limfatičen (PTLs) so relativno razširjena z dilatacionih svetlino v primerjavi z intratumorska limfotokom (ITLs). Povečana P-LVD je bila bistveno višja od I-LVD (P
< 0,05). (2) P-LVD je ugotovila značilno povezana z bezgavkah metastaze (LNM) (P
< 0,001), limfna plovilo invazija (LVI) (P
< 0,001), VEGF-C (P
= 0,003), VEGF-D nivo izražanja (P
= 0,005) in VEGFR-3 nivo izražanja (P
< 0,001) peritumoral tkivih, čeprav je bilo ugotovljeno, ni bistveno povezavo med zgoraj variante z I-LVD . Vendar pa povečana I-LVD je bilo dokazano, da je povezana z zmanjšanjem prostornine tumorja (P
< 0,001). Niti I-LVD niti P-LVD je bila povezana z VEGF-A izražanja (P
> 0,05). (3) Proliferacijsko aktivnost limfatičen endotelija smo opazili pri PTLs, kljub ITLs. (4) Povečanje P-LVD, vendar ne I-LVD, je bilo navedeno, da je neodvisen dejavnik tveganja za bezgavkah metastaze ga multivariatno logistično regresijsko analizo, in je povezana s preživetjem slabši brez bolezni in celokupnega preživetja.
Sklepi
PTLs igrajo vlogo v želodcu napredovanje raka. Povečana P-LVD, ne pa tudi I-LVD, je značilno povezana z VEGF-C /-D /sistema VEGFR-3, in je lahko neodvisen dejavnik tveganja za bezgavkah metastaze in prognostični dejavnik pri raku želodca.
Ozadje
rak želodca je glavni vzrok smrti, povezanih z rakom na Kitajske. Približno 80% ~ 90% bolnikov so bile ugotovljene v fazi s slabim izidom, običajno z limfno razširjanje in daljni metastaz. V zadnjih nekaj letih, zaradi tumorja limfangiogenezo s lymphangiogenic rastnih faktorjev pogon je trdno zasidrana kot nov mehanizem za napredovanje raka. Danes je vse več strokovnjakov verjame, da intratumorska limfatičen (ITLs, so lymphtics znotraj tumorjev) in peritumoral limfatičen (PTLs, lymphtics na robu) imajo natančno ločene biološko vlogo na obnašanje tumorja in prognozo na različnih vrstah tumorjev. Pri raku želodca, so številne študije pokazale, da imajo bolniki z višjo I-LVD višjo prisotnost bezgavk metastaz v zgodnji fazi [1], medtem ko bi P-LVD neodvisen dejavnik tveganja za bezgavkah metastaze in prognozo [2]. Vendar pa funkcija I-LVD in P-LVD in njihove korelacije z VEGFs izražanja še niso pojasnjeni.
Številne študije so pokazale, ključne vloge VEGFs izrazov za napredovanja tumorja in prognozo raka želodca. VEGF-C, VEGF-D, dva člana VEGF družine, so bili definirani kot lymphangiogenic rastnih faktorjev in igrajo pomembno vlogo pri tumorski limfangiogenezo prek aktivacije VEGFR-3, ki se v glavnem izraženo v limfnih endotelijskih celicah (LEK). VEGF-C je prevladujoči regulator limfangiogenezo tako zgodaj in napredovalim rakom želodca [3, 4]. Povečano izražanje VEGF-C je imel pomembno povezanost z LVD, LVI in bezgavk [5] metastaz, vendar prognostično vrednost je ostala sporna. VEGF-D je bila vpletena v širjenje želodca rakavih celic limfatičnega in je lahko neodvisen napovedni dvojno podajo [6]. VEGFR-3 je navedena tudi kot prognostični faktor [6]. En rastni faktor, VEGF-A, ki regulira angiogenezo, je štelo tudi za spodbujanje limfangiogeneze z vezanjem na VEGFR-2 kratkim. Povečana-A VEGF nivo izražanja bolnikov z rakom želodca je bilo dokazano, da so povezani z gostoto microvessel (MVD), hematogenim metastaze, peritonealna disseminateion in slabo prognozo. Vendar pa je še vedno ni znano, ali sta oba intratumorska in peritumoral lymphtics spodbudila tri VEGFs tumorske celice izločajo, ali I-LVD in P-LVD igrajo bistveno različne biološke vloge v bezgavkah metastaze in prognozo raka želodca.
Metode
bolnikov in tumorske vzorce
bila bula osebke, pridobljene od 123 bolnikov s primarnim rakom želodca, ki so sprejele želodca na oddelku za kirurgijo, Tongji bolnišnica Tongji univerze od januarja 2000 do decembra je 2003. Nihče od njih prejela predobratovalne kemoterapijo ali obsevanjem. Populacija študije je sestavljalo 80 moških (65%) in 43 žensk (35%). Povprečna starost ob postavitvi diagnoze je bila 65 let (gibala od 28 do 87 let). Enaintrideset primerov zgodnjega raka želodca (EGC) in 92 primerov napredovalega raka želodca (AGC), so bili vključeni v. Histološki faza je temeljila na razvrstitvi UICC TNM. Druge klinične značilnosti so povzete v tabeli 1. Vsi bolniki so bili klinično spremljati vsaj 5 let po operaciji. Povprečni čas spremljanje bila 56 mesecev (od 6 do 85 mesecev). Analiza preživetja je bila izvedena, vključno s celotno preživetje (OS), preživetje brez bolezni (DFS) in preživetja raka specifične (CSS). OS, DFS in CSS je bila izračunana od datuma operacijo do zadnjega stika za življenje bolnikov, na datum zadnjega spremljanja za bolnike, prosta bolezni, in datumom želodčni rak inducirane smrti oz. so se pojavili štirje EGC primeri in 52 AGC primeri ponovitve. Enajst bolnikov je imelo peritonealno razširjanje, 26 bolnikov jeter metastaze, in 19 primerov je bolezen ponovila v želodcu po operaciji. Štirideset bolnikov umrl zaradi raka želodca. Sedanja študija je odobril Odbor za etiko Research Hospital Tongji povezan z Tongji University. Normalne želodca tkiva so bili zbrani kot kontrolnih vzorcev. Vsi rezultati so bili doseženi z dvema patologi neodvisno, in sredstva, ki so izračunani za vsak primer posebej na osnovi podatkov obtained.Table 1 korelacije LVD z clinicopathological parametrov in VEGFs izrazov
Dejavniki
N
I-LVD
P-LVD


srednja vrednost ± SD
P
povprečje ± SD
P
Tumor razlikovanje
0,802
0,739
Visoka razlikujejo
11
8.18 ± 2.44
12,07 ± 4,49
Mederately /slabo diferencirani
112
8,00 ± 2,27
12,46 ± 3,60
tumor velikosti
< 0,001
< 0,001
< 3,2 cm
57
8,93 ± 2,34
11,18 ± 3,80
≥ 3,2 cm
66
7,23 ± 1,91
13,50 ± 3,21
globina invazije
0.433
0,026
pT1-2
69
8,16 ± 2,51
11,78 ± 3,52
pT3-4
54
7,83 ± 1,96
13,26 ± 3,71
limfnega vozla metastaze
0,056 *
< 0,001
Negative
57
8,47 ± 2,27
10,50 ± 3,42
Pozitivni
66
7,65 ± 2,24
13,98 ± 3,10
LVI
0.700
< 0,001
Negative
83
8,08 ± 2,33
11.23 ± 3.29
Positive
40
7,91 ± 2,22
14,36 ± 3,44
VI
0,905
< 0,001
Negative
86
8,00 ± 2.38
11,65 ± 3,81
pozitivno
37
8,05 ± 2,67
14,24 ± 2,53
TNM stage
0,067
< 0,001
I - II
71
8,34 ± 2,42
11,33 ± 3,29
III - IV
52
7,58 ± 2,01
13,92 ± 3,66
VEGF-A izražanja
0.527
0,091
Low
44
7,84 ± 2,51
11,68 ± 3,54
visoko
79
8,26 ± 2,21
12,84 ± 3,69
VEGF-C izraz
0,092 *
0.003
nizka
42
7,55 ± 2,37
11,06 ± 3,26
visoko
81
8,00 ± 2,34
13,13 ± 3,69
VEGF-D izraz
0,514
0.005
Low
72
7,90 ± 2,47
11,65 ± 3,44
Visoka
51
8,18 ± 1,99
13.53 ± 3,73
P
, t testni; P
*, Mann-Whitney U
test. Kratica: LVD: limfna gostota plovilo; LVI: limfna plovilo invazijo. VI. Venska invasion
Enotni imunohistokemija za D2-40, VEGF-A, VEGF-C, VEGF-R in VEGFR-3
Za immunohistichemical barvanja, so 4 um-debelimi parafin vgrajeni diapozitivi izrezano iz vsake študije blok. Odseki smo obdelali z 0,3% H 2O 2 za 10 minut pri sobni temperaturi. Za pridobivanje antigena, so drsi segrevamo v mikrovalovni pečici, ki vsebuje 0,01 mmol /natrijev citrat L (pH 6,0). Ploščice smo inkubirali pri 4 ° C preko noči v pladenj vlažnosti s primarnimi protitelesi, VEGF-A (miška monoklonska protitelesa, 1: 100, Dako), VEGF-C (kozji poliklonsko protitelo, 1: 100, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), VEGF-D (kozji poliklonsko protitelo, 1: 100, santa Cruz), VEGFR-3 (kozji poliklonsko protitelo, 1: 100, santa Cruz) in D2-40 (miš monoklonsko protitelo, 1: 100, DAKO) oz. Ploščice smo trikrat spere v 0,1 mmol /L PBS za 2 min in inkubirali 30 minut pri sobni temperaturi z kozje anti-kunčje /miš hrenovo peroksidazo (Envision, DAKO, CA) za identifikacijo cilja. Oddelki so bili razviti s 3 '3-diaminobenzidine. Normalna koza IgG je služil kot negativno reakcijo nadzor za obarvanje VEGF-C, VEGF-D in VEGFR-3, in je služil kot negativno reakcijo nadzor za obarvanje VEGF-A in D2-40 normalnega kunčjega IgG.
Dvojna imunohistokemijsko za D2-40 /CD34
Dvojna imunohistokemičnim barvanjem za D2-40 /CD34 je predelal oceniti specifičnost D2-40 izražanja v limfni endotelija. Predlog je bil v skladu z navodili proizvajalca (št: 95-9999, Histostain-DS Kit, Zymed, CA). Parafinski-vgrajeni 4 um odseki so deparaffinized z ksilen in hidracijo. Drsniki bili potopljeni v raztopini peroksidaze gašenja 10 minut. Potem ko inkubiran preko noči pri 4 ° C s primarnimi protitelesi proti CD34 (miške monoklonsko protitelo, 1: 100, DAKO, Carpinteria, CA) so bili odseki zdravljeni z serum blokirno raztopino, čemur sledi pa inkubirana z biotiniliranega sekundarnega protitelesa (Dako ). Zatem smo konjugat alkalne fosfataze uporablja za vsak odsek 10 minut. Nato pa so bili odseki obdelamo z zmesjo substrat kromogena in dvojnim ojačevalec barvanja. Serum blokiranje Raztopino ponovno uporabljena, so drsi inkubirali z drugim primarnim protitelesom proti D2-40 (miške monoklonsko protitelo, 1: 200, GM36190, Gene Tech Company Limited, Šanghaj, Kitajska) za 60 minut in biotiniliranega drugi anti-imunoglobulina (Ig) (DAKO) smo obdelali. Po nanosu z encimom konjugatom 10 min so bile drsi inkubirana z mešanico substrata pufra, raztopine kromogena in 0,6% vodikovega peroksida za HO in spremlja pod mikroskopom. Vodovodna voda, ki vsebuje 0,05% Tween-20 zaključi reakcijo. Negativne kontrole, so odseki obarvamo z neimune seruma namesto enaki koncentraciji primarnega protitelesa. V CD34 pozitivne krvne žile pokazala intenzivno rdeče madeže, in D2-40 pozitivne limfno žilje pokazala temno vijolične madež.
Dvojno barvanje za D2-40 /Ki-67
Za odkrivanje proliferativni aktivnost limfnih žil , je bila izvedena metoda dvojnega imunskim barvanjem za D2-40 /Ki-67. Protitelo D2-40 je bila uporabljena za madež limfnih žil endotelij, skupaj s Ki-67 (monoklonsko protitelo zajec, 1: 200, v Santa Cruz, ZDA), da se obarva proliferacije celic. Ki-67 obarvanje (rdeča), je bila razvita z alkalno fosfatazo konjugiranega sekundarnega protitelesa, nato D2-40 obarvanje (rjava) je bil razvit s peroksidazo konjugiranih sekundarnega protitelesa. Proliferativni limfno žilje so potrdili Ki-67 pozitivno obarvanih jeder, ki so imeli tudi sočasno pozitivno citoplazemske obarvanje v D2-40 pozitivnih celic. Stopnja dvojno označene plovil je določena s štetjem jedra tumor povezan D2-40 pozitivni plovila (100 jeder v vsakem tumorja) [7].
OCENA od LVD
intratumorska LVD (žarišča so se nahajali na tumor v sredini) in peritumoral LVD (žarišča so se nahajali na obodu tkiva v 2 mm tumorja, ki mejijo na invazivno spredaj) so bili ocenjeni ločeno [2, 7-9]. Kvantitativna analiza limfne gostote plovila je bila izvedena v točkah, ki so za enkratno obarvamo za D2-40. Pet območja z največ limfatičen regij ( "vroče točke") so bili izbrani na x 40 povečavo s svetlobnim mikroskopom. LVD je bila ocenjena s štetjem vse obarvane žile na × 200 povečavi. Povprečno število limfotokom ocenjena je bila določena kot LVD. Limfna plovilo invazijo (LVI) so odkrili, da je prisoten, če je vsaj eden tumorske celice grozd v D2-40 pozitivne plovila [10]. Točkovanje in štetje smo izvedli neodvisno dva preiskovalci, ki so imeli nobenih kliničnih podatkov o bolnikih. Povprečni P-LVD in I-LVD so izračunani za vsak primer posebej.
: Ocena o VEGFs in VEGFR-3 izrazi
Pozitivni barvanje VEGF-A, je bil C in D izraz definiran kot v prejšnjih študijah [6 , 11]. Barvanje rezultati zgoraj navedenih treh VEGFs so semiquantitatively ocenil imunohistokemičnim točk v kombinaciji z odstotkom tumorskih celic, ki kažejo posebno radioinkorporacijo. Obarvanjem intenzivnost je bila dana s štirimi stopnjami: ni (0) šibko (1), srednje (2) in močni (3). Odstotek pozitivnih celic karcinoma bila dana z ocenami: 0 (0%), 1 (1% ~ 10%), 2 (11% ~ 49%), 3 (50% ~ 100%) oz. Skupna ocena je bila izračunana tako, da se intenzivnost obarvanja in odstotek pozitivnih tumorskih celic. Mediana rezultat je bil izbran kot raven mejna po kateri tumorji so bile razvrščene v nizko- (0 ~ 3) in visoko izražanja (4 ~ 6) tumorjev [6, 11]. VEGFR-3-pozitivni plovila smo določili, kot je opisano zgoraj [12]. Plovila treh žariščih področjih so bili prešteti v × 400 povečavi. Obarvanje se je štelo kot pozitiven, če je več kot 5% od endotelija pokazala barvanje [6]. Peritumoral VEGFR-3-pozitivnih plovila (P-VEGFR-3) in intratumorska VEGFR-3-pozitivnih plovila (I-VEGFR-3) so bile ocenjene kot zgoraj liberijski oddelek.
Statistična analiza
Statistična analiza je bila opravljena s pomočjo statistike paket programske opreme Social Science (različica 11.5; SPSS Inc., Chicago, IL). Osebki so bili razdeljeni v dve kategoriji glede na mediano vrednosti I-LVD in P-LVD oz. V korelacije I-LVD in P-LVD z clinicopathologic parametri in VEGFs izrazov smo analizirali s neodvisne vzorce T
test ali Mann-Whitney U.-
testa. V korelacije VEGFR-3 izražanja s kliničnimi parametri so bili analizirani s Pearson Chi-kvadrat testov. S tem povezani dejavniki približno bezgavk metastaz pri raku želodca so dosegli z uporabo multivariant logistično regresijsko analizo. Krivulji preživetja so bili pridobljeni z uporabo metode Kalplan-Meier, in v primerjavi s testom log-ranga. Multivariatna analiza preživetja je bila ocenjena z metodo Cox je sorazmerno nevarnosti. Vse statistične analize je dve strani z pomenu opredeljena kot P
< 0,05.
Rezultati
intratumorska in peritumoral limfne značilnosti pri raku želodca
D2-40 pozitivni limfnih žil imel nepravilno morfologijo in tankostenski lumen. Limfne žile v želodcu tkivih so se večinoma nahaja v sloju submucosa (slika 1). Limfne žile (D2-40-lega) in krvnih žil (CD34-lega) je bilo jasno ločiti z dodatnim dvojnim barvanjem (slika 2). Intratumorska limfno žilje so ponavadi propadel, majhen in neredno (slika 3), vendar so nekateri noncollapsed limfatičen pokazala odprte lumnov in občasno vsebuje preplavljajo tumorskih celic grozdov (slika 4). V peritumoral limfne žile v površinske in globoke del submucosa bili vsi razširjeni z limfnih votline dilatacionih (slika 5, slika 6). Limfatičnega Invazija plovilo opazili v 38 primerih. Ni pomembna korelacija je bilo med številom LVD v tumorske centra ter kontrolnih tkiva (8,02 ± 2,28 proti 8,13 ± 1,04, P
> 0,05). Vendar pa je bilo število P-LVD (12,15 ± 3,75) bistveno višji kot pri kontrolnih tkiv in tumorjev center (P
< 0,05). Statističnih razlik je bilo med metodami odkrivanja limfatičen (sam madež za D2-40 in dvojno barvanjem za D2-40 /CD34) (I-LVD, 8.02 ± 2.28 vs 7.80 ± 2,33; P-LVD, 12,15 ± 3,75 vs 12,42 ± 3,67, P
> 0,05). Slika 1 D2-40 pozitivni lymphantics glavnem nahajajo na plast submucosa v želodčnega tkiva (puščice). IHC, povečava:. × 200
Slika 2 dvojni Imunohistokemijsko za D2-40 in CD34 jasno razlikovati limfne žile (črna puščica) iz krvnih žil (rdeča puščica). . IHC, povečava: × 400
Slika 3 intratumorska limfne žile v raka želodca so propadla (puščica); Dvojna Imunohistokemijsko, povečava:. × 200
Slika je bilo 4 osvajačkom rakave celice grozd prisotna v limfni invazije plovila (LVI). Dvojna Imunohistokemijsko za D2-40 /CD34, povečava:. × 400
Slika 5 peritumoral limfne žile v rakom želodca so bili razširjeni z dilatacionih lumen, ki se nahajajo na površnem submucosa. IHC, povečava:. × 200
Slika 6 peritumoral limfno žilje pri raku želodca so bili razširjeni z dilatacionih svetlino, ki se nahajajo v globoki del submucosa. IHC, povečava:. × 200
Korelacije z I-LVD in P-LVD s clinicopathologic parametrov in VEGFs izrazov
korelacij I-LVD in P-LVD z so clinicopathologic parametri, prikazani v tabeli 1. Povečana I- LVD je značilno povezana z manjšo velikost tumorja (P
< 0,001). Ni korelacije je bilo med I-LVD in VEGFs izrazov, medtem ko je bil P-LVD bistveno povezana z večjo velikost tumorja (P
< 0,001), globina invazije (P
= 0,026), bezgavka metastaz (P
< 0,001), LVI (P
< 0,001), venske invazija (VI) (P
< 0,001), TNM faza (P
< 0,001), VEGF-C ( P
= 0,003) in VEGF-D izraz (P
= 0,005).
izražanje treh VEGFs pokazali pozitiven citoplazemske obarvanje v želodcu rakavih celic. Visoka stopnja ekspresijo VEGF-A (slika 7), VEGF-C (slika 8) in VEGF-D (slika 9) na 64,2% (79/123), 65,9% (81/123) in 41,5% so opazili (51 /123) osebkov oz. Niti I-LVD niti P-LVD je bilo značilno povezana z VEGF-A izražanja (P
> 0,05). Slika 7 VEGF-A izraz v citoplazmi raka želodca. IHC, povečava:. × 400
Slika izraz 8 VEGF-C v citoplazmi raka želodca. IHC, povečava:. × 400
Slika 9 VEGF-D izraz v citoplazmi raka želodca. IHC, povečava:. × 200
Proliferativne dejavnosti znotraj in peritumoral limfotokom
Proliferativne limfno žilje so našli v periferiji tumorja, (slika 10). Stopnja Ki-67-pozitivne limfnih jeder plovil na obrobju tumorja je (0,81 ± 0,13)%. No proliferacije limfnega Posodo smo našli v tumorju centru (slika 11). Limfatičen invazija bilo mogoče opaziti pri peritumoral tkiva (slika 12). Slika 10 Ki-67-pozitivne limfne jedra plovil (puščice), so odkrili na obrobju tumorja. Dvojna barvanja za D2-40 /Ki-67, povečavo. × 400
Slika 11 št Ki-67 pozitiven izraz v intratumorska limfatičen jedra. Dvojna barvanja za D2-40 /Ki-67, povečavo. × 400
Slika 12 limfnih žil invazije je bila odkrita v peritumoral tkiva (puščice). Dvojna barvanja za D2-40 /Ki-67, povečavo. × 400
VEGFR-3 izražanje v limfnih žil
VEGFR-3-pozitiven izraz tumorja obrobju (P-VEGFR-3) je bilo leta 55 od 123 primerov, občasno z rakavih celic grozdi preplavljajo (slika 13). Vendar pa je bilo le 34 od 123 primerov na VEGFR-3-pozitivne ekspresijo na tumorja centra (I-VEGFR-3) (slika 14). Ta plovila so bili večinoma tankostenske, nepravilne oblike in vsebuje nobene ali nekaj eritrocitov. Slika 13 VEGFR-3-pozitiven izraz v endotelijskih celicah citoplazmi tumorja obrobju (P-VEGFR-3), občasno z rakava celica skupin preplavljajo (puščice). IHC, povečava:. × 400
Slika 14 VEGFR-3-pozitivnih izrazov so se nahajali na tumorja centru (puščice). . IHC, povečava: × 200
Na obrobnih tumorskih tkivih, VEGFR-3 izrazov je bila statistično značilna, ne z VEGF-C visoko ekspresijo (P
< 0,000), VEGF-D visoko izraz (P
= 0,043), povečana P-LVD (P
< 0,001) in prisotnost LVI (P
= 0,003), kot pri VEGF-A izražanja, povečana I-LVD, venska invazija in bezgavko metastaze (P
> 0,05). med I-VEGFR-3 izražanja in kliničnih parametrov (0,05 P
>) niso opazili nobene korelacije. (Tabela 2) Tabela 2 Korelacije z VEGFR-3 izražanje pri differenr lokacijo tumorja s kliničnimi parametri
Dejavniki
N

I-VEGFR-3
P-VEGFR-3


N (%)
P

N (%)
P
VEGF-A izraz
0,107
0,067
Nizka
44
16 (36.36)
15 (34.09)
Visoka
79
18 (22.78)
40 (50,63)
izražanja VEGF-C
0.795
< 0,001
Nizka
42
11 (26.19)
9 (21.43)
Visoka
81
23 (28.40)
46 (56.79)
VEGF- D izraz
0,968
0,043
Low
72
20 (27.78)
27 (37.50)
Visoka
51
14 (27.45)
28 (54.90)
P-LVD
0.813
< 0,001
< 14
60
16 (26.67)
10 (16,67)
≥ 14
63
18 (28.57)
45 (71,43)
I-LVD
0,412
0,153
< 8
58
14 (24.14)
22 (37.93)
≥ 8
65
20 (30.77)
33 (50.77)
bezgavko metastaze
0,934
0.190
negativno
55
19 (34.55)
21 (38,18)
Pozitivni
68
15 (22.06)
34 (50.00)
LVI
0,681
0,003
Negativna
76
22 (28.95)
26 (34.21)
Pozitivni
47
12 (25.53)
29 (trenutno 61,70)
VI
0,387
0,448
Negative
87
26 (29.89)
37 (42.53)
Pozitivni
36
8 (22.22)
18 (50.00)
Kratica: LVD: limfna gostota plovilo; LVI: limfna plovilo invasion; VI: venska invasion; I-VEGFR-3: VEGFR-3 pozitiven izraz v tumorja centru; P-VEGFR-3: VEGFR-3 pozitiven izraz na obrobju tumorja
Napovedna vrednost liberijski oddelek za bezgavkah metastaz
Kot rezultat multivariatne logistične regresijske analize v tabeli 3, izražanja VEGF-C in P-LVD. so znatno asscoiated z bezgavkah metastaze (P
= 0,024, P
= 0,045, v tem zaporedju). I-LVD, VEGF-A, VEGF-D in P-VEGFR-3 izraz ni pokazala napovedno vrednost za bezgavkah metastaze raka želodca. (Tabela 3) Tabela 3 Z modelom logistične regresije za bezgavkah metastaze
Dejavniki
razmerje obetov
95% CI

P
P-LVD
3,548
1,030 -12,226
0,045
I-LVD
1.300
0,964-1,754
0,085
VEGF-A
0,510
0,138-1,884
0,313
VEGF-C
4.069
1.198 - 13,820
0.024
VEGF-D
3.162
,834-11,992
0,091
P-VEGFR-3
2,919
,747-11,403
0.123
Kratica: LVD: limfna gostota plovilo; P-VEGFR-3. VEGFR-3 pozitiven izraz na obrobju tumorja
prognostični pomen I-LVD in P-LVD
Na univariantne analizi preživetja, P-LVD je bila povezana s slabim celokupno preživetje (Slika 15, P
< 0,001), preživetje brez bolezni (slika 16, P
< 0,001) in preživetje raka specifične (Slika 17, P
< 0,001). Vendar I-LVD je povezana z nonsignificantly trend vseh zgoraj oz (celokupno preživetje je, P
= 0.5835, Slika 18, preživetje brez bolezni, P
= 0.2844, slika 19; preživetje raka specifične, P
= 0,6246, slika 20). Slika 15 Razmerje med P-LVD s celokupno preživetje (P < 0,001).
Slika 16 Razmerje med P-LVD s preživetjem brez bolezni (P < 0,001).
Slika 17 Razmerje med P-LVD s rak specifične preživetje (P < 0,001)..
Slika 18 Razmerje med I-LVD s celokupno preživetje (P = 0,5825)
Slika 19 Razmerje med I-LVD s preživetjem brez bolezni (P = 0,2844) .
Slika 20 Razmerje med I-LVD s preživetja raka specifične (P = 0,6246).
Multivariatna regresijska analiza indicateded, da bi P-LVD neodvisen napovedni dejavnik tako za celokupno preživetje (P
= 0,045 ) in (P
= 0,031), preživetje brez bolezni, kljub preživetje raka specifične. Poleg tega bi lahko prisotnost LVI in stadija TNM služijo kot neodvisni kazalcev za vse tri preživelih (LVI, P
= 0,040, 0,043, 0,039, stopnja TNM, P
= 0,048, 0,001, 0,001, tabela 4) . VEGF-A izraz je neodvisen napovedni napovednik samo za celokupno preživetje (P
= 0,033). Ni bilo statistično pomembne korelacije za I-LVD, VEGF-C, VEGF-D in P-VEGFR-3 s katerim koli od preživelih. (Tabela 4) Tabela 4 Cox regresijska analiza neodvisnih dejavnikov, ki vplivajo na preživetje brez bolezni, preživetje raka specifično in splošno preživetje
faktorja
Rak-Specific Survival
bolezni-preživetje brez
Celokupno preživetje

OR (95% CI)

P
OR (95% CI)
P
OR (95% CI)
P

P-LVD
2.099 (0.91-4.87)
0,084
2.418 (1.08-5.40)
0.031
2.895 (1.02-8.19)
0,045
I-LVD
1,205 (0,56-2,63)
0.639
1.325 (0.62-2.85)
0,472
1.959 (0.90-4.24)
0.088
VEGF-A
1.386(0.50-3.83)
0.528
1.364(0.67-2.78)
0.391
2.437(1.10-5.45)
0.030
VEGF-C
2.423(0.89-6.63)
0.085
1.630(0.77-3.47)
0.205
1.562 (0,79-3,34)
0,182
VEGF-D
0.511 (0.19-1.36)
0,178
1,916 (0.90-4.10)
0.094
1.621 (0.81-3.98)
0.190
LVI
2.716 (1.05-7.04)
0.040
2.477 (1.03-5.97)
0,043
2.578 (1.05-6.34)
0,039
LNM
2,115 (0,68-6,60)
0.197
2.428 (1.18-5.02)
0.017
3.426 (1.66-7.06)
0.001
VI
2.943(0.89-9.77)
0.078
1.697(0.75-3.87)
0.208
1.477(0.63-3.48)
0.373
P-VEGFR-3
1. 499 (0,98-2,31)
0.067
1.099 (0.53-2.28)
0,800
1.402 (0.68-2.90)
0,361
TNM stopnjo
1.523 (1.00-2.31)
0,048
1,674 (1,25-2,25)
0.001
1.656 (1.23-2.23)
0.001
Kratica: P-LVD: peritumoral gostoto limfatičnega plovila; I-LVD: intratumorska limfna gostota plovilo; LVI: limfna plovilo invasion; LNM: bezgavka metastaze; VI: venska invasion; P-VEGFR-3. VEGFR-3 Pozitivni izražanje pri periferije tumorja
Razprava
Nedavno protitelo D2-40, nov označevalec limfni endotelija, je bila opredeljena kot specifičnih protiteles proti človeški podoplanin [13] . Številne študije so navedena imunskim barvanjem D2-40 je značilno za vrednotenje limfnega invazije in limfni gostoto microvessel v človeških raka, vključno z rakom želodca [14-17]. V tej študiji so LVD in limfatičnega invazija plovilo označene z D2-40 barvanjem, in potrjeno z dvojnim barvanjem za D2-40 in CD34, ki očitno diskriminiran limfatičen iz krvnih žil dlje.

• P27Kip1, ureja glikogen sintazo kinazo-3p, rezultati v HMBA-inducirane diferenciacijo človeške želodčne raka cells
• Retrospektivna študija kohorte bolnikov z želodcem in jetri raka: vpliv komorbiditete in narodnosti na oskrbo bolnikov z rakom in rezultatov