Različite značaj između intratumoralnim i peritumorskih limfna gustoće krvnih žila kod raka želuca: retrospektivna studija 123 cases

različite važnosti između intratumoralno i peritumorskih limfni gustoće krvnih žila kod raka želuca: retrospektivna studija od 123 slučajeva pregled apstraktne pregled pozadine pregled pacijenata rak želuca u Kini imaju lošiji ishod i lošije prognoze. Tumorom inducirana limfangiogeneze igra ključnu ulogu u metastazi i progresiju tumora. U intratumoralno i peritumorskih lymphatics su trebali da imaju različite biološke učinke. Tri glavna faktora rasta vaskularnog endotela, faktor rasta (VEGF) -A, VEGF-C i VEGF-D, koji su uključeni u proces aktivacije putem njihovih receptora (VEGFRs). Svrha tekućeg rada je istražiti značajnu razliku između intratumoralno i peritumorskih limfni gustoće žila (LVD) u rak želuca i njihove korelacije s lymphangiogenetic faktora rasta. Pregled metoda
intratumoralno LVD (I-LVD) i peritumorskih LVD ( P-LVD) 123 bolesnika s primarnim karcinomom želuca su ocijenjeni nakon bojenja s D2-40, a potvrđuje dvostrukim bojanjem s D2-40 /CD34. Proliferativna aktivnost limfne žile endotela ocijenjena dvostrukim bojanjem s D2-40 /Ki-67. Udruge su analizirani između I-LVD /P-LVD i razina ekspresije VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D i VEGFR-3 receptor, koji je mjeren imunohistokemijom (IHH). U korelacije I-LVD i P-LVD s prognozom bolesnika također su cijenjena. Pregled Rezultati pregled (1) peritumorskih lymphatics (PTLs) bile su relativno povećani sa proširene lumen u usporedbi s intratumoralno limfe (ITLs). Povećava P-LVD znatno veća od I-LVD (P pregled i 0.05). (2) P-LVD je nađen značajno povezan s metastazama limfnog čvora (LNM) (P pregled < 0,001), limfna invazija posuda (LVI) (P pregled < 0,001), VEGF-C (P
= 0.003), VEGF-D razina ekspresije (P pregled = 0,005) i VEGFR-3 razina ekspresije (P izvoznici < 0,001) u peritumorskih tkiva, bez obzira na značajna povezanost između gore varijante s i-LVD , Međutim, povećana I-LVD je pokazano da je povezan sa smanjenjem volumena tumora (P pregled < 0,001). Ni sam, niti-LVD P-LVD korelaciji s VEGF-A ekspresiju (p
> 0,05). (3) Proliferativna aktivnost limfe endotela zabilježeno je u PTLs, unatoč ITLs. (4) Povećana P-LVD, ali ne I-LVD, pokazali su se nezavisni faktor rizika za limfni čvor metastaziranje multivarijatne logističke regresijske analize, te je povezana s lošijim preživljavanje bez bolesti i ukupno preživljenje. Pregled Zaključci
PTLs igraju ulogu u želučanog raka progresije. Povećana P-LVD, ali ne I-LVD, značajno je povezan s VEGF-C /-D /VEGFR-3 sustavu, a može biti neovisan čimbenik rizika za limfnih čvorova metastaza i prognostički čimbenik u raka želuca. Pregled pozadine rak pregled želuca je glavni vodeći uzrok raka povezanih smrti u Kini. Oko 80% ~ 90% bolesnika se dijagnosticira u poodmakloj fazi s lošim ishodom, najčešće s limfni širenje i udaljenih metastaza. Tijekom posljednjih nekoliko godina, s tumorom inducirana limfangiogeneze vođeni limfangiogenih faktora rasta je čvrsto uspostavljena kao novi mehanizam za napredovanje karcinoma. Danas, sve veći broj stručnjaka vjeruje da intratumoralno lymphatics (ITLs, a lymphtics unutar tumora) i peritumorskih lymphatics (PTLs, lymphtics na periferiji) igraju upravo različite biološke uloge na ponašanje tumora i prognozom u različitim vrstama tumora. Kod karcinoma želuca, nekoliko je studija pokazala da bolesnici s višim I-LVD imali veću prisutnost limfnih čvorova metastaze u ranoj fazi [1], dok je P-LVD mogao biti neovisan čimbenik rizika za limfnih čvorova metastaza i prognozi [2]. Međutim, funkcija I-LVD i P-LVD i njihove korelacije s izrazom VEGF-ova još nisu razjašnjene.
Brojne studije su pokazale ključne uloge VEGF-ova izraza na progresije tumora i prognoze kod raka želuca. VEGF-C i VEGF-D, dva člana obitelji VEGF, definirani su kao limfangiogenih faktora rasta i igraju važnu ulogu u tumorskoj limfangiogeneze preko aktivacije VEGFR-3, koji je uglavnom izražen u limfnoj endotelnim stanicama (LECs). VEGF-C je dominantan regulator limfangiogeneze u oba rane i uznapredovale rakom želuca [3, 4]. Povećana ekspresija VEGF-C je imao značajnu korelaciju s LVD, LVI i limfnih čvorova metastaze [5], ali njegova prognostička vrijednost ostala kontroverzna. VEGF-D je bio uključen u limfnog širenje želuca stanica raka i mogao biti nezavisna prognostički marker [6]. VEGFR-3 također je navedeno kao prognostički faktor [6]. Drugi faktor rasta, VEGF-A, koji regulira angiogenezu, također se smatra da stimulira limfangiogeneze vezanjem na VEGFR-2 u zadnje vrijeme. Povećana VEGF-A razina ekspresije pacijenata oboljelih od raka želuca je dokazano da se odnose s gustoće krvnih žila (MVD), hematogenozni metastaza, peritonejsku disseminateion i lošu prognozu. Međutim, ostaje nepoznato da li oba intratumoralno i peritumorskih lymphtics stimulira tri VEGF-ova koje luče tumorske stanice, ili da li je I-LVD i P-LVD play bitno različite biološke uloge u limfnih čvorova metastaza i prognoze kod raka želuca.
Metode
pacijenata i tumorskih uzoraka pregled tumora su uzorci dobiveni od 123 bolesnika s primarnim rakom želuca koji su prihvatili gastrektomije u Klinici za kirurgiju, Tongji bolnica Sveučilišta Tongji od siječnja 2000. do prosinca 2003. Nitko od njih nije dobila preoperacionalne kemoterapija ili radioterapija tretman. Istraživanje populacija sastojala se od 80 muškaraca (65%) i 43 žena (35%). Prosječna dob u vrijeme postavljanja dijagnoze bila je 65 godina (kretala se od 28 do 87 godina). Trideset jedan slučajeva ranog karcinoma želuca (EGC) i 92 slučajeva naprednim rakom želuca (AGC) su uključene u. Histološka faza se temelji na UICC TNM klasifikaciji. Ostala klinička obilježja sažeti su u tablici 1. Svi bolesnici su praćeni klinički najmanje 5 godina nakon operacije. Prosječna follow-up vrijeme bilo 56 mjeseci (kretala od 6 do 85 mjeseci). Preživljavanje analiza provedena je, uključujući i ukupno preživljenje (OS), preživljenja bez znakova bolesti bez (DFS) i preživljavanje raka-specifične (CSS). OS, DFS i CSS je izračunata od datuma operacije do zadnjeg kontakta za život bolesnika, do datuma zadnjeg praćenja u bolesnika bez bolesti, i do dana želuca raka izazvanog smrću, respektivno. Četiri EGC slučajevi i 52 AGC slučajeva došlo do recidiva. Jedanaest bolesnika je imalo peritonealnoj širenje 26 bolesnika jetre metastaze, a 19 slučajeva relapsed u želucu nakon operacije. Četrdeset pacijenata umro od raka želuca. Trenutna studija je odobren od strane Etičkog povjerenstva istraživanju Tongji bolnice povezanih s University Tongji. Normalne želučani su uzorci tkiva kao kontrolnim uzorcima. Svi rezultati postignuti su dva patologa samostalno, a sredstva su izračunati za svaki slučaj na temelju podataka obtained.Table 1 korelacije LVD s kliničkopatološkim parametara i VEGF-ova izraza pregled Čimbenici
N
I-LVD
P-LVD
pregled pregled srednja vrijednost ± SD
P
srednja vrijednost ± SD
P
tumora diferencijacija pregled 0,802 pregled 0.739
Visoka razlikuju pregled 11
8.18 ± 2.44 pregled 12,07 ± 4,49 pregled Mederately /siromašni razlikuju pregled 112 pregled 8,00 ± 2,27 pregled 12,46 ± 3,60 pregled tumora veličine Netlogu < 0.001 izvoznici < 0.001 izvoznici < 3,2 cm
57 pregled, 8,93 ± 2,34 pregled 11.18 ± 3.80 pregled ≥ 3.2 cm
66 pregled 7,23 ± 1,91
13,50 ± 3,21 pregled Dubina invazije
0,433 pregled 0,026 pregled pT1-2 pregled, 69 pregled, 8,16 ± 2,51 pregled 11,78 ± 3,52 pregled pT3-4 pregled 54 pregled 7,83 ± 1,96 pregled 13.26 ± 3.71 pregled limfnih metastaza čvor pregled 0,056 * izvoznici < 0,001 pregled Negativna pregled 57 pregled 8.47 ± 2.27 pregled 10,50 ± 3,42
Pozitivni pregled, 66 pregled, 7,65 ± 2,24 pregled 13.98 ± 3.10 pregled LVI
0,700 izvoznici &0,001 pregled Negativna pregled 83. pregled 8,08 ± 2,33 Netlogu 11,23 ± 3,29 pregled Pozitivan pregled 40 pregled 7,91 ± 2,22 pregled 14.36 ± 3.44 pregled VI pregled 0,905 izvoznici < 0,001 pregled Negativna pregled 86 pregled, 8,00 ± 2.38 pregled 11.65 ± 3.81 pregled pozitivnih pregled, 37 pregled, 8,05 ± 2,67 pregled 14.24 ± 2.53 pregled TNM stadij pregled 0,067 izvoznici < 0,001 pregled I - II
71 pregled, 8,34 ± 2,42 pregled 11.33 ± 3.29 pregled III - IV pregled 52 pregled, 7,58 ± 2,01 pregled 13.92 ± 3.66
VEGF-A izražavanja
0.527 Netlogu 0,091 pregled Niska
44 pregled, 7,84 ± 2,51 pregled 11,68 ± 3,54 pregled visoka pregled, 79 pregled, 8,26 ± 2,21 pregled 12,84 ± 3,69
VEGF-C izraz
0,092 * pregled 0,003 pregled niska pregled, 42 pregled, 7,55 ± 2,37 pregled 11,06 ± 3,26 pregled visoka pregled, 81 pregled, 8,00 ± 2,34 pregled 13,13 ± 3,69 pregled VEGF-D izraz pregled 0,514 pregled 0,005
Low Netlogu 72 pregled, 7,90 ± 2,47 pregled 11.65 ± 3.44 pregled visoke pregled 51 pregled 8.18 ± 1.99 pregled 13.53 ± 3,73
P
, t-test; P pregled *, Mann-Whitney U pregled, test. Kratica: LVD: Limfni gustoća posuda; LVI: limfna invazija plovilo. VI. Venska invazije pregled Jedan imunohistokemijski za D2-40, VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D i VEGFR-3 pregled za immunohistichemical bojenje, 4 um-debela parafinska ugrađeni stakalca su rez svakog istraživanja blok. Sekcije su tretirane s 0,3% 'H-sub> <2O sub> 2 10 minuta na sobnoj temperaturi. Za dohvat antigen, stakalca su grije se u mikrovalnoj peći s 0,01 mmol /L natrijev citrat (pH 6.0). Rezovi su inkubirani na 4 ° C preko noći u vlažnoj ladicu s primarnim antitijelima, VEGF-A (mišje monoklonsko antitijelo, 1: 100, DAKO), VEGF-C (kozji poliklonalno protutijelo, 1: 100, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), VEGF-D (kozji poliklonalno protutijelo, 1: 100, Santa Cruz), VEGFR-3 (kozji poliklonalno protutijelo, 1: 100, Santa Cruz) i D2-40 (mišje monoklonsko antitijelo, 1: 100, DAKO), odnosno. Stakalca su isprane tri puta u 0,1 mmol /L PBS tijekom 2 min i inkubira 30 minuta na sobnoj temperaturi sa peroksidazom koza anti-zec /miš hrena (Predvidjeti, DAKO, CA) za identifikaciju cilj. Sekcije su razvijene s 3 '3-diaminobenzidin. Normalni kozji IgG služila kao negativna kontrola reakcije za bojenje VEGF-C, VEGF-D i VEGFR-3, i normalno zečjim IgG je služio kao negativna kontrola reakcije za bojenje VEGF-A i D2-40. Pregled Dvostruka imunohistokemijska bojanja za D2-40 /CD34 pregled dvostruke imunohistokemijski bojanjem D2-40 /CD34 je dodatno obraditi kako bi procijenila specifičnost D2-40 izražavanja u limfnom endotelu. Prijedlog je u skladu s uputama proizvođača (broj: 95-9999, Histostain-DS Kit, Zymed, CA). Paraffin-embedded Sekcije od 4 um su deparafmizirani ksilenom i rehidrirane. Stakalca su uronjeni peroksidaze otopinu za gašenje 10 min. Nakon što je inkubirano preko noći na 4 ° C s primarnim antitijelima protiv CD34 (mišjim monoklonskim protutijelom, 1: 100, DAKO, Carpinteria, CA), sekcije su tretirani s serum otopine za blokiranje, a zatim se inkubira s biotiniliranim sekundarnim antitijelima (Dako ). Nakon toga, alkalna fosfataza konjugata koristi za svaki odjeljak tijekom 10 minuta. A zatim, sekcije su tretirani s podloge kromogena smjese i dvostrukog bojanja pojačivačem. Serum blokiranje otopina je ponovo primijenjen, slajdovi su inkubirani sa drugim primarnim antitijelima D2-40 (mišjim monoklonskim protutijelom, 1: 200, GM36190 Gene Tech Company Limited, Shanghai, Kina) za 60 min, a biotinilirani drugi anti-imunoglobulin (Ig) (DAKO) se tretira. Nakon primjene s enzimom konjugatom 10 minuta, slajdovi su inkubirani sa smjesom supstratnog pufera, otopina kromogena i 0,6% -tnim vodikovim peroksidom na HRP i praćena pod mikroskopom. Slavina koja sadrži 0,05% Tween-20 prekine reakciju. Za negativne kontrole, sekcije su obojene s neimunim serum umjesto iste koncentracije primarnim antitijelima. CD34 pozitivnih krvnih žila pokazao intenzivnu crvenu mrlju, a D2-40 pozitivne limfne žile pokazao tamno purpurnu boju.
Double bojanje D2-40 /Ki-67 Netlogu za otkrivanje proliferativni aktivnost limfnih žila , postupak dvostrukog imunološko D2-40 /Ki-67, izveden je. D2-40 bilo korišteno antitijelo mrlja limfne žile endotela, zajedno s Ki-67 (zec monoklonsko antitijelo, 1: 200, Santa Cruz, USA) za bojenje proliferacije stanica. Ki-67 bojanja (crveno) razvijena s alkalnom fosfatazom konjugiranom sa sekundarnim protutijelom, i D2-40 bojanja (smeđe) je razvijen s peroksidazom konjugiranih sekundarnih antitijela. Proliferativni limfne žile su potvrđeni Ki-67 pozitivno obojenih jezgara koji je također imao istovremene pozitivne citoplazmatski bojenje u D2-40 pozitivnih stanica. Stopa dvostruko označene plovila određuje se brojanjem jezgara D2-40 pozitivne plovila povezanih s tumorom (100 jezgara u svakom tumoru) [7]. Netlogu Procjena LVD pregled intratumoralno LVD (hot spots bili smješteni na tumor u sredini) i peritumorskih LVD (hot spots su smještena na periferiji tkiva unutar 2 mm tumora u susjedstvu invazivne ispred) procijenjeni su pojedinačno [2, 7-9]. Kvantitativna analiza limfna gustoće krvnih žila je izvedena u sekcije koje su single-bojane D2-40. Pet područja s najviše limfne žile regijama ( "hot spots") su izabrani na × 40 uvećanja svjetlosnim mikroskopom. LVD je ocijenjen od strane računajući sve obojenim krvnim žilama na × 200 uvećanja. Prosječan broj limfe ocijenjenih je određen kao LVD. Limfna Invazija plovila (LVI) otkrivena je da bude prisutan ako je barem jedna stanica tumora klaster bio u D2-40 pozitivne brodovi [10]. Bodovanje i brojenja su izvedeni samostalno pomoću dva ispitivača koji su imali kliničke podatke o pacijentima. Srednja P-LVD i I-LVD izračunate su za svaki slučaj, pregled Procjena VEGF-ova i VEGFR-3 izrazi
Pozitivno obojenje VEGF-A, -C i D ekspresija je definirana kao prethodnih studija [6 , 11]. Bojanje rezultati za gore navedene tri VEGF-ova su semikvantitativno procijenjeni od imunohistokemijski rezultat u kombinaciji s postotkom tumorskih stanica koje pokazuju specifičnu imunoreaktivnost. Bojenje intenzitet je dan s četiri razreda: none (0), slab (1), umjerena (2) i jaki (3). Postotak pozitivnih stanica karcinoma je dan s ocjena: 0 (0%), 1 (1% -10%), 2 (11% ~ 49%), 3 (50% -100%), redom. Ukupna ocjena je izračunata množenjem intenzitet bojenja i postotak pozitivnih tumorskih stanica. Medijan rezultat je odabrana kao graničnu razinu prema kojoj tumori su kategorizirani u niskim (0 ~ 3) i visoke ekspresije (4 ~ 6) tumora [6, 11]. VEGFR-3-pozitivne posude je određena kao što je opisano ranije [12]. Posude za tri hot spots područja prebrojavanja bila × 400 uvećanja. Obojenje smatra pozitivnim ako je više od 5% endotel pokazao [6] bojenje. Peritumorskih VEGFR-3-pozitivne plovila (P-VEGFR-3) i intratumoralno VEGFR-3-pozitivne plovila (I-VEGFR-3) ocijenjeni su kao što je gore LVD. Pregled, Statistička analiza pregled, Statistička analiza je provedena pomoću statistike Paket za softver Social Science (verzija 11.5; SPSS Inc., Chicago, IL). Uzorci su podijeljeni u dvije kategorije prema tome vrijednost medijana I-LVD i P-LVD, respektivno. U korelacije I-LVD i P-LVD s kliničko parametre i VEGF-ova izraza su analizirani nezavisne uzorke t
test ili Mann-Whitney U pregled, test. U korelacije VEGFR-3 ekspresije s kliničkim parametrima analizirane su Pearsonov Hi-kvadrat testova. Povezani čimbenici oko limfnih čvorova metastaza kod raka želuca postignuti su korištenjem multivarijantne logističke regresijske analize. Krivulje preživljavanja su dobiveni korištenjem Kalplan-Meier metodi i uspoređene log-rank test. Multivarijatna analiza preživljavanja procijenjena je metodom Cox je proporcionalan opasnost. Sve statističke analize bio dvije strane sa značenjem definiranim kao P Netlogu < 0,05. Pregled Rezultati
intratumoralno i peritumorskih limfne obilježja u rak želuca
D2-40 pozitivnih limfnih žila imala neredovite morfologiju i tankih stijenki lumen. Limfne žile u želučanog tkiva uglavnom su smješteni u sloju submukozi (slika 1). Limfne žile (D2-40-položaj) i krvne žile (CD34-pozicije) su jasno razlikovati daljnje dvostrukim bojanjem (slika 2). Intratumoralno limfne žile obično su propali, mala i nepravilna (slika 3), ali neki noncollapsed lymphatics pokazala otvorene lumen, a povremeno je sadržavala invaziju tumorskih stanica klastera (Slika 4). U peritumorskih limfne žile u površnom i dubokom dijelu submukozi svi su povećani s limfnim šupljina proširene (Slika 5, Slika 6). Invazija limfna žila zabilježeno je u 38 slučajeva. Ne Nađena je korelacija između broja LVD u tumorskoj centru te u kontrolnih tkiva (8,02 ± 2,28 vs 8,13 ± 1,04, P izvoznici &0.05). Međutim, broj P-LVD (12.15 ± 3.75) bila je značajno viša nego u kontrolnim tkivima i tumora centar (P pregled < 0,05). Nema statistički značajne razlike pronađen između dvije metode detekcije limfne žile (Single bojenje za D2-40 i dvostrukim bojanjem D2-40 /CD34) (I-LVD, 8,02 ± 2,28 vs 7.80 ± 2.33, P-LVD, 12.15 ± 3.75 vs 12,42 ± 3,67, P pregled i 0.05). Slika 1 D2-40 pozitivne lymphantics uglavnom nalaze na sloju submukozi u želučanog tkiva (strelice). IHC, povećanje. × 200
Slika 2 dvostruku imunohistokemijskih bojanja za D2-40 i CD34 jasno razlikovati limfne žile (crna strelica) iz krvnih žila (crvena strelica). . IHC, povećanje: × 400
Slika 3 intratumoralno limfne žile u raka želuca su propali (strelica); Dvostruka imunohistokemijska bojanja, povećanje. × 200
Slika 4 invaziju stanica raka klastera bile prisutne u limfni invazije žila (LVI). Dvostruka imunohistokemijska bojanja za D2-40 /CD34, uvećanjem. × 400
Slika 5 peritumorskih limfne žile u raka želuca su povećani sa proširene lumena koji se nalaze na površnom submukozi. IHC, povećanje. × 200
slici 6 peritumorskih limfne žile u raka želuca su povećani sa proširene lumena koji se nalazi na dubokom dijelu submukozi. IHC, povećanje. × 200 pregled Korelacije I-LVD i P-LVD s kliničko parametre i VEGF-ova izraza
korelacija I-LVD i P-LVD s kliničko parametri su prikazani u tablici 1. Povećana I- LVD je značajno povezana s manjom veličinom tumora (P izvoznici < 0,001). Nema korelacije između pronađen I-LVD i VEGF-ova izraza, a P-LVD značajno korelira s većom veličinom tumora (P pregled < 0,001), dubina invazije (P
= 0,026), u limfni čvor metastaza (P pregled i 0,001), LVI (P pregled < 0,001), venske invazija (VI) (P pregled < 0,001), TNM fazi (P pregled < 0,001), VEGF-C ( P pregled = 0.003) i VEGF-D ekspresija (P pregled = 0,005). pregled ekspresija VEGF-ova tri pokazala pozitivnu citoplazmatski bojanje u želuca stanica raka. Visoka razina ekspresije VEGF-A (slika 7), VEGF-C (slika 8) i VEGF-D (Slika 9) zabilježene su u 64,2% (79/123), 65,9% (81/123) i 41,5% (51 /123) uzoraka, respektivno. Ni ja-LVD, niti P-LVD pronađen je značajno povezana s VEGF-A izražavanja (P Netlogu > 0,05). Slika 7 VEGF-A izraz u citoplazmi u raka želuca. IHC, povećanje. × 400
Slika 8 VEGF-C izraz u citoplazmi u raka želuca. IHC, povećanje. × 400
Slika 9 VEGF-D izraz u citoplazmi u raka želuca. IHC, povećanje. × 200
Proliferativne aktivnosti u intra- i peritumorskih limfe
Proliferativne limfne žile su pronađeni na periferiji tumora, (slika 10). Stopa Ki-67-pozitivnih limfnih žila jezgre na periferiji tumora je bio (0,81 ± 0,13)%. Ne proliferativni limfni posuda se nalaze u centru za tumor (Slika 11). Lymphatics invazija može se pratiti u peritumorskih tkiva (slika 12). Slika 10 Ki-67-pozitivna limfna posuda jezgre (strelice) nađene su u periferiji tumora. Dvostruko bojenje za D2-40 /Ki-67, uvećanjem. × 400
Slika 11 Nikakva Ki-67 pozitivno izraz u intratumoralno limfe jezgre. Dvostruko bojenje za D2-40 /Ki-67, uvećanjem. × 400
Slika 12 limfnih žila invazija otkrivena je u peritumorskih tkiva (strelice). Dvostruko bojenje za D2-40 /Ki-67, uvećanjem. × 400
VEGFR-3 u limfne žile
VEGFR-3-pozitivnu ekspresiju tumorskih periferiji (P-VEGFR-3) pronađen je u 55 od 123 slučajeva, povremeno s rakom klastera stanica napada (slika 13). Međutim, samo 34 od 123 slučaja imala VEGFR-3-pozitivne ekspresiju u središtu tumora (I-VEGFR-3) (slika 14). Te posude su uglavnom bili tankih stijenki, nepravilnog oblika i sadrži malo ili nema RBC. Slika 13 VEGFR-3-pozitivne ekspresije u endotelnim stanicama citoplazmi tumorskih periferiji (P-VEGFR-3), povremeno raka stanični klasteri napada (strelice). IHC, povećanje. × 400
Slika 14 VEGFR-3-pozitivnih izraza su smještena na tumor centru (strelice). . IHC, povećanje: × 200
u tumorskim tkivima perifernim, VEGFR-3 izrazi značajno povezana je s VEGF-C visoku ekspresiju (p pregled < 0.000), VEGF-D visoke ekspresije (P = pregled 0,043), povećana P-LVD (P pregled < 0,001), a prisustvo LVI (P
= 0.003), dok je s VEGF-a ekspresije, povećana i-LVD, venske invazija i metastaza limfnog čvora (P pregled i 0.05). Nema korelacije su promatrane između I-VEGFR-3 ekspresije i klinički parametri (P
i 0.05). (Tablica 2) Tablica 2. Korelacije VEGFR-3 ekspresije u differenr lokaciji tumora s kliničkim parametrima pregled faktori pregled
n
pregled, I-VEGFR-3
P-VEGFR-3
pregled pregled, N (%)
P

N (%)
P
VEGF-A izraz pregled 0,107 pregled 0,067 pregled Low pregled 44
16 (36.36)
15 (34.09) pregled, visoke pregled 79 pregled, 18 (22.78)
40 (50.63) pregled, izraz VEGF-C pregled 0,795 izvoznici < 0.001 pregled, Low pregled 42 pregled, 11 (26.19) pregled, 9 (21.43) pregled, visoke pregled 81 pregled, 23 (28,40)
46 (56.79) pregled VEGF- D izraz pregled 0.968 pregled 0,043
Low Netlogu 72 pregled, 20 (27.78)
27 (37,50) pregled, visoke pregled 51 pregled, 14 (27.45) pregled 28 (54,90) pregled, P-LVD
0.813 izvoznici < 0.001 izvoznici < 14 pregled, 60 pregled, 16 (26.67) pregled, 10 (16.67)
≥ 14
63 pregled, 18 (28,57)
45 (71,43) pregled, i-LVD
0,412 pregled 0,153 izvoznici < 8 pregled 58 pregled, 14 (24.14)
22 (37.93)
≥ 8 pregled 65 pregled, 20 (30.77)
33 (50.77)
limfnog čvora metastaza pregled 0,934 pregled 0.190
negativan pregled 55 pregled, 19 (34,55)
21 (38.18)
Pozitivan pregled 68 pregled, 15 (22,06)
34 (50,00) pregled LVI pregled 0,681 pregled 0.003
Negativna pregled 76 pregled, 22 (28.95)
26 (34.21)
Pozitivan pregled 47 pregled, 12 (25.53)
29 (61.70) pregled, VI
0387 pregled 0,448 pregled Negativna pregled 87
26 (29.89)
37 (42.53)
Pozitivan pregled 36 pregled, 8 (22.22)
18 (50,00)
Kratica: LVD: limfni gustoća posuda; LVI: limfna invazija posuda; VI: venski invazije; I-VEGFR-3: VEGFR-3 pozitivni izraz u središtu tumora; P-VEGFR-3: VEGFR-3 pozitivni izraz na periferiji tumora pregled Prediktivna vrijednost LVD za limfnih čvorova metastaza Netlogu Kao rezultat multivarijatne logističke regresijske analize u tablici 3, izražavanja VEGF-C i P-LVD. značajno su asscoiated s limfnih čvorova metastaza (P Netlogu = 0,024, P = 0.045 pregled, respektivno). I-LVD, VEGF-A, VEGF-D i P-VEGFR-3 ekspresije nije pokazao predskazujuću vrijednost u limfnim metastazama kod raka želuca. (Tablica 3) Tablica 3 Multivarijatna logistička regresijska analiza za limfnih čvorova metastaza pregled Čimbenici
omjer izgleda
95% CI
pregled P
P-LVD
3,548 pregled 1.030 -12,226 pregled 0,045 pregled I-LVD pregled 1,300 pregled 0,964-1,754 pregled 0,085 pregled VEGF-A pregled 0,510 pregled 0,138-1,884 pregled 0,313 pregled VEGF-C
4.069
1.198 - 13,820 pregled 0,024 pregled VEGF-D
3.162 pregled ,834-11,992 pregled 0,091 pregled P-VEGFR-3 pregled 2,919 pregled ,747-11,403 pregled 0,123 pregled naziv: LVD: limfni gustoća posuda; P-VEGFR-3. VEGFR-3 pozitivni izraz na periferiji tumora pregled Prognostički značaj I-LVD i P-LVD Netlogu Na univarijatne analize preživljavanja, P-LVD je povezana s lošim ukupno preživljavanje (Slika 15, P pregled i 0,001), preživljavanje bez simptoma bolesti (Slika 16, P pregled < 0,001) i preživljavanje karcinom specifični (Slika 17, P pregled < 0,001). Međutim, ja-LVD je povezana s nonsignificantly trendom sve gore, odnosno (ukupno preživljavanje, P pregled = 0.5835, Slika 18; preživljenja bez znakova bolesti-free, P pregled = 0.2844, Slika 19; preživljavanje raka specifične, P pregled = 0,6246, slika 20). Slika 15 Odnos između P-LVD s ukupno preživljavanje (P < 0,001).
Slika 16 Odnos između P-LVD s preživljavanje bez bolesti (P ​​< 0,001).
Slika 17 Odnos između P-LVD s rak-specifične za preživljavanje (P < 0,001)..
Slika 18 odnos između i-LVD sa ukupno preživljavanje (P = 0,5825)
Slika 19 odnos između i-LVD s preživljavanje bez bolesti (P ​​= 0,2844) .
Slika 20 odnos između I-LVD s preživljavanje raka-specifične (P = 0,6246). pregled, Multivarijatna regresijska analiza indicateded da P-LVD mogla biti nezavisna prognostički čimbenik i za ukupno preživljavanje (P = 0.045 pregled ) i bez znakova bolesti opstanak (P pregled = 0,031), bez obzira na preživljavanje raka-specifične. Osim toga, prisutnost LVI i TNM stadiju mogu poslužiti kao nezavisni prediktori za sva tri preživjelima (LVI P pregled = 0.040, 0.043, 0.039, TNM stadij, P pregled = 0.048, 0.001, 0.001, Tablica 4) , VEGF-A izraz lica bio neovisan prognostički pokazatelj samo za ukupno preživljavanje (P
= 0,033). pronađene su statistički značajne korelacije za I-LVD, VEGF-C, VEGF-D i P-VEGFR-3 s bilo kojim od preživjelima. (Tablica 4) Tablica 4 Cox regresijska analiza nezavisnih čimbenika koji utječu na preživljavanje bez bolesti, preživljavanje raka-specifične i ukupno preživljenje pregled Čimbenici
rak-Specific opstanak
bolesti bez opstanak
ukupno preživljenje
pregled, OR (95% CI) pregled
P
ILI (95% CI)
P
ILI (95% CI)
P pregled
P-LVD
2,099 (0.91-4.87)
0,084
2.418 (1.08-5.40)
0.031
2.895 (1.02-8.19)
0.045
I-LVD
1,205 (0,56-2,63)
0,639
1.325 (0.62-2.85)
0,472
1.959 (0.90-4.24)
0.088
VEGF-A
1.386(0.50-3.83)
0.528
1.364(0.67-2.78)
0.391
2.437(1.10-5.45)
0.030
VEGF-C
2.423(0.89-6.63)
0.085
1.630(0.77-3.47)
0.205
1.562 (0,79-3,34) pregled 0,182 pregled VEGF-D
0.511 (0.19-1.36)
0,178
1.916 (0.90-4.10)
0,094
1.621 (0.81-3.98) pregled 0.190 pregled LVI
2.716 (1.05-7.04)
0.040
2.477 (1.03-5.97)
0.043
2.578 (1.05-6.34)
0.039
LNM
2,115 (0,68-6,60)
0,197
2.428 (1.18-5.02)
0.017
3.426 (1.66-7.06)
0.001
VI
2.943(0.89-9.77)
0.078
1.697(0.75-3.87)
0.208
1.477(0.63-3.48)
0.373
P-VEGFR-3
1. 499 (0,98 - 2,31)
0.067
1.099 (0.53-2.28)
0.800
1.402 (0.68-2.90)
0,361 pregled TNM stadij
1,523 (1.00-2.31) pregled 0.048 pregled, 1.674 (1,25 - 2,25)
0.001
1.656 (1.23-2.23)
0.001 pregled kratica: P-LVD: peritumorskih gustoću limfna žila; I-LVD: intratumoralno limfna gustoća brod; LVI: limfna invazija posuda; LNM: limfni čvor metastaze; VI: venski invazije; P-VEGFR-3. VEGFR-3 pozitivna ekspresije periferiji tumora pregled Rasprava pregled Nedavno je D2-40 protutijelo, novi marker za limfnom endotelu, je identificiran kao specifičan antitijela protiv humanog podoplanin [13] , Mnoga istraživanja su pokazala da je imunološko D2-40 specifično za vrednovanje limfna invazija i limfni mikrožilne gustoće u ljudskim karcinoma, uključujući rak želuca u [14-17]. U ovom istraživanju, LVD i limfna invazija brod su identificirani D2-40 bojenja, a potvrđuje dvostrukim bojanjem D2-40 i CD34, koji jasno diskriminirati limfne žile od krvnih žila i dalje.

• P27Kip1, regulirani glikogen sintetaze kinaze-3β, rezultira HMBA-inducirana diferencijacije humanog želučanog raka cells
• Retrospektivnoj studiji bolesnika s karcinomima želuca i jetre: utjecaj komorbiditeta i nacionalnosti na raka, te rezultati