Разное значение между внутриопухолевой и перитуморальной лимфатической плотности сосудов при раке желудка: ретроспективное исследование 123 cases

разное значение между внутриопухолевой и перитуморальной лимфатической плотности сосудов при раке желудка: ретроспективное исследование 123 случаев
Аннотация
Справочная информация
Пациенты с раком желудка в Китае имеют худший результат и худший прогноз. Опухоль-индуцированные лимфангиогенез играет решающую роль в прогрессии метастаза и опухоли. Предполагалось, что внутриопухолевой и перитуморальной лимфатической были иметь различные биологические эффекты. Три основных фактора роста, сосудистый эндотелиальный фактор-роста (VEGF), -A, VEGF-C и VEGF-D, участвуют в процессе активации через свои рецепторы (VEGFRs). Целью настоящего исследования является изучение существенных различий между внутриопухолевой и перитуморальной лимфатической плотности сосудов (LVD) при раке желудка и их корреляции с lymphangiogenetic факторами роста.
Методов
внутриопухолевой LVD (I-LVD) и перитуморальной LVD ( P-LVD) из 123 пациентов с первичным раком желудка оценивали после окрашивания D2-40, и подтверждается двойным окрашиванием с D2-40 /CD34. Пролиферативная активность лимфатической эндотелий оценивали путем двойного окрашивания с D2-40 /Ki-67. Были проанализированы ассоциации между I-LVD /P-низковольтное оборудование и уровень экспрессии VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D и рецептор VEGFR-3, которое было измерено с помощью иммуногистохимии (IHC). Корреляция I-LVD и P-LVD с прогнозом пациента были также оценены.
Результаты
(1) перитуморальное лимфатической (PTLs) были относительно увеличены с дилатационной просвет по сравнению с внутриопухолевых лимфатической (ITL,). Увеличение P-LVD была значительно выше, чем I-LVD (P &
л; 0,05). (2) P-LVD был найден в значительной степени связано с метастазов в лимфатических узлах (LNM) (P &
л; 0,001), лимфатической инвазии сосуд (ЛВИ) (P &
л; 0,001), VEGF-C (P <бр> = 0,003), уровень экспрессии VEGF-D (P
= 0,005) и уровень экспрессии VEGFR-3 (P &
л; 0,001) в перитуморальной тканях, несмотря на отсутствие значимой связи не было найдено между выше варианты с I-LVD , Тем не менее, увеличение I-LVD было продемонстрировано, что связано со снижением объема опухоли (Р &
л; 0,001). Ни я-LVD, ни P-LVD не коррелировала с VEGF-A выражение (P &
GТ; 0,05). (3) пролиферативной активности лимфатическую эндотелий наблюдалась в PTLs, несмотря на ITL,. (4) Увеличение P-LVD, но не я-LVD, было указано, чтобы быть независимым фактором риска развития метастаз лимфатических узлов с помощью многофакторного логистического регрессионного анализа, и было связано с худшей выживаемости без признаков заболевания и общей выживаемости.
Выводы
PTLs играют роль в прогрессии рака желудка. Увеличение P-LVD, но не я-LVD, был в значительной степени связано с VEGF-C /-D /системы VEGFR-3, и может быть независимым фактором риска развития метастазов в лимфатических узлах и прогностический фактор в развитии рака желудка.
Справочная информация
рак желудка является основной ведущей причиной связанной с раком смерти в Китае. Около 80% ~ 90% больных диагностируются на продвинутой стадии с плохим исходом, обычно с лимфатической распространения и отдаленных метастазов. В течение последних нескольких лет, лимфангиогенез индуцированный опухолью обусловлен lymphangiogenic факторами роста прочно утвердился в качестве нового механизма прогрессирования рака. В настоящее время, все большее число экспертов считают, что внутриопухолевой лимфатической (ITL,, в пределах lymphtics опухолей) и перитуморальной лимфатической (PTLs, lymphtics на периферии) играют именно различные биологические функции на поведение опухоли и прогнозом при различных типах опухолей. При раке желудка, некоторые исследования показали, что у пациентов с более высоким уровнем I-LVD имели более высокое присутствие метастазов в лимфатических узлах на ранней стадии [1], в то время как P-LVD может быть независимым фактором риска развития метастазов в лимфатических узлах и прогноз [2]. Тем не менее, функция I-LVD и P-LVD и их корреляции с выражением VEGFs еще не выяснены.
Ряд исследований показали, решающие роли VEGFs выражений на опухолевой прогрессии и прогноза при раке желудка. VEGF-C и VEGF-D, два члена семейства VEGF, были определены как lymphangiogenic факторы роста и играют важную роль в опухолевой лимфангиогенеза посредством активации VEGFR-3, который в основном экспрессируется в лимфатических эндотелиальных клетках (МИК). VEGF-C является доминирующим регулятором лимфангиогенеза как в ранней и раком желудка [3, 4]. Повышенная экспрессия VEGF-C имел значительную корреляцию с LVD, ЛВИ и метастазов в лимфатических узлах [5], но его прогностическое значение остается спорным. VEGF-D был вовлечен в лимфатическую расплывание клеток рака желудка и может быть независимым прогностическим маркером [6]. VEGFR-3 также было указано в качестве прогностического фактора [6]. Еще один фактор роста, VEGF-A, которая регулируется ангиогенез, считается также стимулировать лимфангиогенез путем связывания с VEGFR-2 в последнее время. Увеличение VEGF-A Уровень экспрессии у больных раком желудка была доказана, связано с плотностью микрососудов (MVD), гематогенного метастазирования, перитонеального disseminateion и плохим прогнозом. Тем не менее, он по-прежнему неизвестно, будет ли оба внутриопухолевых и перитуморальной lymphtics стимулируются тремя VEGFs, секретируемых опухолевыми клетками, или является ли I-LVD и P-LVD играют существенно различные биологические роли в метастазов в лимфатических узлах и прогноза при раке желудка.
Методы
пациенты и опухолевые образцы
опухолевые образцы были получены из 123 пациентов с первичным раком желудка, которые приняли гастрэктомию в отделении хирургии, Тунцзи больницы Тунцзи университета с января 2000 года по декабрь 2003 года ни один из них не получил предэксплуатационной химиотерапии или лучевой терапии. Исследуемая популяция состояла из 80 человек (65%) и 43 женщин (35%). Средний возраст на момент постановки диагноза составил 65 лет (от 28 варьировались до 87 лет). Тридцать один случаи раннего рака желудка (РГВ) и 92 случаев раком желудка (AGC) были вовлечены в. Гистологическое этап был основан на классификации UICC TNM. Другие клинические признаки были обобщены в таблице 1. Все пациенты были наблюдались клинически в течение по крайней мере 5 лет после операции. Среднее время наблюдения составило 56 месяцев (колеблется от 6 до 85 месяцев). Анализ выживаемости проводили, в том числе и общей выживаемости (OS), выживаемость без признаков заболевания (ДФС) и выживание рака специфических (CSS). OS, DFS и CSS рассчитывалась с момента операции до последнего контакта для жизни пациентов, на дату последнего наблюдения для пациентов, страдающих болезнью, свободных, и к дате желудочного рака, вызванного смертью, соответственно. Четыре случая EGC и 52 случая АРУ были произошло рецидива. Одиннадцать пациентов имели перитонеальный распространение 26 пациентов метастазов в печени, а также 19 случаев рецидивирующей в желудке после операции. Сорок пациентов умерли от рака желудка. Настоящее исследование было одобрено Комитетом по этике исследования Тунцзи больницы связаны с Тунцзи университета им. Нормальные ткани желудка были собраны в качестве контрольных образцов. Все результаты были достигнуты двумя патологи независимо друг от друга, и средства были рассчитаны для каждого конкретного случая на основании данных obtained.Table 1 корреляцией LVD с клинико-патологическими параметрами и VEGFs выражениями
Факторы

N

I-LVD

P-LVD

<й>
<й>
среднее значение ± SD

P


среднее значение ± SD

P


Опухоль дифференциация
0,802
0,739 <бр> Высокая дифференцированы
11
8,18 ± 2,44
12,07 ± 4,49
Mederately /бедных дифференцированы
112
8,00 ± 2,27
12,46 ± 3,60
размер опухоли
&л; 0,001
&л; 0,001
&л; 3,2 см
57
8,93 ± 2,34
11,18 ± 3,80
≥ 3,2 см
66
7,23 ± 1,91 <бр> 13,50 ± 3,21
Глубина вторжения
0,433
0,026
pT1-2
69
8,16 ± 2,51
11,78 ± 3,52
pT3-4
54
7,83 ± 1,96
13,26 ± 3,71
узел метастаз лимфа
0,056 *
&л; 0,001
Отрицательный
57
8,47 ± 2,27
10,50 ± 3,42
позитиве
66
7,65 ± 2,24
13,98 ± 3,10
LVI
0,700
&лт; 0,001
Негативный
83
8,08 ± 2,33
11,23 ± 3,29
Положительный
40
7,91 ± 2,22
14,36 ± 3,44
VI
0,905
&л; 0,001
Негативный
86
8,00 ± 2.38
11,65 ± 3,81
позитиве
37
8,05 ± 2,67
14,24 ± 2,53
TNM стадия
0,067
&ЛТ; 0,001
I - II <бр> 71
8,34 ± 2,42
11,33 ± 3,29
III - IV
52
7,58 ± 2,01
13,92 ± 3,66
VEGF-A выражение
0,527
0,091
Низкая
44
7,84 ± 2,51
11,68 ± 3,54
Высокие
79
8,26 ± 2,21
12,84 ± 3,69
выражение VEGF-C <бр> 0,092 * 0,003

Low
42
7,55 ± 2,37
11,06 ± 3,26
Высокие
81
8,00 ± 2,34
13,13 ± 3,69
выражение VEGF-D
0,514
0.005
Низкая
72
7,90 ± 2,47
11,65 ± 3,44
Высокое
51
8,18 ± 1,99
13.53 ± 3,73
P
, т испытания; P
*, Манна-Уитни U
Test. Сокращенное наименование: LVD: лимфатический сосуд плотность; LVI: лимфатической инвазии судно. VI:. Венозная инвазия одностоечные иммуногистохимии для D2-40, VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D и VEGFR-3
Для immunohistichemical окрашивания, 4 мкм толщиной парафином слайды были вырезаны из каждого исследования блок. Срезы обрабатывали 0,3% H <суб> 2O <подразделам> 2 в течение 10 мин при комнатной температуре. Для поиска антигена, слайды нагревают в микроволновой печи, содержащей 0,01 ммоль цитрата /л натрия (рН 6,0). Срезы инкубировали при 4 ° С в течение ночи в ванночку влажности с первичными антителами, VEGF-A (мышиных моноклональных антител, 1: 100, DAKO), VEGF-C (козьи поликлональные антитела, 1: 100, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), VEGF-D (козьи поликлональные антитела, 1: 100, Santa Cruz), VEGFR-3 (козьи поликлональные антитела, 1: 100, Santa Cruz) и D2-40 (мышиное моноклональное антитело, 1: 100, DAKO), соответственно. Предметные стекла промывали трижды в 0,1 ммоль /л PBS в течение 2 мин, и инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре с козьим анти-кролик /мышь с пероксидазой хрена (Энвижн, Dako, CA), чтобы определить цель. Секции были разработаны с 3 '3-диаминобензидино. Нормальный козьи подавалось в качестве отрицательного контроля реакции для окрашивания VEGF-C, VEGF-D и VEGFR-3, и нормальной кроличьей IgG был служили в качестве отрицательного контроля реакции для окрашивания VEGF-A и D2-40.
двойной иммуногистохимического окрашивания для D2-40 /CD34
двойного иммуногистохимического окрашивания для D2-40 /CD34 дополнительно обрабатывали для оценки специфичности экспрессии D2-40 в лимфатической эндотелий. Предложение было в соответствии с инструкцией завода-изготовителя (нет: 95-9999, Histostain-DS Kit, Zymed, CA). Парафиновые 4 мкм срезы депарафинировали с ксилолом и регидратации. Слайды были погружены в раствор пероксидазы закалочной в течение 10 мин. После инкубации в течение ночи при 4 ° C с первичными антителами против CD34 (мышиных моноклональных антител, 1: 100, DAKO, Carpinteria, CA), срезы обрабатывают сывороткой блокирующим раствором, а затем инкубируют с биотинилированным вторичным антителом (DAKO ). Затем щелочной фосфатазы конъюгат был использован для каждой секции в течение 10 мин. И затем, срезы обрабатывают с субстратом хромогена смеси и двойное окрашивание энхансер. Сыворотку блокирующий раствор наносили снова, предметные стекла инкубировали с другим первичным антителом против D2-40 (мышиных моноклональных антител, 1: 200, GM36190, Джин Tech Company Limited, Шанхай, Китай) в течение 60 мин и биотинилированного второго анти-иммуноглобулина (Ig), (Dako) обрабатывали. После применения с ферментного конъюгата в течение 10 мин, предметные стекла инкубировали со смесью субстратного буфера, раствор хромогена и 0,6% перекиси водорода для HRP и отслеживаются под микроскопом. Водопроводная вода, содержащая 0,05% твин-20 прекратил реакцию. Для отрицательных контролей, срезы окрашивали неиммунного сыворотки вместо той же концентрации первичного антитела. В CD34 положительные кровеносные сосуды показали интенсивное красное пятно, и D2-40 положительные лимфатические сосуды показали темно-фиолетовый пятно.
Двойное окрашивание для D2-40 /Ki-67
Для обнаружения пролиферативной активности лимфатических сосудов , была выполнена методом двойного иммуногистохимическое D2-40 /Ki-67. Антитело D2-40 использовали для окрашивания лимфатических сосудов эндотелий, вместе с Ki-67 (кролика моноклональное антитело, 1: 200, Santa Cruz, США), чтобы окрасить пролиферативные клетки. Ki-67 окрашивание (красный) был разработан с щелочной фосфатазы конъюгированных с вторичным антителом, а затем D2-40 окрашивание (коричневый) была разработана с конъюгированным с пероксидазой вторичным антителом. Пролиферативные лимфатические сосуды были подтверждены Ki-67 положительно окрашенных ядер, которые также имели сопутствующую положительное окрашивание цитоплазмы в D2-40 положительных клеток. Скорость двойных меченных сосудов определяли путем подсчета ядер ассоциированных с опухолью D2-40-положительных сосудов (100 ядер в каждой опухоли) [7].
ОЦЕНКА LVD
внутриопухолевой NSR (горячие точки были расположены при опухоли в центре) и перитуморальной LVD (горячие точки были расположены на периферии ткани в пределах 2 мм опухоли, прилегающей к инвазивным спереди) оценивались отдельно [2, 7-9]. Количественный анализ лимфатической плотности сосудов проводили в секциях, которые были одним окрашивали D2-40. Пять областей с наибольшим количеством лимфатической регионов ( "горячие точки") были выбраны 40 × увеличении с помощью световой микроскопии. LVD оценивали путем подсчета всех окрашивали сосудов при увеличении × 200. Среднее количество лимфатической начисленных была определена как LVD. Лимфатической инвазии сосуд (LVI) было обнаружено, чтобы присутствовать, если по меньшей мере одна клетка опухоли кластера была в D2-40 положительных сосудов [10]. Подсчет очков и подсчета были выполнены независимо двумя исследователями, которые не имели клинической информации о пациентах. Среднее значение Р-низковольтное оборудование и I-LVD были вычислены для каждого случая.
Assesment из VEGFs и VEGFR-3 выражения
Позитивное окрашивание VEGF-A, -C и -D выражение было определено, как предыдущие исследования [6 , 11]. Окрашивание результаты для трех вышеуказанных VEGFs были полуколичественно оценивали с помощью иммуногистохимического балла в сочетании с процентом опухолевых клеток, дающим конкретные иммунореактивности. Окрашивание интенсивность была дана с четырьмя сортов: нет (0), слабый (1), умеренная (2) и сильный (3). Процент положительных клеток карциномы был дан с оценками: 0 (0%), 1 (1% ~ 10%), 2 (11% ~ 49%), 3 (50% ~ 100%), соответственно. Общая оценка была рассчитана путем умножения интенсивности окрашивания и процент положительных опухолевых клеток. Медиана счет был выбран как уровень отсечки в соответствии с которым опухоли были разделены на низко- (0 ~ 3) и высокоэнергетических выражения (4 ~ 6) опухоли [6, 11]. -Положительные VEGFR-3 сосудов определяли, как описано ранее [12]. Сосуды трех горячих точек областей подсчитывали при увеличении × 400. Окрашивание считается положительным, когда более чем 5% от эндотелии показали [6] окрашивание. Перитуморальной VEGFR-3-положительных сосудов (P-VEGFR-3) и внутриопухолевой VEGFR-3-положительных сосудов (I-VEGFR-3) были оценены как выше LVD.
Статистический анализ
Статистический анализ проводился с использованием статистики Пакет для программного обеспечения социальных наук (версия 11.5; SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс). Образцы были разделены на две категории в зависимости от срединных значений I-LVD и P-LVD, соответственно. Корреляция I-LVD и P-LVD с клиникопатологическими параметрами и VEGFs выражений были проанализированы с помощью независимых выборок T
тест или Манна-Уитни
тест. Корреляция VEGFR-3 экспрессии с клиническими параметрами были проанализированы с помощью хи-квадрат Пирсона испытаний. Связанные с этим факторы около узла метастаза лимфатический при раке желудка были выполнены с использованием многовариантного логистического регрессионного анализа. Кривые выживаемости были получены с использованием метода Kalplan-Мейера и сравнивали с помощью лог-рангового. Многофакторный анализ выживаемости оценивали с использованием метода пропорциональных рисков Кокса. Все статистический анализ был двух сторон значение определяется как P &
ЛТ; 0.05.
Результаты
внутриопухолевой и перитуморальной лимфатическим характеристик в раке желудка
The D2-40-положительных лимфатических сосудов имели неправильную морфологию и тонкостенных просвет. Лимфатические сосуды в тканях желудка были в основном расположены в слое подслизистой (рисунок 1). Лимфатические сосуды (D2-40-положении) и кровеносных сосудов (CD34-позиционные) были четко отличаются дальнейшего двойного окрашивания (рис 2). Внутриопухолевой лимфатические сосуды обычно были разрушилась, малый и нерегулярный (рисунок 3), но некоторые noncollapsed лимфатической показали открытые просвет, а иногда содержали вторжение опухолевых клеток кластеры (Рисунок 4). Перитуморальное лимфатические сосуды в поверхностной и глубокой части подслизистой были увеличены с лимфатическими полостями дилатационной (рисунок 5, рисунок 6). Вторжение лимфатический сосуд наблюдали в 38 случаях. Нет существенной корреляции не было найдено между количеством LVD в центре опухоли и в тканях контроля (8,02 ± 2,28 против 8,13 ± 1,04, P
≫ 0,05). Тем не менее, количество Р-LVD (12,15 ± 3,75) были значительно выше, чем в тканях контрольных и центра опухоли (P &
л; 0,05). Нет статистически значимых различий не было обнаружено между этими двумя методами обнаружения (лимфатические сосуды одного окрашивания для D2-40 и двойного окрашивания для D2-40 /CD34) (I-LVD, 8,02 ± 2,28 против 7,80 ± 2,33; P-LVD, 12,15 ± 3,75 против 12,42 ± 3,67, Р &
ГТ; 0,05). Рисунок 1 D2-40-положительным lymphantics в основном, расположенных в слое подслизистой в желудочном ткани (стрелки). IHC, увеличение:. × 200
Рисунок 2 Двойное иммуногистохимическое окрашивание для D2-40 и CD34 четко выделяются лимфатические сосуды (черная стрелка) из кровеносных сосудов (красная стрелка). . IHC, увеличение: × 400
Рисунок 3 внутриопухолевой лимфатические сосуды рака желудка были разрушилась (стрелка); Двойной иммуногистохимическое окрашивание, увеличение:. × 200 Рисунок 4
вторгшихся раковые клетки кластера присутствовали в лимфатической инвазии сосудов (LVI). Двойной иммуногистохимического окрашивания для D2-40 /CD34, увеличение:. × 400
Рисунок 5 перитуморально лимфатические сосуды рака желудка были увеличены с дилатационной просвет, расположенных на поверхностном подслизистой. IHC, увеличение:. × 200
Рисунок 6 перитуморальное лимфатических сосудов при раке желудка были увеличены с дилатационной просвет, расположенных в глубоководной части подслизистой. IHC, увеличение:. × 200
Корреляция I-LVD и P-LVD с клиникопатологическими параметрами и VEGFs выражениями
корреляции I-LVD и P-LVD с клиникопатологическими параметры приведены в таблице 1. Увеличение I- LVD была в значительной степени связано с меньшим размером опухоли (P &
л; 0,001). Нет корреляции не было найдено между I-LVD и VEGFs выражений, в то время как P-LVD была достоверно коррелирует с большим размером опухоли (P &
л; 0,001), глубина инвазии (P
= 0,026), метастазов в лимфатических узлах (P
&л; 0,001), ЛВИ (P &
л; 0,001), венозная инвазия (VI) (P &
л; 0,001), TNM стадия (P &
л; 0,001), VEGF-C ( Р
= 0,003) и экспрессия VEGF-D (Р
= 0,005).
экспрессия трех VEGFs показали положительное окрашивание цитоплазмы в клетках рака желудка. Высокий уровень экспрессии VEGF-A (рис 7), VEGF-C (рисунок 8) и VEGF-D (рис 9) наблюдались у 64,2% (79/123), 65,9% (81/123) и 41,5% (51 /123) образцов, соответственно. Ни я-LVD, ни P-LVD обнаружено не было в значительной степени связано с VEGF-A выражение (P &
GТ; 0,05). Рисунок A-7 экспрессию VEGF в цитоплазме при раке желудка. IHC, увеличение:. × 400 Рисунок выражение
8 VEGF-C в цитоплазме при раке желудка. IHC, увеличение:. × 400 Рисунок выражение
9 VEGF-D в цитоплазме при раке желудка. IHC, увеличение:. × 200
пролиферативную активность в внутри- и перитуморальной лимфатической
Пролиферативные лимфатические сосуды были найдены на периферии опухоли, (рисунок 10). Скорость ядер лимфатических сосудов Ki-67-положительных на периферии опухоли был (0,81 ± 0,13)%. Нет пролиферативная лимфатический сосуд не был найден в центре опухоли (рисунок 11). Лимфатической вторжения можно было наблюдать в перитуморальное тканях (рисунок 12). Фигура 10 Ki-67-положительных ядер лимфатический сосуд (стрелки) были обнаружены в периферии опухоли. Двойное окрашивание для D2-40 /Ki-67, увеличение:. × 400 Рисунок 11
Нет Ki-67 положительное выражение в внутриопухолевых ядер лимфатической. Двойное окрашивание для D2-40 /Ki-67, увеличение:. × 400
Рисунок 12 лимфатическими сосудами вторжения был обнаружен в перитуморальное ткани (стрелки). Двойное окрашивание для D2-40 /Ki-67, увеличение:. × 400
VEGFR-3 выражение в лимфатических сосудах
The VEGFR-3-положительное выражение в опухоли периферии (P-VEGFR-3) был найден в 55 из 123 случаев, иногда с раковой клетки кластеров вторгшихся (рисунок 13). Тем не менее, только 34 из 123 случаев имели VEGFR-3-положительное выражение в опухолевой центре (I-VEGFR-3) (рисунок 14). Эти суда были в основном тонкостенные, неправильной формы и не содержала или несколько RBCs. Рисунок 13 VEGFR-3-положительное выражение в эндотелиальных клетках цитоплазмы в периферии опухоли (P-VEGFR-3), иногда с кластерами раковых клеток вторжения (стрелки). IHC, увеличение:. × 400 Рисунок 14
The VEGFR-3-положительные выражения были расположены в центре опухоли (стрелки). . IHC, увеличение: х200
В периферических тканях опухоли, VEGFR-3 выражения были достоверно коррелировали с довольно высоким уровнем экспрессии VEGF-C (P &
л; 0,000), VEGF-D высокий уровень экспрессии (P =
0,043), увеличение P-NSR (Р
&л; 0,001) и наличие LVI (P
= 0,003), чем с-VEGF экспрессии, увеличение I-LVD, венозную инвазию и метастазирование узел лимфа (Р
> 0,05). Не было обнаружено корреляции между I-VEGFR-3 экспрессии и клинических параметров (P
≫ 0,05). (Таблица 2) Таблица 2 Корреляция экспрессии VEGFR-3 в differenr локализации опухоли с клиническими параметрами
Факторы

N <бр>
I-VEGFR-3

P-VEGFR-3

<й>
<й>
N (%)

P


N (%)

P


VEGF-A выражение
0,107
0,067
Низкая
44 <бр> 16 (36,36)
15 (34,09)
High
79
18 (22,78)
40 (50,63)
выражение VEGF-C
0,795
< 0.001
Низкая
42
11 (26,19)
9 (21,43)
High
81
23 (28,40)
46 (56,79)
VEGF- выражение D
0,968
0,043
Low
72
20 (27.78)
27 (37,50)
High
51
14 (27,45)
28 (54,90)
P-LVD
0,813
&лт; 0,001
&14 Лт;
60
16 (26,67)
10 (16,67)
≥ 14
63
18 (28,57)
45 (71.43)
I-LVD
0,412
0,153
&л; 8
58
14 (24,14) <бр> 22 (37,93)
≥ 8
65
20 (30,77)
33 (50.77)
узла метастаз лимфатических
0,934
0,190
Негативный
55
19 (34,55)
21 (38,18) Положительный

68
15 (22,06)
34 (50.00)
LVI 0,681
Результаты
0,003 <бр> Негативный
76
22 (28,95)
26 (34,21)
Положительный
47
12 (25,53)
29 (61.70)
VI
0,387
0,448
Негативный
87
26 (29.89)
37 (42,53) Положительный

36
8 (22,22)
18 (50.00) <бр> Сокращенное наименование: LVD: лимфатический сосуд плотность; LVI: лимфатической инвазии судно; VI: венозная инвазия; I-VEGFR-3: VEGFR-3 положительное выражение в центре опухоли; P-VEGFR-3: VEGFR-3 положительное выражение на периферии опухоли
Predictive значение LVD для метастазов в лимфатических узлах
В результате многофакторного логистического регрессионного анализа в таблице 3, экспрессии VEGF-C и P-LVD. были значительно asscoiated с метастазов в лимфатических узлах (P
= 0,024, P = 0,045
соответственно). I-LVD, VEGF-A, VEGF-D и экспрессия P-VEGFR-3 не показали прогностическую ценность для метастазов в лимфатических узлах при раке желудка. (Таблица 3) Таблица 3 Многофакторный логистический регрессионный анализ для метастазов в лимфатических узлах
Факторы

отношение шансов

95% ДИ

P


P-LVD
3,548
1,030 -12,226
0,045
I-LVD
1,300
0,964 - 1,754 0,085

VEGF-A
0,510
0,138 - 1,884
0,313
VEGF-C
4.069
1,198 - 13,820
0,024
VEGF-D
3.162
0,834 - 11,992
0,091
P-VEGFR-3
2,919
0,747 - 11,403
0,123
Сокращенное наименование: LVD: лимфатический сосуд плотность; P-VEGFR-3:. VEGFR-3 положительное выражение на периферии опухоли
прогностическое значение I-LVD и P-LVD
На однофакторного анализа выживаемости, P-LVD было связано с плохим общей выживаемости (Рисунок 15, P
&л; 0,001), выживаемость без признаков заболевания (рисунок 16, P &
л; 0,001) и выживаемости без рака специфического (Рисунок 17, P &
л; 0,001). Тем не менее, I-LVD коррелировало с тенденцией к недостоверно все выше соответственно (общей выживаемости, P = 0.5835
, Рисунок 18, выживаемость без признаков заболевания, P = 0.2844
, Рисунок 19, выживание канцер-специфическая, P
= 0,6246, Рисунок 20). Рисунок 15 Взаимосвязь между P-LVD с общей выживаемости (P &л; 0,001). Рисунок 16
Отношения между P-LVD с безрецидивной выживаемости (P < 0,001). Рисунок 17
Отношения между P-LVD с канцер-специфической выживаемости (Р &л; 0,001).. Рисунок 18
Связь между I-LVD с общей выживаемости (P = 0,5825) Рисунок 19
Связь между I-LVD с безрецидивной выживаемости (P = 0,2844) . Рисунок 20
Связь между I-LVD с выживанием канцер-специфической (P = 0,6246).
Многофакторный регрессионный анализ indicateded, что P-LVD может быть независимым прогностическим фактором как для общей выживаемости (P = 0,045
) и безрецидивная выживаемость (P = 0,031
), несмотря на выживание рака специфические. Кроме того, наличие ЛВИ и стадии TNM могли бы служить в качестве независимых предикторов для всех трех пережитков (LVI, P
= 0,040, 0,043, 0,039; TNM стадия, P
= 0,048, 0,001, 0,001, Таблица 4) , VEGF-A выражение было независимым прогностическим показателем только для общей выживаемости (P = 0,033
). Никаких статистически не были обнаружены значимые корреляции для I-LVD, VEGF-C, VEGF-D и P-VEGFR-3 с любым из пережитков. (Таблица 4) Таблица 4 Cox регрессионный анализ независимых факторов, влияющих на выживаемость без признаков заболевания, выживание рака конкретных и общей выживаемости
Факторы

канцер-специфическая выживаемость

безрецидивная выживаемость

Общая выживаемость

<й>
OR (95% ДИ)

P


OR (95% ДИ)

P


OR (95% ДИ)

P


P-LVD
2.099 (0.91-4.87)
0,084
2.418 (1.08-5.40)
0,031
2.895 (1.02-8.19)
0,045 <бр> I-LVD
1,205 (0.56-2.63)
0,639
1.325 (0.62-2.85)
0,472
1.959 (0.90-4.24)
0.088
VEGF-A
1.386(0.50-3.83)
0.528
1.364(0.67-2.78)
0.391
2.437(1.10-5.45)
0.030
VEGF-C
2.423(0.89-6.63)
0.085
1.630(0.77-3.47)
0.205
1.562 (0.79-3.34)
0,182
VEGF-D
0,511 (0.19-1.36)
0,178
1.916 (0.90-4.10)
0,094
1.621 (0.81-3.98)
0,190
LVI
2.716 (1.05-7.04)
0,040
2.477 (1.03-5.97)
0,043
2.578 (1.05-6.34)
0,039
LNM
2,115 (0.68-6.60)
0,197
2.428 (1.18-5.02)
0,017
3.426 (1.66-7.06)
0.001
VI
2.943(0.89-9.77)
0.078
1.697(0.75-3.87)
0.208
1.477(0.63-3.48)
0.373
P-VEGFR-3
1. 499 (0.98-2.31)
0,067
1.099 (0.53-2.28)
0,800
1.402 (0.68-2.90)
0,361
стадии TNM
1.523 (1.00-2.31)
0,048
1,674 (1.25-2.25)
0.001
1.656 (1.23-2.23)
0.001
Сокращенное наименование: P-LVD: перитуморальной плотность лимфатический сосуд; I-LVD: внутриопухолевые лимфатической плотность сосуда; LVI: лимфатической инвазии судно; LNM: метастазов в лимфатических узлах; VI: венозная инвазия; P-VEGFR-3:. VEGFR-3 положительных Expression на периферии опухоли
Обсуждение
Недавно D2-40 антитело, новый маркер для лимфатической эндотелий, был идентифицирован как специфического антитела против человеческого podoplanin [13] , Многие исследования указывают на то иммунное D2-40 является специфической для оценки лимфатической инвазии и лимфатического плотности микрососудов в злокачественных опухолях человека, в том числе при раке желудка [14-17]. В этом исследовании, LVD и лимфатической инвазии сосуд были идентифицированы с помощью D2-40 окрашивания, и подтверждается двойным окрашиванием для D2-40 и CD34, которые явно дискриминационный лимфатические сосуды из кровеносных сосудов далее.

• P27Kip1, регулируется гликоген-синтазы-киназы-3 &beta приводит к ГММК-индуцированной дифференцировки клеток рака ж…
• Ретроспективный исследование когорты пациентов с желудка и печени рака: влияние сопутствующей патологии и э…