Magskyddande effekten av johannesbröd (johannesbröd L.) mot etanol-inducerad oxidativ stress i rat

magskyddande effekten av johannesbröd (johannesbröd
L.) mot etanol-inducerad oxidativ stress i råtta Bild Sammanfattning
Bakgrund
vi syftar i den aktuella studien, till att undersöka magskyddande effekten av johannesbrödskidor vattenextrakt (CPAE) mot etanol-inducerad oxidativ stress hos råttor samt mekanismen inblandad.
metoder
Vuxna Wistar råttor användes och uppdelade i sex grupper om tio vardera: kontroll, EtOH (80% v /v, 4 g /kg kroppsvikt
), EtOH 80% + olika doser av CPAE (500, 1000 och 2000 mg /kg, kroppsvikt
) och EtOH + famotidin (10 mg /kg, po) Djuren var peroralt (po
) förbehandlade med CPAE under 15 dagar och berusade med en enda oral administrering av EtOH (4 g /kg kroppsvikt
) för två timmar.
Resultat
kolorimetrisk analys visade att CPAE uppvisade en vikt in vitro
antioxidant aktivitet mot ABTS och DPPH radikaler. Vi fann att CPAE förbehandling in vivo
, skyddad mot EtOH-inducerad makroskopiska och histologiska förändringar inducerade i magslemhinnan. Carob extrakt administration skyddas även mot alkohol-inducerad volym magsaft minskning. Ännu viktigare, visade vi att CPAE motverkas EtOH-inducerad gastrisk lipoperoxidation, återförs minskningen av sulfhydrylgrupper (SH) en väteperoxid (H 2O 2) nivåer, och förhindrade utarmning av antioxidant enzymaktivitet av superoxid dismutas (SOD), katalas (CAT) och glutationperoxidas (GPx).
slutsatser
Dessa fynd tyder på att CPAE utövade en potentiell mag-skyddande effekt mot EtOH-inducerad oxidativ stress hos råttor, delvis beroende på att dess antioxidanter egenskaper.
Nyckelord
magsår Johannesbröd Oxidativ stress Antioxidant kapacitet Rat bakgrund
I gastrointestinala besvär, är magsår en vanlig sjukdom med flera etiologier. Denna sjukdom, som kännetecknas av skador på slemhinnor, huvudsakligen orsakade av Helicobacter pylori
, trombocytaggregationshämmande medel, såsom acetylsalicylsyra [1], icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel (NSAID), såsom orala bisfosfonater, kaliumklorid, immunosuppressiva mediciner [2, 3 ], serotoninåterupptagshämmare [4], rökning och alkoholkonsumtion [5]. Patofysiologi magsår har i allmänhet fokuserat på obalans mellan aggressiva och skyddsfaktorer i magen, såsom syra pepsin sekre, slemhinnebarriären, slemutsöndring, blodflöde, cellulär förnyelse, prostaglandiner och epidermal tillväxtfaktorer [6]. Etanol-inducerade magsår är huvudsakligen relaterad till intensiv infiltration i under slemhinnan som främjar bildandet av reaktiva syreradikaler (ROS), minskad slem, utarmning av sulfhydrylgrupper och minskat blodflöde, vilket resulterar i skador på magslemhinnan [7]. ROS speciellt hydroxylradikal spela huvudrollen i att orsaka oxidativ skada på slemhinnan i alla typer av sår [8]. För att bestämma möjlig mekanism genom vilken ämnen kan agera för att främja gastro flera antioxidanter molekyler såsom quercetin [9] och curcumin [10] tidigare undersökts.
Carob (johannesbröd L.
) är en långsam tillväxt ständigt gröna träd odlas i flera år i Medelhavsländerna länderna~~POS=HEADCOMP. Johannesbrödfrukten, brun pod 10-25 cm i längd, innehåller många bioaktiva substanser, såsom sött kolhydrat, kostfiber, tanniner och polyfenoler [11]. Många av de positiva hälsoeffekter förknippade med konsumtion av fenolrika livsmedel är i huvudsak på grund av deras antioxidant verksamhet [12, 13]. För johannesbrödextrakt, har denna egenskap har tidigare rapporterats i och in vitro
studier [14, 15] in vivo
. Nyligen vi och andra upptäckte att tunisiska blad johannesbrödextrakt presenterar några förbättrande effekter mot alkohol eller CCl 4-inducerad oxidativ skada i råttor vävnader [16, 17]. Dessutom, carob fiber uppvisar hög antioxidant kapacitet bestäms av DPPH radikaler testet, det vill säga högre än många andra livsmedel rika på polyfenoler, såsom blåbär, druvor eller rött vin [18, 19].
Följaktligen denna studie var utformad för att utvärdera den förmodade magskyddande roll vattenextrakt av johannesbrödskidor (CPAE) (15 dagar) mot oxidativ stress inducerad av akut etanol exponering och deltar i en sådan skyddsmekanism.
Metoder
Etik uttalande
nödvändiga tillstånd för fältstudier och insamling av johannesbrödskidor prover erhölls genom ministeriet för jordbruk i Tunisien och identifieras med hjälp av Fru Mouhiba Ben-Naceur, professor i taxonomi i högre Institutet för bioteknik i Beja, Tunisien. Kupongen prover har deponerats hos herbarium Högre Institutet för bioteknik Beja och även vid Institutionen för Biological Sciences, naturvetenskapliga fakulteten, Tunisien.
Beredning av johannesbrödextrakt sälja The mogna johannesbrödskidor samlades från regionen Tabarka (nordvästra Tunisien) under oktober 2013. i korthet växtmaterialet senare torkas i en inkubator vid 50 ° C under 72 timmar och pulveriserad i en elektrisk mixer (Moulinex Ovatio 2, FR). Pulverblandning innehållande carob massa (90%) och fröer (10%) upplöstes i dubbeldestillerat vatten och filtreras genom ett durkslag (0,5 mm maskstorlek). Slutligen tillsattes den johannesbrödskidor vattenhaltiga extraktet användes omedelbart för och in vivo
experiment in vitro
.
Friradikal-eliminerings aktiviteter på DPPH
antioxidativa kapaciteten av vätskeextraktet av johannesbrödskidor utfördes med användning av 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radikalfångande aktivitet såsom tidigare beskrivits av Grzegorczyk et al. [20]. I korthet innebar detta olika koncentrationer av CPAE (20, 50, 100, 150, och 200 | ig /ml) sattes till 1 ml av 0,1 mM metanollösning av DPPH och inkuberades vid 27 ° C under 30 min. Den optiska densiteten hos provet kvantifierades vid 517 nm. DPPH radikalfångande aktivitet (RSA), uttryckt i procent, beräknades med användning av följande formel: $$ \\mathrm{R}\\mathrm{S}\\mathrm{A}\\left(\\%\ ight)=\\frac{{{{}^A}_{\\mathrm{DPPH}}}^{-}\\left({{}^{A_{\\mathrm{sample}}}}^{-{A}_{\\mathrm{control}}}\ ight)}{{}^{A_{\\mathrm{DPPH}}}}\\times 100 $$ Askorbinsyra användes som en referensmolekyl i samma koncentration som testextraktet.
Samtliga analyser utfördes i triplikat. Effektiviteten koncentration 50 (EG 50)-värdet bestämdes som den koncentration (i | j, g /ml) av den förening som krävs för att eliminera 50% av DPPH-radikal.
Friradikal-eliminerings aktiviteter på ABTS
antioxidant kapacitet av johannesbrödskidor vattenextraktet utvärderades med användning av 2,2'-azino-bis [3-etylbenstiazolin-6-sulfonsyra] (ABTS) metoden [21]. I korthet sattes 1 ml av utspätt extrakt sattes till 3 ml av 7 mM ABTS radikal lösning (ABTS • +) och hölls i mörker vid rumstemperatur under 60 min. Absorbansen mättes vid 734 nm. Elimineringskapaciteten beräknades som ((1 - Ab /A0) x 100%) (Ab och A0 är absorbansen av prover samt ABTS • + Djur och behandling
.> Friska vuxna Wistar-hanråttor (vägande 220-250 g, inrymt fem per bur) och vuxna manliga Schweiziska albinomöss (som vägde ungefär 25 g, inrymt tio per bur) köptes från Society of Pharmaceutical Industries i Tunisien (SIPHAT, Ben-Arours , TN). Experimentella protokoll godkändes med riktlinjerna i den etiska kommittén för fakulteten Tunis, Tunisien. testet utfördes i enlighet med kommissionens direktiv 2000/32 /EG och OECD Guideline 474 [22]. de lämnades med vanliga livsmedel (standard pellet kost-Badr Utique-TN) och vatten efter behag Mössor och underhålls i djurhus vid kontrollerad temperatur (22 ± 2 ° C) med en 12 h ljus-mörker-cykel. råttorna delades in i halv ett dussin grupper. Grupp 1 och 2 var tjänstgjorde som kontroller och hade dubbeldestillerat vatten (5 ml /kg, kroppsvikt
, po
). Grupperna 3, 4 och 5 förbehandlades med olika doser av CPAE (500, 1000 och 2000 mg /kg, bwpo
), medan grupp 6 förbehandlades med respektive famotidin (10 mg /kg, bwpo
) under 15 dagar. Råttorna fick fasta i 24 timmar före den sista administreringen av CPAE eller referensmolekyler. Efter 60 min, varje djur, med undantag för grupp 1 erhöll EtOH (4 g /kg, kroppsvikt
) genom oral administrering. Två timmar senare avlivades råttorna.
Akut toxicitet
johannesbrödskidor vattenextraktet i dosintervallet 0,05, 0,1, 0,5, 1, 2, 5, 10 och 200 g /kg oralt administreras till olika grupper av möss (n
= 10). Djuren undersöktes var 30 min under 4 timmar och sedan, då för ytterligare en period på åtta timmar. 24 h efter, var mortaliteten registrerades. Mössen observerades också för andra tecken på toxicitet, såsom motorisk koordination, rätande reflex och förändringar i luftvägarna.
Utvärdering av gastrointestinala skador
magen på varje djur avlägsnades och öppnades längs dess större kurvatur. Vävnaden försiktigt sköljdes i NaCl 0,9%. Skadorna i magslemhinnan var makroskopiskt undersöktes och fotografier av blödnings erosioner förvärvades med en Photometrics Quantix digitalkamera. Ulcer index bestämdes som summan av längderna av de hela gastriska lesioner (i mm 2) [23]. Två oberoende, förblindade observatörer utfört mätningar av skade längder.
Gastric volym saft bestämning
magsaft samlas och centrifugeras vid 3000 g under 5 min för att avlägsna olösligt material. Supernatanten efter mättes med användning av forskarrören [24].
Histopatologisk analys
Omedelbart efter avlivning, små bitar av magen skördades och tvättades med iskall saltlösning. Vävnadsfragment fixerades sedan i en 10% neutral buffrad formalinlösning, inbäddades i paraffin och användes för histopatologisk undersökning. 5 | j, m tjocka sektioner skars, avparaffinerades, hydrerade och färgades med hematoxylin och eosin (HE). De gastriska sektioner undersöktes i blint i alla behandlingar [25].
Lipidperoxidation mätning
magslemhinnan lipidperoxidation bestämdes genom MDA mätning enligt den dubbla värme metoden [26]. I korthet sattes alikvoter från magslemhinnan homogenat blandas med BHT-triklorättiksyra (TCA) lösning innehållande 1% BHT (vikt /volym
) upplöst i 20% TCA (vikt /volym
) och centrifugerades vid 1000 x g
under 5 minuter vid 4 ° C. Supernatanten blandades med en lösning innehållande (0,5 N HCl, 120 mM TBA buffras i 26 mM Tris) och upphettades sedan vid 80 ° C under 10 min. Efter kylning tillsattes absorbansen av den resulterande kromoforen bestämdes vid 532 nm. MDA-nivåer bestämdes genom användning av en extinktionskoefficient för MDA-TBA komplex av 1,56 x 10 5 M -1 • cm -1.
Tiolgrupp mätning
Den totala koncentrationen av tiol grupper (-SH) utfördes enligt Ellmans metod [27]. I korthet sattes alikvoter från magslemhinnan blandades med 100 | il av 10% SDS och 800 | il av 10 mM fosfatbuffert (pH 8), och den optiska densiteten mättes vid 412 nm (A 0). Efter tillsats av 100 | il av 5,5'-ditiobis- (2-nitrobensoesyra) (DTNB), fick reaktionsblandningen inkuberades vid 37 ° C under 60 min och ett nytt värde (A 1) bestämdes. Den tiolgrupper koncentration beräknades från A 1 A 0 subtraktion med hjälp av en molar extinktionskoefficient av 13,6 × 10 3 M -1 · cm -1. Resultaten uttrycktes som nmol tiolgrupper per
mg protein.
H2O2 bestämning
magslemhinnan H 2O 2 nivå utfördes enligt Dingeon et al. [28]. Kortfattat reagerar väteperoxiden med p-hydroxibensoesyra och 4-aminoantipyrin i närvaro av peroxidas som leder till bildandet av quinoneimine som har en rosa färg detekterades vid 505 nm.
Antioxidant enzymaktivitetsanalyser
Aktiviteten för SOD bestämdes genom användning av modifierade adrenalin analyser [29]. Vid alkaliskt pH, superoxidanjon O 2 - orsakar autooxidation av adrenalin att adenochrome; samtidigt som de konkurrerar med denna reaktion, SOD minskade adenochrome formation. En enhet av SOD är definierad som den mängd av extraktet som hämmar hastigheten för adenochrome bildning med 50%. Enzymextraktet tillsattes i 2 ml reaktionsblandning innehållande 10 mikroliter av bovint katalas (0,4 U /| il), 20 mikroliter epinefrin (5 mg /ml) och 62,5 mM natriumkarbonat /bikarbonatbuffert pH 10,2. Förändringar i absorbans registrerades vid 480 nm.
Aktiviteten av CAT bedömdes genom mätning av initial hastighet på H 2O 2 försvinnande vid 240 nm [30]. Reaktionsblandningen innehöll 33 mM H 2O 2 i 50 mM fosfatbuffert pH 7,0 och aktiviteten av CAT beräknades med hjälp av extinktionskoefficienten för 40 mM -1 cm -1 för H 2O 2.
aktiviteten av GPx kvantifierades genom förfarandet enligt Flohe och Günzler [31]. I korthet, 1 ml reaktionsblandning innehållande 0,2 ml av magslemhinnan supernatanten, 0,2 ml fosfatbuffert 0,1 M pH 7,4, 0,2 ml GSH (4 mM) och 0,4 ml H 2O 2 (5 mM) inkuberades vid 37 ° C under 1 min och reaktionen stoppades genom tillsats av 0,5 ml TCA (5%, vikt /volym). Efter centrifugering vid 1500 g
för 5 minuter, tillsattes alikvot (0,2 ml) från supernatanten kombinerades med 0,5 ml fosfatbuffert 0,1 M pH 7,4 och 0,5 ml DTNB (10 mM) och absorbansen avlästes vid 412 nm. Aktiviteten hos GPx uttrycktes som nmol GSH konsumeras /min /mg protein.
Statistisk analys
Data analyserades genom en-vägs variansanalys (ANOVA) och uttrycktes som medelvärde ± standardfel för medelvärdet (SEM). Data är representativa för 10 oberoende experiment. Alla statistiska tester tvåsidiga, och ap
värde på 0,05 eller mindre ansågs vara signifikant.
Resultat
Akut oral toxicitet CPAE
I den akuta oral toxicitetsstudie, varken onormalt beteende eller dödlighet var upptäckts under observationsperioden. Sålunda var LD50-värdet är större än 20 g /kg b.w. för det vattenhaltiga extrakt av johannesbrödskidor.
In vitro DPPH och ABTS radikal avlägsnande aktiviteter
Flera koncentrationer varierande från 0 till 200 | j, g /ml av CPAE testades med avseende på deras antioxidant aktiviteter i olika in vitro-
modeller. Vi har funnit att den radikalfångande aktivitet CPAE mot DPPH och ABTS radikaler ökade betydligt i ett dosberoende sätt. EG 50 beräknas från diagrammet visade att RSA av CPAE (EG 50 = 228,22 ± 5,27 mikrogram /ml och 184,41 ± 3,95 mikrogram /ml respektive för DPPH och ABTS radikalborttagande aktivitet) verkade liknar den hos askorbinsyra (EG 50 = 190,47 ± 1,2 och 174,13 ± 0,9 pg /ml) såsom välkänd referensmolekyl (tabell 1) .table 1 EC50 värden av DPPH och ABTS radikalfångande aktivitet johannesbrödskidor vattenbaserade extraktet (CPAE ). EC50: den effektiva koncentrationen av provet som kan minska DPPH eller ABTS koncentration med 50%
EC50 av DPPH radikalfångande aktivitet (pg /ml)
EC50 av ABTS radikalfångande aktivitet (^ g /ml)
CPAE
228,22 ± 5,27
184,41 ± 3,95
Askorbinsyra
190,47 ± 1,2
174,13 ± 0,9
Effekt av CPAE på EtOH-inducerad akut makroskopisk gastric skada och volymändring
makroskopisk undersökning av magslemhinnan visas i fig. 1. Som väntat EtOH administration uppvisade skador, inklusive blödning och hyperemi. CPAE och famotidin behandling uppvisade en dosberoende minskning i alla makroskopiska toxiska tecken jämfört med EtOH behandlade gruppen. Dessutom visade kvantitativ analys att johannesbrödextrakt eller referensmolekyl förbehandling signifikant och dosberoende minskat sårindex, skyddas mot gastric volym saft minskar, och lindras skydd andelen skada inducerad av EtOH administration (tabell 2). Fikon. 1 Subakut effekten av caob skida vattenhaltiga extraktet (CPAE) och famotidin (FAM) på makroskopiska förändringar inducerade av etanol (EtOH) i råttor. Djuren förbehandlades med olika doser av CPAE (500, 1000 och 2000 mg /kg, kroppsvikt, po
), FAM (10 mg /kg, kroppsvikt, po
) eller bi-destillerat vatten, utmanade med en enda oral administrering av EtOH (4 g /kg, kroppsvikt, po
) eller NaCl 9 ‰ under två timmar. a: kontroll; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 och f: EtOH + FAM) Review Tabell 2 Subakut effekten av johannesbrödskidor vattenextrakt (CPAE), famotidin (FAM) och askorbinsyra (AA) på makroskopiska kvantitativa förändringar inducerade av EtOH i råttor: sår slem volym, sår området och procent skydd. Djuren förbehandlades med olika doser av CPAE (500, 1000 och 2000 mg /kg, kroppsvikt, po
), FAM (10 mg /kg, kroppsvikt, po
) eller bi-destillerat vatten, utmanade med en enda oral administrering av EtOH (4 g /kg, kroppsvikt, po
) eller NaCl 9 ‰ i två timmar
Grupp
Slem volym (ml)
Magsårsindex ( mm2)
Skydds procent (%)
Kontroll
4,3 ± 0,20
----
----
EtOH
1,9 ± 0,3 *
86,2 ± 2,6 *
00
EtOH + CPAE-500
2,9 ± 0
67,0 ± 3,6 #
23,4
EtOH + CPAE-1000
3,4 ± 0,2 #
16,6 ± 1,4 #
79,8
EtOH + CPAE-2000
3,9 ± 0,3 #
06.4 ± 0,9 #
92,2
EtOH + FAM
3,8 ± 0,2 #
26,2 ± 3,3 #
68,1
*: p Hotel < 0,05 jämfört med kontrollgruppen och #: p Hotel < 0,05 jämfört med EtOH grupp
Effekt av CPAE på EtOH-inducerad gastrisk mikroskopisk skada
Vi undersökte också effekten av EtOH och CPAE på magslemhinnan histologi och resultaten visas i Fig. 2. EtOH 80% medförde en markant erosiv skada i mag vävnad. CPAE eller famotidin förbehandling minskat kraftigt de histopatologiska förändringar som induceras av akut alkoholförgiftning. Fikon. 2 Subakut effekten av caob skida vattenhaltiga extraktet (CPAE) och famotidin (FAM) på histologiska förändringar inducerade av etanol (EtOH) i råttor. Djuren förbehandlades med olika doser av CPAE (500, 1000 och 2000 mg /kg, kroppsvikt, po
), FAM (10 mg /kg, kroppsvikt, po
) eller bi-destillerat vatten, utmanade med en enda oral administrering av EtOH (4 g /kg, kroppsvikt, po
) eller NaCl 9 ‰ under två timmar. a: kontroll; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 och f: EtOH + FAM) Review Effekt av CPAE på EtOH-inducerad gastrisk lipoperoxidation och väteperoxid ökar
Lager på effekten av EtOH och CPAE på oxidativ stress skick, studerade vi först mag lipoperoxidation och väteperoxid innehåll (Fig. 3a). EtOH berusning drastiskt ökat gastric MDA och H 2O 2 våningar (Fig. 3b). CPAE förbehandling signifikant och dosberoende omvänd lipoperoxidation och väteperoxid ökar inducerad av EtOH berusning. Fikon. 3 Subakut effekten av caob skida vattenhaltiga extraktet (CPAE) och famotidin (FAM) etanol (EtOH) -inducerade förändringar i magslemhinnan MDA a och H2O2 b nivåer i råttor. hos råttor. Djuren förbehandlades med olika doser av CPAE (500, 1000 och 2000 mg /kg, kroppsvikt, po
), FAM (10 mg /kg, kroppsvikt, po
) eller bi-destillerat vatten, utmanade med en enda oral administrering av EtOH (4 g /kg, kroppsvikt, po
) eller NaCl 9 ‰ under två timmar. *: P Hotel < 0,05 jämfört med kontrollgruppen och #: p Hotel < 0,05 jämfört med EtOH grupp
Effekt av av CPAE på EtOH-inducerad gastriska -SH-grupper minskar
Vi visade också att tiolgrupper nivå reducerades signifikant i magslemhinnan alkoholbehandlade råttor. Men CPAE (500, 1000 och 2000 mg /kg, kroppsvikt p.o.
) eller famotidin (10 mg /kg, kroppsvikt p.o.
) förbehandling skyddad betydligt mot denna minskning jämfört med EtOH gruppen (Fig. 4). Fikon. 4 Subakut effekten av caob skida vattenhaltiga extraktet (CPAE) och famotidin (FAM) etanol (EtOH) -inducerad förändringar i magslemhinnan SH- grupper nivå hos råttor. hos råttor. Djuren förbehandlades med olika doser av CPAE (500, 1000 och 2000 mg /kg, kroppsvikt, po
), FAM (10 mg /kg, kroppsvikt, po
) eller bi-destillerat vatten, utmanade med en enda oral administrering av EtOH (4 g /kg, kroppsvikt, po
) eller NaCl 9 ‰ under två timmar. *: P Hotel < 0,05 jämfört med kontrollgruppen och #: p Hotel < 0,05 jämfört med EtOH grupp
Effekt av CPAE på EtOH-inducerad antioxidant enzymaktiviteter utarmning
Vi tittade vidare på effekten av EtOH och CPAE på antioxidant enzymer aktiviteter i magslemhinnan (Fig. 5). EtOH 80% signifikant ökad magslemhinnan antioxidant enzymaktiviteter som SOD (A) och CAT (B) men det minskade signifikant GPx aktivitet (C). Men subakut förbehandling med johannesbrödextrakt eller famotidin avsevärt minskat EtOH-inducerad ökning och en minskning av antioxidant enzymaktiviteter till nära kontrollnivåer med den högsta dosen. Fikon. 5 Subakut effekten av caob skida vattenextrakt (CPAE) och famotidin (FAM) etanol (EtOH) -inducerade förändringar i magslemhinnan antioxidant enzymaktiviteter: SOD a, Cat B och GPX-c hos råttor .. hos råttor. Djuren förbehandlades med olika doser av CPAE (500, 1000 och 2000 mg /kg, kroppsvikt, po), FAM (10 mg /kg, kroppsvikt, po) eller bi-destillerat vatten, utmanade med en enda oral administrering av EtOH (4 g /kg, kroppsvikt, po
) eller NaCl 9 ‰ under två timmar. *: P Hotel < 0,05 jämfört med kontrollgruppen och #: p Hotel < 0,05 jämfört med EtOH grupp
Diskussion
Magen är ett känsligt organ matsmältnings främst exponerad för exogena patogener från kosten. Som svar på dessa patogener producerar magen vävnad ROS såsom hydroxylradikaler en superoxidanjon, som kan vara relaterat till utvecklingen av mag organiska sjukdomar som gastrit, magsår och magcancer, samt funktionella sjukdomar såsom funktionell dyspepsi [ ,,,0],32]. Etanol anses vara en av de medel som inducerar magsår. Effekterna av etanol på magslemhinnan är komplicerade och mångfacetterade som kan förknippas med en störning i balansen mellan magslemhinnan skyddande och aggressiva faktorer [33]. Etanol orsakar skadar i vaskulära endotelceller magslemhinnan och inducerar mikrocirkulationsstörningar och hypoxi, länkar till överproduktion av syreradikaler [34]. ROS produceras inom mag-tarmkanalen, men deras roll i patofysiologi och sjukdoms patogenes har inte studerats.
Många medicinalväxter visar i sin kemiska konstitution, flavonoider, triterpenoids och tanniner, som skyddar magslemhinnan genom induktion av gastro mekanismer eller i egenskap av naturliga antioxidanter [35-37]. Flavonoider och tanniner är den största gruppen av fenolföreningar som fungerar som primära antioxidanter eller fria radikaler [38].
Vår phytochemical studie, dels avslöjade att dess rikedom totala polyfenoler, totalt flavonoider och kondenserade tanniner [14]. Å andra sidan, med hjälp av DPPH och ABTS radikalfångande analysen, fann vi att CPAE presenterar en hög avlägsnande förmåga, om än mindre än askorbinsyra, som användes som en referensmolekyl. Antioxidant kapacitet johannesbröd är främst relaterad till den högre nivån av fenol compouds i denna fraktion [14]. Dessa molekyler är den största källan till deras kapacitet sophantering fria radikaler såsom superoxidanjon (O 2 .) Och hydroxylradikal (OH .) [39].
In vivo
vi först visade att alkohol administration provocerade en tydlig makroskopiska skador, inklusive blödning och hyperemi samt histopatologiska förändringar såsom eroderande skador. CPAE förbehandling signifikant omvänd EtOH-inducerad gastrisk mukosa makro- och mikroskopiska lesioner på ett dos-beroende sätt. Dock magslemhinnan tidigare visat sig spela en viktig roll i skyddet av gastriska hinder [40]. Det är den första försvarslinjen mot syra och följer tillsammans med bikarbonat utsöndras av epitelet att fungera som en barriär mot sig själv matsmältningen [41]. Dessutom är magslemhinnan en viktig skyddande faktor för magslemhinnan och har förmåga att verka som en antioxidant agent och minska skador på slemhinnor förmedlas av ROS [42]. Tanniner kan förhindra magsår utveckling antingen via kärlsammandragande effekter, eller på grund av deras proteiner-utfällda när det främjar utfällning av microproteins i sår platsen, bildar ett ogenomträngligt skikt över foder som hindrar tarmsekret och skyddar den underliggande slemhinnan från irriterande [43]. Dessutom, flavonoider har magsårs och gastro egenskaper [44]. Emellertid har EtOH-inducerad gastrisk ulceration tidigare visats att dämpas med många växter extraherar Aqeratum conyzoides
[45], litet tjockblad och Azadirachta indica
[46], utmärker Hippocratea
[47] och Azadirachta indica
[48]. Men så vitt vi vet, är den första att ta itu med fruktextrakt av johannesbröd
(carob) skyddande effekt på akut EtOH-inducerad ulceration i råtta magslemhinna.
Vi visade också i detta vår rapport studie som EtOH berusning inducerad lipidperoxidation, minskning av tiolgrupper nivå, ökning av väteperoxid innehåll samt utarmning antioxidant enzymaktiviteter såsom SOD, CAT och GPX. Akut alkohol-inducerad oxidativ stress var väldokumenterat i magslemhinnan [49], lever [50], njure [51], hjärta [52] och hjärna [53]. Etanol administrering provocerade oxidativ obalans genom ett antal vägar inklusive genereringen av reaktiva syrespecies [54]. Lipidperoxidation nivå är en indikator på alstringen av ROS i vävnaden. Men omvandlar SOD den reaktiva superoxidradikaler till H 2O 2, som ökades i magslemhinnan och om inte rensas av CAT, det kan i sig orsaka lipidperoxidation genom generering av hydroxylradikaler [55].
Ännu viktigare, visade vi att johannesbrödextrakt förbehandling avskaffas akut EtOH-inducerad oxidativ stress i magslemhinnan. Dessa data fullt bekräftade alla tidigare rapporterade in vivo
[17] och in vitro
[15] antioxidant och anti-inflammatoriska egenskaper av johannesbröd. Vi visade även i vår tidigare rapport av Sebai et al. [14] att den vattenextrakt av johannesbrödskidor innehåller en bra mängd av den totala polyfenoler, totalt flavonoider och kondenserade tanniner. Dessa molekyler är den primära källan till den antioxidant förmågan hos denna växt, genom sophantering fria radikaler som hydroxylradikal (OH •), som är den största orsaken till lipidperoxidation [56]. Dessutom är det väl känt att sulfhydryler är delvis involverade i gastrisk cytoprotektion [57] och även i upprätthålla av slemhinnebarriären integritet och rensar fria radikaler som bildas på grund av inverkan av skadliga medel [58].
Slutsats
Sammanfattningsvis våra data visar tydligt att CPAE utövar skyddande effekter mot akut etanol-inducerad ulceration i råtta magslemhinnan, delvis tack vare sina antioxiderande egenskaper
Förkortningar
CPAE:.
johannesbrödskidor vatten~~POS=TRUNC extrakt~~POS=HEADCOMP
Carob500
Carob 500 mg /kg
Carob1000:
Carob 1000 mg /kg


Carob2000:
Carob 2000 mg /kg
CAT:
Katalas
GPx:
glutationperoxidas
H2O2:
väteperoxid
MDA:
malondialdehyd
Prot:
Proeins
SH:
sulfhydrylgrupper
SOD:
Superoxiddismutas

förklaringar
Erkännanden
Ekonomiskt stöd för det tunisiska ministeriet för "Enseignement Supérieur et Recherche Scientifique" är uppskattande erkänt.
Open Access här artikeln distribueras under villkoren i Creative Commons Attribution 4.0 internationell licens (http: //creative org /licenser /by /4. 0 /.), som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt att du ger rätt kredit till den ursprungliga författaren (s) och källan, en länk till Creative Commons-licens, och ange om det gjorts ändringar. Creative Commons Public Domain Dedication undantag (http:. //Creative org /public /noll /1. 0 /) gäller de uppgifter som görs tillgängliga i den här artikeln, om inte annat anges
Konkurrerande. Alla författare läst och godkänt den slutliga manuskriptet.

• Korrelation av hK6 uttryck med tumörrecidiv och prognos i avancerad magsäckscancer
• Livskvalitet, immunmodulering och säkerhet adjuvant mistel behandling av patienter med magsäckscancer - en randomiserad, kontrollerad pilotstudie