Žalúdočným účinok rohovník (rohovník obyčajný L.) proti etanolom vyvolaného oxidačného stresu v rat

žalúdočnom účinku rohovníka (Ceratonia siliqua
L.) proti etanolom vyvolaného oxidačného stresu u potkanov
abstraktné
pozadia
snažili sme v tejto štúdii, pri vyšetrovaní pred žalúdočnom účinok struky z rohovníka vodný extrakt (CPAE) proti etanolom indukovanej oxidačný stres u potkanov, ako aj mechanizmus, ktorej.
metódy
Dospelé samce potkanov kmeňa Wistar boli použité a rozdelené do šiestich skupín po desiatich každý: kontroly, EtOH (80% objem /objem, 4 g /kg telesnej hmotnosti
), EtOH 80% + rôzne dávky CPAE (500, 1000 a 2000 mg /kg telesnej hmotnosti
) a EtOH + famotidín (10 mg /kg, po) Zvieratá boli orálne (pO
) vopred ošetrené CPAE v priebehu 15 dní a opojení jedinej perorálnej EtOH (4 g /kg telesnej hmotnosti) počas dvoch
hodín.
Výsledky
kolorimetrické analýzy preukázali, že CPAE vykazovali dôležitosť in vitro
antioxidačnú aktivitu proti ABTS a DPPH radikálmi. Zistili sme, že CPAE predčistenie in vivo
, chránené proti EtOH-indukovanej makroskopické a histologické zmeny vyvolané v žalúdočnej sliznici. Rohovník správa extrakt tiež chránený proti Alkohol vyvolaného poklesom žalúdočnej šťavy. Ešte dôležitejšie je, Ukázali sme, že CPAE pôsobiť EtOH indukovanej žalúdočnej lipoperoxidáciu, zvrátiť pokles sulfhydrylové skupiny (SH) je peroxid vodíka ( 2O 2 H) v krvi, a zabránila vyčerpanie antioxidačnú aktivitu enzýmu superoxidu dismutáza (SOD), katalázový (CAT) a glutatión peroxidázy (GPX).
Závery
Tieto zistenia naznačujú, že CPAE pôsobí potenciálny gastro-ochranný účinok proti EtOH indukovanej oxidačným stresom u potkanov, čiastočne, na jeho antioxidanty vlastnosti.
Kľúčové
žalúdočný vred struky z rohovníka Oxidačný stres Antioxidačné kapacita Rat pozadí
V poruchy zažívacieho traktu, vred je časté ochorenie s viacerými etiológie. Toto ochorenie, vyznačujúci sa tým, sliznica poškodením, je prevažne spôsobená Helicobacter pylori
, antiagregačné činidlá, ako je kyselina acetylsalicylová [1], nesteroidných protizápalových liekov (NSAID), ako sú perorálne bisfosfonáty, chlorid draselný, imunosupresívnych liekov [2, 3 ], inhibítory spätného vychytávania serotonínu [4], fajčenie a konzumácia alkoholu [5]. Patofyziológia žalúdočného vredu sa všeobecne zameriava na nerovnováhu medzi agresívnymi a ochranných faktorov v žalúdku, ako je sekrécia kyseliny a pepsínu, slizničnej bariéry, sekréciu hlienu, prekrvenie, regeneráciu buniek, prostaglandínov a epidermálny rastový faktor [6]. Etanol vyvolané gastrickej lézie súvisí predovšetkým s intenzívnou infiltráciu v sub-sliznici, ktorá podporuje tvorbu reaktívnych foriem kyslíka (ROS), zníženie hlien, vyčerpávanie sulfhydrylové skupiny a zníženie prietoku krvi, čo vedie k poškodeniu žalúdočnej sliznice [7]. ROS najmä hydroxy-skupinu hrať hlavnú úlohu v spôsobuje oxidačné poškodenie sliznice vo všetkých typoch vredov [8]. Pre určenie možný mechanizmus, ktorým môže konať látky na podporu žalúdočným, niekoľko antioxidanty molekuly, ako je napríklad kvercetín [9] a [10] kurkumín boli predtým skúmané.
Rohovníka (Ceratonia siliqua L.
) je pomaly rásť stále zelený strom kultivovaný po celé roky v stredomorských krajinách. Rohovníka ovocie, hnedý pod 10-25 cm na dĺžku, obsahujú mnoho bioaktívnych látok, ako sú sladké sacharidov, vlákniny, taníny a polyfenoly [11]. Mnohé z týchto prospešných účinkov na zdravie spojených s konzumáciou fenolových-bohatých potravín sú v podstate v dôsledku ich antioxidačnej aktivity [12, 13]. Pre svätojánskeho chleba extraktu, táto vlastnosť bola predtým oznámené v in vivo stroje a štúdie in vitro
[14, 15]. Nedávno sme i ďalšie zistili, že tuniská list rohovník extrakt predstavuje niektoré melioračných účinkami proti alkoholu alebo CCU 4-indukovanej oxidatívny poškodenie u potkanov tkanivách [16, 17]. Okrem toho, rohovník vlákna vykazujú vysokú antioxidačnú kapacitu stanovenú v teste zachycovačov radikálov DPPH, teda vyššia, ako mnoho iných potravín bohatých na polyfenoly, ako sú čučoriedky, hrozno červeného vína alebo [18, 19]. V súlade s tým
, tejto štúdie bol navrhnutý pre vyhodnotenie domnelú gastroprotektívnymi úlohu vo vodnom extrakte z rohovníka strukov (CPAE) (15 dní) pred oxidačným stresom indukovanej akútnej expozícii etanolu a mechanizmus zapojený do takej ochrany.
metódy
vyhlásenie etika
potrebné povolenia pre terénnych štúdií a zhromažďovanie struky z rohovníka vzorky boli získané od Ministerstva poľnohospodárstva v Tunisku a identifikované pani Mouhiba Ben-Naceur, profesora taxonómie vo vyšších biotechnologický ústav Beja, Tunisko. Poukaz vzorky boli uložené v herbári z Vyššieho Biotechnologický ústav Beja aj na katedre biologických vied, Prírodovedecká fakulta, Tunisko.
Príprava svätojánskeho chleba extraktu
Zrelé struky z rohovníka boli odobraté z oblasť Tabarka (severo-západe Tuniska) v priebehu októbra 2013. v stručnosti, rastlinný materiál bol neskôr vysušený v inkubátore pri teplote 50 ° C počas 72 hodín a práškový v elektrickom mixéri (Moulinex Ovatio 2, FR). Prášková zmes, obsahujúca buničinu rohovník (90%) a semená (10%) sa rozpustí vo dvakrát destilovanej vode a filtruje sa cez cedník (veľkosť ôk 0,5 mm). A konečne, struky z rohovníka vodný extrakt bol okamžite použitý pre in vitro
a v pokusoch in vivo
.
Voľnými radikálmi pohlcujúce aktivity na DPPH
Antioxidačné kapacita vodného extraktu struky z rohovníka bola vykonaná s použitím 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radikály zachytávajúce činnosť, ako bolo opísané skôr Grzegorczyk et al. [20]. V stručnosti, boli pridané rôzne koncentrácie CPAE (20, 50, 100, 150, a 200 ug /ml) na 1 ml 0,1 mM roztoku metanolu DPPH a inkubujú sa pri 27 ° C počas 30 min. Optická hustota vzorky sa kvantifikuje pri 517 nm. DPPH radikály zachytávajúce činnosť (RSA), vyjadrené v percentách, bola odhadnutá s použitím nasledujúceho vzorca: $$ \\mathrm{R}\\mathrm{S}\\mathrm{A}\\left(\\%\ ight)=\\frac{{{{}^A}_{\\mathrm{DPPH}}}^{-}\\left({{}^{A_{\\mathrm{sample}}}}^{-{A}_{\\mathrm{control}}}\ ight)}{{}^{A_{\\mathrm{DPPH}}}}\\times 100 Kyselina askorbová $$ bol použitý ako referenčný molekula v rovnakej koncentrácii ako v extrakte.
Všetky analýzy boli vykonané v troch opakovaniach. Koncentrácia účinnosť 50 (ES 50), hodnota bola stanovená ako koncentrácia (v ug /ml) zlúčeniny, potrebnej k viazaniu 50% DPPH radikálu.
Voľnými radikálmi pohlcujúce aktivity na ABTS
antioxidačné kapacity z luskov rohovníka vodného extraktu boli vyhodnotené za použitia 2,2'-AZIN-bis [3-ethylbenzthiazolin-6-sulfónová kyselina] (ABTS) metóda [21]. Stručne povedané, pridané 1 ml zriedeného extraktu sa 3 ml 7 mM ABTS radikálnej roztoku (ABTS • +) a bola udržiavaná v tme pri teplote miestnosti po dobu 60 min. Absorbancia bola meraná pri 734 nm. Vyplachovanie kapacita bola vypočítaná ako (1 - (Ab /A0) x 100%) (Ab a A0 je absorbancia vzoriek, ako aj ABTS • + roztoku pri 734 nm
Zvieratá a liečba zdravých dospelých samcov krýs Wistar (s hmotnosťou 220-250 g; po piatich umiestnia do klietok) a dospelého muža Swiss Albino myší (s hmotnosťou približne 25 g; sídli desať klietok) boli zakúpené od Society of Pharmaceutical Industries Tuniska (SIPHAT, Ben-Arours , TN). Experimentálne protokoly boli schválené s pokynmi etickou komisiou Prírodovedecká fakulta Tunise. skúška bola vykonaná v súlade so smernicou Komisie 2000/32 /ES a OECD Guideline 474 [22]. boli poskytnuté so štandardným jedlom (štandardné pelety diet- Badr Utique-TN) a voda ad libitum stroje a udržiavané v dome zvierat pri kontrolovanej teplote (22 ± 2 ° C) s cyklom svetlo-tma 12 h. krysy boli rozdelené do polovice tucet skupiny. Skupina 1 a 2 boli podávané ako kontrola a bola dvakrát destilovaná voda (5 ml /kg, telesnej hmotnosti
, po
). Skupiny 3, 4 a 5 boli vopred ošetrené rôznymi dávkami CPAE (500, 1000 a 2000 mg /kg, bwpo
), zatiaľ čo skupina 6 bol vopred upravený, respektíve s famotidínu (10 mg /kg, bwpo
) počas 15 dní. Potkany boli kŕmené 24 hodín pred poslednom podaní CPAE alebo referenčných molekúl. Po 60 minútach, každé zviera, s výnimkou skupiny 1, prijaté EtOH (4 g /kg, brutto váhy
) orálnom podaním. O dve hodiny neskôr boli potkany usmrtené.
Štúdie akútnej toxicity
rohovníka struky vodného extraktu v rozmedzí dávok 0,05, 0,1, 0,5, 1, 2, 5, 10 a 200 g /kg bola orálne podávaná inak skupiny myší (n = 10
). Zvieratá bola skúmaná každých 30 minút počas 4 h a potom sa občas na dobu ďalších 8 hodín. 24 hodín po tom, čo bola zaznamenaná úmrtnosť. Myši boli pozorované tiež pre iné známky toxicity, ako motorickú koordináciu, prirodzených reflexov a respiračných zmien.
Vyhodnotenie poškodenia žalúdočnej sliznici
žalúdka každého zvieraťa bola odstránená a otvorila vďaka svojej väčšej zakrivenie. Tkanivo bola mierne opláchnuté v 0,9%. Tieto lézie žalúdočnej sliznice boli makroskopicky skúmané a fotografií hemoragickej erózie boli nasnímané digitálnym fotoaparátom Photometrics Quantix. Vred indexy boli stanovené ako súčet dĺžok celých žalúdočných lézií (v mm 2) [23]. Dve nezávislého, zaslepeného, ​​pozorovatelia vykonáva meranie dĺžok lézií.
Žalúdočné Stanovenie objemu šťavy
žalúdočnej šťavy sa zachytí a odstreďuje pri 3000 g počas 5 minút za účelom odstránenia nerozpustných materiálov. Supernatant bol potom meria pomocou postgraduálne rúrky [24].
Histopatologické analýza
Ihneď po utratení, malé kúsky žalúdka zozbieraného a premyté ľadovo chladnou fyziologickým roztokom. Tkanivové fragmenty boli potom fixované v 10% neutrálnom roztoku pufrovaného formalínu, vložené do parafínu a použité pre histopatologické vyšetrenie. 5 um silné rezy boli rezané, deparafinizovány, hydratovaná a zafarbené hematoxylínom a eosínu (HE). Žalúdočné rezy boli skúmané v slepá štúdia vo všetkých ošetrení [25].
Lipid meranie peroxidácie
žalúdočnej sliznice peroxidácie lipidov bola stanovená meraním MDA podľa metódy dvojitej vykurovanie [26]. Stručne povedané boli alikvótne z žalúdočnej sliznice Homogenát boli zmiešané s roztokom BHT-kyseliny trichlóroctovej (TCA) obsahujúci 1% BHT (w /v
) sa rozpustí v 20% TCA (w /v
), a centrifugovány pri 1000 x g po
po dobu 5 minút pri 4 ° C. Supernatant bol zmiešaný s roztokom obsahujúcim (0,5 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 120 mM TBA pufra v 26 mM Tris) a potom sa zahrieva na teplotu 80 ° C počas 10 minút. Po ochladení sa absorbancia výsledného chromofor bola stanovená pri 532 nm. Hladiny MDA boli stanovené za použitia koeficientu extinkcie pre MDA-TBA komplexu 1,56 x 10 5 M -1 · cm -1.
Meranie tiolový skupina
celková koncentrácia tiolov skupiny (-SH) bola vykonaná v súlade s Ellmanova metóda [27]. Stručne povedané boli alikvótne z žalúdočnej sliznice sa zmieša so 100 ul 10% SDS a 800 ul 10 mM fosfátového pufra (pH 8), a optická hustota bola meraná pri 412 nm (A 0). Po pridaní 100 ul 5,5'-dithiobis- (2-nitrobenzoová kyseliny) (DTNB), reakčná zmes bola inkubovaná pri teplote 37 ° C počas 60 minút a nová hodnota (A 1) bola stanovená. Koncentrácia tiolové skupiny bola vypočítaná z A 1 na 0 odčítanie s použitím molárneho koeficientu extinkcie 13,6 × 10 3 M -1 · cm -1. Výsledky boli vyjadrené ako nmol thiolových skupín na
mg proteínu. Stanovenie
H2O2
žalúdočnej sliznice H 2O 2 úroveň bola vykonaná v súlade s Dingeon et al. [28]. Stručne povedané, peroxid vodíka reaguje s p-hydroxybenzoovej kyseliny a 4-aminoantipyrín v prítomnosti peroxidázy, vedúci k tvorbe quinoneimine, ktorá má ružovú farbu detekovaný pri 505 nm.
Testov antioxidant aktivita enzýmu
aktivitu SOD bola stanovená s použitím modifikovanej epinefrín testy [29]. V alkalickom pH, peroxidový anión O 2 - spôsobí, že autooxidáciou adrenalínu do adenochrome; zatiaľ čo súťaží s touto reakciou, SOD znižoval adenochrome formáciu. Jedna jednotka SOD je definovaná ako množstvo extraktu, ktorý inhibuje rýchlosť tvorby adenochrome o 50%. Enzým extrakt bol pridaný do 2 ml reakčnej zmesi obsahujúcej 10 ul hovädzieho katalázový (0,4 U /ul), 20 ul epinefrín (5 mg /ml) a 62,5 mM uhličitanu sodného /hydrogénuhličitan pufri o pH 10,2. Zmeny v absorbancii boli zaznamenané pri 480 nm.
Aktivita CAT bola stanovená meraním počiatočnej rýchlosti H 2O 2 zmiznutie pri 240 nm [30]. Reakčná zmes obsahovala 33 mM H 2O 2 v 50 mM fosfátového pufra pH 7,0 a aktivita CAT bola vypočítaná s použitím koeficientu extinkcie 40 mm -1 cm -1 H 2O 2.
aktivita GPX bola kvantifikovaná podľa postupu popísaného v Flöha a Günzler [31]. Stručne povedané, 1 ml reakčnej zmesi, obsahujúcej 0,2 ml žalúdočnej sliznice supernatantu, 0,2 ml fosfátového pufra 0,1 M, pH 7,4, 0,2 ml GSH (4 mM) a 0,4 ml H 2O 2 (5 mM) bola inkubovaná pri teplote 37 ° C počas 1 min a reakcia bola zastavená pridaním 0,5 ml TCA (5%, w /v). Po odstredení pri 1500 g počas 5 minút
, alikvotná časť (0,2 ml), z supernatantu sa zmieša s 0,5 ml fosfátového pufra 0,1 M, pH 7,4 a 0,5 ml DTNB (10 mM) a absorbancia bola odpočítaná pri 412 nm. Aktivita GPX bola vyjadrená ako nmol GSH spotrebovanej /min /mg proteínu.
Štatistická analýza
Dáta boli analyzované pomocou jednocestnej analýzy variance (ANOVA) a boli vyjadrené ako priemer ± štandardná chybu strednej hodnoty (SEM). Dáta sú reprezentatívne pre 10 nezávislých experimentov. Všetky štatistické testy boli dvojchvostý, a ap
hodnota 0,05 alebo menej bola považovaná za významnú.
Výsledky
Akútna orálna toxicita CPAE
akútnej orálnej štúdie toxicity, ani abnormálne správanie, ani bola úmrtnosť zistená v priebehu sledovaného obdobia. To znamená, že hodnota LD50 bola väčšia ako 20 g /kg telesnej hmotnosti pre vodné extrakt z rohovníka strukov.
in vitro DPPH a ABTS zachycovačov radikálov činnosti
niekoľko koncentrácií v rozmedzí od 0 do 200 boli testované ug /ml CPAE pre svoje antioxidačné účinky v rôznych in vitro
modely. Bolo zistené, že radikály zachytávajúce činnosť CPAE proti DPPH a ABTS radikálov významne zvýšil v spôsobom závislým od dávky. EK 50 Hodnoty vypočítané z grafu preukázané, že RSA z CPAE (ES 50 = 228,22 ± 5,27 ng /ml a 184,41 ± 3,95 ng /ml, respektíve pre DPPH a ABTS radikál-vyplachovania činnosti) sa javila podobná že kyseliny askorbovej (ES 50 = 190,47 ± 1,2 a 174,13 ± 0,9 ug /ml), ako je dobre známe, referenčné molekula (tabuľka 1) .Table 1 EC50 hodnoty DPPH a ABTS radikálmi zachytávajúce činnosť struky z rohovníka vodného extraktu (CPAE ). EC50: účinná koncentrácia vzorky, ktoré môžu znižovať koncentráciu DPPH alebo ABTS o 50%
EC50 DPPH radikál-vyplachovanie aktivity (ug /ml)
EC50 ABTS radikály zachytávajúce činnosť (ug /ml)
CPAE
228,22 ± 5,27
184,41 ± 3,95
Kyselina askorbová
190,47 ± 1,2
174,13 ± 0,9
Vplyv CPAE na etanolu indukovanej akútnej makroskopické žalúdočné zranenia a zmena objemu
makroskopického vyšetrenia žalúdočnej sliznice je znázornený na obr. 1. Ako sa dalo očakávať, správa EtOH vystavoval zranenia vrátane krvácania a prekrvenie. CPAE a liečba famotidín vykázali dávkovo závislé zníženie vo všetkých makroskopických príznakov toxicity v porovnaní so skupinou liečenou EtOH. Okrem toho kvantitatívna analýza ukázala, že rohovník extrakt alebo referenčné molekula predúpravu významne a v závislosti od dávky znižuje index vred, chránenú proti zníženie žalúdočnej šťavy objemu, a zlepšil percento ochrany poranenia vyvolanej podávaním EtOH (tabuľka 2). Obr. 1 Subakútna účinok Caoba strukov vodný extrakt (CPAE) a famotidín (FAM) na makroskopické zmeny vyvolané etanolu (EtOH) u potkanov. Zvieratá boli vopred ošetrené rôznymi dávkami CPAE (500, 1000 a 2000 mg /kg, telesnej hmotnosti, po
), FAM (10 mg /kg, telesnej hmotnosti, po
) alebo bi-destilovanej vode, vystavených jednorazové perorálne podanie EtOH (4 g /kg, telesnej hmotnosti, po
) alebo NaCl 9 promile po dobu dvoch hodín. a: kontrola; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; E: EtOH + CPAE-2000 a F: EtOH + FAM)
Tabuľka 2 Subakútna účinok rohovník strukov vodný výluh (CPAE), famotidínom (FAM) a kyseliny askorbovej (AA) na makroskopické kvantitatívne zmeny vyvolané etanolu u krýs: vred hlienu objem, ulcer area a ochrana percento. Zvieratá boli vopred ošetrené rôznymi dávkami CPAE (500, 1000 a 2000 mg /kg, telesnej hmotnosti, po
), FAM (10 mg /kg, telesnej hmotnosti, po
) alebo bi-destilovanej vode, vystavených jednorazové perorálne podanie etanolu (4 g /kg, telesnej hmotnosti, po
) alebo NaCl 9 promile na dve hodiny
objeme Group
mucus (ml)
vredy index ( mm2) percentuálny
Protection (%)
Control
4,3 ± 0,20
---- ----
EtOH
1,9 ± 0,3 *
86,2 ± 2,6 *
00
EtOH + CPAE-500
2,9 ± 0
67,0 ± 3,6 #
23,4
EtOH + CPAE-1000
3,4 ± 0.2 #
16,6 ± 1,4 #
79,8
EtOH + CPAE-2000
3,9 ± 0,3 #
06,4 ± 0,9 #
92,2
etanolu + FAM
3,8 ± 0.2 #
26,2 ± 3,3 #
68,1
*: p Hotel < 0,05 v porovnaní s kontrolnou skupinou a #: p Hotel < 0,05 v porovnaní s EtOH skupina
Vplyv CPAE v EtOH-indukovanej žalúdočnej mikroskopické zranenia
Ďalej bol sledovaný vplyv EtOH a CPAE na žalúdočnú sliznicu histológiu a výsledky sú uvedené na Obr. 2. EtOH 80% viedla k značnej erozívnou lézie v žalúdočnej tkanive. CPAE alebo famotidín predúprava veľmi redukoval histopatologických zmien vyvolaných akútnej intoxikácie alkoholom. Obr. 2 Subakútna účinok Caoba strukov vodný extrakt (CPAE) a famotidín (FAM) na histologické zmeny vyvolané etanolu (EtOH) u potkanov. Zvieratá boli vopred ošetrené rôznymi dávkami CPAE (500, 1000 a 2000 mg /kg, telesnej hmotnosti, po
), FAM (10 mg /kg, telesnej hmotnosti, po
) alebo bi-destilovanej vode, vystavených jednorazové perorálne podanie EtOH (4 g /kg, telesnej hmotnosti, po
) alebo NaCl 9 promile po dobu dvoch hodín. a: kontrola; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 a f: EtOH + FAM)
Vplyv CPAE na EtOH vyvolané žalúdočné lipoperoxidácie a zvýšenie peroxidu vodíka
vplyv na účinok EtOH a CPAE na oxidačným stavu stresu, sme študovali najprv žalúdočné lipoperoxidáciu a obsah peroxidu vodíka (viď obr. 3a). EtOH intoxikácie drasticky zvýšilo žalúdočné MDA a H 2O 2 podlažiach (obr. 3b). CPAE významne predbežného ošetrenie a v závislosti na dávke s reverznej zvýšenie lipoperoxidácie a peroxid vodíka vyvolané EtOH intoxikáciu. Obr. 3 Subakútna účinok Caoba strukov vodný výluh (CPAE) a famotidín (FAM) etanol (EtOH) indukované zmeny v žalúdočnej sliznici MDA A a hladiny H2O2 b u potkanov. u potkanov. Zvieratá boli vopred ošetrené rôznymi dávkami CPAE (500, 1000 a 2000 mg /kg, telesnej hmotnosti, po
), FAM (10 mg /kg, telesnej hmotnosti, po
) alebo bi-destilovanej vode, vystavených jednorazové perorálne podanie EtOH (4 g /kg, telesnej hmotnosti, po
) alebo NaCl 9 promile po dobu dvoch hodín. *: P Hotel < 0,05 v porovnaní s kontrolnou skupinou a #: p Hotel < 0,05 v porovnaní s EtOH skupina
Vplyv z CPAE na EtOH-indukovanej žalúdočné -SH skupín, znížiť
Tiež sme ukázali, že hladiny thiolových skupín bola významne znížená v žalúdočnej sliznici potkanov s alkoholom ošetrené. Avšak CPAE (500, 1000 a 2000 mg /kg telesnej hmotnosti P.O.
) alebo famotidín (10 mg /kg, P.O. b.w.
) predbežné spracovanie významne chránená proti tomuto poklesu oproti skupine EtOH (obr. 4). Obr. 4 Subakútna účinok Caoba strukov vodný extrakt (CPAE) a famotidín (FAM), etanol (EtOH) indukované zmeny v žalúdočnej sliznici SH- skupín úroveň u potkanov. u potkanov. Zvieratá boli vopred ošetrené rôznymi dávkami CPAE (500, 1000 a 2000 mg /kg, telesnej hmotnosti, po
), FAM (10 mg /kg, telesnej hmotnosti, po
) alebo bi-destilovanej vode, vystavených jednorazové perorálne podanie EtOH (4 g /kg, telesnej hmotnosti, po
) alebo NaCl 9 promile po dobu dvoch hodín. *: P Hotel < 0,05 v porovnaní s kontrolnou skupinou a #: p Hotel < 0,05 v porovnaní s etanolom skupina
Vplyv CPAE o antioxidačné aktivity enzýmov vyčerpania etanolu indukované
sme ďalej skúmala účinnosť etanolu a CPAE o antioxidačných enzýmov činnosti v žalúdočnej sliznici (obr. 5). EtOH 80% významne zvýšila žalúdočnej sliznice antioxidačné aktivity enzýmu SOD ako (A) a CAT (B), ale významne znížil aktivitu GPX (C). Avšak, sub-akútnej predpríprave svätojánskeho chleba extraktu alebo famotidínom významne znížil nárast EtOH indukovanej a zníženie antioxidačné aktivity enzýmov do blízkeho úrovniach riadenia s najvyššou dávkou. Obr. 5 Subakútna účinok Caoba strukov vodný výluh (CPAE) a famotidín (FAM) etanol (EtOH) indukované zmeny v žalúdočnej sliznici antioxidačných enzýmových aktivít: SOD A, CAT b a c GPX u potkanov .. u potkanov. Zvieratá boli vopred ošetrené rôznymi dávkami CPAE (500, 1000 a 2000 mg /kg, telesnej hmotnosti, po), FAM (10 mg /kg, telesnej hmotnosti, po) alebo bi-destilovanej vode, napádal s jednorazovou perorálne podávanie EtOH (4 g /kg, telesnej hmotnosti, po
), alebo NaCl 9 ‰ počas dvoch hodín. *: P Hotel < 0,05 v porovnaní s kontrolnou skupinou a #: p Hotel < 0,05 v porovnaní s etanolom skupiny
diskusiu
žalúdok je citlivý tráviaci orgán vystavená predovšetkým exogénnym patogénom zo stravy. V reakcii na tieto patogény, žalúdok tkanivo produkuje ROS, ako je hydroxy-skupinu s superoxid aniónov, ktoré by mohli byť v súvislosti s vývojom žalúdočných organických porúch, ako je gastritída, žalúdočné vredy a rakovinu žalúdka, ako aj funkčných porúch, ako je funkčná dyspepsia [ ,,,0],32]. Etanol je považovaný za jeden z agentov, ktoré vyvolávajú žalúdočné vredy. Účinky etanolu na žalúdočnej sliznice sú zložité a mnohostranné, ktoré môžu byť spojené s poruchy v rovnováhe medzi žalúdočnej sliznice ochrannými a agresívne faktory [33]. Etanol spôsobuje zraní vo vaskulárnych endoteliálnych bunkách žalúdočnej sliznice a vyvoláva poruchy mikrocirkulácie a hypoxia, spájajúcej k nadprodukcii kyslíkových radikálov [34]. ROS sú vyrábané v gastrointestinálnom trakte, ale ich úloha v patofyziológii a patogenéze ochorenia neboli dobre preštudovaný.
Vrátane liečivé rastliny vykazujú v ich chemickom zložení, flavonoidy, triterpenoidy a trieslovín, ktoré chránia žalúdočnú sliznicu prostredníctvom indukcie žalúdočným mechanizmov alebo pôsobí ako prírodné antioxidanty [35-37]. Flavonoidy a taníny sú hlavnou skupinou fenolových zlúčenín, ktoré pôsobia ako primárne antioxidanty a lapače voľných radikálov [38].
Nášho fytochemické štúdiu, za prvé, ukázal, že jeho bohatosť celkové polyfenoly, celkové flavonoidy, triesloviny a kondenzovanej [14]. Na druhej strane, pomocou DPPH a ABTS radikál pohlcujúce testu sme zistili, že CPAE predstavuje vysokú schopnosť zachytávať, hoci menšie, než je kyselina askorbová, ktorý bol použitý ako referenčný molekuly. Antioxidačné kapacita rohovník súvisí predovšetkým s vyšším stupňom fenolových compouds v tejto frakcii [14]. Avšak, tieto molekuly sú hlavným zdrojom ich kapacity voľným radikálom, ako je peroxidový anión (O 2 .) A hydroxylový radikál (OH .) [39].
In vivo,
sme najprv ukázal, že podávanie alkoholu vyvolal jasné makroskopické zranenia vrátane krvácania a prekrvenie, ako aj histopatologickými zmenami, ako erozívna lézie. CPAE predbežné ošetrenie významne reverznej EtOH-indukovanej žalúdočnej sliznice makro- a mikroskopické lézie v spôsobom závislým od dávky. Avšak, žalúdočnej sliznice bolo skôr preukázané, že hrajú kritickú úlohu v ochrane žalúdočných prekážok [40]. Jedná sa o prvú líniu obrany proti kyseliny a držia spolu s hydrogénuhličitanom vylučovaného epitelu slúži ako bariéra proti samovoľnému rozkladu [41]. Okrem toho, žalúdočnej sliznice je dôležitým ochranným faktorom pre žalúdočnej sliznice a je schopný pôsobiť ako antioxidant a znižuje slizničnej poškodenie sprostredkované ROS [42]. Triesloviny by mohlo zabrániť rozvoju vredu buď cez vazokonstrikčné účinky, alebo v dôsledku ich proteínov vyzrážaniu kde podporuje zrážanie microproteins v mieste vredov, ktoré tvoria nepriepustnú vrstvu cez sliznice, ktorá bráni črevné sekréty a chráni základné sliznicou z dráždivé látky [43]. Navyše flavonoidy majú Antiulcerózum a gastroprotektívnymi vlastnosti [44]. Avšak, EtOH vyvolané gastrická ulcerácia bola už skôr preukázané, že zoslabený mnohých rastlinách extrakty Aqeratum conyzoides
[45], Bacopa monnieri a Azadirachta indica
[46], Hippocratea vyniká
[47] a Azadirachta indica
[48]. Avšak, ak vieme, naša správa je prvý, kto sa vysporiadať s ovocným extraktom z rohovník obyčajný
(rohovník) ochranný účinok na akútne vredov etanolu indukované v potkaním žalúdočnej sliznici.
Sme tiež ukázal v prítomnosti študovať že EtOH intoxikácia vyvolaná peroxidáciu lipidov, zníženie thiolových skupín vyrovnaním, zvýšenie obsahu peroxidu vodíka, rovnako ako vyčerpaním antioxidant enzýmovej aktivity, ako je SOD, CAT a gpx. Akútna alkoholom indukovaná oxidačného stresu bola široko popísaná v žalúdočnej sliznici [49], pečeň [50], obličiek [51], srdce [52] a [53] mozgu. podávanie etanol vyvolalo oxidačné nerovnováhu cez množstvo ciest, vrátane tvorby reaktívnych foriem kyslíka [54]. Lipidov úroveň peroxidácie je indikátorom generácia ROS v tkanive. Avšak, SOD prevedie reaktívne superoxidové radikál s H 2O 2, ktorá bola zvýšená v žalúdočnej sliznici, a ak nie prepláchnutý tak, že CAT, môže samo o sebe spôsobiť peroxidáciu lipidov tvorbou hydroxy-skupinu [55].
A čo je dôležitejšie, sme ukázali, že rohovník extrakt predbežné ošetrenie zrušená akútne EtOH-indukovanej oxidatívny stres v žalúdočnej sliznici. Tieto údaje plne potvrdená všetky skôr zaznamenané in vivo
[17] a in vitro
[15] antioxidačné a protizápalové vlastnosti svätojánsky chlieb. Tiež sme preukázali v našej predchádzajúcej správe Šeba et al. [14], že vodný výluh rohovník strukov obsahuje dobré množstvo celkových polyfenolov, celkových flavonoidov a kondenzovanej taníny. Tieto molekuly sú prvotné zdroj antioxidačné schopnosti tejto rastliny, ktoré voľným radikálom, ako hydroxylový radikál (OH •), čo je hlavnou príčinou peroxidácie lipidov [56]. Okrem toho, že je dobre známe, že sulfhydryls sú čiastočne zapojené do žalúdka cytoprotekci [57] a tiež v udržanie slizničnej bariéry integrity a zachytávať voľné radikály vzniknuté v dôsledku pôsobenia škodlivín [58].
Záver
na záver, naše dáta jasne ukazujú, že CPAE vykazuje ochranný účinok proti akútnym vredov etanolom indukované na potkanoch žalúdočnej sliznice, z časti vďaka svojim antioxidačným vlastnostiam
Skratky
CPAE :.
struky z rohovníka vodný výluh
Carob500:
rohovník 500 mg /kg
Carob1000:
rohovník 1000 mg /kg

Carob2000:
rohovník 2000 mg /kg
CAT: katalázy
GPX:
glutathionperoxidázy
H2O2:
Hydrogenperoxide
MDA:
malondialdehydu
Prot:
Proeins
SHS:
sulfhydrylové skupiny
SOD:
superoxiddismutázy

deklarácia
Poďakovanie
finančnej podpory Ministerstva tuniskej časti "Enseignement Supérieur et Recherche Scientifique" sa uznanlivo súhlasom autora.
otvorený prístup Tento článok je distribuovaný pod podmienkami Creative Commons Attribution 4.0 medzinárodná licenčné (http: //Creative Commons org /licencie /od /4/0)., ktorý umožňuje neobmedzené použitie, distribúciu a reprodukciu v nejakom médiu, ak budete venovať náležitú úver na pôvodného autora (y) a zdroj, poskytnúť odkaz na licenciu Creative Commons, a uviesť, či boli vykonané zmeny. Venovanie vzdanie Creative Commons Public Domain (http: //. Creative Commons org /public domain /nula /1 0 /) sa týka údajov, ktoré boli k dispozícii v tomto článku, ak nie je uvedené inak
Konkurenčné. Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Korelácia hK6 prejavu sa recidívy a prognózou u pokročilého karcinómu žalúdka
• Kvalita života, imunomodulácia a bezpečnosti adjuvantnej liečbe imelom u pacientov s karcinómom žalúdka - randomizovanej kontrolovanej pilotnej štúdie