Gastrobeskyttende virkning af johannesbrød (johannesbrød L.) mod ethanol-induceret oxidativt stress i rat

gastrobeskyttende virkning af johannesbrød (johannesbrød
L.) mod ethanol-induceret oxidativt stress i rotter
Abstract
Baggrund
vi sigter i den foreliggende undersøgelse, at undersøge gastrobeskyttende virkning af bælge vandige ekstrakt (CPAE) mod ethanol-induceret oxidativt stress i rotter samt mekanismen impliceret. Salg Metoder
Voksne Wistar-rotter blev anvendt og opdelt i seks grupper på ti hver: kontrol, EtOH (80% v /v, 4 g /kg legemsvægt
), EtOH 80% + forskellige doser af CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, legemsvægt
) og EtOH + famotidin (10 mg /kg, po) Dyr var peroralt (po
) forbehandlet med CPAE i 15 dage og beruset med en enkelt oral administration af EtOH (4 g /kg legemsvægt
) for to timer.
Resultater
kolorimetrisk analyse viste, at CPAE udviste en betydning i vitro
antioxidant aktivitet mod ABTS og DPPH radikaler. Vi fandt, at CPAE forbehandling in vivo
, beskyttet mod EtOH-induceret makroskopiske og histologiske forandringer induceret i maveslimhinden. Carob ekstrakt administration også beskyttet mod alkohol-induceret volumen mavesaft fald. Endnu vigtigere er, Vi viste, at CPAE modvirket EtOH-induceret gastrisk lipoperoxidering, vendt faldet i sulfhydrylgrupper (-SH) en hydrogenperoxid (H 2O 2) niveauer, og forhindrede udtømning af antioxidant enzymaktiviteten af ​​superoxid dismutase (SOD), catalase (CAT) og glutathionperoxidase (GPX).
konklusioner Salg Disse resultater antyder, at CPAE udøvede en potentiel gastro-beskyttende virkning mod EtOH-induceret oxidativt stress hos rotter, skyldes til dels, at dens antioxidanter egenskaber.
Nøgleord
mavesår Johannesbrødbælge Oxidativ stress Antioxidant kapacitet Rat Baggrund Salg In gastrointestinale lidelser, sår er en almindelig sygdom med flere ætiologier. Denne sygdom, kendetegnet ved mucosal beskadigelse, overvejende forårsaget af Helicobacter pylori
, antitrombotiske midler, såsom acetylsalicylsyre [1], non-steroide antiinflammatoriske lægemidler (NSAID) såsom orale bisphosphonater, kaliumchlorid, immunsuppressive lægemidler [2, 3 ], serotonin reuptake hæmmere [4], rygning og alkoholforbrug [5]. Patofysiologi mavesår har generelt fokuseret på ubalance mellem aggressive og beskyttende faktorer i maven, såsom syre-pepsin sekretion, mucosale barriere, mucus-sekretion, blodgennemstrømning, cellulær regenerering, prostaglandiner og epidermal vækstfaktor [6]. Ethanol-induceret gastriske læsioner er hovedsageligt relateret til intens infiltration i sub-slimhinden, der fremmer dannelsen af ​​reaktive ilt arter (ROS), nedsat slim, udtynding af sulfhydrylgrupper og nedsat blodgennemstrømning, hvilket resulterer i beskadigelse af maveslimhinden [7]. ROS især hydroxylradikal spille en vigtig rolle i at forårsage oxidativ beskadigelse af slimhinden i alle typer af sår [8]. For at bestemme den mulige mekanisme, hvormed stoffer kan virke til at fremme gastrobeskyttelse, flere antioxidanter molekyler såsom quercetin [9] og curcumin [10] blev tidligere undersøgt.
Carob (johannesbrød L.
) er en langsom vækst stadigt grønne træ dyrket i årevis i Middelhavslandene. Den carob frugt, brun pod 10-25 cm i længden, indeholder mange bioaktive stoffer, såsom sød kulhydrat, kostfibre, tanniner, og polyphenoler [11]. Mange af de gavnlige sundhedsmæssige effekter forbundet til forbrug af phenol-rige fødevarer er hovedsagelig på grund af deres antioxidant aktiviteter [12, 13]. For carob ekstrakt, har denne egenskab tidligere blevet rapporteret i in vivo
og in vitro
undersøgelser [14, 15]. For nylig har vi og andre opdagede, at tunesiske blad johannesbrød-ekstrakt præsenterer nogle forbedrende virkninger mod alkohol eller CCI 4-induceret oxidativ skade i rotter væv [16, 17]. Desuden carob fiber udviser høj antioxidant kapacitet bestemmes af DPPH radikaler test, dvs. højere end mange andre fødevarer rige på polyphenoler, såsom blåbær, druer eller rødvin [18, 19].
Den foreliggende undersøgelse designet til at evaluere den formodede gastrobeskyttende rolle af den vandige ekstrakt af bælge (CPAE) (15 dage) mod oxidativt stress fremkaldt af akut ethanol eksponering og er involveret i en sådan beskyttelse mekanisme.
Metoder
Etik erklæring
De nødvendige tilladelser til de feltstudier og samling af johannesbrød bælg prøver blev opnået ved landbrugsministeriet i Tunesien og identificeret af Mrs. Mouhiba Ben-Naceur, professor i taksonomi i det Højere Institut for Bioteknologi i Beja, Tunesien. Kuponen enhederne er deponeret hos herbarium af Højere Institut for Bioteknologi Beja og også i Biologisk Institut, Det Naturvidenskabelige Fakultet, Tunesien.
Udarbejdelse af johannesbrød-ekstrakt
De modne bælge blev indsamlet fra region Tabarka (nordvestlige Tunesien) i oktober 2013. Kort fortalt blev plantematerialet senere tørret i en inkubator ved 50 ° C i løbet af 72 timer og pulveriseret i en elektrisk blender (Moulinex OVATIO 2, FR). Pulverblanding indeholdende johannesbrødpulp (90%) og frø (10%) blev opløst i dobbeltdestilleret vand og filtreret gennem en si (0,5 mm maskestørrelse). Endelig blev bælge vandige ekstrakt straks anvendes til in vitro
og in vivo
eksperimenter.
Free Radical-fjernende aktiviteter på DPPH
antioxidant kapacitet af den vandige ekstrakt af bælge blev udført ved anvendelse 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radikal-fjernende aktivitet som beskrevet tidligere af Grzegorczyk et al. [20]. Kort fortalt blev forskellige koncentrationer af CPAE (20, 50, 100, 150, og 200 ug /ml) tilsat til 1 ml 0,1 mM methanolopløsning af DPPH og inkuberet ved 27 ° C i løbet af 30 minutter. Den optiske densitet af prøven blev kvantificeret ved 517 nm. DPPH radikal-fjernelsesaktivitet (RSA), udtrykt som en procentdel, blev anslået anvendelse af følgende formel: $$ \\mathrm{R}\\mathrm{S}\\mathrm{A}\\left(\\%\ ight)=\\frac{{{{}^A}_{\\mathrm{DPPH}}}^{-}\\left({{}^{A_{\\mathrm{sample}}}}^{-{A}_{\\mathrm{control}}}\ ight)}{{}^{A_{\\mathrm{DPPH}}}}\\times 100 $$ Ascorbinsyre blev anvendt som reference molekyle i samme koncentration som den testekstrakt.
Alle analyser blev udført tre gange. Koncentrationen effekt 50 (EF 50) værdi blev bestemt som den koncentration (i mg /ml) af forbindelsen nødvendig til at fjerne 50% af DPPH radikale.
Gratis radikal-fjernende aktiviteter på ABTS
antioxidant kapacitet i bælge vandige ekstrakt blev vurderet ved anvendelse af 2,2'-azino-bis [3-ethylbenzthiazolin-6-sulfonsyre] (ABTS) metode [21]. Kort beskrevet blev 1 ml fortyndet ekstrakt tilsat til 3 ml 7 mM ABTS radikal løsning (ABTS • +) og blev holdt i mørke ved stuetemperatur i 60 minutter. Absorbansen blev målt ved 734 nm. Den latrintømning kapacitet blev beregnet som ((1 - Ab /A0) × 100%) (Ab og A0 er absorbansen af ​​prøver samt ABTS • + løsning ved 734 nm
Dyr og behandling Sund voksne Wistar hanrotter (der vejer 220-250 g, husede fem pr bur) og voksne mandlige schweiziske Albino mus (der vejer ca. 25 g, husede ti per bur) blev købt fra Society of Pharmaceutical Industries i Tunesien (SIPHAT, Ben-Arours , TN). Eksperimentelle protokoller blev godkendt med retningslinjerne fra Etisk Udvalg for Videnskab Fakultet Tunis, Tunesien. testen blev udført i overensstemmelse med Kommissionens direktiv 2000/32 /EF og OECD Guideline 474 [22]. de blev leveret med standard fødevarer (standard pellet kost-Badr Utique-TN) og vand ad libitum
og opretholdt i stalden ved kontrolleret temperatur (22 ± 2 ° C) med en 12 timers lys-mørke cyklus. rotterne blev delt i halve et dusin grupper. Gruppe 1 og 2 blev fungerede som kontroller og havde bidestilleret vand (5 ml /kg, legemsvægt
, po
). Gruppe 3, 4 og 5, blev forbehandlet med forskellige doser af CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, bwpo
), mens gruppe 6 var forbehandlet med henholdsvis famotidin (10 mg /kg, bwpo
) i løbet af 15 dage. Rotter blev fastet i 24 timer, før den sidste indgift af CPAE eller reference- molekyler. Efter 60 min, hvert dyr, undtagen gruppe 1 modtog EtOH (4 g /kg, legemsvægt
) ved oral indgivelse. To timer senere blev rotterne aflivet.
Akut toksicitetsundersøgelse
bælge vandige ekstrakt i dosisområdet på 0,05, 0,1, 0,5, 1, 2, 5, 10 og 200 g /kg blev oralt administreret til forskellige grupper af mus (n
= 10). Dyrene blev undersøgt hver 30 min i 4 h og derefter, lejlighedsvis for yderligere periode på 8 timer. 24 timer efter blev dødeligheden registreret. Musene blev også observeret for andre tegn på toksicitet, såsom motorisk koordination, oprettende refleks og respiratoriske forandringer.
Evaluering af maveslimhinden skader
maven af ​​hvert dyr blev fjernet og åbnet langs dens større krumning. Vævet blev forsigtigt skyllet i NaCl 0,9%. De læsioner i maveslimhinden blev makroskopisk undersøgt, og fotografier af blødende erosioner blev erhvervet med en Photometrics Quantix digitalkamera. Ulcus indekser blev bestemt som summen af ​​længderne af hele gastriske læsioner (i mm 2) [23]. To uafhængige, blindede observatører udførte målingerne af læsion længder.
Gastrisk volumen juice bestemmelse
Gastrisk saft blev opsamlet og centrifugeret ved 3000 g i løbet af 5 min for at fjerne uopløselige materialer. Supernatanten blev efter målt ved hjælp graduate rør [24].
Histopatologisk analyse
Umiddelbart efter aflivningen små stykker af maven blev høstet og vasket med iskoldt saltvand. Vævsfragmenter blev derefter fikseret i en 10% neutral pufret formalinopløsning, indlejret i paraffin og anvendes til histopatologisk undersøgelse. 5 um tykke snit blev skåret, deparaffineret, hydreret og farvet med hematoxylin og eosin (HE). De gastriske sektioner blev undersøgt i blinde mode i alle behandlinger [25].
Lipidperoxidation måling
maveslimhinden lipidperoxidation blev bestemt ved MDA måling i henhold til den dobbelte opvarmning metoden [26]. Kort beskrevet blev portioner fra maveslimhinden homogenater blandet med BHT-trichloreddikesyre (TCA) indeholdende 1% BHT (vægt /volumen
) opløst i 20% TCA (w /v
) og centrifugeret ved 1000 x g
i 5 minutter ved 4 ° C. Supernatant blev blandet med en opløsning indeholdende (0,5 N HCI, 120 mM TBA pufret i 26 mM Tris) og derefter opvarmet ved 80 ° C i 10 min. Efter afkøling blev absorbansen af ​​den resulterende kromofor bestemt ved 532 nm. MDA-niveauer blev bestemt ved hjælp af en ekstinktionskoefficient for MDA-TBA kompleks af 1,56 × 10 5 M -1 · cm -1.
Thiol måling gruppe
samlede koncentration af thiol grupper (-SH) blev udført ifølge Ellman metode [27]. Kort beskrevet blev portioner fra maveslimhinden blandet med 100 pi 10% SDS og 800 pi 10 mM phosphatpuffer (pH 8), og den optiske densitet blev målt ved 412 nm (A 0). Efter tilsætning af 100 pi 5,5'-dithiobis (2-nitrobenzoesyre) (DTNB), blev reaktionsblandingen inkuberet ved 37 ° C i løbet af 60 minutter, og en ny værdi (A 1) blev bestemt. Koncentrationen thiolgrupper blev beregnet ud fra A 1 til A 0 subtraktion ved hjælp af en molær ekstinktionskoefficient på 13,6 x 10 3 M -1 · cm -1. Resultaterne blev udtrykt som nmol af thiolgrupper pr
mg protein.
H2O2 bestemmelse
maveslimhinden H 2O 2-niveau blev udført ifølge Dingeon et al. [28]. Kort beskrevet hydrogenperoxidet reagerer med p-hydroxybenzoesyre og 4-aminoantipyrin i nærvær af peroxidase, der fører til dannelsen af ​​quinoneimine der har en lyserød farve detekteret ved 505 nm.
Antioxidant enzymaktivitetsassays
Aktiviteten af ​​SOD blev bestemt ved anvendelse af modificerede epinephrin assays [29]. Ved alkalisk pH, superoxid anion O 2 - forårsager autoxidation af adrenalin til adenochrome; samtidig konkurrerer med denne reaktion, SOD nedsatte adenochrome formation. En enhed af SOD er ​​defineret som mængden af ​​ekstraktet, som inhiberer hastigheden af ​​adenochrome dannelse med 50%. Enzym ekstrakt blev tilsat i 2 ml reaktionsblanding indeholdende 10 pi bovin katalase (0,4 U /pl), 20 pi epinephrin (5 mg /ml) og 62,5 mM natriumcarbonat /bicarbonat, pH 10,2. Ændringer i absorbans blev registreret ved 480 nm.
Aktiviteten af ​​CAT blev vurderet ved at måle den initiale hastighed af H 2O 2 forsvinden ved 240 nm [30]. Reaktionsblandingen indeholdt 33 mM H 2O 2 i 50 mM fosfatbuffer pH 7,0 og aktiviteten af ​​CAT blev beregnet ved hjælp af ekstinktionskoefficienten for 40 mM -1 cm -1 for H 2O 2.
aktivitet GPX blev kvantificeret ved proceduren i Flohe og Günzler [31]. Kort fortalt blev 1 ml reaktionsblanding indeholdende 0,2 ml maveslimhinden supernatant, 0,2 ml phosphatbuffer 0,1 M, pH 7,4, 0,2 ml GSH (4 mM) og 0,4 ml H 2O 2 (5 mM) blev inkuberet ved 37 ° C i 1 min, og reaktionen blev standset ved tilsætning af 0,5 ml TCA (5%, vægt /volumen). Efter centrifugering ved 1500 g
i 5 minutter, blev alikvot (0,2 ml) fra supernatant kombineret med 0,5 ml phosphatbuffer 0,1 M, pH 7,4, og 0,5 ml DTNB (10 mM), og absorbans blev aflæst ved 412 nm. Aktiviteten af ​​GPX blev udtrykt som nmol GSH forbrugt /min /mg protein.
Statistisk analyse
Data blev analyseret ved envejs variansanalyse (ANOVA) og blev udtrykt som middelværdi ± standardfejl på middelværdien (SEM). Dataene er repræsentative for 10 uafhængige forsøg. Alle statistiske tests blev to-tailed, og ap
værdi på 0,05 eller mindre blev betragtet som signifikant.
Resultater
Akut oral toksicitet CPAE
I den akutte orale toksicitet, hverken unormal adfærd eller dødelighed var registreres i observationsperioden. Således LD50-værdien var større end 20 g /kg legemsvægt for det vandige ekstrakt af bælge. Salg In vitro DPPH og ABTS radikal indfangende
i flere koncentrationer i området fra 0-200 ug /ml af CPAE blev testet for deres antioxidante aktiviteter i forskellige in vitro
modeller. Vi har fundet, at den radikale-fjernende aktivitet af CPAE mod DPPH og ABTS radikaler steg betydeligt på en dosis-afhængig måde. EF 50 værdier beregnet ud fra grafen viste, at RSA af CPAE (EF 50 = 228,22 ± 5,27 mikrogram /ml og 184,41 ± 3,95 mg /ml henholdsvis DPPH og ABTS radikal-fjernelsesaktivitet) syntes ligner at af ascorbinsyre (EF 50 = 190,47 ± 1,2 og 174,13 ± 0,9 ug /ml) som velkendt henvisning molekyle (tabel 1) .table 1 EC50 værdier af DPPH og ABTS radikal-fjernende aktivitet bælge vandigt ekstrakt (CPAE ). EC50: den effektive koncentration af prøve, der kan nedsætte DPPH eller ABTS koncentration med 50%
EC50 af DPPH radikal-fjernelsesaktivitet (ug /m)
EC50 ABTS radikal-fjernelsesaktivitet (pg /ml)
CPAE
228,22 ± 5,27
184,41 ± 3,95
Ascorbinsyre
190,47 ± 1,2
174,13 ± 0,9
Effekt af CPAE på EtOH-induceret akut makroskopisk gastrisk skade og volumenændring
makroskopisk undersøgelse af maveslimhinden er vist i fig. 1. Som forventet, EtOH administration udstillet skader, herunder blødning og hyperæmi. CPAE og famotidin behandling viste en dosis-afhængigt fald i alle makroskopiske toksiske tegn sammenlignet med EtOH behandlede gruppe. Desuden viste kvantitativ analyse, carob ekstrakt eller referencemolekylet forbehandling signifikant og dosisafhængigt reduceret ulcus-indeks, beskyttet mod mavens volumen juice falde, og lindres beskyttelse procentdel af skade induceret af EtOH administration (tabel 2). Fig. 1 Subakut virkning caob bælg vandige ekstrakt (CPAE) og famotidin (FAM) på makroskopiske ændringer induceret af ethanol (EtOH) hos rotter. Dyr blev forbehandlet med forskellige doser af CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, legemsvægt, po
), FAM (10 mg /kg, legemsvægt, po
) eller bi-destilleret vand, udfordret med en enkelt oral administration af EtOH (4 g /kg, legemsvægt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer. a: kontrol; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 og f: EtOH + FAM)
Tabel 2 Subakut effekt af bælge vandigt ekstrakt (CPAE), famotidin (FAM) og ascorbinsyre (AA) på makroskopiske kvantitative forandringer som følge af EtOH i rotter: mavesår slim volumen, mavesår område og procent beskyttelse. Dyr blev forbehandlet med forskellige doser af CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, legemsvægt, po
), FAM (10 mg /kg, legemsvægt, po
) eller bi-destilleret vand, udfordret med en enkelt oral administration af EtOH (4 g /kg, legemsvægt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer
Group
slim volumen (ml)
mavesår indeks ( mm2)
Beskyttelse procent (%)
Kontrol
4,3 ± 0,20
----
----
EtOH
1,9 ± 0,3 *
86,2 ± 2,6 *
00
EtOH + CPAE-500
2,9 ± 0
67,0 ± 3,6 #
23,4
EtOH + CPAE-1000
3,4 ± 0,2 #
16,6 ± 1,4 #
79,8
EtOH + CPAE-2000
3,9 ± 0,3 #
06,4 ± 0,9 #
92,2
EtOH + FAM
3,8 ± 0,2 #
26,2 ± 3,3 #
68,1
*: p
< 0,05 sammenlignet med kontrolgruppen og #: p
< 0,05 sammenlignet med EtOH gruppe
Virkning af CPAE på EtOH-induceret gastrisk mikroskopisk skade
Vi også undersøgt virkningen af ​​EtOH og CPAE på maveslimhinden histologi og resultaterne er vist i fig. 2. EtOH 80% inducerede en markant erosive læsion i den gastriske væv. CPAE eller famotidin forbehandling stærkt reduceret de histopatologiske forandringer som følge af akut alkoholforgiftning. Fig. 2 Subakut virkning caob bælg vandige ekstrakt (CPAE) og famotidin (FAM) på histologiske forandringer som følge af ethanol (EtOH) hos rotter. Dyr blev forbehandlet med forskellige doser af CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, legemsvægt, po
), FAM (10 mg /kg, legemsvægt, po
) eller bi-destilleret vand, udfordret med en enkelt oral administration af EtOH (4 g /kg, legemsvægt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer. a: kontrol; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 og f: EtOH + FAM)
Virkning af CPAE på EtOH-induceret gastrisk lipoperoxidation og hydrogenperoxid stigning
indflydelse på virkningen af ​​EtOH og CPAE på oxidativt stress tilstand, vi først undersøgt gastrisk lipoperoxidation og hydrogenperoxid indhold (fig. 3a). EtOH forgiftning drastisk øget gastrisk MDA og H 2O 2 niveauer (fig. 3b). CPAE forbehandling signifikant og dosisafhængigt omvendt lipoperoxidation og hydrogenperoxid stigning induceret af EtOH forgiftning. Fig. 3 Subakut virkning caob bælg vandige ekstrakt (CPAE) og famotidin (FAM) ethanol (EtOH) -inducerede ændringer i maveslimhinden MDA a og H2O2 B-niveauer i rotter. hos rotter. Dyr blev forbehandlet med forskellige doser af CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, legemsvægt, po
), FAM (10 mg /kg, legemsvægt, po
) eller bi-destilleret vand, udfordret med en enkelt oral administration af EtOH (4 g /kg, legemsvægt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer. *: P
< 0,05 sammenlignet med kontrolgruppen og #: p
< 0,05 sammenlignet med EtOH gruppe
Effekt af af CPAE på EtOH-induceret gastrisk -SH-grupper falde
Vi har også vist, at thiolgrupper niveau blev reduceret betydeligt i maveslimhinden af ​​alkohol-behandlede rotter. Men CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, legemsvægt peroralt
) eller famotidin (10 mg /kg, legemsvægt peroralt
) forbehandling signifikant beskyttet mod dette fald sammenlignet med EtOH gruppe (fig. 4). Fig. 4 Subakut effekt af caob bælg vandigt ekstrakt (CPAE) og famotidin (FAM) ethanol (EtOH) -induceret ændringer i maveslimhinden SH- grupper niveau i rotter. hos rotter. Dyr blev forbehandlet med forskellige doser af CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, legemsvægt, po
), FAM (10 mg /kg, legemsvægt, po
) eller bi-destilleret vand, udfordret med en enkelt oral administration af EtOH (4 g /kg, legemsvægt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer. *: P
< 0,05 sammenlignet med kontrolgruppen og #: p
< 0,05 sammenlignet med EtOH gruppe
Effekt af CPAE på EtOH-induceret antioxidant enzymaktiviteter udtømning
Vi yderligere set på effekten af ​​EtOH og CPAE på antioxidant enzymer aktiviteter i maveslimhinden (fig. 5). EtOH 80% signifikant øget maveslimhinden antioxidant enzymaktiviteter som SOD (A) og CAT (B), men det faldt betydeligt GPX-aktivitet (C). Imidlertid sub-akut forbehandling med carob ekstrakt eller famotidin reducerede signifikant EtOH-inducerede stigning og et fald i antioxidant enzymaktiviteter til nær kontrolniveauer med den højeste dosis. Fig. 5 Subakut virkning caob bælg vandige ekstrakt (CPAE) og famotidin (FAM) ethanol (EtOH) -inducerede ændringer i maveslimhinden antioxidant enzymaktiviteter: SOD a, CAT b og GPX c i rotter .. I rotter. Dyr blev forbehandlet med forskellige doser af CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, legemsvægt, po), FAM (10 mg /kg, legemsvægt, po) eller bi-destilleret vand, udfordret med en enkelt oral administration af EtOH (4 g /kg, legemsvægt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer. *: P
< 0,05 sammenlignet med kontrolgruppen og #: p
< 0,05 sammenlignet med EtOH gruppe
Diskussion
Maven er et følsomt fordøjelsessystem orgel hovedsageligt udsat for eksogene patogener fra kosten. Som reaktion på disse patogener, maven væv producerer ROS såsom hydroxylradikal en superoxid anion, som kan være relateret til udviklingen af ​​gastriske organiske lidelser som gastritis, mavesår og gastrisk cancer, såvel som funktionelle lidelser, såsom funktionel dyspepsi [ ,,,0],32]. Ethanol betragtes som en af ​​de midler, der inducerer gastriske ulcera. Virkningerne af ethanol på maveslimhinden er komplicerede og mangesidede der kan være forbundet med en forstyrrelse i balancen mellem gastriske mucosale beskyttende og aggressive faktorer [33]. Ethanol forårsager skader i de vaskulære endotelceller af maveslimhinden og inducerer mikrocirkulatorisk forstyrrelse og hypoxi, linker til overproduktion af oxygenradikaler [34]. ROS produceres i mave-tarmkanalen, men deres roller i patofysiologi og sygdom patogenese er ikke blevet godt undersøgt.
Mange lægeplanter viser i deres kemiske forfatning, flavonoider, triterpenoids og tanniner, der beskytter maveslimhinden gennem induktion af gastrobeskyttende mekanismer eller fungerer som naturlige antioxidanter [35-37]. Flavonoider og tanniner er den største gruppe af phenoliske forbindelser, der virker som primære antioxidanter eller fri radikal-scavengers [38].
Vores fytokemiske undersøgelse, for det første, viste, at dets rigdom samlede polyphenoler, totale flavonoider, og kondenseret tanniner [14]. På den anden side, ved hjælp af DPPH og ABTS radikal-fjernende assay fandt vi, at CPAE præsenterer en høj fjernende kapacitet, om end mindre end ascorbinsyre, som blev anvendt som reference molekyle. Den antioxidant kapacitet af johannesbrød er hovedsageligt relateret til det højere niveau af phenol compouds i denne fraktion [14]. Men disse molekyler er, den største kilde til deres kapacitet af skylleluften frie radikaler, såsom superoxid anion (O 2 .) Og hydroxylradikal (OH .) [39]. Salg In vivo,
vi det første viste, at alkohol administration provokeret en klar makroskopiske skader, herunder blødning og hyperæmi samt histopatologiske forandringer såsom erosive læsioner. CPAE forbehandling vendte markant EtOH-induceret gastrisk mucosa makro- og mikroskopiske læsioner på en dosis-afhængig måde. Imidlertid blev gastrisk mucosa tidligere vist at spille en kritisk rolle i beskyttelsen af ​​gastriske barrierer [40]. Det er den første linje i forsvaret mod syre og klæber sammen med bikarbonat udskilles af epitelet til at fungere som en barriere mod selv-fordøjelse [41]. Desuden maveslimhinden er en vigtig beskyttende faktor for maveslimhinden og er i stand til at virke som en antioxidant middel og reducerende mucosal skade medieret af ROS [42]. Tanniner kunne forhindre ulcus udvikling enten via karsammentrækkende virkning, eller på grund af deres proteiner udfældes hvor det fremmer udfældning af microproteins i ulceration site, der danner et uigennemtrængeligt lag over foringen, som hindrer gut sekreter og beskytter det underliggende slimhinde fra irritanter [43]. Desuden flavonoider har anti-ulcus og gastrobeskyttende egenskaber [44]. Imidlertid har EtOH-induceret gastrisk sårdannelse tidligere vist sig at være svækket af mange planter ekstrakter Aqeratum conyzoides
[45], Bacopa monniera og Azadirachta indica
[46], Hippocratea excellerer
[47] og Azadirachta indica
[48]. Men så vidt vi ved, vores rapport er den første til at beskæftige sig med frugt ekstrakt af johannesbrød
(carob) beskyttende virkning på akut EtOH-induceret sårdannelse i rotte maveslimhinden.
Vi viste også i den nuværende studere, at EtOH forgiftning fremkaldt lipidperoxidation, fald i thiolgrupper niveau, forøgelse af hydrogenperoxid indhold samt udtynding antioxidant enzym aktiviteter såsom SOD, CAT, ruter og. Akut alkohol-induceret oxidativt stress blev grundigt dokumenteret i maveslimhinden [49], lever [50], nyre [51], hjerte [52] og hjerne [53]. Ethanol administration provokeret oxidativ ubalance gennem en række veje, herunder generering af reaktive oxygenarter [54]. Lipidperoxidation niveau er en indikator for generering af ROS i vævet. Imidlertid SOD konverterer den reaktive superoxidradikal til H 2O 2, som blev forøget i maveslimhinden og hvis ikke scavenged af CAT, det kan i sig selv forårsage lipidperoxidation ved generering af hydroxyl radikal [55].
Mere vigtigt viste vi, at carob ekstrakt forbehandling ophævede akut EtOH-induceret oxidativt stress i maveslimhinden. Disse data fuldt bekræftet alle tidligere rapporterede in vivo
[17] og in vitro
[15] antioxidant og anti-inflammatoriske egenskaber af johannesbrødtræet. Vi har også påvist i vores tidligere rapport fra Sebai et al. [14] at den vandige ekstrakt af bælge indeholder en god mængde af totale polyphenoler, totale flavonoider og kondenserede tanniner. Disse molekyler er primal kilde af antioxidanten evne af denne plante, ved scavenging frie radikaler som hydroxyl radikal (OH •), som er den vigtigste årsag til lipidperoxidation [56]. Desuden er det velkendt, at sulfhydryler er delvist involveret i gastrisk cytobeskyttelse [57] og også i opretholde af mucosale barriere integritet og bekæmpe frie radikaler dannet som følge af virkningen af ​​skadelige agenser [58].
Konklusion
Afslutningsvis vores data viser tydeligt, at CPAE udøver beskyttende virkninger over for akut ethanol-induceret sårdannelse i rotter maveslimhinden, delvis takket være sin antioxidant egenskaber
Forkortelser
CPAE:.
Johannesbrødbælge vandige ekstrakt
Carob500:
Carob 500 mg /kg
Carob1000:
Carob 1000 mg /kg


Carob2000:
Carob 2000 mg /kg
CAT:
Katalase
GPX:
Glutathion peroxidase
H2O2:
hydrogenperoxid
MDA:
malondialdehyd
Prot:
Proeins
SHS:
Sulfhydrylgrupper
SOD:
Superoxiddismutase

erklæringer
Tak
Økonomisk støtte den tunesiske ministerium for "Enseignement Supérieur et Recherche Scientifique" er anerkendende anerkendt.
Open Access Denne artikel er distribueret under betingelserne i Creative Commons Attribution 4.0 International License (http: //creativecommons org /licenser /ved /4. 0 /.), som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat du give passende kredit til den oprindelige forfatter (e) og kilden, give et link til Creative Commons-licensen, og angive, om der er sket ændringer. Creative Commons Public Domain Dedication frafald (http:. //Creativecommons org /public domain /nul /1. 0 /) gælder for de data, der stilles til rådighed i denne artikel, medmindre andet er angivet
Konkurrerende. Alle forfattere læst og godkendt den endelige manuskript.

• Korrelation af HK6 udtryk med tumor tilbagefald og prognose i fremskreden ventrikelkræft
• Livskvalitet, immunmodulation og sikkerhed adjuverende mistelten behandling af patienter med gastrisk karcinom - et randomiseret, kontrolleret pilotstudie