Gastrobeschermende effect van carob (johannesbroodboom L.) tegen-ethanol oxidatieve stress in rat

gastrobeschermende effect van carob (johannesbroodboom
L.) tegen-ethanol oxidatieve stress in rat
Abstracte achtergrond
Ons doel in deze studie nagaan gastrobeschermende het effect van johannesbroodpeulen waterig extract (CPAE) tegen door ethanol geïnduceerde oxidatieve stress in ratten en de mechanismen betrokken.

Werkwijzen Volwassen mannelijke wistar-ratten werden gebruikt en verdeeld in zes groepen van tien st: controle, EtOH (80% v /v, 4 g /kg lichaamsgewicht
), EtOH 80% + verscheidene doses CPAE (500, 1000 en 2000 mg /kg, lichaamsgewicht
) en EtOH + Famotidine (10 mg /kg, po) Dieren werden peroraal (po
) voorbehandeld met CPAE gedurende 15 dagen en dronken met een enkele orale toediening van EtOH (4 g /kg lichaamsgewicht
) twee uur.
Resultaten
de colorimetrische analyse toonde aan dat de CPAE vertoonde een belang in vitro
antioxidant activiteit tegen ABTS en DPPH radicalen. We vonden dat CPAE voorbehandeling in vivo
, beschermd tegen-EtOH veroorzaakte macroscopische en histologische veranderingen geïnduceerd in maagslijmvlies. Carob extract toediening ook beschermd tegen alcohol-geïnduceerde volume maagsap verlagen. Belangrijker We toonden aan dat CPAE tegengegaan EtOH-geïnduceerde gastrische lipoperoxidatie, keerde de daling van sulfhydrylgroepen (-SH) een waterstofperoxide (H 2O 2) niveaus, zodat de uitputting van antioxiderende enzymactiviteit van superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) en glutathion peroxidase (GPx).
Conclusies
Deze bevindingen suggereren dat CPAE oefende een potentiële gastro-beschermend effect tegen-EtOH oxidatieve stress bij ratten, deels aan haar antioxidanten eigenschappen.
Sleutelwoorden
Maagulcus peulen van oxidatieve stress Antioxidant capaciteit Rat Achtergrond
In gastro-intestinale stoornissen, ulcus is een veel voorkomende ziekte met meerdere etiologieën. Deze ziekte wordt gekenmerkt door mucosale schade, wordt voornamelijk veroorzaakt door Helicobacter pylori
, trombocytenaggregatieremmers zoals acetylsalicylzuur [1], niet-steroïde anti-inflammatoire geneesmiddelen (NSAIDs) zoals orale bisfosfonaten, kaliumchloride, immunosuppressiva [2, 3 ], serotonine heropname remmers [4], het roken van sigaretten en alcohol consumptie [5]. De pathofysiologie van maagzweren is algemeen beperkt onbalans tussen agressieve factoren en beschermende in de maag, zoals zure-pepsine secretie, mucosale barrière, slijmafscheiding, de bloedstroom, cellulaire regeneratie, prostaglandinen en epidermale groeifactoren [6]. -Ethanol geïnduceerde maag-laesies is vooral te maken met intense infiltratie in de sub-slijmvlies dat de vorming van reactieve zuurstofverbindingen (ROS) bevordert, verminderde slijm, uitputting van sulfhydrylgroepen en een verminderde doorbloeding, wat resulteert in schade aan het maagslijmvlies [7]. ROS vooral hydroxylgroep spelen belangrijke rol bij het ontstaan ​​van oxidatieve schade mucosa in alle soorten ulcera [8]. Om het mogelijk mechanisme waarmee stoffen kan handelen om gastroprotection verschillende antioxidantia moleculen zoals quercetine [9] en curcumine [10] bevorderen werden eerder onderzochte bepalen.
Carob (Ceratonia siliqua L.
) is een langzaam groeiende altijd groene boom gekweekt voor jaren in de mediterrane landen. De Johannesbroodvrucht, bruin pod 10-25 cm lang, bevatten veel bioactieve stoffen zoals zoete koolhydraten, voedingsvezels, tanninen en polyfenolen [11]. Veel van de gunstige gezondheidseffecten consumptie fenolische-rijke voedingsmiddelen hoofdzakelijk vanwege hun antioxidante activiteiten [12, 13]. Voor sint-extract, heeft deze eigenschap eerder gemeld in in vivo Kopen en in vitro
studies [14, 15]. Onlangs hebben wij en andere ontdekten dat Tunesische blad sint extract presenteert een aantal verbeterende effecten tegen alcohol of CCI 4-geïnduceerde oxidatieve schade bij ratten weefsels [16, 17]. Bovendien, carob vezels vertonen krachtige antioxiderende werking bepaald door DPPH radicalen test, dat wil zeggen, hoger dan veel andere voedingsmiddelen die rijk zijn aan polyfenolen, zoals bosbessen, druiven of rode wijn [18, 19].
Dienovereenkomstig verschaft de onderhavige studie is ontworpen om de vermeende gastrobeschermende rol van het waterige extract van johannesbroodpeulen (CPAE) (15 dagen) tegen oxidatieve stress veroorzaakt door acute blootstelling ethanol en het mechanisme betrokken bij de bescherming te evalueren.
Methoden
Ethiek statement
De benodigde vergunningen voor het veld studies en het verzamelen van johannesbroodpeulen monsters werden verkregen door het ministerie van Landbouw in Tunesië en geïdentificeerd door Mevr Mouhiba Ben-Naceur, professor in de taxonomie in de Hogere Instituut voor Biotechnologie Beja, Tunesië. De Voucher exemplaren zijn gedeponeerd bij het herbarium van het Hoger Instituut voor Biotechnologie Beja en ook in het Department of Biological Sciences, Faculteit der Natuurwetenschappen, Tunesië.
Voorbereiding van de sint extract
De volwassen johannesbroodpeulen werden verzameld uit de regio Tabarka (Noord-Westen van Tunesië) in oktober 2013. in het kort werd het plantmateriaal later gedroogd in een incubator bij 50 ° C gedurende 72 uur en in poedervorm in een elektrische mixer (Moulinex Ovatio 2, FR). Poedermengsel met johannesbrood pulp (90%) en zaden (10%) werd opgelost in dubbel gedestilleerd water en gefiltreerd door een zeef (0,5 mm maaswijdte). Tenslotte werd de peulen waterige extract direct gebruikt voor in vitro Kopen en in vivo experimenten
. Free radicaal vangende activiteiten DPPH
antioxidant capaciteit van het waterige extract van johannesbroodpeulen werd uitgevoerd met behulp 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radicaal-wegvangende activiteit zoals eerder beschreven door Grzegorczyk et al. [20]. Kort samengevat, werden verschillende concentraties CPAE (20, 50, 100, 150 en 200 ug /ml) met 1 ml 0,1 mM DPPH methanoloplossing toegevoegd en geïncubeerd bij 27 ° C gedurende 30 min. De optische dichtheid van het monster werd gekwantificeerd bij 517 nm. DPPH radicalen wegvangende activiteit (RSA), uitgedrukt in procenten, werd geschat met gebruikmaking van de volgende formule: $$ \\mathrm{R}\\mathrm{S}\\mathrm{A}\\left(\\%\ ight)=\\frac{{{{}^A}_{\\mathrm{DPPH}}}^{-}\\left({{}^{A_{\\mathrm{sample}}}}^{-{A}_{\\mathrm{control}}}\ ight)}{{}^{A_{\\mathrm{DPPH}}}}\\times 100 $$ Ascorbinezuur werd gebruikt als referentie molecuul in dezelfde concentratie als de test extract.
Al de analyses werden uitgevoerd in drievoud. De werkzaamheid concentratie 50 (EC 50) waarde werd bepaald als de concentratie (in mg /ml) van de verbinding vereist om 50% vangen van de DPPH radicalen. Free radicaal vangende activiteiten ABTS Ondernemingen De antioxidant capaciteiten van de peulen waterige extract werden geëvalueerd met het 2,2'-azino-bis [3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonzuur] (ABTS) methode [21]. In het kort werd 1 ml verdund extract 3 ml 7 mM ABTS radicale oplossing (ABTS • +) toegevoegd en werd in het donker gehouden bij kamertemperatuur gedurende 60 min. De absorptie werd gemeten bij 734 nm. Het wegvangen capaciteit werd berekend als ((1 - Ab /A0) x 100%) (Ab en A0 is de absorptie van de monsters en de ABTS • + oplossing bij 734 nm
Dieren en behandeling Gezonde volwassen mannelijke Wistar ratten (met een gewicht van 220-250 g; gehuisvest vijf per kooi) en volwassen mannelijke Zwitserse albino muizen (met een gewicht van ongeveer 25 g; gehuisvest tien per kooi) werden gekocht bij Society of Pharmaceutical Industries Tunesië (SIPHAT, Ben-Arours , TN). Experimentele protocollen werden goedgekeurd met de richtlijnen van de Ethische Commissie van de Faculteit van Tunis, Tunesië. de test werd uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijn 2000/32 /EG en de OESO-richtlijn 474 [22]. Ze waren voorzien met standaard eten (standaard pellet dieet- Badr Utique-TN) en water ad libitum Kopen en onderhouden in stal bij een gecontroleerde temperatuur (22 ± 2 ° C) met een 12 uur licht-donker cyclus. De ratten werden verdeeld in de helft een tiental groepen. Groep 1 en 2 werden dienden als controles en had water (5 ml /kg, bw
, po
) tweevoudig gedestilleerd. Groepen 3, 4 en 5 werden voorbehandeld met verschillende doses van CPAE (500, 1000 en 2000 mg /kg, bwpo
), terwijl groep 6 was voorbehandeld respectievelijk famotidine (10 mg /kg, bwpo
) gedurende 15 dagen. Ratten werden gevast gedurende 24 uur vóór de laatste toediening van CPAE of verwijzing moleculen. Na 60 min, elk dier, met uitzondering van groep 1 ontvingen EtOH (4 g /kg, lichaamsgewicht
) oraal toegediend. Twee uur later werden de ratten gedood.
Acute toxiciteit
johannesbroodpeulen waterige extract in het dosisbereik van 0,05, 0,1, 0,5, 1, 2, 5, 10 en 200 g /kg oraal toegediend aan verschillende groepen muizen (n = 10
). De dieren werden onderzocht om de 30 minuten gedurende 4 uur geroerd en vervolgens af bijkomende periode van 8 uur. 24 uur daarna werd de mortaliteit opgenomen. De muizen werden ook waargenomen voor andere tekenen van toxiciteit, zoals motorische coördinatie, opricht reflex en respiratoire veranderingen.
Evaluatie van maagschade mucosale
De maag van elk dier werd verwijderd en geopend langs de grotere kromming. Het weefsel werd voorzichtig gespoeld in 0,9% NaCl. De laesies in het maagslijmvlies werden macroscopisch onderzocht en de foto's van hemorragische erosies werden verworven met een Photometrics Quantix digitale camera. Ulcus indexen werden bepaald als de som van de lengtes van de gehele gastrische lesies (in mm 2) [23]. Twee onafhankelijke, geblindeerde waarnemers voerde de metingen van de laesie lengtes.
Gastric volume sap bepalen
maagsap werd verzameld en gecentrifugeerd bij 3000 g gedurende 5 minuten om onoplosbare materialen te verwijderen. De bovenstaande vloeistof werd daarna gemeten met behulp van gediplomeerde buizen [24].
Histopathologisch analyse
Onmiddellijk na het offer, kleine stukjes van de maag werden geoogst en gewassen met ijskoude zoutoplossing. Weefsel fragmenten werden vervolgens gefixeerd in 10% neutraal gebufferde formaline oplossing en ingebed in paraffine voor histopathologisch onderzoek. 5 pm dikke secties werden gesneden, ontdaan van paraffine, gehydrateerd en gekleurd met hematoxyline en eosine (HE). De maag secties werden blinde wijze onderzocht alle behandelingen [25].
Lipideperoxidatie meting
maagslijmvlies lipideperoxidatie werd bepaald door MDA meting overeenkomstig een dubbele verwarmingsmethode [26]. In het kort aliquots van maagslijmvlies homogenaten werden gemengd met BHT-trichloorazijnzuur (TCA) oplossing met 1% BHT (w /v
) opgelost in 20% TCA (w /v
) en gecentrifugeerd bij 1000 xg
gedurende 5 min bij 4 ° C. Supernatant werd gemengd met een oplossing van (0,5 N HCl, 120 mM TBA gebufferd in 26 mM Tris) en vervolgens gedurende 10 minuten verwarmd bij 80 ° C. Na afkoelen werd de absorptie van het verkregen chromofoor werd bepaald bij 532 nm. MDA-niveaus werden bepaald met gebruikmaking van een extinctiecoëfficiënt voor MDA-TBA complex van 1,56 x 10 5 M -1-cm -1.
Thiolgroep meting
De totale concentratie van thiol groepen (-SH) werd uitgevoerd volgens de werkwijze van Ellman [27]. In het kort aliquots van maagslijmvlies werden gemengd met 100 ul 10% SDS en 800 gl 10 mM fosfaatbuffer (pH 8) en de optische dichtheid werd gemeten bij 412 nm (A 0). Na toevoeging van 100 ul van 5,5'-dithiobis- (2-nitrobenzoëzuur) (DTNB), werd het reactiemengsel geïncubeerd bij 37 ° C gedurende 60 min en een nieuwe waarde (A 1) werd bepaald. De thiol groepen concentratie werd berekend uit A 1 tot en met A 0 aftrekken met behulp van een molaire extinctiecoëfficiënt van 13,6 x 10 3 M -1 · cm -1. De resultaten werden uitgedrukt als nmol thiolgroepen per
mg eiwit.
H2O2 bepaling
het maagslijmvlies H 2O 2 niveau werd volgens Dingeon et al. [28]. Kort samengevat, het waterstofperoxide reageert met p-hydroxybenzoëzuur en 4-aminoantipyrine in aanwezigheid van peroxidase leidt tot de vorming van quinoneimine dat een roze kleur gedetecteerd bij 505 nm.
Antioxidant enzymactiviteit assays
De activiteit van SOD werd bepaald met behulp van gemodificeerde epinefrine assays [29]. Bij alkalische pH, superoxide anion O 2 - zorgt ervoor dat de auto-oxidatie van epinefrine te adenochrome; terwijl concurreren met deze reactie, SOD verminderde de adenochrome formatie. Eén eenheid SOD wordt gedefinieerd als de hoeveelheid van het extract dat de snelheid van adenochrome vorming remt met 50%. Enzymextract werd in 2 ml reactiemengsel dat 10 pl runder katalase (0,4 U /pl), 20 pi epinefrine (5 mg /ml) en 62,5 mM natriumcarbonaat /bicarbonaatbuffer pH 10,2 toegevoegd. Veranderingen in absorptie werden opgenomen bij 480 nm. Ondernemingen De activiteit van CAT werd bepaald door het meten van de initiële snelheid van H 2O 2 verdwijnen bij 240 nm [30]. Het reactiemengsel bevatte 33 mM H 2O 2 in 50 mM fosfaatbuffer pH 7,0 en de activiteit van CAT werd berekend met behulp van de extinctiecoëfficiënt van 40 mM -1 cm -1 H 2O 2. Ondernemingen de activiteit van GPx werd gekwantificeerd door de procedure van Flohe en Günzler [31]. Kort samengevat, 1 ml reactiemengsel dat 0,2 ml maagslijmvlies supernatant, 0,2 ml fosfaatbuffer 0,1 M pH 7,4, 0,2 ml GSH (4 mM) en 0,4 ml H 2O 2 (5 mM) werd gedurende 1 min geïncubeerd bij 37 ° C en de reactie werd gestopt door toevoegen van 0,5 ml TCA (5%, w /v). Na centrifugering bij 1500 g gedurende 5 min
werd aliquot (0,2 ml) van supernatans gecombineerd met 0,5 ml 0,1 M fosfaatbuffer pH 7,4 en 0,5 ml DTNB (10 mM) en de absorptie werd afgelezen bij 412 nm. De activiteit van GPx werd uitgedrukt als nmol GSH verbruikte /min /mg eiwit.

Statistische analyse De gegevens werden geanalyseerd door eenrichtingsanalyse van variantie (ANOVA) en werden uitgedrukt als gemiddelden ± standaardfout van het gemiddelde (SEM). De gegevens zijn representatief voor 10 onafhankelijke experimenten. Alle statistische toetsen waren tweezijdig en ap
waarde van 0,05 of minder werd als significant beschouwd.
Resultaten
Acute orale toxiciteit van CPAE
In de acute orale toxiciteit, noch afwijkend gedrag, noch mortaliteit gedetecteerd tijdens de observatieperiode. Zo is de LD50-waarde groter dan 20 g /kg lichaamsgewicht het waterige extract van peulen.
in vitro DPPH en ABTS wegvangend activiteiten
Verschillende concentraties variërend 0-200 ug /ml van de CPAE werden getest op hun antioxiderende werkzaamheid in verschillende in vitro modellen
. Wij hebben gevonden dat het radicaal-wegvangende werking van CPAE tegen DPPH en ABTS groepen significant op een dosis-afhankelijke wijze toe. De EC 50-waarden berekend uit de grafiek blijkt dat de RSA van CPAE (EG 50 = 228,22 ± 5,27 ug /ml en 184,41 ± 3,95 ug /ml voor respectievelijk DPPH en ABTS radicaal-wegvangende activiteit), vergelijkbaar met dat dat ascorbinezuur (EC 50 = 190,47 ± 1,2 en 174,13 ± 0,9 ug /ml) en bekende referentiemolecuul (tabel 1) .table 1 EC50 waarden van DPPH en ABTS radicalen wegvangende activiteit johannesbroodpeulen waterig extract (CPAE ). EC50: de effectieve concentratie van het monster dat DPPH of ABTS concentratie kan afnemen met 50%
EC50 van DPPH radicaal-wegvangende activiteit (ug /ml)
EC50 van ABTS radicaal-wegvangende activiteit (ug /ml)
CPAE
228,22 ± 5,27
184,41 ± 3.95
ascorbinezuur
190,47 ± 1.2
174,13 ± 0,9
Effect van CPAE op EtOH-geïnduceerde acute macroscopische gastrische schade en volumeverandering
macroscopisch onderzoek van maagslijmvlies wordt getoond in Fig. 1. Zoals verwacht, EtOH administratie vertoonde verwondingen, waaronder bloedingen en hyperemie. CPAE en famotidine behandeling vertoonde een dosisafhankelijke verlaging van alle macroscopische vergiftigingsverschijnselen vergeleken met EtOH behandelde groep. Bovendien kwantitatieve analyse toonde dat johannesbrood extract of referentiemolecuul voorbehandeling significant en dosisafhankelijk verminderde de ulcus index, beschermd tegen maagvolume sap verlagen en verbeterd bescherming percentage schade geïnduceerd door toediening EtOH (tabel 2). Fig. 1 Subacute gevolg caob peulen waterig extract (CPAE) en famotidine (FAM) op macroscopische veranderingen bij ethanol (EtOH) bij ratten. De dieren werden voorbehandeld met verschillende doses van CPAE (500, 1000 en 2000 mg /kg, lichaamsgewicht, po
), FAM (10 mg /kg, lichaamsgewicht, po
) of bi-gedestilleerd water, blootgesteld aan een enkele orale toediening van EtOH (4 g /kg, lichaamsgewicht, po
) of NaCl 9 ‰ twee uur. a: controle; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 en F: EtOH + FAM)
Tabel 2 subacute effect van johannesbroodpeulen waterig extract (CPAE), famotidine (FAM) en ascorbinezuur (AA) op macroscopische kwantitatieve veranderingen veroorzaakt door EtOH bij ratten: zweer slijm volume, ulcus gebied en het percentage bescherming. De dieren werden voorbehandeld met verschillende doses van CPAE (500, 1000 en 2000 mg /kg, lichaamsgewicht, po
), FAM (10 mg /kg, lichaamsgewicht, po
) of bi-gedestilleerd water, blootgesteld aan een enkele orale toediening van EtOH (4 g /kg, bw, po
) of NaCl 9 ‰ twee uur
Group
Slijm volume (ml)
Zweer index ( mm2) percentage
Protection (%)
Controle
4.3 ± 0.20
---- ----

EtOH
1,9 ± 0,3 *
86,2 ± 2,6 *
00
EtOH + CPAE-500
2,9 ± 0
67,0 ± 3,6 #
23,4
EtOH + CPAE-1000
3.4 ± 0,2 #
16,6 ± 1,4 #
79,8
EtOH + CPAE-2000
3,9 ± 0,3 #
06.4 ± 0,9 #
92,2
EtOH + FAM
3,8 ± 0,2 #
26,2 ± 3,3 #
68,1
*: p
< 0,05 in vergelijking met de groep en # controle: p
< 0,05 vergeleken met EtOH groep
Effect van CPAE op EtOH-geïnduceerde gastrische microscopische schade
wij ook het effect van EtOH en CPAE onderzocht maagslijmvlies histologie en de resultaten worden in Fig. 2. EtOH 80% veroorzaakte een duidelijke erosieve laesie in maagweefsel. CPAE of famotidine voorbehandeling sterk verminderd de histopathologische veranderingen veroorzaakt door acute alcoholvergiftiging. Fig. 2 Subacute gevolg caob peulen waterig extract (CPAE) en famotidine (FAM) op histologische veranderingen bij ethanol (EtOH) bij ratten. De dieren werden voorbehandeld met verschillende doses van CPAE (500, 1000 en 2000 mg /kg, lichaamsgewicht, po
), FAM (10 mg /kg, lichaamsgewicht, po
) of bi-gedestilleerd water, blootgesteld aan een enkele orale toediening van EtOH (4 g /kg, lichaamsgewicht, po
) of NaCl 9 ‰ twee uur. a: controle; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 en F: EtOH + FAM)
Effect van CPAE op EtOH geïnduceerde gastrische lipoperoxidatie en waterstofperoxide toename
Invloed op het effect van EtOH en CPAE op oxidatieve stress staat, bestudeerden we eerst de maag lipoperoxidatie en waterstofperoxide-gehalte (Fig 3a.). EtOH intoxicatie drastisch toegenomen de maag MDA en H 2O 2 niveaus (Fig. 3b). CPAE voorbehandeling significant en dosisafhankelijk omgekeerde lipoperoxidatie en waterstofperoxide teweeggebrachte toename van EtOH intoxicatie. Fig. 3 subacute effect van caob pods waterig extract (CPAE) en famotidine (FAM) ethanol (EtOH) geïnduceerde veranderingen in het maagslijmvlies MDA a en b H2O2 niveaus in ratten. bij ratten. De dieren werden voorbehandeld met verschillende doses van CPAE (500, 1000 en 2000 mg /kg, lichaamsgewicht, po
), FAM (10 mg /kg, lichaamsgewicht, po
) of bi-gedestilleerd water, blootgesteld aan een enkele orale toediening van EtOH (4 g /kg, lichaamsgewicht, po
) of NaCl 9 ‰ twee uur. *: P
< 0,05 in vergelijking met de groep en # controle: p
< 0,05 in vergelijking met EtOH groep
Effect van CPAE on-EtOH geïnduceerde maag- -SH groepen afnemen
We toonden ook aan dat thiolgroepen niveau dat aanzienlijk werd verlaagd in het maagslijmvlies van alcohol behandelde ratten. Echter CPAE (500, 1000 en 2000 mg /kg, lichaamsgewicht
p.o.) of famotidine (10 mg /kg, p.o.
lichaamsgewicht) voorbehandeling significant beschermd tegen deze daling in vergelijking met EtOH groep (fig. 4). Fig. 4 subacute effect van caob pods waterig extract (CPAE) en famotidine (FAM) ethanol (EtOH) geïnduceerde veranderingen in het maagslijmvlies SH groepen niveau bij ratten. bij ratten. De dieren werden voorbehandeld met verschillende doses van CPAE (500, 1000 en 2000 mg /kg, lichaamsgewicht, po
), FAM (10 mg /kg, lichaamsgewicht, po
) of bi-gedestilleerd water, blootgesteld aan een enkele orale toediening van EtOH (4 g /kg, lichaamsgewicht, po
) of NaCl 9 ‰ twee uur. *: P
< 0,05 in vergelijking met de groep en # controle: p
< 0,05 in vergelijking met EtOH groep
Effect van CPAE on-EtOH geïnduceerde antioxidant enzym activiteiten uitputting
wij verder gekeken naar het effect van EtOH en CPAE op antioxidantenzymen activiteiten in maagslijmvlies (afb. 5). EtOH 80% significant verhoogd maagslijmvlies antioxidant enzymactiviteiten zoals SOD (A) en CAT (B), maar aanzienlijk verlaagde GPX activiteit (C). Echter, subacute voorbehandeling met johannesbrood extract of famotidine significant de EtOH-geïnduceerde toename en een afname van antioxidant enzymactiviteiten near controleniveaus met de hoogste dosis. Fig. 5 subacute effect van caob pods waterig extract (CPAE) en famotidine (FAM) ethanol (EtOH) geïnduceerde veranderingen in het maagslijmvlies antioxidant enzym activiteiten: SOD a, CAT b en GPX c bij ratten .. bij ratten. De dieren werden voorbehandeld met verschillende doses van CPAE (500, 1000 en 2000 mg /kg, lichaamsgewicht, po), FAM (10 mg /kg, lichaamsgewicht, po) of bi-gedestilleerd water, blootgesteld aan een enkele orale toediening van EtOH (4 g /kg, lichaamsgewicht, po
) of NaCl 9 ‰ twee uur. *: P
< 0,05 in vergelijking met de groep en # controle: p
< 0,05 in vergelijking met EtOH Groep Victoire Discussie
De maag is een gevoelige spijsvertering orgel voornamelijk blootgesteld aan exogene ziekteverwekkers uit de voeding. In reactie op deze pathogenen, het maagweefsel produceert ROS zoals hydroxyl radicaal superoxide anion, wat kan worden gerelateerd aan de ontwikkeling van maag organische aandoeningen zoals gastritis, maagzweren en maagkanker alsook functionele stoornissen zoals functionele dyspepsie [ ,,,0],32]. Ethanol wordt beschouwd als een van de middelen die maagzweren veroorzaken. De effecten van ethanol op maagslijmvlies ingewikkeld en veelzijdig dat kan worden geassocieerd met een verstoring van het evenwicht tussen maagslijmvlies beschermende en agressieve factoren [33]. Ethanol veroorzaakt verwondt in de vasculaire endotheliale cellen van het maagslijmvlies en induceert microcirculatie verstoringen en hypoxie, koppelen aan de overproductie van zuurstofradicalen [34]. ROS geproduceerd in het maagdarmkanaal, maar hun rol in de pathofysiologie en pathogenese zijn niet goed bestudeerd.
Vele medicinale planten tonen in hun chemische samenstelling, flavonoïden, triterpenen en tannines, die het maagslijmvlies beschermen door inductie van gastroprotectieve mechanismen of fungeren als natuurlijke antioxidanten [35-37]. Flavonoïden en tannines zijn de belangrijkste groep van fenolische verbindingen die als primaire antioxidanten en scavengers [38].
Onze fytochemische onderzoek enerzijds gebleken dat de rijkdom totale polyfenolen, totale flavonoïden en gecondenseerde tanninen [14]. Anderzijds, met de DPPH en ABTS radicaal vangende assay bleek dat CPAE vormt een groot wegvangend vermogen, zij het minder dan ascorbinezuur dat werd gebruikt als referentie molecuul. De antioxidant capaciteit van sint is voornamelijk gerelateerd aan het hogere niveau van fenol compouds in deze fractie [14]. Echter, deze moleculen zijn de belangrijkste bron van het aantal vrije radicalen zoals superoxide anion (O 2 .) En hydroxyl radicaal (OH .) [39].
In vivo
we in de eerste plaats is gebleken dat alcohol toediening leidde tot een duidelijke macroscopische verwondingen, waaronder bloedingen en hyperemie evenals histopathologische afwijkingen zoals erosieve laesies. CPAE voorbehandeling significant omgekeerde EtOH geïnduceerde maagslijmvlies macro- en microscopische laesies in een dosis-afhankelijke wijze. Echter, maagslijmvlies eerder aangetoond dat het een cruciale rol bij de bescherming van maag- belemmeringen [40] spelen. Het is de eerste verdedigingslinie tegen zure en hecht samen met bicarbonaat afgescheiden door het epitheel te dienen als een barrière tegen zelf-digestie [41]. Daarnaast maagslijmvlies is een belangrijke beschermende factor voor het maagslijmvlies en kan fungeren als een antioxidant en verminderen slijmvliesschade gemedieerd door ROS [42]. Tanninen kunnen voorkomen ulcus ontwikkeling hetzij via vaatvernauwende effecten, of vanwege hun eiwitten precipiteren wanneer het neerslaan van microproteins in de ulceratie site promoot, die een ondoordringbare laag over de voering die darmafscheidingen belemmert en beschermende functie slijmvlies irriterende stoffen [43]. Bovendien zijn flavonoïden tegen maagzweren en gastroprotectieve eigenschappen [44]. Echter, EtOH-geïnduceerde maagzweren is eerder aangetoond te worden verzwakt door veel planten onttrekt Aqeratum conyzoides
[45], Bacopa monniera en Azadirachta indica
[46], Hippocratea blinkt
[47] en Azadirachta indica
[48]. Echter, voor zover wij weten, ons verslag is de eerste om te gaan met fruit extract van johannesbroodboom
(sint) beschermend effect op acute EtOH geïnduceerde ulcera in rat maagslijmvlies.
Ook bleek in de huidige bestuderen die EtOH intoxicatie geïnduceerde lipideperoxidatie, daling van de thiolgroepen niveau, toename van waterstofperoxide zowel inhoudelijk als uitputting antioxidant enzym activiteiten zoals SOD, CAT en GPX. Acute-alcohol-geïnduceerde oxidatieve stress werd op grote schaal gedocumenteerd in maagslijmvlies [49], lever [50], de nieren [51], het hart [52] en de hersenen [53]. Ethanol toediening veroorzaakte oxidatieve onbalans via een aantal routes, waaronder de productie van reactieve zuurstofsoorten [54]. Lipideperoxidatie niveau is een indicator van de productie van ROS in het weefsel. Echter, SOD zet het reactieve superoxide radicaal H 2O 2, die in het maagslijmvlies wordt vergroot en wanneer niet weggevangen CAT, kan op zichzelf lipide peroxidatie veroorzaken bij generatie hydroxylradicaal [55].
belangrijker we aangetoond dat carob extract voorbehandeling ingetrokken acute EtOH oxidatieve stress in het maagslijmvlies. Deze gegevens volledig bevestigd alle eerder gemeld in vivo
[17] en in vitro
[15] anti-oxidant en anti-inflammatoire eigenschappen van de sint. We hebben ook aangetoond in ons vorige verslag van Sebai et al. [14] dat de waterige extract van johannesbroodpeulen bevat een goede hoeveelheid van de totale polyfenolen, de totale flavonoïden en gecondenseerde tannines. Deze moleculen zijn de primaire bron van de antioxidant vermogen van deze plant door vrije radicalen als hydroxylradicaal (OH •) dat de belangrijkste oorzaak van lipideperoxidatie [56]. Bovendien is het algemeen bekend dat sulfhydrylgroepen ten dele betrokken bij maag- celbescherming [57] en in het handhaven van mucosale integriteit en vangen vrije radicalen gevormd door de inwerking van schadelijke middelen [58].
Conclusie
tot slot, onze gegevens tonen duidelijk aan dat CPAE oefent beschermende effecten tegen acute-ethanol geïnduceerde ulcera in de rat maagslijmvlies, mede dankzij zijn antioxiderende eigenschappen
Afkortingen
CPAE:.
peulen waterig extract
Carob500:
Carob 500 mg /kg
Carob1000:
Carob 1000 mg /kg


Carob2000:
Carob 2000 mg /kg
CAT:
catalase
GPx:
glutathionperoxidase
H2O2:
Waterstofperoxide
MDA:
Malondialdehyde
Prot:
Proeins
SHs:
sulfhydrylgroepen
SOD:
Superoxidedismutase

verklaringen
Dankwoord
Financiële steun van de Tunesische ministerie van "Enseignement Supérieur et Recherche Scientifique" wordt waarderend erkend.
Open Access Dit artikel wordt verspreid onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution 4.0 International License (http: //creativecommons org /licenties /door /4. 0 /.), die onbeperkt gebruik, distributie en reproductie in elk medium toestaat, mits u de juiste krediet te geven aan de oorspronkelijke auteur (s) en de bron, een link naar de Creative Commons-licentie, en aangeven of wijzigingen zijn aangebracht. De Creative Commons Public Domain Dedication waiver (http:. //Creativecommons org /publicdomain /zero /1 0 /) van toepassing op de ter beschikking gestelde in dit artikel, tenzij anders vermeld data
Competing. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• Correlatie van hK6 expressie met tumorrecidief en prognose bij gevorderde maagkanker
• Kwaliteit van leven, immunomodulatie en de veiligheid van adjuvante maretak behandeling bij patiënten met maagcarcinoom - een gerandomiseerde, gecontroleerde pilot-studie