Magesekk effekten av carob (johannesbrødtre L.) mot etanol-indusert oksidativt stress i rat

magesekk effekten av carob (johannesbrødtre
L.) mot etanol-indusert oksidativt stress i rotte
Abstract
Bakgrunn
Vi rettet i denne studien, ved å undersøke den mage effekten av carob pods vandig ekstrakt (CPAE) mot etanol-indusert oksidativt stress hos rotter samt mekanismen innblandet.
Metoder
Voksne Wistar hannrotter ble brukt og delt inn i seks grupper på ti hver: kontroll, EtOH (80% volum /volum, 4 g /kg kroppsvekt
), EtOH 80% + forskjellige doser av CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, kroppsvekt
) og EtOH + famotidin (10 mg /kg, po) Dyr var peroralt (po
) forbehandlet med CPAE under 15 dager og beruset med en enkelt oral administrasjon av EtOH (4 g /kg kroppsvekt
) for to timer. Search Results
kolo analyse viste at CPAE utstilt en betydning in vitro
antioksidantaktivitet mot ABTS og DPPH radikaler. Vi fant ut at CPAE forbehandling in vivo
, beskyttet mot EtOH-indusert makroskopiske og histologiske endringer indusert i mageslimhinnene. Carob ekstrakt administrasjon også beskyttet mot alkohol-indusert volum magesaft nedgang. Enda viktigere, vi viste at CPAE motvirket EtOH gastrisk lipoperoxidation snudde nedgang på sulfhydrylgrupper (SH) en hydrogenperoksid (H 2o 2) nivåer, og hindret utarming av antioksidant enzymaktivitet av superoksid dismutase (SOD), katalase (CAT) og glutation peroksidase (gpx).
Konklusjoner
Disse funnene tyder på at CPAE hatt en potensiell gastro-beskyttende effekt mot EtOH-indusert oksidativt stress hos rotter, skyldes delvis til sin antioksidanter egenskaper.
nøkkelord
magesår Carob pods Oksidativt stress antioksidantkapasitet Rat Bakgrunn
I gastrointestinale forstyrrelser, er sår en vanlig sykdom med flere årsaker. Denne sykdommen, preget av mucosal skade, hovedsakelig forårsaket av Helicobacter pylori
, platehemmere som acetylsalisylsyre [1], ikke-steroide antiinflammatoriske midler (NSAIDs) som orale bisfosfonater, kaliumklorid, immunsuppressive medisiner [2, 3 ], serotonin reopptakshemmere [4], røyking og alkoholbruk [5]. Patofysiologien av magesår har generelt fokusert på ubalanse mellom aggressive og beskyttende faktorer i magesekken, for eksempel syre-pepsin sekresjon, slimhinnebarriere, slimsekresjon, blodgjennomstrømning, cellulær regenerering, prostaglandiner og epidermal vekstfaktorer [6]. Etanol-induserte gastriske lesjoner er i hovedsak knyttet til intens infiltrasjon i sub-mucosa som fremmer dannelsen av reaktive oksygenarter (ROS), redusert slim, uttømming av sulfhydrylgrupper og nedsatt blodstrøm, noe som resulterer i skade på mageslimhinnen [7]. ROS spesielt hydroksyl radikal spille stor rolle i å forårsake oksidativ skade av slimhinnen i alle typer sår [8]. For å bestemme mulige mekanismen som stoffene kan handle for å fremme gastroprotection, flere antioksidanter molekyler som quercetin [9] og curcumin [10] ble tidligere undersøkt
. Carob (johannesbrødtre L.
) er en langsom vekst stadig grønt tre dyrket i mange år i middelhavslandene. Carob frukt, brun pod 10-25 cm i lengde, inneholder mange bioaktive stoffer som søtt karbohydrat, kostfiber, tanniner, polyfenoler og [11]. Mange av de gunstige helseeffekter knyttet til forbruket av fenoliske rike matvarer er i det vesentlige på grunn av deres antioksidantaktivitet [12, 13]. For carob ekstrakt har denne eiendommen tidligere blitt rapportert i in vivo
og in vitro
studier [14, 15]. Nylig har vi og andre oppdaget at tunisiske blad carob ekstrakt presenterer noen lindrende effekt mot alkohol eller CCI 4-indusert oksidativ skade i rotter vev [16, 17]. I tillegg, carob fiber oppviser høy antioksidant kapasitet bestemt av DPPH radikaler, dvs test, dvs. høyere enn mange andre matvarer som er rike på polyfenoler, så som blåbær, druer eller rødvin [18, 19].
Den foreliggende studien er designet for å vurdere den antatte magesekkbeskyttende rolle i den vandige ekstrakt av carob pods (CPAE) (15 dager) mot oksidativt stress indusert ved akutt etanol eksponering og den mekanisme som er involvert i en slik beskyttelse.
Metoder
Etikk uttalelse Bedrifter Den nødvendige tillatelser for feltstudier og innsamling av carob pods prøver ble innhentet av Landbruksdepartementet i Tunisia og identifisert av Mrs. Mouhiba Ben-Naceur, professor i taksonomi i Higher institutt for bioteknologi i Beja, Tunisia. Bilaget eksemplarer har blitt deponert hos herbarium av Higher Institute of Biotechnology av Béja og også ved Institutt for biologi, Fakultet for naturvitenskap, Tunisia.
Utarbeidelse av carob ekstrakt Bedrifter Den modne carob pods ble hentet fra regionen i Tabarka (North-West of Tunisia) i løpet av oktober 2013. Kort fortalt plantematerialet ble senere tørket i en inkubator ved 50 ° C i løpet av 72 timer og pulverisert i en elektrisk blender (Moulinex Ovatio 2, FR). Pulverblandingen som inneholdt johannesbrødmasse (90%) og frø (10%) ble oppløst i dobbeltdestillert vann og filtreres gjennom et dørslag (maskevidde 0,5 mm). Til slutt, carob pods vandige ekstrakt ble umiddelbart anvendt for in vitro og in vivo

eksperimenter.
Fri radikal-fjernende aktiviteter på DPPH
antioksidant kapasitet av det vandige ekstrakt av carob pods ble utført ved hjelp 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radikalfjernende aktivitet som tidligere beskrevet av Grzegorczyk et al. [20]. I korthet, ble forskjellige konsentrasjoner av CPAE (20, 50, 100, 150, og 200 ug /ml) tilsatt til 1 ml av 0,1 mM metanoloppløsning av DPPH og inkubert ved 27 ° C i løpet av 30 min. Den optiske tetthet av prøven ble kvantifisert ved 517 nm. DPPH radikal-fjernende aktivitet (RSA), uttrykt som en prosentandel, ble estimert å benytte følgende formel: $$ \\mathrm{R}\\mathrm{S}\\mathrm{A}\\left(\\%\ ight)=\\frac{{{{}^A}_{\\mathrm{DPPH}}}^{-}\\left({{}^{A_{\\mathrm{sample}}}}^{-{A}_{\\mathrm{control}}}\ ight)}{{}^{A_{\\mathrm{DPPH}}}}\\times 100 $$ Askorbinsyre ble anvendt som en referanse molekylet i den samme konsentrasjon som test ekstrakt.
Alle analysene ble utført i triplikat. Effekten konsentrasjon 50 (EF 50)-verdien ble bestemt som den konsentrasjon (i ug /ml) av forbindelsen som er nødvendig for å nøytralisere 50% av DPPH radikal.
Fri radikal-fjernende aktiviteter på ABTS
antioksidant kapasiteter av johannesbrød pods vandige ekstrakt ble evaluert ved bruk av 2,2'-azino-bis [3-etylbenztiazolin-6-sulfonsyre] (ABTS) metoden [21]. I korthet, ble 1 ml fortynnet ekstrakt tilsatt til 3 ml av 7 mM ABTS radikal løsning (ABTS • +) og ble holdt i mørket ved romtemperatur i 60 min. Absorbansen ble målt ved 734 nm. Det fangende kapasitet ble beregnet som ((1 - Ab /A0) x 100%) (Ab og A0 er absorbansen av prøvene så vel som ABTS • + løsning ved 734 nm for Dyr og behandling Sunn voksne Wistar hannrotter (som veier 220-250 g, ligger fem per bur) og voksne mannlige sveitsiske Albino mus (som veier ca 25 g, som ligger ti per bur) ble kjøpt fra Society of Pharmaceutical Industries i Tunisia (SIPHAT, Ben-Arours , TN). Eksperimentelle protokoller ble godkjent med retningslinjene for Etisk komité naturvitenskapelige fakultet Tunis, Tunisia. testen ble utført i samsvar med EU-direktiv 2000/32 /EF og OECD Guideline 474 [22]. de ble gitt sammen med standard mat (standard diett-pellet Badr Utique-TN) og vann ad libitum
og holdes i dyrehuset ved kontrollert temperatur (22 ± 2 ° C) med en 12 timers lys-mørke-cyklus. rottene ble oppdelt i halv et dusin grupper. Gruppe 1 og 2 ble servert som kontroller og hadde dobbeltdestillert vann (5 ml /kg, kropps
, po
). Gruppe 3, 4 og 5 ble forbehandlet med forskjellige doser av CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, bwpo
), mens gruppe 6 ble forbehandlet med henholdsvis famotidin (10 mg /kg, bwpo
) i løpet av 15 dager. Rottene ble fastet i 24 timer før den siste administrasjon av CPAE eller referanse molekyler. Etter 60 minutter ble hvert dyr, med unntak av gruppe 1, fikk EtOH (4 g /kg, kroppsvekt
) ved oral administrering. To timer senere, ble rottene avlivet.
Akutt toksisitetsstudie
carob pods vandig ekstrakt i doseområdet på 0,05, 0,1, 0,5, 1, 2, 5, 10 og 200 g /kg ble oralt administrert til annen grupper av mus (n =
10). Dyrene ble undersøkt hvert 30. minutt i løpet av 4 timer, og deretter, ved behov for ytterligere periode på 8 timer. 24 timer senere ble dødeligheten registreres. Musene ble også observert for andre tegn på toksisitet, slik som motor koordinering, rettende refleks og luftveis endringer
. Evaluering av mage mucosal skade
magen av hvert dyr ble fjernet og åpnet langs den store kurvatur. Vevet ble forsiktig skylt i NaCl 0,9%. Lesjoner i mageslimhinnen ble makroskopisk undersøkt og fotografier av hemoragisk erosjoner ble kjøpt med en fotometriske Quantix digitalkamera. Sår indekser ble bestemt som summen av lengdene av hele gastriske lesjoner (i mm 2) [23]. To uavhengige, blindet observatører utført målinger av lesjon lengder.
Gastric volum juice besluttsomhet
Gastric juice ble samlet og sentrifugert ved 3000 g under 5 min for å fjerne uoppløselige materialer. Supernatanten ble etter målt ved hjelp graduate rør [24].
Histopatologisk analyse
Umiddelbart etter avliving, små biter av magen ble høstet og vasket med iskald saltvann. Vevsfragmentene ble deretter fiksert i en 10% nøytral bufret formalin-oppløsning, innstøpt i parafin og anvendt for histopatologisk undersøkelse. 5 mikrometer tykke seksjoner ble kuttet, deparaffinized, hydrert og farget med hematoxylin og eosin (HE). Mage Seksjonene ble undersøkt i blind mote i alle behandlinger [25].
Lipidperoksidasjon måling
mageslimhinnen lipidperoksidasjon ble bestemt av MDA måling i henhold til dobbel oppvarming metoden [26]. Kort sagt ble alikvoter fra gastrisk mucosa homogenater blandet med BHT-trikloreddiksyre (TCA) oppløsning inneholdende 1% BHT (w /v
) oppløst i 20% TCA (w /v
) og sentrifugert ved 1000 x g
i 5 min ved 4 ° C. Supernatanten ble blandet med en løsning inneholdende (0,5 N HCl, 120 mM TBA buffret i 26 mM Tris) og deretter oppvarmet ved 80 ° C i 10 min. Etter avkjøling ble absorbansen av den resulterende kromoforen bestemt ved 532 nm. MDA-nivåer ble bestemt ved å bruke en ekstinksjonskoeffisient for MDA-TBA-komplekset på 1,56 x 10 5 M 1 • cm -1.
Tiolgruppe måling
Den totale konsentrasjon av tiol grupper (SH) ble utført i henhold til Ellmans metode [27]. Kort sagt ble alikvoter fra gastrisk mucosa blandet med 100 ul 10% SDS og 800 ul av 10 mM fosfatbuffer (pH 8), og den optiske tettheten ble målt ved 412 nm (A 0). Etter tilsetning av 100 ul av 5,5'-dithiobis- (2-nitrobenzosyre) (DTNB), ble reaksjonsblandingen inkubert ved 37 ° C i løpet av 60 min, og en ny verdi (A 1) ble bestemt. Den tiolgrupper konsentrasjonen ble beregnet fra A 1 i A 0 subtraksjon ved anvendelse av en molar ekstinksjonskoeffisient på 13,6 x 10 3 M 1 • cm -1. Resultatene ble uttrykt som nmol av tiolgrupper pr
mg protein.
H2O2 bestemmelse
gastrisk mucosa H 2o 2 nivået ble utført i henhold til Dingeon et al. [28]. Kort beskrevet, reagerer hydrogenperoksyd med p-hydroksybenzosyre og 4-aminoantipyrin, i nærvær av peroksidase som fører til dannelse av quinoneimine som har en rosa farge påvist ved 505 nm.
Antioksidantenzymaktivitetsanalyser
Aktiviteten av SOD ble bestemt ved hjelp av modifiserte adrenalin analyser [29]. På alkalisk pH, superoksid anion O 2 - årsaker autoxidation av adrenalin til adenochrome; mens de konkurrerer med denne reaksjon, redusert SOD den adenochrome formasjonen. En enhet av SOD er ​​definert som mengden av ekstrakt som hemmer hastigheten av adenochrome formasjon med 50%. Enzymekstrakt ble tilsatt i 2 ml reaksjonsblanding inneholdende 10 mL av bovin katalase (0,4 U /pl), 20 pl adrenalin (5 mg /ml) og 62,5 mM natrium-karbonat /bikarbonat-buffer, pH 10,2. Endringer i absorbans ble registrert ved 480 nm.
Aktivitet av CAT ble vurdert ved å måle utgangshastighet på H 2o 2 forsvinningen ved 240 nm [30]. Reaksjonsblandingen inneholdt 33 mM H 2o 2 i 50 mM fosfatbuffer pH 7,0, og aktiviteten av CAT ble beregnet ved hjelp av ekstinksjonskoeffisient på 40 mM -1 cm -1 for H- 2o 2.
aktiviteten av GPX ble kvantifisert ved hjelp av prosedyren i Flohe og Günzler [31]. I korthet ble 1 ml reaksjonsblanding inneholdende 0,2 ml av mageslimhinnen supernatant, 0,2 ml fosfatbuffer 0,1 M pH 7,4, 0,2 ml av GSH (4 mM) og 0,4 ml H 2o 2 (5 mM) ble inkubert ved 37 ° C i 1 min og reaksjonen ble stanset ved tilsetning av 0,5 ml TCA (5%, vekt /volum). Etter sentrifugering ved 1500 g
i 5 minutter, ble alikvoter (0,2 ml) av supernatanten kombinert med 0,5 ml fosfatbuffer 0,1 M pH 7,4 og 0,5 ml DTNB (10 mM) og absorbansen ble avlest ved 412 nm. Aktiviteten av GPX ble uttrykt som nmol av GSH forbrukt /min /mg protein.
Statistisk analyse
Dataene ble analysert ved en-veis analyse av varians (ANOVA) og ble uttrykt som middel ± standard feil av gjennomsnittet (SEM). Dataene er representative for 10 uavhengige eksperimenter. Alle statistiske tester ble tosidige, og ap
verdi på 0,05 eller mindre ble betraktet som signifikant
. Resultater
Akutt oral toksisitet av CPAE
I den akutte oral toksisitetsstudie, verken unormal adferd eller dødelighet oppdaget i løpet av observasjonsperioden. Således er LD50-verdien var større enn 20 g /kg kroppsvekt for båt ekstrakt av carob pods.
In vitro DPPH og ABTS radikaler, dvs aktiviteter
Flere konsentrasjoner i området 0-200 mg /ml av CPAE ble testet for sine antioksidantaktivitet i ulike in vitro
modeller. Vi har funnet at den radikalfjernende aktivitet av CPAE mot DPPH og ABTS-radikaler økt betydelig i en doseavhengig måte. EF 50 verdier beregnet fra grafen viste at RSA av CPAE (EF 50 = 228,22 ± 5,27 mg /ml og 184,41 ± 3,95 mg /ml henholdsvis for DPPH og ABTS radikal fjernende aktivitet) dukket opp lik som askorbinsyre (EF 50 = 190,47 ± 1,2 174,13 ± og 0,9 pg /ml) så vel kjente referanse-molekyl (tabell 1) .table 1 EC50 verdier av DPPH og ABTS radikalfjernende aktivitet carob pods vandig ekstrakt (CPAE ). EC50: effektiv konsentrasjon av prøven som kan redusere DPPH eller ABTS-konsentrasjon ved 50%
EC50 på DPPH radikalfjernende aktivitet (ug /ml)
EC50 på ABTS radikalfjernende aktivitet (ug /ml)
CPAE
228,22 ± 5.27
184,41 ± 3.95
Askorbinsyre
190,47 ± 1,2
174,13 ± 0,9
Effekt av CPAE på EtOH-indusert akutt makroskopisk gastrisk skade og volumendringen
makroskopisk undersøkelse av gastrisk mukosa er vist i fig. 1. Som forventet, EtOH administrasjon utstilt skader, inkludert blødning og hyperemia. CPAE og famotidin behandling viste en nedgang doseavhengig i alle makroskopiske toksiske tegn sammenlignet med EtOH behandlede gruppe. Videre kvantitativ analyse viste at johannesbrødekstrakt eller referanse molekyl forbehandling signifikant og doseavhengig redusert sårindeks, beskyttet mot saften reduksjonen gastrisk volum, og bedres beskyttelse prosentandelen av skade indusert av EtOH administrering (tabell 2). Fig. 1 Subakutt effekten av caob pods vandig ekstrakt (CPAE) og famotidin (FAM) på makroskopiske endringer indusert av etanol (EtOH) hos rotter. Dyrene ble forbehandlet med forskjellige doser av CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, kroppsvekt, po
), FAM (10 mg /kg, kroppsvekt, po
) eller bi-destillert vann, utfordret med en enkelt oral administrasjon av EtOH (4 g /kg, kroppsvekt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer. a: kontroll; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 og F: EtOH + FAM)
Tabell 2 Subakutt effekten av carob pods vandig ekstrakt (CPAE), famotidin (FAM) og askorbinsyre (AA) på makroskopiske kvantitative endringer indusert av EtOH i rotter: sår slim volum, sår området og prosent beskyttelse. Dyrene ble forbehandlet med forskjellige doser av CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, kroppsvekt, po
), FAM (10 mg /kg, kroppsvekt, po
) eller bi-destillert vann, utfordret med en enkelt oral administrasjon av EtOH (4 g /kg, kroppsvekt, po
) eller NaCl 9 ‰ for
to timer Gruppe
Limet volum (ml)
Sår indeks ( mm2)
Protection prosent (%)
Kontroll
4,3 ± 0,20
----
----
EtOH
1,9 ± 0,3 *
86,2 ± 2,6 *
00
EtOH + CPAE-500
2,9 ± 0
67,0 ± 3,6 #
23,4
EtOH + CPAE-1000
3,4 ± 0.2 #
16,6 ± 1,4 #
79,8
EtOH + CPAE-2000
3,9 ± 0,3 #
06,4 ± 0,9 #
92,2
EtOH + FAM
3,8 ± 0.2 #
26,2 ± 3,3 #
68,1 product: *: p
< 0,05 sammenlignet med kontrollgruppen og #: p
< 0,05 sammenlignet med EtOH gruppe
Effekt av CPAE på EtOH-indusert gastrisk skade mikroskopisk
Vi undersøkte også effekten av EtOH og CPAE på gastrisk mucosa histologi og resultatene er vist i fig. 2. EtOH 80% induserte en markert erosive lesjon i magevevet. CPAE eller famotidin forbehandling sterkt redusert de histopatologiske forandringer indusert av akutt alkoholforgiftning. Fig. 2 Subakutt effekten av caob pods vandig ekstrakt (CPAE) og famotidin (FAM) på histologiske endringer indusert av etanol (EtOH) hos rotter. Dyrene ble forbehandlet med forskjellige doser av CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, kroppsvekt, po
), FAM (10 mg /kg, kroppsvekt, po
) eller bi-destillert vann, utfordret med en enkelt oral administrasjon av EtOH (4 g /kg, kroppsvekt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer. a: kontroll; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 og f: EtOH + FAM)
Effekt av CPAE på EtOH gastrisk lipoperoxidation og hydrogen peroxide økning
Peiling på effekten av EtOH og CPAE på oksidativt stress tilstand, vi først studerte mage lipoperoxidation og hydrogenperoksid innhold (fig. 3a). EtOH rus drastisk økt gastrisk MDA og H 2o 2 nivåer (Fig. 3b). CPAE forbehandling signifikant og doseavhengig reversert lipoperoxidation og hydrogenperoksyd økningen indusert av EtOH rus. Fig. 3 Subakutt effekten av caob pods vandig ekstrakt (CPAE) og famotidin (FAM) etanol (EtOH) indusert forandringer i mageslimhinnene MDA en og H2O2 b nivåer i rotter. hos rotter. Dyrene ble forbehandlet med forskjellige doser av CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, kroppsvekt, po
), FAM (10 mg /kg, kroppsvekt, po
) eller bi-destillert vann, utfordret med en enkelt oral administrasjon av EtOH (4 g /kg, kroppsvekt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer. *: P
< 0,05 sammenlignet med kontrollgruppen og #: p
< 0,05 sammenlignet med EtOH gruppe
Effekt av av CPAE på EtOH-indusert mage SH grupper redusere
Vi viste også at tiol grupper nivået var signifikant redusert i mageslimhinnen alkohol behandlede rotter. Imidlertid CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg kroppsvekt p.o.
) eller famotidin (10 mg /kg, kroppsvekt p.o.
) forbehandling signifikant beskyttet mot denne reduksjon sammenlignet med EtOH gruppe (Fig. 4). Fig. 4 Subakutt virkning av caob pods vandig ekstrakt (CPAE) og famotidin (FAM) etanol (EtOH) indusert endring i mageslimhinnene SH- grupper nivået i rotter. hos rotter. Dyrene ble forbehandlet med forskjellige doser av CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, kroppsvekt, po
), FAM (10 mg /kg, kroppsvekt, po
) eller bi-destillert vann, utfordret med en enkelt oral administrasjon av EtOH (4 g /kg, kroppsvekt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer. *: P
< 0,05 sammenlignet med kontrollgruppen og #: p
< 0,05 sammenlignet med EtOH gruppe
Effekt av CPAE på EtOH-indusert antioksidant enzymaktivitet uttømming
Vi videre sett på effekten av EtOH og CPAE på antioksidantenzymer aktiviteter i mageslimhinnen (Fig. 5). EtOH 80% signifikant økt mageslimhinne antioksidantenzymaktiviteter som SOD (A) og CAT (B), men det betydelig redusert GPX-aktivitet (C). Imidlertid subakutte forbehandling med johannesbrødekstrakt eller famotidin redusert EtOH-induserte økning og en reduksjon av antioksidantenzymaktiviteter til nær kontrollnivåer med den høyeste dosen betydelig. Fig. 5 Subakutt effekten av caob pods vandig ekstrakt (CPAE) og famotidin (FAM) etanol (EtOH) indusert forandringer i mageslimhinnene antioksidantenzymaktivitet: SOD en, Cat B og GPX c hos rotter .. hos rotter. Dyrene ble forbehandlet med forskjellige doser av CPAE (500, 1000 og 2000 mg /kg, kroppsvekt, po), FAM (10 mg /kg, kroppsvekt, po) eller bi-destillert vann, utfordret med en enkelt oral administrering av EtOH (4 g /kg, kroppsvekt, po
) eller NaCl 9 ‰ i to timer. *: P
< 0,05 sammenlignet med kontrollgruppen og #: p
< 0,05 sammenlignet med EtOH gruppe
Diskusjon
magen er et følsomt fordøyelses organ hovedsakelig eksponert for eksogene patogener fra kostholdet. Som svar på disse patogener, produserer magen vev ROS eksempel hydroksylradikal en superoksid anion, som kan være relatert til utviklingen av mage organiske lidelser som gastritt, gastrisk ulcus, og magekreft, så vel som funksjonelle lidelser så som funksjonell dyspepsi [ ,,,0],32]. Etanol regnes som en av de midler som induserer magesår. Effekten av etanol på mageslimhinnen er kompliserte og mangesidig som kan være forbundet med en forstyrrelse av balansen mellom gastrisk slimhinne beskyttende og aggressive faktorer [33]. Etanol fører personskader i vaskulære endotelceller i mageslimhinnen og induserer microcirculatory forstyrrelse og hypoksi, linke til overproduksjon av oksygenradikaler [34]. ROS er produsert i mage-tarmkanalen, men deres roller i patofysiologi og sykdom patogenesen har ikke blitt godt undersøkt.
Mange medisinske planter viser i sine kjemiske konstitusjon, flavonoider, triterpenoids og tanniner, som beskytter mageslimhinnen gjennom induksjon av magesekk mekanismer eller opptrer som naturlige antioksidanter [35-37]. Flavonoider og tanniner er den viktigste gruppen av fenoliske forbindelser som fungerer som primære antioksidanter eller frie radikaler [38].
Vår phytochemical studie, for det første, avslørte at sin rikdom totale polyfenoler, total flavonoider og kondensert tanniner [14]. På den annen side, ved hjelp av DPPH og ABTS-radikal-fjernende analysen, har vi funnet at CPAE presenterer en høy fangende kapasitet, om enn mindre enn askorbinsyre som ble brukt som en referanse molekyl. Den antioksidantkapasitet på carob er i hovedsak knyttet til høyere nivå av fenoliske compouds i denne fraksjonen [14]. Men disse molekylene er hovedkilden til deres kapasitet scavenging frie radikaler, slik som superoksyd anion (O 2 .), Og hydroksyl-radikalet (OH .) [39].
In vivo,
vi først viste at alkohol administrasjon provosert en klar makroskopiske skader, inkludert blødning og hyperemia samt histopatological endringer som erosive lesjoner. CPAE forbehandling vesentlig tilbake EtOH-indusert gastrisk mucosa makro- og mikroskopiske lesjoner på en doseavhengig måte. Imidlertid gastrisk mukosa ble tidligere vist å spille en avgjørende rolle i beskyttelsen av mage barrierer [40]. Det er den første linjen i forsvaret mot syre og fester sammen med bikarbonat utskilt av epitel å tjene som en barriere mot selv fordøyelsen [41]. I tillegg er gastrisk mucosa en viktig beskyttende faktor for mageslimhinne, og er i stand til å virke som en antioksidant middel og reduksjons mucosal skade mediert av ROS [42]. Tanniner kan hindre sår utvikling enten via vasoconstricting effekter, eller på grunn av deres proteinene-utfellende hvor det fremmer utfelling av microproteins i sårdannelse området, som danner et ugjennomtrengelig lag over hele slimhinnen som hindrer tarmsekresjoner og beskytter den underliggende mucosa fra irritanter [43]. Videre flavonoider har anti-sår og gastroprotective egenskaper [44]. Imidlertid har EtOH-indusert magesår tidligere blitt vist å bli svekket av mange planter ekstrakter Aqeratum conyzoides product: [45], Bacopa monniera og Azadirachta indica product: [46], utmerker Hippocratea product: [47] og Azadirachta indica product: [48]. Men så vidt vi vet, er vår rapport den første til å forholde seg til frukt ekstrakt av johannesbrødtre plakater (carob) beskyttende effekt på akutte EtOH-indusert sårdannelse i rottemageslimhinnen.
Vi viste også i nåtiden studere at EtOH rus indusert lipidperoksidasjon, reduksjon av tiol grupper nivå, økning av hydrogen peroxide innhold samt depletion antioksidant enzymaktiviteter som SOD, CAT og GPX. Akutt alkohol-indusert oksidativt stress var viden dokumentert i mageslimhinnen [49], lever [50], nyre [51], hjerte [52] og hjernen [53]. Etanol administrering provosert oksidativ ubalanse gjennom en rekke veier, inkludert generering av reaktive oksygenarter [54]. Lipidperoksidasjon nivå er en indikator for generering av ROS i vevet. Imidlertid omdanner SOD den reaktive superoksidradikalet i H 2o 2, som ble øket i den gastriske slimhinne, og hvis ikke spyles med CAT, det kan i seg selv føre til lipidperoksydasjon ved generering av hydroksylradikalet [55].
Enda viktigere, viste vi at carob ekstrakt forbehandling avskaffet akutt EtOH-indusert oksidativt stress i mageslimhinnen. Disse dataene fullt ut bekreftet alle tidligere rapportert in vivo product: [17] og in vitro product: [15] antioksidant og anti-inflammatoriske egenskaper carob. Vi har også demonstrert i vår forrige rapport Sebai et al. [14] at den vandige ekstrakt av carob pods inneholder en god mengde av totale polyfenoler, total flavonoider og kondenserte tanniner. Disse molekylene er Primal kilden til antioksidant evnen av dette anlegget, ved scavenging frie radikaler som hydroksyl-radikal (OH •), som er den viktigste årsaken til lipidperoksydasjon [56]. I tillegg er det vel kjent at sulfhydryler er delvis involvert i mave cytobeskyttelse [57], og også i den opprett av mukosal barriereintegritet og nøytralisere frie radikaler som dannes på grunn av virkningen av skadelige midler [58].
Konklusjon
i konklusjonen, våre data viser tydelig at CPAE utøver beskyttende effekt mot akutt etanol-indusert sårdannelse i rotte mageslimhinnen, delvis takket være sin antioksidantegenskaper
Forkortelser
CPAE:.
Carob pods vandig ekstrakt
Carob500:
Carob 500 mg /kg
Carob1000:
Carob 1000 mg /kg
<.no> Carob2000:
Carob 2000 mg /kg
CAT:
Catalase
GPX:
glutation peroksidase
H2O2:
hydrogenperoksid
MDA:
malondialdehyde
Prot:
Proeins
SHS:
Sulfhydrylgrupper
SOD:
Superoxide dismutase

Erklæringer
Takk
Økonomisk støtte av den tunisiske Ministry of "Enseignement Supérieur et Recherche Scientifique" er anerkjennende anerkjent.
Open Access Denne artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution 4.0 International License (http: //creative org /lisenser /ved /4. 0 /.), som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt at du gir riktig kreditt til den opprinnelige forfatteren (e) og kilde, gi en link til Creative Commons-lisens, og angi om endringer ble gjort. Creative Commons Public Domain Dedication waiver (http:. //Creative org /offentlig eiendom /null /1. 0 /) gjelder for data som gjøres tilgjengelig i denne artikkelen, med mindre annet er angitt
Konkurrerer. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Korrelasjon av Ht6 uttrykk med tumorresidiv og prognose ved avansert ventrikkelcancer
• Livskvalitet, immunmodulering og sikkerhet for adjuvant misteltein behandling hos pasienter med magekreft - en randomisert, kontrollert pilotstudie